本發(fā)明涉及從蒺藜中制備總呋甾皂苷和總螺甾皂苷的方法，屬于天然藥物化學(xué)或中藥化學(xué)研究領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

中藥材蒺藜為蒺藜科蒺藜屬植物蒺藜tribulusterrestrisl.的干燥成熟果實，為傳統(tǒng)中藥，又名白蒺藜、刺蒺藜、蒺藜子、硬蒺藜。性味辛、苦、微溫、有小毒、入肝、肺經(jīng)，具有平肝解郁、活血、明目、止癢等功效，主要用于頭疼眩暈、乳閉乳痛、風(fēng)疹瘙癢等癥。藥理研究表明，蒺藜具有抗菌、抗癌、利尿等作用，尤其在防治心腦血管疾病方面有較突出的療效。蒺藜中含有甾體皂苷、黃酮、多糖及生物堿等成分,其中甾體皂苷是其主要有效成分。蒺藜甾體皂苷可以通過水提醇沉方法也可以用常用的水煎煮提取、大孔吸附樹脂吸附、乙醇解析的方法獲得。

近年來從蒺藜中分離得到的甾體皂苷有80多種，主要包括螺甾皂苷和呋甾皂苷兩大類，其中螺甾醇含量相對較高。螺甾皂苷極性小，易結(jié)晶，近年來分離得到的螺甾皂苷主要有綠蓮皂苷元、魯斯可皂苷元、螺甾-2α,3β-羥基-4-烯-12-酮、螺甾-4-烯-3,12-二酮、螺甾-24-羥基-4-烯-3,12-二酮、螺甾-4-烯-3,6,12-三酮、螺甾-3,6,12-三酮、25r-螺甾-3,5-二烯、25r-螺甾-3,5-二烯-12-酮、新吉托皂苷元、吉托皂苷元、f-吉托皂苷、terrestrosine、薯蕷皂苷元、亞莫皂苷元、tribestin、纖細(xì)薯蕷皂苷、延齡草素、trillarin、替告皂苷元、gesgalactotigonin、desglucolanatigoninⅱ、terrestrosina、terrestrosinb、新替告皂苷元、isoterrestrosinb、海柯皂苷元、agovosidea、terrestrosinc、terrestrosind、新?？略碥赵?、?？乱阴?、?？峦?。呋甾醇含量較低，水溶性較大，不易結(jié)晶，藥理試驗及藥效實驗證明對心腦血管疾病有明顯的預(yù)防和治療作用，近年來分離得到的呋甾皂苷主要有蒺藜呋甾皂苷a、terrestrosideb、terrestrosinf、terrestrosing、terrestrosinh、terrestrosini、tribufurosidesg、tribufurosidesh、tribufurosidesi、原薯蕷皂苷、methylprototribestin、protogracillin、原纖細(xì)薯蕷皂苷、偽薯蕷皂苷、甲基偽薯蕷皂苷、tribulosaponina、terrestrosink、tribufurosidej、terrestrosidea、tribufurosideb、tribufurosidec等。

由于螺甾皂苷和呋甾皂苷藥理活性及理化性質(zhì)有所不同，開發(fā)利用蒺藜甾體皂苷時經(jīng)常遇到將螺甾皂苷和呋甾皂苷分開后分別應(yīng)用的問題。另外，先將螺甾皂苷和呋甾皂苷分開后更容易從中獲得各種蒺藜皂苷的單體。因此，研究發(fā)明一種能夠?qū)⑤疝悸葭拊碥蘸瓦荤拊碥辗珠_的方法是一件非常有意義的工作。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是要提供一種能夠從蒺藜中分別獲得螺甾皂苷和呋甾皂苷的方法，并將獲得的螺甾皂苷和呋甾皂苷用于保健食品、藥物組合物以及各種蒺藜皂苷單體的制備。本發(fā)明所述的蒺藜不僅指蒺藜科蒺藜屬植物蒺藜tribulusterrestrisl.的干燥成熟果實，也包括新鮮果實，新鮮或干燥地上部分或新鮮或干燥全草。

