本發(fā)明涉及一種負載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體及制備方法和應用。

背景技術：

1、納米藥物遞送系統(tǒng)由于其獨特的物理化學特性和生物學特性，在腫瘤靶向治療中顯示出巨大潛力。外泌體作為一種天然的納米級囊泡，由細胞分泌產生，在細胞間通信中發(fā)揮重要作用。外泌體因其良好的生物相容性、靶向性和低免疫原性被認為是理想的藥物載體。其中，植物源性外泌體具有來源豐富、制備簡單、免疫原性低等優(yōu)點，此外，植物來源的外泌體具有良好的口腔穩(wěn)定性，并能在體內保持完整性。肝細胞癌是全球發(fā)病率和死亡率較高的惡性腫瘤，對于中晚期患者，阿霉素等化療藥物是主要的治療方式，但其全身毒性和藥物耐受性限制了療效。外泌體遞送系統(tǒng)可以提高化療藥物的靶向性，減少全身毒性。

2、甜葉菊是一種傳統(tǒng)藥用植物，其葉片富含多種生物活性成分，如黃酮、多酚和糖苷，具有抗氧化、抗炎和抗腫瘤活性。目前尚無研究探索甜葉菊外泌體作為藥物載體的研究，此外，植物來源的外泌體擁有與動物外泌體相似的結構，來源廣發(fā)，價格便宜，含有多種天然藥效成分。所以，對中藥植物外泌體的研究及其重要。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供一種對于肝癌細胞具有良好的抑制增殖和誘導凋亡功能的負載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體及制備方法和應用。

2、本發(fā)明的技術解決方案是：

3、一種負載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體，其特征是：在提取純化的甜葉菊外泌體表面負載有阿霉素。

4、負載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體具有近球形結構，甜葉菊外泌體的平均粒徑是241.40nm，負載阿霉素的甜葉菊外泌體粒徑是176.16nm。

5、一種負載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體的制備方法，其特征是：包括以下步驟：s1：制備甜葉菊外泌體，新鮮甜葉菊葉片高速破壁獲得甜葉菊汁液，通過差速超速離心獲得甜葉菊外泌體；s2：甜葉菊外泌體純化，利用蔗糖濃度梯度法分離純化外泌體；s3：負載阿霉素，在pbs體系中，將外泌體混懸液與阿霉素共孵育，將混合體系超聲分散得到均質溶液。

6、s1的具體方法：采集新鮮甜葉菊洗凈后高速破壁20分鐘，得到的甜葉菊汁液；再3000rpm離心30分鐘，去除沉渣收集上清10000rpm離心30分鐘，再次收集上清15000rpm離心1小時，收集沉淀物甜葉菊外泌體。

7、s2的具體方法：利用8%、30%、45%和60%的蔗糖濃度梯度法，15000rpm離心1小時純化外泌體，純化后的外泌體利用pbs緩沖液重懸，保存于-80℃。

8、s3的具體方法：在pbs體系中，將外泌體混懸液與阿霉素以1:3v/v共孵育4h，混合體系超聲循環(huán)6次，每次30s，每次30w，循環(huán)之間冷卻時間為2分鐘，最終得到甜葉菊外泌體負載阿霉素的均質溶液。

9、一種負載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體在制備治療耐阿霉素肝細胞癌的藥物中的應用。

10、本發(fā)明中的甜葉菊外泌體含有多種生物活性化合物，包括4-羥基肉桂酸、兒茶酚和對苯二酚等多酚。這些化合物具有顯著的抗氧化和抗炎特性，能夠調節(jié)細胞內氧化應激和炎癥反應；本發(fā)明的甜葉菊外泌體負載阿霉素，對于肝癌細胞具有良好的抑制增殖和誘導凋亡的功能，達到治療肝癌的目的。

11、與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明具有以下有益效果：

12、1.?本發(fā)明中制備獲得的一種負載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體，其中甜葉菊外泌體含有的活性成分具有殺菌抗炎效果，可以緩解或減輕腫瘤組織的炎癥反應，提供更有效和安全的治療選擇。

13、2.?本發(fā)明中制備獲得的一種負載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體，阿霉素作為一種中晚期肝癌化療藥物，能夠在甜葉菊外泌體作為藥物載體的情況下，高效靶向的遞送到肝癌細胞和組織，促進藥物的治療效果，減少對其他正常組織的毒性作用。

14、3.?本發(fā)明中制備獲得的一種負載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體具有高效性和靶向性，有助于藥物的遞送，促進肝癌的治療效果。

技術特征：

1.一種負載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體，其特征是：在提取純化的甜葉菊外泌體表面負載有阿霉素。

2.根據(jù)權利要求1所述的一種負載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體，其特征是：負載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體具有近球形結構，甜葉菊外泌體的平均粒徑是241.40nm，負載阿霉素的甜葉菊外泌體粒徑是176.16nm。

3.一種負載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體的制備方法，其特征是：包括以下步驟：s1：制備甜葉菊外泌體，新鮮甜葉菊葉片高速破壁獲得甜葉菊汁液，通過差速超速離心獲得甜葉菊外泌體；s2：甜葉菊外泌體純化，利用蔗糖濃度梯度法分離純化外泌體；s3：負載阿霉素，在pbs體系中，將外泌體混懸液與阿霉素共孵育，將混合體系超聲分散得到均質溶液。

4.根據(jù)權利要求3所述的一種負載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體的制備方法，其特征是：s1的具體方法：采集新鮮甜葉菊洗凈后高速破壁20分鐘，得到的甜葉菊汁液；再3000rpm離心30分鐘，去除沉渣收集上清10000rpm離心30分鐘，再次收集上清15000rpm離心1小時，收集沉淀物甜葉菊外泌體。

5.根據(jù)權利要求3所述的一種負載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體的制備方法，其特征是：s2的具體方法：利用8%、30%、45%和60%的蔗糖濃度梯度法，15000rpm離心1小時純化外泌體，純化后的外泌體利用pbs緩沖液重懸，保存于-80℃。

6.根據(jù)權利要求3所述的一種負載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體的制備方法，其特征是：s3的具體方法：在pbs體系中，將外泌體混懸液與阿霉素以1:3v/v共孵育4h，混合體系超聲循環(huán)6次，每次30s，每次30w，循環(huán)之間冷卻時間為2分鐘，最終得到甜葉菊外泌體負載阿霉素的均質溶液。

7.一種負載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體在制備治療耐阿霉素肝細胞癌的藥物中的應用。

技術總結
本發(fā)明公開了一種負載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體及制備方法和應用，所述在提取純化的甜葉菊外泌體表面負載有阿霉素是在提取純化的甜葉菊外泌體表面負載有阿霉素。本發(fā)明中制備獲得的一種負載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體，其中甜葉菊外泌體含有的活性成分具有殺菌抗炎效果，可以緩解或減輕腫瘤組織的炎癥反應，提供更有效和安全的治療選擇。本發(fā)明獲得的負載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體具有高效性和靶向性，有助于藥物的遞送，促進肝癌的治療效果。

技術研發(fā)人員：王峰,馮偉,戚菁,曹學敏,李祎,楊君伶
受保護的技術使用者：南通大學附屬醫(yī)院
技術研發(fā)日：
技術公布日：2025/1/6