本發(fā)明涉及天然藥物化學(xué)處理，具體為一種鳳眼草總黃酮的提取方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、鳳眼草為苦木科臭椿屬臭椿(ailanthus?altissima(mill.)swingle)的果實，是我國民間常用的中草藥。鳳眼草色白而泛黃，味苦性寒，具有清熱、止血、利濕、殺蟲、抗菌等功效，在治療腹瀉、痢疾等方面具有較好的療效，但在獸醫(yī)臨床上的應(yīng)用較少，制約了其推廣應(yīng)用，嚴(yán)重影響了鳳眼草在中獸醫(yī)藥臨床優(yōu)勢作用的發(fā)揮。

2、犢牛腹瀉又稱犢牛拉稀，一年四季均可發(fā)生，是犢牛常發(fā)的一種胃腸疾病。犢牛腹瀉是以消化機能紊亂為特征的綜合性疾病，主要癥狀為腹瀉，由于腸蠕動亢進，腸內(nèi)吸收不全或吸收困難，致使腸內(nèi)容物與多量水分被排出體外，糞便呈稀湯或水樣，很快脫水、酸中毒，死亡較快。犢牛腹瀉病因復(fù)雜，多使用抗生素進行治療，結(jié)果耐藥性的菌株不時出現(xiàn)，導(dǎo)致療效下降。中獸藥具有無污染、無殘留、不易產(chǎn)生耐藥性以及不污染動物源性食品等特點，隨著食品安全和行業(yè)監(jiān)管力度的加強，部分抗生素被限用或者禁用，在尋找替代產(chǎn)品時，中獸藥已成為首選。由于犢牛的發(fā)育水平較低，還沒有形成成熟的疾病抵御機制，且免疫力較低，容易受到外界因素的影響發(fā)生疾病。因此，促進我國養(yǎng)牛業(yè)的健康發(fā)展迫切需要研制有效防治犢牛腹瀉的藥物。

3、目前，治療犢牛腹瀉還主要以抗生素，存在著過度依賴抗生素、過量或濫用抗生素的現(xiàn)象，增加病原菌耐藥性的風(fēng)險，引起公共食品安全問題。而遏制動物源細(xì)菌耐藥性和抗生素減量化示范應(yīng)用是我國目前非常重視的工作。

4、中草藥“鳳眼草”，目前在中獸藥研究方面還是一個空白，未見相關(guān)方面的報道。鑒于鳳眼草在治療腹瀉、痢疾等方面具有較好的療效，根據(jù)犢牛腹瀉的病證特點和現(xiàn)代規(guī)?；翀龅挠盟幮枨筇攸c，應(yīng)用現(xiàn)代工藝提取技術(shù)、藥理學(xué)、藥效學(xué)及傳統(tǒng)獸醫(yī)學(xué)等相關(guān)技術(shù)，研制臨床定位明確、治療效果突出的鳳眼草新制劑，有效發(fā)揮中獸醫(yī)藥在防治犢牛腹瀉中的特色優(yōu)勢，對犢牛腹瀉病進行深入研究，為更有效預(yù)防和控制犢牛腹瀉病奠定基礎(chǔ)。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于針對上述現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，提供了一種鳳眼草總黃酮的提取方法，其操作簡單、安全，成本低、有效成分含量和得率高。

2、為了實現(xiàn)上述目的，提供的技術(shù)方案如下：

3、一種鳳眼草總黃酮的提取方法，其特征在于，包括如下步驟：

4、步驟一、取鳳眼草作為原料，將原料進行風(fēng)干并粉碎，得到粉碎原料藥；

5、步驟二、以相應(yīng)濃度的乙醇溶液為溶劑，將步驟一得到粉碎原料藥添加到溶劑中，設(shè)定好相應(yīng)的提取溫度、超聲功率、液料比、超聲時間進行超聲提取，再經(jīng)過濾、濃縮，得到總黃酮；

6、步驟三、按照5因素6水平進行單因素試驗，分別考察提取溫度x1、超聲功率x2、乙醇濃度x3、液料比x4、超聲時間x5對鳳眼草中總黃酮得率的影響；

7、步驟四、在步驟三的單因素水平的基礎(chǔ)上，選取對鳳眼草總黃酮有顯著影響的因素，進行box-behnken響應(yīng)面設(shè)計，按照因素水平組合進行試驗；

8、步驟五、采用design-expert?8.0.6統(tǒng)計分析軟件對試驗數(shù)據(jù)進行分析；從鳳眼草中提取總黃酮的含量公式為：

9、y(％)＝10.56+0.09x1+0.32x2-0.77x3+0.31x1x2+0.36x1x3-0.24x2x3-1.19x12-0.64x22-0.78x32

10、式中，y代表風(fēng)眼草總黃酮含量，x1代表提取溫度，x2代表超聲功率，x3代表乙醇濃度。

11、優(yōu)選的，在步驟三中，所述的提取溫度為30～80℃，超聲功率為50～100w，所述的乙醇濃度為20～70％，所述的液料比為20:1～70:1，所述的超聲時間為20～120min。

12、優(yōu)選的，在步驟三中，每組試驗超聲提取重復(fù)3次，合并，過濾，濾液在水浴50℃、真空度-0.07mpa下減壓濃縮，得到鳳眼草總黃酮。

13、優(yōu)選的，在步驟四中，對鳳眼草總黃酮有顯著影響的因素為提取溫度、超聲功率、乙醇濃度。

14、優(yōu)選的，在步驟五中，分析得到最佳提取工藝的超聲溫度為50℃，超聲功率為85w，乙醇濃度為45％。

15、優(yōu)選的，所述鳳眼草總黃酮在治療犢牛腹瀉中的應(yīng)用。

16、優(yōu)選的，所述鳳眼草總黃酮作為犢牛腹瀉專用藥物在治療產(chǎn)氣莢膜梭菌、沙門菌及隱孢子蟲多重混合感染性腹瀉中的應(yīng)用。

17、本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明提供了一種鳳眼草總黃酮的提取方法及其應(yīng)用，所述的提取鳳眼草總黃酮的含量達到10.41％，相較于現(xiàn)有技術(shù)獲得了顯著的提高，且所述的方法工藝條件簡單、安全，成本低，為鳳眼草犢牛腹瀉新制劑的工業(yè)化生產(chǎn)提供了技術(shù)支撐和理論依據(jù)，為更有效預(yù)防和控制犢牛腹瀉病奠定基礎(chǔ)，具有廣闊的應(yīng)用前景。

技術(shù)特征：

1.一種鳳眼草總黃酮的提取方法，其特征在于，包括如下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鳳眼草總黃酮的提取方法，其特征在于：在步驟三中，所述的提取溫度為30～80℃，超聲功率為50～100w，所述的乙醇濃度為20～70％，所述的液料比為20:1～70:1，所述的超聲時間為20～120min。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鳳眼草總黃酮的提取方法，其特征在于：在步驟三中，每組試驗超聲提取重復(fù)3次，合并，過濾，濾液在水浴50℃、真空度-0.07mpa下減壓濃縮，得到鳳眼草總黃酮。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鳳眼草總黃酮的提取方法，其特征在于：在步驟四中，對鳳眼草總黃酮有顯著影響的因素為提取溫度、超聲功率、乙醇濃度。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鳳眼草總黃酮的提取方法，其特征在于：在步驟五中，分析得到最佳提取工藝的超聲溫度為50℃，超聲功率為85w，乙醇濃度為45％。

6.權(quán)利要求1-5所述的任一一種鳳眼草總黃酮的提取方法提取得到的鳳眼草總黃酮在治療犢牛腹瀉中的應(yīng)用。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于：鳳眼草總黃酮作為犢牛腹瀉專用藥物在治療產(chǎn)氣莢膜梭菌、沙門菌及隱孢子蟲多重混合感染性腹瀉中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及天然藥物化學(xué)處理技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種鳳眼草總黃酮的提取方法及其應(yīng)用，包括如下步驟：取鳳眼草作為原料，將原料進行風(fēng)干并粉碎，得到粉碎原料藥；按照5因素6水平進行單因素試驗，分別考察提取溫度X<subgt;1</subgt;、超聲功率X<subgt;2</subgt;、乙醇濃度X<subgt;3</subgt;、液料比X<subgt;4</subgt;、超聲時間X<subgt;5</subgt;對鳳眼草中總黃酮得率的影響；在單因素水平的基礎(chǔ)上，選取對鳳眼草總黃酮有顯著影響的因素，進行Box?Behnken響應(yīng)面設(shè)計，按照因素水平組合進行試驗；采用Design?Expert?8.0.6統(tǒng)計分析軟件對試驗數(shù)據(jù)進行分析。相較于現(xiàn)有技術(shù)獲得了顯著的提高，且所述的方法工藝條件簡單、安全，成本低，為鳳眼草犢牛腹瀉新制劑的工業(yè)化生產(chǎn)提供了技術(shù)支撐和理論依據(jù)，為更有效預(yù)防和控制犢牛腹瀉病奠定基礎(chǔ)。

技術(shù)研發(fā)人員：劉宇,王勝義,張紅娟,崔東安,周慧婷,郝寶成,賀炯杰,尚若鋒,程峰,楊珍,邵丹,吳迪
受保護的技術(shù)使用者：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/10