專利名稱:制備偕-二鹵代-和四鹵代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷的方法
與正常的靜止態(tài)細(xì)胞相比，迅速增生的細(xì)胞中的天然多胺，例如腐胺、亞精脒和精胺的生物合成的增加，是皆知的事實。反之，腐胺和亞精脒的減少，會導(dǎo)致細(xì)胞增殖的減退，這也是已知的。
鳥氨酸是腐胺的代謝前體，腐胺又是亞精脒的代謝前體，而亞精脒又是精胺的代謝前體。在代謝上，這些生物化學(xué)轉(zhuǎn)化過程分別由鳥氨酸脫羧酶、亞精脒合成酶和精胺合成酶所催化。另外，亞精脒和精胺合成酶利用脫羧的S-腺苷-L-甲硫氨酸作為酶的輔被作用物，后者是S-腺苷-L-甲硫氨酸脫羧酶的反應(yīng)產(chǎn)物。因此，這些酶的抑制劑，包括S-腺苷-甲硫氨酸脫羧酶的抑制劑，可用來抑制腐胺，及由它生成的高碳多胺，即亞精脒和精胺的生物合成，并且理論上作為抗增生試劑或抗腫瘤試劑是有效的。
然而在過去，應(yīng)用鳥氨酸脫羧酶的不可逆抑制劑或S-腺苷-L-甲硫氨酸脫羧酶，亞精脒合成酶和精胺合成酶的抑制劑，證明并非完全有效。例如，只要預(yù)先存在的精胺庫維持在某種臨界含量之上，腐胺和亞精脒對于維持細(xì)胞的生活力并非必要的。而且，對脫羧酶在體內(nèi)的完全抑制之所以困難是因它們能夠迅速更新。
本申請人發(fā)現(xiàn)了一組能拮抗細(xì)胞內(nèi)精胺功能的化合物。這些化合物對迅速增生的細(xì)胞的生長是非常有效的抑制劑。因而，本發(fā)明的化合物用作抗增生和抗腫瘤試劑。
本發(fā)明涉及精胺的某些選擇性的偕-二囟代和四囟代衍生物。具體地說，本發(fā)明涉及具體化學(xué)式(1)的偕-二囟代或四囟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷的衍生物及其藥用鹽 式中X和Y代表氫或囟素，但在二囟代衍生物中，兩個囟素須在一個而且只在一個碳原子上，在四囟代衍生物的情況下，須是2，2，11，11-四囟取代物。
此外，本發(fā)明還包括此處所述的化合物的制備方法，含有這些化合物的藥劑組分，以及這些化合物作為抗腫瘤藥物的用途。
如同上面通式(1)所指出的那樣，本發(fā)明是一組特定的偕-二囟代或偕-四囟代精胺的化合物及其藥用鹽。不過在本發(fā)明的全部敘述中，將使用較明確的命名法，這些化合物將稱作偕-二囟代或偕-四囟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷的衍生物。此處所用的囟素一詞，僅指氯和氟的衍生物。
本發(fā)明所包括的全部化合物是特定的偕-二囟代衍生物和特定的偕-四囟代衍生物。這就是說，本發(fā)明的化合物只限于1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷的2，2-二囟代，6，6-二囟代或2，2，11，11-四囟代衍生物，如同附帶限制條件所指出的那樣?；谠摲肿訉ΨQ的特點，2，2-二囟代衍生物與11，11-二囟代衍生物是同一個化合物，所以這類化合物全部稱作2，2-二囟代衍生物。
2，2，11，11-四囟代衍生物，因其制備方法，在2位和11位碳原子上的取代反應(yīng)是對稱的。換言之，在2位上發(fā)生的取代反應(yīng)，也必然會在11位上發(fā)生。
在權(quán)利要求
1中包括的本發(fā)明的化合物有2，2-二氟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷;2，2-二氯代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷;2-氯-2-氟-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷;6，6-二氟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷;6，6-二氯代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷;6-氯-6-氟-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷;2，2，11，11-四氟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷;和2，11-二氯代-2，11-二氟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷。
藥用鹽包括上述式(1)的堿性化合物的無毒性的有機酸或無機酸的加成鹽。無機酸包括鹽酸，氫溴酸，硫酸和磷酸，以及金屬鹽，例如正磷酸一氫鈉和硫酸氫鉀?？尚纬蛇m宜的鹽的有機酸包括一元、二元和三元酸，例如醋酸，乙醇酸，乳酸，丙酮酸，丙二酸，丁二酸，戊二酸，富馬酸，蘋果酸，酒石酸，檸檬酸，抗壞血酸，馬來酸，羥基馬來酸，苯甲酸，對羥基苯甲酸，苯乙酸，肉桂酸，水楊酸，2-苯氧基乙酸和磺酸，例如甲烷磺酸和2-羥基乙烷磺酸。這些加成鹽或以水合形式存在，或主要以無水形式存在。
