本發(fā)明涉及一種能使毛囊干細(xì)胞生長受到抑制，從而使毛囊停留在休止期狀態(tài)，而不進(jìn)入生長期，實(shí)現(xiàn)抑制毛發(fā)生長的目的一種毛發(fā)生長抑制劑及其用途，屬于美容和保健技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

毛囊在胚胎發(fā)育過程中形成，出生后經(jīng)歷增長（anagen），退行（catagen）和休止（telogen）的反復(fù)周期循環(huán)過程。在生長期，毛母細(xì)胞（matrix）迅速增殖，分化成毛干及毛囊內(nèi)根鞘,退行期毛囊的隆凸（bulge）部位以下結(jié)構(gòu)凋亡消失，毛乳頭（dermalpapilla,dp）向上移位，當(dāng)毛發(fā)進(jìn)入休止期后毛乳頭到達(dá)隆凸部位，直到下一個生長期后毛乳頭隨著新生成的毛囊胚芽（germ）向下移動。毛囊發(fā)育和周期性再生是錯綜復(fù)雜的分子調(diào)控過程，通過控制復(fù)雜的分子網(wǎng)絡(luò)，以及不同的信號通路，以達(dá)到促進(jìn)毛囊生長因子和抑制毛囊生長因子的嚴(yán)格平衡，并傳遞信息到毛囊和周圍組織中，從而決定毛囊發(fā)育啟動或休止及毛囊細(xì)胞有絲分裂速率的調(diào)整。作為功能性微型器官，毛囊中存在多種多能干細(xì)胞，由于其易于觀察、分析和分離的優(yōu)點(diǎn)，毛囊干細(xì)胞已被當(dāng)作理想的研究干細(xì)胞機(jī)制調(diào)控模型而被深入的研究。在過去的幾十年中，基因工程小鼠模型已被廣泛的用于研究毛囊形態(tài)發(fā)生并取得了顯著的進(jìn)步，鑒定了很多調(diào)整毛囊發(fā)育的關(guān)鍵因子和信號通路。

nf-κb為一個轉(zhuǎn)錄因子蛋白家族，包括5個亞單位：rel(crel)、p65(rela,nf-κb3)、relb和p50(nf-κb1)、p52(nf-κb2)。p50和p52只有rhd而缺乏td，因此，p50和p52同源二聚體并不能激活基因轉(zhuǎn)錄，而是作為一種抑制分子存在，它們在細(xì)胞內(nèi)通常各自以其前體p105和p100的形式存在。兩個亞基形成的同源和/或異源二聚體與靶基因上特定的序列（-κb位點(diǎn)）結(jié)合調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄，不同的nf-κb二聚體在選擇結(jié)合序列時可能略有差異，這是nf-κb通過不同的二聚體的形式對不同基因的表達(dá)進(jìn)行精細(xì)調(diào)節(jié)的一種方式。最常見的nf-κb二聚體是p65與p50組成的異二聚體。nf-κb的抑制單位iκb通過其c末端特定的錨蛋白重復(fù)序列(ankyrinrepeatmotif)與nf-κb結(jié)合，并覆蓋nls阻止nf-κb向細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)移。在靜息的細(xì)胞中，nf-κb和iκb形成復(fù)合體，以無活性形式存在于胞漿中。當(dāng)細(xì)胞受細(xì)胞外信號刺激后，iκb激酶復(fù)合體（iκbkinase,ikk）活化將iκb磷酸化，使nf-κb暴露核定位位點(diǎn)。游離的nf-κb迅速移位到細(xì)胞核，與特異性κb序列結(jié)合，誘導(dǎo)相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄。

多毛癥或毛發(fā)過多是指體表毛發(fā)增多，大多數(shù)有家屬性毛發(fā)過多史，無男性化的表現(xiàn)，除了影響美觀外不需治療。而多毛癥是指女性有些部位的毛發(fā)過量生長，一般出現(xiàn)在上下肢、面部；分布形式有男性傾向，下頜、嘴唇上方、耳前、前額、后頸部毛發(fā)增多，乳頭周圍、臍孔下正中線，又伴有男性化現(xiàn)象，如有喉結(jié)出現(xiàn)，聲調(diào)低沉及陰蒂肥大等，除了影響美觀外，還需要結(jié)合其他治療給予治療。同時隨著美容領(lǐng)域的不斷發(fā)展，人們對體表的毛發(fā)有了新的要求，特別是一些年輕女性，很希望能買到某種藥物，能夠抑制或去除身體特定部位毛發(fā)生長，達(dá)到美觀、漂亮或顯示年輕的目的。為美容和保健界的科技工作者提出了更高更新的課題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為適應(yīng)美容、保健界的新形勢，滿足不同人群、特別是一些年輕女性的迫切要求，本發(fā)明的目的是提供一種毛發(fā)生長抑制劑產(chǎn)品的技術(shù)方案，本發(fā)明的另一個目的是提供這種抑制劑產(chǎn)品的用途。

為解決其技術(shù)問題，本發(fā)明人在自己的工作中，利用自己掌握的理論知識，通過長期的研究、分析和多次實(shí)驗，最后總結(jié)出一種能使毛囊干細(xì)胞生長受到抑制，從而使毛囊停留在休止期狀態(tài)，而不進(jìn)入生長期，實(shí)現(xiàn)抑制毛發(fā)生長的一種毛發(fā)生長抑制劑的技術(shù)方案，并實(shí)驗出這種抑制劑的用途，從而完成本發(fā)明，本技術(shù)方案的特點(diǎn)是：

1、該方法是通過皮膚涂抹一種小分子抑制劑，該小分子抑制劑通透皮吸收使毛囊干細(xì)胞生長受到抑制，從而使毛囊停留在休止期狀態(tài)，不進(jìn)入生長期，抑制毛發(fā)生長，而不破壞皮膚和毛囊結(jié)構(gòu)，實(shí)現(xiàn)抑制毛發(fā)生長的目的；

2、所述抑制劑是具有特異性抑制nf-kb蛋白活性的小分子抑制劑，包括qnz(evp4593)、姜黃色素（curcumin）、對氨基水楊酸鈉（sodium4-aminosalicylate）、jsh-23、柳氮磺胺吡啶（sulfasalazine）、gsk583或咖啡酸苯酯（caffeicacidphenethylester）的小分子的任意一種；

3、所述抑制劑的使用方法是：是將所述小分子抑制劑和不同類型的透皮劑或載體混合，形成液體，乳劑或噴霧劑的不同類型形式，通過在皮膚患處涂抹或噴涂，使該抑制劑通透皮吸收抑制毛發(fā)生長，而不破壞皮膚和毛囊結(jié)構(gòu)，從而促進(jìn)該類小分子的吸收效率；

4、所述小分子抑制劑的使用濃度為其在細(xì)胞實(shí)驗中半抑制濃度（ic50）的10-100倍；

5、所述本方法的用途是：可以用于抑制身體局部如退部和腋窩部的毛發(fā)生長，也可以用于抑制多毛癥中的毛發(fā)過度生長；

6、本發(fā)明所述方法，可以保留毛囊正常結(jié)構(gòu)和功能，停止抑制處理后，毛囊可正常生長；

7、注意事項：各種小分子抑制劑的合成方法以scifinderscholar(ca)或者reaxys合成數(shù)據(jù)庫中的合成流程為準(zhǔn)。

本發(fā)明有以下實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著的進(jìn)步優(yōu)點(diǎn)：

1.通過涂抹小分子透皮吸收抑制毛囊生長，易吸收，操作簡單，

2.通過涂抹小分子抑制毛囊生長，而不破壞皮膚和毛囊結(jié)構(gòu)，

3.對于不同的人群可以選用不同的抑制劑型，

4.作用靶點(diǎn)明確，毒副作用小。

具體實(shí)施方式

下面詳細(xì)描述本發(fā)明的實(shí)施例，所述實(shí)施例是示例性的，僅用于解釋本發(fā)明，而不能理解為對本發(fā)明的限制。本申請的實(shí)施例中未注明具體技術(shù)或條件的，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻(xiàn)所描述的技術(shù)或條件或者按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市購獲得的常規(guī)產(chǎn)品。

實(shí)施例1

包含jsh-23小分子透皮吸收乳劑的制作方法如下：

1.儀器：

馬頭牌jyt-1架盤藥物天平（上海醫(yī)用激光儀器廠）；fa2104a電子天平（上海精天電子儀器有限公司）；hh-w600數(shù)顯三用恒溫水箱（江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司）

2.試藥：

水楊酸；白凡士林（山東利爾康消毒科技有限公司紅酚公司新鄉(xiāng)市恒豐生物科技有限公司）；羥苯乙脂（成都市科龍化工試劑廠分析純）；羧甲基纖維素鈉（成都市科龍化工試劑廠實(shí)驗試劑）；丙三醇（成都市科龍化工試劑廠分析純）；十八醇；十二烷基硫酸鈉；単硬脂酸甘油酯（成都市克隆化工廠分析純）；司盤40（批號20040820化學(xué)純）；液體石蠟（成都市克隆化工廠）

3.制作方法

處方：

jsh-23小分子：2mg

水楊酸0.5g

羥甲基纖維素鈉0.6g

甘油1.0g

羥苯乙酯0.05g

純化水8.4ml

制法：稱取羧甲基纖維素鈉0.506g置于研缽中，加入甘油研勻，然后邊研邊加

入羥苯乙酯的乙醇溶液，待溶脹后研勻，即得水溶性基質(zhì)；

取水楊酸置于軟膏板上或研缽中，分次加入制得的水溶性基質(zhì)研勻，制成10g。

實(shí)施例2

jsh-23抑制小鼠生休止期毛囊進(jìn)入生長期的具體過程如下：

1.將7-9周的小鼠用戊巴比妥鈉麻醉，

2.用脫毛膏將小鼠背部的毛發(fā)去除干凈，

3.將jsh-23抑制劑配制成終濃度為0.5mm的透皮吸收軟膏,然后將此乳膏均勻的涂抹到小鼠的背部，涂抹劑量為1g/只小鼠，每兩天涂抹一次。對照組為沒有jsh-23抑制劑的透皮吸收軟膏，

4.實(shí)驗結(jié)果：對照組小鼠脫毛以后10天（d10）有大量的毛發(fā)進(jìn)入生長期，而抑制劑處理組中，脫毛后10天（d10）沒有毛發(fā)長出。

實(shí)施例3

分析jsh-23抑制劑處理組的小鼠毛囊生長周期和毛囊干細(xì)胞增殖情況：

1.分別取jsh-23抑制劑處理組和對照組的皮膚組織，

2.經(jīng)過4%pfa固定和蔗糖脫水后進(jìn)行組織切片，

3.免疫熒光染色顯示對照組小鼠脫毛以后10天毛囊進(jìn)入生長期，而抑制劑處理組中，脫毛后10天毛囊人處于休止期，

實(shí)驗結(jié)果：免疫熒光染色細(xì)胞增殖標(biāo)記ki67顯示，對照組小鼠脫毛以后10天毛囊毛囊干細(xì)胞大量增殖，而抑制劑處理組中，脫毛后10天毛囊干細(xì)胞極少增殖，處于休止期。