本申請涉及藥物化學領(lǐng)域，特別涉及乙酰乙酸在抑制皮膚纖維化中的應(yīng)用及抑制皮膚成纖維細胞纖維化的方法。

背景技術(shù)：

1、皮膚纖維化是一種影響皮膚及其下層組織的疾病，表現(xiàn)為皮膚和結(jié)締組織的異常增厚和硬化，這種病理狀態(tài)不僅影響患者的外貌，還可能導致嚴重的功能障礙和慢性疼痛。皮膚纖維化可以是局部的，如瘢痕疙瘩，也可以是全身性的，如系統(tǒng)性硬化癥。目前，皮膚纖維化的治療仍然是一個臨床挑戰(zhàn)，需要新的治療方法來改善患者的生活質(zhì)量。

2、皮膚纖維化的病因多種多樣，包括遺傳、環(huán)境因素、自身免疫疾病和未知因素等。病理機制涉及炎癥、細胞外基質(zhì)的異常沉積，特別是膠原蛋白的過度合成和沉積，這些過程導致皮膚結(jié)構(gòu)的改變，皮膚失去彈性和柔韌性，最終形成硬化的斑塊。皮膚纖維化的核心特征是細胞外基質(zhì)的異常積累，尤其是膠原蛋白，這種積累導致皮膚變厚、變硬。正常皮膚中，膠原蛋白和其他基質(zhì)成分保持動態(tài)平衡，既有合成也有降解。然而，在纖維化狀態(tài)下，這種平衡被打破，導致膠原蛋白合成過度而降解不足。

3、成纖維細胞是皮膚中合成和分泌膠原蛋白的主要細胞類型，在皮膚纖維化過程中，這些細胞被異常激活，轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂懈吆铣赡芰Φ摹盎罨衫w維細胞”。這些活化的成纖維細胞能夠大量合成膠原蛋白，并改變周圍的細胞外基質(zhì)環(huán)境。多種信號通路參與皮膚纖維化的發(fā)生，包括轉(zhuǎn)化生長因子-β(tgf-β)信號通路。tgf-β是一個關(guān)鍵的纖維化調(diào)節(jié)因子，它可以促進成纖維細胞的增殖和活化，刺激膠原蛋白的合成。在纖維化過程中，tgf-β信號通路通常被異常激活，這會導致過度的膠原蛋白沉積和其他纖維化特征。慢性炎癥是許多纖維化疾病的一個重要因素。在皮膚纖維化的早期階段，炎癥細胞如巨噬細胞、t細胞等會被招募到受損區(qū)域。這些炎癥細胞釋放各種細胞因子和生長因子，進一步刺激成纖維細胞的活化和膠原蛋白的合成。炎癥過程中的氧化應(yīng)激也可以損傷正常組織，加劇纖維化的進程。

4、目前治療皮膚纖維化的方法包括藥物治療、物理治療、激光治療和手術(shù)治療。藥物治療通常包括免疫抑制劑、抗炎藥物和抗纖維化藥物。然而，這些治療方法往往效果有限，且可能伴隨顯著的副作用。物理治療和激光治療可以提供一定的癥狀緩解，但通常需要長期和重復(fù)的治療。手術(shù)治療雖然可以去除纖維化組織，但存在復(fù)發(fā)風險和術(shù)后并發(fā)癥。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本申請?zhí)岢鲆阴Ｒ宜嵩谝种破つw纖維化中的應(yīng)用，所述乙酰乙酸的化學式為ch3coch2cooh。

2、本申請還提出乙酰乙酸在制備皮膚纖維化的藥物中的應(yīng)用，所述藥物為注射劑、噴霧劑、滴劑中的一種。

3、其中，所述乙酰乙酸的濃度為0.1-10mm。

4、本申請還提出一種促進脂肪干細胞成骨分化的方法，以解決現(xiàn)有技術(shù)中治療皮膚纖維化的問題。

5、本申請?zhí)岢鲆种破つw成纖維細胞纖維化的方法，包括以下步驟：

6、s1：無菌獲取人體的皮膚組織；

7、s2：將所述脂肪組織切成小塊，與膠原酶i混合，并在37℃、5％co2的培養(yǎng)箱下進行消化；

8、s3：完成酶解后，經(jīng)離心處理并進行洗滌，將細胞轉(zhuǎn)移至含有培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中進一步培養(yǎng)；

9、s4：待細胞培養(yǎng)至80％融合度時，將其轉(zhuǎn)移至含有乙酰乙酸的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得培養(yǎng)后的皮膚成纖維細胞；

10、s5：檢測、凍存。

11、其中，所述步驟s2中的消化時間為4-6小時。

12、其中，所述步驟s3中的離心條件為1000-1500rpm，離心時間為5-10分鐘。

13、其中，所述步驟s3和步驟s4中的細胞培養(yǎng)在培養(yǎng)箱中進行，所述培養(yǎng)箱為37℃恒溫培養(yǎng)箱，其中含有co2的氣體濃度為5％。

14、其中，所述步驟s3和步驟s4中的細胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基為高糖dmem培養(yǎng)基，所述高糖dmem培養(yǎng)基中含質(zhì)量分數(shù)10％胎牛血清和1％青霉素/鏈霉素。

15、本申請通過待細胞培養(yǎng)至80％融合度時，將其轉(zhuǎn)移至含有乙酰乙酸的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得培養(yǎng)后的皮膚成纖維細胞，利用乙酰乙酸抑制膠原蛋白的合成，減少細胞外基質(zhì)的沉積，從而可能減緩或阻止皮膚纖維化的發(fā)展。

技術(shù)特征：

1.乙酰乙酸在抑制皮膚纖維化中的應(yīng)用，所述乙酰乙酸的化學式為ch3coch2cooh。

2.乙酰乙酸在制備皮膚纖維化的藥物中的應(yīng)用，所述藥物為注射劑、噴霧劑、滴劑中的一種。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的乙酰乙酸在制備皮膚纖維化的藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述乙酰乙酸的濃度為0.1-10mm。

4.一種抑制皮膚成纖維細胞纖維化的方法，其特征在于，包括以下步驟：

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的抑制皮膚成纖維細胞纖維化的方法，其特征在于，所述步驟s2中的消化時間為4-6小時。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的抑制皮膚成纖維細胞纖維化的方法，其特征在于，所述步驟s3中的離心條件為1000-1500rpm，離心時間為5-10分鐘。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的抑制皮膚成纖維細胞纖維化的方法，其特征在于，所述步驟s3和步驟s4中的細胞培養(yǎng)在培養(yǎng)箱中進行，所述培養(yǎng)箱為37℃恒溫培養(yǎng)箱，其中含有co2的氣體濃度為5％。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的抑制皮膚成纖維細胞纖維化的方法，其特征在于，所述步驟s3和步驟s4中的細胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基為高糖dmem培養(yǎng)基，所述高糖dmem培養(yǎng)基中含質(zhì)量分數(shù)10％胎牛血清和1％青霉素/鏈霉素。

技術(shù)總結(jié)
本申請涉及乙酰乙酸在抑制皮膚纖維化中的應(yīng)用及抑制皮膚成纖維細胞纖維化的方法，包括以下步驟：S1：無菌獲取人體的皮膚組織；S2：將所述脂肪組織切成小塊，與膠原酶I混合，并在37℃、5％CO<subgt;2</subgt;的培養(yǎng)箱下進行消化；S3：完成酶解后，經(jīng)離心處理并進行洗滌，將細胞轉(zhuǎn)移至含有培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中進一步培養(yǎng)；S4：待細胞培養(yǎng)至80％融合度時，將其轉(zhuǎn)移至含有乙酰乙酸的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得培養(yǎng)后的皮膚成纖維細胞；S5：檢測、凍存。本申請利用乙酰乙酸抑制膠原蛋白的合成，減少細胞外基質(zhì)的沉積，從而可能減緩或阻止皮膚纖維化的發(fā)展。

技術(shù)研發(fā)人員：李帥軍,商婷
受保護的技術(shù)使用者：鈦能動（上海）生物醫(yī)藥科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/30