本發(fā)明涉及一種用于黑色素瘤切除術(shù)后組織修復的水凝膠創(chuàng)口貼的制備方法，屬于生物材料。

背景技術(shù)：

1、皮膚黑色素瘤已成為全球的重大健康問題，尤其在我國，黑色素瘤的發(fā)病率呈快速增加趨勢，其惡性程度高且死亡率高。特別是肢端雀斑樣黑色素瘤（alm），其好發(fā)于手指和足底，作為常見的一種亞型，在我國的發(fā)病率極高。皮膚黑色素瘤治療的金標準是手術(shù)切除和化療，但受限于腫瘤無法完全根除；瘤體迅速轉(zhuǎn)化垂直生長的侵襲性強；手術(shù)切除后組織愈合恢復緩慢的副作用，最終導致腫瘤復發(fā)。且現(xiàn)有敷料在治療alm時，存在舒適感差，關(guān)節(jié)運動密集易脫落等管理難度大的問題。

2、因而，迫切需要開發(fā)一種材料，不僅能兼顧普通黑色素瘤和肢端雀斑樣黑色素瘤等不同亞型，還能匹配腫瘤消除和組織修復的整個動態(tài)過程，推進黑色素瘤的治療。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于針對上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種水凝膠創(chuàng)口貼的制備方法。本發(fā)明的水凝膠創(chuàng)口貼通過甲基丙烯酸磺基甜菜堿（sbma）、丙烯酰胺（am）、殼聚糖（cycs）和納米顆粒共聚合而得到，納米顆粒為雙摻雜和表面改性的生物活性玻璃，對介孔生物活性玻璃進行鈰、釹離子雙摻雜，賦予其促組織修復和光熱效應(yīng)，再對其進行表面氨化和接枝化療藥甲氨蝶呤，以光熱結(jié)合化療的方式，具有多重殺滅癌細胞作用。

2、本發(fā)明實現(xiàn)過程如下：

3、一種黑色素瘤術(shù)后防復發(fā)及促進組織修復的水凝膠創(chuàng)口貼的制備方法，包括以下步驟：

4、（1）制備甲氨蝶呤改性的生物活性玻璃

5、（a）將十六烷基三甲基溴化銨、無水乙醇和氨水溶于去離子水中得到混合溶液，然后依次加入磷酸三乙酯、正硅酸四乙酯、四水合硝酸鈣、六水合硝酸鈰和六水合硝酸釹充分反應(yīng)，收集沉淀并煅燒，得到鈰和釹雙摻雜的介孔生物活性玻璃納米微球；

6、（b）將制備的鈰和釹雙摻雜的介孔生物活性玻璃納米微球分散在含有3-氨丙基三乙氧基硅烷分散的無水乙醇中，充分反應(yīng)，收集沉淀，即得到表面氨化的介孔生物活性玻璃納米微球；

7、（c）將制備的表面氨化的介孔生物活性玻璃納米微球分散在含有甲氨蝶呤、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和n-羥基琥珀酰亞胺的去離子水中，充分攪拌后，透析、冷凍干燥得到甲氨蝶呤接枝改性的生物活性玻璃納米微球；

8、（2）制備包裹甲氨蝶呤改性的生物活性玻璃的水凝膠創(chuàng)口貼

9、將[2-(甲基丙烯?；趸?乙基]二甲基-(3-磺酸丙基)氫氧化銨（sbma）、丙烯酰胺（am），羧化殼聚糖（cycs）溶解在去離子水中，加入甲氨蝶呤接枝改性的生物活性玻璃納米微球、過硫酸銨（aps）、四甲基乙二胺（tmeda）和n,?n'-亞甲基雙丙烯酰胺（mbaa），待充分混合后，注入模具中，40~60℃下孵育得到水凝膠創(chuàng)口貼。

10、上述水凝膠創(chuàng)口貼制備方法，步驟（a）中，所述十六烷基三甲基溴化銨溶解在去離子水中，其質(zhì)量分數(shù)為2~5?wt%；去離子水與無水乙醇和氨水的體積比為1：（0.5~0.8）：（0.4~0.7）；所述氨水與磷酸三乙酯和正硅酸四乙酯的體積比為1：（0.3~0.6）：（0.1~0.4）；所述磷酸三乙酯與四水合硝酸鈣、六水合硝酸鈰和六水合硝酸釹物質(zhì)的量之比為1：（0.5~1.5）：（0.05~0.2）：（0.05~0.2）；氨水的濃度為15~25%；所述煅燒溫度為500~800℃，煅燒時間為3~5?h。

11、上述水凝膠創(chuàng)口貼制備方法，步驟（b）中，所述3-氨丙基三乙氧基硅烷與無水乙醇的體積比為1：（20~100）；所述雙摻雜的介孔生物活性玻璃納米微球分散在無水乙醇中，得到濃度為0.1~0.7%的納米顆粒溶液。

12、上述水凝膠創(chuàng)口貼制備方法，步驟（c）中，所述去離子水的體積為氨化介孔生物活性玻璃納米微球質(zhì)量的150~220倍;所述甲氨蝶呤與氨化介孔生物活性玻璃納米微球的質(zhì)量比為1：1.5~2.2；甲氨蝶呤、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和n-羥基琥珀酰亞胺的物質(zhì)的量之比為1：（1~1.6）:（1~2）；所述氨化介孔生物活性玻璃納米微球的質(zhì)量單位為g，所述去離子水的體積單位為ml。

13、上述水凝膠創(chuàng)口貼制備方法，步驟（2）中，所述[2-(甲基丙烯?；趸?乙基]二甲基-(3-磺酸丙基)氫氧化銨的質(zhì)量分數(shù)為8~14?wt%；丙烯酰胺的質(zhì)量分數(shù)為6~12?wt%；羧化殼聚糖（cycs）的質(zhì)量分數(shù)為1~7?wt%；甲氨蝶呤接枝改性的生物活性玻璃納米微球的質(zhì)量分數(shù)為1~1.7wt%；所述[2-(甲基丙烯?；趸?乙基]二甲基-(3-磺酸丙基)氫氧化銨與過硫酸銨（aps）、n,n'-亞甲基雙丙烯酰胺（mbaa）的物質(zhì)的量之比為1：（0.03~0.046）：（0.004~0.025）；所述四甲基乙二胺（tmeda）占總體積的0.1%~0.7%；所述[2-(甲基丙烯酰基氧基)乙基]二甲基-(3-磺酸丙基)氫氧化銨、過硫酸銨、n,n'-亞甲基雙丙烯酰胺和甲氨蝶呤接枝改性的生物活性玻璃納米微球的質(zhì)量單位為g，所述去離子水和四甲基乙二胺的體積單位為ml。

14、上述方法制備得到的水凝膠創(chuàng)口貼在制備治療黑色素瘤術(shù)后組織缺損修復和抑制癌癥復發(fā)中的應(yīng)用。

15、本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點：

16、（1）本發(fā)明的水凝膠創(chuàng)口貼結(jié)合生物活性玻璃的促血管生成能力；鈰的高生物相容性，促細胞增殖能力；釹的光熱效應(yīng)；甲氨蝶呤的靶向化療特性。可靶向性的結(jié)合化療和光熱療法，殺滅殘留的腫瘤細胞；而在無黑色素瘤時，不釋放化療藥而釋放離子，促進傷口愈合，因而它能實現(xiàn)殺滅癌細胞的同時促進組織修復；

17、（2）本發(fā)明的水凝膠創(chuàng)口貼，由高生物相容性的sbma、am和cycs組成，其中cycs提供抗菌性能，所制備的水凝膠創(chuàng)口貼可在超薄狀態(tài)下強黏附在皮膚表面，適應(yīng)關(guān)節(jié)運動；

18、（3）本發(fā)明的水凝膠創(chuàng)口貼制備方法，原料廉價易得，工藝環(huán)境友好，容易放大，具有良好的市場應(yīng)用價值。

技術(shù)特征：

1.一種黑色素瘤術(shù)后防復發(fā)及促進組織修復的水凝膠創(chuàng)口貼的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水凝膠創(chuàng)口貼的制備方法，其特征在于：步驟（a）中，所述十六烷基三甲基溴化銨溶解在去離子水中，其質(zhì)量分數(shù)為2~5?wt%；去離子水與無水乙醇和氨水的體積比為1：（0.5~0.8）：（0.4~0.7）；氨水與磷酸三乙酯和正硅酸四乙酯的體積比為1：（0.3~0.6）：（0.1~0.4）；磷酸三乙酯與四水合硝酸鈣、六水合硝酸鈰和六水合硝酸釹物質(zhì)的量之比為1：（0.5~1.5）：（0.05~0.2）：（0.05~0.2），氨水的濃度為15~25%。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水凝膠創(chuàng)口貼的制備方法，其特征在于：步驟（a）中，所述煅燒溫度為500~800℃，煅燒時間為3~5?h。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水凝膠創(chuàng)口貼的制備方法，其特征在于：步驟（b）中，3-氨丙基三乙氧基硅烷與無水乙醇的體積比為1：（20~100）；所述雙摻雜的介孔生物活性玻璃納米微球分散在無水乙醇中，得到濃度為0.1~0.7%的納米顆粒溶液。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水凝膠創(chuàng)口貼的制備方法，其特征在于：步驟（c）中，去離子水的體積為氨化介孔生物活性玻璃納米微球質(zhì)量的150~220倍;所述甲氨蝶呤與氨化介孔生物活性玻璃納米微球的質(zhì)量比為1：1.5~2.2；甲氨蝶呤、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和n-羥基琥珀酰亞胺的物質(zhì)的量之比為1：（1~1.6）:（1~2）。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水凝膠創(chuàng)口貼的制備方法，其特征在于：步驟（2）中，所述[2-(甲基丙烯酰基氧基)乙基]二甲基-(3-磺酸丙基)氫氧化銨的質(zhì)量分數(shù)為8~14?wt%，丙烯酰胺的質(zhì)量分數(shù)為6~12?wt%，羧化殼聚糖（cycs）的質(zhì)量分數(shù)為1~7?wt%，甲氨蝶呤接枝改性的生物活性玻璃納米微球的質(zhì)量分數(shù)為1~1.7wt%；所述[2-(甲基丙烯?；趸?乙基]二甲基-(3-磺酸丙基)氫氧化銨與過硫酸銨（aps）、n,n'-亞甲基雙丙烯酰胺（mbaa）的物質(zhì)的量之比為1：（0.03~0.046）：（0.004~0.025）；所述四甲基乙二胺（tmeda）占總體積的0.1%~0.7%。

7.權(quán)利要求1~6任意之一所述方法制備得到的水凝膠創(chuàng)口貼。

8.權(quán)利要求7所述水凝膠創(chuàng)口貼在制備治療黑色素瘤術(shù)后組織缺損修復和抑制癌癥復發(fā)藥品中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種黑色素瘤術(shù)后防復發(fā)及促進組織修復的水凝膠創(chuàng)口貼的制備方法，該制備方法包括：通過有機模板法制備得到富含鈰、釹的介孔生物活性玻璃，在對其表面氨化后，通過酰胺鍵將甲氨蝶呤接枝在生物活性表面。接著將所獲得的納米顆粒分散在含有甲基丙烯酸磺基甜菜堿、丙烯酰胺、殼聚糖的溶液中，加入過硫酸銨、四甲基乙二胺和N,N'?亞甲基雙丙烯酰胺后，待其充分混合后，注入聚四氟乙烯隔開的璃模具中，在40~60℃下孵育30?min，得到水凝膠創(chuàng)口貼。本發(fā)明的水凝膠創(chuàng)口貼有效的結(jié)合了釹的光熱性能，鈰的促細胞增殖能力，甲氨蝶呤的靶向性和癌癥抑制作用，可實現(xiàn)納米顆粒的靶向治療，以光熱結(jié)合化療的方式，多重殺滅癌細胞。

技術(shù)研發(fā)人員：惠俊峰,姚嘉玲,范代娣,姚嘉欣,鄭曉燕
受保護的技術(shù)使用者：西北大學
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9