專利名稱:大蒜油在抗輻射引起的白細(xì)胞減少和dna損傷藥物制備中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及大蒜油的一種新用途，具體涉及大蒜油在對抗輻射引起的白細(xì)胞減少和DNA損傷藥物制備的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
大蒜(allium sativum L.)為百合科蔥屬植物大蒜的鱗莖。中醫(yī)藥學(xué)認(rèn)為大蒜具有行滯氣、暖脾胃、消瘀積、解毒殺蟲之功效，主治飲食積滯、脘腹冷痛、水腫脹滿、瀉泄、痢疾、瘧疾、癰疽腫毒、白禿癬瘡、蛇蟲咬傷。大蒜油(garlic oil)是從大蒜中提取的油狀物質(zhì)，含有大蒜素(allicin)、大蒜烯(ajoene)和大蒜新素(allitridin)等多種含硫的功效成分。大蒜的抗菌消炎、殺蟲、抗癌、降血壓、降血脂、預(yù)防動脈粥樣硬化、調(diào)節(jié)免疫功能等作用均于大蒜油有關(guān)。對大蒜具有抗癌、降血壓、降血脂、預(yù)防動脈粥樣硬化、調(diào)節(jié)免疫等作用的報道，國內(nèi)外研究甚多，有關(guān)報道見金燕，劉桂潔，大蒜藥理作用的研究進展，中醫(yī)藥信息，2000，(6)33-35；劉萍，大蒜的藥理作用及臨床應(yīng)用，天津藥學(xué)，1999，11(4)18；高玉民，謝錦玉，劉銘福.大蒜油抗動物腫瘤的整體療效觀察.中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，1998；4(8)29；張曉利等，大蒜素對小鼠免疫功能的影響，中醫(yī)藥學(xué)報，1998，(1)57-58。目前尚未有對抗輻射、阻止和恢復(fù)輻射造成的白細(xì)胞減少和細(xì)胞DNA損傷作用報道。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供大蒜油的一種新用途，即大蒜油在對抗輻射引起的白細(xì)胞減少和DNA損傷藥物制備的應(yīng)用。
本發(fā)明的技術(shù)方案是將大蒜油用于制備對抗輻射引起的白細(xì)胞減少和DNA損傷藥物。
具有抗3Gy劑量的γ射線照射引起的白細(xì)胞減少和細(xì)胞DNA損傷作用的大蒜油藥物中大蒜素劑量在10～32mg/kg體重。
上述的大蒜油中大蒜素有效劑量為10～32mg/kg體重。使用方法是口服。
大蒜油可用玉米油稀釋。
為了更好的理解本發(fā)明的實質(zhì)，下面用大蒜油抗輻射引起的白細(xì)胞減少和DNA損傷的實驗結(jié)果來說明大蒜油在對抗輻射引起的白細(xì)胞減少和DNA損傷中的作用。
1材料與方法1.1材料SPF級BALB/c健康雄性小鼠由山東大學(xué)實驗動物中心提供；含35％大蒜素的大蒜油(藥品級)由河南許昌元化生物科技有限公司提供。γ輻射源山東農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供。
1.2方法1.2.1輻射致白細(xì)胞減少模型用60只體重18～22g的雄性小鼠，將小鼠隨機分為輻射模型對照組，大蒜油低、中、高劑量四組，每組15只。大蒜油用玉米油分別稀釋，低、中、高劑量分別含大蒜素為5.3、10.5和31.6mg/kg，經(jīng)口灌胃，每天一次，連續(xù)30天。對照組用同體積玉米油。在灌胃第15天，四組小鼠均接受同一劑量的γ射線全身照射一次，照射總劑量為3Gy(輻射源距動物20cm，照射時間為7′30″，劑量率39.96rad/min)。照射后15天繼續(xù)給大蒜油和玉米油。每周稱重一次，并觀察動物表現(xiàn)。30天后處死動物，取肝、脾和腎臟進行臟器系數(shù)比較。白細(xì)胞計數(shù)用手工操作，于照射前15天、3天和照射后3天、15天四次采眼眶內(nèi)眥血，每次20μl，加入0.38ml1％鹽酸，混勻后入血球計數(shù)板，鏡下計算計數(shù)池中四個大方格中白細(xì)胞總數(shù)，以輻射模型對照組為對照。
1.2.2小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗 用60只體重18～22g的雄性小鼠，輻射模型對照組，大蒜油低、中、高劑量組同輻射致白細(xì)胞減少模型。經(jīng)口灌胃，每天一次，連續(xù)18天。在灌胃第15天，四組小鼠均接受3Gy劑量的Γ射線全身照射一次。照射后第3天，頸椎脫臼處死動物，取股骨，用止血鉗擠出骨髓液與小牛血清混勻，涂片。自然干燥后，甲醇固定，Giemsa染色，在光學(xué)顯微鏡下，每只動物計數(shù)1000個嗜多染紅細(xì)胞中微核細(xì)胞數(shù)，微核發(fā)生率以千分率計，并以輻射模型對照組為對照。
2結(jié)果2.1輻射致白細(xì)胞減少模型動物體重的變化 輻射模型對照組，大蒜油低、中、高劑量組，四組動物初始體重相同；第二周、第三周、第四周體重各劑量組和對照組也未見顯著性差異(P＞0.05)；第三周照射后動物體重也未見明顯改變。見表1。整個實驗期間，沒有發(fā)現(xiàn)動物行為、攝食等活動異常。
表1 大蒜油小鼠不同時間的體重變化(g)
n＝15；P＞0.05vs輻射對照2.2輻射致白細(xì)胞減少模型動物臟器系數(shù)的變化 用大蒜油30天后，小鼠肝臟、腎臟重量有減小的趨勢，肝/體比值、腎/體比值下降，高劑量組與對照相比有顯著差異(P＜0.05)；脾臟表現(xiàn)雙向改變。低劑量組降低，高劑量組增高。重量和脾/體比值與對照相比均有顯著差異(P＜0.01)。見表2。
表2 各組小鼠的臟器系數(shù)比較
2.3大蒜油對輻射小鼠外周血白細(xì)胞計數(shù)改變表3 小鼠外周血白細(xì)胞計數(shù)(×109/L)
由表3可見，照射前第15天，各劑量組小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)與對照組比較，無顯著性差異(P＞0.05)；照射前第3天白細(xì)胞總數(shù)增多，低、中、高劑量分別增加了22％、80％和71％(P＜0.05，P＜0.01)；照射后第3天中、高劑量白細(xì)胞總數(shù)均增加了46％(P＜0.05)；照射后第15天中、高劑量白細(xì)胞總數(shù)分別增加65％和69％(P＜0.01)。
2.1.2大蒜油對輻射誘發(fā)小鼠骨髓細(xì)胞微核的影響表4 大蒜油對輻射誘發(fā)小鼠骨髓細(xì)胞微核的影響組別 劑量(mg/kg) 動物數(shù)(只) 細(xì)胞數(shù)(個) 微核數(shù)(個) 微核率(‰)輻射對照 15 15000 313 20.9±5.1 20.9低劑量組 5.3 15 15000 274 18.3±3.6 18.3中劑量組 10.5 15 15000 255 17.0±4.7*17.0高劑量組 31.6 15 15000 220 14.7±3.0**14.7各組均與對照組比較P＜0.01由表4可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量樣品15天，高劑量組與對照組比較，小鼠微核率顯著降低，有顯著性差異(P＜0.01)。
以上結(jié)果顯示，大蒜油具有對抗輻射引起的白細(xì)胞減少和DNA損傷作用。
權(quán)利要求
1.大蒜油在制備治療輻射引起的白細(xì)胞減少的抗輻射藥物中的應(yīng)用。
2.如權(quán)利要求
1中所述的大蒜油的應(yīng)用，其特征在于，在對3Gy劑量的γ射線照射下引起的白細(xì)胞減少的抗輻射藥物中大蒜素劑量在10～32mg/kg體重。
專利摘要
大蒜油抗輻射引起的白細(xì)胞減少和DNA損傷藥物制備的應(yīng)用。大蒜油中大蒜素含量在10～32mg/kg時具有抗3Gy劑量的γ射線照射引起的白細(xì)胞減少和細(xì)胞DNA損傷作用。為放化療方法治療腫瘤引起的機體白細(xì)胞減低和細(xì)胞DNA損傷藥物的制備又開辟了一條新的應(yīng)用途徑。
文檔編號A61P39/00GKCN1256084SQ200410023701
公開日2006年5月17日 申請日期2004年2月27日
發(fā)明者謝克勤, 于麗華, 朱振平, 趙秀蘭 申請人:山東大學(xué)導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan