技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及獸藥領(lǐng)域，特別涉及一種伊維菌素的納米乳制劑及其制備方法。

背景技術(shù)：
：

伊維菌素是公認(rèn)的具有廣譜、高效、低毒、低殘留的大環(huán)內(nèi)脂類抗寄生蟲藥物，對家畜的胃腸道線蟲、外寄生蟲(蜱、虱、螨、蠅蛆等)有特殊的療效。但由于極低的水溶性、非常差的保存穩(wěn)定性和較強(qiáng)的毒性導(dǎo)致其在臨床應(yīng)用困難重重。目前在獸醫(yī)臨床上應(yīng)用，仍以傳統(tǒng)劑型，如預(yù)混劑、片劑、軟膏劑、溶液劑、注射劑、透皮劑等常規(guī)劑型為主。這些劑型一度滿足了畜牧業(yè)生產(chǎn)的實(shí)際需要，但大多數(shù)傳統(tǒng)制劑容易引起中毒，且有效血藥濃度維持時(shí)間短，往往需要多次重復(fù)給藥才能達(dá)到有效治療目的，增加了副反應(yīng)，不利于動(dòng)物的健康生長，提高了勞動(dòng)成本，因此畜牧業(yè)的發(fā)展客觀上要求研制開發(fā)出新優(yōu)良的制劑。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
：

本發(fā)明在于克服背景技術(shù)中伊維菌素水溶性低、保存性差的缺點(diǎn)而提供一種伊維菌素的納米乳制劑。該伊維菌素的納米乳制劑，克服傳統(tǒng)劑型其應(yīng)用中的諸多不足，為獸醫(yī)臨床動(dòng)物寄生蟲的防治提供新型制劑。

本發(fā)明解決其問題可通過如下技術(shù)方案來達(dá)到：一種伊維菌素的納米乳制劑，其組份及各組份的重量百分比為：伊維菌素0.5－2％、油相油酸乙酯0.5－5％、乳化劑聚氧乙烯氫化蓖麻油(rh－40)8－30％、助乳化劑二乙二醇單乙基醚(transcutol)1－10％、純水余量。

本發(fā)明還提供了一種伊維菌素的納米乳制劑的制備方法，包括以下步驟：

⑴稱取各組分：按預(yù)定比例稱取伊維菌素、油酸乙酯、rh－40、transcutol、純水；

⑵在室溫條件下(15-35℃)，依次將油相、乳化劑、助乳化劑、伊維菌素放入容器內(nèi)，每次加樣都要置恒溫磁力攪拌器上攪拌直至體系透明為止；

⑶向步驟(2)攪拌好的混合物中逐滴加入純水，邊攪拌邊滴入，體系經(jīng)過透明—混濁、粘稠—稀薄、透明的過程，得伊維菌素納米乳。

將制得伊維菌素納米乳經(jīng)過濾除菌分裝，或高溫濕熱滅菌(121℃，15min或115℃30min)，震搖至乳液透明為止，然后分裝。制得伊維菌素納米乳，粒徑范圍為8nm－100nm。

該伊維菌素的納米乳制劑采用各成分的功效如下：

伊維菌素是有效藥物，具有驅(qū)殺畜禽體線蟲和體表節(jié)肢動(dòng)物活性。油酸乙酯，醫(yī)用級，是常用的藥物輔料，為油相；rh－40，醫(yī)用級，常作為水不溶性藥物或其他脂溶性藥物的增溶性和乳化劑，在本制中起乳化和增溶作用；transcutol，二乙二醇單乙基醚醫(yī)用級獸用型，是一種高效溶劑、增溶劑，本劑中作為助化劑；純水，即去離子水，醫(yī)藥中常作溶劑，為水相。

