本發(fā)明涉及生物提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種核桃鞣質(zhì)的制備方法。

背景技術(shù)：

核桃為胡桃科胡桃屬植物，全世界均有分布。核桃青皮為核桃未成熟時(shí)外部的一層綠色果皮，隨著核桃成熟，青果皮會(huì)逐漸變黑。長(zhǎng)久以來(lái)都被視為廢物而拋棄，不但污染環(huán)境，而且浪費(fèi)資源。

核桃青皮辛苦澀，有毒，微寒，具有清熱、解毒、明目和抗腫瘤的作用?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，核桃青皮中主要含有黃酮、萘醌、多酚、脂肪酸及多糖等化合物。鞣質(zhì)是一類(lèi)結(jié)構(gòu)復(fù)雜的水溶性酚類(lèi)化合物，具有較好的抗氧化、抗菌、抗病毒、抗腫瘤等作用?，F(xiàn)在較少有報(bào)道從青皮中提取鞣質(zhì)的文獻(xiàn)，僅少有報(bào)道采用甲醇提取，或酶解提取的方式，存在得率低，鞣質(zhì)純度低等缺點(diǎn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種鞣質(zhì)純度高的核桃鞣質(zhì)的制備方法。

為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：

一種核桃鞣質(zhì)的制備方法，包括以下步驟：取新鮮核桃青皮，置于-30℃～-25℃的條件下放置2～4小時(shí)，然后再置于1℃～3℃的條件下放置1～2小時(shí)，粗碎，加入石油醚浸泡1～2小時(shí)，去除浸泡液，得青皮中間體，加入純凈水提取，過(guò)濾，濃縮，干燥，得水提取物；將所述水提取物上樣于hpd-300型大孔吸附樹(shù)脂，用60％～70％的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮干燥。

作為優(yōu)選，所述石油醚的加入量為所述核桃青皮重量的2～3倍重量。

作為優(yōu)選，每次所述提取時(shí)，純凈水的加入量為所述青皮中間體的4～10倍重量。

作為優(yōu)選，所述提取的次數(shù)為1～5次，每次提取的時(shí)間為1～5小時(shí)。

作為優(yōu)選，所述提取的溫度為60℃～90℃。

本發(fā)明具有以下技術(shù)優(yōu)勢(shì)：

采用新鮮青皮經(jīng)冷凍后，能將青皮中的細(xì)胞液冷凍形成冰晶，刺破細(xì)胞壁，再提高溫度放置，利于提高得率，用石油醚去除極性小的雜質(zhì)，利于純化，再用水提取，上樣于hpd-300型大孔吸附樹(shù)脂，能將核桃青皮中的鞣質(zhì)更好地提取出，產(chǎn)品得率高，為0.58g/100g以上，所得鞣質(zhì)純度高，經(jīng)檢測(cè)，含量高于76.4％。相比青皮原料中的鞣質(zhì)含量為1.86％左右，取得了顯著的進(jìn)步。

具體實(shí)施方式

下面對(duì)本發(fā)明中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明的其中的幾個(gè)實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。基于本發(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。

實(shí)施例1

一種核桃鞣質(zhì)的制備方法，包括以下步驟：取新鮮核桃青皮，置于-28℃的條件下放置3小時(shí)，然后再置于2℃的條件下放置2小時(shí)，粗碎，加入石油醚浸泡2小時(shí)，去除浸泡液，得青皮中間體，加入純凈水提取，過(guò)濾，濃縮，干燥，得水提取物；將所述水提取物上樣于hpd-300型大孔吸附樹(shù)脂，用65％的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮干燥。

其中，石油醚的加入量為所述核桃青皮重量的3倍重量。

每次所述提取時(shí)，純凈水的加入量為所述青皮中間體的8倍重量。所述提取的次數(shù)為3次，每次提取的時(shí)間為3小時(shí)。所述提取的溫度為80℃。

產(chǎn)品得率為0.68g/100g，鞣質(zhì)含量79.1％，純度高。

實(shí)施例2

一種核桃鞣質(zhì)的制備方法，包括以下步驟：取新鮮核桃青皮，置于-25℃的條件下放置4小時(shí)，然后再置于3℃的條件下放置2小時(shí)，粗碎，加入石油醚浸泡2小時(shí)，去除浸泡液，得青皮中間體，加入純凈水提取，過(guò)濾，濃縮，干燥，得水提取物；將所述水提取物上樣于hpd-300型大孔吸附樹(shù)脂，用70％的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮干燥。

