本申請涉及組織工程，尤其涉及一種抑制多重耐藥菌的角膜基質透鏡及其制備方法。

背景技術：

1、感染性角膜潰瘍作為一種高發(fā)病率且易導致失明的眼科疾病，其治療過程面臨著嚴峻的挑戰(zhàn)。目前，主要的治療手段依賴于局部滴眼液，這種給藥方式雖直接，但受限于眼部的特殊生理結構和頻繁的生理活動，如眨眼和流淚，使得藥物在眼球表面及結膜的容留量極為有限。加之眼部眾多的屏障作用，能夠真正滲透進入眼內并發(fā)揮治療作用的藥物量不足總量的5％，這極大地降低了藥物的生物利用度，影響了治療效果。除此之外，隨著抗菌藥物的廣泛使用，病原體逐漸產生了耐藥性，使得傳統(tǒng)治療藥物的效果大打折扣。

2、上述內容僅用于輔助理解本申請的技術方案，并不代表承認上述內容是現有技術。

技術實現思路

1、本申請的主要目的在于提供一種抑制多重耐藥菌的角膜基質透鏡及其制備方法，旨在提供一種抑制多重耐藥菌的角膜基質透鏡，以提高眼部藥物的生物利用度，并克服耐藥性問題。

2、為實現上述目的，本申請實施例提供一種抑制多重耐藥菌的角膜基質透鏡制備方法，所述方法包括：

3、提供角膜基質透鏡原料，其中，所述角膜基質透鏡原料為通過飛秒激光小切口角膜基質透鏡取出術所取出的角膜組織；

4、對所述角膜基質透鏡原料進行脫細胞處理，得到脫細胞角膜基質透鏡；

5、對所述脫細胞角膜基質透鏡進行交聯(lián)處理，得到脫細胞交聯(lián)角膜基質透鏡；

6、將所述脫細胞交聯(lián)角膜基質透鏡置于納米銀溶液中，以進行納米銀負載，制得抑制多重耐藥菌的角膜基質透鏡。

7、在一實施例中，所述納米銀溶液中納米銀的濃度為500～1500ug/ml。

8、在一實施例中，在所述納米銀溶液中的浸泡時長為2～8h。

9、在一實施例中，所述對所述角膜基質透鏡原料進行脫細胞處理，得到脫細胞角膜基質透鏡的步驟包括：

10、將所述角膜基質透鏡原料依次放入氯化鈉溶液和混合酶溶液中進行浸泡，得到所述脫細胞角膜基質透鏡，其中，所述混合酶溶液包括：脫氧核糖核酸酶和核糖核酸酶。

11、在一實施例中，所述混合酶溶液包括：5～10u/ml脫氧核糖核酸酶和50～100ug/ml核糖核酸酶；

12、和/或，在所述混合酶溶液中的浸泡時長為24～72h。

13、在一實施例中，所述氯化鈉溶液的摩爾濃度為1.5～2m；

14、和/或，在所述氯化鈉溶液中的浸泡時長為24～48h。

15、在一實施例中，在所述對所述角膜基質透鏡原料進行脫細胞處理的步驟之前，還包括：

16、通過緩沖液清洗所述角膜基質透鏡原料，其中，清洗次數3～4次，每次清洗時長15～20min；

17、和/或，通過青霉素和鏈霉素的混合溶液對所述角膜基質透鏡原料進行浸泡消毒，其中，浸泡消毒時長1～5h。

18、在一實施例中，所述對所述脫細胞角膜基質透鏡進行交聯(lián)處理，得到脫細胞交聯(lián)角膜基質透鏡的步驟包括：

19、提供交聯(lián)劑溶液，其中，所述交聯(lián)劑溶液包括：1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺和n-羥基硫代琥珀酰亞胺；

20、將所述脫細胞角膜基質透鏡放入所述交聯(lián)劑溶液中進行浸泡，得到所述脫細胞交聯(lián)角膜基質透鏡。

21、在一實施例中，所述交聯(lián)劑溶液中1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺與所述脫細胞角膜基質透鏡之間的摩爾與質量之比為(0.01～0.25mmol):1mg；

22、和/或，所述交聯(lián)劑溶液中1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺和n-羥基硫代琥珀酰亞胺之間的質量比為(5～15):(1～5)；

23、和/或，在所述交聯(lián)劑溶液中的浸泡時長為4～8h。

24、在一實施例中，所述角膜基質透鏡原料的中央厚度為80～150μm。

25、此外，為實現上述目的，本申請實施例還提出一種抑制多重耐藥菌的角膜基質透鏡，通過如上所述方法制得。

26、本申請?zhí)岢龅囊粋€或多個技術方案，至少具有以下技術效果：首先，將飛秒激光小切口角膜基質透鏡取出術所取出的角膜基質透鏡作為組織材料；由于飛秒激光小切口角膜基質透鏡取出術(smile術式)較少地切斷角膜基質的膠原纖維，較多地保留了角膜的正常組織結構和形態(tài)，因此能夠提供更為完整的且生物力學穩(wěn)定的角膜組織材料。其次，通過脫細胞處理有效去除角膜基質透鏡原料的細胞成分，降低免疫原性，降低角膜基質透鏡的排斥率；并且脫細后產生的細胞空隙能夠裝載更多藥物，實現藥物負載。再次，通過交聯(lián)處理在一定程度上增加了角膜基質透鏡的纖維間的強度，使得所制得的角膜基質透鏡在體內環(huán)境中能夠保持較長的穩(wěn)定性和功能性，成為理想的藥物緩釋載體，能夠提高藥物的生物利用度；而角膜基質透鏡具有較好的透光性能，在植入眼內后不會對患者的視力產生明顯影響，保證了患者的視覺質量和生活質量。最后，將脫細胞交聯(lián)角膜基質透鏡置于納米銀溶液中，實現透鏡中納米銀的負載，以制得抑制多重耐藥菌的角膜基質透鏡緩釋系統(tǒng)。由于納米銀的抗菌機制不同于傳統(tǒng)的抗生素，它并不直接針對微生物的特定代謝途徑或酶系，而是通過破壞細胞壁、細胞膜和生命物質等多種途徑來殺滅細菌，因此，納米銀很難產生耐藥性，反而能夠通過納米銀強大的滲透性深入組織內部殺滅隱藏在深處的耐藥菌，從而有效避免耐藥性的產生和傳播，以克服耐藥性的問題。

技術特征：

1.一種抑制多重耐藥菌的角膜基質透鏡制備方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述納米銀溶液中納米銀的濃度為500～1500ug/ml。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，在所述納米銀溶液中的浸泡時長為2～8h。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述對所述角膜基質透鏡原料進行脫細胞處理，得到脫細胞角膜基質透鏡的步驟包括：

5.如權利要求4所述的方法，其特征在于，所述混合酶溶液包括：5～10u/ml脫氧核糖核酸酶和50～100ug/ml核糖核酸酶；

6.如權利要求4所述的方法，其特征在于，所述氯化鈉溶液的摩爾濃度為1.5～2m；

7.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述對所述脫細胞角膜基質透鏡進行交聯(lián)處理，得到脫細胞交聯(lián)角膜基質透鏡的步驟包括：

8.如權利要求7所述的方法，其特征在于，所述交聯(lián)劑溶液中1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺與所述脫細胞角膜基質透鏡之間的摩爾與質量之比為(0.01～0.25mmol):1mg；

9.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述角膜基質透鏡原料的中央厚度為80～150μm。

10.一種抑制多重耐藥菌的角膜基質透鏡，其特征在于，所述抑制多重耐藥菌的角膜基質透鏡通過如權利要求1至9任一項所述方法制得。

技術總結
本申請公開了一種抑制多重耐藥菌的角膜基質透鏡及其制備方法，涉及組織工程技術領域，公開了抑制多重耐藥菌的角膜基質透鏡制備方法，包括：提供角膜基質透鏡原料，其中，角膜基質透鏡原料為通過飛秒激光小切口角膜基質透鏡取出術所取出的角膜組織；對角膜基質透鏡原料進行脫細胞處理，得到脫細胞角膜基質透鏡；對脫細胞角膜基質透鏡進行交聯(lián)處理，得到脫細胞交聯(lián)角膜基質透鏡；將脫細胞交聯(lián)角膜基質透鏡置于納米銀溶液中，以進行納米銀負載，制得抑制多重耐藥菌的角膜基質透鏡。本申請?zhí)峁┝艘环N抑制多重耐藥菌的角膜基質透鏡，提高了眼部藥物的生物利用度，并克服了耐藥性問題。

技術研發(fā)人員：王琴,周奇志,馬嫣然,張敏,饒靜,唐麗君
受保護的技術使用者：重慶眼視光眼科醫(yī)院有限公司
技術研發(fā)日：
技術公布日：2024/12/23