本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，特別是涉及一種祛毒提效及抗氧化的亞麻籽制劑及其制備方法。

背景技術(shù)：

隨著科技的進(jìn)步和發(fā)展，人們的生活節(jié)奏日漸加快，處于激烈競(jìng)爭(zhēng)中的人群中有很多人出現(xiàn)情緒緊張、易怒、心情郁悶、頭痛、易疲勞、記憶力下降、失眠多夢(mèng)、食欲不振、皮膚干燥等癥狀，但通過體征和化驗(yàn)檢查無異常。處在非健康、非患病的中間狀態(tài)，又被稱為亞健康。造成亞健康的原因是多方面的，過度緊張和壓力、不良生活方式和習(xí)慣、環(huán)境污染的不良影響、不良精神和心理因素刺激等都能導(dǎo)致亞健康狀態(tài)的發(fā)生。亞健康所導(dǎo)致的危害也不容忽視。大多數(shù)惡性腫瘤、心腦血管疾病和糖尿病等疾病是由亞健康狀態(tài)轉(zhuǎn)化而成。機(jī)體處于亞健康狀態(tài)時(shí)會(huì)影響正常的生活、學(xué)習(xí)及工作，且心理亞健康容易導(dǎo)致心理疾病，甚至造成抑郁癥。機(jī)體不正常代謝會(huì)產(chǎn)生大量的超氧自由基，當(dāng)超氧自由基的數(shù)量超過體內(nèi)抗氧化防御能力時(shí)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞損傷，此時(shí)機(jī)體則處于氧化應(yīng)激態(tài)。氧化應(yīng)激是活性氧(ros)的產(chǎn)生和細(xì)胞抗氧化能力的失衡引起的，氧化應(yīng)激與疾病有顯著的直接關(guān)系，可導(dǎo)致亞健康甚至疾病的發(fā)生。清除體內(nèi)的超氧自由基是人體抗氧化防御系統(tǒng)的重要作用，主要依靠各種清除自由基的酶和抗氧化劑。外源性的抗氧化劑可參與基本生命過程中的許多氧化還原鏈，介導(dǎo)和調(diào)節(jié)體內(nèi)新陳代謝，細(xì)胞分化等重要生理過程。

膳食中的抗氧化物質(zhì)可分為三類：⑴、營(yíng)養(yǎng)素類。包括維生素a、β-胡蘿卜素、維生素e、維生素c及硒、鋅、銅、錳等；⑵、非營(yíng)養(yǎng)素類。例如類胡蘿卜素、生物類黃酮、植物甾醇類、酚類物質(zhì)、葉綠素、單寧等；⑶、其他類。例如包括bha、bht、pg、tbhq的食品添加劑，食品強(qiáng)化劑和營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑。維生素c，又名抗壞血酸，是一種強(qiáng)的還原劑,因此具有多種生理功能。它可使細(xì)胞色素c、a及分子氧還原與一些金屬離子鰲合，增加某些金屬酶的活性。另外，維生素c參與輕化反應(yīng)是體內(nèi)許多重要物質(zhì)合成或分解的必要步驟，例如促膠原和神經(jīng)遞質(zhì)等的合成、促進(jìn)類固醇的輕化、促進(jìn)有機(jī)物或毒物輕化解毒等。vc還可以直接或間接清除自由基,保護(hù)生物膜的完整性。亞麻籽又稱胡麻籽，為亞麻科植物亞麻的種子，是一種優(yōu)良的油料作物。從亞麻籽中獲得的油被稱為亞麻油，亞麻油中不飽和脂肪酸含量達(dá)80％以上，α-亞麻酸含量為40％-60％，為其它植物油的5-100倍。α-亞麻酸系ω-3多不飽和脂肪酸，是人體必需脂肪酸，在人體生理代謝中起著重要的作用。經(jīng)研究，經(jīng)常食用亞麻籽油能夠顯著降低血清血脂、抑制腫瘤生長(zhǎng)，可用于治療高血脂癥、結(jié)腸癌、乳腺癌，抗動(dòng)脈粥樣硬化，抗心律失常，降低患糖尿病的風(fēng)險(xiǎn)。在亞麻籽中還含有大量的植物雌激素亞麻木酚素，亞麻木酚素是苯丙類物質(zhì)的代謝中間產(chǎn)物，具有雌激素活性、抗氧化活性和增強(qiáng)免疫力的作用。亞麻籽富含的木酚素主要是開環(huán)異落葉松樹脂酚(seco)，通常以開環(huán)異落葉松樹脂酚二葡萄糖苷(sdg)的形式存在，另外還含有少量的鳥臺(tái)樹脂酚(mat)。糖醇類從化學(xué)結(jié)構(gòu)上可分為單糖類、二糖類、三糖類、四糖類等，但均為低分子碳水化合物。其中，五碳糖和六碳糖促進(jìn)氧化，果糖和糖醇具有較強(qiáng)的抗氧化能力，而在食品中作為抗氧化劑廣泛被采用的糖醇為木糖醇、麥芽糖醇和山梨糖醇。

