本發(fā)明涉及一種氯法齊明混懸劑及其應(yīng)用，尤其涉及一種具有優(yōu)異的近紅外光熱、光聲及熒光多重效應(yīng)的氯法齊明混懸劑及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、光療主要包括光動(dòng)力治療以及光熱治療，能夠?qū)崿F(xiàn)對腫瘤的定時(shí)定位治療，使得腫瘤治療更為可控和個(gè)體化。光療還能夠?qū)ζは铝龅仍趦?nèi)的多種腫瘤實(shí)施精準(zhǔn)殺傷，最小化對正常人體細(xì)胞組織的損傷。其中，熱療通過高溫破壞細(xì)胞膜，抑制dna合成，殺傷細(xì)胞。腫瘤區(qū)域的缺氧和偏酸環(huán)境使腫瘤細(xì)胞對熱刺激更為敏感，且因腫瘤部位血管生長畸形，散熱不暢，致使其溫度高于鄰近正常組織3～5℃，所以在相同的高溫下腫瘤細(xì)胞更容易死亡。

2、介質(zhì)經(jīng)光照釋放能量通過以下三個(gè)步驟：(1)入射光能夠被介質(zhì)吸收，將能量轉(zhuǎn)移給介質(zhì)中的分子和原子；(2)吸收能量的分子和原子迅速從基態(tài)(s0)躍遷到激發(fā)態(tài)(sn)；(3)由于激發(fā)態(tài)不穩(wěn)定，因此處于激發(fā)態(tài)的分子或原子會通過輻射衰變和非輻射衰變的方式釋放出能量直接回到基態(tài)或者首先過渡到三重態(tài)再回到基態(tài)。在此過程中，光能轉(zhuǎn)化為熱能(光熱療法，ptt)或聲能(光聲成像，pai)，以上非輻射衰變形式分別適用于疾病的光熱治療及體內(nèi)示蹤；而熒光形式的輻射衰變則應(yīng)用于熒光成像。其中近紅外熒光成像具有靈敏度高等優(yōu)勢，而光聲成像則具有超越傳統(tǒng)光學(xué)成像穿透極限的組織成像深度。將近紅外熒光成像與光聲成像相結(jié)合實(shí)現(xiàn)多模態(tài)成像，能夠在獲得理想成像深度的同時(shí)兼具高靈敏度，為藥物體內(nèi)命運(yùn)研究和疾病診斷提供更可靠和全面的信息。

3、現(xiàn)有近紅外響應(yīng)性材料中，金屬、金屬氧化物半導(dǎo)體和碳基材料等近紅外響應(yīng)材料存在生物相容性和生物安全性問題，而現(xiàn)已應(yīng)用于臨床造影的小分子染料如吲哚菁綠(icg)和亞甲藍(lán)(mb)存在穩(wěn)定性不足、易淬滅和快速代謝等問題，臨床診斷應(yīng)用發(fā)明具有局限性。

4、氯法齊明(clofazimine)是一種胺基吩嗪類藥物，其能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞內(nèi)ros的產(chǎn)生，還能夠特異性抑制致癌性wnt信號通路。目前臨床上常用口服軟膠囊對患者進(jìn)行治療，但是氯法齊明的水溶性較差以及非酶代謝途徑的存在使其生物利用度較低，需要多次給藥，導(dǎo)致患者順應(yīng)性較差。同時(shí)，膠囊劑劑型的粒徑過大，比表面積較小，使整個(gè)給藥體系向胃腸道黏膜釋放藥物的速度減慢，從而使胃腸道黏膜的藥物濃度相對較低，導(dǎo)致藥物吸收入血的速度減慢，吸收速度減緩，生物利用度受限。

5、xueding?wang等分別公開了氯法齊明作為巨噬細(xì)胞靶向光聲造影劑的應(yīng)用(scirep.2016mar?22,6:23528)以及鹽酸氯法齊明納米顆粒在癌前列腺和正常前列腺中積聚的光聲成像應(yīng)用(plos?one.2019jul?15,14(7):e0219655)。兩項(xiàng)研究均利用氯法齊明以及其對應(yīng)的鹽酸溶劑合物在450～540nm具有的光聲響應(yīng)性，實(shí)現(xiàn)了對病灶部位病理切片的診斷。然而450～540nm波長具有非常有限的組織穿透能力，只能局限應(yīng)用于離體組織切片，并且病理切片的取樣過程復(fù)雜且順應(yīng)性差，給病人帶來無法忽視的痛苦。此外，可見光波段一直受困于低靈敏度和強(qiáng)干擾性問題，會導(dǎo)致脫靶和錯(cuò)誤判斷。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、發(fā)明目的：本發(fā)明的第一目的是提供一種以氯法齊明為核心的藥物混懸劑，第二目的是提供一種所述藥物混懸劑在示蹤劑領(lǐng)域中的應(yīng)用，第三目的是提供一種所述藥物混懸劑在抗腫瘤領(lǐng)域中的應(yīng)用。

2、技術(shù)方案：本發(fā)明所述的氯法齊明混懸劑平均粒徑為0.05～5μm，其由以下的任意一種方法制得：

3、(1)反溶劑法：將含有氯法齊明的有機(jī)溶液與穩(wěn)定劑水溶液或水?dāng)嚢璺磻?yīng)，即得；

4、(2)研磨法：將氯法齊明在穩(wěn)定劑和水中研磨，即得。

5、本發(fā)明設(shè)計(jì)了一種基于受固態(tài)形式調(diào)控近紅外光熱光聲和熒光效應(yīng)的氯法齊明注射混懸劑的給藥體系，該給藥體系利用其近紅外光熱與藥物本身具有的抗腫瘤效應(yīng)，采用光療與傳統(tǒng)化學(xué)療法相結(jié)合從而實(shí)現(xiàn)近紅外光療、近紅外熒光和光聲成像、傳統(tǒng)藥物化學(xué)療法和長效滯留“五合一”的治療成像一體化的給藥體系，應(yīng)用在多模態(tài)示蹤劑以及對抗癌癥發(fā)生發(fā)展領(lǐng)域。

6、優(yōu)選，所述的氯法齊明混懸劑的固態(tài)形式選自i型、ii型、iii型或無定形。

7、進(jìn)一步優(yōu)選，當(dāng)所述的氯法齊明混懸劑的固態(tài)形式為i型時(shí)，以2θ±0.2°計(jì)，其在9.24°、11.44°、12.24°、16.10°、19.82°、21.86°、23.56°、24.70°處具有衍射特征峰。

8、進(jìn)一步優(yōu)選，當(dāng)所述的氯法齊明混懸劑的固態(tài)形式為ii型時(shí)，以2θ±0.2°計(jì)，其在10.18°、13.92°、15.4°、16.76°、17.7°、19.3°、20.12°、20.42°處具有衍射特征峰。

9、進(jìn)一步優(yōu)選，當(dāng)所述的氯法齊明混懸劑的固態(tài)形式為iii型時(shí)，以2θ±0.2°計(jì)，其在6.9°、7.88°、10.26°、13.34°、14.34°、19.22°、20.80°、22.16°處具有衍射特征峰。

10、本發(fā)明所述的晶型i、晶型ii或晶型iii對應(yīng)的混懸劑均具有良好的近紅外熒光aie效應(yīng)。

11、優(yōu)選，當(dāng)所述氯法齊明混懸劑固體形態(tài)為i型、ii型或iii型時(shí)，在0～0.5mm濃度范圍內(nèi)，其近紅外熒光強(qiáng)度呈氯法齊明濃度依賴性。

