本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥，特別涉及核酸在制備防治惡液質(zhì)的藥物中的應(yīng)用和施用方法。

背景技術(shù)：

1、惡液質(zhì)是機(jī)體自身組織被消耗的一種復(fù)雜代謝臨床綜合征，可發(fā)生于多種疾病，如腫瘤、艾滋病、嚴(yán)重創(chuàng)傷、術(shù)后、吸收不良及敗血癥等，其中最常見的是腫瘤伴發(fā)的惡液質(zhì)，又稱腫瘤惡液質(zhì)。惡液質(zhì)標(biāo)志性臨床癥狀包括系統(tǒng)性炎癥進(jìn)展、腫瘤微環(huán)境缺氧形成的以warburg效應(yīng)為標(biāo)志的糖酵解代謝模式、失眠、食欲不振，肌肉消耗引發(fā)的體重丟失、全身衰竭及代謝異常等。針對腫瘤惡液質(zhì)，中國國家衛(wèi)生健康委辦公廳發(fā)布了《腫瘤惡液質(zhì)臨床診斷與治療指南(2020版)》，其中指出有關(guān)腫瘤惡液質(zhì)相關(guān)的治療手段缺乏且治療效果不佳。臨床隨機(jī)試驗(yàn)顯示，包括孕激素類似藥等的食欲刺激劑、5-羥色胺(5-hydroxytryptamine，5-ht)拮抗劑，和包括環(huán)氧合酶-2(cyclooxygenase-2，cox-2)抑制劑等的抗炎藥均不能完全逆轉(zhuǎn)癌性惡液質(zhì)的異常狀態(tài)，并伴有血栓栓塞等風(fēng)險(xiǎn)。此外，放化療等抗腫瘤治療也加劇惡液質(zhì)的重要癥狀，即肌肉消耗的不良反應(yīng)。

2、肌肉消耗和體重降低是惡液質(zhì)診療的重要指標(biāo)。當(dāng)前逆轉(zhuǎn)腫瘤惡液質(zhì)患者的體重丟失，進(jìn)而幫助治療腫瘤惡液質(zhì)病癥，提高腫瘤末期患者生存質(zhì)量，是以患者利益為中心的腫瘤治療研究熱點(diǎn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為解決上述現(xiàn)有技術(shù)中的至少部分問題，本發(fā)明設(shè)計(jì)并制備了能夠用于防治惡液質(zhì)的核酸，其包含或能夠在體內(nèi)產(chǎn)生寡核苷酸，并在細(xì)胞內(nèi)及循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)穩(wěn)定存在的同時(shí)直接抑制惡液質(zhì)相關(guān)的核酸因子，進(jìn)一步以直接或間接的方式調(diào)控相關(guān)通路蛋白表達(dá)，最終顯著改變惡液質(zhì)。具體地，本發(fā)明包括以下內(nèi)容。

2、本發(fā)明的第一方面，提供核酸在制備防治惡液質(zhì)的藥物中的應(yīng)用，其中，所述核酸包括或者能夠產(chǎn)生下述(1)和/或(2)的寡核苷酸：

3、(1)序列如seq?id?no.1-42任一項(xiàng)所示的寡核苷酸；

4、(2)上述(1)經(jīng)過核苷酸修飾且具有相同功能的寡核苷酸。

5、在某些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，其中，所述核苷酸修飾包括對磷酸基團(tuán)和/或核糖基團(tuán)進(jìn)行修飾；

6、其中，所述磷酸基團(tuán)的修飾是指對磷酸基團(tuán)中的氧進(jìn)行修飾，包括硫代修飾、硼烷化修飾，從而穩(wěn)定核酸的結(jié)構(gòu)；

7、所述核糖基團(tuán)的修飾是指對核糖基團(tuán)中2’-羥基的修飾，包括在核糖基團(tuán)的2’-羥基位置引入甲氧基或氟，從而使核糖核酸酶不易切割核酸，增加核酸的穩(wěn)定性。

8、在某些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，其中，能夠產(chǎn)生(1)和/或(2)寡核苷酸的核酸為動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)載體。

9、在某些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，能夠產(chǎn)生(1)和/或(2)寡核苷酸的核酸所使用的載體為重組質(zhì)粒、aav病毒載體或慢病毒載體。

10、在某些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，所述寡核苷酸包含于細(xì)胞外囊泡中。

11、在某些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，所述藥物的劑型包括注射劑、注射用粉末、片劑、膏劑、膠囊劑、顆粒劑、氣霧劑、噴霧劑或粉吸入劑。

12、在某些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，所述藥物經(jīng)全身給藥來施用，包括皮下注射、肌肉注射、靜脈內(nèi)給藥、口服給藥、吸入給藥或緩釋給藥。

13、在某些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，所述藥物設(shè)計(jì)為以60kg體重計(jì)，以4μg-60μg/人/次的量施用所述寡核苷酸。

14、在某些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，所述藥物設(shè)計(jì)為能夠以0.005-1μg/kg體重的量施用所述寡核苷酸。

15、在某些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，所述藥物設(shè)計(jì)為能夠使所述寡核苷酸在體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)中的有效濃度為1×104-1×109拷貝/μl，或所述藥物設(shè)計(jì)為能夠使所述寡核苷酸在靶器官內(nèi)的有效濃度為1×104-1×109拷貝/mg。

16、在某些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，所述防治包括下述之一：

17、a.預(yù)防、減輕、逆轉(zhuǎn)、改善、治愈惡液質(zhì)或其癥狀；

18、b.抑制病灶內(nèi)細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲、細(xì)胞周期改變中的一種或多種；

19、c.促進(jìn)病灶內(nèi)細(xì)胞的凋亡、裂解或吸收。

20、在某些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，所述惡液質(zhì)包括因腫瘤發(fā)展所引起的惡液質(zhì)前期、惡液質(zhì)期和惡液質(zhì)難治期階段中的一種或多種。

21、在某些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，所述惡液質(zhì)的癥狀包括肌肉消耗、體重減少、精神萎靡、失眠、全身衰竭、代謝異常、飲食下降和/或活動(dòng)力減弱。

22、本發(fā)明的另一方面，提供體外調(diào)整細(xì)胞增殖的方法，其包括使體外細(xì)胞與本發(fā)明所述寡核苷酸接觸的步驟。優(yōu)選地，體外細(xì)胞包括腫瘤細(xì)胞或永生化細(xì)胞。

23、本發(fā)明的另一方面，提供一種含核酸藥物的施用方法，其中，所述核酸包括或者能夠產(chǎn)生下述(1)和/或(2)的寡核苷酸：

24、(1)序列如seq?id?no.1-42任一項(xiàng)所示的寡核苷酸；

25、(2)上述(1)經(jīng)過核苷酸修飾且具有相同功能的寡核苷酸；

26、所述方法包括以全身給藥方式施用所述藥物。

27、在某些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的含核酸藥物的施用方法，其包括以皮下注射、肌肉注射、靜脈內(nèi)給藥、口服給藥、吸入給藥或緩釋給藥的方式全身給藥。

28、在某些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的含核酸藥物的施用方法，其中，所述藥物的施用能夠以60kg體重計(jì)，4μg-60μg/人/次的量將所述寡核苷酸遞送到體內(nèi)。

29、在某些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的含核酸藥物的施用方法，其中，所述藥物的施用能夠以60kg體重計(jì)，5μg-50μg/人/次的量將所述寡核苷酸遞送到體內(nèi)。

30、在某些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的含核酸藥物的施用方法，其中，所述藥物的施用能夠使所述寡核苷酸在體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)中的有效濃度為1×104-1×109拷貝/μl，或能夠使所述寡核苷酸在靶器官內(nèi)的有效濃度為1×104-1×109拷貝/mg。

31、本發(fā)明的核酸通過其包含或產(chǎn)生的寡核苷酸調(diào)節(jié)體內(nèi)惡液質(zhì)相關(guān)的核酸因子，啟動(dòng)自體的重編程狀態(tài)，通過調(diào)節(jié)關(guān)鍵核酸因子的活躍/沉默，實(shí)現(xiàn)非編碼rna調(diào)控信號(hào)編程網(wǎng)絡(luò)，實(shí)現(xiàn)單個(gè)非編碼rna調(diào)控多個(gè)信號(hào)通路的目的，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)重建失調(diào)的生理狀態(tài)的新穩(wěn)態(tài)。以本發(fā)明的核酸作為活性成分的藥物在防治過程中相對其他核酸藥物，用藥量極小，在實(shí)現(xiàn)藥效的基礎(chǔ)上，確保用藥安全，顛覆傳統(tǒng)質(zhì)粒/核酸藥物給藥的現(xiàn)狀。此外，本發(fā)明的核酸無特異性反應(yīng)，具有較高體內(nèi)安全性。

技術(shù)特征：

1.核酸在制備防治惡液質(zhì)的藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述核酸包括或者能夠產(chǎn)生下述(1)和/或(2)的寡核苷酸：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述核苷酸修飾包括對磷酸基團(tuán)和/或核糖基團(tuán)進(jìn)行修飾；

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，能夠產(chǎn)生(1)和/或(2)寡核苷酸的核酸為動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)載體。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，能夠產(chǎn)生(1)和/或(2)寡核苷酸的核酸所使用的載體為重組質(zhì)粒、aav病毒載體或慢病毒載體。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述寡核苷酸包含于細(xì)胞外囊泡中。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物的劑型包括注射劑、注射用粉末、片劑、膏劑、膠囊劑、顆粒劑、氣霧劑、噴霧劑或粉吸入劑。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述防治包括下述之一：

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述惡液質(zhì)包括因腫瘤發(fā)展所引起的惡液質(zhì)前期、惡液質(zhì)期和惡液質(zhì)難治期階段中的一種或多種。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述惡液質(zhì)的癥狀包括肌肉消耗、體重減少、精神萎靡、失眠、全身衰竭、代謝異常、飲食下降和/或活動(dòng)力減弱。

10.含核酸藥物的施用方法，其特征在于，所述核酸包括或者能夠產(chǎn)生下述(1)和/或(2)的寡核苷酸：

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的含核酸藥物的施用方法，其特征在于，包括以皮下注射、肌肉注射、靜脈內(nèi)給藥、口服給藥、吸入給藥或緩釋給藥的方式全身給藥。

12.根據(jù)權(quán)利要求10所述的施用方法，其特征在于，所述藥物的施用能夠以60kg體重計(jì)，4μg-60μg/人/次的量將所述寡核苷酸遞送到體內(nèi)。

13.根據(jù)權(quán)利要求10所述的施用方法，其特征在于，所述藥物的施用能夠以60kg體重計(jì)，5μg-50μg/人/次的量將所述寡核苷酸遞送到體內(nèi)。

14.根據(jù)權(quán)利要求10所述的施用方法，其特征在于，所述藥物的施用能夠使所述寡核苷酸在體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)中的有效濃度為1×104-1×109拷貝/μl，或所述藥物的施用能夠使所述寡核苷酸在靶器官內(nèi)的有效濃度為1×104-1×109拷貝/mg。

15.根據(jù)權(quán)利要求10所述的施用方法，其特征在于，所述藥物的施用能夠使所述寡核苷酸在體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)中的有效濃度為2×104-1×108拷貝/μl，或所述藥物的施用能夠使所述寡核苷酸在靶器官內(nèi)的有效濃度為2×104-1×108拷貝/mg。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開核酸在制備防治惡液質(zhì)的藥物中的應(yīng)用和施用方法。本發(fā)明的核酸通過其包含或產(chǎn)生的寡核苷酸調(diào)節(jié)體內(nèi)惡液質(zhì)相關(guān)的核酸因子，啟動(dòng)自體的重編程狀態(tài)，通過調(diào)節(jié)關(guān)鍵核酸因子的活躍/沉默，實(shí)現(xiàn)非編碼RNA調(diào)控信號(hào)編程網(wǎng)絡(luò)，實(shí)現(xiàn)單個(gè)非編碼RNA調(diào)控多個(gè)信號(hào)通路的目的，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)重建失調(diào)的生理狀態(tài)的新穩(wěn)態(tài)。以本發(fā)明的核酸作為活性成分的藥物在防治過程中相對其他核酸藥物，用藥量極小，實(shí)現(xiàn)藥效的基礎(chǔ)上，確保用藥安全，顛覆傳統(tǒng)質(zhì)粒/核酸藥物給藥的現(xiàn)狀。此外，本發(fā)明的核酸無特異性反應(yīng)，具有較高體內(nèi)安全性。

技術(shù)研發(fā)人員：胡小云,田春亮
受保護(hù)的技術(shù)使用者：江蘇核泰生物有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/30