本發(fā)明涉及檢測試劑盒領(lǐng)域，具體涉及一種嗅覺障礙檢測試劑盒及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

帕金森病(parkinson’sdisease,pd)及阿爾茨海默病(alzheimer’sdisease,ad)是老年人常見的慢性進(jìn)展性神經(jīng)系統(tǒng)疾病。帕金森病的其臨床特點(diǎn)為以運(yùn)動癥狀(靜止性震顫、運(yùn)動遲緩、肌僵直)為主，在運(yùn)動癥狀出現(xiàn)前、后伴有大量的非運(yùn)動癥狀(嗅覺減退、便秘、抑郁、睡眠障礙)和后期的并發(fā)癥狀(如平衡障礙、跌倒、凍結(jié)現(xiàn)象、吞咽困難、語言障礙等)。阿爾茨海默病(俗稱：老年癡呆)主要以認(rèn)知功能障礙、記憶力損害為主要表現(xiàn)，在該疾病早期階段，即輕度認(rèn)知障礙(mildcognitiveimpairment，mci)階段也可出現(xiàn)與認(rèn)知功能減退相關(guān)的嗅覺障礙的臨床表現(xiàn)。

隨著人口老年化的加速，pd與ad已成為我國目前乃至今后數(shù)十年所面臨的重大健康、經(jīng)濟(jì)和社會問題。調(diào)查顯示60歲以上人口中pd的患病率約為1.7～2％，ad的患病率約為3-7％，由于中國人口基數(shù)大，目前全世界接近50％的pd及ad患者在中國。僅以帕金森病為例：研究推測在2030年中國將有500萬以上的pd患者，約占全世界總患者數(shù)的57％。由于pd的病程長，病變呈進(jìn)行性發(fā)展，沒有有效的遏制疾病進(jìn)展的方法，而且致殘率高、中晚期病人多，治療效果差，治療費(fèi)用昂貴，給家庭和社會帶來沉重的精神和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。

眾多研究發(fā)現(xiàn)，帕金森病發(fā)病前4年即可出現(xiàn)顯著的嗅覺減退，并且存在嗅覺減退的正常老年人在4年內(nèi)患帕金森病風(fēng)險增加約5倍，其中有10％的存在嗅覺減退的老年人群可在2年內(nèi)發(fā)展為帕金森病患者。因此，嗅覺減退被認(rèn)為是帕金森病臨床前期的重要癥狀。國際運(yùn)動障礙病協(xié)會(movementdisorderssociety；mds)從2015年開始將嗅覺減退列入帕金森病診斷標(biāo)準(zhǔn)中，并且也在帕金森病前驅(qū)期研究標(biāo)準(zhǔn)中明確指出嗅覺減退對于帕金森病的預(yù)警價值，所以嗅覺檢查不僅對帕金森病患者的準(zhǔn)確診斷很重要，同時可以有助于在健康老年人中篩查早期帕金森病的高危人群。

老年輕度認(rèn)知障礙(mci)是一種臨床表現(xiàn)，是介于正常衰老和阿爾茨海默病(ad)之間的一種中間過渡狀態(tài)，是ad的早期階段。mci患者以每年10％～l5％的速度發(fā)展為ad，是正常老人發(fā)生ad概率的10倍。迄今為止，由于對ad尚無有效的治療手段，因而對mci這一特殊階段的研究有助于辨別癡呆的高危人群，為老年期癡呆尋找最佳的干預(yù)時間。近年來，日益增多的證據(jù)表明，嗅覺障礙與ad密切相關(guān)，而且可能是最早出現(xiàn)的癥狀之一。嗅覺中樞位于顳葉、杏仁核及梨狀區(qū)皮質(zhì)(包括海馬旁回前部、鉤及其附近的皮質(zhì))，這正是ad早期病理改變所在區(qū)域。有學(xué)者提出，嗅覺障礙是早期診斷mci及ad的指標(biāo)之一。國內(nèi)外普遍研究認(rèn)為嗅覺障礙不僅在ad的早期即已存在，而且隨著病程進(jìn)展逐漸加重，嗅覺障礙的程度與癡呆嚴(yán)重度成正比，而且部分研究認(rèn)為嗅覺通路有可能成為有效控制和治療ad/mci的給藥通路。所以嗅覺檢查對于阿爾茨海默病早期即mci階段具有重要的診斷和篩查價值。

帕金森病和阿爾茨海默病的嗅覺檢測方法比較有限，國外的方法主要有upsit法和sniffin’sticks嗅棒法。前者主要采用氣味納米涂層，通過鉛筆劃擦涂層釋放氣味，可以用于嗅覺識別能力的測試。該方法基本做到操作簡便易行，患者可以進(jìn)行自我評估，因此被世界各國廣泛應(yīng)用于帕金森病和阿爾茨海默病的臨床和社區(qū)人群的嗅覺檢查。upsit共有40種氣味，其簡化版本b-sit則有12種氣味。但是upsit這種方法尚缺乏中國人群中的研究報道，宣武醫(yī)院曹明團(tuán)隊(duì)曾使用該方法進(jìn)行中國人群帕金森病患者的嗅覺測試，其中部分氣味并不為中國老年人群所熟悉，如：比薩味，巧克力味等，并且該方法的敏感性指標(biāo)也不夠理想。sniffin’sticks嗅棒法包含嗅覺識別閾、嗅覺察覺閾和嗅覺辨別閾三種測試，可以較完整的對嗅覺功能進(jìn)行評估，在中國少數(shù)的嗅覺測試研究中，該方法曾被用于帕金森病患者的嗅覺篩查，研究結(jié)果顯示此種方法能夠較有效的作為帕金森病患者嗅覺障礙的檢查工具。但是，該方法的測試工具體積較大，測試采用液體試劑形式，不利于攜帶和儲存。并且，測試過程必須有專業(yè)人員指導(dǎo)受試者使用，不能進(jìn)行受試者自我評估，因此不利于廣泛的篩查工作。

我國中國科學(xué)院半導(dǎo)體研究所研制的“五味試嗅液”法，曾經(jīng)通過臨床研究證實(shí)該方法可以用于帕金森病和阿爾茨海默病患者的嗅覺檢查，但是該方法存在一些不足，例如：嗅覺測試液采用玻璃瓶裝，容易破損、不易攜帶；氣味有一定的揮發(fā)性，存放不便；測試所選氣味僅5種，并且選擇之初均沒有通過人群熟悉度調(diào)查；正常值范圍的確定僅針對18-25歲青年人群的研究數(shù)據(jù)確定，沒有對正常老年人嗅覺功能進(jìn)行設(shè)定等問題。因此，國內(nèi)尚缺乏氣味能夠被中國人群熟悉，操作簡便，存放方便，容易攜帶的針對帕金森病和阿爾茨海默病患者的一種嗅覺檢測工具。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種用于輔助診斷帕金森病和阿爾茨海默病的嗅覺障礙檢測試劑盒，使得所述試劑盒操作簡便、容易攜帶，不易揮發(fā)變質(zhì)，并且具備較佳的嗅覺測試效果，例如氣味的釋放效果、檢測敏感性、檢測特異性、保存期限等。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

一種嗅覺障礙檢測試劑盒，包括一個或多個由固相溶劑、賦形物和氣味香精組成的固體氣味塊；所述固相溶劑為常溫下為固體，加熱后為液體的能夠溶解香精的溶劑。其中，所述固相溶劑優(yōu)選為常溫為固體，80℃加熱變?yōu)橐后w；而非固相溶劑指常溫為液體，或者加熱(如80℃)后仍為固體的溶劑均不符合本發(fā)明的要求，無法達(dá)到本發(fā)明的預(yù)期目的。

針對目前用于輔助診斷帕金森病和阿爾茨海默病的嗅覺障礙檢測產(chǎn)品均為液體形式產(chǎn)品，本發(fā)明采用固體形式，由固相溶劑、賦形物和氣味香精組成的固體氣味塊作為檢測試劑盒中關(guān)鍵組分-氣味釋放物，使得所述試劑盒操作簡便、容易攜帶，不易揮發(fā)變質(zhì)，并在一定程度上提高了嗅覺測試效果。

