專(zhuān)利名稱(chēng)：羅氏海盤(pán)車(chē)明膠代血漿的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是關(guān)于羅氏海盤(pán)車(chē)明膠代血漿的制備方法，是屬于醫(yī)學(xué)血液學(xué)領(lǐng)域里的血漿代用品的制備方法。血漿代用品(簡(jiǎn)稱(chēng)代血漿)是一種治療創(chuàng)傷及其它疾病的重要血容擴(kuò)充劑。
當(dāng)前在醫(yī)學(xué)臨床中，普遍應(yīng)用的代血漿是右旋糖酐、羥乙基淀粉和明膠衍生物。前兩種代血漿，它們的制備工藝復(fù)雜，工藝條件控制較難，并且其制成品價(jià)格較高。其中右旋糖酐在臨床應(yīng)用中有誘發(fā)類(lèi)過(guò)敏或過(guò)敏反應(yīng)。這些過(guò)敏反應(yīng)包括輕度的皮膚反應(yīng)到嚴(yán)重的呼吸和循環(huán)衰竭，甚者有導(dǎo)致死亡的可能;羥乙基淀粉在血液循環(huán)中易被血液淀粉酶所水解，其存留時(shí)間較短。然而明膠代血漿在臨床應(yīng)用中過(guò)敏反應(yīng)癥狀卻比血漿蛋白或右旋糖酐都輕微。在血源緊張的情況下，應(yīng)用上述前兩種代血漿往往由于產(chǎn)量少、價(jià)格高而“供不應(yīng)求”。因此開(kāi)發(fā)明膠衍生物。這種明膠代血漿質(zhì)高價(jià)廉是很有必要的。
本發(fā)明的目的是開(kāi)發(fā)海洋藥物資源，以利于滿(mǎn)足軍民，在平戰(zhàn)時(shí)期所用代血漿的需求，設(shè)計(jì)出一種藥物資源豐富，制備工藝簡(jiǎn)單的明膠代血漿制備方案。使用該工藝方法，可以生產(chǎn)出具有無(wú)特異抗原性、分子量適中，可參加人體內(nèi)代謝，可大量多次輸入，無(wú)毒性反應(yīng)的明膠代血漿。
本發(fā)明的任務(wù)是由下述工藝方案而完成的選用新鮮的海洋棘皮動(dòng)物-海星(最好是羅氏海盤(pán)車(chē)AsteriasrollestoniBell)洗滌潔凈后，首先酸浸即加入3～21%(重量、體積比)的鹽酸溶液，以浸沒(méi)海星軀體為宜，并經(jīng)常翻拌海星，使其酸浸均勻。浸酸的目的是除去海星體中的鈣鹽等礦物質(zhì)，使其軀體骨質(zhì)柔軟而有彈性，利于提取膠朊。該工藝步驟的工藝條件是控制酸浸液的溫度在13℃以下，在16～20天時(shí)間內(nèi)每隔8小時(shí)檢查并保持酸浸液的濃度不低于3%(重量、體積比)。在上述溫度、濃度的工藝條件下酸浸步驟可順利進(jìn)行。待浸酸完畢后，剖開(kāi)海星，除盡其內(nèi)臟。再用自來(lái)水反復(fù)沖洗至PH值近中性。
其次堿浸將上述經(jīng)酸浸的海星(最好是羅氏海盤(pán)車(chē))的體壁，投入0.03～5%(重量、體積比)的石灰水中，經(jīng)常翻拌。堿浸的目的是利用石灰乳中的OH-離子，打破蛋白質(zhì)的二、三級(jí)結(jié)構(gòu)，以達(dá)到溶解膠朊以外的粘性蛋白質(zhì)、強(qiáng)性蛋白質(zhì)，使肽鏈膠朊溶出，同時(shí)還可使海星體壁的殘余脂肪發(fā)生皂化反應(yīng)而被除去。該工藝步驟的主要工藝條件是控制堿浸液的溫度在15℃以下，在20～30天內(nèi)視堿浸液顏色變深時(shí)，更換石灰水。20～30天之后，取出海星體壁，用自來(lái)水漂洗至中性;再將漂洗至中性的海星體壁投入5-15%(重量、體積比)氫氧化鈉溶液中去，適當(dāng)攪拌2-15分鐘，以不破碎體壁為度。二次堿浸其目的是進(jìn)一步分解除去雜蛋白。二次堿浸后，立即排除堿浸液，再用自來(lái)水漂洗至PH值7·5-7·0微弱堿性;再加入蒸餾水漂洗兩次，供熬膠用。
再次熬膠將上述經(jīng)酸、堿處理的海星(最好是羅氏海盤(pán)車(chē))的體壁，投入注射用水中去煮沸，除盡上層泡沫后，再進(jìn)行熱壓降解處理，其工作表壓為0.5～2.5kg/cm2，保壓處理0.2～3小時(shí)。熱壓處理后，排盡壓力觀察膠液溶出情況，測(cè)定并調(diào)整降解后膠液的相對(duì)粘度在1.5～2.0之間，再將相對(duì)粘度在1.5～2.0的膠液投入1-2%(重量、體積比)的活性炭，常壓煮沸脫色，之后用紙漿過(guò)濾，取濾液;再投入2%(重量、體積比)的活性炭，常壓煮沸再脫色，經(jīng)石棉板減壓抽濾，取濾液放冷待用。
最后配液將放冷的上述膠液分別經(jīng)強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和強(qiáng)堿性陰離子交換樹(shù)脂處理，用以除去無(wú)機(jī)鹽類(lèi);所得淋液再調(diào)整其PH值在4～7;加入注射用氯化鈉使膠液氯化鈉含量為0.9%，經(jīng)微孔濾膜精濾，并裝瓶密封后，在0.7kg/cm2工作表壓下，滅菌30分鐘，即得。
本發(fā)明所設(shè)計(jì)的羅氏海盤(pán)車(chē)明膠代血漿的制備方法，工藝設(shè)計(jì)合理，制備工藝簡(jiǎn)便，生產(chǎn)成本較低。應(yīng)用羅氏海盤(pán)車(chē)制備的明膠代血漿，其原料資源豐富，我國(guó)渤、黃海沿岸海域均有大量羅氏海盤(pán)車(chē)生長(zhǎng)分布。在經(jīng)應(yīng)用羅氏海盤(pán)車(chē)明膠代血漿的臨床320例實(shí)驗(yàn)證明該藥品臨床療效確切，用藥安全，并能參與創(chuàng)傷機(jī)體的蛋白質(zhì)的合成代謝，有利于創(chuàng)傷修復(fù)，尤其是在國(guó)外愛(ài)滋病流行，使用人血或血漿制品難于保證其安全性，這就求助于該代血漿來(lái)治療創(chuàng)傷、燒傷等失血性休克。該代血漿具有擴(kuò)充血容量作用，抗休克有效率為93.9%，由于該代血漿體內(nèi)半存留期較長(zhǎng)，在應(yīng)用于創(chuàng)傷擴(kuò)容輸液中，未見(jiàn)傷口滲血現(xiàn)象，而且還有提升血小板的作用。在應(yīng)用于流行性出血熱所致低血壓休克的治療中有明顯升壓作用。該代血漿可與20余種靜脈用藥物配伍，而無(wú)理化配伍禁忌。經(jīng)實(shí)驗(yàn)測(cè)試，應(yīng)用該代血漿對(duì)人體、心臟、腎臟、血液均無(wú)明顯影響，未發(fā)現(xiàn)副作用和毒性反應(yīng)。
本發(fā)明的實(shí)施例如下實(shí)施例1藥品批號(hào)801122取新鮮海盤(pán)車(chē)若干，投入到10%鹽酸溶液中去，溶液面高于海盤(pán)車(chē)面5cm。每日翻拌1-3次，保持酸浸液的溫度在10℃±2℃。在第二、三、七、十、十四天分別補(bǔ)充酸液，使得酸浸液濃度維持在含酸量在5%以上。第十八天海盤(pán)車(chē)骨質(zhì)全部軟化后，取出海盤(pán)車(chē)除盡內(nèi)臟，用自來(lái)水沖洗至近中性。
取上述經(jīng)酸浸的海盤(pán)車(chē)之體壁投入到0.2%石灰水中，不時(shí)翻拌，控制堿浸液溫度在10℃±1℃。在第十天時(shí)，更換石灰水一次。共浸石灰水21天。取出海盤(pán)車(chē)體壁，用自來(lái)水洗漂至近中性。分批投入8%氫氧化鈉溶液中，適當(dāng)攪拌5分鐘，取出體壁用自來(lái)水漂洗至近中性(PH值為7.5～7.0)，再加注射用水漂洗兩次。迅速投入注射用水中煮沸后，除盡上表層泡沫。再將膠液置于密閉受壓容器內(nèi)，熱壓降解處理一小時(shí)，其工作表壓為1kg/cm2。熱壓處理后，測(cè)定膠液含膠量為8%(重量/體積)，加注射用水稀釋至4%的含膠量，此時(shí)膠液相對(duì)粘度為1.8。所得全部膠液再加入2%(重量/體積)的活性炭，煮沸5分鐘，立即通過(guò)紙漿制過(guò)濾介質(zhì)減壓過(guò)濾;取濾液，再加濾液體積的2%(重量/體積)活性炭煮沸3分鐘，經(jīng)石棉板減壓過(guò)濾。放冷濾液，再通過(guò)強(qiáng)酸性732陽(yáng)離子交換樹(shù)脂處理，和強(qiáng)堿性717陰離子交換樹(shù)脂處理。得淋液后，測(cè)定其含膠量，并用注射用水，稀釋至含膠量為4%(重量/體積)，再加入注射用氯化鈉溶解入膠液中，使膠液含氯化鈉量為0.9%(重量/體積)，調(diào)整膠液PH值為5.0;經(jīng)微孔濾膜精濾，裝入500ml鹽水瓶，共制得750瓶，封口后，在0.7kg/cm2熱壓下滅菌30分鐘即得到橙黃色透明液體。這就是羅氏海盤(pán)車(chē)明膠代血漿，其平均分子量為2.2萬(wàn)，PH值為5.2，明膠含量為4.2%，相對(duì)粘度1.7，不含皂甙，熱源及無(wú)菌檢查合格，重金屬含量＜1.5ppm，豚鼠全身過(guò)敏試驗(yàn)陰性，臨床應(yīng)用無(wú)不良反應(yīng)。
實(shí)施例2藥品批號(hào)841207
取新鮮海盤(pán)車(chē)若干，投入15%鹽酸溶液中去。每日翻拌一次，保持并控制酸浸液溫度為5℃±2℃，在第二、五、九、十七天分別補(bǔ)充新鮮酸液，使酸液濃度維持在3%以上。第二十天后，海盤(pán)車(chē)骨質(zhì)全部軟化。取出海盤(pán)車(chē)除盡內(nèi)臟，用自來(lái)水沖洗近中性;再將海盤(pán)車(chē)體壁投入1%石灰水中，不時(shí)翻拌。保持并控制堿浸液溫度為4℃±1℃，在第九天更換石灰水并保持堿浸液濃度為1%(含CaO)。在第二十八天后取出海盤(pán)車(chē)體壁，用自來(lái)水沖洗至近中性。再分批投入5%的氫氧化鈉溶液中，不斷攪拌8分鐘后，以不破碎體壁為度，取出該體壁，用自來(lái)水漂洗至近PH值7.5-7.0;再用注射用水漂洗3次，迅速投入注射用水中煮沸5分鐘，除盡上層泡沫，再將該膠液置于密閉容器，熱壓降解一小時(shí)，工作表壓1.2kg/cm2，取樣測(cè)定該膠液含膠量為6%，加注射用水稀釋至4%后，測(cè)定其相對(duì)粘度為2.5，故過(guò)高，再經(jīng)1kg/cm2熱壓處理30分鐘，取樣測(cè)定膠液相對(duì)粘度為1.9，故熱降解完畢。取全部膠液加入該膠液量的2%(重量/體積)活性炭煮沸5分鐘，通過(guò)紙漿制介質(zhì)過(guò)濾，取濾液再加2%(重量/體積)活性炭煮沸3分鐘后，經(jīng)石棉板介質(zhì)減壓過(guò)濾，取濾液放冷。再將濾液分別通過(guò)強(qiáng)酸性732陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和強(qiáng)堿性717陰離子交換樹(shù)脂處理，將淋洗液測(cè)定其含膠量，并用注射用水稀釋至含膠量為4%，再加入注射用氯化鈉，使其溶解并含氯化鈉量為0.9%，調(diào)整PH值為6.0后，經(jīng)微孔濾膜精濾，灌入500ml鹽水瓶，共制得980瓶，再于0.7kg/cm2熱壓滅菌30分鐘，即得到橙黃色透明的膠液，該膠液微顯乳光，其平均分子量為2.95萬(wàn)，PH值5.7，明膠含量為3.8%，相對(duì)粘度1.85，不含皂甙，熱源、滅菌檢查合格，重金屬含量低于1.5ppm，豚鼠全身過(guò)敏試驗(yàn)陰性，臨床應(yīng)用無(wú)不良反應(yīng)。
權(quán)利要求
1.一種羅氏海盤(pán)車(chē)明膠代血漿的制備方法，其由新鮮海星經(jīng)過(guò)下述步驟而制成的(1)酸浸(1.1)加鹽酸溶液浸沒(méi)潔凈的海星，間歇翻拌；(1.2)控制酸浸液之溫度；(1.3)在16～20天內(nèi)檢查并保持酸浸液之濃度；(1.4)待所投海星體壁全部軟化后，剖除其內(nèi)臟，用自來(lái)水反復(fù)沖洗至近中性；(2)堿浸(2.1)將上述海星體壁投入石灰水中，經(jīng)常翻拌；(2.2)控制堿浸液之溫度，共浸20～30天；(2.3)用自來(lái)水漂洗至近中性；(2.4)投入氫氧化鈉溶液，攪拌適時(shí)，以不破碎海星體壁為度；(2.5)排除堿浸液后，用自來(lái)水漂洗至PH值7.5-7.0微弱堿性，再加蒸餾水漂洗兩次；(3)熬膠(3.1)將上述海星體壁投入注射用水中煮沸，除盡上表層泡沫，進(jìn)行熱降解；(3.2)熱降解結(jié)束后，視膠液溶出情況，調(diào)整膠液濃度，使膠液相對(duì)粘度在1.5～2.0間；(3.3)加1～2%(重量/體積)的活性炭煮沸后，以紙漿過(guò)濾，取濾液；(3.4)濾液再用2%(重量/體積)活性炭煮沸，經(jīng)石棉板減壓抽濾，取濾液放冷待用；(4)配液(4.1)放冷的上述膠液，分別經(jīng)強(qiáng)酸、堿性，陽(yáng)、陰離子交換樹(shù)脂處理；(4.2)樹(shù)脂處理后，調(diào)整PH值4～7；(4.3)加入注射用氯化鈉，使膠液含氯化鈉0.9%，經(jīng)微孔濾膜精濾；(4.4)裝瓶密封，在0.7kg/cm2熱壓滅菌，30分，保存?zhèn)溆茫淮送馄涮卣髟谟?1.1.1)鹽酸溶液濃度為3～20%(重量/體積)；(1.2.1)控制酸浸液之溫度在13℃以下；(1.3.1)每隔8小時(shí)檢查并保持酸浸液之濃度在3%以上(重量/體積)；(2.1.1)投石灰水之濃度在0.03～5%(重量/體積)；(2.2.1)控制堿浸液之溫度為15℃以下；(2.4.1)投入氫氧化鈉溶液之濃度為5～15%(重量/體積)，攪拌2～15分鐘；(3.1.1)熱降解還包括采用熱壓降解處理，其工作表壓為0.5～2.5kg/cm2，處理時(shí)間為0.2～3小時(shí)。
2.按照權(quán)利要求1所述的羅氏海盤(pán)車(chē)明膠代血漿的制備方法，其特征在于所采用的新鮮海星是以羅氏海盤(pán)車(chē)(Asterias rollestoni Bell)為最佳原料。
全文摘要
本發(fā)明是關(guān)于羅氏海盤(pán)車(chē)明膠代血漿的制備方法，是屬于醫(yī)學(xué)血液學(xué)領(lǐng)域里的血漿代用品(簡(jiǎn)稱(chēng)為代血漿)的制備方法。該工藝方法開(kāi)發(fā)了海洋藥物資源，利用物產(chǎn)豐富的羅氏海盤(pán)車(chē)-海洋棘皮動(dòng)物為原料，經(jīng)過(guò)獨(dú)特的工藝處理，使羅氏海盤(pán)車(chē)的體壁熱壓降解成為分子量適中的明膠代血漿。該代血漿臨床療效確切，用藥安全，并能參與刨傷、燒傷機(jī)體的蛋白質(zhì)合成代謝有利于創(chuàng)傷修復(fù)，在國(guó)外愛(ài)滋病流行時(shí)，尤其求助于該代血漿來(lái)治療創(chuàng)傷、燒傷及其它失血性休克癥。
文檔編號(hào)A61K35/56GK1037084SQ8810526
公開(kāi)日1989年11月15日 申請(qǐng)日期1988年4月29日 優(yōu)先權(quán)日1988年4月29日
發(fā)明者方子季, 梁東升, 袁錦華 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍四○一醫(yī)院