本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案完成的。

將干燥蒺藜粉碎，用8-15倍水煎煮提取或乙醇回流提取3次，合并提取液，過濾，水提液直接過大孔吸附樹脂柱吸附(乙醇提取液回收乙醇后過大孔吸附樹脂柱吸附)，水洗至無色或者用ph值為9-13的堿水溶液，再用水洗至中性，用體積百分比濃度17％-40％的有機溶劑水溶液洗脫即得主要含有呋甾皂苷的混合物，即蒺藜總呋甾皂苷；將呋甾皂苷洗脫完全后繼續(xù)用體積百分比濃度大于40％的有機溶劑水溶液洗脫即得主要含有呋甾皂苷的混合物，即蒺藜總螺甾皂苷。

所述的大孔吸附樹脂選自ab-8、d4020、d101、d102、d103、860021、hp20的一種或它們的兩種或兩種以上的混合樹脂。

所述的有機溶劑選自乙醇、甲醇、丙酮、正丙醇、異丙醇或它們中的一種或兩種或兩種以上混合溶劑。

所述的低濃度有機溶劑的水溶液是指體積百分比濃度小于等于40％的有機溶劑水溶液，所述的高濃度有機溶劑的水溶液是體積百分比濃度大于40％的有機溶劑的水溶液。

所述的堿是堿金屬或堿土金屬的氫氧化物。

所述的堿金屬或堿土金屬的氫氧化物是氫氧化鈉或氫氧化鉀或氫氧化鈣。

具體研發(fā)過程如下：

將吸附上蒺藜提取物的大孔吸附樹脂柱首先用15％的乙醇溶液洗脫，利用薄層色譜檢查洗脫下來的成分(將洗脫液濃縮后tlc檢驗，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，分別噴a試劑(50ml醋酸使0.5ml茴香醛溶解，加硫酸1ml)和e試劑(1％對二甲氨基苯甲醛乙醇溶液：濃鹽酸(4：1)顯色)，結(jié)果沒有出現(xiàn)甾體皂苷斑點，說明15％的乙醇溶液不能將呋甾皂苷和螺甾皂苷洗脫下來(a試劑對呋甾、螺甾都顯黃色，e試劑只對呋甾顯粉色)；接著用17％的乙醇溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點薄層板，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個黃色斑點，用e試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個粉色斑點，但是黃色斑點和粉色斑點能夠完全對應(yīng)，說明17％的乙醇溶液能將呋甾皂苷洗脫下來而不能將螺甾皂苷洗脫下來。再分別用6倍柱體積的19％、21％、23％、25％、27％、29％、31％、33％、35％、37％、39％的乙醇溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點硅膠板，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個黃色斑點，用e試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個粉色斑點，且黃色斑點和粉色斑點能夠完全對應(yīng)，說明17％、19％、21％、23％、25％、27％、29％、31％、33％、35％、37％、39％、40％的乙醇溶液能將呋甾皂苷洗脫下來而不能將螺甾皂苷洗脫下來。用39％的乙醇溶液將呋甾皂苷洗脫完全后再用41％、43％、45％乙醇溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點硅膠板，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個黃色斑點，用e試劑顯色，硅膠板不出現(xiàn)斑點，說明41％、43％、45％的乙醇溶液能將螺甾皂苷洗脫下來且洗脫液中不含呋甾皂苷。綜上利用17％-40％的乙醇溶液洗脫只能將蒺藜中的呋甾皂苷洗脫下來而螺甾皂苷仍然吸附在大孔吸附樹脂上。因此用此方法可以將呋甾皂苷和螺甾皂苷進(jìn)行分離。通過進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，選用ab-8、d4020、d101、d102、d103、860021、hp20等大孔吸附樹脂的任何一種或它們的兩種或兩種以上的混合樹脂，選用乙醇、甲醇、丙酮、正丙醇、異丙醇等有機溶劑或它們中的一種或兩種或兩種以上混合溶劑，同樣可以獲得相同的效果。即將吸附上蒺藜提取物的大孔吸附樹脂柱首先用15％的甲醇、丙酮、正丙醇、異丙醇等有機溶劑溶液洗脫，利用薄層色譜檢查洗脫下來的成分(將洗脫液濃縮后tlc檢驗，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，分別噴a試劑(50ml醋酸使0.5ml茴香醛溶解，加硫酸1ml)和e試劑(1％對二甲氨基苯甲醛乙醇溶液：濃鹽酸(4：1)顯色)，結(jié)果沒有出現(xiàn)甾體皂苷斑點，說明15％的甲醇、丙酮、正丙醇、異丙醇等有機溶劑溶液不能將呋甾皂苷和螺甾皂苷洗脫下來(a試劑對呋甾、螺甾都顯黃色，e試劑只對呋甾顯粉色)；接著用17％的甲醇、丙酮、正丙醇、異丙醇等有機溶劑溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點薄層板，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個黃色斑點，用e試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個粉色斑點，但是黃色斑點和粉色斑點能夠完全對應(yīng)，說明17％的甲醇、丙酮、正丙醇、異丙醇等有機溶劑溶液能將呋甾皂苷洗脫下來而不能將螺甾皂苷洗脫下來。再分別用6倍柱體積的19％、21％、23％、25％、27％、29％、31％、33％、35％、37％、39％的甲醇、丙酮、正丙醇、異丙醇等有機溶劑溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點硅膠板，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個黃色斑點，用e試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個粉色斑點，且黃色斑點和粉色斑點能夠完全對應(yīng)，說明19％、21％、23％、25％、27％、29％、31％、33％、35％、37％、39％、40％的甲醇、丙酮、正丙醇、異丙醇等有機溶劑溶液能將呋甾皂苷洗脫下來而不能將螺甾皂苷洗脫下來。用39％的甲醇、丙酮、正丙醇、異丙醇等有機溶劑溶液將呋甾皂苷洗脫完全后再用41％、43％、45％乙醇溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點硅膠板，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個黃色斑點，用e試劑顯色，硅膠板不出現(xiàn)斑點，說明41％、43％、45％的甲醇、丙酮、正丙醇、異丙醇等有機溶劑溶液能將螺甾皂苷洗脫下來且洗脫液中不含呋甾皂苷。綜上利用17％-40％的甲醇、丙酮、正丙醇、異丙醇等有機溶劑溶液洗脫只能將蒺藜中的呋甾皂苷洗脫下來而螺甾皂苷仍然吸附在大孔吸附樹脂上。因此用此方法可以將呋甾皂苷和螺甾皂苷進(jìn)行分離。

另外本發(fā)明還發(fā)現(xiàn)用堿性水溶液對吸附上蒺藜提取物的大孔吸附樹脂柱進(jìn)行洗脫，洗脫下來的是黃酮類成分，而皂苷類成分仍然保留在大孔吸附樹脂上。因此通過先用堿性水溶液洗脫，再用水洗至中性，再用低濃度有機溶劑洗脫的方法可以獲得不含黃酮類成分的純度更高的蒺藜總呋甾皂苷。同時本發(fā)明還發(fā)現(xiàn)通過先用低于15％的有機溶劑洗脫，再用低濃度有機溶劑洗脫的方法可以獲得純度更高的蒺藜總呋甾皂苷。

具體實施方式

實施例1

取干燥蒺藜果實1kg粉碎，用8倍水煎煮提取3次，煎煮時間分別為2h、1.5h、1h，合并提取液，過濾，濃縮，過d4020大孔吸附樹脂柱吸附，用去離子水洗至無色，用6倍柱體積的15％的乙醇溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點薄層板，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑(50ml醋酸使0.5ml茴香醛溶解，加硫酸1ml)和e試劑(1％對二甲氨基苯甲醛乙醇溶液：濃鹽酸(4：1)檢查，結(jié)果沒有出現(xiàn)甾體皂苷斑點，說明15％的乙醇溶液不能將呋甾皂苷和螺甾皂苷洗脫下來(a試劑對呋甾、螺甾都顯黃色，e試劑只對呋甾顯粉色)；接著用17％的乙醇溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點薄層板，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個黃色斑點，用e試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個粉色斑點，且黃色斑點和粉色斑點能夠完全對應(yīng)，說明17％的乙醇溶液能將呋甾皂苷洗脫下來而不能將螺甾皂苷洗脫下來。再分別用6倍柱體積的19％、21％、23％、25％、27％、29％、31％、33％、35％、37％、39、40％％的乙醇溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點硅膠板，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個黃色斑點，用e試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個粉色斑點，且黃色斑點和粉色斑點能夠完全對應(yīng)，說明23％、25％、27％、29％、31％、33％、35％、37％、39％、40％的乙醇溶液能將呋甾皂苷洗脫下來而不能將螺甾皂苷洗脫下來。再用41％、43％、45％乙醇溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點硅膠板，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個黃色斑點，用e試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)粉色斑點，說明當(dāng)乙醇濃度大于41％時將呋甾皂苷和螺甾皂苷一起洗脫下來。

取干燥蒺藜果實3kg粉碎，用8倍水煎煮提取3次，煎煮時間分別為2h、1.5h、1h，合并提取液，過濾，濃縮，過d4020大孔吸附樹脂柱吸附，用去離子水洗至無色，用40％的乙醇溶液將呋甾皂苷洗脫完全，再用85％的乙醇溶液將螺甾皂苷洗脫完全，分別減壓回收溶劑，干燥，得蒺藜總呋甾皂苷15.1克，蒺藜總螺甾皂苷18.3克。

實施例2

取蒺藜地上部分1kg粉碎，用10倍水提取3次，煎煮時間分別為3h、2h、1h，合并提取液，過濾、濃縮、過ab-8大孔吸附樹脂柱吸附，用去離子水洗至無色，用6倍柱體積的15％的乙醇溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點薄層板，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑(50ml醋酸使0.5ml茴香醛溶解，加硫酸1ml)和e試劑(1％對二甲氨基苯甲醛乙醇溶液：濃鹽酸(4：1)檢查，結(jié)果沒有出現(xiàn)甾體皂苷斑點，說明15％的乙醇溶液不能將呋甾皂苷和螺甾皂苷洗脫下來(a試劑對呋甾、螺甾都顯黃色，e試劑只對呋甾顯粉色)；接著用17％的乙醇溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點薄層板，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個黃色斑點，用e試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個粉色斑點，且黃色斑點和粉色斑點能夠完全對應(yīng)，說明17％的乙醇溶液能將呋甾皂苷洗脫下來而不能將螺甾皂苷洗脫下來。再分別用6倍柱體積的19％、21％、23％、25％、27％、29％、31％、33％、35％、37％、39％、40％的乙醇溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點硅膠板，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個黃色斑點，用e試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個粉色斑點，且黃色斑點和粉色斑點能夠完全對應(yīng)，說明23％、25％、27％、29％、31％、33％、35％、37％、39％、40％的乙醇溶液能將呋甾皂苷洗脫下來而不能將螺甾皂苷洗脫下來。再用41％、43％、45％乙醇溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點硅膠板，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個黃色斑點，用e試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)粉色斑點，說明當(dāng)乙醇濃度大于41％時將呋甾皂苷和螺甾皂苷一起洗脫下來。

具體取干燥蒺藜果實3kg粉碎，用8倍水煎煮提取3次，煎煮時間分別為2h、1.5h、1h，合并提取液，過濾，濃縮，ab-8大孔吸附樹脂柱吸附，用去離子水洗至無色，用40％的乙醇溶液將呋甾皂苷洗脫完全，再用85％的乙醇溶液將螺甾皂苷洗脫完全，分別減壓回收溶劑，干燥，得蒺藜總呋甾皂苷13.5克，蒺藜總螺甾皂苷19.0克。

實施例3

取蒺藜1kg粉碎，用14倍水煎煮提取3次，煎煮時間分別為3h、2h、1h合并提取液，過濾、濃縮、過d101大孔吸附樹脂柱吸附，用去離子水洗至無色，用6倍柱體積的15％的甲醇溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點薄層板，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑(50ml醋酸使0.5ml茴香醛溶解，加硫酸1ml)和e試劑(1％對二甲氨基苯甲醛甲醇溶液：濃鹽酸(4：1)檢查，結(jié)果沒有出現(xiàn)甾體皂苷斑點，說明15％的甲醇溶液不能將呋甾皂苷和螺甾皂苷洗脫下來(a試劑對呋甾、螺甾都顯黃色，e試劑只對呋甾顯粉色)；接著用17％的甲醇溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點薄層板，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個黃色斑點，用e試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個粉色斑點，且黃色斑點和粉色斑點能夠完全對應(yīng)，說明17％的甲醇溶液能將呋甾皂苷洗脫下來而不能將螺甾皂苷洗脫下來。再分別用6倍柱體積的19％、21％、23％、25％、27％、29％、31％、33％、35％、37％、39％、40％的甲醇溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點硅膠板，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個黃色斑點，用e試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個粉色斑點，且黃色斑點和粉色斑點能夠完全對應(yīng)，說明23％、25％、27％、29％、31％、33％、35％、37％、39％、40％的甲醇溶液能將呋甾皂苷洗脫下來而不能將螺甾皂苷洗脫下來。再用41％、43％、45％甲醇溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點硅膠板，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個黃色斑點，用e試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)粉色斑點，說明當(dāng)甲醇濃度大于41％時將呋甾皂苷和螺甾皂苷一起洗脫下來。

具體取干燥蒺藜果實3kg粉碎，用8倍水煎煮提取3次，煎煮時間分別為2h、1.5h、1h，合并提取液，過濾，濃縮，過d101大孔吸附樹脂柱吸附，用去離子水洗至無色，用35％的甲醇溶液將呋甾皂苷洗脫完全，再用85％的甲醇溶液將螺甾皂苷洗脫完全，分別減壓回收溶劑，干燥，得蒺藜總呋甾皂苷14.6克，蒺藜總螺甾皂苷18.9克。

實施例4

取蒺藜1kg粉碎，用12倍水煎煮提取3次，煎煮時間分別為3h、2h、1h合并提取液，過濾、濃縮、過hp20大孔吸附樹脂柱吸附，用去離子水洗至無色，用6倍柱體積的15％的丙酮溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點薄層板，用氯仿-丙酮-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑(50ml醋酸使0.5ml茴香醛溶解，加硫酸1ml)和e試劑(1％對二甲氨基苯甲醛甲醇溶液：濃鹽酸(4：1)檢查，結(jié)果沒有出現(xiàn)甾體皂苷斑點，說明15％的丙酮溶液不能將呋甾皂苷和螺甾皂苷洗脫下來(a試劑對呋甾、螺甾都顯黃色，e試劑只對呋甾顯粉色)；接著用17％的丙酮溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點薄層板，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個黃色斑點，用e試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個粉色斑點，且黃色斑點和粉色斑點能夠完全對應(yīng)，說明17％的丙酮溶液能將呋甾皂苷洗脫下來而不能將螺甾皂苷洗脫下來。再分別用6倍柱體積的19％、21％、23％、25％、27％、29％、31％、33％、35％、37％、39％、40％的丙酮溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點硅膠板，用氯仿-丙酮-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個黃色斑點，用e試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個粉色斑點，且黃色斑點和粉色斑點能夠完全對應(yīng)，說明23％、25％、27％、29％、31％、33％、35％、37％、39％、40％的丙酮溶液能將呋甾皂苷洗脫下來而不能將螺甾皂苷洗脫下來。再用41％、43％、45％丙酮溶液洗脫，將洗脫液濃縮后點硅膠板，用氯仿-甲醇-水(7:4:0.9)系統(tǒng)展開，用a試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)若干個黃色斑點，用e試劑顯色，硅膠板出現(xiàn)粉色斑點，說明當(dāng)丙酮濃度大于41％時將呋甾皂苷和螺甾皂苷一起洗脫下來。

具體取干燥蒺藜果實3kg粉碎，用8倍水煎煮提取3次，煎煮時間分別為2h、1.5h、1h，合并提取液，過濾，濃縮，過hp20大孔吸附樹脂柱吸附，用去離子水洗至無色，用30％的甲醇溶液將呋甾皂苷洗脫完全，再用95％的甲醇溶液將螺甾皂苷洗脫完全，分別減壓回收溶劑，干燥，得蒺藜總呋甾皂苷12.3克，蒺藜總螺甾皂苷17.8克。

實施例5

取干燥蒺藜果實3kg粉碎，用8倍水煎煮提取3次，煎煮時間分別為2h、1.5h、1h，合并提取液，過濾，濃縮，過d4020大孔吸附樹脂柱吸附，用去離子水洗至無色，用10倍柱體積的0.5％氫氧化鈉水溶液洗脫，再用水洗至中性，然后用35％的乙醇溶液將呋甾皂苷洗脫完全，再用75％的乙醇溶液將螺甾皂苷洗脫完全，分別減壓回收溶劑，干燥，得蒺藜總呋甾皂苷12.0克，蒺藜總螺甾皂苷17.5克。

實施例6

取干燥蒺藜果實3kg粉碎，用8倍水煎煮提取3次，煎煮時間分別為2h、1.5h、1h，合并提取液，過濾，濃縮，過ab-8大孔吸附樹脂柱吸附，用去離子水洗至無色，用10倍柱體積的15％的乙醇溶液洗脫，然后用35％的乙醇溶液將呋甾皂苷洗脫完全，再用85％的乙醇溶液將螺甾皂苷洗脫完全，分別減壓回收溶劑，干燥，得蒺藜總呋甾皂苷11.5克，蒺藜總螺甾皂苷17.9克。

實施例7

取干燥蒺藜果實3kg粉碎，用8倍水煎煮提取3次，煎煮時間分別為2h、1.5h、1h，合并提取液，過濾，濃縮，過ab-8大孔吸附樹脂柱吸附，用去離子水洗至無色，用10倍柱體積的0.5％氫氧化鈉水溶液洗脫，再用水洗至中性，接著用10倍柱體積的15％的乙醇溶液洗脫，然后用35％的乙醇溶液將呋甾皂苷洗脫完全，再用85％的乙醇溶液將螺甾皂苷洗脫完全，分別減壓回收溶劑，干燥，得蒺藜總呋甾皂苷11.2克，蒺藜總螺甾皂苷17.8克。

實施例8

取新鮮蒺藜果實15kg搗碎，用10倍的85％乙醇回流提取3次，回流時間分別為2h、1.5h、1h，合并提取液，過濾，減壓回收溶劑，過ab-8大孔吸附樹脂柱吸附，用去離子水洗至無色，用10倍柱體積的15％的乙醇溶液洗脫，然后用35％的乙醇溶液將呋甾皂苷洗脫完全，再用85％的乙醇溶液將螺甾皂苷洗脫完全，分別減壓回收溶劑，干燥，得蒺藜總呋甾皂苷18.5克，蒺藜總螺甾皂苷23.9克。

實施例9

取新鮮蒺藜地上部分13kg粉碎，用8倍水煎煮提取3次，煎煮時間分別為2h、1.5h、1h，合并提取液，過濾，用10倍的85％乙醇回流提取3次，回流時間分別為2h、1.5h、1h，合并提取液，過濾，減壓回收溶劑，過d101大孔吸附樹脂柱吸附，用去離子水洗至無色，用10倍柱體積的15％的乙醇溶液洗脫，然后用35％的乙醇溶液將呋甾皂苷洗脫完全，再用85％的乙醇溶液將螺甾皂苷洗脫完全，分別減壓回收溶劑，干燥，得蒺藜總呋甾皂苷18.4克，蒺藜總螺甾皂苷20.3克。