本發(fā)明的全部化合物的制備方法，按邏輯順序由具有式(2)的相應(yīng)的2，2-二囟代-1，4-丁二醇開始 式中X1和Y1代表氯和氟。這些化合物經(jīng)適當(dāng)?shù)?，2-二囟代丁二酸與三氟醋酸酐反應(yīng)，生成相應(yīng)的2，2-二囟代丁二酸酐是容易制取的。用甲醇解離該酸酐，生成相應(yīng)的2，2-二囟代丁二酸甲酯，用甲硼烷-二甲硫復(fù)合物還原該相應(yīng)的游離酸功能基，生成相應(yīng)的醇，即2，2-二囟代-4-羥基丁酸甲酯，還原該酯基，例如用硼氫化鈉，生成所需要的起始原料，即2，2-二囟代-1，4-丁二醇(2)。
本發(fā)明的6，6-二囟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷衍生物的制備，可按如下的合成次序進行
式中X1和Y1＝氯或氟， 化合物2，2-二囟代-1，4-丁二醇(2)在吡啶的存在下用兩等當(dāng)量的甲烷磺酰氯處理，生成相應(yīng)的1，4-雙-甲烷磺酰氧基-2，2-二囟丁烷(3)。在溶劑例如二甲基甲酰胺中(3)與兩等當(dāng)量的鄰苯二甲酰亞胺鉀反應(yīng)，生成相應(yīng)的2，2-二囟代-1，4-二鄰苯二甲酰亞胺基一丁烷(4)。在溶劑例如乙醇中(4)與肼共熱，除掉了鄰苯二甲酰基保護基團，生成關(guān)鍵的中間體2，2-二囟代-1，4-二氨基丁烷(5)，作為它們的二氮囟酸鹽很容易分離出來?；衔?，2-二氟代-1.4-二氨基丁烷是制備6，6-二氟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷的有用的關(guān)鍵中間體。所以這些2，2-二囟代-1，4-二氨基丁烷是一類新的有用的化合物，它們作為本發(fā)明的一部分特地在這里提出申請。
為了避免得到較高烷基化產(chǎn)物，(5)的伯胺以標(biāo)準(zhǔn)的方法用對-甲苯磺酰氯保護，生成相應(yīng)的2，2-二囟代-1，4-二-對-甲苯磺酰胺基丁烷(6)。在無水條件下，于合適的非質(zhì)子性溶劑，例如二甲基甲酰胺在碘化鈉和叔丁醇鉀的存在下，被保護的胺(6)用兩等當(dāng)量的3-溴丙基鄰苯二甲酰亞胺進行烷基化，生成相應(yīng)的6，6-二囟代-1，12-二鄰苯二甲酰亞胺基-4，9-二-對-甲苯磺酰基-4，9-二氮雜-十二烷(1)。
這些4，9-二氮雜-十二烷衍生物(7)的去保護基作用分兩步進行，第一步是在溶劑例如乙醇中與肼共熱除去鄰苯二甲酰基。這樣得到的產(chǎn)物在與含水的HBr共熱，以除去保護的對甲苯磺?；糠帧Ｓ眠@種方式得到的最終產(chǎn)物是相應(yīng)的6，6-二囟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜一十二烷(1)，它們可以容易地以它們相應(yīng)的四氫囟酸鹽，最好是它們的四氫溴酸鹽的形式分離出。
本發(fā)明的2，2-二囟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷衍生物的制備，是按如下的反應(yīng)次序進行，由適當(dāng)?shù)?，2-二囟代-1，4-丁二醇(2)開始。在該反應(yīng)次序中，符號X1，Y1，Pht，Mes和Tos的含義與前述相同。
在吡啶的存在下，2，2-二囟代-1，4-丁二醇(2)用兩等當(dāng)量的甲烷磺酰氯處理，生成相應(yīng)的1，4-雙-甲烷磺酰氧基-2，2-二囟丁烷(3)。當(dāng)(3)在溶劑如二甲基甲酰胺中與二氮雜雙環(huán)十一烯共熱，得到相應(yīng)的1-甲烷磺酰氧基-2，2-二囟代-3-丁烯(8)。
在溶劑如二甲基甲酰胺中(8)與鄰苯二甲酰亞胺鉀反應(yīng)，生成相應(yīng)的1-鄰苯二甲酰亞胺基-2，2-二囟代-3-丁烯(9)。在醇溶劑中用肼解離鄰苯二甲?；苌?9)，生成相應(yīng)的1-氨基-2，2-二囟代-3-丁烯(10)。
用標(biāo)準(zhǔn)的方法，伯胺(10)是經(jīng)與對-甲苯磺酰氯反應(yīng)而得到保護，得到相應(yīng)的N-(2，2-二囟代-3-丁烯基)-對-甲苯磺酰胺(11)。在無水條件和適宜的溶劑如二甲基甲酰胺中，在叔丁醇鉀的存在下，經(jīng)保護的胺(11)用4-溴丁基鄰苯二甲酰亞胺進行烷基化，生成相應(yīng)的N-(4-鄰苯二甲酰亞胺丁基)-N-(2，2-二囟代-3-丁烯基)-對-甲苯磺酰胺(12)。
在溶劑如乙醇中，(12)的肼反應(yīng)生成相應(yīng)的9-氨基-3，3-二囟代-5-對-甲苯磺?；?5-氮雜-1-壬烯(13)，用對-甲苯磺酰氯處理(13)，生成相應(yīng)的9-對-甲苯磺酰胺基-3，3-二囟代-5-對-甲苯磺?；?5-氮雜-1-壬烯(14)。
在無水條件下，在溶劑如二甲基甲酰胺中，在叔丁醇鉀的存在下，要保護的胺(14)與3-溴丙基鄰苯二甲酰亞胺反應(yīng)，發(fā)生烷基化，生成相應(yīng)的3，3-二囟代-13-鄰苯二甲酰亞胺基-5，10-二-對-甲苯磺酰基-5，10-二氮雜-1-十三烯(15)。在醋酸水溶液中用高錳酸鉀氧化(15)的雙鍵，生成相應(yīng)的2，2-二囟代-12-鄰苯二甲酰亞胺基-4，9-二-對-甲苯磺?；?4，9-二氮雜-十二(烷)酸(16)。用甲硼烷-二甲硫復(fù)合物還原(16)，生成相應(yīng)的2，2-二囟代-12-鄰苯二甲酰亞胺基-4，9-二-對-甲苯磺酰基-4，9-二氮雜-十二烷醇(17)。
在吡啶存在下利用無水溶劑如二氯甲烷，(17)與甲烷磺酰氯反應(yīng)，生成相應(yīng)的2，2-二囟代-1-甲烷磺酰氧基-12-聯(lián)苯二甲酰亞胺基-4，9-二-對-甲苯磺?；?4，9-二氮雜-十二烷(18)。
在無水的二甲基甲酰胺中，鄰苯二甲酰亞胺鉀與(18)進一步反應(yīng)，生成相應(yīng)的2，2-二囟代-1，12-二鄰苯二甲酰亞胺基-4，9-二-對-甲苯磺?；?4，9-二氮雜-十二烷(19)，(19)的去保護基團分兩步，第一步是在溶劑如乙醇中與肼共熱，以除掉鄰苯二甲酰基團，然后將所得到的產(chǎn)物與含水的HBr共熱，以除掉對-甲苯磺酰保護基部分。由此生成的所需的產(chǎn)物是相應(yīng)的2，2-二囟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷(1)，以它們相應(yīng)的四氫囟酸鹽形式，特別是以四氫溴酸鹽的形式分離出。
本發(fā)明的2，2，11，11-四囟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷衍生物按如下反應(yīng)序列很容易制備。在此序列中，X1，Y1，Pht，Mes和Tos的含義與前述相同，只是X1的兩個數(shù)值與Y1的兩個數(shù)值必須要相同。
按照前述的反應(yīng)序列制備兩等當(dāng)量的化合物，N-(2，2-二囟代-3-丁烯基)-對-甲苯磺酰胺(11)，在無水條件以及叔丁醇鉀的存在下，使用如二甲基甲酰胺這樣的溶劑，用一等當(dāng)量的1，4-二溴丁烷對稱地進行二烷基化，生成相應(yīng)的3，3，12，12-四囟代-5，10-二-對-甲苯磺酰基-5，10-二氮雜-1，13-十四碳二烯(19)。
在醋酸水溶液中用KMnO4氧化(19)的雙鍵，生成相應(yīng)的2，2，11，11-四囟代-4，9-二-對-甲苯磺?；?4，9-二氮雜-1，12-十二碳二羧酸(20)。甲硼烷-二甲硫復(fù)合物還原(20)，生成相應(yīng)的2，2，11，11-四囟代-4，9-二-對-甲苯磺?；?4，9-二氮雜-1，12-十二碳二醇(21)。
在吡啶存在下，應(yīng)用無水溶劑如二氯甲烷，(21)與甲烷磺酰氯反應(yīng)，得到相應(yīng)的1，12-雙-甲烷磺酰氧基-2，2，11，11-四囟代-4，9-二-對-甲苯磺酰氧基-4，9-二氮雜-十二烷(22)。在無水二甲基甲酰胺中(22)進一步與鄰苯二甲酰亞胺鉀反應(yīng)，得到相應(yīng)的1，12-二鄰苯二甲酰亞胺基-2，2，11，11-四囟代-4，9-二-對-甲苯磺?；?4，9-二氮雜-十二烷(23)。
化合物(23)的去保護基團可分兩步進行，首先是在溶劑如乙醇中與肼共熱，除掉鄰苯二甲?；?，然后將得到的產(chǎn)物與含水的HBr共熱，以除掉對一甲苯磺酰保護基部分。這樣得到的產(chǎn)物是所要的相應(yīng)的2，2，11，11-四囟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷(1)，其作為四氫溴酸鹽容易分離出。
本發(fā)明的化合物用作抗增生劑和抗腫瘤劑。這類化合物的作用機理尚不清楚。不過已經(jīng)知道，本發(fā)明的化合物加到大鼠肝細(xì)胞瘤組織培養(yǎng)細(xì)胞(HTC)的介質(zhì)中時，細(xì)胞的生長會發(fā)生顯著的減退。與已知的鳥氨酸脫羧酶的抑制劑，如2-二氟甲基-2，5-二氨基戊酸(DFMO)或[2R，5R]-6-庚炔-2，5-二胺(R，R-MAP)合用，會進一步抑制細(xì)胞的生長。
還發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物在標(biāo)準(zhǔn)的動物腫瘤模型的試驗中，能夠使腫瘤細(xì)胞的增生減慢。使用這些化合物的最好的方式是與DFMO或[R，R]-MAP合用，或在治療動物腫瘤時與其它的已知能影響多胺代謝的治療方法或藥物合并應(yīng)用。這里所用的動物，這一術(shù)語，是指溫血哺乳動物，如小鼠，大鼠，狗，貓，豚鼠，牛，馬和人。
本發(fā)明的化合物既可用于預(yù)防，也可用作治療。治療用藥的活性成分的用量可有很寬的變化幅度，取決于這些因素如受試動物的種屬，年令，健康狀況，性別，體重和受試動物狀況的嚴(yán)重程度和性質(zhì)。一般活性成分的有效治療給藥量的范圍每天是0.2到5克，最好是0.5到3克。預(yù)防用藥時，相應(yīng)地減少到每天為0.05到2克。
與其它的鳥氨酸脫羧酶抑制劑如DFMO或[R，R]-MAP合并用藥時，偕-二囟代或一四囟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷的用量每天為0.1到4克，鳥氨酸脫羧酶抑制劑的用量為每天0.5到10克。
本發(fā)明的化合物可口服用藥。口服劑量為每公斤體重2到50毫克，最好口服偕一二囟代或一四囟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷的劑量每天為每公斤體重10到20毫克，分?jǐn)?shù)次給藥。不經(jīng)胃腸給藥的情況下，藥量相應(yīng)要降低。與鳥氨酸脫羧酶抑制劑合并用藥時，本發(fā)明的化合物可用標(biāo)準(zhǔn)的劑型，如片劑，膠囊，糖衣丸，錠劑， 劑，乳劑，混懸劑以及各種靜脈、肌肉和皮內(nèi)注射劑。
口服用藥的最好劑型是片劑和膠囊。每個劑型單位中所含的有效成分量當(dāng)然要隨著特定的偕一二囟代或四囟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷的種類而改變，也隨著所用的特定劑型而改變藥量。除賦形劑外，在單位劑型中一般含有10到500毫克的活性成分，最好的劑型是每片含有100到400毫克活性成分的片劑，可以一日兩次，一日三次或一日四次給藥。
在制備固體劑型如片劑時，活性成分通常與常規(guī)的藥用載體或賦形劑混合，如明膠，各種淀粉，乳糖，磷酸鈣或糖粉。這里所說的藥用載體一語也包括潤滑劑，用來改善制片顆粒的流動性，以免物料粘在打片機的沖頭和沖模表面上。適宜的潤滑劑包括例如滑石粉，硬脂酸，硬脂酸鈣，硬脂酸鎂和硬脂酸鋅。這里所用的藥用載體的定義還包括加入的崩解劑，以有助于服用片劑后的崩解和溶解，還包括著色劑和/或矯味劑，以增加片劑的美觀和使病人樂于服用。
為了制備液體劑型所用的液體賦形劑，包括水和醇類，例如乙醇，芐醇和聚乙二醇，或加或不加入表面活性劑。一般優(yōu)選的液體賦形劑，特別用于注射劑時，包括水，生理鹽水，右旋糖和乙二醇溶液，例如水性丙二醇或聚乙二醇的水溶液。
用于滅菌可注射溶液的液體制劑，通常在溶液中含有重量比為0.5%到25%的活性成分，最好是在1%到10%的范圍。某些局部用和非經(jīng)胃腸給藥的制劑，可用各種油類作為載體或賦形劑。油類可以是礦油，甘油酯油，如豬油，魚肝油，花生油，麻油，玉米油和豆油。對于不溶解的化合物，可加入懸浮劑，以及可調(diào)節(jié)粘度的試劑，例如硅酸鋁鎂或羧甲基纖維素。除這些賦形劑外，也可加入緩沖劑，防腐劑和乳化劑。
用于制備非經(jīng)胃腸給藥的液體劑型，活性成分在總液體組分的比例，按重量比為0.05%到20%，最好為0.1%到10%，其余的成分是上述的各種藥用賦形劑的任何一種。為減低或消除對注射部位的刺激，組分中可含有非離子型表面活性劑，其親水性親油性比率(HLB)為12-17。這種劑型中表面活性劑的含量大約占重量的5-15%。表面活性劑可以是有上述HLB的單一成份，或是具有所希望的HLB的兩個或多個成分的混合物。用于非胃腸給藥制劑的表面活性劑是一類聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯，例如山梨糖酐單油酸酯以及環(huán)氧乙烷與憎水基的高分子量加成物，該憎水基是由氧化丙烯與丙二醇縮合而生成的。
連同下面特定制備方法一起具體舉例說明本發(fā)明，但并不只局限于所舉的實例。
6，6-二氟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷的制備2，2-二氟-1，4-丁二醇2，2-二氟丁二酸(120克，0.78摩爾)和三氟乙酸酐(540毫升)回流(浴溫80°)2小時。用短維格羅分餾柱蒸除大部分三氟乙酸，然后將痕量的三氟乙酸真空中除去(12毫米汞柱，50℃)，最后用四氯化碳進行兩次溶脫。油狀殘留物與石油醚刮磨而固化，過濾并用石油醚洗滌，得到2，2-二氟丁二酸酐98克(92%)，為淺紫色結(jié)晶。
2，2-二氟丁二酸酐(98g，0.72摩爾)溶于二氯甲烷，攪拌下緩緩加到甲醇中，冰浴冷卻。混合物保持在室溫下放置過夜，蒸發(fā)并用四氯化碳溶脫兩次，得到淺褐色油狀的2，2-二氟丁二酸甲酯121克(100%)。
在裝有回流冷凝營和1升滴液漏斗的4升燒瓶中放入在干燥的四氫呋喃溶解的2，2-二氟丁二酸甲酯(120克0.714摩爾)溶液，于20℃攪拌下，緩緩將BH3·Me2S復(fù)合物(10摩爾，88ml)于干燥二氯甲烷(1升)的溶液加到上述溶液中，歷時2小時?；亓?浴溫80℃)約15小時后，讓混合物冷卻至室溫，并緩緩將甲醇(1升)加入。蒸發(fā)，得到2，2-二氟-4-羥基丁酸甲酯，該油狀物先用1升甲醇溶脫，最后用CCl4溶脫，得到黃色油狀物100克(92%)。
將2，2-二氟-4-羥基丁酸甲酯(55克，0.36摩爾)的乙醇溶液，慢慢加到氫化硼鈉(10.3g，0.272摩爾)的乙醇冷溶液中，反應(yīng)混合物的內(nèi)部溫度保持在-5℃到0℃?；旌衔镌?℃攪拌1小時，然后把大約4N的氯化氫氣體溶液小心加入甲醇溶液中(200ml)，過濾氯化鈉，真空中除去甲醇，殘留物溶于乙醇中。再過濾除去析出的NaCl，蒸發(fā)濾液，得無色油狀物2，2-二氟代-1，4-丁二醇，于150℃/0.05毫米汞柱進行泡管蒸餾，得41克(90%)。
2，2-二氟代-1，4-二氨基丁烷將甲烷磺酰氯(23.6克)于二氯甲烷(50毫升)的溶液，緩緩加到攪拌下的2，2-二氟代-1，4-丁二醇(12.97克，103毫摩爾)，干燥吡啶(65毫升)和二氯甲烷(200毫升)的混合物中，繼續(xù)攪拌過夜，混合物用2N HCl洗滌兩次，10%NaHCO3洗到中性，最后用水洗。有機層MgSO4干燥，蒸發(fā)溶劑得1，4-雙-甲烷磺酰氧基-2，2-二氟丁烷，為淡黃色油狀物(25.4克，87.5%)，與干燥乙醚刮磨，則成白色結(jié)晶22.3克(77%)。
化合物1，4-雙-甲烷磺酰氧基-2，2-二氟丁烷(66克，234毫摩爾)，鄰苯二甲酰胺鉀(97克，過量10%)，和干燥DMF(700毫升)在攪拌和氮氣流下加熱(浴溫110℃)約110小時。真空下(油泵)除掉大部分DMF，殘留物中加入水。過濾沉淀物，用水洗滌三次，溶于氯仿中，用1N NaOH洗兩次，食鹽水洗兩次。有機層經(jīng)MgSO4干燥后濃縮，2，2-二氟代-1，4-二鄰苯二甲酰亞胺基-丁烷開始結(jié)晶，加入己烷，收集生成的固體物質(zhì)，用乙醚洗滌，得白色結(jié)晶，69.55克(77%)。
在氮氣流和有效的攪拌下，將2，2-二氟代-1，4-二鄰苯二甲酰亞胺基丁烷(69.55克，180.6毫摩爾)，四氫呋喃(361毫升)和361毫升1N的水合肼乙醇溶液在浴溫90℃加熱過夜。加入6N HCl(700毫升)后，繼續(xù)加熱攪拌1.5小時。冷卻反應(yīng)混合物(水浴)，過濾沉淀物，(乙醇洗滌)，將濾液蒸發(fā)，殘留物用水處理，過濾，再蒸發(fā)，用膜過濾器(微孔過濾器)再重復(fù)這一過程。殘留物用異丙醇溶脫兩次，乙醇溶脫兩次，以除去最后痕量的水。用乙醇浸提后，將得到的產(chǎn)物過濾，白色結(jié)晶順序用乙醇、丙酮和乙醚洗滌，得30.9克(87%)。該物質(zhì)經(jīng)溶于盡可能少的熱水中重結(jié)晶(約50毫升)，過濾并加入乙醇，得純凈的2，2-二氟代-1，4-二氨基丁烷鹽酸鹽22克(67.8%)，C4H12Cl2F2N2計算值C，24.38;H，6.14;N，14.22實驗值C，24.33;H，5.19;N，14.246，6-二氟代-1，12-二鄰苯二甲酰亞胺基-4，9-二-對-甲苯磺?；?4，9-二氮雜-十二烷將對-甲苯磺酰氯(3.04克，2等當(dāng)量)的二氯甲烷溶液攪拌下緩緩加入2，2-二氟代-1，4-二氨基丁烷二鹽酸鹽(1.57克，8毫摩爾)，三乙胺(3.23克，4等當(dāng)量)和干燥的二氯甲烷的混合物中，室溫下攪拌過夜，再加入些二氯甲烷。反應(yīng)混合物用1N HCl洗滌兩次，食鹽溶液洗兩次，Na2SO4干燥，蒸發(fā)溶劑，得白色結(jié)晶3克。得到的物質(zhì)用乙醚浸提，并用乙醚徹底洗滌，得純2，2-二氟代-1，4-二-對-甲苯磺酰胺基-丁烷2.45克(71%)。
在氮氣流下，將叔丁醇鉀(1.3g，2等當(dāng)量)加到攪拌著的2，2-二氟代-1，4-二-對-甲苯磺酰胺基-丁烷(2.45克，5.67毫摩爾)于干燥二甲基甲酰胺(5ml)的溶液中。于室溫30分鐘后，再加入5毫升二甲基甲酰胺，N-3-溴丙基鄰苯二甲酰亞胺(3.04克，2等當(dāng)量)和碘甲烷(170毫克)，混合物攪拌過夜，真空中(油泵)蒸除二甲基甲酰胺，殘留物加入250毫升水，濾出沉淀物，用水洗滌，P2O5干燥，得4.57克。粗產(chǎn)物在氯仿/乙醚中重結(jié)晶，得純凈的6，6-二氟代-1，12-二鄰苯二甲酰亞胺基-4，9-二-對-甲苯磺?；?4，9-二氮雜-十二烷，為白色結(jié)晶，3.45克(75%)，6，6-二氟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷6，6-二氟代-1，12-二鄰苯二甲酰亞胺基-4，9-二-對-甲苯磺?；?4，9-二氮雜-十二烷(3.4g，4.22毫摩爾)。8.5毫升乙醇和8.5毫升的1N水合肼的乙醇溶液，混合后攪拌加熱(浴溫90℃)過夜。蒸去溶劑，甲醇溶脫兩次，殘留物溶于20毫升水和20毫升甲醇和40毫升濃HCl的混合液中。加熱(浴溫90℃)回流3小時。反應(yīng)混合物冷卻后，過濾并蒸發(fā)，殘留物溶于熱1N HCl中。過濾該溶液，濾液蒸發(fā)后，殘留物用異丙醇和乙醇各溶脫兩次。殘留物溶于乙醇，加入乙醚，蒸掉溶劑后，得到1，12-二氨基-6，6-二氟代-4，9-二-對-甲苯磺?；?4，9-二氮雜-十二烷，為白色結(jié)晶性泡沫體，2.7克(定量的收率)。
化合物1，12-二氨基-6，6-二氟代-4，9-二-對-甲苯磺酰基-4，9-二氮雜-十二烷(2.7克，4，36毫摩爾)與47%含水的HBr回流(浴溫110℃)17小時。冷卻至室溫后，該溶液謹(jǐn)慎地用乙醚提取3次，最后用氯仿提取。水相蒸發(fā)后，殘留物用異丙醇和乙醇各洗滌兩次，得到的固體殘留物用丙酮浸提，得到的固體用丙酮洗滌三次，乙醇洗滌三次，最后用乙醚洗滌，得白色結(jié)晶1.8克(74%)。該物質(zhì)溶于熱的(80℃)乙醇水溶液(100ml，H2O∶乙醇1∶9)重結(jié)晶，濾紙過濾，再加入10-20毫升乙醇，得到所需要的6，6-二氟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷的四氫溴酸鹽，白色結(jié)晶1.2g(49%)。
C10H28Br4F2N2計算值C，21.37;H，5.02;N，9.97實驗值C，20.97;H，4.75;N，10.07
2，2，11，11-四氟代-4，12-二氨基-4，9-二氮雜-辛烷的制備1-鄰苯二甲酰亞胺基-2，2-二氟代-3-丁烯甲烷磺酰氯(23.6克)于二氯甲烷(50毫升)的溶液，緩緩加到攪拌下的2，2-二氟代-1，4-丁二醇(12.97克，103毫摩爾)、干燥吡啶(65毫升)和二氯甲烷(200毫升的混合液中。繼續(xù)攪拌兩次，繼之用10%NaHCO3水溶液至中性，然后用水洗滌。有機相用MgSO4干燥，蒸除溶劑后，得到淺黃色油狀物。油狀物與干燥乙醚刮磨，得到1，4-雙-甲烷磺酰氧基-2，2-二氟丁烷22.3克(77%)，為白色結(jié)晶。
1，4-雙-甲烷磺酰氧基-2，2-二氟代丁烷(20克，71毫摩爾)和二氮雜雙環(huán)十一烯(21.6克，142毫摩爾)與干燥的四氫呋喃(150毫升)在氮氣流下攪拌加熱(80℃)過夜。真空中除去溶劑，殘留的油狀物溶于二氯甲烷中，用1N HCl洗滌兩次，食鹽溶液洗滌兩次，Na2SO4干燥。蒸發(fā)溶劑后，得到1-甲烷磺?；?2，2-二氟代-3-丁烯11.2克(85%)，為油狀物。
1-甲烷磺?；?2，2-二氟代-3-丁烯(11.2克，60.2毫摩爾)，鄰苯二甲酰亞胺鉀(12.3克，66.4毫摩爾)和干燥的二甲基甲酰胺(30毫升)在氮氣流中攪拌加熱(浴溫110℃)120小時。冷卻到室溫后，反應(yīng)的粗產(chǎn)物在加入大約300毫升水后而沉淀出，過濾并溶解于二氯甲烷中。該二氯甲烷溶液用1N氫氧化鉀洗滌兩次，水洗兩次，Na2SO4干燥，蒸發(fā)溶劑得到1-鄰苯二甲酰亞胺基-2，2-二氟代-3-丁烯11.9克(83%)，為米色結(jié)晶。
1-對-甲苯磺酰胺基-2，2-二氟代-3-丁烯1-鄰苯二甲酰亞胺基-2，2-二氟代-3-丁烯(11.4克，48.1毫摩爾)與1等當(dāng)量的1N水合肼的乙醇溶液加熱20小時。冰浴中冷卻后，過濾除去鄰苯二甲酸，蒸發(fā)濾液，殘留物溶于水中，用乙醚提取兩次，蒸發(fā)至干，殘留物用異丙醇反提。與乙醚研磨，得到1-氨基-2，2-二氟代-3-丁烯鹽酸鹽6.12克(88%)，為溶解性結(jié)晶。
將對一甲苯磺酰氯(8.1克，1等當(dāng)量)于50毫升的二氯甲烷溶液緩緩加入用冰浴冷卻的攪拌下的1-氨基-2，2-二氟代-3-丁烯鹽酸鹽(6.1克，42.5毫摩爾)，50毫升的干燥二氯甲烷和三乙胺(8.74克，2等當(dāng)量)的混合物中。室溫下繼續(xù)攪拌過夜，反應(yīng)混合物中再加入二氯甲烷，該有機層用1N HCl洗滌兩次，水洗兩次，用Na2SO4干燥。蒸發(fā)溶劑后，得到褐色半固態(tài)物質(zhì)(9.66克)，經(jīng)急聚硅膠層析(300克，洗脫劑∶乙酸乙酯/石油醚20-80;餾分大小100ml)。餾分17-25混合并蒸發(fā)，得到1-對-甲苯磺酰胺基-2，2-二氟代-3-丁烯4.8克(43%)，為白色結(jié)晶。所需要的化合物可在乙醚/石油醚中重結(jié)晶，得到非常細(xì)的棉狀針晶。
C11H13F2NO2S計算值C，50.56;H，5.02;N，5.36實驗值C，50.93;H，5.02;N，5.45基本上按照如制備2，2-二氟代-4，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷相同的方法，上面制備的兩等當(dāng)量的1-對-甲苯磺酰胺基-2，2-二氟代-3-丁烯用1等當(dāng)量的1，4-二溴丁烷進行烷基化。在含水的乙酸溶液中用KMnO4將雙鍵氧化成相應(yīng)的二羧酸。得到的二羧酸可用甲硼烷-二甲硫復(fù)合物還原成相應(yīng)的伯二醇，該二醇用甲烷磺酰氯進行甲烷磺?；?甲烷磺酰衍生物再與鄰苯二甲酰亞胺鉀反應(yīng)，得到相應(yīng)的1，12-二鄰苯二甲酰亞胺基衍生物;除掉保護基團鄰苯二甲?；蛯?甲苯磺?；?，得到所需要的2，2，11，11-四氟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷。
6，6-二氟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷的抗增生作用的實驗說明莫利斯大鼠肝癌7288C(HTC)細(xì)胞是在懸浮培養(yǎng)基中按常規(guī)方法生長，在斯威姆77培養(yǎng)基中補加10%(v/v)滲析的馬血清，11.0毫摩爾葡萄糖，2毫摩爾谷氨酰胺，0.057毫摩爾胱氨酸，5.9毫摩爾NaHCO3和50毫摩爾N-三-(羥甲基)甲基甘氨酸。該HTC細(xì)胞培養(yǎng)液在微摩爾(μm)或10微摩爾(μm)6，6-二氟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷的存在或不存在的情況下溫孵，觀察約11天。
在第二天改換細(xì)胞培養(yǎng)基，以維持細(xì)胞的對數(shù)生長期。用細(xì)胞計數(shù)器測定細(xì)胞的實際數(shù)目，按照所用的各種稀釋因子來計算細(xì)胞的相對生長速度。細(xì)胞生長的百分抑制率按如下方程計算100-100[ (Ntn-NtO)/(Ncn-NcO) ]式中Nc O為時間＝0時對照培養(yǎng)液中細(xì)胞的相對生長;
Ncn為時間＝n時對照培養(yǎng)液中細(xì)胞的相對生長;
Nt O為時間＝0時受試培養(yǎng)液中細(xì)胞的相對生長;
表Ⅰ列出了在向培養(yǎng)基中加入1微摩爾的6，6-二氟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷后，于第四天末細(xì)胞的生長受到54%的抑制;而加入該化合物10微摩爾時于第4天末細(xì)胞的生長受到77%的抑制作用。

本發(fā)明的另一內(nèi)容是使用此處公布的氟化物作為核磁共振(NMR)的顯影劑，借助體內(nèi)的F19NMR譜和F19NMR斷層顯影，用來探測和診斷腫瘤組織。雖然本發(fā)明的所有含氟化合物都可用作NMR試劑，可對哺乳動物體內(nèi)存在的需診斷和或治療的任何腫瘤的嚴(yán)格的位置進行精確的確定和探測，但用于抗增生和抗腫瘤的最有活性的化合物，作為NMR腫瘤顯影劑最好。另一組最好用來探測和定位哺乳動物的腫瘤的NMR顯影劑，是用于制備式Ⅰ的含氟化合物的二氟中間體，特別是2，2-二氟代-1，4-丁二胺?；衔锏倪@種應(yīng)用，用量是0.2到5克。
權(quán)利要求
1.具有如下化學(xué)式的偕-二囟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷衍生物及其藥用鹽的制備方法 式中X和Y代表氫和囟素，但在二囟代衍生物時，兩個囟素須在一個而且只在一個碳原子上，在四囟代衍生物的情況下，須是2，2，11，11-四囟取代物，該制備過程方法(1)于6，6-二囟代衍生物的情況下(a)甲烷磺酰氯與具有如下化學(xué)式的2，2-二囟代-1，4-丁二醇反應(yīng) 式中X′和Y′為氯和氟，從而生成相應(yīng)的1，4-雙-甲烷磺酰氧基-2，2-二囟丁烷；(b)該1，4-雙-甲烷磺酰氧基-2，2-二囟丁烷與鄰苯二甲酰亞胺鉀反應(yīng)，得到相應(yīng)的2，2-二囟代-1，4-二鄰苯二甲酰亞胺基-丁烷，(c)該1，4-二鄰苯二甲酰亞胺基-丁烷衍生物與肼共熱，生成相應(yīng)的2，2-二囟代-1，4-二氨基、丁烷；(d)用對-甲苯磺酰氯保護游離氨，生成相應(yīng)的2，2-二囟代-4，9-二-對-甲苯磺酰胺基-丁烷；(e)該4，9-二-對-甲苯磺酰胺基丁烷與兩等當(dāng)量3-溴丙基鄰苯二甲酰亞胺進行烷基化，生成相應(yīng)的6，6-二囟代-1，12-二鄰苯二甲酰亞胺基-4，9-二-對-甲苯磺?；?4，9-二氮雜-十二烷；(f)該4，9-二氮雜-十二烷與肼共熱，以除去保護基團鄰苯二甲酰基，繼之與含水的HBr共熱，以除去保護基團對-甲苯磺酰基，分離出所需的6，6-二囟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷；(2)在2，2-二囟代衍生物的情況下(a)由上述步驟(1)(a)得到的1，4-雙-甲烷磺酰氧基-2，2-二囟代丁烷與二氮雜雙環(huán)十一烯共熱，生成相應(yīng)的1-甲烷磺酰氧基-2，2-二囟代-3-丁烯；(b)該1-甲烷磺酰氧基衍生物與鄰苯二甲酰亞胺鉀反應(yīng)，再用肼解離掉生成的鄰苯二甲?