本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥，具體涉及一種負(fù)載阿霉素脂質(zhì)體和cxcl12的抗腫瘤轉(zhuǎn)移水凝膠及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、癌癥是全球發(fā)病率和死亡率最高的疾病之一。盡管人類已在癌癥早期篩查和臨床治療等方面取得了重大進(jìn)展，但晚期癌癥患者仍然面臨著嚴(yán)峻的預(yù)后，其原因主要在于腫瘤細(xì)胞具有較強(qiáng)的侵襲周圍組織并向遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移的能力。約90%的癌癥患者死亡原因與腫瘤逃逸轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。化療是腫瘤治療中最常用的治療方法，它可以通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝、阻斷細(xì)胞有絲分裂等多種機(jī)制誘導(dǎo)細(xì)胞死亡。然而，化療在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)，伴隨腫瘤組織內(nèi)穩(wěn)態(tài)結(jié)構(gòu)的破壞，并刺激免疫抑制性細(xì)胞增殖，從而引發(fā)腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移。

2、目前臨床上尚缺乏針對(duì)性防治腫瘤轉(zhuǎn)移的藥物。處于臨床前研究和臨床試驗(yàn)階段的藥物策略主要有重塑轉(zhuǎn)移前灶微環(huán)境以及殺傷轉(zhuǎn)移性細(xì)胞兩類。

3、重塑轉(zhuǎn)移前灶微環(huán)境采用化學(xué)干擾或基因調(diào)控手段降低轉(zhuǎn)移前灶中促腫瘤轉(zhuǎn)移細(xì)胞含量或激活微環(huán)境免疫反應(yīng)，可干擾腫瘤細(xì)胞的定植過(guò)程，進(jìn)而阻礙轉(zhuǎn)移灶的形成。然而，此策略需預(yù)判轉(zhuǎn)移前灶位置，避免調(diào)控不當(dāng)引發(fā)的治療副作用。

4、殺傷轉(zhuǎn)移型腫瘤細(xì)胞采用特異性抗體或免疫細(xì)胞的膜組分修飾殺傷性藥物，增加藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的識(shí)別能力，提高對(duì)轉(zhuǎn)移型腫瘤細(xì)胞的殺傷效率，進(jìn)而降低腫瘤轉(zhuǎn)移率。然而，腫瘤細(xì)胞表型多變且具有異質(zhì)性，藥物識(shí)別轉(zhuǎn)移型腫瘤細(xì)胞的有效性和逐一追蹤殺傷的完全性會(huì)極大影響策略的發(fā)展。

5、因此如何靈敏識(shí)別并捕獲轉(zhuǎn)移型腫瘤細(xì)胞，如何高效殺滅腫瘤細(xì)胞并防止其遺漏逃逸是抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物設(shè)計(jì)的兩個(gè)瓶頸問(wèn)題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是提供了一種負(fù)載阿霉素脂質(zhì)體和cxcl12的抗腫瘤轉(zhuǎn)移水凝膠及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明構(gòu)建“腫瘤誘殺陷阱”誘捕轉(zhuǎn)移型腫瘤細(xì)胞，讓陷阱內(nèi)的阿霉素脂質(zhì)體高效殺傷被富集的腫瘤細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)防治腫瘤轉(zhuǎn)移的治療目標(biāo)。

2、為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明擬采用的技術(shù)方案是：

3、本發(fā)明提供了一種負(fù)載阿霉素脂質(zhì)體和cxcl12的抗腫瘤轉(zhuǎn)移水凝膠，所述抗腫瘤轉(zhuǎn)移水凝膠的制備方法為：將阿霉素脂質(zhì)體和cxcl12溶解于交聯(lián)劑溶液中，再向增稠劑溶液中加入含有阿霉素脂質(zhì)體和cxcl12的交聯(lián)劑溶液制得。

