本發(fā)明屬于藥品或保健品領(lǐng)域，具體涉及一種解毒利咽的中藥組合物及其制備方法與用途。
背景技術(shù)：
急性咽炎是咽部黏膜及黏膜下組織的急性炎癥，主要致病原因有病毒感染、細(xì)菌感染和環(huán)境因素，多由飛沫或直接接觸而傳染，常繼發(fā)于急性扁桃體炎或急性鼻炎，亦可單獨(dú)發(fā)生，為臨床常見(jiàn)病、多發(fā)病，嚴(yán)重者可引起諸多并發(fā)癥，危及健康。
目前，急性咽炎的治療以抗病毒藥為主，其他還包括抗生素和激素，但均存在毒副作用較大等問(wèn)題。
中醫(yī)理論認(rèn)為，急性咽炎屬中醫(yī)學(xué)“急喉痹”范疇，多由風(fēng)熱外邪侵襲或肺胃熱盛，上犯咽喉而致，治宜疏風(fēng)清熱，解毒利咽。根據(jù)急性咽炎的中醫(yī)理論，中國(guó)專利文獻(xiàn)cn104815150a公開(kāi)了：一種治療急性咽炎的中藥膠囊，其是由下列重量配比的中藥原料組成：牡蠣4-6，珍珠3-5，鵝不食草3-6、浙貝母4-8、陳皮8-10、牛蒡子10-12、豬苦膽4-6、穿山甲5-10、一枝黃花2-4、劉寄奴8-10、三七花3-5、九爪龍5-8、馬蹄9-12、肉桂4-6、胖大海3-5、甘草5-10。然而，上述中藥組合物存在組成成分復(fù)雜、原料藥來(lái)源有限、原料藥成本較高等缺點(diǎn)，從而限制了其應(yīng)用。
因此，研究新型治療急性咽炎的中藥組合物具有重要意義。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
為此，本發(fā)明藥解決的技術(shù)問(wèn)題是現(xiàn)有的治療急性咽炎的中藥組合物組成成分復(fù)雜、原料藥來(lái)源有限、原料藥成本較高的問(wèn)題，從而提供一種解毒利咽的中藥組合物，進(jìn)而提供其制備方法與用途。
為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的：
本發(fā)明提供一種解毒利咽的中藥組合物，其原料藥包括：
錦燈籠7-23重量份、板藍(lán)根7-23重量份、穿心蓮4-17重量份、牛蒡子4-17重量份、桔梗2-11重量份、薄荷2-11重量份、甘草4-17重量份。
優(yōu)選地，本發(fā)明上述解毒利咽的中藥組合物，其原料藥包括：
錦燈籠10-20重量份、板藍(lán)根10-20重量份、穿心蓮6-15重量份、牛蒡子6-15重量份、桔梗3-10重量份、薄荷3-10重量份、甘草6-15重量份。
進(jìn)一步優(yōu)選地，本發(fā)明上述解毒利咽的中藥組合物，其原料藥包括：
錦燈籠15重量份、板藍(lán)根15重量份、穿心蓮10重量份、牛蒡子10重量份、桔梗6重量份、薄荷6重量份、甘草10重量份；或者
錦燈籠10重量份、板藍(lán)根15重量份、穿心蓮6重量份、牛蒡子15重量份、桔梗3重量份、薄荷3重量份、甘草15重量份；或者
錦燈籠20重量份、板藍(lán)根10重量份、穿心蓮15重量份、牛蒡子6重量份、桔梗10重量份、薄荷10重量份、甘草6重量份；或者
錦燈籠14重量份、板藍(lán)根14重量份、穿心蓮9重量份、牛蒡子9重量份、桔梗5重量份、薄荷5重量份、甘草9重量份；或者
錦燈籠16重量份、板藍(lán)根16重量份、穿心蓮11重量份、牛蒡子11重量份、桔梗7重量份、薄荷7重量份、甘草11重量份；或者
錦燈籠18重量份、板藍(lán)根20重量份、穿心蓮12重量份、牛蒡子13重量份、桔梗10重量份、薄荷7重量份、甘草6重量份。
本發(fā)明還提供一種上述解毒利咽的中藥組合物的制備方法，包括以下步驟：
分別按照選定重量份取錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草，加水加熱回流提取，過(guò)濾，合并濾液，將濾液濃縮至50℃下相對(duì)密度1.20-1.25的清膏，即得。
優(yōu)選地，本發(fā)明上述解毒利咽的中藥組合物的制備方法，包括以下步驟：
分別按照選定重量份取錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草，加水加熱回流提取1-3次，以錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草的總重量為基準(zhǔn)，每次加入8-12重量倍量的水提取1-3小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，將濾液濃縮至50℃下相對(duì)密度1.20-1.25的清膏，即得。
進(jìn)一步優(yōu)選地，本發(fā)明上述解毒利咽的中藥組合物的制備方法，包括以下步驟：
分別按照選定重量份取錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草，加水加熱回流提取2次，以錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草的總重量為基準(zhǔn)，每次加入10重量倍量的水提取1.5小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，將濾液濃縮至50℃下相對(duì)密度1.20-1.25的清膏，即得。
進(jìn)一步優(yōu)選地，本發(fā)明上述解毒利咽的中藥組合物的制備方法，在加熱回流提取的步驟前，還包括如下步驟：粉碎后混合或混合后粉碎。
本發(fā)明還提供包括上述中藥組合物的制劑、或者包括上述制備方法制備得到的中藥組合物的制劑，
所述中藥組合物加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成臨床上可接受的片劑、膠囊劑、散劑、合劑、丸劑、顆粒劑、溶液劑、糖漿劑、煎膏劑、貼膏劑、栓劑、氣霧劑、軟膏劑或注射劑。
