本發(fā)明涉及制藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種復(fù)方板藍(lán)根注射液及其制備方法。

背景技術(shù)：

板藍(lán)根為十字花科植物菘藍(lán)干燥的根，系常用傳統(tǒng)中藥，具有清熱解毒，涼血利咽，消腫的功效，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，其具有較強(qiáng)的抗病毒、抗菌、抗內(nèi)毒素和免疫調(diào)節(jié)作用，可用于治療家畜流感、仔豬白痢、肺炎及某些發(fā)熱性疾患。

板藍(lán)根對(duì)流感病毒、柯薩奇病毒、疹病毒、乙型腦炎病毒等有顯著抑制作用，是公認(rèn)抗病毒中藥。其抗病毒作用體現(xiàn)在：能有效阻礙流感病毒核蛋白基因表達(dá)，抑制乙肝病毒核心抗原，滅活單純皰疹病毒-i(hsv-i)等，保護(hù)細(xì)胞免受病毒吸附，而抑制病毒感染。板藍(lán)根抗菌作用體現(xiàn)在：對(duì)金黃色葡萄球菌、肺炎雙球菌、溶血性鏈球菌、腦膜炎球菌、大腸埃希菌、痢疾桿菌等數(shù)十種細(xì)菌有顯著抗菌活性，能封閉宿主細(xì)胞上的細(xì)菌受體而阻止細(xì)菌侵襲。板藍(lán)根免疫調(diào)節(jié)作用體現(xiàn)在：能顯著增加動(dòng)物免疫器官指數(shù)、白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞總數(shù)，促進(jìn)抗體產(chǎn)生、調(diào)節(jié)細(xì)胞因子釋放，增強(qiáng)非特異性免疫和細(xì)胞免疫功能，這也提高了動(dòng)物抗病毒、細(xì)菌感染能力。板藍(lán)根既能直接破壞內(nèi)毒素結(jié)構(gòu)，也能阻斷內(nèi)毒素引起的信號(hào)傳導(dǎo)通路，抑制機(jī)體炎性因子的過(guò)度釋放，抑制膜結(jié)構(gòu)伸展刺突蛋白和絲裂原活化蛋白激酶的表達(dá)而削弱內(nèi)毒素毒性。

板藍(lán)根在畜禽疾病防治中廣泛應(yīng)用。在豬病臨床，板藍(lán)根注射液常用藥于防治豬流感、豬水泡性口炎、豬病毒性水瀉等疾病，有報(bào)道其對(duì)豬黃痢治愈率達(dá)95％以上。板藍(lán)根注射液用于防治犢牛腹瀉、牛腮腺炎、牛流行熱及羔羊痢疾、羊痘等，效果明顯。在豬、羊、牛、犬、貓等疾病防治的一個(gè)療程中，板藍(lán)根注射液需重復(fù)多次注射給藥，易造成血藥濃度出現(xiàn)明顯的“波峰波谷”，不利于抗病毒、抗菌及免疫調(diào)節(jié)等作用發(fā)揮，且頻繁注射捉抓動(dòng)物費(fèi)時(shí)費(fèi)力又易造成動(dòng)物應(yīng)激反而加重病情。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種見(jiàn)效快、療效好、無(wú)毒副作用的復(fù)方板藍(lán)根注射液。

本發(fā)明還提供了該復(fù)方板藍(lán)根注射液的制備方法。

本發(fā)明的目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一種復(fù)方板藍(lán)根注射液，是由以下重量份的原料制得的：板藍(lán)根100份、黃連9-13份、人面子5-8份、益母草4-6份、延胡索3-7份。