目前，已經(jīng)開發(fā)了一些具有抗氧化功能的食品或保健品。例如中國(guó)專利申請(qǐng)cn201310489756a公開了一種具有抗氧化功能的保健食品，原料重包括雨生紅球藻、葡萄皮提取物、大豆卵磷脂、紅花、谷維素、亞麻籽等，該食品可以提高血清中sod、t-aoc和gsh-px，減少h2o2含量，能夠清除體內(nèi)自由基，具有一定的抗氧化作用。cn201010258275公開了一種一氧化氮增強(qiáng)劑及其應(yīng)用，屬于功能性食品技術(shù)領(lǐng)域，其特征是，所述一氧化氮增強(qiáng)劑由如下重量比例的原料組成：l-精氨酸3～10g，l-瓜氨酸0.1～2g，葉酸0.1～2mg，茶多酚20～800mg，輔酶q1020～200mg，植物甾醇0.4～3.2g，亞麻籽粉2～20g。cn201410107826公開了一種具有高效抗氧化功能的翅果油復(fù)方制劑，含有下列物質(zhì)：50-80重量份的翅果油，3-6重量份的亞麻籽油，2-10重量份的維生素a，5-20重量份的β-胡蘿卜素，5-15重量份的番茄紅素。

現(xiàn)有技術(shù)中公開的抗氧化制劑雖然具有一定的抗氧化效果，但是往往成分較多，相互影響因素復(fù)雜，不利于制劑的制備和貯存。因此，仍然需要開發(fā)原料簡(jiǎn)單、穩(wěn)定性好的具有抗氧化作用的制劑。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種原料簡(jiǎn)單、穩(wěn)定性好的亞麻籽自乳化粉劑，該制劑具有祛毒提效和顯著的抗氧化作用，可用于調(diào)理機(jī)體功能、增強(qiáng)人體免疫力、促進(jìn)人體新陳代謝，并且長(zhǎng)期服用無任何毒副作用，具有很好的保健效果。

為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明通過以下的技術(shù)方案得以實(shí)施。

在本發(fā)明的第一方面，提供了一種亞麻籽自乳化組合物，其特征在于包含亞麻籽提取物、維生素c、木糖醇、乳化劑、加工助劑和防腐劑。

研究已證實(shí)，亞麻籽具有抗癌、降血脂、降血糖、治療心血管疾病等多種功效，而亞麻也是我國(guó)總產(chǎn)較高的經(jīng)濟(jì)作物之一，因此亞麻籽在醫(yī)藥保健領(lǐng)域的利用具有良好的開發(fā)前景。亞麻籽除含有豐富的油脂和蛋白質(zhì)之外，還含有較高的食用纖維、礦物質(zhì)、各位維生素以及酚酸類、黃酮、植酸、卵磷脂等營(yíng)養(yǎng)成分。但是，目前已確認(rèn)有醫(yī)藥保健功效的亞麻籽有效部位包括亞麻籽油和亞麻木酚素。但是，現(xiàn)有技術(shù)中多是將亞麻籽油和亞麻木酚素單獨(dú)應(yīng)用于醫(yī)藥保健品中，而沒有對(duì)兩者的復(fù)方進(jìn)行研究。本申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)，將亞麻籽油和亞麻木酚素以特定的比例混合后可顯著提高抗氧化能力，具有一定的協(xié)同和增效作用。因此，在本發(fā)明中，亞麻籽提取物為亞麻籽油和亞麻木酚素，兩者的重量比優(yōu)選為2-5：1，更優(yōu)選為3.25：1。

此外，申請(qǐng)人還發(fā)現(xiàn)，在亞麻籽油和亞麻木酚素的基礎(chǔ)之上進(jìn)一步添加維生素c和木糖醇，可更加顯著地提高抗氧化協(xié)同效果。因此，在本發(fā)明的更加優(yōu)選的實(shí)施方式中，亞麻籽自乳化組合物包含亞麻籽油5-20重量％，亞麻木酚素1-8重量％，維生素c0.5-5重量％，木糖醇1-5重量％，乳化劑0.2-10重量％、加工助劑0.2-15重量％和防腐劑0.1-2.5重量％。

微乳是由油相、水相和乳化劑及加工助劑組成的光學(xué)上均一、熱力學(xué)及動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定的體系。作為藥物載體，其具有以下優(yōu)點(diǎn)：①水包油型微乳可作為疏水性藥物的載體，油包水型微乳可延長(zhǎng)水溶性藥物的釋放時(shí)間，起到緩釋作用；②低黏度，注射時(shí)不會(huì)引起疼痛；③藥物分散性好，吸收迅速，可提高生物利用度；④對(duì)于易水解的藥物，采用油包水型微乳可起到保護(hù)的作用。微乳口服后可經(jīng)淋巴管吸收，從而克服了首過效應(yīng)以及大分子通過胃腸道上皮細(xì)胞膜時(shí)的障礙。微乳室溫下易于制備，對(duì)水溶性和脂溶性藥物都有溶解能力且具有較高的物理穩(wěn)定性，因表面張力較低而易于通過胃腸壁的水化層，使藥物能直接和胃腸上皮細(xì)胞接觸，促進(jìn)藥物的吸收，增加藥物的生物利用度。但是，微乳屬于熱力學(xué)不穩(wěn)定體系，在滅菌和貯存過程中的穩(wěn)定性差，大大影響其品質(zhì)和效果。自乳化藥物傳遞系統(tǒng)口服后在胃液的水相里，由于胃蠕動(dòng)和乳化劑的存在自發(fā)形成水包油型乳劑。與普通的微乳相比，該體系屬于熱力學(xué)穩(wěn)定體系，工藝簡(jiǎn)單，性質(zhì)穩(wěn)定，便于貯存。

亞麻籽油是由亞麻籽經(jīng)過壓榨制取的油類，不溶于水；而亞麻木酚素(又名開環(huán)異落葉松樹脂酚二葡萄糖苷，sdg)為無色晶體，可溶于水、甲醇、含水乙醇和丙醇，易被酶或酸水解。為了將亞麻籽油和亞麻木酚素同時(shí)制備成穩(wěn)定地、易于吸收的制劑，本發(fā)明將亞麻籽油和亞麻木酚素利用自微乳技術(shù)制成了自微乳制劑，其在胃液中自發(fā)形成微乳，通過增加比表面積使活性成分在胃腸道中被充分吸收，從而提高活性成分的生物利用度。由于亞麻籽油本身也是一種良好的油相載體成分，因此亞麻籽油在本發(fā)明中既具有抗氧化活性，又兼具油相載體的作用，從而大大減少了其它油相輔料的用量，避免了輔料過多帶來的潛在毒副作用。

將特定的活性成分制成分布均勻、穩(wěn)定性良好的微乳制劑，需要對(duì)乳化劑和加工助劑進(jìn)行嚴(yán)格的選擇。本申請(qǐng)人經(jīng)過大量研究最終發(fā)現(xiàn)，適用于本發(fā)明亞麻籽自乳化組合物的乳化劑優(yōu)選選自聚氧乙烯氫化蓖麻油、卵磷脂和吐溫80中的一種或多種；加工助劑優(yōu)選選自甘油、peg400和正丁醇中的一種或多種；防腐劑優(yōu)選選自對(duì)羥基苯甲酸丁酯、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、對(duì)羥基苯甲酸甲酯中的一種或多種。

在本發(fā)明的另一方面，進(jìn)一步提供了上述亞麻籽自乳化組合物的粉劑形式。該粉劑包含前文提及的自乳化組合物和藥學(xué)上可接受的賦形劑。所述藥學(xué)上可接受的賦形劑優(yōu)選選自乳糖、蔗糖、甘露醇和山梨醇中的一種或多種。

最優(yōu)選地，本發(fā)明亞麻籽自乳化粉劑的原料由以下成分組成：粉劑原料由以下成分組成：亞麻籽油13.0重量％，亞麻木酚素4.0重量％，維生素c2.5重量％，木糖醇2.0重量％，吐溫808.0重量％，甘油11.5重量％，對(duì)羥基苯甲酸甲酯0.15重量％和乳糖58.85重量％。

另外，本發(fā)明還提供了上述亞麻籽自乳化組合物的制備方法，包括以下步驟：將乳化劑、加工助劑在30-45℃加熱混合均勻，然后加入亞麻籽油、亞麻木酚素、木糖醇、維生素c、防腐劑，攪拌混合均勻，冷卻至室溫，即形成濃縮油乳。為將所述的亞麻籽自乳化組合物進(jìn)一步制成粉劑，從而穩(wěn)定性更好、便于運(yùn)輸和攜帶，可采用包括以下步驟的方法制備：將乳化劑、加工助劑在30-45℃加熱混合均勻，然后加入亞麻籽油、亞麻木酚素、木糖醇、維生素c、防腐劑，攪拌混合均勻，冷卻至室溫，即形成濃縮油乳，然后加入藥學(xué)上可接受的賦形劑，混合形成粉末，即得。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的亞麻籽自乳化組合物具有以下優(yōu)點(diǎn)：⑴將亞麻籽油和亞麻木酚素以特定的比例混合后可顯著提高抗氧化能力，具有一定的協(xié)同和增效作用，進(jìn)一步添加維生素c和木糖醇，可更加顯著地提高抗氧化協(xié)同效果。⑵將亞麻籽油和亞麻木酚素等活性成分制成自微乳后可提高活性成分的生物利用度和穩(wěn)定性，進(jìn)一步與載體均勻混合后得到的粉劑，可方便服用、掩味不良?xì)馕叮曳€(wěn)定性進(jìn)一步得到提高；⑶本發(fā)明的亞麻籽油兼具抗氧化活性和油相載體的作用，大大減少了其它油相輔料的用量，避免了輔料過多帶來的潛在毒副作用。⑷本發(fā)明亞麻籽粉劑的制備方法簡(jiǎn)單，原料易得，自微乳在水中形成的微乳液粒徑范圍為20-40nm，且外觀均勻、穩(wěn)定性好。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明給出下面的實(shí)施例來進(jìn)一步說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于這些實(shí)施例。

實(shí)施例1

亞麻籽自乳化粉劑配方：亞麻籽油13重量％，亞麻木酚素4重量％，維生素c2.5重量％，木糖醇2.0重量％，吐溫808.0重量％，甘油11.5重量％，對(duì)羥基苯甲酸甲酯0.15重量％和乳糖58.85重量％。

制備步驟：將吐溫80、甘油在35℃加熱混合均勻，然后加入亞麻籽油、亞麻木酚素、木糖醇、維生素c、對(duì)羥基苯甲酸甲酯，攪拌混合均勻，冷卻至室溫，即形成濃縮油乳，然后加入乳糖，混合形成粉末，即得。將該粉劑在37℃的500ml水中完全分散至成外觀均勻、澄明的液體，經(jīng)檢測(cè)微乳粒徑為26.2nm。

實(shí)施例2

亞麻籽自乳化粉劑配方：亞麻籽油8.0重量％，亞麻木酚素4.0重量％，維生素c4.5重量％，木糖醇4.0重量％，聚氧乙烯氫化蓖麻油5.0重量％，正丁醇8.0重量％，對(duì)羥基苯甲酸乙酯2.0重量％和山梨醇64.5重量％。

制備步驟：將聚氧乙烯氫化蓖麻油、正丁醇在40℃加熱混合均勻，然后加入亞麻籽油、亞麻木酚素、木糖醇、維生素c、對(duì)羥基苯甲酸乙酯，攪拌混合均勻，冷卻至室溫，即形成濃縮油乳，然后加入山梨醇，混合形成粉末，即得。將該粉劑在37℃的500ml水中完全分散至成外觀均勻、澄明的液體，經(jīng)檢測(cè)微乳粒徑為26.7nm。

實(shí)施例3

亞麻籽自乳化粉劑配方：亞麻籽油18.0重量％，亞麻木酚素3.6重量％，維生素c1.8重量％，木糖醇2.6重量％，吐溫806.4重量％，卵磷脂3.6重量％，peg40012.0重量％，對(duì)羥基苯甲酸丁酯1.2重量％，蔗糖25.0質(zhì)量％和甘露醇25.8重量％。

制備步驟：將吐溫80、卵磷脂、peg400在30℃加熱混合均勻，然后加入亞麻籽油、亞麻木酚素、木糖醇、維生素c、對(duì)羥基苯甲酸丁酯，攪拌混合均勻，冷卻至室溫，即形成濃縮油乳，然后加入蔗糖和甘露醇，混合形成粉末，即得。將該粉劑在37℃的500ml水中完全分散至成外觀均勻、澄明的液體，經(jīng)檢測(cè)微乳粒徑為26.5nm。

對(duì)比例1-7

對(duì)比例1：參照實(shí)施例1的處方和方法制備，但是亞麻籽油的含量為17重量％，且不含亞麻木酚素。

對(duì)比例2：參照實(shí)施例1的處方和方法制備，但是用玉米油替換亞麻籽油。

對(duì)比例3：參照實(shí)施例1的處方和方法制備，但是亞麻籽油的含量為8.5重量％，亞麻木酚素的含量為8.5重量％。

對(duì)比例4：參照實(shí)施例1的處方和方法制備，但是亞麻籽油的含量為14.6重量％，亞麻木酚素的含量為2.4重量％。

對(duì)比例5：參照實(shí)施例1的處方和方法制備，但是不含維生素c和木糖醇。

對(duì)比例6：參照實(shí)施例1的處方和方法制備，但是用十二烷基硫酸鈉替換聚氧乙烯氫化蓖麻油。

對(duì)比例7：參照實(shí)施例1的處方和方法制備，但是用乙醇替換甘油。

試驗(yàn)例1：體外抗氧化活性研究

1、試驗(yàn)方法：

dpph自由基清除能力研究：稱取1,1-二苯基-2-三硝基苯阱(dpph)試劑3.5mg，用乙醇溶解，制備成濃度為0.018mmol/l的貯備液，冷藏備用；取實(shí)施例1-3和對(duì)比例1-7的粉劑，溶解于適量乙醇，制備成濃度為0.03mmol/l的樣品溶液；在比色管中依次加入dpph貯備液和樣品溶液，用乙醇定容，混勻后在517nm波長(zhǎng)處立即測(cè)定吸光值(a1)，混合液室溫避光保存30min后再次測(cè)定吸光值(a2)，空白對(duì)照品只加dpph貯備液，測(cè)定其吸光值為a0，按照下列公式計(jì)算自由基清除率k(％)＝[1-(a1-a2)/a0]×100％。

羥自由基清除能力研究：參照fenton反應(yīng)的方法建立反應(yīng)體系，依次加入pbs緩沖液(ph＝7.4)、鄰菲羅啉無水乙醇(0.75mmol/l)、去離子水、硫酸亞鐵溶液(0.75mmol/l)、雙氧水(0.01％)以及取實(shí)施例1-3和對(duì)比例1-7的粉劑溶解于適量乙醇后制備的樣品溶液。反應(yīng)體系置于37℃恒溫水浴鍋中，反應(yīng)1.5h后立即取出并在536nm處測(cè)定吸光度。其中，不加雙氧水(0.01％)和樣品溶液的吸光度記為a0，不加樣品溶液的吸光度記為a1，加雙氧水(0.01％)和樣品溶液的吸光度記為a2。按照下列公式計(jì)算羥自由基清除率i(％)＝(a2-a1)/a0×100％。

超氧自由基清除能力研究：取實(shí)施例1-3和對(duì)比例1-7的粉劑溶解于適量乙醇后，取0.1ml加入適量0.1mol/l的tris-hcl緩沖溶液(ph＝8.2)，空白對(duì)照管以蒸餾水代替樣品，振蕩混勻，在25℃水浴保溫10min后加入0.1ml的3mmol/l鄰苯三酚溶液，迅速混勻并在325nm處測(cè)定吸光度。按照下列公式計(jì)算超氧自由基清除率l(％)＝(a對(duì)照-a樣品)/v對(duì)照×100％。

2、試驗(yàn)結(jié)果

表1各組的自由基清除能力試驗(yàn)結(jié)果(x±s)

結(jié)果表明，本發(fā)明實(shí)施例1-3和對(duì)比例1-7的微乳液對(duì)dpph自由基、羥自由基和超氧自由基均有一定的清除能力。但是，與活性成分及其用量不在本發(fā)明范圍內(nèi)的對(duì)比例1-5相比，本發(fā)明實(shí)施例1-3對(duì)各種自由基的清除率顯著要高，表明本發(fā)明的活性物質(zhì)組成具有更佳的抗氧化活性。

試驗(yàn)例2：穩(wěn)定性研究

1、試驗(yàn)方法：采用恒溫加速試驗(yàn)法考察本發(fā)明實(shí)施例1-3和對(duì)比例1-7粉劑的穩(wěn)定性。將各組的粉劑分別于40℃、60℃以及相對(duì)濕度為75％的條件下保存，分別于10d后在37℃的500ml水中完全分散，考察微乳液的外觀、粒徑。

表2各組加速穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明，本發(fā)明實(shí)施例1-3的粉劑和對(duì)比例1-7的粉劑相比，加速試驗(yàn)后制劑穩(wěn)定性更好，且乳化劑、組乳化劑的種類對(duì)粉劑的穩(wěn)定性影響較大。

另外，將本發(fā)明實(shí)施例1-3的粉劑置于常溫下保存6個(gè)月后，分散于水中所形成的微乳液澄清透明，主藥含量和粒徑均無明顯變化，表明本發(fā)明粉劑的長(zhǎng)期穩(wěn)定性好。