；?，生成相應(yīng)的1-氨基-2，2-二囟代-3-丁烯；(c)用對-甲苯磺酰氯保護該1-氨基-2，2-二囪代-3-丁烯，生成相應(yīng)的N-(2，2-二囟代-3-丁烯基)-對-甲苯磺酰胺，(d)經(jīng)保護的衍生物用4-溴丁基鄰苯二甲酰亞胺進行烷基化，得到相應(yīng)的N-(4-鄰苯二甲酰亞胺基-丁基)-N-(2，2-二囟代-3-丁烯基)-對-甲苯磺酰胺；(e)該對-甲苯磺酰胺衍生物與肼共熱，生成相應(yīng)的9-氨基-3，3-二囟代-5-對-甲苯磺?；?5-氮雜-1-壬烯；(f)該9-氨基-5-氮雜-1-壬烯衍生物用對-甲苯磺酰氯保護，再將該經(jīng)保護的衍生物用-3-溴丙基鄰苯二甲酰亞胺進行烷基化，生成相應(yīng)的3，3-二囟代-13-鄰苯二甲酰亞胺基-5，10-二-對-甲苯磺酰基-5，10-二氮雜-1-，十三烯；(g)該1-十三烯的末端雙鍵進行氧化，繼之用甲硼烷-二甲硫復(fù)合物還原，生成相應(yīng)的2，2-二囟代-12-鄰苯二甲酰亞胺基-4，9-二-對-甲苯磺?；?4，9-二氮雜-十二碳醇；(h)該十二碳醇與甲烷磺酰氯反應(yīng)，生成相應(yīng)的2，2-二囟代-1-甲烷磺酰氧基-12-鄰苯二甲酰亞胺基-4，9-二-對-甲苯磺?；?4，9-二氮雜-十二烷，后者與鄰苯二甲酰亞胺鉀反應(yīng)，得到相應(yīng)的2，2-二囟代-1，12-二鄰苯二甲酰亞胺基-4，9-二-對-甲苯磺?；?4，9-二氮雜-十二烷；(i)該1，12-二鄰苯二甲酰亞胺基-十二烷在乙醇中與肼共熱，除掉鄰苯二甲酰保護基團，在與含水的HBr共熱，除掉對-甲苯磺酰保護基團；由此分離出所希望的2，2-二囟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷；(3)在2，2，11，11-四囟代衍生物的情況下(a)上述步驟(2)(c)得到兩等當(dāng)量的N-(2，2-二囟代-3-丁烯基-對-甲苯酰胺，用1等當(dāng)量的1，4-二溴丁烷烷基化，生成相應(yīng)的3，3，12，12-四囟代-5，10-二-對-甲苯磺?；?5，10-二氮雜-1，13-十四碳二烯；(b)該1，13-十四碳二烯的末端雙鍵用KMnO4氧化，繼之用甲硼烷-二甲硫復(fù)合物還原，生成相應(yīng)的2，2，11，11-四囟代-4，9-二-對-甲苯磺酰基-4，9-二氮雜-1-12-十二碳二醇；(c)該1，12-十二碳二醇與甲烷磺酰氯反應(yīng)，生成相應(yīng)的1，12-雙-甲烷磺酰氧基-2，2，11，11-四囟代-4，9-二-對-甲苯磺酰氧基-4，9-二氮雜-十二烷，該，1，12-雙-甲烷磺酰氧基-4，9-二氮雜-十二烷與鄰苯二甲酰亞胺鉀反應(yīng)，得到相應(yīng)的1，12-二鄰苯二甲酰胺基-2，2，11，11-四囟代-4，9-二-對-甲苯磺?；?4，9-二氮雜-十二烷；(d)該1，12-二鄰苯二甲酰胺基-4，9-二氮雜-十二烷在乙醇中與肼共熱，以除掉鄰苯二甲酰保護基團，繼之與含水的HBr共熱，以除掉對-甲苯磺酰保護基團；由此分離出所需的2，2，11-11-四囟代-4，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷；
2.按照權(quán)利要求
1的方法，該方法制備的偕-二囟代衍生物是6，6-二囟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷或其藥用鹽;
3.按照權(quán)利要求
1的方法，該方法制備的偕-二囟代衍生物是2，2-二囟代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷或其藥用鹽;
4.按照權(quán)利要求
1的過程，該方法制備的偕-四囟代衍生物是2，2，11，11-四囟代-4，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷或其藥用鹽;
5.制備抗增生和抗腫瘤組分的方法，該方法包括將有效治療量的權(quán)利要求
1的化合物與藥用載體或稀釋劑相混合。
6.按照權(quán)利要求
5制備抗增生和抗腫瘤組分的方法，該方法還包括另外與有效治療量的2-二氟甲基-2，5-二氨基戊酸或[2R，5R]-6-己炔-2，5-二胺相混合。
專利摘要
偕-二鹵代和偕-四鹵代-1，12-二氨基-4，9-二氮雜-十二烷衍生物用作抗增生或抗腫瘤劑。
文檔編號C07C211/14GK86105088SQ86105088
公開日1987年4月29日 申請日期1986年8月20日
發(fā)明者格哈特·弗里茨, 馬蒙特·彼里 申請人:默里爾多藥物公司導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan