本發(fā)明涉及藥物制劑領(lǐng)域，具體涉及抗肝癌中藥酵素及其制備方法。

背景技術(shù)：

1、目前，我們對于肝癌的有效治療手段，還極為有限，主要包括手術(shù)、消融、介入栓塞、放療、化療、靶向治療、免疫治療、肝移植等方式。目前，肝癌手術(shù)切除率低是影響預(yù)后的主要因素之一。因此，肝癌術(shù)前新輔助治療或轉(zhuǎn)化治療可以最大程度的提高手術(shù)切除率，改善預(yù)后。其次，抗血管生成藥物或靶向治療藥物聯(lián)合免疫治療已成為不可切除或中晚期肝癌的重要治療方式。但是對于肝癌的整體療效還是不盡人意，化療有很大的副作用，很多肝癌患者合并有肝硬化伴有肝功能損害，而化療的毒副作用則促使了肝功能進一步損害，此外放療結(jié)束一段時間后，不少病人很快出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，臨床上也缺乏對于肝癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移后的有效治療手段。肝癌進展迅速，整體治療不僅花費昂貴，而且疼痛感強烈，生活質(zhì)量低。

2、中醫(yī)醫(yī)治肝癌有著其獨特的優(yōu)勢，它貫穿于肝癌治療的全過程，包括：①肝癌中醫(yī)中藥治療適用于臨床整個治療過程，手術(shù)前結(jié)合中藥治療可以改善患者的機體免疫功能，增強患者的手術(shù)耐受性；用在術(shù)后有利于促進術(shù)后恢復(fù)，防止術(shù)后并發(fā)癥或肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)；②中醫(yī)藥治療肝癌時具有健脾理氣、消腫化淤、軟堅散結(jié)、清熱解毒等特點，可明顯抑制肝癌細胞生長，提高機體免疫能力，主要適用于肝癌、肝硬化、肝腹水等肝病，與放化療合用還可明顯減輕由放化療帶來的的毒副作用，提高患者生活質(zhì)量，穩(wěn)定病情。③中醫(yī)中藥治療肝癌也可以與放、化療和免疫療法相結(jié)合，可提高遠期療效，減輕放、化療毒副反應(yīng)、增強機體免疫功能；它既可以增強患者的免疫功能，也可以減低放化療的副作用，增強治療效果。④對于不適合手術(shù)、放、化療的患者，中藥可作為主要的治療手段單獨用于肝癌治療，通過清熱解毒、益氣養(yǎng)血、扶正固本等辨證論治，可達到快速緩解癥狀，減輕痛苦，提高患者生存質(zhì)量，延長生命的目的。

3、酵素指的是一種以動物、植物和菌類等為原料，經(jīng)微生物發(fā)酵制得的含有特定生物活性成分的產(chǎn)品。中藥酵素是以不同草本藥材為原料，經(jīng)微生物(酵母菌、乳酸菌、醋酸菌和食用真菌等)發(fā)酵形成的功能性發(fā)酵產(chǎn)品。通過一定時間的發(fā)酵，草本藥材中的有效成分和營養(yǎng)物質(zhì)經(jīng)微生物分解釋放，更易被人體吸收?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)酵素具有諸多有益功能，包括清除自由基、抗氧化、抑菌、解酒護肝、潤腸通便、凈化血液等，這些功能使酵素作為一種新興的活性功能成分用于保健品，受到消費者的青睞。目前抗肝癌中藥酵素種類缺乏，而我國具有抗肝癌作用的藥食同源的藥材豐富，因此，開發(fā)一種能對肝癌術(shù)后具有較好輔助效果的酵素具有重要的應(yīng)用價值。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于提供抗肝癌中藥酵素及其制備方法。

2、本發(fā)明提供了抗肝癌的中藥酵素的制備方法，其包括如下步驟：

3、步驟1、將中藥原料萃取，獲得萃取液；

4、步驟2、所述萃取液經(jīng)復(fù)合菌發(fā)酵，獲得所述中藥酵素；

5、所述中藥原料包括如下重量份原料：10～20份人參、15～25份丹參、15～25份柴胡、10～20份枸杞子、5～15份決明子、15～25份澤瀉、20～30份龍膽、15～25份板藍根、10～20份五味子、10～20份姜黃、15～25份甘草和/或10～25份莪術(shù)；

6、所述萃取液中復(fù)合菌包括：1.0×108～2.0×108cfu/ml嗜酸乳酸桿菌、1.0×108～2.0×108cfu/ml長雙歧桿菌、1.0×108～2.0×108cfu/ml德氏乳桿菌保加利亞種和/或1.0×108～2.0×108cfu/ml嗜熱鏈球菌。

7、進一步的，

8、所述的中藥原料包括如下重量份原料：10～20份人參、15～25份丹參、15～25份柴胡、10～20份枸杞子、5～15份決明子、15～25份澤瀉、20～30份龍膽、15～25份板藍根、10～20份五味子、10～20份姜黃、15～25份甘草、10～25份莪術(shù)、12～25份化血膽和/或10～20份積雪草；

9、所述萃取液中復(fù)合菌包括：1.0×108～2.0×108cfu/ml嗜酸乳酸桿菌、1.0×108～2.0×108cfu/ml長雙歧桿菌、1.0×108～2.0×108cfu/ml德氏乳桿菌保加利亞種、1.0×108～2.0×108cfu/ml嗜熱鏈球菌和/或1.0×108～2.0×108cfu/ml布拉酵母菌。

10、更進一步的，

11、所述中藥原料包括如下重量份原料：12～18份人參、18～22份丹參、18～23份柴胡、12～18份枸杞子、8～12份決明子、18～22份澤瀉、22～28份龍膽、18～22份板藍根、12～18份五味子、12～18份姜黃、18～22份甘草、15～22份莪術(shù)、18～22份化血膽和12～18份積雪草；

12、所述萃取液中復(fù)合菌包括：1.5×108cfu/ml嗜酸乳酸桿菌、1.5×108cfu/ml長雙歧桿菌、1.5×108cfu/ml德氏乳桿菌保加利亞種、1.0×108cfu/ml嗜熱鏈球菌和1.5×108cfu/ml布拉酵母菌。

13、具體的，

14、所述的中藥原料包括如下重量份原料：15份人參、20份丹參、20份柴胡、15份枸杞子、10份決明子、20份澤瀉、25份龍膽、20份板藍根、15份五味子、15份姜黃、20份甘草、20份莪術(shù)、20份化血膽和15份積雪草。

15、本發(fā)明所述的制備方法中，

16、所述萃取為超聲萃取，所述超聲萃取的參數(shù)為：超聲波輸出功率為320w，超聲萃取6h。

17、所述發(fā)酵的條件為14℃～36℃，0.3～3年，優(yōu)選1～2年。

18、所述發(fā)酵后還包括離心的步驟，所述離心的條件為1000g～2000g，10min～20min，優(yōu)選1500g，15min。

19、具體實施例中，本發(fā)明中藥酵素的制備方法，包括：

20、(1)按照比例將上述中藥原料經(jīng)過干燥后再分別粉碎得到中藥粉末，中藥粉末中加水攪拌均勻，然后在每種中藥粉末單獨用超聲萃取，得到中藥萃取物。

21、(2)取上述中藥萃取物置于發(fā)酵罐中，加入復(fù)合菌，充分攪拌。

22、(3)所述的發(fā)酵工藝為厭氧發(fā)酵，發(fā)酵方式為自然發(fā)酵，即根據(jù)北回歸線區(qū)域的節(jié)氣變化自行發(fā)酵，無需人為干預(yù)。

23、(4)取上述發(fā)酵液經(jīng)離心去除沉淀物，離心的條件優(yōu)選為轉(zhuǎn)速1000～2000g，時間10～20min；更優(yōu)選為轉(zhuǎn)速1500g，時間15min。

24、(5)取上述過濾液于萬級無菌車間下進行無菌灌裝，得抗肝癌中藥酵素。

25、所述的發(fā)酵周期為0.3～3年，優(yōu)選為1～2年。

26、本發(fā)明提供了所述的制備方法制備獲得的中藥酵素。

27、本發(fā)明對所述中藥酵素的中藥原料和發(fā)酵菌群進行了優(yōu)化，試驗結(jié)果表明，在所述的中藥原料包括如下重量份原料：15份人參、20份丹參、20份柴胡、15份枸杞子、10份決明子、20份澤瀉、25份龍膽、20份板藍根、15份五味子、15份姜黃、20份甘草、20份莪術(shù)、20份化血膽和15份積雪草；和所述萃取液中復(fù)合菌包括：1.5×108cfu/ml嗜酸乳酸桿菌、1.5×108cfu/ml長雙歧桿菌、1.5×108cfu/ml德氏乳桿菌保加利亞種、1.0×108cfu/ml嗜熱鏈球菌和1.5×108cfu/ml布拉酵母菌時制備獲得的中藥酵素的作用效果最好。

28、本發(fā)明針對現(xiàn)有抗肝癌中藥酵素缺乏的現(xiàn)狀以及中藥酵素生產(chǎn)技術(shù)的不足，提供了一種具有抗肝癌功能的藥食同源中藥酵素制備方法。該方法采用復(fù)合益生菌，通過傳統(tǒng)與現(xiàn)代生物工程技術(shù)相結(jié)合的發(fā)酵技術(shù)，經(jīng)充分發(fā)酵后，可獲得質(zhì)量穩(wěn)定、安全性高、療效強的中藥酵素，可用于肝癌患者放化療前、中、后各時期的營養(yǎng)支持和輔助治療，提高肝癌患者的生存質(zhì)量，顯著提升放化療療效、延長肝癌患者的生存期。

29、所述的抗肝癌中藥酵素，具有質(zhì)量穩(wěn)定的特點，常溫保存3年內(nèi)不發(fā)生變質(zhì)；所述的抗肝癌中藥酵素，具有安全性高的特點，每天口服2000ml無明顯不良反應(yīng)；所述的抗肝癌中藥酵素，具有吸收快、療效好的特點，口服30秒內(nèi)即可在血漿中檢測到相關(guān)物質(zhì)。

30、本發(fā)明提供了所述的制備方法制備獲得的中藥酵素和/或本發(fā)明所述的中藥酵素在制備抗肝癌藥物中的應(yīng)用。

31、本發(fā)明提供了抗肝癌的藥物，其原料本發(fā)明所述的制備方法制備獲得的中藥酵素和/或本發(fā)明所述的中藥酵素。

32、本發(fā)明提供了一種預(yù)防和/或治療肝癌的方法，其為服用本發(fā)明所述的藥物。

33、具體的，可在肝癌患者放化療前、中、后各時期均可服用。

34、本發(fā)明提供了抗肝癌的中藥酵素，所述中藥酵素以人參、丹參、柴胡、枸杞子、決明子、澤瀉、龍膽、板藍根、五味子、姜黃、甘草、莪術(shù)、化血膽、積雪草作為發(fā)酵原料，利用由嗜酸乳酸桿菌、長雙歧桿菌、德氏乳桿菌保加利亞種、嗜熱鏈球菌和酵母菌組成的復(fù)合菌發(fā)酵獲得。所述抗肝癌的中藥酵素可用于肝癌的預(yù)防和治療，同時也可用于肝癌化療后的機體修復(fù)，具有重要的應(yīng)用價值。