專利名稱：紅霉素衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及紅霉素衍生物及其鹽，它們能夠刺激哺乳動物消化道的收縮能動性，因而可作為消化道收縮能動性的刺激劑。
根據(jù)機制的不同，原動力劑可大致地分為四類直接膽堿能藥(如aclatonuimnapadisilate);間接膽堿能藥(如cisapride);多巴胺阻斷劑(如domperidone);和鴉片制劑拮劑(如trimebutinemaleate)，它們被廣泛地用作腸蠕動機能障礙的治療劑，尤其是用于治療由于運動減少所引起的消化器官疾病(如腸胃病)。但是，這些藥物具有副作用，例如，由于多巴胺的阻斷作用而引起錐體囊外癥狀或刺激催乳激素的釋放。另外，與自上消化道至下消化道的自發(fā)生理蠕動不同，已知上述藥物的作用常常導(dǎo)致fluor、嘔吐等副作用的發(fā)生。
另一方面，已知胃動素是胃腸道激素，它刺激消化道的收縮能動性，但其來源無論是通過天然提取還是化學(xué)合成均不理想，難以保證能大量提供。而且，胃動素是一種由22個氨基酸組成的肽。因此，難以開發(fā)含有胃動素的口服制劑。
近年來，人們發(fā)現(xiàn)紅霉素及其衍生物對消化道的收縮能動性具有很強的刺激作用，其一種衍生物EM-523已被開發(fā)成原動力劑(日本專利申請公開SHONO.60-218321，SHONO.61-87625，SHONO.63-99016，SHONO.63-99092和JournalofpharmacoloyyandExperimentalTherapeutcis，vol.251，NO.2，pp707-712，1989)。
但是，EM-523在酸存在的情況下不穩(wěn)定，因此，當(dāng)EM-523通過口服給藥時，由于被胃酸分解其作用減弱。鑒于這些事實，本發(fā)明人進行了研究，以期找到耐酸且能通過口服給藥的紅霉素衍生物，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，下面所述的而在文獻中沒有記載的紅霉素新衍生物具有上述性質(zhì)和作用，并根據(jù)這一發(fā)現(xiàn)完成了本發(fā)明。
即在發(fā)明涉及下面式(Ⅰ)所代表的化合物及其鹽
其中R1為氫原子或酰基;
R2和R2可相同或不同，且均代表氫原子、羥基、酰氧基或氨基，或它們結(jié)合在一起，共同代表＝0或＝NOR10，R10代表氫原子或低級烷基;
R4代表氫原子或低級烷基;
Y代表-NR5R6或-N+R7R8R9X-，其中R5、R6、R7、R8和R9可相同或不同，且均代表氫原子或未取代或取代低級烷基、低級鏈烯基、低級鏈炔基、環(huán)烷基或含有氧、氮、硫為一雜原子的3-7元雜環(huán)基，X代表一陰離子，R5和R6或R7和R8可分別與相鄰氮原子一起形成氮雜環(huán)烷基。
在本說明書及權(quán)利要求書中，?；庵??；?、乙?；?、丙?；⒍□；⑿挛祯；?、苯甲酰基、乙氧羰基、叔丁氧羰基、芐氧羰基等;酰氧基意指甲酰氧基、乙酰氧基、丙酰氧基、丁酰氧基、新戊酰氧基、芐酰氧基、乙氧羰基氧基、叔丁氧羰基氧基、芐氧羰基氧基等;低級烷基意指有1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷基，優(yōu)選包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、新戊基等;低級鏈烯基意指有2-6個碳原子的直鏈或支鏈烯基，優(yōu)選包括乙烯基、烯丙基、正丁烯基、異丁烯基和仲丁烯基;低級鏈炔基意指有2-6個碳原子的直鏈或支鏈炔基，優(yōu)選包括乙炔基、丙炔基和丁炔基等。
氮雜環(huán)烷基意指其中一個或多個碳原子被氮原子代替的環(huán)烷基，包括例如氮雜環(huán)丙基、氮雜環(huán)丁基、吡咯烷基、哌啶基、六亞甲基亞氨基等。環(huán)烷基意指有3-8個碳原子的環(huán)烷基，優(yōu)選包括環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基等。含有氧原子、氮原子或硫原子等雜原子的3-7元雜環(huán)基的雜環(huán)的例子包括1-氮雜環(huán)丙烷、氮雜環(huán)丁烷、吡咯烷、哌啶、環(huán)氧乙烷、氧雜環(huán)丁烷、氧雜環(huán)戊烷、四氫吡喃、硫雜丙環(huán)、thietane、thiolane、thiane等。位于未取代或取代低級烷基、低級鏈烯基、低級鏈炔基、環(huán)烷基或含有氧、氮、硫等雜原子的3-7元雜環(huán)基上的取代基的例子包括羥基、氨基、鹵原子、氰基、烷氧基、巰基、?；被柞；?，位于環(huán)烷基或含有氧、氮、硫等雜原子的3-7元富馬酸雜環(huán)基上的其它取代基的例子包括烴基，如低級烷基、低級鏈烯基、低級鏈炔基、芳基、芳烷基等。
陰離子包括氯離子、溴離子、碘離子、羧酸鹽離子、磺酸鹽離子等。可用于成鹽的酸包括無機酸(如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸等)或有機酸(如乙酸、草酸、馬來酸、富馬酸、琥珀酸、甲烷磺酸等)。
本發(fā)明化合物(Ⅰ)可通過例如將式(Ⅱ)化合物進行氧化反應(yīng)，并根據(jù)需要進一步進行烷基化反應(yīng)和去保護反應(yīng)而制得
其中R1、R2、R3、R4和Y的定義同前。
可用于上述氧化反應(yīng)的氧化劑包括金屬氧化劑(如鉻酸、氧化鎂等)或利用有機化合物的氧化劑(如二甲基亞砜等)。烷基化反應(yīng)可在有或沒有堿的情況下在惰性溶劑中利用烷基化劑(如烷基鹵、丙烯酸衍生物等)來完成。適用的堿包括金屬堿(如氫化鈉、醇鈉、醇鉀、烷基鋰、碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鉀或氫氧化鈉)或有機堿(如三乙胺、三甲胺、二異丙基乙胺或吡啶)?？墒褂玫亩栊匀軇┌状?、乙醇、丙醇、氯仿、二氯甲烷、乙醚、四氫呋喃、N，N-二甲基甲酰胺等。烷基鹵的烷基為有1-6個碳原子的碳鏈，它可以有支鏈并可以包含不飽和鍵或羥基、氨基、鹵原子、氰基、烷氧基、巰基、甲酰基等取代基，可使用的烷基鹵如包含上述烷基的氯化物、溴化物或碘化物，可使用的丙烯酸衍生物如丙烯酸、丙烯酸酯、丙烯腈、丙烯醛等。
由于已通過實驗證實本發(fā)明式Ⅰ化合物不同于EM-523，其活性在酸性條件下不下降，且在口服組藥后具有很強的腸蠕動刺激作用，因此，該化合物尤其可用作哺乳動物消化道的收縮能動性刺激劑。
下面通過實施例詳細說明本發(fā)明化合物的制備方法，但無論如何本發(fā)明并不僅限于這些實施例。
實施例1在冰冷卻下，向25g2′-0-乙?；?4″-0-甲?；?8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物1)〔文獻J.Tadenier，dtal.，TounnalofOrganicChemistry，39，2495(1974)〕、24.6ml二甲基亞砜和19.7g二環(huán)己基碳化二亞胺的400ml二氯甲烷溶液中加入18.4g三氟乙酸吡啶翁。所得混合物于室溫下攪拌4小時，然后過濾掉不溶物質(zhì)，濾液用水洗滌，于無水硫酸鈉上干燥。并蒸餾掉溶劑。經(jīng)硅膠柱層析〔展層劑氯仿-甲醇-濃氨水(30∶1∶0.1)〕純化所得殘渣后，得到16.8g(產(chǎn)率67%)2′-0-乙?；?4″-0-甲?；?11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物2)，為白色粉末。
實施例2在冰冷卻及攪拌條件下，向15.8g化合物2的300mlN，N-二甲基甲酰胺溶液中加入1.20g60%氫化鈉，并在攪拌20分鐘后加入2.5ml甲基碘。將混合物攪拌2小時后，加入碳酸氫鈉飽和水溶液，并用乙酸乙酯萃取。用水和飽和鹽水洗滌有機層后，于無水硫酸鈉上干燥，然后蒸餾掉溶劑。所得殘渣溶于150ml甲醇，向該溶液中加入10ml碳酸氫鈉飽和水溶液，于室溫下攪拌過夜。反應(yīng)溶液經(jīng)氯仿萃取、飽和鹽水洗滌和無水硫酸鈉干燥后，蒸餾掉溶劑。所得殘渣經(jīng)硅膠柱層析〔展層溶劑氯仿-甲醇-濃氨水(60∶1∶0.1)〕純化后，產(chǎn)生7.4g(產(chǎn)率51%)12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物3)，為白色粉末。
實施例3將6.9g化合物3和3.9g乙酸鈉的90ml80%甲醇/水溶液加熱至50℃，并在攪拌下向溶液中加入3.6g碘。將混合物于室溫下攪拌2小時，同時通過加入適量IN氫氧化鈉水溶液將pH值維持在8-9。將反應(yīng)溶液例入含有7ml濃氨水的350ml水中，經(jīng)氯仿萃取、無水硫酸鈉干燥后蒸餾掉溶劑。通過硅膠柱層析〔展層溶劑氯仿-甲醇-濃氯水(40∶1∶0.1)〕純化所得殘渣層，得到5.21g(產(chǎn)率77%)脫(N-甲基)-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物4)，為白色粉末。
實施例4向160mg化合物4的5ml甲醇溶液中加入290mg二-異丙基乙胺和1.4g乙基碘，并于40℃攪拌20小時。蒸餾掉溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。氯仿溶液于無水硫酸鈉上干燥后蒸餾掉溶劑。通過硅膠柱層析〔展層劑氯仿-甲醇-濃氨水(80∶1∶0.1)〕純化所得殘余物后，得到105mg(產(chǎn)率63%)乙基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物5)，為白色粉末。
實施例5向485mg化合物4的10ml甲醇溶液中加入877ml二一異丙基乙胺和4.62g異丙基碘，然后于60℃攪拌5天。蒸餾掉溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。于無水硫酸鈉上干燥氯仿溶液后，蒸餾掉溶劑。通過硅膠柱層析〔展層劑氯仿-甲醇-濃氨水(100∶1∶0.1)〕純化所得殘余物后，得到262mg(產(chǎn)率50%)異丙基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物6)，為白色粉末。
實施例6向250mg化合物4的4ml甲醇溶液中加入453mg二-異丙基乙胺和2.38g1-碘代丙烷，并于50℃攪拌1天。蒸餾掉溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。于無水硫酸鈉上干燥氯仿溶液后，蒸餾掉溶劑。通過硅膠柱層析〔展層劑氯仿-甲醇-濃氨水(150∶1∶0.1)〕純化殘余物后，得到170mg(產(chǎn)率64%)丙基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物7)，為白色粉末。
實施例7向250mg化合物4的4ml甲醇溶液中加入59mg碳酸氫鈉和0.050ml烯丙基溴，然后于40℃攪拌過夜。蒸餾掉溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。于無水硫酸鈉上干燥氯仿溶液后蒸餾溶劑。通過硅膠柱層析〔展層劑氯仿-甲醇-濃氨水(150∶1∶0.1)〕純化所得殘余物后，得到156mg(產(chǎn)率59%)烯丙基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-無水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物8)，為白色粉末。
實施例8向250mg化合物4的4ml甲醇溶液中加入59mg碳酸氫鈉和0.034ml炔丙基溴，然后于50℃攪拌2小時。蒸餾掉溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。于無水硫酸鈉上干燥氯仿溶液后，蒸餾掉溶劑。通過硅膠柱層析〔展層劑氯仿-甲醇-濃氨水(150∶1∶0.1)〕純化所得殘余物后，得到105mg(產(chǎn)率40%)炔丙基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物9)，為白色粉末。
實施例9向250mg化合物4的4ml甲醇溶液中加入453mg二-異丙基乙胺和1.41g4-溴-1-丁烯，并于50℃攪拌1天。蒸餾掉溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。于無水硫酸鈉上干燥氯仿溶液，并蒸餾掉溶劑。通過硅膠柱層析〔展層劑氯仿-甲醇-濃氨水(150∶1∶0.1)〕純化所得殘余物后，得到152mg(產(chǎn)率56%)3-丁烯基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物10)，為白色粉末。
實施例10向250mg化合物4的4ml甲醇溶液中加入453mg二-異丙基乙胺和1.75g溴乙醇，并于50℃攪拌1天。蒸餾掉溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。于無水硫酸鈉上干燥氯仿溶液，并蒸餾掉溶劑。通過硅膠柱層析〔展層劑氯仿-甲醇-濃氨水(80∶1∶0.1)〕純化所得殘余物后，得到205mg(產(chǎn)率77%)2-羥基乙基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物11)，為白色粉末。
實施例11將270mg化合物4的3ml丙烯腈溶液加熱回流3小時，蒸餾掉溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用碳酸氫鈉飽和水溶液和飽和鹽水洗滌。于無水硫酸鈉上干燥氯仿溶液，并蒸餾掉溶劑。所得殘余物經(jīng)硅膠柱層析〔展層劑氯仿-甲醇-濃氨水(200∶1∶0.1)〕純化后，得到189mg(產(chǎn)率65%)2-氰基乙基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物12)，為白色粉末。
實施例12將75ml無水甲醇置于反應(yīng)器中，其中的空氣用氮氣清除20分鐘。然后向該溶液中加入161mg金屬鈉，并在鈉溶于其中時開始用冰冷卻溶液。接著向混合物中加入1.0g化合物4和1.78g碘。在氮氣環(huán)境下攪拌4小時后，將反應(yīng)溶液例入其中已加入3.0g硫化硫酸鈉和2.5ml濃氨水的300ml水中?；旌衔镆月确螺腿　柡望}水洗滌和無水硫酸鈉干燥層，蒸餾掉溶劑。所得殘余物經(jīng)硅膠柱層析〔展層劑氯仿-甲醇-濃氨水(50∶1∶0.1)〕純化后，得到890mg(產(chǎn)率90%)雙-〔脫(N-甲基)〕-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物13)，為白色粉末。
實施例13向700mg化合物13的10ml甲醇溶液中加入336mg碳酸氫鈉和3.1g乙基碘，然后于50℃攪拌6小時。蒸餾掉溶劑后，反應(yīng)溶液用氯仿稀釋，并用水和飽和鹽水洗滌。于無水硫酸鈉上干燥氯仿溶液，并蒸餾掉溶劑。通過硅膠柱層析〔展層劑氯仿-甲醇-濃氨水(120∶1∶0.1)〕純化所得殘余物后，得到74mg(產(chǎn)率10%)二乙基-二降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物14)，為白色粉末，和172mg(產(chǎn)率24%)乙基-二降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物15)，為白色粉末。
實施例14向995mg化合物13的20ml甲醇溶液中加入3.67g二-異丙基乙胺和1.72g烯丙基溴，并于50℃攪拌10小時，蒸餾掉溶劑后，反應(yīng)溶液用氯仿稀釋并用水和飽和鹽水洗滌。氯仿溶液于無水硫酸鈉上干燥，并蒸餾掉溶劑。通過硅膠柱層析〔展層劑氯仿-甲醇-濃氨水(200∶1∶0.1)〕純化所得殘渣后，得到490mg(產(chǎn)率44%)二烯丙基-二降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物16)，為白色粉末。
實施例15向440mg化合物13的10ml甲醇溶液中加入158mg碳酸氫鈉和0.11ml烯丙基溴，然后于50℃攪拌3小時。蒸餾掉溶劑后，反應(yīng)溶液用氯仿稀釋，并用水和飽和鹽水洗滌。于無水硫酸鈉上干燥氯仿溶液，并蒸餾掉溶劑。通過硅膠柱層析〔展層劑氯仿-甲醇-濃氨水(100∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到80mg(產(chǎn)率17%)烯丙基-二降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物17)，為白色粉末。
實施例16將180mg化合物6和98mg乙酸鈉的3ml80%甲醇/水溶液加熱至50℃，并在攪拌下向溶液中加入91mg碘，混合物于該溫度下攪拌2小時，同時通過加入適量IN氫氧化鈉水溶液將其pH值維持在8-9。將反應(yīng)溶液倒入含有1ml濃氨水的20ml水中，經(jīng)氯仿萃取、無水硫酸鈉干燥后，蒸餾掉溶劑。經(jīng)硅膠柱層析〔展層劑氯仿-甲醇-濃氨水(80∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到70mg(產(chǎn)率40%)異丙基-二降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物18)，為白色粉末。
實施例17向250mg化合物3的3ml氯仿溶液中加入0.096ml甲基碘，并將混合物于室溫下攪拌4小時，蒸餾掉溶劑后，向殘余物中加入乙醚以產(chǎn)生沉淀，將其過濾。經(jīng)乙醚洗滌和干燥沉淀物后得到206mg(產(chǎn)率69%)12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮甲基碘(化合物19)，為白色粉末。
實施例18向250mg化合物3的3ml氯仿溶液中加入0.21ml炔丙基溴，并將混合物于室溫下攪拌6小時。蒸餾掉溶劑后，向殘余物中加入乙醚以產(chǎn)生沉淀，并將其過濾。沉淀物用乙醚洗滌后通過硅膠柱層析〔展層劑氯仿-甲醇-濃氨水(10∶1∶0.1)〕純化，產(chǎn)生198mg(產(chǎn)率68%)12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮炔丙基溴(化合物20)，為白色粉末。
實施例19于冰冷卻和攪拌條件下，向694mg化合物3的10ml氯仿溶液中加入0.30ml吡啶和0.30ml乙酸酐?；旌衔镌诒鋮s下攪拌15分鐘，然后于室溫下攪拌1小時，接著加入碳酸氫鈉飽和水溶液，并用氯仿萃取。氯仿溶液經(jīng)飽和鹽水洗滌后，于無水硫酸鈉上干燥，然后蒸餾掉溶劑。將所得殘余物與0.73ml二甲基亞砜和588mg二環(huán)已基碳化二亞胺混合，并將混合物溶于10ml二氯甲烷，于冰冷卻下向所得溶液中加入550mg氟乙酸吡啶鎓，將該溶液于室溫下攪拌4小時，并過濾掉不溶物質(zhì)。濾液用水洗滌后用無水硫酸鈉干燥，并蒸餾掉溶劑。通過硅膠柱層析〔展層劑氯仿-甲醇-濃氨水(200∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到428mg(產(chǎn)率58%)2′-0-乙?；?12-0-甲基-4″，11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物21)，為白色粉末。
實施例20.;在室溫下，將化合物21(383mg)于5ml甲醇中的溶液攪拌20小時，蒸除溶劑后，經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(200∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到294mg(產(chǎn)率81%)12-0-甲基-4″，11-二氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物22)的白色粉末。
實施例21向化合物2(2.15g)于30ml甲醇的溶液中加入3ml碳酸氫鈉飽和水溶液，接著在室溫下攪拌過夜。用氯仿萃取反應(yīng)溶液，用飽和鹽水洗滌并用無水硫酸鈉干燥，然后蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(70∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到1.84g(產(chǎn)率93%)11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物23)的白色粉末。
實施例22將化合物23(656mg)和377mg乙酸鈉于10ml80%甲醇/水中的溶液加熱至50℃，在攪拌下，將350mg碘加到溶液中。在該溫度下將混合物攪拌2小時，同時經(jīng)加入適量的IN氫氧化鈉水溶液使其pH保持在8-9，將反應(yīng)溶液倒入50ml含有3ml濃氨水的水中，用氯仿萃取，用無水硫酸鈉干燥，然后蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(30∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到428mg(產(chǎn)率66%)脫(N-甲基)-11-氧化-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物24)的白色粉末。FAB-MSm/z701(MH+)。
向化合物24(205mg)于5m甲醇的溶液中加入378mg二異丙基乙胺和1.83g乙基碘，接著在40℃下攪拌20小時，蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，然后蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(60∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到139mg(產(chǎn)率65%)乙基-降-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物25)的白色粉末。
實施例23向化合物24(428mg)于7ml甲醇的溶液中加入790mg二異丙基乙胺和4.16g異丙基碘，接著在60℃下攪拌5天。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，然后蒸除溶劑，經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(100∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到290mg(產(chǎn)率64%)異丙基-降-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物26)的白色粉末。
實施例24向化合物23(383mg)于4ml氯仿的溶液中加入0.34ml炔丙基溴，并在室溫下將混合物攪拌6小時。蒸除溶劑后，將乙醚加到殘余物中，濾除所形成的沉淀物。用乙醚洗滌沉淀物，然后經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(10∶1∶0.1)〕純化，得到251mg(產(chǎn)率56%)11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮炔丙基溴
化合物27實施例25向化合物4(300mg)于5ml甲醇的溶液中加入597mg二異丙基乙胺和456mg3-氯-1-丁烯，接著在60℃下攪拌40小時，蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(200∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到81mg(產(chǎn)率25%)2-(3-丁烯基)-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物28)的白色粉末。
向化合物4(300mg)于5ml乙腈的溶液中加入543mg二異丙基乙胺和423mg2-(1，3-二氟丙基)三氟甲磺酸酯，接著在50℃下攪拌30分鐘。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(250∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到167mg(產(chǎn)率50%)2-(1，3-二氟丙基)-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物29)的白色粉末。
實施例27向化合物4(200mg)于5mlN，N-二甲基甲酰胺的溶液中加入362mg二異丙基乙胺，1.0g1-溴-2-氟乙烷和420mg碘化鈉，接著在80℃下攪拌11小時。用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥乙酸乙酯溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(250∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到133mg(產(chǎn)率63%)2-氟乙基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物30)的白色粉末。
化合物30實施例28向化合物4(250mg)于4ml甲醇的溶液中加入0.11ml環(huán)丁酮和53mg氰基氫硼化鈉，接著在室溫下攪拌過夜。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(150∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到192mg(產(chǎn)率71%)環(huán)丁基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物31)的白色粉末。
實施例29向化合物4(350mg)于6ml甲醇的溶液中加入0.19ml環(huán)戊酮和74mg氰基氫硼化鈉，接著在室溫下攪拌1天。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(150∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到250mg(產(chǎn)率65%)環(huán)戊基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物32)的白色粉末。
實施例30向化合物4(278mg)于6ml甲醇的溶液中加入144mg四氫呋喃-3-酮和59mg氰基氫硼化鈉，接著在室溫下攪拌過夜。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(150∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到177mg(產(chǎn)率58%)3-四氫呋喃基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物33)的白色粉末。
