專利名稱：：鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物的冷凍干燥制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及鬼臼乙叉甙衍生物的穩(wěn)定冷凍干燥制劑，其用做抗腫瘤劑。4-0-(2-脫氧-2-二甲基氨基-4，6-0-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-脫甲基-4-表鬼臼脂素鹽酸鹽(今后縮寫為鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物)是抗腫瘤劑鬼臼乙叉甙的衍生物。鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物具有優(yōu)良的溶解度并且顯示出抗腫瘤活性(cf.usp4，716，221)，而鬼臼乙叉甙的溶解度不好。但鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物在水溶液中不穩(wěn)定，這使其不易長期貯存。通過僅將鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物溶在蒸餾水中，然后冷凍干燥得到的藥物制劑存在著這樣的缺陷當(dāng)該化合物重新與水配制時，其溶液的PH將增加，從而造成結(jié)晶析出。為改善重新配制對制劑組成進(jìn)行了各種研究，結(jié)果本發(fā)明者已發(fā)現(xiàn)含非揮發(fā)酸和/或其鹽的鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物的冷凍干燥制劑具有良好重新配制性能從而無結(jié)晶析出發(fā)生，其在貯存時還顯示出良好的穩(wěn)定性并且?guī)缀醪恍纬煞纸猱a(chǎn)物，且它的穩(wěn)定性通過加入糖進(jìn)一步提高。由此本發(fā)明已完成。本發(fā)明涉及鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物的冷凍干燥制劑。本發(fā)明提供的冷凍干燥制劑包括(1)約5-約50W/W%的非揮發(fā)酸和/或其鹽，(2)約10-約95W/W%4-0-(2-脫氧-2-二甲基氨基-4，6-0-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-脫甲基-4-表鬼臼脂素鹽酸鹽和(3)0-約85W/W%作為穩(wěn)定劑的至少一種糖。本發(fā)明中所用的鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物通常以其鹽酸鹽形式使用，見日本專利申請KOKAINo.61-227590。該鹽酸鹽具有三種多晶型結(jié)晶形式，一種為無水結(jié)晶(今后簡稱為α結(jié)晶)，另二種為二水合物結(jié)晶(今后簡稱為β結(jié)晶和ν結(jié)晶)。本發(fā)明的任何一種結(jié)晶形式都是可用的。作為本發(fā)明中可用的非揮發(fā)酸或其鹽，只要它們在室溫下是液體或固體，在PH3至5范圍內(nèi)(該范圍內(nèi)鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物是相對穩(wěn)定的并具有好的溶解度)具有所需的緩沖作用，所用的酸或其鹽就不受任何具體的抑制，它們是藥用的及藥理可接受的。這些酸包括無機(jī)酸如磷酸，硫酸等含6個碳原子的含羥羧酸如檸檬酸，葡萄糖酸等;含4個碳原子的二羧酸如琥珀酸，酒石酸，富馬酸，馬來酸等;含2個碳原子的羧酸，如氨基乙酸等。這些酸中，尤其優(yōu)選磷酸。這些酸的鹽有堿金屬或堿土金屬鹽如鈉鹽，鉀鹽，鎂鹽等，但一般優(yōu)選堿金屬鹽。這些酸或其鹽可兩個和/或多個合起來用。加到制劑中的這些酸和/或其鹽的量依賴于這些酸和/或其鹽的緩沖效果，但范圍一般是以1份重鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物計(jì)，由約0.1至5份重，優(yōu)選約0.1-4份重，更優(yōu)選0.2-3份重。本發(fā)明制劑的PH不低于3，不高于5，作為重新配制溶液的PH，優(yōu)選不低于3.0，不高于4.5。如必須需要的話，本發(fā)明制劑還可含有糖等。糖的例子包括含5-6個碳原子的糖醇如甘露糖醇，山梨糖醇，木糖醇，肌醇等;二糖如乳糖，麥芽糖，蔗糖等。在這些糖中，雖不存在特殊限制，但優(yōu)選乳糖，用這些糖改善了貯存期間鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物的穩(wěn)定性。糖的量以1份重鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物計(jì)，為0-30份重，優(yōu)選約0.1-10份重。從把該化合物制成其藥物制劑看，優(yōu)選糖量為約0.1-約4份重。在本發(fā)明冷凍干燥制劑中，鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物占組合物總重量約10-約95%(W/W除非另有說明，今后皆為W/W)，優(yōu)選約15-約80%，更優(yōu)選約30-約50%，非揮發(fā)酸和/或其鹽占組合物總重的約5-約50%，優(yōu)選約15-約35%，更優(yōu)選約20-約30%;糖占組合物總重的約0-約85%，優(yōu)選約0-約70%，更優(yōu)選約30-約50%。本發(fā)明冷凍干燥制劑如下制備，將鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物和非揮發(fā)酸和/或其鹽及如必要的話，再加上糖一起溶于水用于制備注射劑，如必要，用氫氧化鈉等將PH調(diào)到約3-約5，優(yōu)選約3.0-約4.5，得到水溶液。當(dāng)使用非揮發(fā)酸的鹽時，鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物可能由于其PH不能溶解，在這種情況下，使用非揮發(fā)酸，將PH降低到3以下由此來溶解鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物。例如，優(yōu)選的水溶液組合物包括約5-約15mg/ml鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物，約1-約10mg/ml非揮發(fā)酸和/或其鹽和0-約50mg/ml糖。由此得到的水溶液于-5--60℃下冷凍，然后在真空度為0.01-200Pa減壓下使水升華，從而得到本發(fā)明的冷凍干燥制劑。因此得到的冷凍干燥制劑通常通過加溶解液如水重新溶解以制備注射劑，所得到的溶液用作注射液。在這種情況下，溶解液的PH值優(yōu)選約3-約5范圍。下面由實(shí)施例和試驗(yàn)例說明本發(fā)明，但這不代表任何限制。實(shí)施例1將α結(jié)晶溶于50mM磷酸鹽緩沖液中以使?jié)舛葹?0mg/ml，該緩沖液是通過將50mM磷酸水溶液和50mM磷酸二氫鈉水溶液混合得到的，其PH為3.0。然后用1N氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)所得溶液PH至3.0。將該溶液按1ml/小瓶的比例分到小瓶中，冷凍干燥，得到本發(fā)明的組合物1(含約63%鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物和約37%磷酸和其鹽)。實(shí)施例2將α結(jié)晶和甘露糖醇溶于50mM磷酸鹽緩沖液中，從而使它們的濃度分別達(dá)到10mg/ml和40mg/ml，該緩沖液PH如實(shí)施例1所示為3.0。然后用1N氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)所得溶液PH至3.0。按實(shí)施例1同樣方式冷凍干燥該溶液得本發(fā)明的組合物2(含約18%鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物，約11%磷酸和其鈉鹽，約71%甘露糖醇)。實(shí)施例3將α結(jié)晶和肌醇溶于50mM磷酸鹽緩沖液以使它們的濃度分別達(dá)到10mg/ml和40mg/ml，該緩沖液PH如實(shí)施例1所示為3.0。然后用1N氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)所得溶液的PH至3.0。按實(shí)施例1中的同樣方法冷凍干燥該溶液，得到本發(fā)明的組合物3(含約18%鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物，約11%磷酸和其鈉鹽，約71%肌醇)。實(shí)施例4將α結(jié)晶和乳糖溶于50mM磷酸鹽緩沖液中以使它們的濃度分別達(dá)到10mg/ml和40mg/ml，所用緩沖液的PH如實(shí)施例1中所示為3.0。然后用1N氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)所得溶液PH至3.0。按實(shí)施例1中同樣方法冷凍干燥該溶液，得本發(fā)明的組合物4(含約18%鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物，約11%磷酸和其鈉鹽，約71%乳糖)。實(shí)施例5將α結(jié)晶和麥芽糖溶于50mM磷酸鹽緩沖液以使它們的濃度分別達(dá)到10mg/ml和40mg/ml，該緩沖液PH如實(shí)施例1所示為3.0。然后用1N氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)所得溶液PH至3.0。按實(shí)施例1同樣方法冷凍干燥該溶液，得到本發(fā)明的組合物5(含約18%鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物，約11%磷酸和其鈉鹽，約71%麥芽糖)。實(shí)施例6將α結(jié)晶和蔗糖溶于50mM磷酸鹽緩沖液中以使包括的濃度分別達(dá)到10mg/ml和40mg/ml，所用緩沖液的PH如實(shí)施例1所示為3.0。然后用1N氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)所得溶液PH至3.0。按實(shí)施例1中同樣方法冷凍干燥該溶液，得到本發(fā)明的組合物6(含約18%鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物，約11%磷酸和其鈉鹽。71%蔗糖)。實(shí)施例7將α結(jié)晶溶于50mM檸檬酸鹽緩沖液以使其濃度達(dá)到10mg/ml，該緩沖液是通過混合50mM檸檬酸水溶液和50mM檸檬酸三鈉水溶液得到的，其PH為3.0。然后用50mM檸檬酸三鈉水溶液調(diào)節(jié)所得溶液的PH至3.0。按實(shí)施例1同樣方法冷凍干燥該溶液，得到本發(fā)明的組合物7(含約49%鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物和約51%檸檬酸和其鈉鹽)。實(shí)施例8將α結(jié)晶和甘露糖醇溶于50mM檸檬酸鹽緩沖液中以使它們的濃度分別達(dá)到10mg/ml和40mg/ml，所用緩沖液PH如實(shí)施例7所示為3.0。然后用50mM檸檬酸三鈉水溶液調(diào)節(jié)所得溶液PH至3.0。按實(shí)施例1同樣方法冷凍干燥該溶液，得到本發(fā)明的組合物8(含約17%鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物，約17%檸檬酸和其鈉鹽，約66%甘露糖醇)。實(shí)施例9將β結(jié)晶溶于50mM磷酸鹽緩沖液中以使其濃度達(dá)到10mg/ml，該緩沖液PH為3.0。然后用1N氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)所得溶液的PH至3.0。按2ml/小瓶比例將該溶液分到小瓶中，然后冷凍干燥，得到本發(fā)明的組合物9(含約63%鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物和約37%磷酸和其鈉鹽)。實(shí)施例10將β結(jié)晶溶于50mM磷酸鹽緩沖液中以使其濃度達(dá)到10mg/ml，所用緩沖液PH與實(shí)施例1中相同。然后用1N氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)所得溶液PH至4.0。按實(shí)施例9同樣方法冷凍干燥該溶液，得到本發(fā)明的組合物10(含約63%鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物和約37%磷酸和其鈉鹽)。實(shí)施例11按實(shí)施例9所述，將β結(jié)晶溶于25mM磷酸鹽以使其濃度達(dá)到10mg/ml，該緩沖液是通過混合25mM磷酸水溶液和25mM磷酸二氫鈉水溶液得到的，其PH為3.0。然后用1N氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)所得溶液PH至3.5。按實(shí)施例9同樣方法冷凍干燥該溶液，得本發(fā)明的組合物11(含約77%鬼臼乙叉甙-2-二甲氨基化合物和約23%磷酸和其鈉鹽)。實(shí)施例12將β結(jié)晶和甘露糖醇溶于如實(shí)施例9中所述50mM磷酸鹽緩沖液中以使它們的濃度分別達(dá)到10mg/ml和4mg/ml。然后用1N氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)所得溶液PH至3.5。按實(shí)施例9同樣方法冷凍干燥該溶液，得本發(fā)明的組合物12(含約50%鬼臼乙叉甙-2-二甲氨基化合物，約30%磷酸和其鈉鹽，約20%甘露糖醇)。實(shí)施例13將β結(jié)晶和乳糖溶于如實(shí)施例9中所述的50mM磷酸鹽緩沖液中以使它們的濃度達(dá)到10mg/ml。然后用1N氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)所得溶液PH至3.0。按實(shí)施例9中同樣方法冷凍干燥該溶液，得到本發(fā)明的組合物13(含約37%鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物，約26%磷酸和其鈉鹽，及約37%乳糖)。實(shí)施例14按實(shí)施例9所述，將β結(jié)晶和山梨糖醇溶于25mM磷酸鹽緩沖液以使它們的濃度達(dá)到10mg/ml。然后用1N氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)所得溶液PH至3.5。按實(shí)施例9中同樣方法冷凍干燥該溶液，得本發(fā)明的組合物14(含約42%鬼臼乙叉甙-2-二甲氨基化合物，約17%磷酸和其鈉鹽及約41%山梨糖醇)。實(shí)施例15如實(shí)施例9所述，將β結(jié)晶和木糖醇溶于25mM磷酸鹽緩沖液中以使它們的濃度達(dá)到10mg/ml。然后用1N氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)所得溶液的PH至3.5。按實(shí)施例9中同樣方法冷凍干燥該溶液，得本發(fā)明的組合物15(含約42%鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物，約17%磷酸和其鈉鹽，及約41%木糖醇)。比較實(shí)施例1將α結(jié)晶溶于水中以使其濃度達(dá)到10mg/ml，然后用1N鹽酸調(diào)節(jié)所得溶液PH至3.0。按實(shí)施例1中同樣方法冷凍干燥該溶液，得比較組合物1。比較實(shí)施例2將α結(jié)晶和乳糖溶于水中以使它們的濃度達(dá)到10mg/ml。然后按實(shí)施例1中同樣方法冷凍干燥所得溶液，得比較組合物2(含約50%鬼臼乙叉甙-2-二甲氨基化合物和約50%乳糖)。下面進(jìn)行的試驗(yàn)實(shí)施例是用來說明含鬼臼乙叉甙-2-二甲氨基化合物的本發(fā)明冷凍干燥制劑在貯存時有優(yōu)異的穩(wěn)定性并且其重配性也得到了改善。試驗(yàn)實(shí)施例本發(fā)明組合物1-15，比較組合物1(其PH用揮發(fā)酸調(diào)節(jié)，隨后冷凍干燥)和比較組合物(其是通過單獨(dú)加入糖，不調(diào)節(jié)PH，然后冷凍干燥得到的)在冷凍干燥及60-65℃貯存一星期后馬上檢驗(yàn)它們的外觀，重配性，PH和鬼臼乙叉甙-2-二甲基氨基化合物的剩余量。剩余量是通過液相色譜測定的，其中鬼臼乙叉甙-2-二甲氨基化合物和分解產(chǎn)物的總量應(yīng)為100。加1ml蒸餾水到實(shí)施例1-8和比較實(shí)施例1-2的每一小瓶中，加2ml蒸餾水到實(shí)施例9-15的每一小瓶中，從而使鬼臼乙叉甙-2-二甲氨基化合物的濃度為10mg/ml，然后用溶解干燥粉末的程度和溶解后結(jié)晶有無析出來觀察重配性。結(jié)果當(dāng)比較實(shí)施例1和2組合物重配時，它們在PH為5或更高下析出了結(jié)晶，因此，比較組合物都不適宜用于制備注射劑。而本發(fā)明組合物1-15顯示出如表中所示的好的再溶性，無結(jié)晶析出，PH改變很小。結(jié)果表明它們具有好的貯存穩(wěn)定性。通過加糖，剩余量進(jìn)一步提高。表</tables>如上所述，本發(fā)明提供了具有良好重配性和穩(wěn)定PH和剩余量的鬼臼乙叉甙-2-二甲氨基化合物的制劑。權(quán)利要求1.制備冷凍干燥制劑的方法，該方法包括將(1)非揮發(fā)酸和/或其鹽，(2)4-0-(2-脫氧-2-二甲氨基-4，6-0-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-脫甲基-4-表鬼臼脂素鹽酸鹽和(3)作為穩(wěn)定劑的至少一種糖溶于水用于注射，得到溶液，然后減壓冷凍干燥該溶液，每種成份在冷凍干燥制劑中的含量分別為(1)約5-約50W/W%，(2)約10-約95W/W%和(3)0-約85W/W%。2.根據(jù)權(quán)利要求1制備冷凍干燥制劑的方法，其中冷凍干燥是在-5--60℃溫度下進(jìn)行的。3.根據(jù)權(quán)利要求1制備冷凍干燥制劑的方法，其中減壓是在真空度0.01-200Pa下進(jìn)行的。4.根據(jù)權(quán)利要求1制備冷凍干燥制劑的方法，其中當(dāng)所得冷凍干燥制劑再溶于蒸餾水時，所得溶液的PH值不小于3但小于5。5.根據(jù)權(quán)利要求1制備冷凍干燥制劑的方法，其中所說非揮發(fā)酸和/或其鹽選自磷酸和其鹽的混合物，選自含6個碳原子的含羥羧酸，含4個碳原子的二羧酸和氨基乙酸的一種酸和/或它的鹽。6.根據(jù)權(quán)利要求1制備冷凍干燥制劑的方法，其中所說非揮發(fā)酸和其鹽是磷酸和其堿金屬鹽或檸檬酸和其堿金屬鹽。7.根據(jù)權(quán)利要求1制備冷凍干燥制劑的方法，其中所說糖是含5-6個碳原子的糖醇或二糖。8.根據(jù)權(quán)利要求1制備冷凍干燥制劑的方法，其中所說糖選自乳糖、麥芽糖、蔗糖和甘露糖醇。9.根據(jù)權(quán)利要求1制備冷凍干燥制劑的方法，其中該制劑包括(1)約15-約35W/W%磷酸和其堿金屬鹽，(2)約15-約80W/W%4-0-(2-脫氧-2-二甲氨基-4，6-0-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-脫甲基-4-表鬼臼脂素鹽酸鹽和(3)0-約70W/W%乳糖。10.根據(jù)權(quán)利要求1制備冷凍干燥制劑的方法，其中該制劑包括(1)約20-約30W/W%磷酸和其堿金屬鹽，(2)約30-約50W/W%4-0-(2-脫氧-2-二甲氨基-4，6-0-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-脫甲基-4-表鬼臼脂素鹽酸鹽和(3)約30-約50W/W%乳糖。11.根據(jù)權(quán)利要求10制備冷凍干燥制劑的方法，其中當(dāng)該制劑再溶于水用于注射時，該制劑的PH值不小于3但小于5。全文摘要本發(fā)明涉及冷凍干燥制劑，其包括(1)約5-約50W/W％非揮發(fā)酸和/或其鹽，(2)約10-約95W/W％4-O-(2-脫氧-2-二甲氨基-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖基)-4′-脫甲基-4-表鬼臼脂素鹽酸鹽和(3)0-約85W/W％作為穩(wěn)定劑的至少一種糖。文檔編號A61K31/70GK1053550SQ9110037公開日1991年8月7日申請日期1991年1月19日優(yōu)先權(quán)日1990年1月19日發(fā)明者大朏和男,大熊高明申請人:日本化藥株式會社