本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，涉及一種中藥組合物，更具體的是指一種用于改善認(rèn)知功能，延緩癡呆病情進(jìn)展的中藥組合物。
背景技術(shù)：
：隨著社會(huì)老齡化，認(rèn)知障礙和癡呆患者日益增多，癡呆已成為威脅老年人健康的重大疾病之一。我國(guó)目前已有700萬以上老年性癡呆患者，約占全世界總例數(shù)的1/4，且每年約30萬人加入這個(gè)行列。癡呆給照料者、家庭、社會(huì)均帶來沉重負(fù)擔(dān)，癡呆的防治關(guān)系我國(guó)的國(guó)計(jì)民生。目前藥物治療仍是癡呆治療的主要方法，而對(duì)于認(rèn)知功能障礙，尤其是輕度認(rèn)知障礙，目前缺乏公認(rèn)安全有效的治療藥物?，F(xiàn)在臨床一線使用的西藥，如膽堿酯酶抑制劑、興奮性氨基酸受體拮抗劑等，僅適用于病情較重、已明確診斷為癡呆的患者，且為改善癥狀的對(duì)癥治療，對(duì)于大于5年的遠(yuǎn)期療效尚不確切，存在可能出現(xiàn)惡心、嘔吐、食欲下降、腹痛、體重下降等副作用，耐受性差。對(duì)于額顳葉癡呆，目前無藥物治療。中醫(yī)中藥在防治認(rèn)知障礙與癡呆方面具有優(yōu)勢(shì)。認(rèn)知障礙與癡呆，屬于中醫(yī)“呆病”范疇，腦髓空虛，脾腎不足，兼痰濁瘀血阻滯腦絡(luò)，蒙閉腦神，日久而為呆病。臨床上辨證多屬脾腎兩虛兼痰濁瘀血。運(yùn)用健脾益腎化濁法治療癡呆，對(duì)于改善認(rèn)知功能，以及老年人常見便秘、失眠、乏力等癥狀有良好療效。但截至目前為止，尚無公認(rèn)安全有效、具備循證醫(yī)學(xué)證據(jù)的用于改善認(rèn)知功能，延緩癡呆病情進(jìn)展的中藥組合物。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供一種安全有效的，可以改善認(rèn)知功能，延緩癡呆病情進(jìn)展的中藥組合物，從而提高患者日常生活能力、社會(huì)功能，提高生活質(zhì)量。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：一種中藥組合物，由如下重量份的原料制得：肉蓯蓉21-39份，益智仁8-16份，紅景天7-13份，遠(yuǎn)志7-13份，黃連4-8份。優(yōu)選地，所述中藥組合物由如下重量份的原料制得：肉蓯蓉29-31份，益智仁11-13份，紅景天9-11份，遠(yuǎn)志9-11份，黃連5-7份。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述中藥組合物由如下重量份的原料制得：肉蓯蓉30份，益智仁12份，紅景天10份，遠(yuǎn)志10份，黃連6份。本發(fā)明還提供一種中藥制劑，由上述中藥組合物與藥學(xué)上可接受的輔料組成。所述中藥制劑的劑型可為本領(lǐng)域常用劑型，優(yōu)選為顆粒劑、水煎劑、丸劑、膏劑、片劑、膠囊劑等。本發(fā)明所述的中藥組合物在具體應(yīng)用時(shí)，給藥方式通常為口服，每日劑量為68g，分早晚兩次服用。本發(fā)明還提供上述中藥組合物用于制備治療改善認(rèn)知功能，延緩癡呆藥物的應(yīng)用。本發(fā)明所述的中藥組合物由肉蓯蓉、益智仁、紅景天、遠(yuǎn)志和黃連五味藥組成；其中：肉蓯蓉，性味甘、咸、溫，歸腎、大腸經(jīng)，填精助陽(yáng)，化生其源，肝腎雙補(bǔ)，上奉于腦，神明可安。肉蓯蓉質(zhì)潤(rùn)滋養(yǎng)，為補(bǔ)腎陽(yáng)、益精血之良藥，又能潤(rùn)腸通便?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，肉蓯蓉中主要的活性成分苯乙醇苷類，具有抗不良刺激、增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶力、抗氧化的作用；肉蓯蓉總苷對(duì)阿爾茨海默病模型小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙具有保護(hù)作用。肉蓯蓉單用或組成復(fù)方常用于治療腰膝酸軟、陽(yáng)痿、不孕、老年癡呆癥、帕金森病、腸燥便秘等病癥，又可以作為功能食品用于抗疲勞、抗氧化、提高記憶力、防治老年癡呆、抗衰老等。(1)益智仁，性辛，溫。歸腎、脾經(jīng)，可暖腎固精縮尿，溫脾開胃攝唾。益智仁可助蓯蓉溫脾補(bǔ)腎，澀精益氣?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，益智乙醇提取物對(duì)神經(jīng)細(xì)胞凋亡具有保護(hù)作用，益智仁水提物對(duì)腦缺血再灌注神經(jīng)元損傷具有良好的保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)益智仁水提取物可顯著改善腦缺血、腦老化鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。(2)遠(yuǎn)志，性苦，辛，溫。歸心，腎，肺經(jīng)?？砂采褚嬷牵钐甸_竅，宣散心氣，通達(dá)腎氣而強(qiáng)志不忘，為通腎安志、益智強(qiáng)識(shí)之佳品，是目前臨床上常用的益智健腦的中藥?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》：“……益智慧，耳目聰明，不忘，強(qiáng)志，倍力。”遠(yuǎn)志是不忘散(《證治準(zhǔn)繩》)中的主藥，“令人不忘”。現(xiàn)代藥理研究證明，遠(yuǎn)志及其遠(yuǎn)志皂苷具有改善學(xué)習(xí)記憶、鎮(zhèn)靜催眠、抗抑郁、抗氧化、抗衰老、抑菌抗炎、鎮(zhèn)咳祛痰、保護(hù)心腦血管等多方面的生物活性。(3)紅景天，性甘、寒，歸脾、肺經(jīng)，可健脾化濁，通竅益智?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)紅景天具有抗疲勞、抗缺氧、提高工作效率、提高腦力活動(dòng)的作用，并能增加血液中紅細(xì)胞、血紅蛋白含量。紅景天苷在降低神經(jīng)細(xì)胞凋亡及壞死上有顯著作用，也有研究發(fā)現(xiàn)紅景天可以增強(qiáng)腦的機(jī)能，并可能使其向年輕化的方向轉(zhuǎn)化，具有較好的改善學(xué)習(xí)記憶、防治老年性癡呆的作用。(4)黃連味苦，寒，“久服令人不忘”，能清解瘀熱。將上述5味藥按照特定比例進(jìn)行配伍應(yīng)用，可獲得具有健脾益腎，化濁通竅益腦之效。現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，黃連素可減輕海馬神經(jīng)元的死亡，具有顯著的神經(jīng)保護(hù)作用；黃連總生物堿可阻遏鋁負(fù)荷導(dǎo)致的小鼠學(xué)習(xí)記憶能力降低，并有抗焦慮作用。雖然上述五味藥均屬于本領(lǐng)域常用藥物，但本發(fā)明是在長(zhǎng)期臨床實(shí)踐中總結(jié)提煉，從大量相關(guān)藥物中篩選出這五種中藥，并以特定比例配伍：肉蓯蓉、益智仁補(bǔ)腎填精，充腦益智，為君藥；紅景天健脾補(bǔ)氣，兼能活血化濁；遠(yuǎn)志交通心腎，安神益智，又能開竅祛痰，共為臣藥；黃連為佐，清熱化濁，清解瘀熱。五藥相合，發(fā)揮協(xié)同作用，不僅能補(bǔ)腎益腦，又可潤(rùn)腸通便、安神助眠、健脾祛痰。本發(fā)明從現(xiàn)有多種中草藥中篩選出肉蓯蓉、益智仁、紅景天、遠(yuǎn)志、黃連這五味，并以特定比例配伍，使各組分發(fā)揮協(xié)同作用，有效改善認(rèn)知功能，延緩癡呆病情進(jìn)展；且經(jīng)臨床試驗(yàn)和動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果可知，本發(fā)明所述中藥組合物能在一定程度上改善卒中后患者神經(jīng)功能缺損，提高患者日常生活能力及社會(huì)功能，提高患者生活質(zhì)；提高vd大鼠學(xué)習(xí)、記憶能力。本發(fā)明所得中藥組合物安全有效，值得大力推廣使用。附圖說明圖1為大鼠運(yùn)動(dòng)軌跡圖。圖2為本發(fā)明所述中藥組合物對(duì)vd大鼠記憶功能的影響。具體實(shí)施方式為了進(jìn)一步說明本發(fā)明，以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明提供的一種中藥組合物，其制備方法及應(yīng)用進(jìn)行詳細(xì)描述，但不能將其理解為對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限定。下面結(jié)合臨床試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)研究數(shù)據(jù)說明本發(fā)明的有益效果：一、臨床試驗(yàn)1、研究對(duì)象納入急性腦梗死后認(rèn)知障礙患者為研究對(duì)象，共90例，隨機(jī)分為干預(yù)組(45例)及對(duì)照組(45例)，干預(yù)90天，隨訪90天。1.1診斷標(biāo)準(zhǔn)(1)參照1995年中華醫(yī)學(xué)會(huì)第四次全國(guó)腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議修訂的《各類腦血管疾病診要點(diǎn)》中腦梗死診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)參照2006年ninds—csn關(guān)于血管源性認(rèn)知障礙統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。1.2納入標(biāo)準(zhǔn)(1)符合西醫(yī)腦梗死診斷；(2)符合腦梗死ocsp分型中部分前循環(huán)梗死(paci)、后循環(huán)梗死(poci)或腔隙梗死(laci)；(3)發(fā)病14天以內(nèi)；(4)年齡在40歲以上，80歲以下者；(5)神經(jīng)心理學(xué)檢測(cè)：moca＜26分；19分(文盲組為17分)≤mmse評(píng)分≤26分(文盲組為24分)；臨床癡呆量表評(píng)分(cdr)0.5分、1分；(6)受試者知情并簽署知情同意書。1.3排除標(biāo)準(zhǔn)(l)短暫性腦缺血發(fā)作(tia)；(2)腦梗死ocsp分型中的全前循環(huán)梗死(taci)；(3)腦出血及蛛網(wǎng)膜下腔出血，腦腫瘤、腦外傷、血液病等引起的卒中患者；(4)發(fā)病超過14天；(5)因風(fēng)濕性心臟病、冠心病及其他心臟病合并房顫，引起腦栓塞者；(6)因嚴(yán)重視、聽功能障礙、失用、失語(yǔ)不能配合檢查者；(7)可影響認(rèn)知功能的其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病(如嚴(yán)重的帕金森病、正常顱壓腦積水、腦腫瘤、腦炎等)；(8)病情溝通困難者，精神疾患患者；(9)抑郁癥，漢密爾頓抑郁量表(hamd)評(píng)分≥17分；(10)過去6個(gè)月內(nèi)確定為酒精或藥物依賴者；(11)其他可引起認(rèn)知損害的疾病，如甲狀腺功能異常、嚴(yán)重貧血、梅毒、hiv等；(12)既往卒中病史且遺留嚴(yán)重后遺癥，不能配合神經(jīng)心理學(xué)檢查者；(13)有嚴(yán)重原發(fā)性疾病，不能依從上述方案者。2、研究方法干預(yù)組：內(nèi)科基礎(chǔ)治療+本發(fā)明中藥組合物(肉蓯蓉30g，益智仁12g，紅景天10g，遠(yuǎn)志10g，黃連6g)，每日2次，療程為90天，隨訪90天。對(duì)照組：內(nèi)科基礎(chǔ)治療。注意：不可使用其他具有親智能、神經(jīng)遞質(zhì)調(diào)節(jié)等作用的中西藥物。隨訪方案：每30天聯(lián)絡(luò)患者一次，進(jìn)行宣傳教育，強(qiáng)化依從性。于干預(yù)結(jié)束后第90天隨訪，結(jié)果填入隨訪觀察表。主要內(nèi)容包括一般情況、中醫(yī)癥狀、認(rèn)知功能測(cè)評(píng)、生存質(zhì)量評(píng)價(jià)、終點(diǎn)事件(癡呆，心、腦血管病相關(guān)事件)發(fā)生情況，病情惡化率等。3、療效評(píng)價(jià)指標(biāo)①總體認(rèn)知功能評(píng)價(jià)：蒙特利爾認(rèn)知評(píng)估(moca)(北京版)，簡(jiǎn)易精神狀態(tài)檢查(mmse)。對(duì)患者總體認(rèn)知功能、記憶力、定向力、執(zhí)行功能、語(yǔ)言、運(yùn)用、視空間和結(jié)構(gòu)能力等進(jìn)行評(píng)定。得分越低，認(rèn)知障礙程度越重。②日常生活能力綜合評(píng)定：日常生活能力量表(adl)、社會(huì)功能活動(dòng)問卷(faq)。日常能力減退是癡呆的核心癥狀之一。對(duì)于獨(dú)立生活所必需的能力，如穿衣、吃飯、如廁，以及復(fù)雜的日?；蛏鐣?huì)活動(dòng)能力，如外出、工作、家務(wù)能力等，進(jìn)行綜合評(píng)定?？梢苑从巢∏榈倪M(jìn)展，評(píng)價(jià)治療效果。得分越高，能力減退越重。③神經(jīng)功能缺損評(píng)定：美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院卒中量表(nihss)用于評(píng)定卒中后神經(jīng)功能缺損程度，分值越高，功能缺損越重。④中醫(yī)癥狀及證候觀察：中醫(yī)“呆病”核心癥狀、周邊癥狀。4、研究結(jié)果4.1總體認(rèn)知功能評(píng)價(jià)(mmse、moca)在訪視期第90天及第180天，干預(yù)組mmse總分、moca總分均高于入組時(shí)，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)；在訪視期第90天及第180天，干預(yù)組moca總分均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05，p＜0.01)，干預(yù)組mmse總分均高于對(duì)照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。見表1。結(jié)果表明：本發(fā)明所述中藥組合物能夠改善患者綜合認(rèn)知功能，患者能夠獲益。表1兩組患者mmse、moca總分比較注：組內(nèi)前后對(duì)照**p＜0.01；組間比較##p＜0.01，#p＜0.05。4.2癡呆轉(zhuǎn)化率以入組時(shí)moca總分21分為界，將患者分為moca總分≥21分及moca總分＜21分兩個(gè)組，對(duì)患者進(jìn)行分層評(píng)價(jià)療效。訪視期第90天，入組時(shí)moca總分≥21分的患者中，干預(yù)組癡呆轉(zhuǎn)化率為17.39％(4例)，對(duì)照組癡呆轉(zhuǎn)化率為18.18％(4例)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)入組時(shí)moca總分＜21分的患者中，干預(yù)組癡呆轉(zhuǎn)化率為68.18％(15例)，對(duì)照組癡呆轉(zhuǎn)化率為95.65％(22例)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)；訪視期第180天，入組時(shí)moca總分≥21分的患者中，干預(yù)組癡呆轉(zhuǎn)化率為17.39％(4例)，對(duì)照組癡呆轉(zhuǎn)化率為22.73％(5例)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。入組時(shí)moca總分＜21分的患者中，干預(yù)組癡呆轉(zhuǎn)化率為59.09％(13例)，對(duì)照組癡呆轉(zhuǎn)化率為95.65％(22例)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表2。表2兩組患者癡呆轉(zhuǎn)化率比較[例(％)]注：#p＜0.05；##p＜0.01。結(jié)果表明：對(duì)于入組時(shí)認(rèn)知功能損害相對(duì)較重的患者，本發(fā)明所述中藥組合物可以減緩認(rèn)知功能的惡化，降低癡呆轉(zhuǎn)化率，延緩病情向癡呆進(jìn)展，使患者獲益。4.3神經(jīng)功能缺損評(píng)定(nihss、改良rankin)nihss：①組內(nèi)比較，干預(yù)組、對(duì)照組在第90天及第180天，得分均低于入組時(shí)得分，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)；②組間比較，干預(yù)組在第90天、第180天，得分均低于對(duì)照組得分，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。具體見表3。改良rankin量表：①組內(nèi)比較，干預(yù)組、對(duì)照組在第90天及第180天，得分均低于入組時(shí)得分，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)；②組間比較，干預(yù)組在第90天及第180天，得分與對(duì)照組相近，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。具體見表3。表3兩組患者nihss、改良rankin總分比較注：組內(nèi)前后對(duì)照**p＜0.01結(jié)果表明：本發(fā)明所述中藥組合物可能在一定程度上改善卒中后患者神經(jīng)功能缺損，但目前尚無明確證據(jù)，可能與納入病例數(shù)較小有關(guān)，有待進(jìn)一步研究。4.4日常生活能力與社會(huì)功能(adl、faq)在第90天、第180天，干預(yù)組adl、faq評(píng)分均低于對(duì)照組，組間比較有顯著差異(p＜0.05，p＜0.01)見表4。表4兩組患者adl、faq總分比較注：組內(nèi)前后對(duì)照**p＜0.01，*p＜0.05；組間比較##p＜0.01，#p＜0.05。結(jié)果表明：本發(fā)明所述中藥組合物可以明顯提高患者日常生活能力及社會(huì)功能，提高患者生活質(zhì)量。5、中醫(yī)癥狀及證候觀察對(duì)“呆病”的15項(xiàng)中醫(yī)核心癥狀、29項(xiàng)周邊癥狀進(jìn)行了觀察分析，(15項(xiàng)核心癥狀：轉(zhuǎn)盼遺忘、多忘善誤、神思不聚、持籌握算差、多疑寡斷、言語(yǔ)懶、言語(yǔ)重復(fù)、言善誤、言辭貧乏、憂愁思慮、神情呆滯、表情淡漠、思維、反應(yīng)遲鈍、懶動(dòng)嗜臥、日間靜則瞌睡；29項(xiàng)周邊癥狀：形體肥胖、面色萎黃、口唇紫暗、頭重如裹、頭暈、失眠、多夢(mèng)、急躁易怒、視物模糊、雙目干澀、耳鳴、口渴、口苦、口臭、口黏膩、言語(yǔ)謇澀、咯痰、神疲、氣短、乏力、心悸、善太息、納差、腰膝酸軟/痛、肢倦身重、肢體疼痛、自汗、夜尿頻多、便干難解)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明所述中藥組合物對(duì)核心癥狀中“轉(zhuǎn)盼遺忘”、“神思不聚”、“言語(yǔ)懶”、“憂愁思慮”、“思維、反應(yīng)遲鈍”等癥狀改善明顯；周邊癥狀中多數(shù)癥狀改善明顯，其中神疲、乏力、頭重如裹、口臭、夜尿頻多、便干難解這幾項(xiàng)改善顯著。6、結(jié)論本發(fā)明所述中藥組合物可以改善認(rèn)知功能，提高日常生活能力、社會(huì)功能，提高患者生活質(zhì)量；減少癡呆轉(zhuǎn)化，延緩病情進(jìn)展；有效改善“轉(zhuǎn)盼遺忘”、“神思不聚”、“言語(yǔ)懶”、“憂愁思慮”、“思維、反應(yīng)遲鈍”，緩解神疲、乏力、頭重如裹、口臭、夜尿頻多、便干難解等癥狀。二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究1、動(dòng)物分組和給藥(1)動(dòng)物分組：健康雄性wistar大鼠，體重220-250g，隨機(jī)分為7組:正常組(control)、假手術(shù)組(sham)、模型組(model)、中藥低劑量組(生藥量1g/kg/d)、中藥中劑量組(生藥量3g/kg/d)、中藥高劑量組(生藥量6g/kg/d)、西藥對(duì)照組(尼麥角林片，nicergolineng7mg/kg/d)。術(shù)后每天灌胃給藥1次，連續(xù)6周。(2)實(shí)驗(yàn)藥物中藥組：肉蓯蓉30g，益智仁12g，紅景天10g，遠(yuǎn)志10g，黃連6g。對(duì)照藥：尼麥角林片，7mg/kg，臨用前用蒸餾水配至所需濃度。2、制備動(dòng)物模型應(yīng)用2-vo法制作血管性癡呆大鼠模型，其具體步驟如下：wistar大鼠，術(shù)前禁食12h，10％水合氯醛溶液(0.35ml/100g)腹腔注射麻醉。仰臥位固定于鼠板上，沿頸部中線正中切開，鈍性分離肌肉及結(jié)締組織，分離出雙側(cè)頸總動(dòng)脈并結(jié)扎，逐層縫合肌肉和皮膚。假手術(shù)組僅分離暴露雙側(cè)頸總動(dòng)脈而不結(jié)扎，余過程同前。實(shí)驗(yàn)過程中，所有因手術(shù)、麻醉等原因死亡，術(shù)后存活時(shí)間未達(dá)取材時(shí)間要求動(dòng)物，均不入組。3、行為學(xué)實(shí)驗(yàn)3.1morris水迷宮實(shí)驗(yàn)morris水迷宮(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所)是一個(gè)直徑170cm、高40cm的圓形水池。實(shí)驗(yàn)前確保池內(nèi)水溫在26±1℃，室內(nèi)的光線強(qiáng)度及參照物保持始終不變。將圓形水池等分為四個(gè)象限，一個(gè)高11cm的透明玻璃平臺(tái)放置在四個(gè)象限之一的中心，向水池內(nèi)注水，使水位的高度高于平臺(tái)1cm，在水內(nèi)撒入奶粉使大鼠不能看見平臺(tái)。利用olympus自動(dòng)攝像機(jī)(日本東京奧林巴斯有限公司)對(duì)大鼠游泳過程進(jìn)行跟蹤記錄。3.1.1定位航行試驗(yàn)本試驗(yàn)中逃避潛伏期作為評(píng)價(jià)大鼠學(xué)習(xí)和記憶能力的指標(biāo)。將大鼠面對(duì)水池放入水中，從平臺(tái)所在象限的相鄰及對(duì)面象限入水，入水點(diǎn)為每個(gè)象限的弧形邊緣1/2處。每天進(jìn)行2次試驗(yàn)，2次試驗(yàn)中間間隔15分鐘，連續(xù)進(jìn)行試驗(yàn)5天數(shù)據(jù)。從大鼠入水開始計(jì)時(shí)，找到隱匿平臺(tái)為止記作逃避潛伏期。連續(xù)訓(xùn)練大鼠5天后，記錄第6天的逃避潛伏期。每只大鼠限時(shí)120秒尋找平臺(tái)，找到平臺(tái)后允許在平臺(tái)上休息30秒，如果未能在120秒內(nèi)找到平臺(tái)，則逃避潛伏期記為120秒，由試驗(yàn)者將其引至平臺(tái)。數(shù)據(jù)采集及圖像分析均由圖像自動(dòng)監(jiān)視和處理系統(tǒng)完成。指標(biāo)：逃避潛伏期(評(píng)價(jià)大鼠空間學(xué)習(xí)和記憶能力)3.1.2空間探索試驗(yàn)定位航行試驗(yàn)5天試驗(yàn)完成后，于當(dāng)天立即進(jìn)行空間探索試驗(yàn)。簡(jiǎn)要試驗(yàn)過程為撤去水池中的平臺(tái)，讓大鼠自由游泳，入水點(diǎn)為平臺(tái)對(duì)側(cè)象限。120秒內(nèi)大鼠跨越平臺(tái)次數(shù)作為大鼠記憶功能的評(píng)價(jià)指標(biāo)。整個(gè)試驗(yàn)進(jìn)行2次，2次試驗(yàn)中間間隔15分鐘。指標(biāo)：跨越平臺(tái)次數(shù)(評(píng)價(jià)大鼠空間記憶能力)3.2跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)裝置為50cm×locm×60cm的反射箱。分隔成5間。底部鋪以可通電的銅柵，間距為0.5cm，電壓強(qiáng)度由變壓器控制。每問左角置一高度和直徑均為4.5cm的橡膠平臺(tái)。將大鼠放入反應(yīng)箱內(nèi)適應(yīng)環(huán)境3min后通以36v交流電，受到電擊后，大鼠跳到橡膠平臺(tái)上以躲避傷害性刺激，如大鼠跳下平臺(tái)，受到電刺激后會(huì)重新返回平臺(tái)。如此訓(xùn)練5min，大鼠可形成記憶，停留在平臺(tái)上。記錄每鼠受到電擊的次數(shù)或錯(cuò)誤次數(shù)(numberoferrors)，以此作為學(xué)習(xí)成績(jī)。24h后再次測(cè)試，先將大鼠放置在平臺(tái)上。記錄大鼠第1次跳下平臺(tái)的潛伏期和5min之內(nèi)跳下平臺(tái)受到電擊的次數(shù)(錯(cuò)誤次數(shù))。3.3穿梭箱實(shí)驗(yàn)使用大鼠穿梭程序自動(dòng)控制儀。先將動(dòng)物放入箱內(nèi)暗適應(yīng)5min，使其熟悉環(huán)境。實(shí)驗(yàn)程序?yàn)椋阂詿艄鉃闂l件刺激，電擊為非條件刺激。開始時(shí)給予持續(xù)燈光刺激5s，如大鼠不逃至另一端(穿梭)，則給予電擊(給箱底通電流3ma、頻率15hz的電刺激)，使動(dòng)物逃至箱底不通電的另一端，此時(shí)電擊停止，否則持續(xù)受電擊5s。間隔60s后再給予光刺激，開始下一輪訓(xùn)練。每次試驗(yàn)進(jìn)行20次光、電刺激。如大鼠在燈光刺激后即能完成穿梭動(dòng)作稱主動(dòng)回避反應(yīng)(activeavoidanceresponse，aar)；而經(jīng)電刺激后才能完成穿梭動(dòng)作稱被動(dòng)回避反應(yīng)(er)；不能完成穿梭動(dòng)作則認(rèn)為失敗(fail)。4.結(jié)果4.1本發(fā)明所述中藥組合物對(duì)vd大鼠水迷宮的影響在定位航行實(shí)驗(yàn)中，模型組大鼠的運(yùn)動(dòng)軌跡以邊緣式和隨機(jī)式為主，假手術(shù)組及各給藥組大鼠以直線式和趨向式為主，具體見圖1。在定位航行實(shí)驗(yàn)中，模型組平均平臺(tái)逃避潛伏期明顯延長(zhǎng)，尼麥角林和本發(fā)明所述中藥組合物高中低劑量組均可以縮短潛伏期時(shí)間(p＜0.01)。說明慢性缺血導(dǎo)致血管性癡呆組大鼠學(xué)習(xí)能力下降，而經(jīng)過本發(fā)明所述中藥組合物治療后，vd大鼠學(xué)習(xí)能力提高。結(jié)果見圖2a(其中，與假手術(shù)組相比，*p<0.05，**p<0.01；與模型組相比，#p<0.05，##p<0.01)?？臻g探索實(shí)驗(yàn)中，與假手術(shù)組比較，vd組大鼠跨越平臺(tái)次數(shù)明顯減少(p＜0.01)；與vd組比較，尼麥角林和本發(fā)明所述中藥組合物高劑量組大鼠跨越平臺(tái)次數(shù)增多，提示vd組大鼠存在記憶功能受損，本發(fā)明所述中藥組合物治療可改善vd大鼠記憶功能。結(jié)果見圖2b(其中，與假手術(shù)組相比，*p<0.05，**p<0.01；與模型組相比，#p<0.05，##p<0.01)。4.2本發(fā)明所述中藥組合物對(duì)vd大鼠跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)的影響在跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)中，模型組的學(xué)習(xí)成績(jī)錯(cuò)誤次數(shù)、記憶成績(jī)錯(cuò)誤次數(shù)明顯增多，潛伏期明顯縮短(與假手術(shù)組相比，p＜0.01)，尼麥角林和本發(fā)明所述中藥組合物高、中、低劑量組均可以降低錯(cuò)誤次數(shù)，延長(zhǎng)潛伏期(p＜0.01)。結(jié)果見表5。表5本發(fā)明所述中藥組合物對(duì)vd大鼠跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)的影響(n＝7)注：#與假手術(shù)組比較，p＜0.01；*與模型組比較，p＜0.01。4.3本發(fā)明所述中藥組合物對(duì)vd大鼠穿梭箱實(shí)驗(yàn)的影響在穿梭箱實(shí)驗(yàn)中，各組術(shù)前主動(dòng)回避反應(yīng)次數(shù)無明顯差異(p＞0.05)；術(shù)后6周，模型組的主動(dòng)回避反應(yīng)次數(shù)較正常組、假手術(shù)組明顯下降(p＜0.01)；尼麥角林和本發(fā)明所述中藥組合物高、中、低劑量組主動(dòng)回避反應(yīng)次數(shù)較模型組明顯增多(p＜0.01)。結(jié)果見表6。表6vd大鼠穿梭箱實(shí)驗(yàn)主動(dòng)回避反應(yīng)次數(shù)(n＝7)組別術(shù)前術(shù)后6周正常組17.6±2.118.1±1.4假手術(shù)組17.1±1.717.9±1.2模型組17.9±2.110.4±3.6#尼麥角林組18.1±2.314.1±3.8*中藥高劑量組17.6±1.915.7±2.9*中藥中劑量組17.3±1.813.4±2.7*中藥低劑量組18.0±1.914.2±3.4*注：#與假手術(shù)組比較，p＜0.01；*與模型組比較，p＜0.01。5、結(jié)論：各組行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示vd組大鼠存在學(xué)習(xí)、記憶功能受損，本發(fā)明所述中藥組合物治療可明顯提高vd大鼠學(xué)習(xí)、記憶能力。雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明及具體實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對(duì)之作一些修改或改進(jìn)，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。當(dāng)前第1頁(yè)12