專利名稱：增強(qiáng)抗腫瘤藥物活性的嘧啶類衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及2，4-二氨基嘧啶類化合物以及它們作為抗腫瘤劑的腫瘤細(xì)胞致敏物的應(yīng)用。
在癌癥的化療中，抗癌藥物的效果經(jīng)常受腫瘤細(xì)胞抗藥性的限制。有些腫瘤如結(jié)腸腫瘤、胰腺腫瘤、腎腫瘤和肝腫瘤一般具有固有的抗藥性，并且其他相應(yīng)的腫瘤在化療過程中常常會產(chǎn)生耐藥性。多重耐種(MDR)現(xiàn)象的特征在于腫瘤細(xì)胞對結(jié)構(gòu)上無關(guān)的藥物產(chǎn)生交叉抗藥性。易產(chǎn)生抗藥性的藥物有阿霉素、正定霉素、長春堿、長春新堿、放線菌素D和鬼臼乙叉甙?？顾幮约?xì)胞通常與mdrl基因的過分表達(dá)有關(guān)。該基因產(chǎn)物屬于起依賴ATP流出泵作用的140-220kd跨膜磷糖蛋白(P-糖蛋白)族。因此有人提出以下假說該流出泵機(jī)制使抗癌藥物的細(xì)胞內(nèi)含量是低水平的，這就使腫瘤細(xì)胞能夠存活下來。
近年來，已將多種物質(zhì)如異搏仃、硝苯吡啶、硫氮 酮用于體外試驗(yàn)系統(tǒng)，以逆轉(zhuǎn)MDR現(xiàn)象。最近，已將某些上述藥物作為MDR逆轉(zhuǎn)劑進(jìn)行臨床試驗(yàn)。異搏仃或三氟拉嗪幾乎沒有效果，因此，需要有效的MDR逆轉(zhuǎn)劑。
Fukgzawa等敘述了用作為抗癌藥物增強(qiáng)劑的一系列雜環(huán)化合物(歐洲專利申請?zhí)?9310235.0)。一系列蝶啶類衍生物也被認(rèn)為具有同樣的用途(歐洲專利申請?zhí)?9117610.9)。
Tomino等(歐洲專利申請?zhí)?9313595.4)揭示了用于治療神經(jīng)病的一系列嘧啶類化合物，其中包括2，4-二氨基嘧啶類化合物。
美國專利4，945，093敘述了可用于促進(jìn)頭發(fā)生長的一系列2，4，6-三氨基嘧啶-N-氧化物。
本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上適用的鹽具有下式，
其中M為氫、C1-3烷氧基、C1-3烷基、由1或2個(gè)烷氧基取代基(每個(gè)烷氧基有1-3個(gè)碳原子)任意取代的芐基、氯、氟、氨基、C1-3烷氧基、C2-6二烷氨基或三氟甲基，M1為氫、氨基、C1-3烷氨基、C2-6二烷氨基、C1-3烷基、氟或氯，R1為下式的芳烷基，
式中 n為整數(shù)零或1，W為氧、硫或一化學(xué)鍵，A為C1-4亞烷基，Y和Y′各自為氫、C1-3烷基、C1-3烷氧基、氟、氯、三氟甲基、氨基、C1-3烷氨基或C2-6二烷氨基，并且Y和Y17一起代表亞乙二氧基或亞甲二氧基，R2為氫或C1-8烷基，R1和R2與其所連接的氮原子一起代表下式基團(tuán)，
式中 R5為氫、C1-3烷基或二烷氧基苯基烷基，所述烷氧基有1-3個(gè)碳原子，所述烷基有1-3個(gè)碳原子，Q和Q1各自為氫、C1-3烷基、C1-3烷氧基、氟、氯、三氟甲基、氨基、C1-3烷氨基或C2-6二甲烷基氨基，并且Q和Q7一起代表亞甲二氧基或亞乙二氧基，R3為下式的芳烷基，
式中 m為整數(shù)零或1，z為氧、硫或一化學(xué)鍵，B為C1-4亞烷基，X和X1各自為氫、C1-3烷基、C1-3烷氧基、氟、氯、三氟甲基、氨基、C1-3烷氨基或C2-6二烷氨基，并且X和X1一起代表亞甲二氧基或亞乙二氧基，
R4為氫或C1-4烷基，并且R3和R4與其所連接的氮原子一起形成下式基團(tuán)，
式中 R6為氫或二烷氧基芐基，所述烷氧基有1-3個(gè)碳原子，P和P1各自為氫、C1-3烷基、C1-3烷氧基、氟、氯、三氟甲基、氨基、C1-3烷氨基或C2-6二烷氨基，一組優(yōu)選的本發(fā)明化合物是下述化合物，其中M1為氫或C1-3烷基，R1和R2與其所連接的氮一起代表下式基團(tuán)，
式中 Q為6-甲氧基，Q1為7-甲氧基，R3和R4與其所述連接的氮一起代表下式基團(tuán)，
式中 P為6-甲氧基，P1為7-甲氧基。
在上述一組中特別優(yōu)選的化合物是其中M為氫，M1為氫，R5為3，4-二甲氧基芐基，R6為3，4-二甲氧基芐基，以及其中M為氫，M1為氫，R5為3，4-二甲氧基芐基，R6為氫。
第二組優(yōu)選的化合物是其中M為二烷氧基芐基M1為氫R1和R2與其所連接的氮一起為下式基團(tuán)，
式中 Q為6-甲氧基，Q1為7-甲氧基，R3為下式芳烷基，
式中 M為零，Z為一化學(xué)鍵，B為亞乙基，R4為氫。
在上述一組化合物中特別優(yōu)選的化合物是其中M為3，4-二甲氧基芐基，R5為氫，X為2-氯，X1為氫;
其中M為3，4-二甲氧基芐基，R5為3，4-二甲氧基芐基，X為2-氯，X1為氫。
第3組優(yōu)選的化合物是其中M為氫，M1為氫或C1-3烷基，R3為下式的芳烷基，
式中 m為零，Z為一化學(xué)鍵，B為亞乙基，R4為氫，R1和R2與其所連接的氮一起代表下式基團(tuán)，
式中 Q為6-甲氧基，Q1為7-甲氧基。
在上述這組化合物中特別優(yōu)選的化合物是其中M1為甲基，X為3-甲氧基，X1為4-甲氧基，R5為氫;
其中M1為氫，X為2-甲氧基，X1為3-甲氧基，R5為3，4-二甲氧基芐基;
其中M1為氫，X為2-氯，X1為氫，R5為3，4-二甲氧基芐基;
其中M1為氫，X和X1一起代表3，4-亞甲二氧基，R5為3，4-二甲氧基芐基;和其中M1為甲基，X為2-氯，X1為氫R5為3，4-二甲氧基芐基。
本發(fā)明還包括抑制需治療的哺乳動(dòng)物中P-糖蛋白的方法，該方法包括給該哺乳動(dòng)物服用抑制P-糖蛋白劑量的式Ⅰ化合物。優(yōu)選的方法是其中哺乳動(dòng)物是患有癌癥的人，并且在給病人服用抗癌有效劑量的化療劑之前、同時(shí)或之后服用本發(fā)明化合物。
本發(fā)明也包括給哺乳動(dòng)物服用的藥用組合物，該組合物包括抑制P-糖蛋白劑量的式Ⅰ化合物、藥學(xué)上適用的載體以及任意的抗癌有效劑量的化療劑。
如以上所述，式Ⅰ化合物可以形成藥學(xué)上適用的酸加成鹽。所述藥學(xué)上適用的酸加成鹽包括(但不限于)與下述酸形成的鹽HCl、HBr、HNO3、H2SO4、H3PO4、CH3SO3H、P-CH3C6H4SO3H、CH3CO2H、羥基乙酸、酒石酸、馬來酸和琥珀酸。當(dāng)然，在上述式(Ⅰ)化合物還含有另一堿性氮的情況下可以形成二酸加成鹽(如二鹽酸鹽)以及常見的單酸加成鹽。
熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員明白，式Ⅰ化合物可以含有不對稱碳原子。全部可能的異構(gòu)體是在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
本發(fā)明化合物可以按下法制備使2，4-二氯嘧啶與當(dāng)量合適的胺R1R2NH反應(yīng)，接著將反應(yīng)產(chǎn)物2-氯-4-氨基嘧啶衍生物與第2個(gè)當(dāng)量合適的胺R3R4NH反應(yīng)。
上述方法更詳細(xì)地?cái)⑹鋈缦聦?摩爾當(dāng)量任意取代的2，4-二氯嘧啶和1摩爾當(dāng)量叔胺(酸接受體)如三乙胺、N-甲基嗎啉或二乙基異丙胺，以及1摩爾當(dāng)量的胺R1R2NH于無水溶劑(如二甲基乙酰胺、二噁烷、二氯甲烷或N-甲基-2-吡咯烷酮)中，在0℃-約25℃反應(yīng)1-48小時(shí)。
反應(yīng)混合物經(jīng)過濾，濾液于真空下濃縮至干，或者將反應(yīng)混合物倒入水中，中間產(chǎn)物或者過濾，或者用與水不混溶的溶劑(如二氯甲烷或乙酸乙酯)萃取。除去萃取溶劑，得到所需產(chǎn)物。常常將殘余物與有機(jī)溶劑一起研磨，以促使殘余物能夠結(jié)晶，并通過重結(jié)晶或柱層析進(jìn)一步純化。
制備本發(fā)明產(chǎn)物的第二步程序是使1摩爾當(dāng)量合適的2-氯-4-氨基嘧啶與2摩爾當(dāng)量的胺R3R4NH，或1摩爾上述胺和1摩爾當(dāng)量的叔胺(酸接受體)按以上所述，于對反應(yīng)呈惰性的溶劑(如乙氧基乙氧基乙醇、丁醇、戊醇或環(huán)己醇)中反應(yīng)5分鐘-數(shù)小時(shí)，反應(yīng)溫度為100-200℃。
將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并且1N合適的酸(如鹽酸)處理，得到所需產(chǎn)物(如鹽酸鹽)的沉淀。其他的酸可以得到相應(yīng)的酸加成鹽。如果不析出酸加成鹽，那么可以將粗的游離堿經(jīng)硅膠層析，用例如氯仿、乙酸乙酯、乙醚、甲醇、二氯甲烷、乙醇或它們的混合液進(jìn)行洗脫，分離出游離堿產(chǎn)物，然后將其轉(zhuǎn)變?yōu)樗峒映甥}。在真空下除去溶劑可分離出酸加成鹽。酸加成鹽可經(jīng)重結(jié)晶進(jìn)行純化。
將酸加成鹽的水溶液或混懸液用至少1當(dāng)量的有機(jī)堿或無機(jī)堿處理，接著用與水不混溶的溶劑(如乙酸乙酯或二氯甲烷)萃取游離堿產(chǎn)物，可以容易地從酸加成鹽得到游離堿。除去溶劑，得到所需的游離堿。
式Ⅰ化合物是P-糖蛋白功能抑制劑，這些P-糖白尤其指人類mdr I 蛋白或與P-糖蛋白有關(guān)的膜蛋白。這些蛋白參與異生物或跨膜蛋白-例如真核生物和前真核生物(eukariotic and proeukariotic origin，如pmfdr)但不局限于這些例子-細(xì)胞膜的傳遞。
通式Ⅰ的化合物可應(yīng)用于癌、瘧疾和病毒感染(如艾滋病)的聯(lián)合化療，用于膿毒性休克綜合癥和炎癥的治療，還可用于提高藥物的組織穿透作用，在這些組織中由于存在P-糖蛋白或與P-糖蛋白有關(guān)的功能蛋白質(zhì)而使上述異生物的穿透力受到限制。式Ⅰ化合物能增強(qiáng)下列藥物的活性或藥效阿霉素、正定霉素、表鬼臼毒素同類物，放線菌素D，依米丁，長春新堿，長春堿，氯喹，蒽霉素等抗菌素;結(jié)構(gòu)上和功能上與上面提到的例子有關(guān)的藥物，特別當(dāng)業(yè)已證明這些藥物的活性由于P-糖蛋白(如人mdr I蛋白或與P-糖蛋白有關(guān)的蛋白)的存在和起作用而受到限制時(shí)。
采用細(xì)胞內(nèi)藥物滯留試驗(yàn)，對本發(fā)明化合物作為化療藥物的增強(qiáng)劑進(jìn)行評價(jià)。進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì)，研究本發(fā)明化合物對放射性標(biāo)記藥物在細(xì)胞內(nèi)滯留的影響。在這種情況下，測定由多重耐藥的人類癌細(xì)胞DBVI滯留的14C阿霉素。
在含μg/ml長春堿和熱滅活的10%小牛血清并補(bǔ)充谷氨酰胺、Pen-Strep和硫酸慶大霉素的DMEM高葡萄糖培養(yǎng)液中，使KBVI細(xì)胞以單細(xì)胞層在組織增養(yǎng)皿中常規(guī)生長。
該試驗(yàn)方案(下面闡述)稍加修改，可適用于組織培養(yǎng)皿中多種細(xì)胞系的生長。
試驗(yàn)方案(1)在雙排6孔組織培養(yǎng)板上，每孔接種每2ml含1.2×10Eb細(xì)胞的不含長春堿的細(xì)胞液;
(2)在能調(diào)節(jié)濕度的培養(yǎng)箱(5%CO2)中于37℃溫育24小時(shí);
(3)抽出用過的培養(yǎng)液，并在單細(xì)胞層上面覆蓋新鮮介質(zhì)，2ml/每孔，該新鮮介質(zhì)內(nèi)含2μM阿霉素(2μM未標(biāo)記阿霉素+20000CPm14C-阿霉素)和濃度為0-100μM的試驗(yàn)化合物;
(4)在可調(diào)濕度的培養(yǎng)箱中于37℃溫育3小時(shí)后，除去介質(zhì)，用2ml冰冷緩沖生理鹽水沖洗單細(xì)胞層2次;
(5)用0.5ml胰蛋白酶/EDTA液分離單細(xì)胞層，收集被分離的細(xì)胞并移入閃爍瓶內(nèi)，再用0.5ml緩沖生理鹽水淋洗孔1次，并將其加到含細(xì)胞的相同閃爍瓶中;
(6)閃爍瓶中加入5ml Beckman Ready-Safe閃爍液，將瓶內(nèi)容物渦動(dòng)混合，用閃爍計(jì)數(shù)儀測定每個(gè)樣品的放射性(每個(gè)樣品10分鐘);
(7)對空白對照的處理將單細(xì)胞層于4℃預(yù)孵育15分鐘，然后移去培養(yǎng)液，加入含阿霉素的制冷新鮮介質(zhì)(見步驟3)。在4℃孵育3小時(shí)后移去介質(zhì)并用2ml冰冷緩沖生理鹽水沖洗單細(xì)胞層2次，然后按步驟5進(jìn)行;
(8)結(jié)果以T/C值和ED3×值表示，定義如下T/C＝用試驗(yàn)化合物處理的每10E6細(xì)胞所含阿霉素Pmole數(shù)/未處理的每10E6細(xì)胞所含阿霉素Pmole數(shù)。
ED3×＝細(xì)胞內(nèi)放射性標(biāo)記的阿霉素積蓄量增加3倍，即T/C＝3，所需要的試驗(yàn)化合物濃度。
計(jì)算特異CPm＝[樣品CPm-空白CPm]特異活性＝[CPm/阿霉素的總濃度]阿霉素Pmole數(shù)＝[特異CPm/特異活性]每10E6細(xì)胞中阿霉素Pmole數(shù)＝[(每孔阿霉素Pmole數(shù)/每孔細(xì)胞數(shù))×10E6細(xì)胞]如前所述，本發(fā)明化合物及其鹽有助于增強(qiáng)化療藥物的抗癌作用。所述化療藥物包括阿霉素，正定霉素，阿克拉霉素A，放線菌素C，放線菌素D，光輝霉素、茅屋霉素，長春堿，美登素，鴉膽丁，高三尖杉酯堿，蛇形菌素，新制癌菌素，絲裂霉素C以及蒽霉素。
可以在服用化療劑之前24小時(shí)或直到服用化療劑之后72小時(shí)服用本發(fā)明化合物。在服用上述本發(fā)明藥物和化療劑時(shí)，它們可以分別服用，或者在同一制劑中同時(shí)服用。
本發(fā)明化合物可以單獨(dú)地服用，或者與抗癌劑合并服用，本發(fā)明化合物一般以藥用組合物的形式服用，該藥用組合物包括至少1種式Ⅰ化合物和任意的化療劑以及藥學(xué)上適用的載體或稀釋劑。通常按一般的方法，根據(jù)所需要的服用方式用固體或液體載體或稀釋劑配制上述組合物，口服劑型有片劑、硬明膠膠囊劑或軟明膠膠囊劑、混懸劑、顆粒劑、粉劑等，對于非經(jīng)胃腸道給藥的劑型有注射溶液或混懸劑等。
為了增強(qiáng)抗癌劑在哺乳動(dòng)物(包括人)中的效果，按每天每千克體重約0.5-100mg的劑量服用式Ⅰ化合物，可以是單次劑量或均分劑量。雖然在個(gè)別情況下可以按主治醫(yī)師意見給藥，劑量超出較寬的范圍是需要的，但較好的劑量范圍是每天千克體重2-50mg。較好的給藥途徑一般是口服，但在特定的病例中(例如如果疾病使口服吸收受損，或者患者不能吞胭)，非經(jīng)胃腸道給藥(如肌內(nèi)注射、靜脈注射、真皮內(nèi)給藥)也是較好的。
用下述實(shí)例詳細(xì)敘述本發(fā)明，但本發(fā)明并不限于其細(xì)節(jié)和范圍。
實(shí)例12-(2-氯苯乙氨基)-4-(1，2，3，4-四氫-6，7-二甲氧基異喹啉-2-基)-5-(3，4-二甲氧基芐基)嘧啶(M＝3，4-(CH3O)2C6H3CH2-;M1＝H;R1R2N＝1，2，3，4-四氫-6，7-(CH3O)2-異喹啉-2-基;R3＝2-ClC6H4(CH2)2-;和R4＝4)A.5-(3，4-二甲氧基芐基)尿嘧啶將5.0g 5-羥甲基尿嘧啶、150ml藜蘆醚和0.5ml濃鹽酸的溶液于140℃加熱1小時(shí)，過濾沉淀，用乙醚洗滌，并用熱甲醇重結(jié)晶，得6.85g，M+263.20。
B.2，4-二氯-5-(3，4-二甲氧基芐基)嘧啶將4.7g實(shí)例1A的產(chǎn)物和125ml三氯氧磷的混合物加熱回流過夜。在真空下除去過量的三氯氧磷，殘余物倒入冰水中。水溶液用二氯甲烷萃取，合并萃取液并經(jīng)硫酸鈉干燥。除去二氯甲烷后殘余物經(jīng)硅膠層析(以二氯甲烷洗脫)，得4.92g所需的中間體，M299.0
C.2-氯-4-(6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)-5-(3，4-二甲氧基芐基)嘧啶將2.0g實(shí)例1B的化合物、1.54g6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氫異喹啉鹽酸鹽和1.73g二異丙基乙胺在125ml二噁烷中的溶液加熱回流過夜。在真空下除去溶劑，殘余物經(jīng)硅膠層析(以4%乙酸乙酯的二氯甲烷溶液洗脫)，得到2.27g產(chǎn)物，M+456.10D.2-(2-氯苯乙氨基)-4-(1，2，3，4-四氫-6，7-二甲氧基異喹啉-2-基)-5-(3，4-二甲氧基芐基)嘧啶將300mg實(shí)例1C的產(chǎn)物、102mg2-氯苯乙胺和85mg二異丙基乙胺在1ml2-(2-乙氧基乙氧基)-乙醇中的混合物于160℃加熱2小時(shí)，在真空下除去溶劑，殘余物經(jīng)硅膠層析(以2%甲醇的二氯甲烷溶液洗脫)，得到230mg產(chǎn)物，m.p.140-141℃，M+575.30實(shí)例2-16應(yīng)用實(shí)例1的方法，用合適的試劑為起始原料，制備下列化合物。

實(shí)施例2 M＝H;M1＝6-CH3;R5＝H;Q1＝6-CH3O;Q2＝7-CH3O;R3＝2，3-(CH3O)2C6H3(CH2)-;R4＝H;m.p.224-226.5℃，M+465.00.
實(shí)例3M，M1＝H;R5＝H;Q1＝6-CH3O;Q2＝7-CH3O;
R3NR4＝

m.p.151-153℃，M+613.20.
實(shí)例4M，M1＝H;R5＝3，4-(CH3O)2C6H3CH2-;Q1＝6-CH3O;Q2＝7-CH3O;
R3NR4＝

m.p.138-142℃，M+763.40.
實(shí)例5M，M1＝H;R5＝3，4-(CH3O)2C6H3CH2-;Q1＝6-CH3O;Q2＝7-CH3O;R3＝3，4-(CH3O)2C6H3(CH2)2-;和R4＝H;m.p.174-175℃，M+601.50.
實(shí)例6M＝H;M1＝6-CH3;R5＝H;Q1＝6-CH3O;Q2＝7-CH3O;R3＝3，4-(CH3O)2C6H3(CH2)2-;和R4＝H;m.p.72-76℃，M+465.0.
實(shí)例7M，M1＝H;R5＝3，4-(CH3O)2C6H3CH2-;Q1＝6-CH3O;Q2＝7-CH3O;R3＝2，3-(CH3O)2C6H3(CH2)2-;和R4＝H;m.p.69-72℃，M+601.40.
實(shí)例8M，M1＝H;R5＝3，4-(CH3O)2C6H3CH2-;Q1＝6-CH3O;Q2＝7-CH3O;R3＝2-ClC6H4(CH2)2-;和R4＝H;m.p.73-75℃，M+575.30.
實(shí)例9M，M1＝H;R5＝3，4-(CH3O)2C6H3CH2-;Q1＝6-CH3O;Q2＝7-CH3O;R3＝3，4-(CH2O2)C6H3(CH2)2-;和R4＝H;m.p.118-122℃，M+585.3.
實(shí)例10M，M1＝H;R5＝3，4-(CH3O)2C6H3CH2-;Q1＝6-CH3O;Q2＝7-CH3O;R3＝4-CH3OC6H4O(CH2)2-;和R4＝H;m.p.160-162℃，M+587.3.
實(shí)例11M＝H;M1＝6-CH3;R5＝3，4-(CH3O)2C6H3-CH2-;Q1＝6-CH3O;Q2＝7-CH3O;和R3NR4＝

m.p.190-192℃，M+777.3.
實(shí)例12M＝H;M1＝6-CH3;R5＝H;Q1＝6-CH3O;Q2＝7-CH3O;R3＝2-ClC6H4(CH2)2-;和R4＝H;m.p.174-177℃，M+439.0.
實(shí)例13M＝H;M1＝6-CH3;R5＝H;Q1＝6-CH3O;Q2＝7-CH3O;R3＝3，4-(CH3O)2C6H3(CH2)2-;和R4＝H;m.p.170-171℃，M+615.3.
實(shí)例14M＝H;M1＝6-CH3;R5＝3，4-(CH3O)2C6H3-CH2;Q1＝6-CH3O;Q2＝7-CH3O;R3＝2，3-(CH3O)2C6H3-(CH2)2-;和R4＝H;m.p.110-112℃，M+615.3.
實(shí)例15M＝H;M1＝6-CH3;R5＝3，4-(CH3O)2C6H3-CH2;Q1＝6-CH3O;Q2＝7-CH3O;R3＝2-ClC6H4(CH2)2-;和R4＝H;m.p.100-102℃，M+589.3.
實(shí)例6M＝5-CH3;M1＝6-CH3;R5＝H;Q＝6-CH3O;Q2＝7-CH3O;R3＝3，4-(CH3O)2C6H3(CH2)2-;和R4＝H;m.p.117-118℃，M+478.3.
實(shí)例17-20應(yīng)用實(shí)例1的方法，用合適的試劑為起始原料，制備下列化合物。

實(shí)例17M＝3，4-(CH3O)2C6H3CH2-;M1＝H;R5＝H;Q1＝6-CH3O;Q2＝7-CH3O;R3＝3，4-(CH3O)2C6H3(CH2)2-;和R4＝H;m.p.89-91℃，M+601.40.
實(shí)例18M＝3，4-(CH3O)2C6H3CH2-;M1＝H;R5＝H;Q1＝6-CH3O;Q2＝7-CH3O;R3＝2，3-(CH3O)2C6H3(CH2)2-;和R4＝H;m.p.89-91℃，M+601.4.
實(shí)例19M＝3，4-(CH3O)2C6H3CH2-;M1＝H;R5＝3，4-(CH3O)2C6H3CH2-;Q1＝6-CH3O;Q2＝7-CH3O;R3＝2-ClC6H4(CH2)2-;and R4＝H;m.p.90-95℃，(游離堿)M+725.50.
實(shí)例20M＝H;M1＝6-Cl;R5＝H;Q1＝6-CH3O;Q2＝7-CH3O;R3＝2-ClC6H4(CH2)2-;和-R4＝H;m.p.(HCl鹽)129-131℃，M+459.10.
實(shí)例212-(1-[3，4-二甲氧基芐基]-6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)-4-(3，4-二甲氧基苯乙氨基)-嘧啶鹽酸鹽(M和M1＝H;R1R2N＝3，4-(CH3O)2C6H3(CH2)2NH和R3R4N＝1，2，3，4-四氫-1-(3，4-二甲氧基芐基)-6，7-二甲氧基異喹啉-2-基)將149g2，4-二氯嘧啶、181mg2-(3，4-二甲氧基苯基)乙胺和三乙胺(111mg)在2ml2-(2-乙氧基乙氧基)乙醇中的混合物于室溫?cái)嚢?小時(shí)。此后加入四氫罌粟堿鹽酸鹽(300mg)和三乙胺(222mg)，混合物在氮?dú)饬飨掠?70℃加熱1.5小時(shí)。濾出沉淀，在減壓下除去溶劑。殘余物經(jīng)硅膠層析，用2.5%甲醇的二氯甲烷溶液(VV)洗脫，得到45mg(7.5%)固體。該固體用1N氯化氫的甲醇溶液處理，得到標(biāo)題化合物，為無定形的固體，m.p.48-51℃，M601。
實(shí)例22-24應(yīng)用實(shí)例1的方法，用合適的試劑為起始原料，制備下列化合物。

實(shí)例22M和M1＝H;R1＝C6H5CH2;R2＝CH3;R3＝3，4-(CH3O)2C6H3(CH2)2-;and R4＝H;m.p.109-111℃，M+379.
實(shí)例23M和M1＝H;R1＝C6H5CH2;R2＝CH3;R3＝2，3-(CH3O)2C6H3(CH2)2-;and R4＝H;m.p.128-129℃，M+379.
實(shí)例24M和M1＝H;R1＝3，4-(CH3O)2C6H3(CH2)2-;R2＝H;R3＝3，4-(CH3O)2C6H3(CH2)2;和R4＝H;m.p.100-102℃，，M+439.2.
制備A應(yīng)用實(shí)例1C的方法，用合適的試劑為起始原料，制備下列中間體，



權(quán)利要求
1.制備下式化合物及其藥學(xué)上適用的酸加成鹽的方法，
其中M為氫、C1-3烷氧基、C1-3烷基、由1或2個(gè)烷氧基取代基(每個(gè)烷氧基有1-3個(gè)碳原子)任意取代的芐基、氨基、C1-3烷氨基、C2-6二烷氨基、氟、氯或三氟甲基，M1為氫、氨基、C1-3烷氨基、C2-6二烷基、C1-3烷基、氟或氯，R1為下式的芳烷基，
式中n為整數(shù)零或1，W為氧或硫或一化學(xué)鍵，A為C1-4亞烷基，Y和Y1各自為氫、C1-3烷基、C1-3烷氧基、氟、氯、三氟甲基、氨基、C1-3烷氨基或C2-6二烷氨基，并且Y和Y1一起代表亞乙二氧基或亞甲二氧基，R2為氫或C1-8烷基，R和R2與其所連接的氮原子一起形成下式基團(tuán)，
式中R5為氫、C1-3烷基或二烷氧基苯基烷基，所述烷氧基有1-3個(gè)碳原子，所述烷基有1-3個(gè)碳原子，Q和Q1各自為氫、C1-3烷基、C1-3烷氧基、氟、氯、氨基、C1-3烷氨基、三氟甲基或C2-6二烷氨基，并且Q和Q1一起代表亞甲二氧基或亞乙二氧基，R3為下式的芳烷基，
式中m為整數(shù)零或1，z為氧或硫或一化學(xué)鍵，B為C1-4亞烷基，X和X1各自為氫、C1-3、烷基、C1-3烷氧基、氟、氯、三氟甲基、氨基、C1-3烷氨基或C2-6二烷氨基，并且X和X1一起代表亞甲二氧基或亞乙二氧基，R4為氫、C1-4烷基，并且R3和R4與其所連接的氮原子一起形成下式基團(tuán)，
式中P和P1各自為氫、C1-3烷基、C1-3烷氧基、氟、氯、三氟甲基、氨基、C1-3烷氨基或C2-6二烷氨基，P與P1一起代表亞甲二氧基或亞乙二氧基，R6是氫或二烷氧基芐基，所述烷氧基有1-3個(gè)碳原子，該方法包括使下式化合物
與2摩爾當(dāng)量的胺NHR3R4或1摩爾當(dāng)量的胺NHR3R4和1摩爾當(dāng)量的叔胺(酸接受體)于惰性反應(yīng)溶劑中，在100-200℃進(jìn)行反應(yīng)，直至反應(yīng)充分地完成，并且有選擇地制備其藥學(xué)上適用的鹽。
全文摘要
本發(fā)明公開了在癌癥治療中作為化療劑增強(qiáng)劑的2，4-氨基嘧啶類衍生物。
文檔編號A61K31/495GK1065863SQ9210268
公開日1992年11月4日 申請日期1992年4月16日 優(yōu)先權(quán)日1991年4月17日
發(fā)明者J·W·科, A·F·J·弗里里, 金子卓至, E·R·拉森 申請人:美國輝瑞有限公司