本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種蛋白聚合物在制備治療孤獨(dú)癥藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、孤獨(dú)癥又稱為自閉癥，是一種神經(jīng)系統(tǒng)失調(diào)導(dǎo)致的發(fā)育障礙，表現(xiàn)為早期不能進(jìn)行正常的語言表達(dá)和社交活動，并且常見做一些刻板、重復(fù)性和限制性的動作和行為。目前世界范圍內(nèi)人群發(fā)病率大約為1％，男性患者比例大于女性，但女性發(fā)病時癥狀較男性嚴(yán)重，且至少70％的孤獨(dú)癥患者通常還伴有其他疾病(lai?m?c,lombardomv,baron-cohens.search?strategyandselectioncriteria[j].lancet,2014,383:896-910.)。

2、孤獨(dú)癥治療通常是多學(xué)科的，研究表明，系統(tǒng)強(qiáng)化行為治療法(例如，加強(qiáng)互動和有意義的交流)帶來較多的益處。精神心理醫(yī)生和教育工作者，通過行為分析，系統(tǒng)地根據(jù)不同的行為問題采取相對應(yīng)的行為治療，有助于在家中和學(xué)校里管理患兒。目前還缺乏能夠改變孤獨(dú)癥病程和改變核心癥狀的藥物，針對涉及孤獨(dú)癥不同系統(tǒng)的藥物正在研究中(催產(chǎn)素系統(tǒng)，膽堿能系統(tǒng)，以及谷氨酸系統(tǒng))，抗精神病藥物可有效減少孤獨(dú)癥兒童重復(fù)性行為，在青少年和成人孤獨(dú)癥的治療的有效性仍缺乏證據(jù)。

3、干細(xì)胞一般在常規(guī)條件下培養(yǎng)，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)在適當(dāng)應(yīng)激條件下培養(yǎng)干細(xì)胞后，裂解應(yīng)激培養(yǎng)的干細(xì)胞以后可以其裂解物中分離多種蛋白質(zhì)，所分離得到的蛋白質(zhì)具有修復(fù)神經(jīng)系統(tǒng)功能，治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的功效。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的至少一個不足，提供一種蛋白聚合物在制備治療孤獨(dú)癥藥物中的應(yīng)用。

2、本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：

3、一種蛋白聚合物在制備治療孤獨(dú)癥藥物中的應(yīng)用，所述蛋白聚合物的制備包括以下步驟：

4、s1)培養(yǎng)干細(xì)胞并使用適當(dāng)方法制造應(yīng)激環(huán)境刺激干細(xì)胞；

5、s2)將所述應(yīng)激條件培養(yǎng)的干細(xì)胞裂解，從裂解物中分離純化得到所述蛋白聚合物。

6、在一些應(yīng)用的實(shí)例中，所述蛋白聚合物至少包括如下蛋白中的至少一種：

7、sp|p02768|albu_human?serum?albumin?os＝homo?sapiens；

8、sp|p02787|trfe_human?serotransferrin?os＝homo?sapiens；

9、sp|p51884|lum_human?lumican?os＝homo?sapiens；

10、sp|p62736|acta_humanactin，aortic?smooth?muscle?os＝homo?sapiens；

11、sp|p01009|a1at_humanalpha-1-antitrypsin?os＝homo?sapiens；

12、sp|p07951|tpm2_human?tropomyosin?beta?chain?os＝homo?sapiens；

13、sp|p08670|vime_human?vimentin?os＝homo?sapiens；

14、sp|p02751|finc_human?fibronectin?os＝homo?sapiens；

15、sp|p09493|tpm1_human?tropomyosin?alpha-1chain?os＝homo?sapiens；

16、sp|p21333|flna_human?filamin-aos＝homo?sapiens；

17、sp|p0dox5|igg1_human?immunoglobulin?gamma-1heavy?chain?os＝homosapiens；

18、sp|p24821|tena_human?tenascin?os＝homo?sapiens；

19、sp|p01023|a2mg_humanalpha-2-macroglobulin?os＝homo?sapiens；

20、sp|p60709|actb_humanactin,cytoplasmic?1os＝homo?sapiens；

21、sp|p69891|hbg1_human?hemoglobin?subunit?gamma-1os＝homo?sapiens；

22、sp|p01024|c3?human?complement?c3?os＝homo?sapiens。

23、在一些應(yīng)用的實(shí)例中，所述sp|p02768|albu_human?serum?albumin?os＝homosapiens和所述sp|p02787|trfe_human?serotransferrin?os＝homo?sapiens在所述蛋白聚合物中的質(zhì)量之和占蛋白聚合物總質(zhì)量不低于40％。

24、在一些應(yīng)用的實(shí)例中，所述應(yīng)激條件包括如下中的至少一種：紫外照射、紅外照射、電磁場、高溫、低溫、低氧、高氧、高ph值、低ph值、超聲、太赫茲電磁波、x射線、微波、α射線、β射線、γ射線、離子束、高co2、低co2。各種應(yīng)激處理既可以先后進(jìn)行，在不相沖突時也可以同時進(jìn)行。如紫外照射可以可高氧或低氧同時進(jìn)行，或先進(jìn)行紫外照射應(yīng)激，之后進(jìn)行高co2應(yīng)激處理。