其中，石油醚的加入量為所述核桃青皮重量的3倍重量。

每次所述提取時(shí)，純凈水的加入量為所述青皮中間體的10倍重量。所述提取的次數(shù)為5次，每次提取的時(shí)間為5小時(shí)。所述提取的溫度為90℃。

產(chǎn)品得率為0.58g/100g，鞣質(zhì)含量76.4％，純度高。

實(shí)施例3

一種核桃鞣質(zhì)的制備方法，包括以下步驟：取新鮮核桃青皮，置于-30℃的條件下放置2小時(shí)，然后再置于1℃的條件下放置1小時(shí)，粗碎，加入石油醚浸泡1小時(shí)，去除浸泡液，得青皮中間體，加入純凈水提取，過(guò)濾，濃縮，干燥，得水提取物；將所述水提取物上樣于hpd-300型大孔吸附樹(shù)脂，用60％的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮干燥。

其中，石油醚的加入量為所述核桃青皮重量的2倍重量。

每次所述提取時(shí)，純凈水的加入量為所述青皮中間體的4倍重量。所述提取的次數(shù)為1次，提取的時(shí)間為1小時(shí)。所述提取的溫度為60℃。

產(chǎn)品得率為0.61g/100g，鞣質(zhì)含量78.6％，純度高。

實(shí)施例4

一種核桃鞣質(zhì)的制備方法，包括以下步驟：取新鮮核桃青皮，置于-30℃的條件下放置4小時(shí)，然后再置于3℃的條件下放置2小時(shí)，粗碎，加入石油醚浸泡1小時(shí)，去除浸泡液，得青皮中間體，加入純凈水提取，過(guò)濾，濃縮，干燥，得水提取物；將所述水提取物上樣于hpd-300型大孔吸附樹(shù)脂，用70％的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮干燥。

其中，石油醚的加入量為所述核桃青皮重量的2倍重量。

每次所述提取時(shí)，純凈水的加入量為所述青皮中間體的6倍重量。所述提取的次數(shù)為2次，每次提取的時(shí)間為2小時(shí)。所述提取的溫度為80℃。

產(chǎn)品得率為0.63g/100g，鞣質(zhì)含量77.2％，純度高。

對(duì)比例1

一種核桃鞣質(zhì)的制備方法，包括以下步驟：取新鮮核桃青皮粗碎，加入石油醚浸泡2小時(shí)，去除浸泡液，得青皮中間體，加入純凈水提取，過(guò)濾，濃縮，干燥，得水提取物；將所述水提取物上樣于hpd-300型大孔吸附樹(shù)脂，用65％的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮干燥。

其中，石油醚的加入量為所述核桃青皮重量的3倍重量。

每次所述提取時(shí)，純凈水的加入量為所述青皮中間體的8倍重量。所述提取的次數(shù)為3次，每次提取的時(shí)間為3小時(shí)。所述提取的溫度為80℃。

產(chǎn)品得率為0.39g/100g，鞣質(zhì)含量40.2％。

對(duì)比例2

一種核桃鞣質(zhì)的制備方法，包括以下步驟：取新鮮核桃青皮，置于-28℃的條件下放置3小時(shí)，然后再置于2℃的條件下放置2小時(shí)，粗碎，加入純凈水提取，過(guò)濾，濃縮，干燥，得水提取物；將所述水提取物上樣于hpd-300型大孔吸附樹(shù)脂，用65％的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮干燥。

其中，每次所述提取時(shí)，純凈水的加入量為所述青皮中間體的8倍重量。所述提取的次數(shù)為3次，每次提取的時(shí)間為3小時(shí)。所述提取的溫度為80℃。

產(chǎn)品得率為0.52g/100g，鞣質(zhì)含量47.9％。

對(duì)比例3

一種核桃鞣質(zhì)的制備方法，包括以下步驟：取新鮮核桃青皮，置于-28℃的條件下放置3小時(shí)，然后再置于2℃的條件下放置2小時(shí)，粗碎，加入石油醚浸泡2小時(shí)，去除浸泡液，得青皮中間體，加入純凈水提取，過(guò)濾，濃縮，干燥，得水提取物；將所述水提取物上樣于d-101型大孔吸附樹(shù)脂，用65％的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮干燥。

其中，石油醚的加入量為所述核桃青皮重量的3倍重量。

每次所述提取時(shí)，純凈水的加入量為所述青皮中間體的8倍重量。所述提取的次數(shù)為3次，每次提取的時(shí)間為3小時(shí)。所述提取的溫度為80℃。

產(chǎn)品得率為0.55g/100g，鞣質(zhì)含量53.7％。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。