專利名稱:靈芝浸膏片原料全自動(dòng)化發(fā)酵工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及靈芝浸膏片原料全自動(dòng)化發(fā)酵工藝，屬生物制藥技術(shù)領(lǐng)域：
。
背景技術(shù)：
靈芝及其制劑是中國(guó)醫(yī)藥學(xué)寶庫(kù)中的瑰寶，其治療疾病和保健、滋補(bǔ)作用眾所周 知，被譽(yù)為"神奇的東方蘑菇"。靈芝及其制劑的功效之所以備受推崇，與其含有不同于其 他任何一種藥物或保健品的多種生理活性物質(zhì)有關(guān)。其在臨床上治療的疾病涉及呼吸、循 環(huán)、消化、神經(jīng)、內(nèi)分泌及運(yùn)動(dòng)等系統(tǒng)，涵蓋內(nèi)、外、婦、兒各科。其神奇療效使任何藥物無法 替代。
公開號(hào)CN 101390885公開了一種靈芝浸膏片及其制備方法，該方法制備靈芝浸 膏片所采用的原料為靈芝發(fā)酵液和靈芝菌絲體經(jīng)干燥處理制成發(fā)酵物干粉末，傳統(tǒng)工藝生 產(chǎn)靈芝浸膏片所需的原料存在工藝技術(shù)落后，依靠人工看罐，不能很好地控制發(fā)酵溫度、發(fā)
酵物ra值、溶氧量等缺點(diǎn)。
授權(quán)公告號(hào)CN 1055723公開了靈芝10噸罐發(fā)酵工藝，該專利也未涉及如何控制 發(fā)酵工藝參數(shù)的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是，改變?cè)徐`芝浸膏片原料發(fā)酵依靠人工看罐，不能自動(dòng)控制發(fā) 酵，不能控制發(fā)酵溫度、發(fā)酵物pH值、溶氧量；發(fā)酵物缺少營(yíng)養(yǎng)物料依靠人工判斷進(jìn)行補(bǔ)料 的狀況，在對(duì)原有工藝進(jìn)行改進(jìn)的基礎(chǔ)上，通過設(shè)置全自動(dòng)化發(fā)酵控制裝置，能夠?qū)`芝浸 膏片原料發(fā)酵過程中的溫度，溶氧量，pH進(jìn)行自動(dòng)控制，對(duì)發(fā)酵物缺少營(yíng)養(yǎng)物料進(jìn)行自動(dòng)補(bǔ) 料。
本發(fā)明的技術(shù)方案是，通過在靈芝浸膏片原料發(fā)酵裝置上設(shè)置全自動(dòng)化發(fā)酵控制
系統(tǒng)，在種子罐培養(yǎng)和大罐發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)對(duì)發(fā)酵過程中的溫度，溶氧量，PH進(jìn)行自動(dòng)控制，對(duì)
發(fā)酵物缺少營(yíng)養(yǎng)物時(shí)進(jìn)行補(bǔ)料控制，選擇發(fā)酵物有效成份達(dá)到最高時(shí)放料。
發(fā)酵溫度是靈芝浸膏片原料發(fā)酵過程的重要參數(shù)，全自動(dòng)化控制系統(tǒng)通過溫度傳
感器快速傳至控制裝置的微處理器，由微處理器發(fā)出指令進(jìn)行調(diào)整，溫度高了，自動(dòng)進(jìn)行降
溫；溫度低了，自動(dòng)進(jìn)行升溫，始終保證溫度在所設(shè)定的需要范圍內(nèi)；
發(fā)酵時(shí)容器中的溶氧量也是靈芝浸膏片原料發(fā)酵過程的一個(gè)重要參數(shù)，因?yàn)槲⑸?物生長(zhǎng)需要一定的氧氣，當(dāng)氧氣不夠時(shí)，全自動(dòng)化控制系統(tǒng)通過氧傳感器所測(cè)得的容器中 的溶氧量，隨時(shí)對(duì)容器自動(dòng)進(jìn)行氧氣補(bǔ)給，始終保持發(fā)酵容器內(nèi)的溶氧量在所設(shè)定需要的 范圍內(nèi)；
發(fā)酵過程中pH應(yīng)保持一定范圍內(nèi)，pH或高或低了 ，都會(huì)影響靈芝浸膏片原料發(fā)酵 物的產(chǎn)率，通過在線酸堿度測(cè)試儀測(cè)得發(fā)酵液的pH后，全自動(dòng)化控制系統(tǒng)進(jìn)行判斷并自動(dòng) 加酸或加堿進(jìn)行調(diào)節(jié)，確保發(fā)酵液在設(shè)置所需要的pH范圍內(nèi)。
當(dāng)靈芝浸膏片原料發(fā)酵物缺少營(yíng)養(yǎng)物時(shí)，通過全自動(dòng)化控制系統(tǒng)進(jìn)行補(bǔ)料控制，可以根據(jù)需要選擇補(bǔ)料形式(分為時(shí)比補(bǔ)料和自動(dòng)分時(shí)分段自動(dòng)流加補(bǔ)料)，任意設(shè)定補(bǔ)
料周期；進(jìn)行蠕動(dòng)泵時(shí)間的設(shè)定與補(bǔ)料量的設(shè)定、補(bǔ)料量的清零等。
本發(fā)明靈芝浸膏片原料全自動(dòng)發(fā)酵工藝流程為
1、搖瓶種子培養(yǎng)
(1)母瓶(一級(jí)種子)配方
馬鈴薯20% ;KH2P040. 1 % ;MgS040. 05% ;蛋白胨O. 2% ;維生素Bi微量；葡萄糖
2% ;其余水；PH自然。
(2)子瓶(二級(jí)搖瓶)配方
黃豆餅粉1% ;KH2P040. 1% ;MgS040 . 05% ;玉米粉1.5% ;維生素Bi少量；葡萄糖 1. 5% ;酵母粉0. 5% ;其余水；PH自然。
(3) —級(jí)種子搖瓶制備(母瓶種子)
按上述母瓶、子瓶配方，配好培養(yǎng)基，分裝于500ml三角瓶為200ml， 1000ml三角瓶 為600ml，瓶口用松軟棉塞塞好，再用牛皮紙包扎，以12rC濕熱消毒，(0. lMPa流通蒸汽)保 壓30分鐘，待冷卻后，方可接種。
選新鮮或活化了大試管生產(chǎn)斜面或平皿菌種，以無菌手續(xù)挖0.5cm2大小，接入 500ml或1000ml搖瓶，每分鐘旋轉(zhuǎn)150-200轉(zhuǎn)的搖瓶機(jī)上，28± rC培養(yǎng)5 8天，待培養(yǎng)液 清香，菌球密布時(shí)，選擇生長(zhǎng)正常，無污染的搖瓶種子，作為一級(jí)種子搖瓶(母瓶種子)，備 用。
(5) 二級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)(子瓶種子)
選擇新鮮的一級(jí)搖瓶種子(母瓶種子)，以無菌手續(xù)按10%接種量接入1000ml搖 瓶，置搖瓶機(jī)(150-200轉(zhuǎn)/分鐘)，28± 1 t:培養(yǎng)3 4天，待培養(yǎng)液清香，菌絲球密布時(shí)，選 擇生長(zhǎng)正常，無污染的搖瓶種子作為二級(jí)搖瓶種子，備用。
(6)工藝條件
①一級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)5 8天，二級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)3 4天。
②一般500ml —級(jí)搖瓶配制量為200ml ， 1000ml —級(jí)搖瓶配制量300ml 。子瓶均為
用1000ml為配制量600ml 。
③培養(yǎng)溫度為28 ± 1°C 。
2、種子罐培養(yǎng)
(1)種子罐培養(yǎng)基配制
葡萄糖2% ;KH2P040. 1 % ;MgS040. 05% ;酵母粉1.5% ;黃豆餅粉1.5% ;玉米粉 2% ;消沫油適量；其余水。
(2)種子罐培養(yǎng)
①一級(jí)種子罐定容100L，消后培養(yǎng)基體積50L， 二級(jí)種子罐定容1000L，消后培養(yǎng) 基體積500L。
②一級(jí)種子罐，二級(jí)種子罐培養(yǎng)基消毒均采用實(shí)消121°C (0. IMPa流通蒸汽)保 壓25分鐘，冷卻至28°C 3(TC，將二級(jí)搖瓶種子以無菌方式接種于一級(jí)種子罐內(nèi)，接種量 一般為2% 5%，培養(yǎng)56 72小時(shí)，待培養(yǎng)液清香，菌絲球密布時(shí)，選擇生長(zhǎng)正常，無污染 的菌絲作為種子罐的一級(jí)種子。二級(jí)種子罐接種量為10% 20%左右，接種時(shí)可視等傳種 菌種生產(chǎn)情況而定。接后攪拌均勻?yàn)橹?。[0032] ③一級(jí)、二級(jí)種子罐培養(yǎng)條件為罐溫為28士rC，罐壓為0. 05MPa，通氣量微量， 以使培養(yǎng)基均勻翻動(dòng)為宜。消沫油用量一級(jí)種子罐為0.5 1.5L，二級(jí)種子罐為1.5 2. 5L。
④種子罐培養(yǎng)周期一級(jí)種子罐二級(jí)種子罐培養(yǎng)24 48小時(shí)。
(3)工藝條件
①菌絲態(tài)菌絲長(zhǎng)分枝，菌絲壁易見芽頭和鎖狀聯(lián)合，培養(yǎng)液清香，濃稠。
②pH值下降至3. 5 4. 5 。 ③鏡檢和平面培養(yǎng)無污染。
培養(yǎng)周期一級(jí)種子罐56 72小時(shí)，二級(jí)種子罐24 48小時(shí)。
⑤培養(yǎng)溫度為28 ± 1°C 。 3、大罐發(fā)酵培養(yǎng)
(1)大罐培養(yǎng)基配制
葡萄糖2% ;KH2P040. 1 % ;MgS040. 05% ;酵母粉1.5% ;黃豆餅粉1.5% ;玉米粉 2% ;消沫油適量；其余水。
(2)大罐發(fā)酵培養(yǎng)
①大罐容IOOOOL，消后培養(yǎng)基體積5000L。
②大罐消毒，121°C (0. 1Mpa流通蒸汽)保壓25分鐘，冷卻至9(TC左右，開動(dòng)攪拌
加速冷卻，冷至28°C 3(TC接種。
接種量按10 20%，接種后開攪拌。
④大罐培養(yǎng)條件
罐溫28t: 士rC，罐壓O. 05MPa，空氣量以使發(fā)酵液均勻翻動(dòng)為宜；培養(yǎng)周期48
72小時(shí)左右。
(3)工藝條件
①大罐放罐標(biāo)準(zhǔn)菌絲形態(tài)，菌絲易見空泡，菌絲無集凝并開始自溶；發(fā)酵液消 香，濃稠；
②pH值降至4 4.5;
③培養(yǎng)溫度為28士rC，罐壓0. 05MPa，空氣量以使發(fā)酵液均勻翻動(dòng)為宜。 在種子罐培養(yǎng)和大罐發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)本發(fā)明采用全自動(dòng)化控制裝置，根據(jù)發(fā)酵過程中 的溫度，溶氧量，PH的變化進(jìn)行自動(dòng)控制，對(duì)發(fā)酵物缺少營(yíng)養(yǎng)物料進(jìn)行自動(dòng)補(bǔ)料，以實(shí)現(xiàn)靈 芝浸膏片原料的全自動(dòng)化發(fā)酵工藝。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)比較的有益效果是，由于本發(fā)明采用了全自動(dòng)發(fā)酵工藝，對(duì)發(fā) 酵的溫度、氧量、pH值及對(duì)發(fā)酵物缺少營(yíng)養(yǎng)物時(shí)的補(bǔ)料實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)控制，大大提高了發(fā)酵物 的產(chǎn)率和產(chǎn)品質(zhì)量，減輕了工人的勞動(dòng)強(qiáng)度，提高了生產(chǎn)效率。 本發(fā)明適用于靈芝浸膏片原料的全自動(dòng)發(fā)酵。


附圖為本發(fā)明靈芝浸膏片全自動(dòng)化發(fā)酵工藝流程圖具體實(shí)施方式
[0057]
本發(fā)明實(shí)施例工藝流程如附圖所示。
本發(fā)明實(shí)施例實(shí)施步驟如下 1、搖瓶種子培養(yǎng)
(1)母瓶( 一級(jí)種子)配方
馬鈴薯20% ;KH2P040. 1 % ;MgS040. 05% ;蛋白胨O. 2% ;維生素Bi微量；葡萄糖
2% ;其余水；PH自然。
(2)子瓶(二級(jí)搖瓶)配方
黃豆餅粉1% ;KH2P040. 1% ;MgS040 . 05% ;玉米粉1. 5% ;維生素Bi少量；葡萄糖 1. 5% ;酵母粉0. 5% ;其余水；PH自然。
(3)種子搖瓶制備
按上述母瓶、子瓶配方，配好培養(yǎng)基，分裝于500ml三角瓶為200ml， 1000ml三角瓶 為600ml，瓶口用松軟棉塞塞好，再用牛皮紙包扎，以12rC濕熱消毒，(0. lMPa流通蒸汽)保 壓30分鐘，待冷卻后，方可接種。 [ooee]
(4) —級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)(母瓶種子)
選新鮮或活化了大試管生產(chǎn)斜面或平皿菌種，以無菌手續(xù)挖0.5cm2大小，接入 500ml或1000ml搖瓶，每分鐘旋轉(zhuǎn)150-200轉(zhuǎn)的搖瓶機(jī)上，28± rC培養(yǎng)5 8天，待培養(yǎng) 液清香，菌球密布時(shí)，選擇生長(zhǎng)正常，無污染的搖瓶種子，直接供接二級(jí)種子搖瓶，或再行傳 種。暫時(shí)不用的搖瓶，放0 4t:冰箱保存?zhèn)溆谩１４鏁r(shí)間不得超過30天。 [ooes]
(5) 二級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)(子瓶種子)
選擇新鮮的一級(jí)搖瓶種子(母瓶種子)，以無菌手續(xù)，按10%接種量接入1000ml 搖瓶，置搖瓶機(jī)(150-200轉(zhuǎn)/分鐘)，28士rC培養(yǎng)3 4天待培養(yǎng)液清香，菌絲球密布時(shí)， 選擇符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的搖瓶直接進(jìn)一級(jí)種子灌。暫時(shí)不用的二級(jí)搖瓶種子(子瓶)放入0 4t:左右保存?zhèn)溆?，保存時(shí)間不得超過30天。
本實(shí)施例一級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)5 8天，二級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)3 4天。
本實(shí)施例母瓶采用1000ml，一級(jí)搖瓶配制量300ml。子瓶采用1000ml，配制量
600ml。
本實(shí)施例搖瓶培養(yǎng)溫度為28 ± 1°C 。
2、種子罐培養(yǎng)
(1)種子罐培養(yǎng)基配制
葡萄糖2% ;KH2P040. 1 % ;MgS040. 05% ;酵母粉1.5% ;黃豆餅粉1.5% ;玉米粉 2% ;消沫油適量；其余水。
(2)種子罐培養(yǎng)
①一級(jí)種子罐定容IOOL，消后培養(yǎng)基體積50L， 二級(jí)種子罐定容IOOOL，消后培養(yǎng) 基體積500L。
②一級(jí)種子罐，二級(jí)種子罐培養(yǎng)基消毒均采用實(shí)消121°C (0. lMPa流通蒸汽)保壓 25分鐘，冷卻至28°C 3(TC接種，一級(jí)種子罐接種量一般為2% 5%，二級(jí)種子罐接種量 為10% 20%左右，接種時(shí)可視等傳種菌種生產(chǎn)情況而定。接后攪拌均勻?yàn)橹埂?br> ③一級(jí)、二級(jí)種子罐培養(yǎng)條件為罐溫為28士rC，罐壓為0. 05MPa，通氣量微量， 以使培養(yǎng)基均勻翻動(dòng)為宜。消沫油用量一級(jí)種子罐為0.5 1.5L，二級(jí)種子罐為1.5
62. 5L。
④種子罐培養(yǎng)周期一級(jí)種子罐培養(yǎng)56 72小時(shí)，二級(jí)種子罐培養(yǎng)24 48小 時(shí)。
本發(fā)明實(shí)施例種子罐培養(yǎng)pH值控制為3. 5 4. 5 ;培養(yǎng)周期為一級(jí)種子罐56 72小時(shí)，二級(jí)種子罐24 48小時(shí)；培養(yǎng)溫度度為28± 1°C 。菌絲態(tài)菌絲長(zhǎng)分枝，菌絲壁易 見芽頭和鎖狀聯(lián)合，培養(yǎng)液清香，濃稠。 3、大罐發(fā)酵培養(yǎng)
(1)大罐培養(yǎng)基配制
葡萄糖2% ;KH2P040. 1 % ;MgS040. 05% ;酵母粉1.5% ;黃豆餅粉1.5% ;玉米粉 2% ;消沫油適量；其余水。
(2)大罐發(fā)酵培養(yǎng)
①大罐容10000L，消后培養(yǎng)基體積5000L。
②大罐消毒，121°C (0. 1Mpa流通蒸汽)保壓25分鐘，冷卻至9(TC左右，開動(dòng)攪拌
加速冷卻，冷至28°C 3(TC接種。
接種量按10 20%，接種后開攪拌。
④大罐培養(yǎng)條件
罐溫28t: 士rC，罐壓O. 05MPa，空氣量以使發(fā)酵液均勻翻動(dòng)為宜；培養(yǎng)周期48 72小時(shí)左右。
本發(fā)明實(shí)施例pH值控制在4 4. 5 ;培養(yǎng)溫度為28± rC，罐壓0. 05MPa，空氣量 以使發(fā)酵液均勻翻動(dòng)為宜；大罐放罐標(biāo)準(zhǔn)為菌絲形態(tài)，菌絲易見空泡，菌絲無集凝并開始 自溶；發(fā)酵液消香，濃稠。
本發(fā)明實(shí)施例在種子罐培養(yǎng)和大罐發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)采用全自動(dòng)化控制裝置，根據(jù)種子 罐培養(yǎng)和大罐發(fā)酵過程中的溫度，溶氧量，pH的變化進(jìn)行自動(dòng)控制，并對(duì)發(fā)酵物缺少營(yíng)養(yǎng)物 料時(shí)進(jìn)行自動(dòng)補(bǔ)料，以實(shí)現(xiàn)靈芝浸膏片原料的全自動(dòng)化發(fā)酵。
權(quán)利要求
一種靈芝浸膏片原料全自動(dòng)化發(fā)酵工藝，其特征在于，所述工藝通過在靈芝浸膏片原料發(fā)酵裝置上設(shè)置全自動(dòng)化發(fā)酵控制系統(tǒng)，在種子罐培養(yǎng)和大罐發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)對(duì)發(fā)酵過程中的溫度，溶氧量，pH進(jìn)行自動(dòng)控制，對(duì)發(fā)酵物缺少營(yíng)養(yǎng)物時(shí)進(jìn)行補(bǔ)料控制，選擇發(fā)酵物有效成份達(dá)到最高時(shí)放料。
2. 根據(jù)權(quán)利要求
1所述的靈芝浸膏片原料全自動(dòng)化發(fā)酵工藝，其特征在于，所述對(duì)發(fā) 酵物缺少營(yíng)養(yǎng)物時(shí)進(jìn)行補(bǔ)料控制，可以根據(jù)需要選擇補(bǔ)料形式，任意設(shè)定補(bǔ)料周期；進(jìn)行蠕 動(dòng)泵時(shí)間的設(shè)定與補(bǔ)料量的設(shè)定、補(bǔ)料量的清零等。
3. 根據(jù)權(quán)利要求
1所述的靈芝浸膏片原料全自動(dòng)化發(fā)酵工藝，其特征在于，所述對(duì)pH 進(jìn)行自動(dòng)控制，通過在線酸堿度測(cè)試儀測(cè)得發(fā)酵液的pH后，自動(dòng)加酸或加堿進(jìn)行調(diào)節(jié)，確 保發(fā)酵液在設(shè)置所需要的pH范圍內(nèi)。
4. 根據(jù)權(quán)利要求
1所述的靈芝浸膏片原料全自動(dòng)化發(fā)酵工藝，其特征在于，所述對(duì)溶 氧量進(jìn)行自動(dòng)控制，通過氧傳感器所測(cè)得的容器中的溶氧量，隨時(shí)對(duì)容器自動(dòng)進(jìn)行氧氣補(bǔ) 給，始終保持發(fā)酵容器內(nèi)的溶氧量在所設(shè)定需要的范圍內(nèi)。
專利摘要
一種靈芝浸膏片原料全自動(dòng)化發(fā)酵工藝，該工藝在靈芝浸膏片原料發(fā)酵裝置上設(shè)置全自動(dòng)化發(fā)酵控制系統(tǒng)，在種子罐培養(yǎng)和大罐發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)對(duì)發(fā)酵過程中的溫度，溶氧量，pH進(jìn)行自動(dòng)控制，對(duì)發(fā)酵物缺少營(yíng)養(yǎng)物時(shí)進(jìn)行補(bǔ)料控制。所述對(duì)pH進(jìn)行自動(dòng)控制，通過在線自動(dòng)測(cè)試pH后，自動(dòng)加酸或堿進(jìn)行調(diào)節(jié)，確保在所需要的pH范圍內(nèi)；所述對(duì)溶氧量進(jìn)行自動(dòng)控制，通過傳感器所測(cè)得的容器中的溶氧量，隨時(shí)對(duì)容器自動(dòng)進(jìn)行氧氣補(bǔ)給，始終保持發(fā)酵容器內(nèi)的氧氣量在所設(shè)定的范圍內(nèi)；所述對(duì)發(fā)酵物缺少營(yíng)養(yǎng)物時(shí)進(jìn)行補(bǔ)料控制，可以根據(jù)需要選擇補(bǔ)料形式，任意設(shè)定補(bǔ)料周期；進(jìn)行蠕動(dòng)泵的時(shí)間設(shè)定與補(bǔ)料量設(shè)定、補(bǔ)料量的清零等。本發(fā)明適用于靈芝浸膏片原料的全自動(dòng)發(fā)酵。
文檔編號(hào)A61K9/20GKCN101791322SQ201010114757
公開日2010年8月4日 申請(qǐng)日期2010年2月26日
發(fā)明者付志高 申請(qǐng)人:江西百神藥業(yè)集團(tuán)有限公司導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan