本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，涉及一種白術(shù)多糖，具體涉及一種白術(shù)多糖在制備治療糖尿病合并脂肪性肝炎的藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、糖尿病(diabetes?mellitus，dm)以2型糖尿病(type?2diabetes?mellitus，t2dm)為主，代謝相關(guān)脂肪性肝病(metabolic?associated?fatty?liver?disease，mafld)是其常見(jiàn)合并癥，包括肝脂肪變性、非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic?steatohepatitis，nash)、纖維化和肝硬化，可能導(dǎo)致終末期肝功能衰竭或肝細(xì)胞癌。對(duì)20個(gè)國(guó)家的80項(xiàng)研究進(jìn)行meta分析，發(fā)現(xiàn)49419名t2dm中mafld的全球患病率為55.5％，是非t2dm一般人群的兩倍。mafld與t2dm的聯(lián)系可能是雙向的，t2dm會(huì)增加肝臟相關(guān)并發(fā)癥肝硬化、肝衰竭和肝癌等的風(fēng)險(xiǎn)，是nash和肝纖維化的最強(qiáng)預(yù)測(cè)因子，而mafld患者肝臟脂質(zhì)累積加重了胰島素抵抗，從而提高了血糖水平。

2、眾多nash候選藥物因療效不佳或不良反應(yīng)多而被拒絕上市，2024年3月，美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(food?and?drug?administration，fda)批準(zhǔn)了全球首個(gè)治療nash的藥物rezdiffra，其廣泛有效性和安全性仍有待后續(xù)研究。中藥復(fù)方因其多靶點(diǎn)、多途徑的作用方式，對(duì)全身代謝性疾病nash顯示出了良好的療效和安全性，具有廣闊的應(yīng)用前景。中藥多糖類藥物可通過(guò)調(diào)節(jié)糖脂代謝紊亂，降低血糖和血脂，對(duì)糖尿病和脂肪性肝炎起到治療作用。白術(shù)多糖(polysaccharides?of?atractylodes?macrocephala?koidz，amps)是白術(shù)的主要活性成分，已有研究發(fā)現(xiàn)，amps有效預(yù)防和治療mafld，減輕肝細(xì)胞脂肪變性和空泡變性，并可能通過(guò)提高外周靶器官對(duì)胰島素的敏感性、降低血漿胰島素水平、改善胰島素抵抗降低血糖。但amps是否能夠治療2型糖尿病合并的脂肪性肝炎還不清楚，對(duì)白術(shù)多糖治療2型糖尿病合并脂肪性肝炎進(jìn)行藥效研究，將推動(dòng)2型糖尿病合并脂肪性肝炎的新藥研發(fā)進(jìn)展。

3、t2dm與mafld有著共同的病理生理基礎(chǔ)，胰島素抵抗是其主要特征。機(jī)體最初出現(xiàn)胰島素抵抗時(shí)，可通過(guò)增加胰島素的分泌代償，將血糖維持在正常水平。但長(zhǎng)期的胰島素抵抗會(huì)對(duì)胰島素生理作用帶來(lái)不可逆的損害，最終機(jī)體將無(wú)法通過(guò)自身調(diào)節(jié)代償血糖的升高。t2dm患者空腹?fàn)顟B(tài)的高血糖是由于肝臟胰島素抵抗引起的肝臟糖原異生和內(nèi)源性葡萄糖生成增加所致，其中脂肪組織分解衍生的肝乙酰輔酶a降低作為胰島素抑制hgp的主要調(diào)節(jié)劑。機(jī)體持續(xù)的高血糖會(huì)使脂質(zhì)代謝受到影響，加重細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)堆積。在mafld中，血脂異常的典型特征為極低密度脂蛋白(very?low-density?lipoprotein，vldl)和低密度脂蛋白(low-density?lipoprotein，ldl)水平升高以及高密度脂蛋白膽固醇(high-densitylipoprotein?cholesterol，hdl-c)水平降低。vldl的增加也可能進(jìn)一步增加t2dm合并mafld的風(fēng)險(xiǎn)；而t2dm緩解后復(fù)發(fā)患者的肝臟vldl1-甘油三酯和vldl1-棕櫚酸含量增加幅度大于未復(fù)發(fā)個(gè)體。

4、胰島素被肝臟和其他組織清除，在肝臟中進(jìn)行第一次代謝(或肝臟提取胰島素)，占胰島素清除量的50-80％。因此肝臟能夠影響循環(huán)胰島素水平。mafld患者的胰島素清除率降低與胰島素抵抗相關(guān)，游離脂肪酸(free?fatty?acid，ffa)的變化可能是重要的調(diào)節(jié)信號(hào)，同時(shí)，mafld患者肝臟脂肪少量的增加與肝臟和骨骼肌胰島素抵抗相關(guān)。脂質(zhì)介質(zhì)、基因型也在胰島素抵抗中起重要作用。肝臟脂質(zhì)利用率升高與線粒體功能適應(yīng)不足可能誘導(dǎo)肝臟產(chǎn)生dag和神經(jīng)酰胺，從而影響肝臟胰島素抵抗和mafld的進(jìn)展，而特定脂質(zhì)種類及其在質(zhì)膜中的定位在胰島素抵抗中具有關(guān)鍵作用。與pnpla3i148m或pnpla3m148m基因型患者相比，pnpla3i148i基因型mafld患者具有更高的胰島素抵抗水平。

5、中醫(yī)學(xué)本無(wú)t2dm合并nash病名，t2dm屬于中醫(yī)“消渴病”范疇，nash多歸屬為“脅痛”“痰證”“肥氣病”“積聚”等范疇。t2dm合并nash主要由稟賦不足、飲食失節(jié)、情志失調(diào)、勞逸失度等因素導(dǎo)致肝郁脾虛，痰瘀互結(jié)或濕熱內(nèi)蘊(yùn)，停滯于肝所致。其中脾虛為病機(jī)之本，肝郁為發(fā)病之關(guān)鍵環(huán)節(jié)，痰瘀互阻則為主要病理因素貫穿疾病始終。一些醫(yī)家根據(jù)臨床數(shù)據(jù)對(duì)t2dm合并mafld進(jìn)行了辯證分型，主要分型有痰濕內(nèi)阻，濕熱內(nèi)蘊(yùn)、肝郁脾虛、痰瘀互結(jié)、肝腎陰虛證等，基于分型選用對(duì)證治療的方藥，常取得良效。吳新顏在常規(guī)治療基礎(chǔ)上加服清熱祛濕湯治療濕熱瘀阻型2型糖尿病合并脂肪性肝炎患者，可有效提高血糖控制效果，降低血脂水平，有利于肝功能的改善以及臨床癥狀的緩解，療效確切且安全性較高。崔玉紅發(fā)現(xiàn)二陳湯加味治療2型糖尿病合并脂肪性肝炎痰濕內(nèi)阻證具有臨床療效確切、不良反應(yīng)小的特點(diǎn)。

6、多糖是由10個(gè)以上的單糖分子通過(guò)苷鍵聚合而成的一類分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜且龐大的糖類物質(zhì)，包括動(dòng)物多糖、植物多糖和微生物多糖(包括真菌多糖與細(xì)菌。近年來(lái)，關(guān)于多糖降血糖和血脂作用的研究取得了巨大進(jìn)展，已經(jīng)從基本藥理活性研究發(fā)展到作用機(jī)制研究。黃芪多糖是中藥黃芪的重要生物活性成分，研究發(fā)現(xiàn)黃芪多糖劑量依賴性地式增加前脂肪細(xì)胞的增殖，上調(diào)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4，增加葡萄糖攝取，以提高胰島素敏感性，可能與ampk相關(guān)信號(hào)通路的激活有關(guān)。絞股藍(lán)多糖能夠抑制α-葡萄糖苷酶活性，影響葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2，從而降低血糖。金橘多糖喂養(yǎng)高脂血癥大鼠，明顯增加了血清脂肪酶的含量，且提高了總抗氧化能超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶和谷胱甘肽s-轉(zhuǎn)移酶的活性，降低丙二醛的含量。這說(shuō)明金橘多糖可能是通過(guò)增強(qiáng)抗氧化酶的活性來(lái)調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的。多糖還可以通過(guò)腸肝軸調(diào)節(jié)脂代謝。有研究發(fā)現(xiàn)，小球藻中的一種活性多糖，能夠善脂質(zhì)代謝，并加速盲腸總膽汁酸(bile?acids，bas)和短鏈脂肪酸的代謝，改變腸道菌群的構(gòu)成，說(shuō)明其可以改善腸道菌群的組成來(lái)改善高脂血癥大鼠的脂代謝。而黃芪多糖可能通過(guò)調(diào)節(jié)腸道甜味受體的表達(dá)，促進(jìn)腸激素分泌來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)脂代謝紊亂的調(diào)節(jié)。

7、公開(kāi)號(hào)為cn1398630a的發(fā)明專利公開(kāi)了一種降血糖活性的白術(shù)糖復(fù)合物、生產(chǎn)方法和用途，采用浸泡獲得白術(shù)水提液，有機(jī)溶劑沉淀、沉淀用水溶解，上清液經(jīng)透析或膜分離和濃縮干燥獲得粗品，粗品經(jīng)柱層析分離獲得精品白術(shù)糖復(fù)合物。該白術(shù)糖元素分析：c＝35％-45％，h＝5.5％-7.0％，n＝1.0％-3.0％；多糖含量：40％-60％；糖醛酸含量：15％-45％；蛋白質(zhì)含量：10％-25％；單糖組成：中性糖有葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖和鼠李糖，另外含有葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸。該多糖無(wú)毒副作用，具有明顯的降血糖功能作用。

8、由于提取和純化方法對(duì)多糖的修飾和生物活性有顯著影響，為了尋求治療糖尿病合并脂肪性肝炎的有效、安全低毒新治療藥，因此需要策略加以改進(jìn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的問(wèn)題，提供了一種白術(shù)多糖在制備治療糖尿病合并脂肪性肝炎的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明通過(guò)制備得到白術(shù)多糖可以改善2型糖尿病合并脂肪性肝炎導(dǎo)致的胰島素抵抗、脂質(zhì)代謝紊亂、肝臟炎癥和肝纖維化。

2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

3、第一方面，本發(fā)明提供了一種白術(shù)多糖在制備治療糖尿病合并脂肪性肝炎的藥物中的應(yīng)用。

4、所述糖尿病合并脂肪性肝炎包括胰島素抵抗、脂質(zhì)代謝紊亂、肝臟炎癥、肝臟損傷和肝纖維化中第一種或多種。

5、所述白術(shù)多糖采用水提醇沉法制備得到，所述水提醇沉法為：在85-95℃條件下，將白術(shù)和超純水按照比例1g:15-25ml進(jìn)行提取，提取1-3次，每次提取1-3h，所述提取優(yōu)選為為提取2次，合并提取液并濃縮，得到濃縮液；所述濃縮液中加入2-4倍體積的90-100％乙醇溶液，醇沉，得到沉淀，所述沉淀優(yōu)選采用乙醇洗滌，干燥，得到白術(shù)多糖。

6、在一個(gè)實(shí)施例中，所述水提醇沉法具體為：

7、步驟1)：在90℃條件下，將白術(shù)和超純水按照比例1g:20ml進(jìn)行提取，提取2h，4000rpm離心20min，收集上清液和殘?jiān)?/p>

8、步驟2)：按照步驟1)的方法將殘?jiān)M(jìn)行第二次提取與離心，合并兩次提取的上清液并于60℃下濃縮得到濃縮液；

9、步驟3)：濃縮液中加入3倍體積的95％乙醇溶液，4℃醇沉過(guò)夜，離心收集沉淀，乙醇洗滌沉淀后冷凍干燥，得到白術(shù)多糖。

10、所述白術(shù)多糖由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸構(gòu)成。

11、優(yōu)選地，所述白術(shù)多糖由82-85％葡萄糖、6-8％阿拉伯糖、5-6％半乳糖、2-4％半乳糖醛酸和0.1-0.8％葡萄糖醛酸構(gòu)成。

12、在一個(gè)實(shí)施例中，所述白術(shù)多糖由83.92％葡萄糖、7.19％阿拉伯糖、5.47％半乳糖、3％半乳糖醛酸和0.41％葡萄糖醛酸構(gòu)成。

13、相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明具有以下有益效果：本發(fā)明通過(guò)制備得到的白術(shù)多糖(apms)對(duì)糖尿病合并脂肪性肝炎具有顯著的治療效果，可以改善糖尿病合并脂肪性肝炎造成的的肝損傷、炎癥、脂質(zhì)代謝和纖維化。本發(fā)明通過(guò)血糖、ogtt檢測(cè)發(fā)現(xiàn)amps能夠調(diào)節(jié)糖代謝，通過(guò)血清生化檢測(cè)發(fā)現(xiàn)amps具有改善肝功能、降低血脂的作用；通過(guò)h&e、油紅o染色發(fā)現(xiàn)amps具有改善肝臟脂質(zhì)沉積的作用；通過(guò)cd68免疫組化發(fā)現(xiàn)，amps能夠減輕肝臟炎癥；通過(guò)天狼星紅染色染色，發(fā)現(xiàn)amps能夠減輕肝臟膠原沉積；通過(guò)qpcr和wb檢測(cè)小鼠肝臟相關(guān)基因和蛋白表達(dá)，發(fā)現(xiàn)amps能夠從基因和蛋白水平上改善肝臟脂代謝、炎癥、纖維化。