本發(fā)明涉及一中藥物制劑及其制備方法，具體涉及一種含有左旋奧硝唑的注射液及其制備方法。
背景技術(shù)：
奧硝唑(ornidazole)，化學(xué)名為1-(3-氯-2-羥丙基)-2-甲基-5-硝基咪唑，分子式為c7h10cln3o3，適應(yīng)癥為由脆弱擬桿菌、梭狀芽胞桿菌、真桿菌、消化球菌和消化鏈球菌、幽門螺桿菌、黑色素?cái)M桿菌、梭桿菌、牙齦類桿菌等敏感厭氧菌所引起的多種感染性疾病。奧硝唑最早由美國hoffer.m等研制成功，隨后由roche公司于1977-1983年先后在德國、法國、意大利、瑞士等國以“tiberal”上市。我國從2002年開始，相繼批準(zhǔn)了奧硝唑原料及各種制劑的生產(chǎn)。目前國內(nèi)已有包括片劑、分散片、膠囊、注射液、氯化鈉注射液等劑型，其中注射劑占主導(dǎo)地位。
cn1686116a公開了一種左旋奧硝唑的靜脈給藥制劑，提高了左旋奧硝唑的溶解度。
cn1739505a公開了一種左旋奧硝唑注射制劑，具有質(zhì)量穩(wěn)定、可控，安全有效等特點(diǎn)。
左旋奧硝唑是奧硝唑的左旋體化合物，其中樞神經(jīng)毒性明顯低于外消旋奧硝唑，因此目前市面上主要為左旋奧硝唑的制劑。左旋奧硝唑制劑，尤其是左旋奧硝唑氯化鈉注射液在生產(chǎn)及貯存時(shí)，會產(chǎn)生多種有關(guān)物質(zhì)。有關(guān)物質(zhì)的產(chǎn)生，不僅會降低主要的含量，還會產(chǎn)生毒性或加重不良反應(yīng)。
前人研究發(fā)現(xiàn)，左旋奧硝唑氯化鈉注射液的不良反應(yīng)發(fā)生率約為1.5％，包括消化系統(tǒng)不良反應(yīng)如胃部不適、神經(jīng)系統(tǒng)不良反應(yīng)如頭昏、免疫系統(tǒng)不良反應(yīng)如粒細(xì)胞減少等癥狀。雖然比奧硝唑氯化鈉注射液的不良反應(yīng)發(fā)生率已經(jīng)有顯著的降低，但是大范圍人群中使用時(shí)，左旋奧硝唑氯化鈉注射液1.5％的不良反應(yīng)率仍會帶來大量的不良反應(yīng)患者。
因此，控制左旋奧硝唑的有關(guān)物質(zhì)，降低其毒性，提高其安全性，更好的發(fā)揮其臨床療效，成為一個(gè)很有實(shí)際意義的研究方向。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
為此，申請人對左旋奧硝唑及外消旋奧硝唑進(jìn)行了大量研究，并意外的發(fā)現(xiàn)，在生產(chǎn)和貯存過程中，多種奧硝唑制劑中會產(chǎn)生乙酸根這種前人未曾發(fā)現(xiàn)的有關(guān)物質(zhì)，而這種雜質(zhì)不僅會降低奧硝唑制劑的藥效，也會在一定程度上提高奧硝唑制劑在體內(nèi)的毒性。所述的乙酸根雜質(zhì)包括各種含乙酸根的分子。
因此，需要控制奧硝唑制劑中有關(guān)物質(zhì)的量來提高其使用安全性。
基于以上目的，本發(fā)明提供一種奧硝唑制劑，含有奧硝唑、制劑常用輔料、乙酸根，其中，乙酸根含量不高于15mg/l。優(yōu)選的，奧硝唑含量與乙酸根含量之比不低于200:1。
進(jìn)一步地，本發(fā)明提供一種安全性高的左旋奧硝唑注射液，包括左旋奧硝唑，等滲調(diào)節(jié)劑組分，其特征在于，所述左旋奧硝唑注射液中，含有乙酸根，其中，乙酸根含量不高于15mg/l，優(yōu)選不高于10mg/l，更優(yōu)選不高于2mg/l。左旋奧硝唑與乙酸根的含量之比不低于200:1，優(yōu)選的含量之比不低于500:1，更優(yōu)選的含量之比不低于1000:1。