納米乳是由油相、水相、乳化劑和助乳化劑組成，乳滴粒徑一般為小于100nm的透明或者半透明液體載藥系統(tǒng)，其乳滴多為球形，大小比較均勻；它具有增加難溶性藥物溶解度及提高藥物穩(wěn)定性和生物利用度等優(yōu)點(diǎn)；許多難溶性藥物制成納米乳后具有緩釋和靶向的作用；同時(shí)納米乳生物相容性好，可生物降解，因此，它用作脂溶性藥物和對水解敏感藥物的載體，可以減少藥物的刺激性及毒副作用；納米乳熱力學(xué)穩(wěn)定，久置不分層，不破乳，因而是難溶性藥物的理想載體。

本發(fā)明與上述背景技術(shù)相比較可具有如下有益效果：該伊維菌素的納米乳制劑含有納米乳成分，增加了主藥物的溶解度及提高藥物穩(wěn)定性和生物利用度，同時(shí)，減少了藥物的刺激性及毒副作用，增加了藥物的熱力學(xué)穩(wěn)定性，久置不分層，不破乳。對綿羊消化道線蟲蟲卵轉(zhuǎn)陰率,0.1mg/kg劑量的1％伊維菌素納米乳劑與0.2mg/kg劑量的1％伊維菌素注射液相當(dāng)；對豬疥癬的療效，劑量為0.075mg/kg伊維菌素納米乳組優(yōu)于劑量為0.3mg/kg1％伊維菌素注射液對照組；防治牛皮蠅效果，伊維菌素納米乳各組均優(yōu)于藥物對照組。說明該納米乳制劑用于驅(qū)除家畜寄生蟲效果顯著。該制劑可注射，可口服，又可經(jīng)皮給藥。藥學(xué)和臨床學(xué)試驗(yàn)表明，該制劑具有穩(wěn)定，低毒、高效、長效，成本低廉，安全可靠，刺激性小，孕畜可用的特點(diǎn)。

具體實(shí)施方式：

下面結(jié)合具體實(shí)施方式對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明：

實(shí)施例1

稱取油酸乙酯3.87g、rh－40為12.71g、transcutol為2.72g、伊維菌素2g、純水78.7g。在室溫條件下，依次將上述油相、乳化劑、助乳化劑、伊維菌素放入燒杯內(nèi)，每次加樣都要置恒溫磁力攪拌器上攪拌直至體系透明為止；然后向上述混合物中逐滴加入純水，邊攪拌邊滴入，體系經(jīng)過透明——混濁、粘稠——稀薄、透明的過程，得2％伊維菌素納米乳，經(jīng)過濾除菌分裝。

實(shí)施例2

稱取油酸乙酯2.87g、rh－40為11.54g、transcutol為2.88g、伊維菌素1.5g、純水81.21g。在室溫條件下，依次將上述油相、乳化劑、助乳化劑、伊維菌素放入燒杯內(nèi)，每次加樣都要置恒溫磁力攪拌器上攪拌直至體系透明為止；然后向上述混合物中逐滴加入純水，邊攪拌邊滴入，體系經(jīng)過透明——混濁、粘稠——稀薄、透明的過程，得1.5％伊維菌素納米乳，經(jīng)高溫濕熱滅菌(121℃，15min)，震搖至乳液透明為止，然后分裝。

實(shí)施例3

稱取油酸乙酯2.20g、rh－40為15.84g、transcutol為3.96g、伊維菌素1.0g、純水77g。在室溫條件下，依次將上述油相、乳化劑、助乳化劑、伊維菌素放入燒杯內(nèi)，每次加樣都要置恒溫磁力攪拌器上攪拌直至體系透明為止；然后向上述混合物中逐滴加入純水，邊攪拌邊滴入，體系經(jīng)過透明——混濁、粘稠——稀薄、透明的過程，得1.0％伊維菌素納米乳，經(jīng)過濾除菌分裝。

