專利名稱:促進(jìn)傷口肉芽生長和上皮形成的局部藥物制劑的制備及其生產(chǎn)方法和應(yīng)用的制作方法
由細(xì)胞培養(yǎng)試驗已知，Ca2+-離子對細(xì)胞分裂有影響，(國家科學(xué)院學(xué)報，70，675-679頁)。此外通過提高細(xì)胞外的k+-濃度可以達(dá)到膜電位的去報化作用也是已知的。但這些效應(yīng)對傷口肉芽生長和上皮形成的影響至今沒有為公眾所知。但大量的試驗已經(jīng)表明，在細(xì)胞的培植中，找到的最佳Ca2+-濃度和較高的Ca2+-濃度對傷口治療既沒有促進(jìn)影響也沒有阻止影響。
既使同時作到保持一種細(xì)胞外的最佳的Ca2+-濃度，在細(xì)胞外圍額外增加的生理鉀數(shù)量，對傷口治療也沒有促進(jìn)的效果。
現(xiàn)在出乎意料的發(fā)現(xiàn)，Ca2+和k+離子一起，以完全一定的濃度比例對傷口肉芽生長和上皮形成有一預(yù)料不到的好作用，在理想克分子的情況下并且作用很強(qiáng)烈，因此以結(jié)合形式使用是一種有價值的促進(jìn)傷口治愈的制劑。
若對傷口表面直接用一含水的電解液包扎，該電解液含有，以這種電解液含有的水為基準(zhǔn)，20至100mM Ca2+-離子和25至60mM k+-離子，則可以得到本發(fā)明的濃度比例。
電解液本身可以由傷口分泌物和/或由一種附加在傷口上的含水藥劑構(gòu)成。
在第一種情況，使生理上相容的可離子化的Ca-鹽和k-鹽與一固體載體一起，按克分子比1∶3至4∶1，以這樣的數(shù)量敷在傷口上，在傷口分泌物的溶液中使Ca-鹽和k-鹽形成上面所指定的濃度范圍。但因為談到的傷口分泌物的數(shù)量可以有很大波動，并不能準(zhǔn)確估計到，因此用干凝膠，藥粉，離子交換劑，羊毛浸漬過的繃帶材料，聚糖類，或類似的干燥藥劑不是總能確保達(dá)到本發(fā)明的濃度范圍，并能維持一段較長的時間的。
因此這樣一些藥劑還是比較適宜的，這些藥劑雖然是以干燥形式生產(chǎn)出來的，并且部分地也以這種形式在商業(yè)上銷售，因之也決定了，在服用前要摻入相當(dāng)準(zhǔn)確的定量的水。在這種藥劑吸收了摻入的水量，并且使Ca2+-鹽和k+-鹽分離以后，再將它置于傷口上。屬于這種情況的例子，如干凝膠根據(jù)西德公開說明書28 49 570。
也有混合形式的，在這種形式中，干的載體一開始就用水潤濕，水中含有按所要求的比例溶解的Ca2+-離子和k+-離子。屬于這種形式的例子有離子交換劑，適用于凝膠色譜的凝膠(分子篩)，或者簡單的固體的，例如被潤濕的，并密封消過毒的紡織品的傷口復(fù)蓋物。
最后提到的藥劑本身是典型的含水藥劑。對比可以理解為這樣一些制劑，特別是以水作為載體起作用的制劑和有時含有除了其他的輔助物和或有效物以外濃度為20至100mM或25至60mM的Ca2+-離子以及k+-離子的制劑。優(yōu)先選用的范圍在這里是25至35mMCa2+-離子和35至45mM k+-離子。特別選用的比例定30mM Ca2+-離子和40mM k+-離子。
作為含水藥劑考慮所有含有水份的，可以調(diào)整發(fā)明克分子離子濃度的藥物制劑。除了簡單的水溶液、洗液或油在水中的乳化液以外，粘稠溶液，分散系統(tǒng)和泡沫也屬于這一類。
上面所述及的凝膠類藥劑，例如像聚丙烯酰胺/瓊脂-凝膠是特別適合傷口的，因此是優(yōu)先選用的。
對于上面談到的制劑，優(yōu)先選用了一種制造方法，該方法的特微是以已知方法，向一含水的藥物載體中，除了其他的輔助物和或有效物外，以所含水為基準(zhǔn)，作為有效物加入濃度直至20至100mM的Ca2+-離子和25至60mM的k+-離子，Ca2+和k+離子生成在藥理上相容的鹽，并且這些離子均勻的分布在水相中。
作為藥理上相容的鹽類主要是考慮氯化物和磷酸鹽，但也可以使用其他的無機(jī)的和有機(jī)的鹽，例如像檸檬酸鹽，馬來酸鹽，琥珀酸鹽或類似的鹽類，只要是它們與細(xì)胞組織是相容的可分解的。
在含水液的藥劑情況下，將水相調(diào)至等滲壓是適合的。為了避免外界離子，可以選用葡萄糖來進(jìn)行。陽離子的電解質(zhì)的效果，除了添加的Ca2+和k+外，還沒有研究過。在許多情況下，向水相中為提高電解質(zhì)對皮膚的滲透性添加表面活化劑，也是適宜的。
因為上面提到的制劑作用僅僅要求以Ca2+和k+-離子在細(xì)胞外空間中的離子比例為基礎(chǔ)，所以不言而喻的，這樣一些凡含有提到的離子作為唯一的有效物質(zhì)的制劑也是完全有效的。但在有些情況下，添加一些其他的有效物也是受歡迎的，例如像抗生的或抑制真菌有效的制劑或表面麻醉劑。
在所敘的制劑機(jī)理試驗中進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，不只是在Ca2+和k+-離子存在時，有促進(jìn)傷口肉芽生長和上皮形成的積極作用，而且往往是在提高了血漿膜的鈣滲透性，并因此能使Ca2+-離子流入細(xì)胞以后，才有這種促進(jìn)的積極作用的。這不但能夠作到，如上所述，在一種藥理上相容的載體上，有時除了其他的有效物質(zhì)和/或輔助物質(zhì)外，均勻分布0.2至10重量百分?jǐn)?shù)的一種有效物的混合物，該混合物是由在藥理上相容的可離子化的Ca2+和k+鹽，Ca2+∶k+克分子比為1∶3至4∶1所組成，并借此用k-離子打開所提到的血漿膜中的鈣的通道，而且也可以作到，不用所敘述的有效物的混合物，或者使一種濃度為3×10-8至3×10-6M的Ca2+-離子載體與濃度為0.1-50mM的鈣鹽結(jié)合一起，或者使?jié)舛葹?0-5至10-9M的一種鈣-興奮劑，在濃度為5×10-3至2×10-2M的k+-離子和濃度為10-3M至3×10-2M Ca2+的存在情況下，均勻的分布在一藥理上相容的載體上，得到的制劑用作傷口治療劑。
Ca2+-離子載體是一些化合物，這些化合物滲透過血漿膜對鈣是有選擇性的。
例如這樣一種離子載體是開始以A23 187表明的已知的抗生素6S〔6α(2S＊，3S＊)，8β(R)＊，9β11α〕-5-甲基氨基-2-〔3，9，11-三甲基-8-〔1-甲基-2-氧代-2-(1H-吡咯-2-基)-乙基丁-1、7-二氧雜螺旋〔S，S〕+一-2-基〕甲基〕-4-苯并噁唑-羧酸。〔赫希斯特，文檔號8154-1082〕按照發(fā)明，A 23 187與鈣一起，在濃度為3×10-8至3×10-6M時起作用，在這當(dāng)中，為了保證足夠的Ca2+-流入細(xì)胞中，在細(xì)胞外的鈣鹽，必須處于濃度為0.1至50mM。
因為原則上是通過血漿膜供給細(xì)胞以鈣，所以本發(fā)明的較迅速的治愈傷口的效果，同樣可以通過所有其他的Ca2+-離子載體達(dá)到。
