本發(fā)明屬于屬于醫(yī)藥，具體涉及鼠乳桿菌在開發(fā)增強(qiáng)免疫檢測(cè)點(diǎn)抑制劑療效藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、胃癌(gc)是最常見的惡性腫瘤之一。隨著微生物檢測(cè)技術(shù)和腫瘤內(nèi)部駐留細(xì)菌的進(jìn)一步研究，越來越多的證據(jù)表明，腫瘤內(nèi)的微生物對(duì)腫瘤微環(huán)境(tme)至關(guān)重要。這些微生物通常與宿主處于一種動(dòng)態(tài)平衡中，影響著多種生理過程。這種平衡的破壞與一系列疾病發(fā)生有關(guān)，其影響腫瘤進(jìn)展、藥物抵抗以及治療反應(yīng)，已引起了越來越多研究者的密切關(guān)注。一些研究表明，腫瘤內(nèi)微生物或其代謝產(chǎn)物可以通過改變腫瘤微環(huán)境中腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(tils)的比例和功能，進(jìn)而促進(jìn)癌癥的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移。例如，咽峽炎鏈球菌(streptococcus?anginosus)對(duì)胃癌腫瘤的定植可以通過tmpc與anxa2相互作用，加速胃癌的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移發(fā)展。瘤內(nèi)共生微生物相關(guān)的代謝物甲基胺-n-氧化物能夠促進(jìn)cd8+t細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤免疫。然而，腫瘤中其他潛在微生物對(duì)腫瘤的影響以及其作用機(jī)制仍有待進(jìn)一步探索。隨著越來越多證據(jù)表明腫瘤中存在微生物，瘤內(nèi)微生物逐漸被認(rèn)為是腫瘤微環(huán)境的一部分。瘤內(nèi)微生物對(duì)腫瘤進(jìn)展及其潛在機(jī)制有待充分闡明。

2、通過對(duì)免疫檢查點(diǎn)分子程序性細(xì)胞死亡受體1(pd-1)、其配體(pd-l1)和細(xì)胞毒性t淋巴細(xì)胞相關(guān)蛋白4(ctla-4)等的深入研究，人們發(fā)現(xiàn)免疫檢查點(diǎn)具有若干調(diào)節(jié)免疫抑制的通路，通過靶向pd-1、pd-l1和ctla-4的免疫檢查點(diǎn)抑制劑(icb)能夠阻斷這些抑制通路，從而增強(qiáng)對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用，延緩腫瘤進(jìn)展。pd-1也被稱為cd279，是免疫球蛋白超家族的一種重要的免疫抑制分子。t細(xì)胞膜表面的pd-1蛋白與其腫瘤細(xì)胞表達(dá)的配體pd-l1特異性識(shí)別，通過調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)，避免腫瘤細(xì)胞受到損傷或破壞。在腫瘤微環(huán)境中，pd-l1與pd-1相互作用后，招募蛋白酪氨酸磷酸酶shp-2來減弱t細(xì)胞的激活信號(hào)并介導(dǎo)免疫逃逸，最終誘導(dǎo)t細(xì)胞凋亡、無(wú)反應(yīng)性和功能衰竭，從而讓腫瘤細(xì)胞逃避免疫系統(tǒng)的監(jiān)視。阻斷pd-1和pd-l1的結(jié)合可以逆轉(zhuǎn)免疫抑制性腫瘤微環(huán)境，提高機(jī)體免疫細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷能力。對(duì)此，人們對(duì)icb為代表的免疫治療為不同的難治性腫瘤患者提供了可靠的治療策略。臨床上已廣泛用于肺癌、頭頸部鱗癌、結(jié)直腸癌、黑色素瘤、霍奇金淋巴瘤等腫瘤的治療。然而，超過一半接受icb治療的患者表現(xiàn)出耐藥性，這限制icb的廣泛使用。而闡明影響icb治療腫瘤的相關(guān)機(jī)制，可能是克服icb治療耐藥性的潛在策略。目前人們對(duì)pd-1抑制劑耐藥的機(jī)制主要有以下幾方面：腫瘤抗原免疫原性不足、主要組織相容性復(fù)合體(mhc)功能障礙、cd8+t細(xì)胞嚴(yán)重耗竭、腫瘤微環(huán)境抑制。而越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，微生物群能影響多種腫瘤細(xì)胞對(duì)免疫治療的反應(yīng)，包括胃癌、結(jié)直腸癌和黑色素瘤等。而icb的免疫相關(guān)毒性也與腸道微生物群的組成有關(guān)。一項(xiàng)臨床試驗(yàn)表明，移植來自免疫治療響應(yīng)者的糞便微生物群能克服黑色素瘤患者對(duì)免疫治療的耐藥性。據(jù)報(bào)道，嗜黏蛋白阿克曼氏菌、長(zhǎng)雙歧桿菌、普氏糞桿菌對(duì)icb治療表現(xiàn)出較好的療效。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明旨在探究腫瘤內(nèi)微生物與胃癌發(fā)展之間的潛在聯(lián)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)鼠乳桿菌(lactobacillus?murinus)增強(qiáng)αpd-1單克隆抗體的治療效果，降低腫瘤微環(huán)境內(nèi)treg細(xì)胞的浸潤(rùn)，增強(qiáng)了cd8+t細(xì)胞的浸潤(rùn)；通過靶向代謝組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)lactobacillus?murinus定植的腫瘤組織中，丁酸含量顯著升高，丁酸在體外與cd8+t細(xì)胞共培育，可以抑制小鼠腫瘤細(xì)胞mfc的生長(zhǎng)。

2、因此，本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供鼠乳桿菌(lactobacillus?murinus)在制備增強(qiáng)免疫檢測(cè)點(diǎn)抑制劑療效藥物中的應(yīng)用。

3、優(yōu)選的，所述的免疫檢測(cè)點(diǎn)抑制劑是pd-1/pd-l1免疫檢查點(diǎn)的單克隆抗體。

4、優(yōu)選的，所述的免疫檢測(cè)點(diǎn)抑制劑是pd-1單克隆抗體。

5、本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供鼠乳桿菌(lactobacillus?murinus)在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。優(yōu)先的，所述的抗腫瘤藥物包括但不限于抗卵巢癌、乳腺癌細(xì)胞、宮頸癌、肺癌、肝癌、結(jié)直腸癌或胃癌的藥物。

6、本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供一種抗腫瘤組合物，其包含鼠乳桿菌(lactobacillusmurinus)和免疫檢測(cè)點(diǎn)抑制劑。

7、優(yōu)選的，所述的免疫檢測(cè)點(diǎn)抑制劑是pd-1/pd-l1免疫檢查點(diǎn)的單克隆抗體。

8、優(yōu)選的，所述的免疫檢測(cè)點(diǎn)抑制劑是pd-1單克隆抗體。

9、本發(fā)明的第四個(gè)目的是提供上述的抗腫瘤組合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。優(yōu)先的，所述的抗腫瘤藥物包括但不限于抗卵巢癌、乳腺癌細(xì)胞、宮頸癌、肺癌、肝癌、結(jié)直腸癌或胃癌的藥物。

10、本發(fā)明的第五個(gè)目的是提供一種抗腫瘤藥物，其包含有效量的鼠乳桿菌(lactobacillus?murinus)或上述的抗腫瘤組合物作為活性成分，以及藥學(xué)上可接受的載體。

11、本發(fā)明通過mfc細(xì)胞(小鼠胃癌細(xì)胞)荷瘤小鼠模型評(píng)估鼠乳桿菌(lactobacillusmurinus)定植對(duì)腫瘤生長(zhǎng)和αpd-1單克隆抗體療效的影響。通過免疫組化和流式細(xì)胞術(shù)評(píng)估腫瘤微環(huán)境調(diào)節(jié)性t(treg)細(xì)胞和cd8+t細(xì)胞的浸潤(rùn)。使用靶向代謝組學(xué)方法比較小鼠腫瘤組織中差異代謝物，通過細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞術(shù)驗(yàn)證差異代謝物對(duì)小鼠cd8+t細(xì)胞的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：鼠乳桿菌(lactobacillus?murinus)增強(qiáng)αpd-1單克隆抗體的治療效果，降低腫瘤微環(huán)境內(nèi)t細(xì)胞的浸潤(rùn)，增強(qiáng)了cd8+t細(xì)胞的浸潤(rùn)。通過靶向代謝組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)lactobacillus?murinus定植的腫瘤組織中，丁酸含量顯著升高，丁酸在體外與cd8+t細(xì)胞共培育，可以抑制小鼠腫瘤細(xì)胞mfc的生長(zhǎng)。鼠乳桿菌對(duì)多種腫瘤細(xì)胞，包括卵巢癌細(xì)胞、乳腺癌細(xì)胞、宮頸癌細(xì)胞、肺癌細(xì)胞、肝癌細(xì)胞、結(jié)直腸癌細(xì)胞、胃癌細(xì)胞均具有抑制活性，可望用于開發(fā)抗腫瘤藥物。

12、本發(fā)明的發(fā)現(xiàn)為使用l.murinus作為增強(qiáng)αpd-1抗體治療效果的輔助手段提供了科學(xué)依據(jù)，l.murinus通過調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境中的免疫細(xì)胞和代謝物，增強(qiáng)了抗腫瘤免疫反應(yīng)，從而提高αpd-1抗體的治療效果。這些發(fā)現(xiàn)為開發(fā)新的腫瘤免疫治療策略提供了有價(jià)值的信息。

技術(shù)特征：

1.鼠乳桿菌(lactobacillus?murinus)在制備增強(qiáng)免疫檢測(cè)點(diǎn)抑制劑療效藥物中的應(yīng)用。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的免疫檢測(cè)點(diǎn)抑制劑是pd-1/pd-l1免疫檢查點(diǎn)的單克隆抗體。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的免疫檢測(cè)點(diǎn)抑制劑是pd-1單克隆抗體。

4.鼠乳桿菌(lactobacillus?murinus)在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

5.一種抗腫瘤組合物，其特征在于，包含鼠乳桿菌(lactobacillus?murinus)和免疫檢測(cè)點(diǎn)抑制劑。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的抗腫瘤組合物，其特征在于，所述的免疫檢測(cè)點(diǎn)抑制劑是

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的抗腫瘤組合物，其特征在于，所述的免疫檢測(cè)點(diǎn)抑制劑是pd-1單克隆抗體。

8.權(quán)利要求5-7任一項(xiàng)所述的抗腫瘤組合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

9.根據(jù)權(quán)利要求4或8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的抗腫瘤藥物為抗卵巢癌、乳腺癌細(xì)胞、宮頸癌、肺癌、肝癌、結(jié)直腸癌或胃癌的藥物。

10.一種抗腫瘤藥物，其特征在于，包含有效量的鼠乳桿菌(lactobacillus?murinus)或權(quán)利要求5-7任一項(xiàng)所述的抗腫瘤組合物作為活性成分，以及藥學(xué)上可接受的載體。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了鼠乳桿菌在開發(fā)增強(qiáng)免疫檢測(cè)點(diǎn)抑制劑療效藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)鼠乳桿菌(Lactobacillus?murinus)增強(qiáng)αPD?1單克隆抗體的治療效果，降低腫瘤微環(huán)境內(nèi)T細(xì)胞的浸潤(rùn)，增強(qiáng)了CD8<supgt;+</supgt;T細(xì)胞的浸潤(rùn)；通過靶向代謝組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)L.murinus定植的腫瘤組織中，丁酸含量顯著升高，丁酸在體外與CD8<supgt;+</supgt;T細(xì)胞共培育，可以抑制小鼠腫瘤細(xì)胞MFC的生長(zhǎng)。因此，本發(fā)明為使用L.murinus作為增強(qiáng)αPD?1抗體治療效果的輔助手段提供了科學(xué)依據(jù)，為開發(fā)新的腫瘤免疫治療策略提供了有價(jià)值的信息。

技術(shù)研發(fā)人員：夏承來,周曉玲
受保護(hù)的技術(shù)使用者：佛山市婦幼保健院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6