優(yōu)選的，一種復(fù)方板藍(lán)根注射液，是由以下重量份的原料制得的：板藍(lán)根100份、黃連11份、人面子7份、益母草5份、延胡索5份。

一種復(fù)方板藍(lán)根注射液的制備方法，是由以下步驟制得的：

1)取板藍(lán)根100份、黃連9-13份、人面子5-8份、益母草4-6份、延胡索3-7份，粉碎后過(guò)20-40目篩，得粉料；

2)加入8倍于粉料重量的水，鹽酸調(diào)ph值為2-4，在30-40℃下浸潤(rùn)5-6h，大火煮沸1-2h，60℃保溫1.5h，經(jīng)過(guò)濾、澄清、去渣，得藥液；

3)減壓濃縮：將藥液在60℃減壓濃縮至粉料重量的1.5-2倍，冷卻至55℃，邊攪拌邊緩慢加入乙醇，至溶液含醇量≥60％，靜置沉淀，過(guò)濾，得一次濾液；將一次濾液減壓濃縮至粉料重量的0.5-0.8倍，冷藏靜置沉淀，過(guò)濾，得二次濾液；將二次濾液加濃氨水調(diào)節(jié)ph值至7.8-8.2，冷藏靜置沉淀，過(guò)濾，得三次濾液；將三次濾液加熱去氨至ph值至5.5-6.0，冷藏靜置沉淀；再加水至溶液總量與粉料重量相同，得濾液；

4)將濾液加至反應(yīng)容器中，不斷攪拌下緩慢加入3重量份的聚山梨酯-80和3重量份的苯甲酸，攪拌溶解后加入1重量份的活性炭，攪拌10-20min，再吸附脫色15-30min后過(guò)濾，再加入注射用水至溶液總量為粉料重量的1.7-1.9倍；

5)將步驟4)最后得到的溶液采用無(wú)菌灌裝技術(shù)灌裝、封口，灌裝入潔凈的安瓿中；

6)將步驟5)中灌裝封口后的藥品在4h內(nèi)移至檢漏滅菌柜中滅菌檢漏，滅菌溫度為95-110℃，滅菌時(shí)間為25-40min。

所述的，過(guò)濾為微孔濾膜過(guò)濾器，其氣泡點(diǎn)壓力≥0.34mpa。

所述的，安瓿經(jīng)過(guò)如下處理：將安瓿放入安瓿洗瓶機(jī)內(nèi)用純化水進(jìn)行粗洗，將粗洗后的安瓿進(jìn)行重復(fù)三次以上的注水甩水精洗，再將精洗后的安瓿放入熱風(fēng)循環(huán)烘箱進(jìn)行烘瓶，烘瓶溫度為180℃，烘瓶時(shí)間為120min，烘瓶結(jié)束后待安瓿冷卻至40℃。

本發(fā)明復(fù)方板藍(lán)根注射液的用法用量：肌肉注射，一次量，家畜每1kg體重0.1-0.2ml，一日一次，連用2-3次。

本發(fā)明的有益效果：

1.本發(fā)明的復(fù)方板藍(lán)根注射液具有見(jiàn)效快、療效好、無(wú)毒副作用的特點(diǎn)，對(duì)家畜繁殖障礙呼吸道綜合癥、流感、鏈球菌、附紅細(xì)胞體等引起的無(wú)名高熱、高燒不退有較好的療效。

2.本發(fā)明的復(fù)方板藍(lán)根注射液可有效防止氧化，顯著提高抗菌作用，且退燒迅速，不反復(fù)，還可提高免疫力，增強(qiáng)食欲。

3.本發(fā)明的復(fù)方板藍(lán)根注射液使用量低，無(wú)毒副作用，同時(shí)用藥量大大減少，降低了藥物殘留，對(duì)確保食品的安全具有重要意義。

具體實(shí)施方式

以下列舉了若干實(shí)施例、對(duì)比例及實(shí)驗(yàn)例，通過(guò)這些來(lái)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了進(jìn)一步的解釋說(shuō)明，不可以理解為對(duì)發(fā)明的進(jìn)一步限制，本領(lǐng)域技術(shù)人員利用自己的專(zhuān)業(yè)知識(shí)均可以做出相應(yīng)的變化和修飾來(lái)完成本發(fā)明，這些也將落入本發(fā)明保護(hù)范圍。