所述常規(guī)輔料為：填充劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、防腐劑、基質(zhì)等。填充劑包括：淀粉、預(yù)膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素等；崩解劑包括：淀粉、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素納等；潤(rùn)滑劑包括：硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、二氧化硅等；助懸劑包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素、瓊脂、羥丙基甲基纖維素等；粘合劑包括，淀粉漿、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素等；甜味劑包括：糖精鈉、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矯味劑包括：甜味劑及各種香精；防腐劑包括：尼泊金類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽類、苯扎溴銨、醋酸氯乙定、桉葉油等；基質(zhì)包括：peg6000、peg4000、蟲(chóng)蠟等。
本發(fā)明還提供上述中藥組合物、上述制備方法制備得到的中藥組合物、或上述中藥組合物的制劑在制備解毒利咽的藥品或保健品中的應(yīng)用。
本發(fā)明還提供上述中藥組合物、上述制備方法制備得到的中藥組合物、或上述中藥組合物的制劑在制備解熱抗炎的藥品或保健品中的應(yīng)用。
本發(fā)明還提供上述中藥組合物、上述制備方法制備得到的中藥組合物、或上述中藥組合物的制劑在制備治療急性咽炎或風(fēng)熱證的藥品或保健品中的應(yīng)用。
優(yōu)選地，本發(fā)明上述應(yīng)用，所述急性咽炎為小兒急性咽炎。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的技術(shù)方案具有如下優(yōu)點(diǎn)：
【錦燈籠】性寒，味苦，歸肺經(jīng)，具有清熱解毒的功效。
【板藍(lán)根】性寒，味苦，歸心、胃經(jīng)，具有清熱解毒、涼血利咽的功效。
【穿心蓮】性寒，味苦，歸肺、胃、大腸、小腸經(jīng)，具有清熱解毒、燥濕的功效。
【牛蒡子】性寒，味辛、苦，歸肺、胃經(jīng)，具有發(fā)散風(fēng)熱、解毒透疹、利咽的功效。
【桔?！啃云?，味苦、辛，歸肺經(jīng)，具有宣肺、利咽、祛痰、排膿的功效。
【薄荷】性涼，味辛，歸肺、肝經(jīng)，具有宣散風(fēng)熱、清頭目、透疹的功效。
【甘草】性平，味甘，歸心、脾、肺、胃經(jīng)，具有補(bǔ)脾益氣、清熱解毒、祛痰止咳、緩急止痛的功效。
(1)本發(fā)明的中藥組合物，選用錦燈籠、板藍(lán)根為君藥，選用穿心蓮、牛蒡子為臣藥，選用薄荷、桔梗為佐藥，選用生甘草為使藥，各原料藥在特定的配比下相互配合、共同作用，全方具有清熱疏風(fēng)、解毒利咽的功效，共同作用于咽喉部位，從而發(fā)揮治療急性咽炎、風(fēng)熱證的作用；
(2)本發(fā)明的中藥組合物對(duì)多種試驗(yàn)性幼齡實(shí)驗(yàn)動(dòng)物急性咽炎病變具有較好的治療作用，對(duì)炎性因子分泌和非特異性急性炎癥反應(yīng)的抑制作用可能是其治療急性咽炎的重要環(huán)節(jié)，其解熱作用亦可在一定程度上改善臨床的發(fā)熱癥狀；
(3)本發(fā)明中藥組合物僅僅包括7種原料藥錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草，不僅原料藥組成成分較少，而且各原料藥來(lái)源充足，原料藥成本較低。
具體實(shí)施方式
本發(fā)明以下實(shí)施例和實(shí)驗(yàn)例中，錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草均為市售品。
實(shí)施例1
本實(shí)施例解毒利咽的中藥組合物的原料藥組成為：錦燈籠15g、板藍(lán)根15g、穿心蓮10g、牛蒡子10g、桔梗6g、薄荷6g、甘草10g；
該中藥組合物的制備方法，包括以下步驟：分別按照選定重量取錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草，混合后粉碎，加水加熱回流提取2次，以錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草的總重量為基準(zhǔn)，每次加入10重量倍量的水提取1.5小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，將濾液濃縮至50℃下相對(duì)密度1.20-1.25的清膏，即得。
本實(shí)施例解毒利咽的中藥組合物加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成顆粒劑。
實(shí)施例2
本實(shí)施例解毒利咽的中藥組合物的原料藥組成為：錦燈籠10g、板藍(lán)根15g、穿心蓮6g、牛蒡子15g、桔梗3g、薄荷3g、甘草15g；
該中藥組合物的制備方法，包括以下步驟：分別按照選定重量取錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草，混合后粉碎，加水加熱回流提取1次，以錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草的總重量為基準(zhǔn)，加入12重量倍量的水提取3小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，將濾液濃縮至50℃下相對(duì)密度1.20-1.25的清膏，即得。
本實(shí)施例解毒利咽的中藥組合物加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成蜜丸。
實(shí)施例3
本實(shí)施例解毒利咽的中藥組合物的原料藥組成為：錦燈籠20g、板藍(lán)根10g、穿心蓮15g、牛蒡子6g、桔梗10g、薄荷10g、甘草6g；