因為Ca-興奮劑也提高血漿膜的鈣滲透性，所以它的作用也定如此。在有鉀存在的情況下，通過Ca-興奮劑打開了鈣的通道。但在按照發(fā)明使用Ca-興奮劑時，只需要使用很少的鉀，所以，尤其在大面積燒傷時，不致破壞鉀的平衡。對于使用純的Ca++和k+離子來說，如上面對它所描敘的那樣，這是一種改善。
鈣-興奮劑的最有效的濃度范圍是10-5至10-9M。所需鉀的濃度處在5×10-3至2×10-2M范圍內(nèi)，鈣-濃度應(yīng)處在10-3M和3×10-2M之間。
一種這樣的鈣-興奮劑，例如是物質(zhì)拜克(Bag k)8644，關(guān)于這種物質(zhì)早已公知，它刺激鈣-流入細(xì)胞中〔參閱例子，藥劑研究/藥物研究，33(11)9號(1983)以及生物化學(xué)和生物物理研究通訊，(1984)118、3號，842-847頁〕。
使人最出乎意料的是，在細(xì)胞內(nèi)部鈣是傷口肉芽生長的一個重要因素。在細(xì)胞外的空間中鈣的濃度，沒有本發(fā)明制劑提高滲透性，也決沒有治愈傷口的作用。通過加入一種鈣的螯合物如乙二醇-雙(β-氨基-乙基)-N，N，N，N-四乙酸(EGTA)取走鈣，在細(xì)胞外部空間提高鈣的濃度大約為生理濃度的二十倍，都不能導(dǎo)致傷口肉芽生長的改變。因此專業(yè)技術(shù)人員可以得出結(jié)論，鈣對傷口肉芽生長沒有重要的關(guān)系。
因此本發(fā)明的主題是促進(jìn)傷口肉芽生長和上皮形成的一種局部的醫(yī)療制劑，含有一種在藥理上相容的載體和一種有效物，該制劑通過特微表明，有效物提高了血漿膜的鈣滲透性，并且或者a)以載體為基準(zhǔn)，由0.2至10重量百分?jǐn)?shù)的可離子化的在藥理上相容的Ca2+和k+鹽類所組成，Ca2+∶k+克分子比1∶3至4∶1或者b)由一濃度為3×10-8至3×10-6M的Ca2+-離子載體與一濃度為0.1至50mM的鈣鹽結(jié)合一起所組成，或者c)在濃度為5×10-3至2×10-2M的k+-離子和濃度為10-3M至3×10-2M的Ca2+-離子存在情況下，由一濃度為10-5至
10-9M的鈣-興奮劑所組成。
本發(fā)明的另一主題是促進(jìn)傷口肉芽生長和上皮形成的局部藥劑的一種制造方法，該方法的特微在于，有時除了其他的有效物和/或輔助物外，將一種有效物a)，b)或c)均勻分布在一種在藥理上相容的載體上，以及使用這種所表明的藥物制劑促進(jìn)傷口肉芽生長和上皮形成。
圖形可以進(jìn)一步說明發(fā)明的主題由圖1可以看出，傷口肉芽組織的形成基本上與細(xì)胞外的鈣濃度無關(guān)。
由圖2表明，提高滲透性的有效物質(zhì)A23187，在細(xì)胞外圍空間中存在鈣離子，濃度在10-7和3×10-6M之間時，特別是在濃度為3×10M時與比較試樣相比，傷口肉芽生長有明顯提高。若在細(xì)胞外的空間利用EGTA去掉Ca2+減少細(xì)胞中的Ca2+-濃度，并且少用作為提高滲透性藥劑的A23187時，則傷口肉芽生長明顯降低。這個試驗表明，肉芽組織的形成，傷口治愈的前提條件，與細(xì)胞的Ca2+-含量有很強(qiáng)的依賴關(guān)系，若使用本發(fā)明的提高滲透性的藥劑提高細(xì)胞的Ca2+-含量，則傷口肉芽生長可以顯著的提高。
作為圖1和2基礎(chǔ)的試驗，是以下列方式進(jìn)行的。
割斷豚鼠的脊部皮膚直至結(jié)締組織膜，在傷口中縫入一直徑為21mm的聚四氟乙烯環(huán)。由此可以阻止傷口的上皮愈合。在背部肌肉的結(jié)蒂組織膜上，該結(jié)蒂組織直至手術(shù)時沒有肉芽組織，連續(xù)三天敷上一含水的含有規(guī)定濃度的有效物的聚丙烯酰胺-瓊脂凝膠。三天以后，當(dāng)肉芽生長到最佳狀態(tài)的時候，用一鋒利的小勺摘除全部肉芽組織，稱重和進(jìn)行組織發(fā)生學(xué)處理。
在使用一濃度為30mM Ca2+離子和40mMk+離子的方法a)中，在這當(dāng)中，由于等滲壓的原因，向凝膠中摻入了0.9重量-%的NacL，可以得到明顯的肉芽組織生長數(shù)量的增高，直至大約180%。組織發(fā)生學(xué)的對比試驗表明了一種真正的細(xì)胞增殖，不只是細(xì)胞的體積增加。
下邊的例子用來進(jìn)一步說明發(fā)明例1等滲壓的溶液在100毫升量瓶中放入80毫升的凈水，然后在電磁攪拌器攪拌情況下，加入20毫克苯亞甲基毒芹氯化物，并溶解，接著先后加入0.3克氯化鉀，0.44克氯化鈣(兩種鹽一起PH、Eur、Ⅰ)和2.62克葡萄糖-水合物(PH.EurⅡ)。將燒瓶在水浴中加熱至20℃，接著注入純的同樣為20℃的溫水至刻度記號處。然后將溶液經(jīng)一孔徑為0.2mm內(nèi)徑的薄膜過濾器無菌過濾，并且無菌灌入容器。
〔0.29822克kcL～40mMCL k+0.44106克CacL2～30mMcL Ca2+〕
例2油在水中的乳化液在第一個配方中，用7克由飽和脂肪酸，脂肪醇，羊毛臘，石油和非離子的乳化劑所組成的混合物與2.5克聚乙二醇甘油脂肪酸脂，3克硬脂酸的和棕櫚酸的單酸單油脂，0.3克十六烷基醇和3克異丙基棕櫚酸鹽，通過在水浴中加溫至70℃使均勻熔化。
在第二個配方中，在攪拌情況下，將80克的凈水與3克丙二醇混合，并加溫至70℃。然后將這樣得到的混合物摻入0.3克氯化鉀，0.44克氯化鈣和0.2克防腐劑。得到的透明溶液，在70℃在攪拌下，加入到第一配方中進(jìn)行乳化。這樣得到的乳化液冷卻至40℃，補(bǔ)足由于蒸發(fā)損失的水分。然后將冷卻至30℃的乳化液灌入容器。
例3透明的液體繃帶材料(凝膠片)配方A3.5克丙烯酰胺和0.091克雙丙烯酰胺溶于100毫升的凈水中。然后將溶液升溫至60℃。
配方B0.3克氯化鉀和0.44克氯化鈣，溶于100毫升的凈水中，并摻入0.2克防腐劑。加入2克瓊脂(OEAB9)以后，在電磁攪拌器攪拌情況下，將溶液煮沸，然后冷卻至60℃。
接著在60℃在攪拌情況下，將配方A和B混合。然后加入0.045克氨過氧化物二亞硫酸鹽和0.045克(60ML)四甲撐二胺。經(jīng)短時間的積極攪拌以后，將其倒入特里培養(yǎng)皿中，該培養(yǎng)皿事先已在溫箱中加熱至60℃。然后將特里培養(yǎng)皿貯存于56℃的溫箱中30分鐘。接著將其冷卻至室溫，并將培養(yǎng)皿與得到的透明硬化片放在-4℃溫度下的箱中24小時進(jìn)行熟化。這樣得到的片可以直接敷蓋在傷口上。
例4可涂敷的凝膠將94克凈水加熱至70℃，并摻入0.3克氯化鉀和0.44克氯化鈣。在加入0.2克防腐劑以后，使5克甲基羥乙基纖維素分散在所得的溶液中，然后在攪拌下冷卻。在冷卻以后，得到一具有粘度為90秒的高粘度的充滿空氣泡的凝膠，該凝膠可以直接用于傷口處理。
例5紡織品的傷口敷蓋物將4×4cm大小和5mm原無菌漂白薄紗布片，按照例1浸入無菌的滲透溶劑中，接著將溶液擠出，使布片不再滴液為止。然后將這樣得到的布片在無菌的條件下與聚乙烯薄膜焊接在一起。
例6帶有A23 187的可涂敷的凝膠將1000克凈水加熱至70℃，摻入1.6mg A23 187和560mg氯化鈣。在加入2克防腐劑以后，將50克甲基羥乙基纖維素分散到制得的溶液中。然后在攪拌下進(jìn)行冷卻。冷卻后得到一具有粘度為90
、鈔充滿空氣泡的高粘度的凝膠，該凝膠可以直接用于傷口處理。
例7帶有拜克(Bag、k)8644的可涂敷的凝膠1000克凈水加熱至70℃，摻入1.49克kcL，3.3克CacL2和3.56mg拜克(Bag k)8644。在加入2克防腐劑以后，將50克甲基羥乙基纖維素分散于所得到的溶液中，并如例1所述的進(jìn)行加工。
權(quán)利要求
1.含有一種在藥理學(xué)上相容的載體和一種有效物質(zhì)，促進(jìn)傷口肉芽生長和上皮形成的局部藥物制劑，其特微在于，有效物質(zhì)提高了血漿膜的鈣滲透性，或者a)以載體為基準(zhǔn)，由0.2至10重量百分?jǐn)?shù)可離子化的在藥理學(xué)上相容的Ca2+和K+鹽，以Ca2+K+分子比為1∶3至4∶1的混合物所組成，或者b)由濃度為3×10-8至3×10-6M的一種Ca2+-離子載體與濃度為0.1至50mM的鈣鹽結(jié)合所組成，或者c)在濃度為5×10-3至2×10-2M的K-離子存在情況下，由一濃度為10-5至10-9的鈣興奮劑與濃度為10-3M至3×10-2M的Ca2+所組成。
2.按照權(quán)利要求
1的藥物制劑，其特微在于，該載體主要是由水所組成。
3.按照權(quán)利要求
1和2的藥物制劑，其特微在于，該載體以一種含水的凝膠形式存在。
4.按照權(quán)利要求
1的制劑，其特微在于，于凝膠用作載體。
5.按照權(quán)利要求
1a)的制劑，其特微在于，制劑，以所含水為基準(zhǔn)，含有20至100mMCa2+-離子和25至60mM k+-離子。
6.按照權(quán)利要求
5的藥物制劑，其特微在于，制劑含有約30mM Ca2+-離子和約40mM k+-離子。
7.促進(jìn)傷口肉芽生長和上皮形成的局部藥物制劑的生產(chǎn)方法，其特微在于，有時除了其他的有效物質(zhì)和/或輔助物質(zhì)以外，將按照權(quán)利要求
1，5或6之一的一種有效物質(zhì)a)，b)或c)均勻的分布在一在藥理上相容的載體中。
8.按照權(quán)利要求
7的方法，其特微在于，載體主要由水所組成，并且除了其他的輔助物/或有效物以外，有時向載體中，以所含水為基準(zhǔn)，添加直至濃度為20至100mM的Ca2+-離子和25至60mM k+-離子，并且使這些離子均勻的分布于水的藥物基質(zhì)中。
9.按照權(quán)利要求
1至6之一的制劑的應(yīng)用，促進(jìn)傷口肉芽生長和上皮形成。
專利摘要
該藥劑含有一種在藥理上相容的載體和一種有效物質(zhì)，特征在于，有效物質(zhì)提高了血漿膜的鈣滲透性，并且或者
文檔編號A61K47/00GK85103399SQ85103399
公開日1986年12月10日 申請日期1985年5月14日
發(fā)明者羅蘭得·尼德納, 迪特爾·瑪爾梅, 埃爾溫·舍普夫 申請人:歌德克股份公司導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan