本發(fā)明涉及到中藥納米乳凝膠，涉及一種石榴皮多酚納米乳溫敏凝膠及制備方法和用途。

背景技術(shù)：

1、外陰陰道念珠菌病(vvc)是由真菌感染所致的外陰和陰道的炎癥，其中白念珠菌是vvc的主要致病菌種。外陰陰道念珠菌病雖然不引發(fā)高死亡率，但對(duì)患者的生活質(zhì)量有持續(xù)的負(fù)面影響，包括刺激、瘙癢、排尿困難、性交困難、奶酪樣陰道分泌物、外陰灼熱和破裂，并伴有黏膜病變和輕微出血。據(jù)調(diào)查知，70％-75％的女性一生中至少會(huì)感染一次vvc，尤其是在育齡期，40％-50％的女性在第一次感染癥狀明顯緩解后，會(huì)經(jīng)歷一次或多次復(fù)發(fā)。因此，針對(duì)外陰陰道念珠菌病的治療藥物的研究受到廣泛重視。但是，由于唑類抗真菌藥物的廣泛使用，使得白念珠菌對(duì)唑類藥物的耐藥性增強(qiáng)，臨床感染難治愈。因此，從中藥提取物中尋找新的治療藥物來(lái)代替唑類抗真菌藥物的頻繁使用尤為重要。

2、石榴在維吾爾藥中具有悠久的用藥歷史，石榴皮多酚是石榴科植物石榴(punicagranatuml.)的干燥果皮中提取出的多酚成分，具有抑菌、抗氧化、抗病毒、抗腫瘤等藥理活性，對(duì)于慢性病的防治有重要意義。石榴皮中的多酚成分主要包括安石榴苷、安石榴林、沒(méi)食子酸、鞣花酸、表兒茶素、山奈酚、咖啡酸、槲皮素等。近年來(lái)，石榴皮多酚在治療陰道炎中具有較好進(jìn)展，石榴皮多酚對(duì)白念珠菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌等均具有明顯抑菌活性，同時(shí)對(duì)于治療陰道炎頗有成效。尤其是，石榴皮多酚提取物對(duì)于白念珠菌的生長(zhǎng)及其生物膜的形成和特定自誘導(dǎo)物的釋放具有一定的限制作用。

3、植物精油(plant?essential?oil)是一種從天然植物中獲取的具有芳香氣味的物質(zhì)，可作為天然廣譜抗菌劑抑制或殺死有害菌，常與其他天然成分起協(xié)同抗菌作用。同時(shí)，植物精油不僅自身具有良好的滲透性，也可作為其他藥物的促滲劑發(fā)揮作用，從而獲得更好的治療效果。石榴籽精油、牛至精油、小裂葉荊芥精油、歐薄荷精油等作為新疆特色植物精油不僅與石榴皮多酚起到協(xié)同抗菌作用，同時(shí)可替代促滲劑促進(jìn)石榴皮多酚在陰道黏膜處的吸收，起到藥輔合一的應(yīng)用效果。

4、納米乳溫敏凝膠兼具納米乳和溫敏凝膠的雙重優(yōu)點(diǎn)。納米乳作為一種新型的給藥載體，具有增加藥物溶解度、增加藥物滲透性、提高藥物穩(wěn)定性、延長(zhǎng)藥物作用時(shí)間等優(yōu)點(diǎn)。納米乳可以同時(shí)裝載親脂性和親水性的藥物分別在油相與水相中，使得不同理化性質(zhì)的藥物能夠同時(shí)進(jìn)入病灶處發(fā)揮作用，提高藥物的治療效率；溫度敏感型原位凝膠(溫敏凝膠)在室溫時(shí)處于液體狀態(tài)，方便凝膠在陰道處的推注及凝膠到陰道腔深處的鋪展，給藥后在體溫(37℃)下可迅速轉(zhuǎn)變?yōu)榘牍腆w凝膠，在陰道腔內(nèi)凝固并與陰道黏膜緊密黏附形成局部藥物儲(chǔ)庫(kù)，實(shí)現(xiàn)藥物持續(xù)釋放。因此，納米乳溫敏凝膠可作為陰道黏膜給藥的新型藥物制劑遞送策略。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明目的在于，提供一種石榴皮多酚納米乳溫敏凝膠及制備方法和應(yīng)用，該溫敏凝膠是由石榴皮多酚、植物精油、油脂、乳化劑、助乳化劑、凝膠基質(zhì)、保濕劑、凝膠、純化水和ph調(diào)節(jié)劑通過(guò)水滴定法結(jié)合改良冷凍法制成，所述納米乳溫敏凝膠兼具納米乳和溫敏凝膠的雙重優(yōu)點(diǎn)，納米乳能夠顯著改善藥物的滲透性能，提高藥物穩(wěn)定性；所選的植物精油作為天然抑菌劑不僅與石榴皮多酚起到協(xié)同抑菌作用，還可發(fā)揮促滲劑作用，促進(jìn)藥物在陰道黏膜吸收，具有藥輔合一的應(yīng)用特色。溫敏凝膠則在室溫時(shí)處于液體狀態(tài)，方便凝膠在陰道處的推注及凝膠到陰道腔深處的鋪展，給藥后在體溫(37℃)下迅速轉(zhuǎn)變?yōu)榘牍腆w凝膠，在陰道腔內(nèi)凝固并與陰道黏膜緊密黏附形成局部藥物儲(chǔ)庫(kù)，實(shí)現(xiàn)藥物持續(xù)釋放。通過(guò)本發(fā)明制備的納米乳溫敏凝膠，其物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)的穩(wěn)定性良好、抑菌效果明顯、作用時(shí)間持久、生物相容性好、給藥方式便利，適合作為陰道給藥制劑治療外陰陰道念珠菌病。該方法反應(yīng)條件溫和，實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單，適合擴(kuò)大生產(chǎn)。

2、本發(fā)明所述的一種石榴皮多酚納米乳溫敏凝膠，以重量份計(jì)是由原料：石榴皮多酚30-50份、植物精油1-20份、油脂20-50份、乳化劑50-100份、助乳化劑25-200份、凝膠基質(zhì)300-500份、凝膠10-25份、ph調(diào)節(jié)劑、純化水2000-5000份制成，其中石榴皮多酚的主要成分安石榴苷含量為40-45％、鞣花酸含量為3-5％；植物精油為石榴籽精油、牛至精油、百里香精油、薄荷精油中的一種或三種；油脂為油酸乙酯、油酸、荊芥油、椰子油、肉豆蔻酸異丙酸酯或中鏈甘油三酯或大豆油；乳化劑為吐溫-80、司盤(pán)-80、辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯或聚氧乙烯氫化蓖麻油；凝膠基質(zhì)為泊洛沙姆f127或泊洛沙姆f68；凝膠為羧甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素、脫乙酰殼聚糖、水溶性殼聚糖貨或卡波姆934；ph調(diào)節(jié)劑為鹽酸、磷酸、果膠、三乙醇胺、沙丁胺醇、氫氧化鈉或氫氧化鉀；助乳化劑為正丁醇、無(wú)水乙醇、聚乙二醇-400、甘油、1,2-丙二醇或二乙二醇單乙醚。具體操作按下列步驟進(jìn)行：

3、a、將20-50份油脂與1-20份植物精油混合得到多元油相，向多元油相中加入50-100份乳化劑，加入25-200份助乳化劑，攪拌均勻得到澄清混合油相；

4、b、將30-50份石榴皮多酚置于2000-5000份純化水中，超聲溶解后，攪拌條件下緩慢滴加到步驟a中的混合油相中，攪拌至溶液澄清透明呈淡藍(lán)色乳光，得到納米乳；

5、c、將步驟b得到的納米乳加入2000-5000份純化水稀釋備用，在溫度4℃下將300-500份凝膠基質(zhì)、10-25份凝膠黏附劑加入到稀釋后的納米乳中，攪拌至完全溶解，置于溫度4℃冷藏過(guò)夜后加入ph調(diào)節(jié)劑，得到ph為3.5-4.5的納米乳溫敏凝膠。

6、一種石榴皮多酚納米乳溫敏凝膠的制備方法，以重量份計(jì)，具體操作按以下步驟進(jìn)行：

7、a、將20-50份油脂為油酸乙酯、油酸、荊芥油、椰子油、肉豆蔻酸異丙酸酯或中鏈甘油三酯或大豆油與1-20份植物精油為石榴籽精油、牛至精油、百里香精油、薄荷精油中的一種或三種混合得到多元油相，然后加入50-100份乳化劑為吐溫-80、司盤(pán)-80、辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯或聚氧乙烯氫化蓖麻油，25-200份助乳化劑為正丁醇、無(wú)水乙醇、聚乙二醇-400、甘油、1,2-丙二醇或二乙二醇單乙醚，攪拌均勻得到澄清混合油相；

8、b、將30-50份石榴皮多酚置于2000-5000份純化水中，超聲溶解后，攪拌條件下緩慢滴加到步驟a中的混合油相中，攪拌至溶液澄清透明呈淡藍(lán)色乳光，得到納米乳；

9、c、將步驟b得到的納米乳加入2000-5000份純化水稀釋備用，在溫度4℃下將300-500份凝膠基質(zhì)為泊洛沙姆f127或泊洛沙姆f68，10-25份凝膠黏附劑為羧甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素、脫乙酰殼聚糖、水溶性殼聚糖貨或卡波姆934加入到稀釋后的納米乳中，攪拌至完全溶解，置于溫度4℃冷藏過(guò)夜后加入ph調(diào)節(jié)劑為鹽酸、磷酸、果膠、三乙醇胺、沙丁胺醇、氫氧化鈉或氫氧化鉀，得到ph為3.5-4.5的納米乳溫敏凝膠。

10、所述石榴皮多酚納米乳溫敏凝膠在制備治療外陰陰道念珠菌的藥物中的應(yīng)用。

11、本發(fā)明所述的石榴皮多酚納米乳溫敏凝膠具有以下有益效果：

12、本發(fā)明采用水滴定法結(jié)合改良冷凍法制備得到了石榴皮多酚納米乳溫敏凝膠，改善了石榴皮多酚膜滲透性差和生物利用度低，凝膠作用時(shí)間短和易泄露的難題，從外觀、形態(tài)、粒徑、zeta電位、體外釋放和體外滲透等多方面對(duì)石榴皮多酚納米乳溫敏凝膠進(jìn)行表征，并對(duì)石榴皮多酚納米乳溫敏凝膠進(jìn)行抑菌活性評(píng)價(jià)。研究結(jié)果表明，石榴皮多酚納米乳溫敏凝膠具有穩(wěn)定物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)、在體內(nèi)具有良好的滲透吸收效果、抑菌效果明顯、作用時(shí)間持久、生物相容性好、給藥方式便利，適合用做陰道制劑治療外陰陰道念珠菌病。

13、本發(fā)明所制備的石榴皮多酚納米乳溫敏凝膠是一種溫度響應(yīng)型原位凝膠，在室溫條件下呈液態(tài)，易于給藥，便于藥物在陰道內(nèi)的流動(dòng)和鋪展；在37℃的體溫環(huán)境下，凝膠由液態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榘牍虘B(tài)，便于凝膠與陰道黏膜發(fā)生黏附作用，延長(zhǎng)藥物在病灶處的滯留時(shí)間。

14、石榴皮多酚納米乳溫敏凝膠顯著增加了石榴皮多酚的黏膜滲透性。

15、石榴皮多酚納米乳溫敏凝膠具有明顯的抑制白念珠菌生長(zhǎng)的能力。