作為優(yōu)選，本發(fā)明所述固相溶劑為脂溶性溶劑，其常溫為固體，80℃加熱變?yōu)橐后w，在該類溶劑下，試劑盒中的固體氣味塊能夠達(dá)到較佳的氣味釋放效果和保存效果。在本發(fā)明具體實(shí)施方式中，所述脂溶性溶劑選自棕櫚酸、硬脂酸、蜂蠟、微晶蠟、石蠟、油墨中的一種或兩種以上。

賦形物除了用于對固相溶劑的力學(xué)支撐外，對于氣味的釋放效果也具備影響，在本發(fā)明具體實(shí)施方式中，所述賦形物選自棉片(如聚丙烯棉片、聚苯乙烯棉片或聚氨酯棉片)、濾紙、吸油棉中的一種或兩種以上。

作為優(yōu)選，所述固相溶劑和氣味香精的質(zhì)量比為10:1-1000:1。

為了能夠?qū)①x形物的支撐作用以及與固相溶劑配合釋放氣味效果達(dá)到最佳，在本發(fā)明具體實(shí)施過程中，所述賦形物被固相溶劑和氣味香精的混合物包裹，形成固體氣味塊。

現(xiàn)有相關(guān)的檢測產(chǎn)品對于氣味的選擇缺乏合理性，致使不能夠全面準(zhǔn)確反映受試者嗅覺功能，特別是老年人的嗅覺功能，本發(fā)明通過氣味人群調(diào)查，挑選出12種人群熟悉度高、便于分辨的氣味，香蕉味，蘋果味，大料(八角茴香)，玫瑰味，菠蘿味，檸檬味，牛奶味，薄荷味，樹脂(松香)味，樟腦味，木頭味，大蒜味；為了在實(shí)際檢測過程中能夠?qū)⑦@些氣味釋放效果發(fā)揮至最佳，本發(fā)明針對這些氣味選擇了與固體氣味塊更匹配的香精物質(zhì)，選自乙酸葉醇酯、蘋果酯、大茴香醛、玫瑰醇、丁酸乙酯、檸檬醛、2,3－丁二酮、薄荷醇、桂酸乙酯、乙酸異龍腦酯、麝香t、大蒜油中的一種或兩種以上。通常為了更加準(zhǔn)確的檢測，12種氣味通常全部采用。

上述12種氣味香精中，固相溶劑與香精的質(zhì)量比可以是任何適宜的比例，而在本發(fā)明具體實(shí)施中，固相溶劑與乙酸異龍腦酯質(zhì)量比可以是10:1，固相溶劑與乙酸葉醇酯、蘋果酯、玫瑰醇、檸檬醛、2,3－丁二酮、薄荷醇、桂酸乙酯的質(zhì)量比均可以是100:1，固相溶劑與大茴香醛、丁酸乙酯、麝香t、大蒜油的質(zhì)量比均可以是1000:1。

除了關(guān)鍵的固體氣味塊，本發(fā)明所述試劑盒還包括帕金森病/阿爾茨海默病嗅覺障礙輔助診斷卡和/或氣味選擇卡；其中，帕金森病/阿爾茨海默病嗅覺障礙輔助診斷卡也稱為個人信息卡，可包含受試者姓名，性別，年齡，病史(主要有無鼻部疾病，過敏史，近2周內(nèi)感冒病史，有無服用影響嗅覺的藥物，有無鼻部外傷手術(shù)史等)，吸煙史，現(xiàn)有產(chǎn)品以及本發(fā)明產(chǎn)品診斷結(jié)果等，具體形式可參考表1，表1只是作為舉例說明，并不會將本發(fā)明試劑盒僅限定于此種形式；

表1帕金森病/阿爾茨海默病嗅覺障礙輔助診斷卡

所述氣味選擇卡為針對所選擇的氣味制定的包含正確選項(xiàng)和非正確選項(xiàng)的選項(xiàng)卡，具體形式可參考表2，表2只是作為舉例說明，并不會將本發(fā)明試劑盒僅限定于此種形式；

表2氣味選擇卡

按照上述本發(fā)明提供的試劑盒，嗅覺障礙檢測的流程一般為：(1)首先受試者填寫個人信息卡；(2)依次或隨機(jī)選擇其中一個固體氣味塊，放在受試者鼻前3-5cm處，進(jìn)行測試，不限制受試者嗅聞的時間；(3)受試者結(jié)束嗅聞后，查找氣味選項(xiàng)卡中對應(yīng)固體氣味塊標(biāo)號的題干，從4個備選答案中進(jìn)行選擇(每個題干受試者必須給出答案)；(4)完成選擇后，棄置固體氣味塊，間隔15秒后(可以理解為待上一個氣味在鼻部作用消失)，進(jìn)行下一個嗅覺測試塊的測試；(5)檢查結(jié)果。要求所有氣味必須全部完成，所有問題必須做出選擇，計算總分作為測試結(jié)果，滿分12分。

評分標(biāo)準(zhǔn)為每題答對得1分，答錯得0分，總分12分。診斷標(biāo)準(zhǔn)為得分高于8分則診斷為嗅覺正常，得分低于8分診斷為嗅覺障礙，可以作為帕金森病確診的支持標(biāo)準(zhǔn)之一，同時也可以作為阿爾茲海默病風(fēng)險預(yù)測的輔助依據(jù)，并且?guī)啄陜?nèi)進(jìn)展為帕金森病或阿爾茨海默病的風(fēng)險高于嗅覺正常的測試者。

經(jīng)過對比試驗(yàn)驗(yàn)證，不同固相溶劑和賦形物均能夠影響氣味的釋放效果和保存效果，在本發(fā)明所限定的脂類溶劑范圍下，氣味的釋放效果最佳，其中以聚丙烯棉片+棕櫚酸/石蠟/硬脂酸/微晶蠟/蜂蠟、吸油棉+棕櫚酸/石蠟/硬脂酸/微晶蠟/蜂蠟、聚苯乙烯棉片+棕櫚酸/石蠟/硬脂酸/微晶蠟/蜂蠟、聚氨酯棉片+棕櫚酸/石蠟/硬脂酸/微晶蠟/蜂蠟效果較佳，同時考慮到賦形物本身的支撐作用，以石蠟+棉片組合為最佳。

此外，為了驗(yàn)證本發(fā)明所述試劑盒是否具有較高的敏感性和特異性，以及ppv(陽性預(yù)測值)和npv(陰性預(yù)測值)等性能指標(biāo)，分別采用本發(fā)明所述試劑盒和美國b-sit方法對帕金森病患者組和健康對照組進(jìn)行嗅覺測試，結(jié)果顯示本發(fā)明所述試劑盒的敏感性和特異性可以分別達(dá)到75.0％和86.7％，陽性預(yù)測值ppv和陰性預(yù)測值npv可以分別達(dá)到86.7％和75.0％。與美國b-sit產(chǎn)品比較，本發(fā)明所述試劑盒對帕金森病診斷可以達(dá)到相同效果，但特異性、陽性預(yù)測值及陰性預(yù)測值更優(yōu)。同時，也說明本發(fā)明試劑盒對于嗅覺障礙的檢測具有更好的效果，對于同屬于神經(jīng)退行性疾病并且也具備嗅覺減退病理性改變的阿爾茨海默病，其同樣適用并具有預(yù)期較好的效果。

基于上述本發(fā)明產(chǎn)品優(yōu)異的技術(shù)效果，本發(fā)明提出了所述試劑盒在制備輔助診斷帕金森病和阿爾茨海默病檢測產(chǎn)品中的應(yīng)用。

同時，本發(fā)明還對應(yīng)提供了所述試劑盒的制備方法，包括：

將固相溶劑加熱融化后，加入氣味香精混勻，接著將賦形物浸入至固相溶劑和氣味香精的混合物中浸泡，然后取出賦形物晾干固化，獲得所述試劑盒。其中，賦形物的規(guī)格大小根據(jù)需求可具體調(diào)整，固相溶劑和氣味香精的的質(zhì)量比為10:1-1000:1。

更為具體地，固相溶劑稱取10g，放入50ml離心管中，80℃水浴鍋中孵育直至完全融化，加入0.01-1g氣味香精，輕微搖晃離心管，使得氣味香精均勻溶解；

將賦形物分別裁切成20*10mm規(guī)格的片狀，加入離心管中，浸泡5min后用鑷子取出，置于托盤上晾干。

制備完成后，固體氣味塊可進(jìn)行包裝和編號，便于保存和對應(yīng)于氣味選項(xiàng)卡，例如外包裝可包含pvc塑料底板和易撕密封薄膜，外觀設(shè)計為長方形，設(shè)有一個凹陷的氣味槽，每個槽內(nèi)可放置一個固體氣味塊，每個氣味槽表面可通過易撕密封薄膜封閉，上下兩端預(yù)留一定的區(qū)域，方便使用過程中撕開密封薄膜暴露氣味槽。

由以上技術(shù)方案可知，本發(fā)明試劑盒采用固體材料作為氣味載體并適配特定香精成分，避免了類似sniffin’ssticks和五味試嗅液方法的液體試劑，可以減少液體的遺撒、容器破損、污染環(huán)境和揮發(fā)的風(fēng)險，同時保證固體氣味塊具備較佳的嗅覺測試效果，相比同類的b-sit方法具有更優(yōu)秀的性能指標(biāo)，特別適合中國人群，可應(yīng)用于帕金森病和阿爾茨海默病的輔助診斷中以及相關(guān)檢測產(chǎn)品的制備中。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明公開了一種嗅覺障礙檢測試劑盒及其應(yīng)用，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改進(jìn)工藝參數(shù)實(shí)現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明所述試劑盒產(chǎn)品及其制備方法和應(yīng)用已經(jīng)通過較佳實(shí)施例進(jìn)行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本發(fā)明內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)對本文所述的分離純化方法進(jìn)行改動或適當(dāng)變更與組合，來實(shí)現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。

以下就本發(fā)明所提供的一種嗅覺障礙檢測試劑盒及其應(yīng)用做進(jìn)一步說明。

實(shí)施例1：本發(fā)明試劑盒固體氣味塊的制備

固相溶劑稱取10g，放入50ml離心管中，80℃水浴鍋中孵育直至完全融化，加入0.1g氣味香精，輕微搖晃離心管，使得氣味香精均勻溶解；

將聚丙烯棉片分別裁切成20*10mm規(guī)格的片狀，加入離心管中，浸泡5min后用鑷子取出，置于托盤上晾干。

其中，固相溶劑為棕櫚酸、硬脂酸、石蠟、蜂蠟、微晶蠟或油墨；所述氣味香精為乙酸葉醇酯、蘋果酯、大茴香醛、玫瑰醇、丁酸乙酯、檸檬醛、2,3－丁二酮、薄荷醇、桂酸乙酯、乙酸異龍腦酯、麝香t或大蒜油。

實(shí)施例2：本發(fā)明試劑盒固體氣味塊的制備

固相溶劑稱取10g，放入50ml離心管中，80℃水浴鍋中孵育直至完全融化，加入1g氣味香精，輕微搖晃離心管，使得氣味香精均勻溶解；

將濾紙分別裁切成20*10mm規(guī)格的片狀，加入離心管中，浸泡5min后用鑷子取出，置于托盤上晾干。

其中，固相溶劑為棕櫚酸、硬脂酸、石蠟、蜂蠟、微晶蠟或油墨；所述氣味香精為乙酸葉醇酯、蘋果酯、大茴香醛、玫瑰醇、丁酸乙酯、檸檬醛、2,3－丁二酮、薄荷醇、桂酸乙酯、乙酸異龍腦酯、麝香t或大蒜油。

實(shí)施例3：本發(fā)明試劑盒固體氣味塊的制備

固相溶劑稱取10g，放入50ml離心管中，80℃水浴鍋中孵育直至完全融化，加入0.01g氣味香精，輕微搖晃離心管，使得氣味香精均勻溶解；

將吸油棉分別裁切成20*10mm規(guī)格的片狀，加入離心管中，浸泡5min后用鑷子取出，置于托盤上晾干。

其中，固相溶劑為棕櫚酸、硬脂酸、石蠟、蜂蠟、微晶蠟或油墨；所述氣味香精為乙酸葉醇酯、蘋果酯、大茴香醛、玫瑰醇、丁酸乙酯、檸檬醛、2,3－丁二酮、薄荷醇、桂酸乙酯、乙酸異龍腦酯、麝香t或大蒜油。

實(shí)施例4：本發(fā)明所述試劑盒

(1)實(shí)施例1中以石蠟為固相溶劑制備的12種固體氣味塊、個人信息卡和氣味選項(xiàng)卡；

(2)實(shí)施例2中以棕櫚酸為固相溶劑制備的12種固體氣味塊、個人信息卡和氣味選項(xiàng)卡；

(3)實(shí)施例3中以硬脂酸為固相溶劑制備的12種固體氣味塊、個人信息卡和氣味選項(xiàng)卡；

(4)實(shí)施例1中以蜂蠟為固相溶劑制備的12種固體氣味塊、個人信息卡和氣味選項(xiàng)卡；

(5)實(shí)施例1中以微晶蠟為固相溶劑制備的12種固體氣味塊、個人信息卡和氣味選項(xiàng)卡；

實(shí)施例5：氣味釋放效果研究

1、固相脂溶性溶劑：豆蔻酸、硬脂酸、石蠟、蜂蠟、微晶蠟、棕櫚酸、單硬脂酸甘油酯；

2、固體氣味塊制備方法：參照實(shí)施例1制備方法，氣味香精均選擇乙酸葉醇酯；

3、氣相色譜質(zhì)譜儀檢測：

取固體氣味塊作為樣品加入頂空瓶中，氣相色譜質(zhì)譜儀檢測。

頂空進(jìn)樣器條件：加熱平衡溫度50℃，平衡時間4min，進(jìn)樣針溫度50℃，進(jìn)樣體積0.5ml。

氣相色譜條件：進(jìn)樣口溫度250℃。升溫程序：50℃保持1min，10℃/min的速率升至200℃，保持5min。

質(zhì)譜條件：電子轟擊(ei)離子源，離子源溫度230℃，離子化能量70ev。全掃描(scan)模式掃描，掃描范圍35amu～200amu。

4、研究方法：

使用gc-ms對各固體氣味塊進(jìn)行分析，通過乙酸葉醇酯出峰的峰面積來表征不同組合釋放氣味的能力，由于嗅覺測試產(chǎn)品需要通過釋放氣味使受試者嗅聞并判斷氣味種類，因此峰面積越高，釋放氣味能力越強(qiáng)，可以認(rèn)為嗅覺測試產(chǎn)品越優(yōu)秀，結(jié)果見表3。

表3不同固體氣味塊乙酸葉醇酯出峰的峰面積

上表結(jié)果顯示聚丙烯棉片+棕櫚酸/石蠟/硬脂酸/微晶蠟/蜂蠟、吸油棉+棕櫚酸/石蠟/硬脂酸/微晶蠟/蜂蠟、聚苯乙烯棉片+棕櫚酸/石蠟/硬脂酸/微晶蠟/蜂蠟、聚氨酯棉片+棕櫚酸/石蠟/硬脂酸/微晶蠟/蜂蠟組合具有較佳的峰面積，都可以作為固相溶劑+賦形物的備選，上述組合均具有較佳的氣味釋放效果。

石蠟的熔點(diǎn)較低，而硬脂酸的熔點(diǎn)接近80℃(12種香精中2,3-丁二酮的沸點(diǎn)僅88℃)，在生產(chǎn)過程中搖晃溶解香精時容易在管壁凝固，對生產(chǎn)有一定影響；另外吸油棉和棉片都是由多層纖維材質(zhì)構(gòu)成，但是吸油棉相比棉片構(gòu)造更為松散，在生產(chǎn)和使用過程中存在散落的風(fēng)險。此外，根據(jù)采用其他香精的試驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)，在上述組合形勢下，各其他香精的峰面積均在1.80e+09以上，而處于石蠟+棉片(包含表3中三種棉片)組合下，絕大多數(shù)香精都能夠達(dá)到最佳的釋放效果，從生產(chǎn)和使用角度考慮，棉片+石蠟組合是更優(yōu)秀的產(chǎn)品組合。

實(shí)施例6：本發(fā)明試劑盒檢測方法和b-sit方法敏感性和特異性的對比

1、目的：驗(yàn)證該嗅覺檢測方法是否具有較高的敏感性和特異性，以及ppv和npv。

2、研究對象：選取50例帕金森病患者和50例健康對照組人群。

(1)pd組：帕金森病患者來自宣武醫(yī)院和瑞安醫(yī)院門診及病房，按2015年mds診斷標(biāo)準(zhǔn)診斷為帕金森病，年齡50歲以上(依據(jù)2015年國際運(yùn)動障礙病協(xié)會mds制定的pd臨床前驅(qū)期標(biāo)準(zhǔn)，風(fēng)險預(yù)測值的計算是從50歲開始。)，性別比例1：1。

排除標(biāo)準(zhǔn)：mmse低于24分，有嗅覺疾病(鼻炎等)或鼻部外傷手術(shù)史，有近兩周感冒病史。

(2)control組：健康對照組來自帕金森病患者配偶及北京老年社區(qū)隊(duì)列人群，按年齡性別1：1匹配入組。

排除標(biāo)準(zhǔn)：mmse低于24分，有嗅覺疾病(鼻炎等)或鼻部外傷手術(shù)史，有近兩周感冒病史，有明確診斷的神經(jīng)系統(tǒng)疾病史(pd、ad等)。

3、研究方法：所有受試者均接受兩周嗅覺測試方法的嗅覺測試，每種嗅覺測試方法中間間隔15分鐘。

4、嗅覺測試方法為：基于本發(fā)明試劑盒(實(shí)施例4)的方法和美國b-sit方法。美國b-sit方法參照測試卡正面說明書執(zhí)行。本發(fā)明測試方法如下：

(1)首先受試者填寫個人信息卡；(2)依次或隨機(jī)選擇其中一個固體氣味塊，放在受試者鼻前3-5cm處，進(jìn)行測試，不限制受試者嗅聞的時間；(3)受試者結(jié)束嗅聞后，查找氣味選項(xiàng)卡中對應(yīng)固體氣味塊標(biāo)號的題干，從4個備選答案中進(jìn)行選擇(每個題干受試者必須給出答案)；(4)完成選擇后，棄置固體氣味塊，間隔15秒后(可以理解為待上一個氣味在鼻部作用消失)，進(jìn)行下一個嗅覺測試塊的測試；(5)檢查結(jié)果。要求所有氣味必須全部完成，所有問題必須做出選擇，計算總分作為測試結(jié)果，滿分12分。

5、統(tǒng)計分析：采用spss19.0完成。

6、結(jié)果見表4。

表4

上表結(jié)果顯示本，發(fā)明所述試劑盒的敏感性和特異性可以分別達(dá)到75.0％和86.7％，陽性預(yù)測值ppv和陰性預(yù)測值npv可以分別達(dá)到86.7％和75.0％。與美國b-sit產(chǎn)品比較，本發(fā)明所述試劑盒對帕金森病診斷可以達(dá)到相同效果，但特異性、陽性預(yù)測值及陰性預(yù)測值更優(yōu)。

由于帕金森病和阿爾茨海默病均為神經(jīng)退行性疾病，在發(fā)病過程中嗅覺系統(tǒng)均有病理性改變，因此帕金森病和阿爾茨海默病具有相似的嗅覺障礙表現(xiàn)，本實(shí)施例可擴(kuò)展至阿爾茨海默病。

以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。