實(shí)施例4

稱取油酸乙酯1g、rh－40為9g、transcutol為3g、伊維菌素0.5g、純水86.5g。在室溫條件下，依次將上述油相、乳化劑、助乳化劑、伊維菌素放入燒杯內(nèi)，每次加樣都要置恒溫磁力攪拌器上攪拌直至體系透明為止；然后向上述混合物中逐滴加入純水，邊攪拌邊滴入，體系經(jīng)過透明——混濁、粘稠——稀薄、透明的過程，得0.5％伊維菌素納米乳，經(jīng)過高溫濕熱滅菌(115℃30min)，震搖至乳液透明為止，然后分裝。

該伊維菌素的納米乳注射液用于驅(qū)除家畜寄生蟲效果的試驗(yàn)：

使用含伊維菌素濃度為1％的伊納乳注射液，由黑龍江省獸醫(yī)科學(xué)研究所檢驗(yàn)室研制，含量1％伊維菌素常規(guī)劑型藥物。使用的試劑為：0.4％氫氧化鈉溶液、飽和鹽水溶液、50％甘油水溶液，均由黑龍江省獸醫(yī)科學(xué)研究所檢驗(yàn)室自制。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為經(jīng)篩選合乎條件的實(shí)驗(yàn)羊、牛，共計(jì)401頭(只)。其中，體重約50kg綿羊100只，由齊齊哈爾市郊區(qū)西大橋下養(yǎng)羊戶提供；體重約100kg大白豬48頭,由齊齊哈爾市東溝養(yǎng)殖合作社提供；體重約400kg黃牛253頭，由富?？h龍安橋草場養(yǎng)牛戶提供。參試的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，雌雄各半，精神狀態(tài)良好，飲食、活動(dòng)正常。

1、驅(qū)除綿羊消化道線蟲的效果：

分為三組，分別為：伊納乳劑組、藥物對照組、空白對照組。伊納乳劑組按照給藥劑量為分0.1mg/kg(1組)、0.2mg/kg(2組)、0.3mg/kg(3組)、0.4mg/kg(4組)四組，藥物對照組(5組)為一組，給藥劑量為0.2mg/kg。用藥組給藥方式均為皮下注射?？瞻讓φ战M(6組)，不作任何處理。每組20只羊。對每組綿羊編號，以試驗(yàn)第0天、14d直腸采糞樣，糞樣分盒編號后帶回實(shí)驗(yàn)室檢查。用斯陶爾氏法對糞便蟲卵進(jìn)行計(jì)數(shù)。給藥后觀察記錄試驗(yàn)綿羊的飲食欲、排尿、排糞情況及精神狀況。計(jì)算第14d各組綿羊體內(nèi)消化道線蟲蟲卵的轉(zhuǎn)陰率和減少率，評價(jià)藥物效果。在15天試驗(yàn)期內(nèi)，參試羊只均在同一草場放牧，其它飼養(yǎng)條件相同。驅(qū)除綿羊消化道線蟲試驗(yàn)結(jié)果見下表1。

2.防治牛皮蠅蛆效果：

試驗(yàn)當(dāng)年10月份，將試驗(yàn)牛登記、記號，然后分組，分成藥物組和對照組。藥物組分成伊納乳組和1％伊維菌素組。伊納乳組分成a組：劑量為0.1mg/kg，參試牛37頭；b組：劑量為0.2mg/kg，參試牛37頭；c組：劑量為0.4mg/kg，參試牛37頭，1％伊維菌素組又分為d組：劑量為0.1mg/kg，參試牛57頭；e組：劑量為0.2mg/kg,參試牛33頭。用藥組均為皮下注射，給藥一次；對照組(f)不用藥物。于次年3—7月份，試驗(yàn)各組牛只采用觸摸背部皮蠅蛆瘤皰法⑷進(jìn)行檢驗(yàn)，記數(shù)、統(tǒng)計(jì)感染率、感染強(qiáng)度，以便比較、分析藥物的防治效果。防治牛皮蠅的試驗(yàn)結(jié)果見表2。

3.治療豬疥癬效果:

將48頭患豬按照感染程度輕重均勻搭配分為4組，每組12頭。第一組為空白對照組(g1)，不給藥；第二組為1％伊維菌素對照組(g2)，劑量為0.3mg/kg；第三組為伊納乳高劑量組(g3)，劑量為0.3mg/kg；第四組為伊納乳低劑量組(g4)，劑量為0.075mg/kg。給藥途徑均為皮下注射。這些實(shí)驗(yàn)豬分四個(gè)不同的圈舍飼養(yǎng)，飼養(yǎng)條件相同。用藥后進(jìn)行臨床癥狀觀察，并于7天、14天、21天、28天進(jìn)行疥螨數(shù)檢查，計(jì)算蟲體轉(zhuǎn)陰率。在試驗(yàn)過程中，除了第二組有3頭豬在初次用藥后以相同的劑量第二次給藥外，其它各用藥組均是給藥一次。治療豬疥癬試驗(yàn)結(jié)果見表3：

表1各組試驗(yàn)羊消化道線蟲蟲卵轉(zhuǎn)陰率和減少率統(tǒng)計(jì)結(jié)果

表2各試驗(yàn)組防治牛皮蠅試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)結(jié)果

表3各試驗(yàn)組不同時(shí)間間隔螨蟲轉(zhuǎn)陰率統(tǒng)計(jì)結(jié)果

對綿羊消化道線蟲蟲卵轉(zhuǎn)陰率、減少率，應(yīng)用伊維菌素納米乳注射劑按0.1mg/kg劑量皮下注射，分別為95％和98.5％；0.2mg/kg、0.3mg/kg0.4mg/kg劑量組蟲卵轉(zhuǎn)陰率、減少率均達(dá)100.0％。應(yīng)用伊維菌素注射液，0.2mg/kg劑量皮下注射組蟲卵轉(zhuǎn)陰率、減少率分別為95％和97.5％。本試驗(yàn)結(jié)果表明，0.1mg/kg劑量1％伊維菌素納米乳劑對綿羊消化道線蟲蟲卵轉(zhuǎn)陰率、減少率分別98.5％和100％，驅(qū)殺效果與0.2mg/kg劑量組1％伊維菌素注射液相當(dāng)，說明該制劑驅(qū)殺活性高，驅(qū)殺綿羊消化道線蟲的效果優(yōu)于1％伊維菌素注射劑。

在治療豬疥癬的試驗(yàn)中顯示，劑量為0.3mg/kg伊維菌素納米乳組療效顯著高于對藥物照組療效，給藥后第14、21、28d均查到活蟲體，蟲體轉(zhuǎn)陰率為100％。而劑量為0.075mg/kg伊維菌素納米乳組療效也比藥物對照組略高。而且一次用藥，藥效持續(xù)期可達(dá)28天以上。這是因?yàn)榧{米乳注射進(jìn)入血液后，藥物需要經(jīng)過一個(gè)從納米乳內(nèi)部向介質(zhì)轉(zhuǎn)移的再分配過程，從而延長了藥物的釋放，提高了藥物的生物利用度，增加了藥效。

牛皮蠅蛆病是一種對養(yǎng)牛業(yè)危害嚴(yán)重國際性寄生蟲病。我國牛皮蠅病主要分布在東北、華北、西北等地，在流行區(qū)感染率可達(dá)100％。于每年9-10月間采取1％伊維菌素皮下注射方法是防治本病的有效方法之一。本試驗(yàn)中a組、b組、c組的感染率均為0，而d組和對照組感染率和瘤皰數(shù)分別為14％和5.5個(gè)/頭、8個(gè)/頭和46.5％，說明伊維菌素對該病防治效果確實(shí)，也說明納米乳劑比常規(guī)注射劑效果更優(yōu)。

在臨床對家畜用藥的過程中，伊納乳注射劑對畜體的刺激性遠(yuǎn)低于1％伊維菌素注射劑。注射時(shí)家畜表現(xiàn)非常安靜，注射后無腫脹、發(fā)炎情況發(fā)生。將劑量加至常規(guī)劑量的5倍，也未發(fā)生藥物中毒現(xiàn)象。對孕畜也非常安全。