所述左旋奧硝唑注射液中，左旋奧硝唑含量(w/v)不低于0.3％，優(yōu)選含量不低于0.4％，更優(yōu)選含量為0.5％。
所述左旋奧硝唑注射液中，等滲調(diào)節(jié)劑組分含量(w/v)不低于0.1％，優(yōu)選含量不低于0.5％，更優(yōu)選的含量為0.83％。
所述等滲調(diào)節(jié)劑選自氯化鈉、葡萄糖、果糖、磷酸鹽、枸櫞酸鹽、甘露醇、聚乙二醇、丙二醇的一種或幾種的組合。
進(jìn)一步地，所述左旋奧硝唑注射液中還可以含有藥學(xué)上可接受的緩沖鹽，所述緩沖鹽選自如枸櫞酸鹽、磷酸鹽、碳酸鹽等的一種或幾種的組合。
進(jìn)一步地，所述左旋奧硝唑注射液中還可以含有藥學(xué)上可接受的抗氧化劑，所述抗氧化劑選自如半胱氨酸、亞硫酸氫鈉、甘氨酸等的一種或幾種的組合。
此外，發(fā)明人意外的發(fā)現(xiàn)，當(dāng)乙酸根的含量超過15mg/l時(shí)，左旋奧硝唑氯化鈉注射液的不良反應(yīng)發(fā)生率會有顯著提高，具體來說，使用者神經(jīng)系統(tǒng)的不良反應(yīng)率顯著提高、消化系統(tǒng)的不良反應(yīng)率顯著提高。
本發(fā)明還提供了一種左旋奧硝唑的制備方法，其步驟包括：在避光、無氧保護(hù)的容器中，加入有機(jī)溶劑和2-甲基-5-硝基咪唑，攪拌下慢慢加催化劑(控制溫度不超過10℃)，滴加完畢后，再慢慢滴加s-(+)-環(huán)氧氯丙烷(控制溫度不超過10℃)，0-20℃反應(yīng)2-10小時(shí)，將反應(yīng)液慢慢加入冰水混合物中，溫度不超過30℃攪拌反應(yīng)10分鐘-5小時(shí)，用酸調(diào)ph值為1.0-2.0，分去有機(jī)層，水層用堿調(diào)ph為6.0-8.0，攪拌析晶1小時(shí)-24小時(shí)，過濾，用水洗滌，烘干得左旋奧硝唑。
更具體的說上述步驟容器中所加入的有機(jī)溶劑為：乙酸乙酯、甲苯、二氯甲烷、乙醚的一種或幾種的組合，優(yōu)選乙酸乙酯或二氯甲烷。
上述步驟中催化劑為三氟化硼，三氟化硼可以為氣體也可為三氟化硼的有機(jī)溶液，優(yōu)選為三氟化硼乙醚溶液、三氟化硼乙酸乙酯溶液、三氟化硼二氯甲烷溶液、三氟化硼乙腈溶液、三氟化硼丙酮溶液的一種或幾種。
上述步驟中調(diào)ph所用的酸為硫酸、鹽酸或磷酸，優(yōu)選鹽酸。
上述步驟中調(diào)ph所用的堿為無機(jī)堿或有機(jī)堿，優(yōu)選氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、氨水、三乙胺、二乙胺的一種或幾種的組合。
本發(fā)明還提供了一種制備左旋奧硝唑注射液的方法，其步驟包括：(1)在避光、無氧保護(hù)的條件下，稱取氯化鈉，左旋奧硝唑，加注射用水并攪拌使其溶解，補(bǔ)加注射用水至接近全量；(2)加入活性炭吸附5-60min，過濾后用ph調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)ph至3.0-4.0，補(bǔ)加注射用水至全量；(3)灌裝，扎蓋后密封，在高溫下滅菌。
優(yōu)選的，灌裝前用0.45μm微孔濾膜過濾。
優(yōu)選的，步驟(1)中稱取檸檬酸鈉并與氯化鈉、左旋奧硝唑一起溶解，更優(yōu)選的，稱取最終注射液重量0.003％檸檬酸鈉。
溶解氯化鈉及左旋奧硝唑的溫度為30℃-60℃，優(yōu)選為45℃-55℃。
活性炭用量為0.005％-0.015％。
所述ph調(diào)節(jié)劑為鹽酸。
所述高溫滅菌的條件為110℃-130℃下滅菌10min-20min。優(yōu)選的，高溫滅菌的條件為115℃下，滅菌30min。
本發(fā)明還提供了一種左旋奧硝唑注射液中乙酸根的檢測方法。該方法適用于左旋奧硝唑注射液中乙酸根的檢測，且便于操作，分離度高，重現(xiàn)性好。
所述左旋奧硝唑注射液中的乙酸根采用液相色譜法進(jìn)行檢測。
色譜柱：采用陰離子交換硅膠色譜柱。優(yōu)選的，色譜柱采用hypersilsax(4.6mm×250mm，5μm)。
流動相：流動相由流動相a液與乙腈混合而成，二者比例為95:5-80:20，優(yōu)選為90:10。流動相a配制方法為：稱取3-5重量份的磷酸二氫鉀于1000重量份超純水中，充分溶解，用20％的磷酸調(diào)ph值至4.0-5.0，過濾即得。流動相a優(yōu)選的配制方法為：稱取重量份3.4份的磷酸二氫鉀于1000重量份超純水中，充分溶解，用20％的磷酸調(diào)ph值至4.2，過濾即得。
流速：0.8-1.2ml/min，優(yōu)選為1.0ml/min。
柱溫：20-40℃，優(yōu)選為30℃。
檢測波長：200-220nm，優(yōu)選為210nm。
進(jìn)樣量：10-30μl，優(yōu)選為20μl。
運(yùn)行時(shí)間：20-40min，優(yōu)選為30min。
檢測時(shí)，以基準(zhǔn)級乙酸鈉為對照品，用外標(biāo)法計(jì)算奧硝唑氯化鈉注射液中乙酸根的含量。
本發(fā)明還提供一種左旋奧硝唑注射液的質(zhì)量評價(jià)方法，所述方法為，檢測注射液中乙酸根的含量，當(dāng)所述注射液中乙酸根含量超過15mg/l時(shí)，判定其為不合格品。
本發(fā)明還提供一種提高左旋奧硝唑注射液使用安全性的方法，所述方法為，檢測注射液中乙酸根的含量，當(dāng)所述注射液中乙酸根量超過15mg/l時(shí)，判定其為不合格品，并棄用；當(dāng)所述注射液中乙酸根含量均不超過15mg/l時(shí)，設(shè)乙酸根含量為xmg/l，那么所述左旋奧硝唑注射液應(yīng)在檢測后(15-x)*3.2月內(nèi)使用。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)：
1.本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了一種奧硝唑制劑中新的有關(guān)物質(zhì)，并對其毒性進(jìn)行了充分的研究，同時(shí)推測了這種雜質(zhì)與奧硝唑不良反應(yīng)之間的關(guān)系。
2.本發(fā)明提供了一種左旋奧硝唑注射液，其安全性高，毒性低，可以更好的發(fā)揮左旋奧硝唑的臨床療效。
3.本發(fā)明提供了左旋奧硝唑注射液中，對乙酸根的檢測方法，其分離度高，專屬性好，可以對左旋奧硝唑中的乙酸根進(jìn)行準(zhǔn)確的檢測。
4.本發(fā)明提供了一種左旋奧硝唑的制備方法，該方法制備的左旋奧硝唑，純度更高，配制的制劑有關(guān)物質(zhì)含量小，提高了制劑的安全性。
5.本發(fā)明還提供了一種左旋奧硝唑注射液的制備方法，該方法制備的注射液安全性好，穩(wěn)定性高，并可以有效降低左旋奧硝唑注射液的有關(guān)物質(zhì)含量。