4、本發(fā)明提供了所述的負(fù)載阿霉素脂質(zhì)體和cxcl12的抗腫瘤轉(zhuǎn)移水凝膠的制備方法，所述制備方法具體包括以下步驟：

5、（1）將脂質(zhì)材料和阿霉素溶解于有機(jī)溶劑中，真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，得到均勻脂質(zhì)膜，加入pbs溶液進(jìn)行水化，超聲破碎對(duì)混合物進(jìn)行均質(zhì)化處理，過(guò)濾除雜后得到包裹有阿霉素的阿霉素脂質(zhì)體；

6、（2）將cxcl12與所述阿霉素脂質(zhì)體溶解于交聯(lián)劑溶液中，與溶解的增稠劑溶液迅速攪拌得到負(fù)載阿霉素脂質(zhì)體和cxcl12的抗腫瘤轉(zhuǎn)移水凝膠。

7、進(jìn)一步的：所述步驟（1）中脂質(zhì)材料為卵磷脂與膽固醇的混合物，卵磷脂和膽固醇的質(zhì)量比為3-6:1。

8、進(jìn)一步的：所述步驟（2）中cxcl12在與交聯(lián)劑的混合溶液中的濃度大于6?μg/ml，所述混合溶液中活性藥物阿霉素的濃度大于900?μg/ml。

9、進(jìn)一步的：所述步驟（2）中增稠劑為聚乙烯醇，聚乙烯醇在水凝膠中的質(zhì)量比為1-8%。

10、進(jìn)一步的：所述步驟（2）中交聯(lián)劑為硼砂，硼砂在水凝膠中的質(zhì)量比為0.01-0.1%。

11、本發(fā)明還提供了所述的水凝膠或所述制備方法得到的負(fù)載阿霉素脂質(zhì)體和cxcl12的抗腫瘤轉(zhuǎn)移水凝膠在制備抗腫瘤轉(zhuǎn)移的制劑中的應(yīng)用。

12、進(jìn)一步的：所述腫瘤為肺癌、乳腺癌、肝癌、卵巢癌、胃癌、骨髓瘤。

13、進(jìn)一步的：所述水凝膠中釋放的cxcl12能夠吸引腫瘤細(xì)胞，使腫瘤細(xì)胞主動(dòng)向凝膠遷移。

14、進(jìn)一步的：所述水凝膠顯著降低了肝功能的損傷，顯著降低了游離dox?lipo引起的心臟毒性。

15、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有的優(yōu)點(diǎn)和有益效果是：

16、1、負(fù)載阿霉素脂質(zhì)體和cxcl12的抗腫瘤轉(zhuǎn)移水凝膠（bh-gel）中釋放的“誘餌”cxcl12可以招募腫瘤細(xì)胞，吸引腫瘤細(xì)胞主動(dòng)向凝膠遷移；

17、2、負(fù)載阿霉素脂質(zhì)體和cxcl12的抗腫瘤轉(zhuǎn)移水凝膠中釋放阿霉素脂質(zhì)體能夠集中高效地殺死被招募的腫瘤細(xì)胞，最大限度地減少全身毒性并限制癌癥轉(zhuǎn)移；

18、3、與同等劑量的阿霉素脂質(zhì)體相比，局部注射所述bh-gel對(duì)肺腫瘤具有更好的抗腫瘤活性；

19、4、所述bh-gel不僅降低了腫瘤細(xì)胞逃逸的風(fēng)險(xiǎn)，而且減少了與阿霉素相關(guān)的不良副作用。

20、本發(fā)明構(gòu)建的負(fù)載阿霉素脂質(zhì)體和cxcl12的抗腫瘤轉(zhuǎn)移水凝膠，所述水凝膠包含具有招募腫瘤細(xì)胞作用的cxcl12和能殺傷腫瘤細(xì)胞的阿霉素脂質(zhì)體。本發(fā)明先采用薄膜水化法制備阿霉素脂質(zhì)體（也可使用市售阿霉素脂質(zhì)體），隨后將聚乙烯醇與含有阿霉素脂質(zhì)體和cxcl12的硼砂溶液物理混合，制備得到負(fù)載阿霉素脂質(zhì)體和cxcl12的抗腫瘤轉(zhuǎn)移水凝膠。