本發(fā)明所用的水為純化水。

實(shí)施例1

一種復(fù)方板藍(lán)根注射液，是由以下重量份的原料制得的：板藍(lán)根100份、黃連13份、人面子5份、益母草4份、延胡索7份。

一種復(fù)方板藍(lán)根注射液的制備方法，是由以下步驟制得的：

1)取板藍(lán)根100份、黃連13份、人面子5份、益母草4份、延胡索7份，粉碎后過(guò)20目篩，得粉料；

2)加入8倍于粉料重量的水，鹽酸調(diào)ph值為4，在30℃下浸潤(rùn)6h，大火煮沸1h，60℃保溫1.5h，經(jīng)過(guò)濾、澄清、去渣，得藥液；

3)減壓濃縮：將藥液在60℃減壓濃縮至粉料重量的1.5倍，冷卻至55℃，邊攪拌邊緩慢加入乙醇，至溶液含醇量≥60％，靜置沉淀，過(guò)濾，得一次濾液；將一次濾液減壓濃縮至粉料重量的0.8倍，冷藏靜置沉淀，過(guò)濾，得二次濾液；將二次濾液加濃氨水調(diào)節(jié)ph值至7.8，冷藏靜置沉淀，過(guò)濾，得三次濾液；將三次濾液加熱去氨至ph值至5.5，冷藏靜置沉淀；再加水至溶液總量與粉料重量相同，得濾液；

4)將濾液加至反應(yīng)容器中，不斷攪拌下緩慢加入3重量份的聚山梨酯-80和3重量份的苯甲酸，攪拌溶解后加入1重量份的活性炭，攪拌10min，再吸附脫色30min后過(guò)濾，再加入注射用水至溶液總量為粉料重量的1.7倍；

5)將步驟4)最后得到的溶液采用無(wú)菌灌裝技術(shù)灌裝、封口，灌裝入潔凈的安瓿中；

6)將步驟5)中灌裝封口后的藥品在4h內(nèi)移至檢漏滅菌柜中滅菌檢漏，滅菌溫度為110℃，滅菌時(shí)間為25min。

所述的，過(guò)濾為微孔濾膜過(guò)濾器，其氣泡點(diǎn)壓力≥0.34mpa。

所述的，安瓿經(jīng)過(guò)如下處理：將安瓿放入安瓿洗瓶機(jī)內(nèi)用純化水進(jìn)行粗洗，將粗洗后的安瓿進(jìn)行重復(fù)三次以上的注水甩水精洗，再將精洗后的安瓿放入熱風(fēng)循環(huán)烘箱進(jìn)行烘瓶，烘瓶溫度為180℃，烘瓶時(shí)間為120min，烘瓶結(jié)束后待安瓿冷卻至40℃。

實(shí)施例2

一種復(fù)方板藍(lán)根注射液，是由以下重量份的原料制得的：板藍(lán)根100份、黃連11份、人面子7份、益母草5份、延胡索5份。

一種復(fù)方板藍(lán)根注射液的制備方法，是由以下步驟制得的：

1)取板藍(lán)根100份、黃連11份、人面子7份、益母草5份、延胡索5份，粉碎后過(guò)30目篩，得粉料；

2)加入8倍于粉料重量的水，鹽酸調(diào)ph值為3，在35℃下浸潤(rùn)5.5h，大火煮沸1.5h，60℃保溫1.5h，經(jīng)過(guò)濾、澄清、去渣，得藥液；

3)減壓濃縮：將藥液在60℃減壓濃縮至粉料重量的1.8倍，冷卻至55℃，邊攪拌邊緩慢加入乙醇，至溶液含醇量≥60％，靜置沉淀，過(guò)濾，得一次濾液；將一次濾液減壓濃縮至粉料重量的0.6倍，冷藏靜置沉淀，過(guò)濾，得二次濾液；將二次濾液加濃氨水調(diào)節(jié)ph值至8.0，冷藏靜置沉淀，過(guò)濾，得三次濾液；將三次濾液加熱去氨至ph值至5.8，冷藏靜置沉淀；再加水至溶液總量與粉料重量相同，得濾液；

4)將濾液加至反應(yīng)容器中，不斷攪拌下緩慢加入3重量份的聚山梨酯-80和3重量份的苯甲酸，攪拌溶解后加入1重量份的活性炭，攪拌15min，再吸附脫色20min后過(guò)濾，再加入注射用水至溶液總量為粉料重量的1.8倍；

5)將步驟4)最后得到的溶液采用無(wú)菌灌裝技術(shù)灌裝、封口，灌裝入潔凈的安瓿中；

6)將步驟5)中灌裝封口后的藥品在4h內(nèi)移至檢漏滅菌柜中滅菌檢漏，滅菌溫度為100℃，滅菌時(shí)間為35min。

其余同實(shí)施例1。

實(shí)施例3

一種復(fù)方板藍(lán)根注射液，是由以下重量份的原料制得的：板藍(lán)根100份、黃連9份、人面子8份、益母草6份、延胡索3份。

一種復(fù)方板藍(lán)根注射液的制備方法，是由以下步驟制得的：

1)取板藍(lán)根100份、黃連9份、人面子8份、益母草6份、延胡索3份，粉碎后過(guò)40目篩，得粉料；

2)加入8倍于粉料重量的水，鹽酸調(diào)ph值為2，在40℃下浸潤(rùn)5h，大火煮沸2h，60℃保溫1.5h，經(jīng)過(guò)濾、澄清、去渣，得藥液；

3)減壓濃縮：將藥液在60℃減壓濃縮至粉料重量的2倍，冷卻至55℃，邊攪拌邊緩慢加入乙醇，至溶液含醇量≥60％，靜置沉淀，過(guò)濾，得一次濾液；將一次濾液減壓濃縮至粉料重量的0.5倍，冷藏靜置沉淀，過(guò)濾，得二次濾液；將二次濾液加濃氨水調(diào)節(jié)ph值至8.2，冷藏靜置沉淀，過(guò)濾，得三次濾液；將三次濾液加熱去氨至ph值至6.0，冷藏靜置沉淀；再加水至溶液總量與粉料重量相同，得濾液；

4)將濾液加至反應(yīng)容器中，不斷攪拌下緩慢加入3重量份的聚山梨酯-80和3重量份的苯甲酸，攪拌溶解后加入1重量份的活性炭，攪拌20min，再吸附脫色15min后過(guò)濾，再加入注射用水至溶液總量為粉料重量的1.9倍；

5)將步驟4)最后得到的溶液采用無(wú)菌灌裝技術(shù)灌裝、封口，灌裝入潔凈的安瓿中；

6)將步驟5)中灌裝封口后的藥品在4h內(nèi)移至檢漏滅菌柜中滅菌檢漏，滅菌溫度為95℃，滅菌時(shí)間為40min。

其余同實(shí)施例1。

對(duì)比例1

一種注射液，是由以下步驟制得的：

1)取板藍(lán)根100份，粉碎后過(guò)30目篩，得粉料；

2)加入8倍于粉料重量的水，鹽酸調(diào)ph值為3，在35℃下浸潤(rùn)5.5h，大火煮沸1.5h，60℃保溫1.5h，經(jīng)過(guò)濾、澄清、去渣，得藥液；

3)減壓濃縮：將藥液在60℃減壓濃縮至粉料重量的1.8倍，冷卻至55℃，邊攪拌邊緩慢加入乙醇，至溶液含醇量≥60％，靜置沉淀，過(guò)濾，得一次濾液；將一次濾液減壓濃縮至粉料重量的0.6倍，冷藏靜置沉淀，過(guò)濾，得二次濾液；將二次濾液加濃氨水調(diào)節(jié)ph值至8.0，冷藏靜置沉淀，過(guò)濾，得三次濾液；將三次濾液加熱去氨至ph值至5.8，冷藏靜置沉淀；再加水至溶液總量與粉料重量相同，得濾液；

4)將濾液加至反應(yīng)容器中，不斷攪拌下緩慢加入3重量份的聚山梨酯-80和3重量份的苯甲酸，攪拌溶解后加入1重量份的活性炭，攪拌15min，再吸附脫色20min后過(guò)濾，再加入注射用水至溶液總量為粉料重量的1.8倍；

5)將步驟4)最后得到的溶液采用無(wú)菌灌裝技術(shù)灌裝、封口，灌裝入潔凈的安瓿中；

6)將步驟5)中灌裝封口后的藥品在4h內(nèi)移至檢漏滅菌柜中滅菌檢漏，滅菌溫度為100℃，滅菌時(shí)間為35min。

其余同實(shí)施例1。

對(duì)比例2

一種注射液，是由以下步驟制得的：

1)取黃連11份、人面子7份、益母草5份、延胡索5份，粉碎后過(guò)30目篩，得粉料；

2)加入8倍于粉料重量的水，鹽酸調(diào)ph值為3，在35℃下浸潤(rùn)5.5h，大火煮沸1.5h，60℃保溫1.5h，經(jīng)過(guò)濾、澄清、去渣，得藥液；

3)減壓濃縮：將藥液在60℃減壓濃縮至粉料重量的1.8倍，冷卻至55℃，邊攪拌邊緩慢加入乙醇，至溶液含醇量≥60％，靜置沉淀，過(guò)濾，得一次濾液；將一次濾液減壓濃縮至粉料重量的0.6倍，冷藏靜置沉淀，過(guò)濾，得二次濾液；將二次濾液加濃氨水調(diào)節(jié)ph值至8.0，冷藏靜置沉淀，過(guò)濾，得三次濾液；將三次濾液加熱去氨至ph值至5.8，冷藏靜置沉淀；再加水至溶液總量與粉料重量相同，得濾液；

4)將濾液加至反應(yīng)容器中，不斷攪拌下緩慢加入3重量份的聚山梨酯-80和3重量份的苯甲酸，攪拌溶解后加入1重量份的活性炭，攪拌15min，再吸附脫色20min后過(guò)濾，再加入注射用水至溶液總量為粉料重量的1.8倍；

5)將步驟4)最后得到的溶液采用無(wú)菌灌裝技術(shù)灌裝、封口，灌裝入潔凈的安瓿中；

6)將步驟5)中灌裝封口后的藥品在4h內(nèi)移至檢漏滅菌柜中滅菌檢漏，滅菌溫度為100℃，滅菌時(shí)間為35min。

其余同實(shí)施例1。

藥理學(xué)試驗(yàn)

試驗(yàn)動(dòng)物：試驗(yàn)所采用15-30kg自然患病并確診的病豬。品種為三元雜交種豬，且未經(jīng)任何藥物治療。

診斷標(biāo)準(zhǔn)：發(fā)病快，病豬體溫為41℃-42℃，稽留不退，食欲減退或廢絕，飲水減少，打盹，嗜睡，呼吸困難，咳嗽，有的鼻流清亮或膿性鼻液，尿液發(fā)黃，糞便先干后稀。部分患豬皮膚發(fā)紅，耳緣發(fā)紺、腹下和四肢末梢等身體多處皮膚也有紫色斑塊；病程長(zhǎng)的病豬膚色蒼白，被毛粗亂；部分病豬四肢無(wú)力走路搖晃，有的后肢不能站立。

通過(guò)實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)室血清學(xué)?？蓹z出藍(lán)耳病、豬瘟、流感、圓環(huán)，鏈球菌、傳染性胸膜肺炎、支原體等。

試驗(yàn)方法：將患病豬250頭，隨機(jī)分成5個(gè)實(shí)驗(yàn)組，每組50頭，分欄圈養(yǎng)。

各組對(duì)應(yīng)的治療藥物如下：

實(shí)驗(yàn)組1-3：分別使用本發(fā)明實(shí)施例1-3制備的復(fù)方板藍(lán)根注射液；

對(duì)照組1-2：分別使用對(duì)比例1-2制備的注射液。

以上各組實(shí)驗(yàn)豬，均按0.1ml/kg體重肌肉注射對(duì)應(yīng)的藥物，每天1次，連續(xù)3天。用藥后密切觀測(cè)療效情況，并為每頭豬建立個(gè)體檔案，用藥療程為3天，停藥后觀察3天。

試驗(yàn)在同一棟豬舍進(jìn)行，采用半敞開(kāi)式飼養(yǎng)，定時(shí)自由采食，自由飲水，飼料為豬場(chǎng)飼料車(chē)間自行配制的不含任何藥物的全價(jià)中豬料。

臨床療效的差異性分析用生物統(tǒng)計(jì)卡方檢驗(yàn)。

療效判斷標(biāo)準(zhǔn)

治愈：注射給藥3天后，試驗(yàn)豬精神狀態(tài)、食欲、呼吸、體溫各方面均恢復(fù)正常，停藥4天后無(wú)復(fù)發(fā)。治愈頭數(shù)占該組頭數(shù)的比例計(jì)算治愈率。

有效：注射給藥3天后試驗(yàn)豬精神狀態(tài)、食欲、呼吸、體溫等大部分癥狀恢復(fù)正常或基本恢復(fù)正常。有效頭數(shù)與治愈頭數(shù)之和為總有效頭數(shù)，根據(jù)總有效頭數(shù)占該組試驗(yàn)頭數(shù)的比例計(jì)算總有效率。

無(wú)效：注射給藥3天后試驗(yàn)豬幾乎所有的癥狀無(wú)好轉(zhuǎn)甚至惡化死亡者。根據(jù)無(wú)效頭數(shù)占該組試驗(yàn)頭數(shù)的比例計(jì)算無(wú)效率。

死亡：給藥期間和停藥后3天內(nèi)試驗(yàn)豬死亡者。

結(jié)果與分析：經(jīng)過(guò)3天用藥，停藥后觀察3天，各組治療豬高熱癥的試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1注射液的試驗(yàn)結(jié)果

注：*表示與對(duì)照組1和2相比，p<0.05，具有顯著性差異。

從表1可以看出，實(shí)驗(yàn)組1-3在治愈率和總有效率方面明顯高于對(duì)照組1和2，無(wú)效率明顯低于對(duì)照組1和2。

安全性試驗(yàn)

選用15-30kg健康的豬30頭，按本發(fā)明實(shí)施例2制備的復(fù)方板藍(lán)根注射液推薦給藥劑量的10倍量即1ml/kg體重肌肉注射，每天1次，連用3天，觀察豬的體溫、呼吸等生理指標(biāo)，有無(wú)不良反應(yīng)，以評(píng)價(jià)藥物的安全性。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，未見(jiàn)有明顯的不良反應(yīng)，說(shuō)明本發(fā)明的復(fù)方板藍(lán)根注射液臨床推薦劑量安全。

以上所述僅為本發(fā)明的實(shí)施例，并非因此限制本發(fā)明的專(zhuān)利范圍，凡是利用本發(fā)明說(shuō)明書(shū)內(nèi)容所作的等效結(jié)構(gòu)或等效流程變換，或直接或間接運(yùn)用在其他相關(guān)的技術(shù)領(lǐng)域，均同理包括在本發(fā)明的專(zhuān)利保護(hù)范圍內(nèi)。