本發(fā)明屬于藥物領(lǐng)域，涉及丹參酚酸和丹參酮的組合物，具體涉及丹參酚酸提取物和丹參酮提取物的組合物及其制備方法和應(yīng)用、產(chǎn)品。

背景技術(shù)：

1、丹參(salvia?miltiorrhiza)是一種傳統(tǒng)中藥，具有活血化瘀、通經(jīng)止痛、涼血消癰、抗炎、抗氧化、保護心肌細(xì)胞、保護血管等作用，常用于治療動脈粥樣硬化、冠心病、高血壓等心血管疾病。丹參的組成成分可分為水溶性酚酸類和脂溶性的二萜丹參酮類。其中，丹參酚酸類成分主要由丹酚酸b、丹酚酸a、迷迭香酸、紫草酸等成分組成，而丹參酮類成分主要包括丹參酮iia、隱丹參酮、二氫丹參酮i、丹參酮i等。

2、丹參酮類化合物為心腦血管疾病治療的主要活性物質(zhì)，主要分布于丹參根及根莖周皮木栓層，其次是韌皮部，且周皮木栓層細(xì)胞的顏色分布與其含量正相關(guān)，即木栓層細(xì)胞紅色強度越強的部位，丹參酮類成分含量越高。而木質(zhì)部細(xì)胞的顏色與丹參酮類成分分布沒有直接相關(guān)性，木質(zhì)部是丹酚酸類化合物的主要分布場所，其次是韌皮部，木栓層中丹酚酸含量很低。近年來的研究表明，丹參地上莖葉及花序也具有與根及根莖類似的藥理作用，丹酚酸類化合物的含量在生長旺盛期明顯高于地下根及根莖。

3、會議論文(劉青平.芪藶強心膠囊治療擴張型心肌病伴慢性心衰患者的臨床觀察[c].江西省宜春市第二人民醫(yī)院,2024)公開了丹參中含有的丹參酮、丹參酚酸類成分對慢性心力衰竭、冠狀動脈粥樣硬化、心絞痛等心腦血管疾病的治療效果顯著，原因在于丹參酮和丹參酚酸類具有降低心肌細(xì)胞炎癥反應(yīng)、抑制細(xì)胞黏附、抗炎抗氧化、保護心血管內(nèi)皮細(xì)胞等心血管保護作用。

4、公開號為cn115192585a的發(fā)明專利公開了一種包含丹酚酸a、二氫丹參酮i和隱丹參酮的組合物及其用途，包含丹酚酸a、二氫丹參酮i和隱丹參酮的組合物中丹酚酸a、二氫丹參酮i和隱丹參酮之間的摩爾比為14:14:14，該組合物能夠顯著降低肝纖維化模型小鼠血清轉(zhuǎn)氨酶水平、減輕肝組織炎癥和膠原沉積、抑制促炎型巨噬細(xì)胞分泌促炎癥細(xì)胞因子、抑制促炎型巨噬細(xì)胞炎癥小體活化，并證實該丹酚酸a、該二氫丹參酮i和該隱丹參酮之間的摩爾比以1:3:4和3:4:2為最佳。

5、公開號為cn101863957a的發(fā)明專利公開了一種同步高效提取丹參中丹參酮ⅱa和丹酚酸b的方法，丹參經(jīng)過粉碎，低溫條件下用親水性溶劑提取，提取過程不斷改變壓力，提取液濃縮，得到富含丹參酮ⅱa和丹酚酸b的浸膏。該發(fā)明有機溶劑使用量少，時間短，提取率高。提取過程通過不斷的改變壓力，達到高效提取的目的，提取濃縮過程在低溫條件下處理，保證了提取效率和不破壞有效成份，提取的過程中采用壓力泵進行溶劑循環(huán)，提高提取效。

6、碳酸酐酶(carbonic?anhydrase，ca)是一種含鋅金屬酶，通過催化co2水化反應(yīng)及某些脂、醛類水化反應(yīng)，參與多種離子交換，維持機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)。ca廣泛分布于人體各組織，參與呼吸、co2和hco3-的跨膜運輸、酸堿平衡、滲透壓調(diào)節(jié)、鈣化、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、腫瘤生成等重要環(huán)節(jié)。

7、碳酸酐酶抑制劑(cai)的開發(fā)有著漫長的歷史，以乙酰唑胺等磺胺類藥物為首的cai通過抑制ca活性達到減少h+-na+交換、hco3-轉(zhuǎn)運等生理過程，從而達到改善代謝性酸中毒、降低眼壓、利尿等功效，臨床上常用于治療青光眼、心源性水腫和急性高原病。然而乙酰唑胺會引起四肢麻木及刺痛感、疲勞、體重減輕、困倦抑郁、嗜睡、金屬樣味覺、惡心、食欲不振、消化不良、腹瀉、多尿、夜尿、腎及泌尿道結(jié)、暫時性近視、磺胺樣皮疹和剝脫性皮炎等不良反應(yīng)。因此，需進一步開發(fā)副作用低、活性好的碳酸酐酶抑制劑。

8、期刊文獻(朱方石等.中醫(yī)藥對萎縮性胃炎動物模型研究進展與述評[j].上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2003,(03):61-64)中公開了董建華教授的“甘平養(yǎng)胃”方(太子參、炙百合、香櫞皮等)和“胃樂”方(丹參、三七粉、白花蛇舌草、半枝蓮等)對實驗性cag進行了酶組化及電鏡觀察，結(jié)果表明，該二方水劑均能增強琥珀脫氫酶(sdh)、碳酸酐酶(ca)活性，降低ldh活性。

9、丹參酚酸類成分和丹參酮類成分都具有保護心血管、保護神經(jīng)細(xì)胞、抗炎、抗氧化等作用，但以上技術(shù)均未公開丹參酚酸類成分和丹參酮類成分對碳酸酐酶具有抑制活性，因此有必要進一步研究。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，提供了丹參酚酸提取物和丹參酮提取物的組合物及其制備方法和應(yīng)用、產(chǎn)品。本發(fā)明通過從丹參中提取得到丹參酚酸提取物和丹參酮提取物，將丹參酚酸提取物和丹參酮提取物混合，得到具有碳酸酐酶抑制活性的組合物，進一步通過調(diào)整組合物中丹參酚酸提取物和丹參酮提取物的用量比例，可協(xié)同增效，提高碳酸酐酶抑制活性。

2、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

3、第一方面，本發(fā)明提供了丹參酚酸提取物和丹參酮提取物的組合物的制備方法，包括以下步驟：

4、1)向丹參中加入乙醇水溶液進行滲漉提取，過濾，收集丹參提取液；

5、2)將步驟1)得到的丹參提取液中的乙醇去除，調(diào)節(jié)ph至酸性，靜置，分離濾液和濾渣，將濾渣洗滌并干燥，得到丹參酮提取物；

6、3)步驟2)得到的濾液依次經(jīng)樹脂吸附、除雜和洗脫，收集洗脫液，濃縮干燥得到丹參酚酸提取物；

7、4)將步驟2)得到的丹參酮提取物和將步驟3)得到的丹參酚酸提取物混合，得到丹參酚酸提取物和丹參酮提取物的組合物。

8、具體的，所述步驟1)中乙醇水溶液的體積分?jǐn)?shù)為10-90％。在一個實施例中，所述步驟1)中滲漉提取之前還包括溶脹，步驟1)具體為：將丹參中加入乙醇水溶液依次進行溶脹、滲漉提取，過濾，收集丹參提取液。

9、所述滲漉提取是將粉碎的丹參置于滲漉筒中，由上部不斷添加溶劑，溶劑滲過丹參層向下流動過程中浸出丹參成分的方法，為動態(tài)浸出的方法，溶劑利用率高，有效成分浸出完全，可直接收集浸出液。所述滲漉提取的方法可以為單滲漉法、重滲漉法、加壓滲漉法或逆流滲漉法。在一個實施例中，將丹參粉碎后，加入80％體積分?jǐn)?shù)的乙醇水溶液浸泡、溶脹3h，丹參與乙醇水溶液的比例為1g:1-1.2ml，然后進行滲漉提??；所述滲漉提取包括：使用1080ml?80％體積分?jǐn)?shù)的乙醇水溶液滲漉5h，所述滲漉提取中丹參和乙醇水溶液的比例為1g:9-9.2ml，過濾收集丹參提取液。丹參提取液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除乙醇，經(jīng)冷凍干燥后即可得丹參提取物。在一個實施例中，將丹參粉碎后，稱取118g粉末，加入120ml?80％體積分?jǐn)?shù)的乙醇水溶液浸泡、溶脹3h，然后使用1080ml?80％體積分?jǐn)?shù)的乙醇水滲漉5h，過濾收集丹參提取液。丹參提取液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除乙醇，經(jīng)冷凍干燥后即可得丹參提取物。

10、所述步驟2)中采用鹽酸調(diào)節(jié)ph，所述ph為2.0-4.0，優(yōu)選為3.0，靜置的時間為12-48h，優(yōu)選為過夜。

11、所述步驟3)中濾液依次經(jīng)樹脂吸附、除雜和洗脫具體為：將濾液上樣于吸附樹脂進行吸附，所述吸附樹脂于優(yōu)選為d101大孔吸附樹脂，依次采用純水和20-40％體積分?jǐn)?shù)的乙醇水溶液進行除雜，所述純水的柱體積為1-10個，優(yōu)選為10個；所述乙醇水溶液的體積分?jǐn)?shù)優(yōu)選為30％，柱體積為1-10個，優(yōu)選為7個；然后采用4-8個柱體積的40-60％體積分?jǐn)?shù)的乙醇水溶液進行洗脫，所述洗脫的柱體積優(yōu)選為6個。

12、所述步驟4)的組合物中，丹參酚酸提取物和丹參酮提取物的濃度的質(zhì)量比為1-100:1，優(yōu)選為2.5-30:1，更優(yōu)選為5-10:1。在一個實施例中，所述丹參酚酸提取物和丹參酮提取物的濃度的質(zhì)量比為9-10:1。

13、第二方面，本發(fā)明提供了丹參酚酸提取物和丹參酮提取物的組合物，由上述技術(shù)方案所述制備方法制備得到。

14、第三方面，本發(fā)明提供了上述技術(shù)方案所述的制備方法制備得到的組合物或上述技術(shù)方案所述的組合物在抑制碳酸酐酶活性的藥物中的應(yīng)用。

15、所述藥物包括治療或預(yù)防以高眼壓為癥狀的疾病、治療或預(yù)防心源性水腫、治療或預(yù)防高原病的藥物。本發(fā)明對所述的高原病沒有特別限制，以本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的即可?？梢詾橐愿咴磻?yīng)為癥狀的疾病，所述高原反應(yīng)包括頭痛、頭暈、惡心、嗜睡、氣促、心慌、嘔吐、乏力、失眠、手足麻木或心率失常。在一個實施例中，所述高原病為因海拔升高所引起的慢性高原病或急性高原病。本發(fā)明對所述的以高眼壓為癥狀的疾病沒有特別限制，以本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的即可。在一個實施例中，所述藥物包括治療或預(yù)防以高眼壓為癥狀的疾病的藥物，所述以高眼壓為癥狀的疾病為青光眼、白內(nèi)障或黃斑水腫。

16、第四方面，本發(fā)明提供了一種藥物，包括上述技術(shù)方案所述的制備方法制備得到的組合物或上述技術(shù)方案所述的組合物。

17、所述藥物還包括至少一種藥用輔料，所述的藥用輔料因施用途徑和作用特征的而異，位藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的藥用輔料，包括但不限于填充劑、粘合劑、濕潤劑、吸收促進劑、表面活性劑、香味劑或甜味劑。所述填充劑可以為淀粉、蔗糖或微晶纖維素；所述粘合劑可以為淀粉漿、羥丙纖維素、明膠或聚乙二醇；所述濕潤劑可以為硬脂酸鎂、微粉硅膠或聚乙二醇類；所述吸收促進劑可以為聚山梨脂或卵磷脂；所述表面活性劑可以為伯洛沙姆、脂肪酸山梨坦或聚山梨脂。

18、所述藥物的劑型為片劑、丸劑、粉劑、膠囊劑、溶液劑、混懸劑、乳劑、氣霧劑或栓劑。所述片劑可以為分散片；所述膠囊劑可以為軟膠囊劑、硬膠囊劑或微膠囊劑；所述溶液劑可以為酏劑、糖漿劑或注射劑；所述乳劑可以為口服乳劑、靜脈注射乳劑或搽劑等。所述藥物可制成常規(guī)、速釋或緩釋的制劑。

19、所述藥物的給藥方式為口服給藥、鼻吸給藥、皮膚給藥、腔道給藥或注射給藥，所述注射給藥包括肌肉注射、皮下注射或靜脈注射。

20、相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明具有以下有益效果：本發(fā)明通過從丹參中提取得到丹參酚酸提取物和丹參酮提取物，將丹參酚酸提取物和丹參酮提取物混合，得到具有碳酸酐酶抑制活性的組合物，進一步通過調(diào)整組合物中丹參酚酸提取物和丹參酮提取物的用量比例，可協(xié)同增效，提高碳酸酐酶抑制活性，為以丹參為主的藥物研發(fā)、組分配伍提供參考，丹參酚酸提取物和丹參酮提取物的組合物可用于降低眼壓、利尿、糾正代謝性酸中毒、增加血管氧通量、提高肺通氣量、擴張腦血管、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制破骨細(xì)胞骨吸收，有望開發(fā)療效更好的用于治療或預(yù)防以高眼壓為癥狀的疾病、心源性水腫或急性高原病、心腦血管疾病、骨質(zhì)疏松引起的骨代謝病疾病的藥物。