本公開提供了使用針對序列相似家族19成員a5(fam19a5)的拮抗劑(例如抗fam19a5抗體)或包括此類拮抗劑的組合物治療個體(例如人)視網膜病變(例如糖尿病性視網膜病變)和/或黃斑變性(例如年齡相關性黃斑變性)的方法。

背景技術：

1、糖尿病性視網膜病變(dr)(也稱為糖尿病眼病)等視網膜病變由視網膜的小血管和神經元損傷引起。dr是全世界工作年齡人口(例如20-74歲)視力喪失的最常見原因。leer.等人，眼睛vis(lond)2：17(2015)。近年來，隨著糖尿病患者預期壽命的增加，dr的發(fā)病率急劇增加。粗略地講，大約50％的糖尿病患者糖尿病發(fā)病10年后發(fā)生dr，70％的糖尿病患者糖尿病發(fā)病20年后發(fā)生dr，90％的糖尿病患者糖尿病發(fā)病30年后發(fā)生dr。據估計，到2030年，全世界20-79歲年齡組的糖尿病患者人數將幾乎翻倍，這意味著dr確診人數將進一步增加。nentwich?m.m.和ulbig?m.w.，《世界糖尿病雜志(world?j?diabetes)》6(3)：489-499(2015)。

2、雖然目前有一些治療方案，能夠有助于管理dr相關癥狀，但是這些治療方案不僅不能對疾病起到治愈作用，還會產生不良副作用。例如，激光療法在治療中會引起嚴重不適、永久性視網膜瘢痕，以及周邊視力、色覺和夜視能力下降。參見worldwideweb.aao.org/munnerlyn-laser-surgery-center/laser-treatment-of-proliferative-nonproliferative-。因此，目前需要有糖尿病性視網膜病變的替代治療方案。

3、年齡相關性黃斑變性(amd)是另一種影響眼睛的視網膜病變，具體指眼睛的中央部分(即黃斑部)。amd由滋養(yǎng)視網膜的動脈硬化所致，使視網膜組織缺氧，導致中心視力下降。gheorghe?a.等人，《rom?j?ophthalmol》59(2)：74-77(2015)。amd是最常見的一種黃斑變性，僅美國就有約1100萬人患病，全球患病人數為1.7億人次。amd是工業(yè)化國家造成視力殘疾的主要原因，也是世界范圍內造成視力殘疾的第三大原因。pennington?k.l.和deangelis?m.m.，《eye?vis》(lond)3：34(2016)。衰老是最大的風險因素；因此，預計到2050年，美國的amd患病人數將增加到2200萬人次，而到2040年，全球患病人數預計將增加到2.88億人次。wong?w.l.等人，《柳葉刀-全球健康(lancet?glob?health)》2：e106-e116(2014)。

4、如果及早確診，可以通過各種治療方案治療amd，包括維生素補充劑(例如抗氧化劑)、膳食變化(例如低脂飲食)、抗血管生成藥物(例如抗血管內皮生長因子(vegf)抗體)、激光療法、手術(例如網膜下手術)和視網膜轉位術。holz?f.g.等人，《j?clin?invest》124(4)：1430-1438(2014)。然而，目前尚無已知的治療amd的方法，很多治療方案可能并不適用于所有amd患者。例如，很多出現脈絡膜新生血管(cnv)(即濕性amd)的患者不適合激光療法，這是因為就激光治療而言，cnv過大，或者無法準確確定其位置。此外，即使接受了治療，很多amd患者的中心視力也會逐漸喪失。virgili?g.和bini?a.，《cochrane數據庫系統(tǒng)(cochrane?database?syst)》，版次3：cd004763(2007)。因此，目前需要更加有效而全面的amd治療方案。

技術實現思路

1、本發(fā)明提供了一種與參考值(例如，施用fam19a5拮抗劑之前個體的相應值，或不施用fam19a5拮抗劑的情況下個體的相應值)相比，可改善有需要的個體視網膜內的視網膜電位的方法，包括對個體施用針對序列相似家族19成員a5(“fam19a5”)蛋白的拮抗劑(“fam19a5拮抗劑”)。在某些方面，視網膜電位的改善包括a波、b波、振蕩電位或其任何組合的增加。

2、在某些方面，個體患有與視網膜電位降低有關的疾病或病癥。在某些方面，所述疾病或病癥是指糖尿病性視網膜病變。在其他方面，所述疾病或病癥是指視網膜年齡相關性黃斑變性。

3、本發(fā)明還提供了一種治療有需要的患者的視網膜病變和/或黃斑病變的方法，包括施用個體fam19a5拮抗劑。

4、在某些方面，視網膜病變是指糖尿病性視網膜病變。在某些方面，糖尿病性視網膜病變是指非增生型糖尿病性視網膜病變(npdr)。在其他方面，糖尿病性視網膜病變是指增生型糖尿病性視網膜病變。在某些方面，糖尿病性視網膜病變與個體視網膜內視網膜電位降低、周細胞損失、無細胞毛細血管的形成、血管充血或其任何組合有關。

5、在某些方面，黃斑病變是指糖尿病性黃斑水腫。在某些方面，糖尿病性黃斑水腫與個體視網膜內的視網膜電位降低、周細胞損失、無細胞毛細血管的形成、血管充血或其任何組合有關。

6、在某些方面，與參考值(例如，施用fam19a5拮抗劑之前個體的相應值，或不施用fam19a5拮抗劑的情況下個體的相應值)相比，fam19a5拮抗劑可改善個體的視網膜電位。在某些方面，視網膜電位的改善包括a波、b波、振蕩電位或其任何組合的增加。在某些方面，fam19a5拮抗劑減少了個體視網膜內的周細胞損失。在某些方面，fam19a5拮抗劑用于減少和/或抑制個體視網膜內無細胞毛細血管的形成。在其他方面，fam19a5拮抗劑用于減少和/或抑制個體視網膜神經纖維層內的血管充血。

7、本公開還提供了一種用于治療有需要的個體的黃斑變性的方法，包括向個體施用針對fam19a5蛋白的拮抗劑。

8、在某些方面，黃斑變性是指年齡相關性黃斑變性。在某些方面，年齡相關性黃斑變性是指干性(萎縮性)黃斑變性。在其他方面，年齡相關性黃斑變性是指濕性(新生血管性或滲出性)黃斑變性。在某些方面，年齡相關性黃斑變性是指(i)早期amd、(ii)中期amd或(iii)晚期amd(地圖樣萎縮)。在更多方面，年齡相關性黃斑變性與個體視網膜內的脈絡膜小疣積累或聚集、新生血管、視網膜電位降低、星形膠質細胞形成或其任何組合有關。

9、在某些方面，cd31和/或vegf表達減少表明，fam19a5拮抗劑用于減少和/或抑制個體視網膜內的新生血管。在某些方面，cd31和/或vegf表達減少表明，fam19a5拮抗劑能夠減少和/或抑制具有激光誘導脈絡膜新生血管的小鼠視網膜內的新生血管。在更多方面，其中，與參考值(例如，施用fam19a5拮抗劑之前個體的相應值，或不施用fam19a5拮抗劑的情況下個體的相應值)相比，fam19a5拮抗劑降低了個體視網膜的神經纖維層和神經節(jié)細胞層內的血小板衍生生長因子(pdgf)表達。在其他方面，與參考值(例如，施用fam19a5拮抗劑之前個體的相應值，或不施用fam19a5拮抗劑的情況下個體的相應值)相比，fam19a5拮抗劑可改善個體的視網膜電位。在某些方面，視網膜電位的改善包括b波的增加。在某些方面，fam19a5拮抗劑能夠減少和/或抑制脈絡膜小疣在個體視網膜內的積累或聚集。

10、在某些方面，fam19a5拮抗劑是反義寡核苷酸、sirna、shrna、mirna、靶向fam19a5的dsrna、適體、pna或包括它們的載體。

11、在某些方面，fam19a5拮抗劑是特異性結合fam19a5蛋白的抗體或其抗原結合部分(“抗fam19a5抗體”)。其中，在某些方面，抗fam19a5抗體表現出的屬性從以下幾項中選擇：(a)通過酶聯免疫吸附測定法(elisa)測量，與可溶性人fam19a5結合，kd小于等于10nm；(b)通過elisa測量，與膜結合型人fam19a5結合，kd小于等于10nm；(c)(a)和(b)兩者兼有。

12、在某些方面，抗fam19a5抗體與參考抗體交叉競爭，與人fam19a5表位結合，其中，參考抗體選自由表2-5中的抗體組成的群組。在某些方面，所述參考抗體包括重鏈cdr1、cdr2和cdr3以及輕鏈cdr1、cdr2和cdr3，(i)其中，所述重鏈cdr1包括seq?id?no：14所示的氨基酸序列，所述重鏈cdr2包括seq?id?no：15所示的氨基酸序列，所述重鏈cdr3包括seqid?no：16所示的氨基酸序列，所述輕鏈cdr1包括seq?id?no：26所示的氨基酸序列，所述輕鏈cdr2包括seq?id?no：27所示的氨基酸序列，所述輕鏈cdr3包括seq?id?no：28所示的氨基酸序列；或(ii)其中，所述重鏈cdr1包括seq?id?no：17所示的氨基酸序列，所述重鏈cdr2包括seq?id?no：18所示的氨基酸序列，所述重鏈cdr3包括seq?id?no：19所示的氨基酸序列，所述輕鏈cdr1包括seq?id?no：29所示的氨基酸序列，所述輕鏈cdr2包括seq?id?no：30所示的氨基酸序列，所述輕鏈cdr3包括seq?id?no：31所示的氨基酸序列。

13、在某些方面，抗fam19a5抗體特異性結合與參考抗體相同的fam19a5表位，其中，參考抗體選自由表2-5組成的群組。在某些方面，所述參考抗體包括重鏈cdr1、cdr2和cdr3以及輕鏈cdr1、cdr2和cdr3，(i)其中，所述重鏈cdr1包括seq?id?no：14所示的氨基酸序列，所述重鏈cdr2包括seq?id?no：15所示的氨基酸序列，所述重鏈cdr3包括seq?id?no：16所示的氨基酸序列，所述輕鏈cdr1包括seq?id?no：26所示的氨基酸序列，所述輕鏈cdr2包括seqid?no：27所示的氨基酸序列，所述輕鏈cdr3包括seq?id?no：28所示的氨基酸序列；或(ii)其中，所述重鏈cdr1包括seq?id?no：17所示的氨基酸序列，所述重鏈cdr2包括seq?id?no：18所示的氨基酸序列，所述重鏈cdr3包括seq?id?no：19所示的氨基酸序列，所述輕鏈cdr1包括seq?id?no：29所示的氨基酸序列，所述輕鏈cdr2包括seq?id?no：30所示的氨基酸序列，所述輕鏈cdr3包括seq?id?no：31所示的氨基酸序列。

14、在某些方面，抗fam19a5抗體特異性結合至少一個fam19a5表位，即seq?id?no：6或seq?id?no：9。

15、在某些方面，所述抗fam19a5抗體包括重鏈cdr1、cdr2和cdr3以及輕鏈cdr1、cdr2和cdr3，(i)其中，所述重鏈cdr1包括cdr1，cdr1選自由表2中的cdr1組成的群組；(ii)其中，所述重鏈cdr2包括cdr2，cdr2選自由表2中的cdr2組成的群組；(iii)其中，所述重鏈cdr3包括cdr3，cdr3選自由表2中的cdr3組成的群組；(iv)其中，所述輕鏈cdr1包括cdr1，cdr1選自由表3中的cdr1組成的群組；(v)其中，所述輕鏈cdr2包括cdr2，cdr2選自由表3中的cdr2組成的群組；和/或(vi)其中，所述輕鏈cdr3包括cdr3，cdr3選自由表3中的cdr3組成的群組。

16、在某些方面，所述抗fam19a5抗體包括重鏈cdr1、cdr2和cdr3以及輕鏈cdr1、cdr2和cdr3，(i)其中，所述重鏈cdr1包括seq?id?no：14或seq?id?no：17所示的氨基酸序列；(ii)其中，所述重鏈cdr2包括seq?id?no：15或seq?id?no：18所示的氨基酸序列；(iii)其中，所述重鏈cdr3包括seq?id?no：16或seq?id?no：19所示的氨基酸序列；(iv)其中，所述輕鏈cdr1包括seq?id?no：26或seq?id?no：29所示的氨基酸序列；(v)其中，所述輕鏈cdr2包括seq?id?no：27或seq?id?no：30所示的氨基酸序列；和/或(vi)其中，所述輕鏈cdr3包括seqid?no：28或seq?id?no：31所示的氨基酸序列。