25、在一些應(yīng)用的實(shí)例中，所述紫外線照射滿足如下條件中的至少一個：

26、照射時間為1～30h；

27、照射強(qiáng)度為10～100μw/cm2；

28、紫外線的波長為290～340nm。

29、在一些應(yīng)用的實(shí)例中，所述高溫為37.5℃～42.0℃；所述低溫為2.0-25.0℃；所述低氧為氧氣體積含量為3.0％-16.0％；所述高氧為氧氣體積含量為22.0％-100.0％；所述高ph值為7.6-10.0；所述低ph值為1.0-6.8；所述超聲的強(qiáng)度不超過使用細(xì)胞可以耐受的超聲強(qiáng)度；所述x射線、微波、α射線、β射線、γ射線、離子束的照射強(qiáng)度或劑量不超過使用細(xì)胞可以耐受的強(qiáng)度或劑量；所述電磁場為不超過使用細(xì)胞可以耐受的強(qiáng)度；所述高co2為co2含量為5.1％-15.0％；所述低co2為co2含量為1.0％-4.9％。

30、無血清干細(xì)胞培養(yǎng)基中的未知成分少，外源蛋白含量少，得到的蛋白聚合物具有更高的安全性，也有利于簡化蛋白聚合物的純化操作。在一些應(yīng)用的實(shí)例中，所述培養(yǎng)使用的培養(yǎng)基為無血清干細(xì)胞培養(yǎng)基。

31、在一些應(yīng)用的實(shí)例中，所述干細(xì)胞包括但不限于胚胎干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞、體外誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞、造血干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、骨髓干細(xì)胞、肝干細(xì)胞、肌肉衛(wèi)星細(xì)胞、皮膚表皮干細(xì)胞、腸上皮干細(xì)胞、視網(wǎng)膜干細(xì)胞、胰腺干細(xì)胞、muse細(xì)胞中的至少一種。

32、在一些應(yīng)用的實(shí)例中，所述間充質(zhì)干細(xì)胞來源包括但不限于臍帶來源人間充質(zhì)干細(xì)胞、骨髓來源間充質(zhì)干細(xì)胞、人胎盤來源間充質(zhì)干細(xì)胞、脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞、皮膚來源間充質(zhì)干細(xì)胞。

33、在一些應(yīng)用的實(shí)例中，所述應(yīng)激培養(yǎng)干細(xì)胞的裂解方法為可以裂解干細(xì)胞的方法，包括化學(xué)法和/或物理法。從裂解物中分離提取蛋白質(zhì)的方法包括但不限于：色譜法、光譜法、體積法、透析法、鹽析法、有機(jī)溶劑沉淀法、酸提法、堿提法、超濾法、層析法、電泳法、離心法中的至少一種。

34、在一些應(yīng)用的實(shí)例中，所述蛋白聚合物滿足如下特性中的至少一種：

35、1)分子篩排阻層析時，在流速為0.1～0.3ml/min、洗脫液為pbs的排阻層析條件下，第一組分出峰的洗脫體積為12.0～13.2ml、第二組分出峰的洗脫體積為15.2～17.0ml、第三組分出峰的洗脫體積為17.0～20.0ml、第四組分出峰的洗脫體積為29.0～31.0ml、第五組分出峰的洗脫體積為31.0～34.0ml；

36、2)sds-page檢測時，使用4～20％預(yù)制膠進(jìn)行樣品分離檢測，樣品條帶主要分布于11kd～100kd，其中分子量從大到小，第一條帶位于75kd～100kd之間；第二條帶位于63kd～75kd之間；

37、3)反相hplc檢測時，在上樣體積80～120μl、柱溫20～30℃，流速0.2～0.8ml/min，檢測波長260nm和/或280nm，流動相為pbs溶液，樣品分離后出峰時間在10～40min之間，其中特征峰1出峰時間為13～17min，特征峰2出峰時間為20～22min。

38、在一些應(yīng)用的實(shí)例中，所述藥物為注射劑、鼻噴制劑或口服制劑。

39、在一些應(yīng)用的實(shí)例中，所述藥物的給藥方式選自鞘內(nèi)給藥、靜脈給藥、鞘內(nèi)和靜脈聯(lián)合給藥、顱內(nèi)給藥、鼻噴給藥、黏膜給藥、口服給藥中的一種。

40、在一些應(yīng)用的實(shí)例中，所述藥物的劑型為凍干粉、注射液、凝膠、丸劑、片劑、散劑或膏劑。

41、本發(fā)明的有益效果是：

42、發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)，源自間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)應(yīng)激環(huán)境，如紫外照射刺激后產(chǎn)生的蛋白聚合物，對孤獨(dú)癥有一定的治療作用，為孤獨(dú)癥的治療提供了可能。