該中藥組合物的制備方法，包括以下步驟：分別按照選定重量取錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草，粉碎后混合，加水加熱回流提取3次，以錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草的總重量為基準(zhǔn)，每次加入8重量倍量的水提取1小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，將濾液濃縮至50℃下相對(duì)密度1.20-1.25的清膏，即得。
本實(shí)施例解毒利咽的中藥組合物加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成散劑。
實(shí)施例4
本實(shí)施例解毒利咽的中藥組合物的原料藥組成為：錦燈籠14g、板藍(lán)根14g、穿心蓮9g、牛蒡子9g、桔梗5g、薄荷5g、甘草9g；
該中藥組合物的制備方法，包括以下步驟：分別按照選定重量取錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草，粉碎后混合，加水加熱回流提取2次，以錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草的總重量為基準(zhǔn)，每次加入9重量倍量的水提取2.5小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，將濾液濃縮至50℃下相對(duì)密度1.20-1.25的清膏，即得。
本實(shí)施例解毒利咽癥的中藥組合物加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成膠囊劑。
實(shí)施例5
本實(shí)施例解毒利咽的中藥組合物的原料藥組成為：錦燈籠16g、板藍(lán)根16g、穿心蓮11g、牛蒡子11g、桔梗7g、薄荷7g、甘草11g；
該中藥組合物的制備方法，包括以下步驟：分別按照選定重量取錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草，混合后粉碎，加水加熱回流提取2次，以錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草的總重量為基準(zhǔn)，每次加入11重量倍量的水提取1.5小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，將濾液濃縮至50℃下相對(duì)密度1.20-1.25的清膏，即得。
本實(shí)施例解毒利咽癥的中藥組合物加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成顆粒劑。
實(shí)施例6
本實(shí)施例解毒利咽的中藥組合物的原料藥組成為：錦燈籠18g、板藍(lán)根20g、穿心蓮12g、牛蒡子13g、桔梗10g、薄荷7g、甘草6g；
該中藥組合物的制備方法，包括以下步驟：分別按照選定重量取錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草，混合后粉碎，加水加熱回流提取2次，以錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草的總重量為基準(zhǔn)，每次加入10重量倍量的水提取2小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，將濾液濃縮至50℃下相對(duì)密度1.20-1.25的清膏，即得。
本實(shí)施例解毒利咽癥的中藥組合物加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成片劑。
實(shí)施例7
本實(shí)施例解毒利咽的中藥組合物的原料藥組成為：錦燈籠7g、板藍(lán)根23g、穿心蓮4g、牛蒡子17g、桔梗2g、薄荷11g、甘草4g；
該中藥組合物的制備方法，包括以下步驟：分別按照選定重量取錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草，混合后粉碎，加水加熱回流提取2次，以錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草的總重量為基準(zhǔn)，每次加入10重量倍量的水提取1.5小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，將濾液濃縮至50℃下相對(duì)密度1.20-1.25的清膏，即得。
本實(shí)施例解毒利咽癥的中藥組合物加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成蜜丸。
實(shí)施例8
本實(shí)施例解毒利咽的中藥組合物的原料藥組成為：錦燈籠23g、板藍(lán)根7g、穿心蓮17g、牛蒡子4g、桔梗11g、薄荷2g、甘草17g；
該中藥組合物的制備方法，包括以下步驟：分別按照選定重量取錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草，粉碎后混合，加水加熱回流提取3次，以錦燈籠、板藍(lán)根、穿心蓮、牛蒡子、桔梗、薄荷和甘草的總重量為基準(zhǔn)，每次加入9重量倍量的水提取1.5小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，將濾液濃縮至50℃下相對(duì)密度1.20-1.25的清膏，即得。
本實(shí)施例解毒利咽癥的中藥組合物加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成片劑。
實(shí)驗(yàn)例1本發(fā)明中藥組合物對(duì)試驗(yàn)性急性咽炎模型動(dòng)物的影響
1.1對(duì)氨水致幼齡大鼠急性咽炎模型的影響
1.1.1實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
通過(guò)氨水咽部刺激法復(fù)制幼齡大鼠急性咽炎模型，觀察對(duì)急性咽炎幼齡大鼠全血白細(xì)胞計(jì)數(shù)分類、血清炎癥因子水平以及咽部粘膜病理組織學(xué)改變的影響，評(píng)價(jià)對(duì)急性咽炎咽部病變以及相關(guān)指標(biāo)的改善作用。
1.1.2實(shí)驗(yàn)方法
sd大鼠，雌雄各半，72只，適應(yīng)性喂養(yǎng)5天，隨機(jī)分為6組，分別為：空白對(duì)照組，模型對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組1-4組，每組12只，雌雄各半。
造模方法如下：除空白對(duì)照組外，其余各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用喉頭噴霧器于動(dòng)物咽部噴霧15％氨水，2次/天，每次3掀，連續(xù)3天，復(fù)制大鼠急性咽炎模型，空白組噴霧等量生理鹽水。噴霧后大鼠出現(xiàn)搔抓口部，頻繁飲水，咽部充血、腫脹。
造模后，實(shí)驗(yàn)組1-4組分別經(jīng)口灌胃給予實(shí)施例1制備的中藥組合物4.36g/kg、2.18g/kg、1.09g/kg、0.73g/kg，1次/日，連續(xù)5天，空白對(duì)照組和模型對(duì)照組給予等體積蒸餾水。
末次給藥結(jié)束后1h，各組動(dòng)物稱重，水合氯醛(300mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠，腹主動(dòng)脈取血，取全血用血球計(jì)數(shù)儀測(cè)定血中白細(xì)胞計(jì)數(shù)和白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)，評(píng)價(jià)藥物對(duì)模型大鼠全血白細(xì)胞和分類的影響；取血清測(cè)定血清中tnf-α水平，評(píng)價(jià)藥物對(duì)模型大鼠炎癥急性期炎性因子分泌的影響；咽部黏膜組織取材，10％甲醛溶液固定，he染色，光鏡下觀察其組織形態(tài)學(xué)變化，評(píng)價(jià)藥物對(duì)模型大鼠咽部黏膜病理組織學(xué)變化的影響。
1.1.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：(1)實(shí)施例1制備的中藥組合物4.36g/kg、2.18g/kg、1.09g/kg可顯著降低氨水致急性咽炎模型大鼠全血wbc計(jì)數(shù)，與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(分別p<0.001，p<0.05，p<0.01)；
(2)實(shí)施例1制備的中藥組合物4.36g/kg、2.18g/kg、1.09g/kg、0.73g/kg可顯著降低模型大鼠全血中性粒細(xì)胞分類百分比，與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(均p<0.01)；這表明，實(shí)施例1制備的中藥組合物可顯著降低氨水致幼齡大鼠急性咽炎模型升高的全血白細(xì)胞計(jì)數(shù)和中性粒細(xì)胞分類百分比，具有較好的降低急性咽炎全血白細(xì)胞升高的作用；
(3)實(shí)施例1制備的中藥組合物4.36g/kg、2.18g/kg、1.09g/kg可顯著降低模型大鼠血清tnf-α水平，與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(分別p<0.001，p<0.01，p<0.05)；這表明，實(shí)施例1制備的中藥組合物可顯著降低氨水致幼齡大鼠急性咽炎模型升高的tnf-α水平，具有較好的抑制急性咽炎血清炎性因子分泌的作用；
(4)病理組織學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示，模型對(duì)照組大鼠咽部黏膜腫脹增厚，黏膜上皮、固有層和黏膜下組織水腫，黏膜充血，血管擴(kuò)張及漿液滲出，黏膜下小血管增多、充血，大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，少量深入肌層組織，肌纖維排列不規(guī)則；實(shí)施例1制備的中藥組合物4.36g/kg、2.18g/kg、1.09g/kg、0.73g/kg均可不同程度減輕模型大鼠咽部粘膜的病理改變，其中4.36g/kg、2.18g/kg可顯著降低咽部粘膜病理分級(jí)評(píng)分，與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(分別p<0.05，p<0.01)。
1.1.4實(shí)驗(yàn)結(jié)論
本發(fā)明中藥組合物對(duì)氨水致幼齡大鼠急性咽炎具有較好地改善和治療作用。
1.2對(duì)腺病毒感染致幼年小鼠急性咽炎模型的治療作用
1.2.1實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
研究本發(fā)明中藥組合物對(duì)腺病毒感染致幼年小鼠急性咽炎模型的治療作用。
1.2.2實(shí)驗(yàn)方法
取幼年icr小鼠60只，體重11±1g，按體重等級(jí)分為6組，分別為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組1-4組，每組10只。
除正常對(duì)照組外，均咽部注射100tcid50稀釋的腺病毒病毒液，50μl/只，連續(xù)3天，感染當(dāng)天開(kāi)始給藥，實(shí)驗(yàn)組1-4組分別經(jīng)口灌胃給予實(shí)施例1制備的中藥組合物6.48g/kg、3.24g/kg、1.62g/kg、1.08g/kg，每日1次，連續(xù)3天，正常對(duì)照組和模型對(duì)照組在同等條件下給蒸餾水。第3天給藥后1h解剖動(dòng)物，肉眼觀察小鼠咽部黏膜的情況。
1.2.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：(1)感染腺病毒后，模型對(duì)照組小鼠咽部組織出現(xiàn)明顯的充血、腫脹；
(2)實(shí)施例1制備的中藥組合物6.48g/kg、3.24g/kg、1.62g/kg、1.08g/kg均能明顯減輕小鼠咽部組織的病變程度，與模型對(duì)照組比較具有顯著性差異(分別p<0.01，p<0.01，p<0.01，p<0.05)。
1.2.4實(shí)驗(yàn)結(jié)論
本發(fā)明中藥組合物對(duì)腺病毒感染致幼年小鼠急性咽炎具有較好地改善和治療作用。
1.3對(duì)乙型溶血性鏈球菌致幼年大鼠急性咽炎模型的影響
1.3.1實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
研究本發(fā)明中藥組合物對(duì)乙型溶血性鏈球菌致幼年大鼠急性咽炎模型的影響。
1.3.2實(shí)驗(yàn)方法
取幼年sd大鼠60只，體重90±10g，按體重等級(jí)隨機(jī)分為6組，分別為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組1-4組，每組10只。
實(shí)驗(yàn)組1-4組分別經(jīng)口灌胃給予實(shí)施例1制備的中藥組合物4.36g/kg、2.18g/kg、1.09g/kg、0.73g/kg。
除正常對(duì)照組外，使用滅菌鑷子翻開(kāi)大鼠口腔，暴露上頜粘膜，用注射器將吸有1×109cfu/ml濃度乙型溶血性鏈球菌菌液水平方向點(diǎn)刺鼻咽部粘膜，并注射菌液，操作程度以略有點(diǎn)狀出血為度，每只0.1ml，連續(xù)感染2天。第1天感染后1h實(shí)驗(yàn)組1-4組各動(dòng)物按1ml/100g灌胃給藥，每天1次，連續(xù)3天，正常對(duì)照組和模型對(duì)照組在同等條件下給蒸餾水。第3天給藥后1h，解剖動(dòng)物，分別取咽部上部及下部組織進(jìn)行病理學(xué)檢查，根據(jù)組織病變程度判斷藥物的作用，結(jié)果采用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
1.3.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：(1)咽部感染乙型溶血性鏈球菌后，模型對(duì)照組大鼠咽喉黏膜上皮有不同程度增厚或變薄，上皮層細(xì)胞有退行性變和空泡變；黏膜下輕度充血，粘膜下以中性分葉核為主，淋巴細(xì)胞和炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；
(2)實(shí)施例1制備的中藥組合物2.18g/kg、1.09g/kg和0.73g/kg/可顯著改善模型大鼠咽部粘膜的病理組織學(xué)變化，其中實(shí)施例1制備的中藥組合物1.09g/kg與模型對(duì)照組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)。
1.3.4實(shí)驗(yàn)結(jié)論
本發(fā)明中藥組合物對(duì)腺病毒感染致幼年小鼠急性咽炎具有較好地改善和治療作用。
1.4對(duì)柯薩奇b4病毒致幼年家兔急性咽炎模型的影響
1.4.1實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
研究本發(fā)明中藥組合物對(duì)柯薩奇b4病毒致幼年家兔急性咽炎模型的影響。
1.4.2實(shí)驗(yàn)方法
取幼年家兔36只，體重1～1.8kg，按體重隨機(jī)分為6組，分別為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組1-4組，每組6只。
實(shí)驗(yàn)組1-4組分別經(jīng)口灌胃給予實(shí)施例1制備的中藥組合物4.36g/kg、2.18g/kg、1.09g/kg、0.73g/kg。
除正常對(duì)照組外，均用滅菌鑷子翻開(kāi)家兔上頜口頰，使之暴露粘膜，以帶有100tcid50稀釋度的柯薩奇b4病毒液的注射針頭以接近水平方向點(diǎn)刺粘膜，并注射，注射量為0.4ml/只。感染1h后開(kāi)始給藥，每日1次，連續(xù)3天，正常對(duì)照組和模型對(duì)照組在同等條件下給蒸餾水。第3天給藥后1h解剖動(dòng)物，取咽部組織進(jìn)行病理學(xué)檢查，根據(jù)組織病變程度來(lái)判斷藥物的作用，結(jié)果采用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
1.4.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：(1)模型對(duì)照組家兔咽喉黏膜上皮有不同程度增生、增厚，上皮有節(jié)段性退行性變，染色淺，黏膜下有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，上皮下有中性分葉核、淋巴細(xì)胞和少量單核細(xì)胞等炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；
(2)實(shí)施例1制備的中藥組合物2.18g/kg、1.09g/kg、0.55g/kg、0.36g/kg均可顯著減輕模型家兔咽喉粘膜病變，與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(均p<0.01)。
1.4.4實(shí)驗(yàn)結(jié)論
本發(fā)明中藥組合物對(duì)柯薩奇b4病毒致幼年家兔急性咽炎具有較好地改善和治療作用。
實(shí)驗(yàn)例2本發(fā)明中藥組合物對(duì)急性非特異性急性炎癥反應(yīng)的影響
2.1對(duì)二甲苯所致幼齡小鼠急性耳腫脹的影響
2.1.1實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
通過(guò)幼齡小鼠二甲苯性耳腫脹試驗(yàn)，觀察本發(fā)明中藥組合物對(duì)幼齡小鼠耳廓腫脹程度的影響，評(píng)價(jià)其抑制急性炎癥反應(yīng)的作用。
2.1.2實(shí)驗(yàn)方法
icr小鼠，60只，雄性，適應(yīng)性喂養(yǎng)3天，隨機(jī)分為5組：模型對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組1-4組，每組12只。
實(shí)驗(yàn)組1-4組分別經(jīng)口灌胃給予實(shí)施例1制備的中藥組合物6.54g/kg、3.27g/kg、1.63g/kg、1.09g/kg。
各給藥組小鼠分別經(jīng)口灌胃給予相應(yīng)劑量的藥物，1次/日，連續(xù)給藥5天；模型對(duì)照組灌胃給予等體積的蒸餾水。
末次給藥后40min，將0.05ml二甲苯涂于各小鼠左耳兩側(cè)(一側(cè)各0.025ml)致炎，致炎后60min處死小鼠，以8mm打孔器在小鼠左右耳廓相同部位打下耳片，電子分析天平稱重，左右耳片重量之差即為腫脹度。計(jì)算各給藥組的耳廓腫脹率和抑制率。
耳廓腫脹率(％)＝(左耳耳廓重量—右耳耳廓重量)÷右耳耳廓重量×100％
耳廓腫脹抑制率(％)＝(模型對(duì)照組耳廓腫脹度均值－給藥組耳廓腫脹均值)÷模型對(duì)照組耳廓腫脹度均值×100％
2.1.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：實(shí)施例1制備的中藥組合物6.54g/kg、3.27g/kg、1.63g/kg、1.09g/kg均可不同程度地降低二甲苯所致小鼠耳殼急性炎癥反應(yīng)的耳腫脹度和腫脹率，與模型對(duì)照組相比有顯著性差異(分別p<0.01，0.05，0.01，0.01)；這表明，實(shí)施例1制備的中藥組合物可顯著降低二甲苯致幼齡小鼠的急性耳殼腫脹度和腫脹率，具有較好的抑制急性炎癥反應(yīng)的作用。
2.1.4實(shí)驗(yàn)結(jié)論
本發(fā)明中藥組合物可顯著降低二甲苯致幼齡小鼠的急性耳殼腫脹度和腫脹率，具有較好的抑制急性炎癥反應(yīng)的作用。
2.2對(duì)醋酸致幼齡小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響
2.2.1實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
通過(guò)幼齡小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性試驗(yàn)，觀察本發(fā)明中藥組合物對(duì)醋酸致幼齡小鼠腹腔伊文思藍(lán)滲透的影響，評(píng)價(jià)其對(duì)急性炎癥反應(yīng)毛細(xì)血管通透性的抑制作用。
2.2.2實(shí)驗(yàn)方法
icr小鼠，60只，雌雄各半，適應(yīng)性喂養(yǎng)3天，隨機(jī)分為5組：模型對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組1-4組，每組12只，雌雄各半。實(shí)驗(yàn)組1-4組分別經(jīng)口灌胃給予實(shí)施例1制備的中藥組合物6.54g/kg、3.27g/kg、1.63g/kg、1.09g/kg。
各給藥組小鼠分別經(jīng)口灌胃給予相應(yīng)劑量的藥物，1次/日，連續(xù)給藥5天；模型對(duì)照組灌胃給予等體積的蒸餾水。
于末次給藥后40min，各鼠尾靜脈注射0.5％伊文思藍(lán)生理鹽水溶液0.1ml/10g，隨即腹腔注射0.8％冰醋酸0.2ml/只，20min后脫頸椎處死，腹腔注射生理鹽水4ml，輕柔小鼠腹部后，剪開(kāi)腹部皮膚肌肉，吸取1ml液體，3000r/min離心15min，取上清液于540nm比色測(cè)定吸光度值。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x±sd)”表示。數(shù)據(jù)先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)。方差齊選用one-wayanova法進(jìn)行各組間比較；方差不齊選用t’檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較。
2.2.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：實(shí)施例1制備的中藥組合物6.54g/kg、3.27g/kg、1.63g/kg均可不同程度地降低小鼠腹腔伊文思藍(lán)滲出液的吸光度值，與模型對(duì)照組相比有顯著性差異(分別p<0.001，p<0.001，p<0.01)；這表明，實(shí)施例1制備的中藥組合物可顯著降低醋酸誘導(dǎo)幼齡小鼠腹腔伊文思藍(lán)的滲出量，具有較好的抑制急性炎癥反應(yīng)毛細(xì)血管通透性的作用。
2.2.4實(shí)驗(yàn)結(jié)論
本發(fā)明中藥組合物可顯著降低醋酸誘導(dǎo)幼齡小鼠腹腔伊文思藍(lán)的滲出量，具有較好的抑制急性炎癥反應(yīng)毛細(xì)血管通透性的作用
2.3對(duì)幼齡大鼠角叉菜膠足跖腫脹的影響
2.3.1實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
通過(guò)幼齡大鼠角叉菜膠足跖腫脹試驗(yàn)，觀察本發(fā)明中藥組合物對(duì)幼齡大鼠足跖腫脹程度的影響，評(píng)價(jià)其抑制急性炎癥反應(yīng)的作用。
2.3.2實(shí)驗(yàn)方法
sd大鼠，60只，雄性，適應(yīng)性喂養(yǎng)3天，隨機(jī)分為5組：模型對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組1-4組，每組12只。
實(shí)驗(yàn)組1-4組分別經(jīng)口灌胃給予實(shí)施例1制備的中藥組合物4.36g/kg、2.18g/kg、1.09g/kg、0.73g/kg。
各給藥組大鼠分別經(jīng)口灌胃給予相應(yīng)劑量的藥物，1次/日，連續(xù)給藥5天；模型對(duì)照組灌胃給予等體積的蒸餾水。
末次給藥1小時(shí)后，在大鼠右后足跖腱膜下注射1％角叉菜膠0.1ml/只。用足跖容積測(cè)定儀分別測(cè)量致炎前，致炎后的0.5、1、2、4、6小時(shí)右后足跖容積[7]。以致炎前后的足容積差值為腫脹度，計(jì)算腫脹率。
腫脹度＝致炎后足跖容積－致炎前足跖容積
腫脹率＝腫脹度/致炎前足跖容積×100％
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x±sd)”表示。數(shù)據(jù)先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)。方差齊選用one-wayanova法進(jìn)行各組間比較；方差不齊選用t’檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較。
2.3.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：(1)與模型對(duì)照組比較，實(shí)施例1制備的中藥組合物4.36g/kg可顯著抑制角叉菜膠致炎后1h、2h、4h、6h的大鼠足跖腫脹度(分別p<0.05，0.001，0.01，0.01)和致炎后2h、4h、6h足跖腫脹率(分別p<0.01，0.01，0.05)；
(2)實(shí)施例1制備的中藥組合物2.18g/kg可顯著抑制致炎后2h、4h、6h的大鼠足跖腫脹度(分別p<0.05，0.05，0.01)和致炎后2h、4h、6h足跖腫脹率(均p<0.05)；
(3)實(shí)施例1制備的中藥組合物0.73g/kg可顯著抑制致炎后4h、6h的大鼠足跖腫脹度(均p<0.05)；
(4)實(shí)施例1制備的中藥組合物1.09g/kg雖具有一定的抑制致炎后的足跖腫脹度和足跖腫脹率，但與模型對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異；
這表明，實(shí)施例1制備的中藥組合物在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)可顯著降低角叉菜膠致幼齡大鼠足跖腫脹度和腫脹率，具有較好的抑制急性炎癥發(fā)應(yīng)的作用。
2.3.4實(shí)驗(yàn)結(jié)論
本發(fā)明中藥組合物可顯著降低角叉菜膠致幼齡大鼠足跖腫脹度和腫脹率，具有較好的抑制急性炎癥發(fā)應(yīng)的作用。
實(shí)驗(yàn)例3本發(fā)明中藥組合物的解熱作用研究
3.1對(duì)內(nèi)毒素致家兔發(fā)熱的影響
3.1.1實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
通過(guò)家兔內(nèi)毒素發(fā)熱試驗(yàn)，觀察本發(fā)明中藥組合物對(duì)家兔體溫升高程度的影響，評(píng)價(jià)其解熱作用。
3.1.2實(shí)驗(yàn)方法
雄性兔70只，適應(yīng)性喂養(yǎng)5天后，每日用數(shù)字電子測(cè)溫計(jì)肛門插入測(cè)體溫一次，連續(xù)3天，選擇體溫范圍在38.5℃-39.6℃的合格兔供試驗(yàn)用。取3次體溫均值作為基礎(chǔ)體溫，按基礎(chǔ)體溫隨機(jī)分為6組，每組8只，分別為空白對(duì)照組，模型對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組1-4組。
實(shí)驗(yàn)組1-4組分別經(jīng)口灌胃給予實(shí)施例1制備的中藥組合物2.18g/kg、1.09g/kg、0.54g/kg、0.36g/kg。
各給藥組分別經(jīng)口灌胃給予相應(yīng)劑量的藥物，1次/日，連續(xù)給藥3天；空白對(duì)照組和模型對(duì)照組灌胃給予等體積的蒸餾水。
末次給藥前對(duì)各組家兔進(jìn)行基礎(chǔ)體溫測(cè)定，連續(xù)兩次，間隔30min，隨后各組開(kāi)始灌胃給藥，30min后，除空白對(duì)照組外，各組家兔從耳緣靜脈注射大腸桿菌內(nèi)毒素300ng/kg(2ml/kg)，空白對(duì)照組注射等體積的生理鹽水，靜脈注射后0.5h、1h、1.5h、2h、3h、4h、5h各測(cè)體溫一次。計(jì)算各測(cè)定時(shí)間家兔體溫的變化值(測(cè)定體溫-基礎(chǔ)體溫，δ℃)。比較組間差異，并繪制體溫變化曲線。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x±sd)”表示。數(shù)據(jù)先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)。方差齊選用one-wayanova法進(jìn)行各組間比較；方差不齊選用t’檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較。
3.1.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：(1)實(shí)施例1制備的中藥組合物2.18g/kg可顯著降低內(nèi)毒素靜脈注射后致家兔發(fā)熱模型1～5h時(shí)間點(diǎn)體溫升高值，與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(分別p<0.01，p<0.001，p<0.001，p<0.001，p<0.001，p<0.001)；
(2)實(shí)施例1制備的中藥組合物1.09g/kg可顯著降低1～5h時(shí)間點(diǎn)體溫升高值，與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(分別p<0.01，p<0.01，p<0.001，p<0.001，p<0.001，p<0.01)；
(3)實(shí)施例1制備的中藥組合物0.54g/kg可顯著降低1～5h時(shí)間點(diǎn)體溫升高值，與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(分別p<0.05，p<0.05，p<0.001，p<0.001，p<0.001，p<0.01)；(4)實(shí)施例1制備的中藥組合物0.36g/kg可顯著降低2h、3h時(shí)間點(diǎn)體溫升高值，與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(均p<0.001)；
這表明，實(shí)施例1制備的中藥組合物在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)可顯著降低內(nèi)毒素致家兔的體溫升高值，具有較好的解熱作用。
3.1.4實(shí)驗(yàn)結(jié)論
本發(fā)明中藥組合物可顯著降低內(nèi)毒素致家兔的體溫升高值，具有較好的解熱作用。
3.2對(duì)酵母致幼齡大鼠發(fā)熱的影響
3.2.1實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
通過(guò)幼齡大鼠酵母發(fā)熱試驗(yàn)，觀察本發(fā)明中藥組合物對(duì)幼齡大鼠體溫升高程度的影響，評(píng)價(jià)其解熱作用。
3.2.2實(shí)驗(yàn)方法
sd大鼠，100只，雄性，適應(yīng)性喂養(yǎng)5天后，每日測(cè)量各組大鼠的肛溫，測(cè)定時(shí)間為上午9:30，將體溫計(jì)于探頭后2.5cm處標(biāo)記，確保體溫計(jì)每次伸入動(dòng)物體內(nèi)的長(zhǎng)度一致，連續(xù)測(cè)定3d。選取體溫在36.5-38.5℃，且連續(xù)體溫變化小于0.3℃的大鼠用于實(shí)驗(yàn)。
將篩選合格后的大鼠按照體溫隨機(jī)分為5組：模型對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組1-4組。
實(shí)驗(yàn)組1-4組分別經(jīng)口灌胃給予實(shí)施例1制備的中藥組合物4.36g/kg、2.18g/kg、1.09g/kg、0.73g/kg。給藥組開(kāi)始給藥，模型對(duì)照組給予同體積的生理鹽水。
禁食不禁水8小時(shí)后，于早上連續(xù)監(jiān)測(cè)體溫2次，取其平均體溫作為基礎(chǔ)體溫。稱重后各組動(dòng)物以10ml/kg劑量背部皮下注射20％干酵母混懸液，制備大鼠發(fā)熱模型。造模后4小時(shí)給組給予相應(yīng)的受試藥物，模型對(duì)照組給予等體積蒸餾水。
于給藥后0.5h、1h、2h、3h、4h、5h、6h測(cè)定肛溫，記錄數(shù)據(jù)，與基礎(chǔ)體溫比較，計(jì)算體溫變化值(δ℃)(測(cè)定體溫-基礎(chǔ)體溫)。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差
3.2.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：(1)實(shí)施例1制備的中藥組合物4.36g/kg可顯著降低皮下注射酵母混懸液后致大鼠發(fā)熱模型1～5h時(shí)間點(diǎn)體溫升高值，與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(分別p<0.05，p<0.05，p<0.01，p<0.05，p<0.05)；
(2)實(shí)施例1制備的中藥組合物2.18g/kg可顯著降低1h、3h、4h時(shí)間點(diǎn)體溫升高值，與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(均p<0.05)；
(3)實(shí)施例1制備的中藥組合物1.09g/kg可顯著降低3h和4h時(shí)間點(diǎn)體溫升高值，與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(均p<0.05)；
(4)實(shí)施例1制備的中藥組合物0.73g/kg雖有降低體溫升高值的趨勢(shì)，但與模型對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異；
這表明，實(shí)施例1制備的中藥組合物在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)可顯著降低酵母致幼齡大鼠的體溫升高值，具有較好的解熱作用。
3.2.4實(shí)驗(yàn)結(jié)論
本發(fā)明中藥組合物可顯著降低酵母致幼齡大鼠的體溫升高值，具有較好的解熱作用。
綜上所述，本發(fā)明中藥組合物對(duì)多種試驗(yàn)性幼齡實(shí)驗(yàn)動(dòng)物急性咽炎病變具有較好的治療作用，對(duì)炎性因子分泌和非特異性急性炎癥反應(yīng)的抑制作用可能是其治療急性咽炎的重要環(huán)節(jié)，其解熱作用亦可在一定程度上改善臨床的發(fā)熱癥狀，為本發(fā)明中藥組合物臨床治療小兒急性咽炎提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
顯然，上述實(shí)施例僅僅是為清楚地說(shuō)明所作的舉例，而并非對(duì)實(shí)施方式的限定。對(duì)于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在上述說(shuō)明的基礎(chǔ)上還可以做出其它不同形式的變化或變動(dòng)。這里無(wú)需也無(wú)法對(duì)所有的實(shí)施方式予以窮舉。而由此所引伸出的顯而易見(jiàn)的變化或變動(dòng)仍處于本發(fā)明創(chuàng)造的保護(hù)范圍之中。