本發(fā)明屬于植物提取，更具體地，涉及一種白刺花籽提取物的制備方法及其產(chǎn)品與應用。

背景技術：

1、白刺花，豆科苦參屬植物，別名苦刺花、白刻針、馬鞭采、馬蹄針、狼牙刺。白刺花性苦、寒，其根、花、葉、果實、種子均入藥。白刺花為清熱藥，其味苦，性寒，具有清熱解毒，利濕消腫作用，能治療咽喉腫痛、濕熱痢疾、尿血、鼻血、皮膚瘙癢、便血等，白刺花籽可理氣消積，抗癌，用于消化不良，胃痛，腹痛，表皮癌和白血病，被列入彝藥之一。現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)白刺花具有抗炎、抗過敏、抗?jié)?、抗腫瘤、抗氧化、抑菌等作用。白刺花主要生長于河谷沙丘和山坡路邊的灌木叢中，滇中、滇南、滇西均有分布，是云南藏族、白族、苗族、哈尼族等少數(shù)民族的傳統(tǒng)野生蔬菜和中藥材，但將白刺花作為護膚品原料的研究目前鮮有報道。

2、白刺花籽為白刺花 sophora的干燥籽（果實），白刺花籽的化學成分多且復雜，目前已知的白刺花籽化學成分主要有生物堿、黃酮、有機酸、苷、酯、萜、烴等化合物，人們通常將白刺花籽粗提后的產(chǎn)物直接代替藥材來應用，但該方式無法保證粗體產(chǎn)物品質以及無法實現(xiàn)大批量工業(yè)化生產(chǎn)。目前，對于白刺花籽活性成分分離提取的手段主要有：有機溶劑萃取法、超聲波法、酶解法等，其中應用較為廣泛的方法是有機溶劑萃取法，但該分離提取方法由于采用有機溶劑，導致其環(huán)境不友好。例如：中國專利cn108743655b中公開了一種白刺花黃酮提取物及其制備方法和用途，其以80%乙醇水溶液提取得到粗提物，經(jīng)大孔樹脂富集得到白刺花總黃酮。由于該方法采用高比例乙醇進行提取，繼而導致乙醇在提取物中殘留，使得提取物存在一定的致敏風險。

3、亞臨界水為溫度處于100℃到?374℃，在一定高壓條件下仍然保持液態(tài)的水。亞臨界水萃取技術作為一種尚未推廣開的萃取技術，目前還未有將其應用在白刺花籽提取物制備方面的研究報道。由于不同條件下（如溫度數(shù)值范圍）的亞臨界水的性質差異性較大，利用不同條件下的亞臨界水所提取得到的白刺花籽提取物的成分差異也較大，因此，亟需提出一種使用亞臨界水的安全環(huán)保且提取效果好的白刺花籽活性成分提取物的制備方法，以及白刺花籽提取物在制備具有舒緩抗炎和/或抗衰作用的護膚品中的應用，以解決上述現(xiàn)有技術中存在的技術問題。

技術實現(xiàn)思路

1、針對現(xiàn)有技術的不足，本發(fā)明的主要目的在于提出一種白刺花籽提取物的制備方法及其產(chǎn)品與應用，旨在解決現(xiàn)有的白刺花籽提取物的粗提方法安全環(huán)保性能不佳、提取物品質無法保證，以及當前未有可大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)的將白刺花籽提取物應用于制備具有舒緩抗炎和/或抗衰作用的護膚品的技術問題中的至少一個。

2、為達到此發(fā)明目的，本發(fā)明采用以下技術方案：

3、第一方面，本發(fā)明提供一種白刺花籽提取物的制備方法，所述制備方法包括如下步驟：

4、步驟s1：將粉碎過篩的白刺花籽經(jīng)超聲波輔助酶解，得到酶解產(chǎn)物；

5、步驟s2：用亞臨界水對酶解產(chǎn)物進行亞臨界萃取，得到萃取液；

6、步驟s3：將萃取液過濾、濃縮后得到白刺花籽粗提物；

7、步驟s4：對白刺花籽粗提物進行絮凝處理和脫色處理，得到所述白刺花籽提取物。

8、本發(fā)明所涉及的白刺花籽提取物的制備方法，協(xié)同采用了超聲輔助酶解技術與亞臨界水萃取技術，有效提升了白刺花提取物的制備效果。同時對亞臨界水萃取操作參數(shù)進行優(yōu)化，進一步提升了超聲波輔助酶解的協(xié)同作用效果；另外，通過絮凝處理和脫色處理的方式進一步進行純化，工藝簡單，操作方便，本發(fā)明所述的制備方法不引入有機溶劑，無毒無害，綠色環(huán)保，所得白刺花籽提取物安全無刺激、生物活性明確，具有優(yōu)異的舒緩、抗炎和抗衰的功效，可以安全地應用于護膚品領域，實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。

9、優(yōu)選的，所述步驟s1中所述酶解使用的酶由果膠酶、淀粉酶和纖維素酶復配得到，其中，所述果膠酶、淀粉酶和纖維素酶的質量比為（0.5-2）:（1-3）:（0.1-4）；所述酶解使用的酶的質量占比白刺花籽質量的0.1wt%-2wt%；

10、其中，上述“0.5-2”可具體取值如：0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2等；

11、其中，上述“1-3”可具體取值如：1、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3等；

12、其中，上述“0.1-4”可具體取值如：0.1、0.2、0.5、0.8、1、1.2、1.5、1.8、2、2.2、2.5、2.8、3、3.2、3.5、3.8、4等；

13、其中，上述“0.1wt%-2wt%”可具體取值如：0.1wt%、0.2wt%、0.3wt%、0.4wt%、0.5wt%、0.6wt%、0.7wt%、0.8wt%、0.9wt%、1wt%、1.1wt%、1.2wt%、1.3wt%、1.4wt%、1.5wt%、1.6wt%、1.7wt%、1.8wt%、1.9wt%、2wt%等，該數(shù)值范圍內的其他具體點值均可選擇，在此便不再一一贅述；

14、優(yōu)選的，所述步驟s1中還包括在超聲波輔助酶解之前加入水的步驟，所述白刺花籽與水的質量比為1:（5-10）；

15、其中，上述“1:（5-10）”可具體取值如：1:5、1:5.5、1:6、1:6.5、1:7、1:7.5、1:8、1:8.5、1:9、1:9.5、1:10等，該數(shù)值范圍內的其他具體點值均可選擇，在此便不再一一贅述。

16、優(yōu)選的，所述步驟s1中所述超聲波的功率為300-700w；所述酶解的溫度為50-65℃，時間為25-40min；

17、其中，上述“300-700w”可具體取值如：300w、325w、350w、375w、400w、425w、450w、475w、500w、525w、550w、575w、600w、625w、650w、675w、700w等；

18、其中，上述“50-65℃”可具體取值如：50℃、51℃、52℃、53℃、54℃、55℃、56℃、57℃、58℃、59℃、60℃、61℃、62℃、63℃、64℃、65℃等；

19、其中，上述“25-40min”可具體取值如：25min、26min、27min、28min、29min、30min、31min、32min、33min、34min、35min、36min、37min、38min、39min、40min等，該數(shù)值范圍內的其他具體點值均可選擇，在此便不再一一贅述。

20、優(yōu)選的，所述步驟s2中所述亞臨界萃取的壓力為0.1-1mpa，溫度為130-160℃，時間為20-60min，所述白刺花籽與亞臨界水的質量比為1:（4-10）；

21、其中，上述“0.1-1mpa”例如可以是0.1mpa、0.2mpa、0.3mpa、0.4mpa、0.5mpa、0.6mpa、0.7mpa、0.8mpa、0.9mpa、1mpa等；

22、其中，上述“130-160℃”例如可以是130℃、132℃、135℃、138℃、140℃、143℃、145℃、147℃、150℃、152℃、155℃、158℃、160℃等，優(yōu)選的，所述亞臨界萃取的溫度為132-158℃；優(yōu)選的，為135-155℃；優(yōu)選的，為138-152℃；優(yōu)選的，為140-150℃；優(yōu)選的，為143-147℃；優(yōu)選的，為145℃；

23、本發(fā)明所涉及的白刺花籽提取物的制備方法，協(xié)同采用了超聲輔助酶解技術與亞臨界水萃取技術，同時對亞臨界水萃取操作參數(shù)進行優(yōu)化，申請人意外地發(fā)現(xiàn)，當亞臨界萃取溫度在上述130-160℃范圍內時，其制備得到的白刺花籽提取物的生物活性更優(yōu)，對炎癥因子tnf-α、no和il-6的抑制活性顯著提高，具備更加的舒緩、抗炎和抗衰的功效。

24、其中，上述“20-60min”例如可以是20min、22min、25min、27min、30min、33min、35min、38min、40min、42min、45min、48min、50min、52min、55min、58min、60min等；

25、其中，上述“1:（4-10）”例如可以是1:4?g/ml、1:5?g/ml、1:6?g/ml、1:7?g/ml、1:8g/ml、1:9?g/ml、1:10?g/ml等，該數(shù)值范圍內的其他具體點值均可選擇，在此便不再一一贅述。

26、優(yōu)選的，所述步驟s3中的所述過濾前還對萃取液進行降溫處理，所述降溫為下降至50-60℃。

27、其中，上述“50-60℃”例如可以是50℃、51℃、52℃、53℃、54℃、55℃、56℃、57℃、58℃、59℃、60℃等，該數(shù)值范圍內的其他具體點值均可選擇，在此便不再一一贅述。

28、優(yōu)選的，所述步驟s4中所述絮凝處理為：將白刺花籽粗提物與絮凝劑混合形成混合物，所述絮凝劑占所述混合物的質量比為1wt%-3wt%；所述絮凝劑包括殼聚糖、明膠和ztc-植提澄清劑的組合。

29、在本發(fā)明中，通過將殼聚糖、明膠和ztc-植提澄清劑復合，得到一種復合絮凝劑，其中，殼聚糖是一種天然的高分子類多糖物質，具有獨特的理化性能和生物活化功能，作為一種高分子絮凝劑，具備優(yōu)良的絮凝性能；明膠作為一種天然高分子絮凝劑具有高效、反應快易于生物降解等特點；ztc-植提澄清劑可以去除鞣質、蛋白、蠟質等膠體不穩(wěn)定成份，且對于中草藥中的有效成分如黃酮、多糖、生物堿、氨基酸等均不影響，具備優(yōu)異的高效純化性能。三種成分之間相互配合協(xié)同增效，獲得了更好的絮凝效果，在提高白刺花籽提取物產(chǎn)品舒緩、抗炎和抗衰方面的功效更好。

30、其中，上述“1wt%-3wt%”?可具體取值如：1wt%、1.2wt%、1.4wt%、1.6wt%、1.8wt%、2wt%、2.2wt%、2.4wt%、2.6wt%、2.8wt%、3wt%等，該數(shù)值范圍內的其他具體點值均可選擇，在此便不再一一贅述。

31、優(yōu)選的，所述殼聚糖、明膠和ztc-植提澄清劑的質量比為(0.1-3):(0.1-5):1；

32、其中，上述“0.1-3”?可具體取值如：0.1、0.2、0.5、0.8、1、1.2、1.5、1.8、2、2.2、2.5、2.8、3等，該數(shù)值范圍內的其他具體點值均可選擇，在此便不再一一贅述；

33、其中，上述“0.1-5”?可具體取值如：0.1、0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5等，該數(shù)值范圍內的其他具體點值均可選擇，在此便不再一一贅述。

34、優(yōu)選的，所述步驟s4中的所述脫色處理后還進行過濾和干燥處理；所述干燥的方法包括冷凍干燥、真空干燥或噴霧干燥中的任意一種或至少兩種的組合。

35、第二方面，本發(fā)明提供一種白刺花籽提取物，所述白刺花籽提取物由第一方面所述的白刺花籽提取物的制備方法制得；所述白刺花籽提取物中氧化苦參堿含量不低于10wt%，例如可以是10wt%、10.5wt%、11wt%、11.5wt%、12wt%、12.5wt%、13wt%、13.5wt%、14wt%、14.5wt%、15wt%等，該數(shù)值范圍內的其他具體點值均可選擇，在此便不再一一贅述；總多糖含量不低于20wt%，例如可以是21wt%、21.5wt%、22wt%、23wt%、24wt%、25wt%、26wt%、27wt%、28wt%、29wt%、30wt%等，該數(shù)值范圍內的其他具體點值均可選擇，在此便不再一一贅述。

36、采用硫酸-苯酚法對本發(fā)明所得白刺花籽提取物總多糖進行含量測定。

37、第三方面，本發(fā)明提供第一方面所述的白刺花籽提取物的制備方法或第二方面所述的白刺花籽提取物在制備具有舒緩抗炎和/或抗衰作用的護膚品中的應用；所述護膚品包括乳液、面霜、護膚水、護膚精華或面膜。

38、相對于現(xiàn)有技術，本發(fā)明至少具有以下有益效果：

39、（1）本發(fā)明的一種白刺花籽提取物的制備方法創(chuàng)造性地采用超聲波輔助酶解協(xié)同聯(lián)合亞臨界萃取和絮凝純化技術，并且該制備方法全程未使用有機溶劑，這就使得該制備方法不僅環(huán)境友好，而且通過殼聚糖、明膠和ztc-植提澄清劑三種絮凝劑復配使用，能夠更為有效地除去產(chǎn)品中的雜質，能夠獲得具有優(yōu)異的舒緩、抗炎、抗衰效果和安全性的高品質白刺花籽提取物，為白刺花籽的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)和多場景應用提供了基礎。

40、（2）本發(fā)明的一種白刺花籽提取物的制備方法中的酶解使用的酶由果膠酶、淀粉酶和纖維素酶復配得到，其中，所述果膠酶、淀粉酶和纖維素酶的質量比為（0.5-2）:（1-3）:（0.1-4），采用該復配得到的酶能夠在超聲波輔助下更好發(fā)揮酶解作用，進而顯著提升白刺花提取物的提取效能；所得白刺花籽提取物與常規(guī)加熱回流提取工藝得到的提取物相比，其對炎癥因子tnf-α、no和il-6的抑制活性顯著提高；對透明質酸酶、膠原酶和彈性蛋白酶的體外抑制活性也均顯著提高。

41、（3）本發(fā)明所得白刺花籽提取物富含氧化苦參堿和多糖，其中氧化苦參堿含量不小于10wt%；總多糖含量不小于20wt%。

42、（4）本發(fā)明所得白刺花籽提取物具有優(yōu)異的抗hff細胞（人包皮成纖維細胞）衰老能力。