21、所述抗腫瘤轉(zhuǎn)移水凝膠能通過(guò)cxcl12引誘腫瘤細(xì)胞主動(dòng)靠近的富集作用以及阿霉素脂質(zhì)體介導(dǎo)的藥物殺傷作用，解決了現(xiàn)今抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物設(shè)計(jì)如何靈敏識(shí)別并捕獲轉(zhuǎn)移型腫瘤細(xì)胞以及高效殺滅腫瘤細(xì)胞并防止其遺漏逃逸的瓶頸問(wèn)題。為防治腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移提供了新的藥物治療策略，，具有廣泛的市場(chǎng)應(yīng)用前景。

技術(shù)特征：

1.一種負(fù)載阿霉素脂質(zhì)體和cxcl12的抗腫瘤轉(zhuǎn)移水凝膠，其特征在于：所述抗腫瘤轉(zhuǎn)移水凝膠的制備方法為：將阿霉素脂質(zhì)體和cxcl12溶解于交聯(lián)劑溶液中，再向增稠劑溶液中加入含有阿霉素脂質(zhì)體和cxcl12的交聯(lián)劑溶液制得。

2.權(quán)利要求1所述的負(fù)載阿霉素脂質(zhì)體和cxcl12的抗腫瘤轉(zhuǎn)移水凝膠的制備方法，其特征在于：所述制備方法具體包括以下步驟：

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述步驟（1）中脂質(zhì)材料為卵磷脂與膽固醇的混合物，卵磷脂和膽固醇的質(zhì)量比為3-6:1。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述步驟（2）中cxcl12在與交聯(lián)劑的混合溶液中的濃度大于6?μg/ml，所述混合溶液中活性藥物阿霉素的濃度大于900?μg/ml。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述步驟（2）中增稠劑為聚乙烯醇，聚乙烯醇在水凝膠中的質(zhì)量比為1-8%。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述步驟（2）中交聯(lián)劑為硼砂，硼砂在水凝膠中的質(zhì)量比為0.01-0.1%。

7.權(quán)利要求1所述的水凝膠或權(quán)利要求2-6任一項(xiàng)所述制備方法得到的負(fù)載阿霉素脂質(zhì)體和cxcl12的抗腫瘤轉(zhuǎn)移水凝膠在制備抗腫瘤轉(zhuǎn)移的制劑中的應(yīng)用。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于：所述腫瘤為肺癌、乳腺癌、肝癌、卵巢癌、胃癌、骨髓瘤。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于：所述水凝膠中釋放的cxcl12能夠吸引腫瘤細(xì)胞，使腫瘤細(xì)胞主動(dòng)向凝膠遷移。

10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于：所述水凝膠顯著降低了肝功能的損傷，顯著降低游離dox?lipo引起的心臟毒性。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種負(fù)載阿霉素脂質(zhì)體和CXCL12的抗腫瘤轉(zhuǎn)移水凝膠及其制備方法和應(yīng)用。所述水凝膠包含具有招募腫瘤細(xì)胞作用的CXCL12和能殺傷腫瘤細(xì)胞的阿霉素脂質(zhì)體。本發(fā)明將增稠劑與含有阿霉素脂質(zhì)體和CXCL12的交聯(lián)劑溶液混合，制備得到負(fù)載阿霉素脂質(zhì)體和CXCL12的抗腫瘤轉(zhuǎn)移水凝膠。本發(fā)明制備的水凝膠通過(guò)負(fù)載CXCL12以及阿霉素脂質(zhì)體，可實(shí)現(xiàn)誘捕轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞以及高效殺傷被富集的腫瘤細(xì)胞，解決了現(xiàn)今抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物設(shè)計(jì)如何靈敏識(shí)別并捕獲轉(zhuǎn)移型腫瘤細(xì)胞以及高效殺滅腫瘤細(xì)胞并防止其遺漏逃逸的瓶頸問(wèn)題，為防治腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移提供了新的藥物治療策略，具有廣泛的市場(chǎng)應(yīng)用前景。

技術(shù)研發(fā)人員：郭羚,鄭慶榕,陳彩蓮
受保護(hù)的技術(shù)使用者：海南大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/2