背景技術(shù)：

1、bag3通過增強(qiáng)自噬和減少細(xì)胞凋亡來調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的質(zhì)量控制，從而在心臟中發(fā)揮關(guān)鍵作用。最近，申請人發(fā)現(xiàn)了一組僅在非洲血統(tǒng)的個體中發(fā)現(xiàn)的bag3的功能性突變，這些突變導(dǎo)致死亡或需要住院治療的心力衰竭惡化的風(fēng)險(xiǎn)增加了近2倍。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的實(shí)施方案是針對腦、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)疾病或失調(diào)(包括創(chuàng)傷性損傷)中的bag3蛋白質(zhì)的質(zhì)量控制。例如，包括但不限于帕金森病、阿爾茨海默病和并發(fā)慢性創(chuàng)傷性腦病的創(chuàng)傷性腦損傷。

2、本發(fā)明的實(shí)施方案可以在沒有提出理論方面的情況下實(shí)施。此外，在介紹理論方面時，申請人并不尋求受到所介紹理論的約束。

3、本文所公開的所有基因、基因名稱和基因產(chǎn)物均意在與本文所公開的組合物和方法所適用的任何物種的同源物相對應(yīng)。因此，這些術(shù)語包括但不限于來自人類和小鼠的基因和基因產(chǎn)物。不言而喻，當(dāng)公開了特定物種的基因或基因產(chǎn)物時，該公開僅是示例性的，除非在上下文中有明確說明，否則不應(yīng)將其解釋為限制。因此，舉例來說，本文所公開的基因，在某些實(shí)施方案中涉及哺乳動物的核酸和氨基酸序列，其目的是包括來自其他動物的同源和/或直系基因和基因產(chǎn)物，包括但不限于其他哺乳動物、魚類、兩棲動物、爬行動物和鳥類。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，基因或核酸序列是人類的。

4、定義

5、本文所使用的術(shù)語僅用于描述特定的實(shí)施方案，而無意限制本發(fā)明。本文所用的單數(shù)形式“一”、“一個”和“該”也包括復(fù)數(shù)形式，除非上下文另有明確說明。此外，在詳細(xì)描述和/或權(quán)利要求中使用術(shù)語“包含”、“含有”、“具有”、“有”、“帶有”或其變體時，這些術(shù)語意在以類似于術(shù)語“包括”的方式包含在內(nèi)。

6、本文所用的“bag3”、“bag3分子”、“bcl2-相關(guān)永生基因3(bag3)基因”、“bcl2-相關(guān)永生基因3(bag3)分子”包括所有家族成員、突變體、cdna序列、等位基因、片段、物種、編碼和非編碼序列、有義和反義多核苷酸鏈等。(hgnc(939)entrez?gene(9531)ensembl(ensg00000151929)omim(603883)uniprotkb(095817))。類似地，“bag3”、“bag3分子”、“bcl2-相關(guān)永生基因3(bag3)分子”也指bag3多肽或其活性片段、蛋白質(zhì)、變體、衍生物等。因此，術(shù)語“分子”包括bag3的核酸序列和氨基酸序列。

7、本文使用的術(shù)語“包括”、“包含”或“含有”及其變體，在提及項(xiàng)目、組合物、裝置、方法、過程、系統(tǒng)等的定義或描述的元素時，意指具有包容性或開放性，允許包含其他元素，從而表明定義或描述的項(xiàng)目、組合物、裝置、方法、過程、系統(tǒng)等包括這些指定的元素--或酌情包括其等價物--并且可以包含其他元素，且仍屬于并落入項(xiàng)目、組合物、裝置、方法、過程、系統(tǒng)等的范圍/定義之內(nèi)。

8、術(shù)語“大約”或“近似”是指在本領(lǐng)域普通技術(shù)人員確定的特定數(shù)值的可接受誤差范圍內(nèi)，該誤差范圍取決于數(shù)值的測量或確定方式，即測量系統(tǒng)的局限性。例如，根據(jù)本領(lǐng)域的慣例，“大約”可以指1個或1個以上的標(biāo)準(zhǔn)偏差?？蛇x地，“大約”也可以是指在給定值的20％以內(nèi)，優(yōu)選地10％以內(nèi)，更優(yōu)選地5％以內(nèi)，更優(yōu)選地1％以內(nèi)?？蛇x地，特別是在生物系統(tǒng)或過程方面，該術(shù)語可以指在一個數(shù)量級內(nèi)，優(yōu)選在數(shù)值的5倍以內(nèi)，更優(yōu)選2倍以內(nèi)。在本申請和權(quán)利要求書中描述特定值的情況下，除非另有說明，否則應(yīng)假定術(shù)語“約”意指在特定值的可接受誤差范圍內(nèi)。

9、“可選”或“可選地”是指隨后描述的情況可能發(fā)生，也可能不發(fā)生，這樣描述就包括了該情況發(fā)生的實(shí)例和不發(fā)生的實(shí)例。

10、本文所用術(shù)語“表達(dá)載體”是指一種含有編碼至少部分能夠被轉(zhuǎn)錄的基因產(chǎn)物的核酸序列的載體。在某些情況下，然后rna分子會被翻譯成蛋白質(zhì)、多肽或肽。在其他情況下，例如在生產(chǎn)反義分子、sirna、核酶等時，這些序列不會被翻譯。表達(dá)載體可以包含各種控制序列，控制序列是指在特定宿主生物體中轉(zhuǎn)錄和可能翻譯可操作連接的編碼序列所必需的核酸序列。除了控制轉(zhuǎn)錄和翻譯的控制序列外，載體和表達(dá)載體還可包含具有其他功能的核酸序列。

11、重組病毒載體"是指包含一種或多種異源基因產(chǎn)物或序列的病毒載體。由于許多病毒載體都存在與包裝相關(guān)的尺寸限制，因此通常通過替換病毒基因組的一個或多個部分來引入異源基因產(chǎn)物或序列。這種病毒可能會出現(xiàn)復(fù)制缺陷，需要在病毒復(fù)制和封裝期間中瞬時(in?trans)提供被刪除的功能(例如，通過利用輔助病毒或攜帶復(fù)制和/或封裝所必需的基因產(chǎn)品的封裝細(xì)胞系)。也有人描述了將要遞送的多核苷酸攜帶在病毒顆粒的外部的修飾病毒載體(參考，例如curiel,d?t,et?al.,pnas?88:8850-8854,1991)。

12、術(shù)語“調(diào)節(jié)”是指本文所描述的化合物的任何提及的活性，例如增加、增強(qiáng)、提高、激活(作為激動劑)、促進(jìn)、降低、減少、抑制阻斷或拮抗(作為拮抗劑)。調(diào)節(jié)可使活性比基線值增加1倍、2倍、3倍、5倍、10倍、100倍等。調(diào)節(jié)也可使其活性降至基線值以下。

13、本文所用術(shù)語“制劑”是指包括任何能夠預(yù)防、改善或治療疾病或其他病癥的分子、化學(xué)實(shí)體、組合物、藥物、治療劑、化療劑或生物制劑。該術(shù)語包括小分子化合物、反義試劑、sirna試劑、抗體、酶、肽、有機(jī)或無機(jī)分子、天然或合成化合物等。可以在臨床試驗(yàn)期間、臨床試驗(yàn)前的測試或fda批準(zhǔn)后的任何階段，根據(jù)本發(fā)明的方法對制劑進(jìn)行檢測。

14、如本文所定義，化合物或制劑的“治療有效”數(shù)量(即有效劑量)是指足以產(chǎn)生治療(如臨床)理想效果的數(shù)量。組合物以從每天一次或多次至每周一次或多次的方式(包括隔天施用一次)施用。本領(lǐng)域技術(shù)人員理解，某些因素會影響有效治療受試者所需的劑量和時間，包括但不限于疾病或失調(diào)的嚴(yán)重程度、先前的治療、受試者的一般健康狀況和/或年齡，以及存在的其他疾病。此外，用本發(fā)明的治療有效量的化合物的受試者治療可包括單次治療或系列治療。

15、“治療”是一種以阻止疾病發(fā)展或改變病理或癥狀為目標(biāo)的干預(yù)措施。因此，“治療”既指有療效的治療，也指預(yù)防或預(yù)防措施?！爸委?也可具體指姑息治療。需要治療的人包括已經(jīng)患有疾病的人，以及需要預(yù)防疾病的人。因此，“醫(yī)治”或“治療”某種狀態(tài)、失調(diào)或病癥包括：(1)預(yù)防或延遲可能患有或易患該狀態(tài)、失調(diào)或病癥但尚未出現(xiàn)或顯示該狀態(tài)、失調(diào)或病癥的臨床或亞臨床癥狀的人類或其他哺乳動物出現(xiàn)該狀態(tài)、失調(diào)或病癥的臨床癥狀；(2)抑制該狀態(tài)、失調(diào)或病癥，或(3)緩解疾病，即導(dǎo)致狀態(tài)、失調(diào)或病癥或其至少一種臨床或亞臨床癥狀消退。對接受治療個體的益處在統(tǒng)計(jì)學(xué)上是顯著的，或者至少是病人或醫(yī)生可以感覺到的。

技術(shù)特征：

1.一種治療腦或中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)退行性疾病的方法，其包括向患有腦或中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)退行性疾病或有腦或中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)退行性疾病的風(fēng)險(xiǎn)的受試者施用bcl2-相關(guān)永生基因3(bag3)多核苷酸、多肽或其活性片段，以向所述腦或中樞神經(jīng)系統(tǒng)提供bag3多肽或其活性片段的表達(dá)，從而治療或降低所述腦或中樞神經(jīng)系統(tǒng)的所述神經(jīng)退行性疾病的所述風(fēng)險(xiǎn)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述腦或中樞神經(jīng)系統(tǒng)的所述神經(jīng)退行性疾病是帕金森病、阿爾茨海默病、肌萎縮側(cè)索硬化癥、亨廷頓病、路易體病、血管性癡呆或混合性癡呆。

3.一種治療創(chuàng)傷性腦損傷的方法，其包括向患有創(chuàng)傷性腦損傷或有創(chuàng)傷性腦損傷的風(fēng)險(xiǎn)的受試者施用bcl2-相關(guān)永生基因3(bag3)多核苷酸、多肽或其活性片段，以向所述腦或中樞神經(jīng)系統(tǒng)提供bag3多肽或其活性片段的表達(dá)，從而治療或降低有創(chuàng)傷性腦損傷的所述風(fēng)險(xiǎn)。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述創(chuàng)傷性腦損傷是由慢性創(chuàng)傷性腦病(cte)并發(fā)的創(chuàng)傷性腦損傷。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其中與正常對照相比，在腦或中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細(xì)胞或組織中，bag3多核苷酸、多肽或其活性片段的所述表達(dá)或數(shù)量增加。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述bag3多核苷酸包括用于表達(dá)所述bag3多肽或其活性片段的表達(dá)載體。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中所述表達(dá)載體還包括表達(dá)控制元件。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述表達(dá)控制元件包括啟動子或增強(qiáng)子。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所述啟動子或增強(qiáng)子包括誘導(dǎo)型啟動子或增強(qiáng)子、組成型啟動子或增強(qiáng)子、雙順反子啟動子或增強(qiáng)子、或組織特異性啟動子或增強(qiáng)子。

10.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的方法，其中所述表達(dá)控制元件、啟動子或增強(qiáng)子在所述腦或中樞神經(jīng)系統(tǒng)中是活躍的。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中在所述腦或中樞神經(jīng)系統(tǒng)中活躍的表達(dá)控制元件、啟動子或增強(qiáng)子是選自表1中列出的表達(dá)控制元件、啟動子或增強(qiáng)子。

12.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述表達(dá)控制元件包括巨細(xì)胞病毒(cmv)啟動子。

13.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中所述表達(dá)載體穿過所述血腦屏障。

14.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述bag3多核苷酸、多肽或其活性片段可穿過所述血腦屏障傳遞或直接施用至所述腦或中樞神經(jīng)系統(tǒng)。

15.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中所述表達(dá)載體包括病毒載體、質(zhì)?；蚪湍篙d體。

16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中所述病毒載體包括腺相關(guān)病毒(aav)載體、腺病毒載體、慢病毒載體、柯薩奇病毒載體、巨細(xì)胞病毒載體、逆轉(zhuǎn)錄病毒載體或愛潑斯坦巴爾病毒載體。

17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，其中所述aav載體包括重組aav(raav)顆粒，其包含aav衣殼蛋白和包含編碼所述bag3多肽或其活性片段的多核苷酸的載體基因組。

18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中所述載體基因組還包括一個或多個aav反向末端重復(fù)序列(itr)、內(nèi)含子、終止密碼子或多聚a序列。

19.根據(jù)權(quán)利要求17或18所述的方法，其中所述aav衣殼蛋白或aav?itr包括：

20.根據(jù)權(quán)利要求18或19所述的方法，其中所述aav?itr側(cè)接編碼所述bag3多肽或其活性片段的所述多核苷酸的5'或3'末端。

21.根據(jù)權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述bag3多核苷酸、bag3多肽、其活性片段、包含bag3多核苷酸的表達(dá)載體或病毒載體包含在藥物組合物中。

22.根據(jù)權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述bag3多核苷酸、bag3多肽、其活性片段、包含bag3多核苷酸的表達(dá)載體或病毒載體包含在微囊、納米囊或納米顆粒中。

23.根據(jù)權(quán)利要求6-20中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述表達(dá)載體或病毒載體靶向大腦皮層。

24.一種組合物，其包含誘導(dǎo)bag3的bcl2-相關(guān)永生基因3(bag3)多核苷酸、多肽和/或制劑。

25.根據(jù)權(quán)利要求24所述的組合物，其中與正常對照相比，在靶細(xì)胞或組織中，所述制劑調(diào)節(jié)bcl2-相關(guān)永生基因3(bag3)分子、蛋白質(zhì)或其肽的表達(dá)或數(shù)量。

26.根據(jù)權(quán)利要求24所述的組合物，其中所述制劑包括表達(dá)bag3蛋白或其活性片段的表達(dá)載體、寡核苷酸或其組合。

27.根據(jù)權(quán)利要求26所述的組合物，其中所述表達(dá)載體還包括啟動子，所述啟動子包括誘導(dǎo)型啟動子、組成型啟動子、雙順反子啟動子或組織特異性啟動子。

28.根據(jù)權(quán)利要求26所述的組合物，其中所述表達(dá)載體包括病毒載體、質(zhì)?；蚪湍篙d體。

29.根據(jù)權(quán)利要求26所述的組合物，其中所述載體穿過所述血腦屏障。

30.根據(jù)權(quán)利要求24所述的組合物，其中所述bag3或誘導(dǎo)所述bag3的制劑可穿過所述血腦屏障傳遞或直接施用。

31.根據(jù)權(quán)利要求24所述的組合物，其中所述制劑包括蛋白質(zhì)或其肽、擬肽物、小分子、有機(jī)或無機(jī)化合物、合成或天然化合物。

技術(shù)總結(jié)
BAG3蛋白用于治療帕金森病、阿爾茨海默病、肌萎縮側(cè)索硬化癥、亨廷頓病、路易體病、血管性癡呆、混合性癡呆和創(chuàng)傷性腦損傷，例如慢性創(chuàng)傷性腦病(CTE)。描述了有療效的BAG3組合物、BAG3用途和BAG3治療方法。

技術(shù)研發(fā)人員：亞瑟·M·費(fèi)爾德曼,瓦萊麗·邁爾斯
受保護(hù)的技術(shù)使用者：聯(lián)邦高等教育系統(tǒng)天普大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6