17、在某些方面，所述抗fam19a5抗體包括重鏈cdr1、cdr2和cdr3以及輕鏈cdr1、cdr2和cdr3，其中，所述重鏈cdr1、cdr2和cdr3分別包括seq?id?no：14、15和16所示的氨基酸序列，所述輕鏈cdr1、cdr2和cdr3分別包括seq?id?no：26、27和28所示的氨基酸序列。在其他方面，所述抗fam19a5抗體包括重鏈cdr1、cdr2和cdr3以及輕鏈cdr1、cdr2和cdr3，其中，所述重鏈cdr1、cdr2和cdr3分別包括seq?id?no：17、18和19所示的氨基酸序列，所述輕鏈cdr1、cdr2和cdr3分別包括seq?id?no：29、30和31所示的氨基酸序列。

18、在某些方面，所述抗fam19a5抗體包括重鏈可變區(qū)(vh)和輕鏈可變區(qū)(vl)，(i)其中，所述vh包括seq?id?no：36或seq?id?no：37所示的氨基酸序列；或(ii)其中，所述vl包括seq?id?no：40或seq?id?no：41所示的氨基酸序列。在某些方面，所述vh包括seq?id?no：36的氨基酸序列，所述vl包括seq?id?no：40所示的氨基酸序列。在其他方面，所述vh包括seqid?no：37的氨基酸序列，所述vl包括seq?id?no：41所示的氨基酸序列。

19、在某些方面，所述抗fam19a5抗體包括重鏈可變區(qū)(vh)和輕鏈可變區(qū)(vl)，其中，所述vh包括與作為seq?id?no：36或seq?id?no：37所示的氨基酸序列至少約80％、至少約85％、至少約90％、至少約95％、至少約96％、至少約97％、至少約98％、至少約99％或約100％相同的氨基酸序列。在某些方面，所述抗fam19a5抗體包括重鏈可變區(qū)(vh)和輕鏈可變區(qū)(vl)，其中，所述vl包括與作為seq?id?no：40或seq?id?no：41所示的氨基酸序列至少約80％、至少約85％、至少約90％、至少約95％、至少約96％、至少約97％、至少約98％、至少約99％或約100％相同的氨基酸序列。

20、在某些方面，所述抗fam19a5抗體包括重鏈可變區(qū)(vh)和輕鏈可變區(qū)(vl)，(i)其中，所述vh包括與作為seq?id?no：36或seq?id?no：37所示的氨基酸序列至少約80％、至少約85％、至少約90％、至少約95％、至少約96％、至少約97％、至少約98％、至少約99％或約100％相同的氨基酸序列；and(ii)其中，所述vl包括與作為seq?id?no：40或seq?id?no：41所示的氨基酸序列至少約80％、至少約85％、至少約90％、至少約95％、至少約96％、至少約97％、至少約98％、至少約99％或約100％相同的氨基酸序列。

21、在某些方面，抗fam19a5抗體包括fab、fab'，f(ab')2、fv或單鏈fv(scfv)。在某些方面，抗fam19a5抗體選自由igg1、igg2、igg3、igg4及其變體組成的群組。在某些方面，抗fam19a5抗體為igg2、igg4或其組合。在更多方面，抗fam19a5抗體包括igg2/igg4同種型抗體。在某些方面，所述抗fam19a5抗體包括不具有fc功能的恒定區(qū)。在某些方面，所述抗fam19a5抗體為嵌合抗體、人抗體或人源化抗體。

22、在某些方面，fam19a5拮抗劑與具有第二結合部分的分子連接，由此形成雙特異性分子。在某些方面，fam19a5拮抗劑與試劑連接，由此形成免疫偶聯物。

23、在某些方面，用藥學上可接受的載體，配制本發(fā)明所公開的fam19a5拮抗劑。在某些方面，通過眼內給藥方式施用fam19a5拮抗劑。在某些方面，眼內給藥包括玻璃體內給藥。在某些方面，fam19a5拮抗劑通過靜脈注射施用。

24、在某些方面，本發(fā)明所公開的方法進一步包括施用治療劑。在某些方面，接受本公開治療的個體是人。

25、本公開還提供了一種用于防治視網膜病變和/或黃斑病變的藥用組合物，包括使用藥物有效量的針對fam19a5蛋白的拮抗劑。