12、進(jìn)一步優(yōu)選，當(dāng)所述氯法齊明混懸劑的固體形態(tài)為i型時(shí)，其近紅外熒光效應(yīng)fl與混懸劑濃度c的相關(guān)性方程為fl＝32.24c+189.2，r2＝0.9968。

13、更進(jìn)一步優(yōu)選，所述氯法齊明混懸劑的濃度為0.75～400μm。

14、優(yōu)選，當(dāng)氯法齊明混懸劑的固體形態(tài)為晶型i、晶型ii和晶型iii或無定形時(shí)，其近紅外光熱轉(zhuǎn)化效率為1％～35％。

15、進(jìn)一步優(yōu)選，form?i的光熱轉(zhuǎn)化效率達(dá)到了25.88％，form?ii的光熱轉(zhuǎn)化效率為1.36％，form?iii的光熱轉(zhuǎn)化效率為2.34％，而無定形則高達(dá)32.01％。

16、本發(fā)明所述的晶型i和無定形對應(yīng)的混懸劑具有良好的近紅外光熱效應(yīng)，能夠通過選擇不同的固體形式實(shí)現(xiàn)氯法齊明混懸劑在近紅外光熱轉(zhuǎn)化效率為1％～35％范圍內(nèi)較為靈活的調(diào)控。

17、本發(fā)明所述混懸劑的固體形態(tài)為i型或無定形時(shí)，其在680～970nm范圍內(nèi)具有明顯的光聲信號；且無論晶型i還是無定形，在包括720nm在內(nèi)的強(qiáng)信號波段內(nèi)其光聲信號均具有良好的氯法齊明濃度相關(guān)線性關(guān)系。

18、優(yōu)選，當(dāng)所述氯法齊明混懸劑固體形態(tài)為i型時(shí)，其在720nm處具有光聲信號強(qiáng)度峰值。

19、優(yōu)選，當(dāng)所述氯法齊明混懸劑固體形態(tài)為無定形時(shí)，在680～970nm范圍內(nèi)，其光聲信號強(qiáng)度隨波長的增加逐漸減弱。

20、優(yōu)選，當(dāng)所述氯法齊明混懸劑固體形態(tài)為i型時(shí)，在0～5mm濃度范圍內(nèi)，其光聲信號強(qiáng)度呈氯法齊明濃度依賴性。

21、進(jìn)一步優(yōu)選，當(dāng)所述氯法齊明混懸劑固體形態(tài)為i型時(shí)，在720nm波長下，其光聲信號強(qiáng)度pa與濃度c的相關(guān)性方程為pa＝0.4691c+0.037。

22、更進(jìn)一步優(yōu)選，所述氯法齊明混懸劑的濃度為5mm。

23、優(yōu)選，當(dāng)所述氯法齊明混懸劑固體形態(tài)為無定形時(shí)，在為0～5mm濃度范圍內(nèi)，其近紅外熒光強(qiáng)度呈氯法齊明濃度依賴性。

24、進(jìn)一步優(yōu)選，當(dāng)所述氯法齊明混懸劑固體形態(tài)為無定形時(shí)，在720nm波長下，其光聲信號強(qiáng)度pa與濃度c的相關(guān)性方程為pa＝0.647c-0.112。

25、更進(jìn)一步優(yōu)選，所述氯法齊明混懸劑的濃度為5mm。

26、優(yōu)選，所述的方法(1)中，有機(jī)溶劑為二甲基亞砜，有機(jī)溶液中氯法齊明的濃度大于0.5mg/ml，更進(jìn)一步優(yōu)選為0.5～5mg/ml，再進(jìn)一步優(yōu)選為2～5mg/ml；氯法齊明的有機(jī)溶液與穩(wěn)定劑水溶液或水的體積比為1:5～1:40，更進(jìn)一步優(yōu)選為1:5～1:20；穩(wěn)定劑選自聚山梨醇酯、聚乙二醇、聚乙二醇1000維生素e琥珀酸酯、泊洛沙姆、聚維酮、羥丙甲基纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、明膠、soluplus中的一種或多種；穩(wěn)定劑與水的質(zhì)量體積比為0.1～100mg/ml，更進(jìn)一步優(yōu)選為0.1～10mg/ml。

27、優(yōu)選，攪拌速度快于50rpm，攪拌反應(yīng)時(shí)間不短于5min。

28、優(yōu)選，所述的方法(2)中，穩(wěn)定劑選自聚山梨醇酯、聚乙二醇、聚乙二醇1000維生素e琥珀酸酯、泊洛沙姆、聚維酮、羥丙甲基纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、明膠、soluplus中的一種或多種。

29、進(jìn)一步優(yōu)選，所述的穩(wěn)定劑與水的質(zhì)量體積比為0.1～100mg/ml，更進(jìn)一步優(yōu)選為2.5:1～100:1，再進(jìn)一步優(yōu)選為2.5～50mg/ml。

30、優(yōu)選，所述的方法(2)中，研磨轉(zhuǎn)速為200～1000rpm。

31、進(jìn)一步優(yōu)選，所述的研磨轉(zhuǎn)速為500～1000rpm。

32、本發(fā)明所述的藥物混懸劑采用反向溶劑法或濕法球磨法制得。

33、反向溶劑法：

34、在攪拌、超聲的條件下，將含有氯法齊明的有機(jī)溶液加入水中反應(yīng)，收集得到平均粒徑為0.05～5μm的氯法齊明晶體或無定形；

35、濕法球磨法：

36、在加入一定穩(wěn)定劑的條件下，加入研磨介質(zhì)和水，在一定轉(zhuǎn)速下反應(yīng)一段時(shí)間，收集得到平均粒徑為0.05～5μm的氯法齊明晶體或無定形。

37、優(yōu)選，在濕法球磨制備混懸劑的過程中，穩(wěn)定劑的主要功能包括防止顆粒聚集、改善分散性、調(diào)節(jié)粒徑、延長磨制時(shí)間等，并不會影響氯法齊明體系的近紅外光響應(yīng)性。因此，所述的穩(wěn)定劑不限于選自聚山梨醇酯、聚乙二醇、聚乙二醇1000維生素e琥珀酸酯、泊洛沙姆、聚維酮、羥丙甲基纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、明膠、soluplus中的一種或多種。

38、本發(fā)明所述的氯法齊明混懸劑應(yīng)用在制備近紅外光聲、熒光成像的示蹤劑中。

39、本發(fā)明所述的氯法齊明混懸劑應(yīng)用在制備抗腫瘤的藥物中。

40、優(yōu)選，所述的藥物為治療乳腺癌的藥物。

41、優(yōu)選，所述的藥物為用于抗腫瘤的近紅外光熱治療、近紅外熒光成像或近紅外光聲成像的藥物。

42、優(yōu)選，所述藥物的藥用濃度為0.5～10mm。

43、有益效果：與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下顯著優(yōu)點(diǎn)：

44、本發(fā)明設(shè)計(jì)的混懸劑給藥體系能夠基于固態(tài)形式調(diào)控近紅外光熱、光聲及熒光效應(yīng)，利用其近紅外光熱與藥物本身具有的抗腫瘤效應(yīng)，采用光療與傳統(tǒng)化學(xué)療法相結(jié)合從而實(shí)現(xiàn)對腫瘤發(fā)生發(fā)展的有效抑制作用。同時(shí)，良好的近紅外熒光及光聲特性使得該給藥體系具有實(shí)現(xiàn)多模態(tài)成像的優(yōu)勢。此外，該給藥體系能夠?qū)崿F(xiàn)藥物在腫瘤部位的長期滯留，增加了治療的順應(yīng)性，形成具有近紅外光療、近紅外熒光成像、光聲成像、傳統(tǒng)藥物化學(xué)療法與長效滯留“五合一”的治療成像一體化特性的給藥體系。