6.本發(fā)明還提供了一種左旋奧硝唑注射液質(zhì)量評價(jià)的方法，通過對乙酸根含量的檢測，將有關(guān)物質(zhì)含量高于標(biāo)準(zhǔn)的產(chǎn)品判定為不合格品，以避免毒性較高的產(chǎn)品被患者使用，從而提高了左旋奧硝唑注射液的使用安全性。
7.本發(fā)明還提供了一種提高左旋奧硝唑注射液使用安全性的方法，通過對乙酸根含量的檢測，從而判斷該批產(chǎn)品可以繼續(xù)保存的時(shí)間，以降低患者用藥時(shí)的風(fēng)險(xiǎn)。
具體實(shí)施方式
下面通過實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。應(yīng)理解的是，本發(fā)明實(shí)施例僅僅是用于說明本發(fā)明，而不是對本發(fā)明的限制，在本發(fā)明的構(gòu)思前提下，對本發(fā)明的簡單改進(jìn)均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
對比例1
按照cn1686116a的方法制備左旋奧硝唑注射液，并重復(fù)5次。
對比例2
按照cn1739505a的方法制備左旋奧硝唑注射液，并重復(fù)5次。
對比例3
精密稱取氯化鈉83g，左旋奧硝唑50g，加注射用水9000ml攪拌使其溶解，加注射用水至10000ml。加活性炭10g吸附15min，過濾后用稀鹽酸調(diào)節(jié)ph至3.60。用0.45μm微孔濾膜過濾，灌裝，扎蓋后密封，再經(jīng)115℃蒸氣滅菌30min，獲得成品，并重復(fù)5次。
對比例4
精密稱取氯化鈉83g，左旋奧硝唑50g，乙酸鈉0.2g，加注射用水9000ml攪拌使其溶解，加注射用水至10000ml。加活性炭10g吸附15min，過濾后用稀鹽酸調(diào)節(jié)ph至3.60。用0.45μm微孔濾膜過濾，灌裝，扎蓋后密封，再經(jīng)115℃蒸氣滅菌30min，獲得成品，并重復(fù)5次。
實(shí)施例1
在避光，無氧條件下的50l反應(yīng)釜中，加入20l乙酸乙酯和2kg的2-甲基-5-硝基咪唑，降溫至-10℃，慢慢滴加三氟化硼的乙酸乙酯溶液(含三氟化硼約1.1kg)(控制溫度不超過15℃)，滴加畢，再慢慢滴加2.2ls-(+)-環(huán)氧氯丙烷(控制溫度不超過15℃)，滴畢10℃反應(yīng)5小時(shí)，將反應(yīng)液慢慢加入18kg冰水混合物中，溫度不超過30℃攪拌反應(yīng)5小時(shí)，用濃鹽酸調(diào)ph值為1.0左右，分去有機(jī)層，水層用濃氨水調(diào)ph為7.0，攪拌析晶24小時(shí)，過濾，用水洗滌，烘干得左旋奧硝唑3.21kg。
精密稱取氯化鈉83g，上述方法制備的左旋奧硝唑50g，加注射用水9000ml攪拌使其溶解，加注射用水至10000ml。加活性炭10g吸附15min，過濾后用稀鹽酸調(diào)節(jié)ph至3.60。用0.45μm微孔濾膜過濾，灌裝，扎蓋后密封，再經(jīng)115℃蒸氣滅菌30min，獲得成品，并重復(fù)5次。
實(shí)施例2
在避光，無氧條件下的50l反應(yīng)釜中，加入20l乙酸乙酯和2kg的2-甲基-5-硝基咪唑，降溫至-10℃，慢慢滴加三氟化硼的乙酸乙酯溶液(含三氟化硼約1.1kg)(控制溫度不超過15℃)，滴加畢，再慢慢滴加2.2ls-(+)-環(huán)氧氯丙烷(控制溫度不超過15℃)，滴畢10℃反應(yīng)5小時(shí)，將反應(yīng)液慢慢加入18kg冰水混合物中，溫度不超過30℃攪拌反應(yīng)5小時(shí)，用濃鹽酸調(diào)ph值為1.0左右，分去有機(jī)層，水層用濃氨水調(diào)ph為7.0，攪拌析晶24小時(shí)，過濾，用水洗滌，烘干得左旋奧硝唑3.21kg。
精密稱取氯化鈉83g，上述方法制備的左旋奧硝唑50g，乙酸鈉0.05g，加注射用水9000ml攪拌使其溶解，加注射用水至10000ml。加活性炭10g吸附15min，過濾后用稀鹽酸調(diào)節(jié)ph至3.60。用0.45μm微孔濾膜過濾，灌裝，扎蓋后密封，再經(jīng)115℃蒸氣滅菌30min，獲得成品，并重復(fù)5次。
實(shí)施例3
在避光，無氧條件下的50l反應(yīng)釜中，加入20l乙酸乙酯和2kg的2-甲基-5-硝基咪唑，降溫至-10℃，慢慢滴加三氟化硼的乙酸乙酯溶液(含三氟化硼約1.1kg)(控制溫度不超過15℃)，滴加畢，再慢慢滴加2.2ls-(+)-環(huán)氧氯丙烷(控制溫度不超過15℃)，滴畢10℃反應(yīng)5小時(shí)，將反應(yīng)液慢慢加入18kg冰水混合物中，溫度不超過30℃攪拌反應(yīng)5小時(shí)，用濃鹽酸調(diào)ph值為1.0左右，分去有機(jī)層，水層用濃氨水調(diào)ph為7.0，攪拌析晶24小時(shí)，過濾，用水洗滌，烘干得左旋奧硝唑3.21kg。
精密稱取氯化鈉83g，上述方法制備的左旋奧硝唑50g，乙酸鈉0.1g，加注射用水9000ml攪拌使其溶解，加注射用水至10000ml。加活性炭10g吸附15min，過濾后用稀鹽酸調(diào)節(jié)ph至3.60。用0.45μm微孔濾膜過濾，灌裝，扎蓋后密封，再經(jīng)115℃蒸氣滅菌30min，獲得成品，并重復(fù)5次。
實(shí)施例4
在避光，無氧條件下的50l反應(yīng)釜中，加入20l乙酸乙酯和2kg的2-甲基-5-硝基咪唑，降溫至-10℃，慢慢滴加三氟化硼的乙酸乙酯溶液(含三氟化硼約1.1kg)(控制溫度不超過15℃)，滴加畢，再慢慢滴加2.2ls-(+)-環(huán)氧氯丙烷(控制溫度不超過15℃)，滴畢10℃反應(yīng)5小時(shí)，將反應(yīng)液慢慢加入18kg冰水混合物中，溫度不超過30℃攪拌反應(yīng)5小時(shí)，用濃鹽酸調(diào)ph值為1.0左右，分去有機(jī)層，水層用濃氨水調(diào)ph為7.0，攪拌析晶24小時(shí)，過濾，用水洗滌，烘干得左旋奧硝唑3.21kg。
在45℃、避光、無氧保護(hù)的條件下，精密稱取氯化鈉83g，上述制備方法制得的左旋奧硝唑50g，檸檬酸鈉0.3g，加注射用水9000ml攪拌使其溶解，加注射用水至10000ml。加活性炭10g吸附15min，過濾后用稀鹽酸調(diào)節(jié)ph至3.60。用0.45μm微孔濾膜過濾，灌裝，扎蓋后密封，再經(jīng)115℃蒸氣滅菌30min，獲得成品，并重復(fù)5次。
實(shí)施例5
分別檢測對比例1-4及實(shí)施例1-4獲得的左旋奧硝唑氯化鈉溶液中乙酸根的含量。
所述左旋奧硝唑注射液中的乙酸根采用液相色譜法進(jìn)行檢測。色譜柱選用hypersilsax(4.6mm×250mm，5μm)。
流動相：流動相由流動相a液與乙腈混合而成，二者比例為90:10。流動相a配制方法為：稱取3.4g的磷酸二氫鉀于1000ml超純水中，充分溶解，用20％的磷酸調(diào)ph值至4.2，過濾即得。
流速：1.0ml/min。
柱溫：30℃。
檢測波長：210nm。
進(jìn)樣量：20μl。
運(yùn)行時(shí)間：30min。
檢測時(shí)，以基準(zhǔn)級乙酸鈉為對照品，用外標(biāo)法計(jì)算奧硝唑氯化鈉注射液中乙酸根的含量。
檢測結(jié)果如表1所示。
表1對比例1-4及實(shí)施例1-4中乙酸根的含量
由表1的結(jié)果可知，采用本發(fā)明中所述的左旋奧硝唑的制備方法所制備的左旋奧硝唑，配制的左旋奧硝唑氯化鈉注射液成品(實(shí)施例1)，其乙酸根含量較現(xiàn)有技術(shù)更低，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)。而采用實(shí)施例4制備方法制備的左旋奧硝唑氯化鈉注射液，其乙酸根含量更低，相比實(shí)施例1的數(shù)據(jù)也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)。
實(shí)施例6
對對比例1-4及實(shí)施例1-4制備的左旋奧硝唑氯化鈉溶液進(jìn)行長期毒性實(shí)驗(yàn)。
取健康sd大鼠，體重(135±10)g，每組30只，雌雄各半，實(shí)驗(yàn)組按每日20g/kg的劑量給藥，空白對照組按等量生理鹽水灌胃。投藥前觀察一周，各組動物活動、進(jìn)食、糞便等情況均無異常，然后開始給藥。
每天按時(shí)給藥1次，連續(xù)60天，每周稱體重一次，據(jù)體重變化調(diào)整給藥量。進(jìn)行外觀體征、行為活動、糞便性狀、食量、體重變化等一般觀察。
待用藥結(jié)束后，摘眼球取血進(jìn)行血象、血生化檢查，取心、肝、脾、肺、腎五個(gè)臟器稱重，計(jì)算每100g體重的器官比重量。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示。
表2對比例1-4及實(shí)施例1-4制備的左旋奧硝唑注射液長期毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果
根據(jù)表2的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，在左旋奧硝唑注射液中，乙酸根含量對小鼠的不良反應(yīng)發(fā)生率有顯著的影響，高含量的乙酸根導(dǎo)致不良反應(yīng)率的上升。
對比例1-4組，大鼠的不良反應(yīng)發(fā)生率明顯高于實(shí)驗(yàn)例1-4組。具體的，對比例1-4組中，神經(jīng)系統(tǒng)反應(yīng)如痙攣或顫抖反應(yīng)均明顯高于實(shí)施例1-4組，且其數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)；對比例1-4組中，胃腸道系統(tǒng)反應(yīng)如腹瀉或便秘反應(yīng)均明顯高于實(shí)施例1-4組，且其數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)；在乙酸根含量更高的對比例4組中，小鼠甚至出現(xiàn)了情緒異常，如異常發(fā)聲或異常攻擊性。故控制這乙酸根的含量成為降低左旋奧硝唑氯化鈉注射液不良反應(yīng)發(fā)生率的一種可行措施。
實(shí)施例7
將對比例1-4及實(shí)施例1-4獲得的成品，置于20℃避光保存18月。
分別檢測上述左旋奧硝唑氯化鈉溶液中乙酸根的含量。
所述左旋奧硝唑注射液中的乙酸采用液相色譜法進(jìn)行檢測。色譜柱選用hypersilsax(4.6mm×250mm，5μm)。
流動相：流動相由流動相a液與乙腈混合而成，二者比例為90:10。流動相a配制方法為：稱取3.4g的磷酸二氫鉀于1000ml超純水中，充分溶解，用20％的磷酸調(diào)ph值至4.2，過濾即得。
流速：1.0ml/min。
柱溫：30℃。
檢測波長：210nm。
進(jìn)樣量：20μl。
運(yùn)行時(shí)間：30min。
檢測時(shí)，以基準(zhǔn)級乙酸鈉為對照品，用外標(biāo)法計(jì)算奧硝唑氯化鈉注射液中乙酸根的含量。
檢測結(jié)果如表3所示。
表320℃避光保存18月后對比例1-4及實(shí)施例1-4中乙酸根的含量
由表3的結(jié)果可知，采用本發(fā)明中所述的左旋奧硝唑的制備方法所制備的左旋奧硝唑，配制的左旋奧硝唑氯化鈉注射液成品，在20℃避光保存18月后乙酸根含量更低；且其在保存過程中，產(chǎn)生的乙酸根比現(xiàn)有技術(shù)生產(chǎn)的產(chǎn)品更少，數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)。
進(jìn)一步地，在保存中，實(shí)施例1-4中，所述左旋奧硝唑注射液乙酸根增量為3.6-5.5mg/ml，平均每3.27-5月增長1mg/l，因此為了安全起見，設(shè)左旋奧硝唑注射液的乙酸根含量為xmg/l，那么應(yīng)控制所述左旋奧硝唑注射液應(yīng)在檢測后(15-x)*3.2月內(nèi)使用。
實(shí)施例8
將對比例1-4及實(shí)施例1-4獲得的成品，置于20℃避光保存12月。對上述成品按實(shí)施例6的方法進(jìn)行長期毒性實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表4所示。
表4對比例1-4及實(shí)施例1-4制備的左旋奧硝唑注射液長期毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果
根據(jù)表4的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，在左旋奧硝唑注射液中，乙酸根含量對小鼠的不良反應(yīng)發(fā)生率有顯著的影響，高含量的乙酸根導(dǎo)致不良反應(yīng)率的上升。
對比例1-4組，大鼠的不良反應(yīng)發(fā)生率明顯高于實(shí)驗(yàn)例1-4組。具體的，對比例1-4組中，神經(jīng)系統(tǒng)反應(yīng)如痙攣或顫抖反應(yīng)均明顯高于實(shí)施例1-4組，且其數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)；對比例1-4組中，胃腸道系統(tǒng)反應(yīng)如腹瀉或便秘反應(yīng)均明顯高于實(shí)施例1-4組，且其數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)；在對比例1-4組中，小鼠均出現(xiàn)了情緒異常，如異常發(fā)聲或異常攻擊性，而在實(shí)施例1-4組中沒有出現(xiàn)。進(jìn)一步證明了控制左旋奧硝唑注射液中乙酸根含量的重要性，以及證明了本發(fā)明制備的左旋奧硝唑注射液的穩(wěn)定性及安全性。
應(yīng)當(dāng)指出，對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以對本發(fā)明進(jìn)行若干改進(jìn)和修飾，這些改進(jìn)和修飾也落入本發(fā)明權(quán)利要求的保護(hù)范圍內(nèi)。