實施例31向化合物4(200mg)于5ml甲醇的溶液中加入246mg四氫噻吩-3-酮和84mg氰基氫硼化鈉，接著在室溫下攪拌2天。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑，經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(230∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到146mg(產(chǎn)率65%)3-四氫噻吩基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物34)的白色粉末。
實施例32向化合物4(478mg)于10ml甲醇的溶液中加入682mg1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷-3-酮和101mg氰基氫硼化鈉，接著在室溫下攪拌過夜。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(250∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到667mg(定量產(chǎn)率)3-(1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷基)-降-12-0-甲基-11氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物35)的白色粉末。
實施例33向化合物35(235mg)于6ml乙酸的溶液中加入50mgPearlman氏催化劑，接著在氫氣環(huán)境下在室溫下攪拌過夜。濾除催化劑后，用二氯甲烷稀釋反應(yīng)熔液，并用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥二氯甲烷溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(10∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到87mg(產(chǎn)率41%)3-氮雜環(huán)丁基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物36)的白色粉末。
實施例34向化合物4(250mg)于5ml甲醇的溶液中加入200mg3-氧雜環(huán)丁酮和53mg氰基氫硼化鈉，接著在室溫下攪拌2.5小時。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(150∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到120mg(產(chǎn)率44%)3-氧雜環(huán)丁基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物37)的白色粉末。
化合物37實施例35向化合物4(205mg)于5ml乙腈的溶液中加入297mg二異丙基乙胺和650mg2，2，2-三氟乙基三氟甲碘酸酯，接著在50℃下攪拌過夜。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(200∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到132mg(產(chǎn)率57%)2，2，2-三氟乙基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物38)的白色粉末。
實施例36向化合物4(300mg)于7ml甲醇的溶液中加入543mg二異丙基乙胺和3.09g2-碘丁烷，接著在60℃下攪拌4天。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(150∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到63mg(產(chǎn)率20%)2-丁基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物39)的白色粉末。
實施例37向化合物4(200mg)于4ml甲醇的溶液中加入0.26ml新戊醛和84mg氰基氫硼化鈉，接著在室溫下攪拌40小時，蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展并劑氯仿-甲醇-濃氨水(200∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到128mg(產(chǎn)率58%)2，2-二甲基丙基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物40)的白色粉末。
實施例38向化合物4(250mg)于6ml乙腈的溶液中加入452mg二異丙基乙胺和2.84gN-(2-溴乙基)苯鄰二甲酰亞胺，接著在50℃下攪拌1天。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(100∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到190mg(產(chǎn)率61%)2-(N-鄰苯二甲酰亞胺基)乙基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物41)的白色粉末。
向化合物41(190mg)于3ml甲醇的溶液中加入1ml40%甲胺-甲醇溶液，接著在室溫下攪拌2小時，蒸除溶劑扣，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑，經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(15∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到114mg(產(chǎn)率70%)2-氨乙基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物42)的白色粉末。
實施例39向化合物4(200mg)于5ml乙腈的溶液中加入362mg二異丙基乙胺和777mgα-氯丙酮，接著在室溫下攪拌過夜。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(60∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到196mg(產(chǎn)率91%)2-氧代丙基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物43)的白色粉末。
化合物43實施例40向化合物43(175mg)于3ml甲醇的溶液中加入30mg氫硼化鈉，與此同時用冰冷卻，接著在室溫下攪拌7小時，蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(70∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到132mg(產(chǎn)率75%)2-羥丙基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮9化合物44)的白色粉末。
實施例41向化合物4(191mg)于4ml乙脯和4ml甲醇混合物的溶液中加入346mg二異丙基乙胺和750mg2-氯乙酰胺，接著在50℃下攪拌過夜。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(60∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到141mg(產(chǎn)率68%)2-乙酰胺基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物45)的白色粉末。
實施例42向化合物4(605mg)于6mlN，N-二甲基甲酰胺的溶液中加入1.09g二異丙基乙胺和3.48g異丁基溴，接著在50℃下攪拌1天。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇(300∶1)〕純化所得殘余物，得到310mg(產(chǎn)率47%)異丁基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物46)的白色粉末。
化合物46實施例43向化合物13(200mg)于7ml甲醇的溶液中加入384mgα，α′-二氟丙酮和180mg氰基氫硼化鈉，接著在室溫下攪拌1天。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(250∶1∶0.1)〕純掄所得殘余物，得到143mg(產(chǎn)率64%)2-(1，3-二氟丙基)-二降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮9化合物47)的白色粉末。
實施例44向化合物13(400mg)于10ml甲醇的溶液中加入492mg3-戊酮和108mg氰基氫硼化鈉，接著在室溫下攪拌過夜。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(75∶1∶0.1)〕純化殘余物，得到194mg(產(chǎn)率44%)3-戊基-二降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物48)的白色粉末。
向化合物48(194mg)于6ml乙脯的溶液中加入216mg甲醛溶液，40mg氰基氫硼化鈉和1滴乙酸，接著在室溫下攪拌1小時，蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(150∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到154mg(產(chǎn)率78%)3-戊基-降-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物49)的白色粉末。
實施例45向化合物13(500mg)于5mlN，N-二甲基甲酰胺的溶液中加入461mg二異丙基乙胺和2.4g1，5-二溴戊烷，接著在50℃下攪拌過夜。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇(300∶1)〕純化所得殘余物，得到184mg(產(chǎn)率33%)脫(二甲氨基)-3′-哌啶子基-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物50)的白色粉末。
實施例46向化合物13(400mg)于5mlN，N-二甲基甲酰胺的溶液中加入369mg二異丙基乙胺和1.85g1，4-二溴丁烷，接著在50℃下攪拌過夜。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(60∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到124mg(產(chǎn)率29%)脫(二甲氨基)-3′-吡咯烷-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物51)的白色粉末。
實施例47向化合物22(500mg)于10ml甲醇的溶液中加入531mg乙酸銨和86mg氰基氫硼化鈉，接著在室溫下攪拌1天，蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(40∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到123mg(產(chǎn)率25%)4″-脫氧-4″-氨基-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物52)的白色粉末。
化合物52實施例48向化合物22(200mg)于10ml甲醇的溶液中加入96mg鹽酸羥胺，接著在室溫下攪拌1天。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。經(jīng)硅膠柱色譜〔展開劑氯仿-甲醇-濃氨水(40∶1∶0.1)〕純化所得殘余物，得到109mg(產(chǎn)率53%)4″-脫氧-4″-肟基-12-0-甲基-11-氧代-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物53)的白色粉末。
實施例49用冰冷卻下，向化合物24(4.90克)在80毫升1，2-二氯乙烷中的溶液中加入8.5克二甲氨基吡啶和8.0毫升芐氧羰基氯，再攪拌1小時，并在室溫下另攪拌19小時。向此反應(yīng)溶液中加水，然后用二氯甲烷萃取，并用飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥二氯甲烷溶液，并蒸除溶劑。以硅膠柱色譜法提純殘液〔展開溶劑氯仿-甲醇(70∶1)〕，得到1.38克(收率18%)N-脫甲基-2′-0，4″-0，3′-N-三(芐氧羰基)-11-氧-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物54)白色粉末。
用冰冷卻下，向化合物54(600毫克)在10毫升N，N-二甲基甲酰胺中的溶液中加入33毫克氫化鈉。攪拌該混合物15分鐘，并向其中添加0.085毫升乙基碘，然后攪拌1小時。向該反應(yīng)溶液中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，然后用乙酸乙酯萃取。用水和飽和鹽水洗滌此乙酸乙酯溶液，然后用無水硫酸鈉干燥，并蒸除溶劑。用硅膠柱色譜法〔展開溶劑氯仿-甲醇(100∶1)〕提純此殘液，得到305毫克(收率53%)N-脫甲基-2′-0，4″-0，3′-N-三(芐氧羰基)-12-0-乙基-11-氧-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物55)白色粉末。
向化合物55(300毫克)在8毫升乙醇中的溶液中加入50毫克10%鈀-碳，室溫氫氣氛下攪拌該混合物過夜。其后向該混合物中加入228毫克甲醛溶液，然后在氫氣氛下攪拌6小時，過濾該反應(yīng)溶液并蒸除溶劑。用硅膠柱色譜法〔展開溶劑氯仿-甲醇-濃氨水(40∶1∶0.1)〕提純所得殘液，得到146毫克(收率74%)12-0-乙基-11-氧-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物56)白色粉末。
實施例50用冰冷卻下，向化合物54(219毫克)在3毫升N，N-二甲基甲酰胺中的溶液中加入12毫克氫化鈉。攪拌該混合物15分鐘，并向其中加入0.047毫升芐基溴，攪拌1小時。向反應(yīng)溶液中加入碳酸氫鈉飽和水溶液，然后用乙酸乙酯萃取。用水和飽和鹽水洗滌該乙酸乙酯溶液，然后用無水硫酸鈉干燥，并蒸除溶劑。用硅膠柱色譜法〔展開溶劑乙酸乙酯-正己烷(1∶2)〕提純所得殘液，得到179毫克(收率75%)N-脫甲基-2′-0，4″-0，3′-N-三(芐氧羰基)-12-0-芐基-11-氧-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物57)白色粉末。
向化合物57(175毫克)在4毫升乙醇中的溶液中加入27毫克10%鈀-碳，并在室溫氫氣氛下攪拌該混合物過夜。其后向該混合物中加入71毫克甲醛溶液，然后在氫氣氛下攪拌8小時。過濾反應(yīng)溶液，并蒸除溶劑。用硅膠柱色譜〔展開溶劑氯仿-甲醇-濃氨水(70∶1∶0.1)〕提純所得殘液，得到121毫克(定量產(chǎn)量)12-0-芐基-11-氧-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物58)白色粉末。
實施例51用冰冷卻下，向化合物54(264毫克)在3毫升N，N-二甲基甲酰胺中的溶液中加入19毫克氫化鈉。攪拌該混合物15分鐘，向其中加入0.070毫升正丙基碘，再攪拌2小時。向反應(yīng)溶液中加入碳酸氫鈉飽和水溶液，然后用乙酸乙酯萃取。用水和飽和鹽水洗滌乙酸乙酯溶液，然后用無水硫酸鈉干燥，并蒸除溶劑。用硅膠柱色譜法〔展開溶劑乙酸乙酯-正己烷(1∶2)〕提純所得殘液，得到133毫克(收率48%)N-脫甲基-2′-0，4″-0，3′-N-三(芐氧羰基)-12-0-丙基-11-氧-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物59)白色粉末。
向化合物59(133毫克)在4毫升乙醇中的溶液中加入20毫克10%鈀-碳，并在室溫氫氣氛下攪拌該混合物過夜。其后向該混合物中加入96毫克甲醛溶液，然后在氫氣氛下攪拌5小時。過濾該反應(yīng)溶液，并蒸除溶劑。用硅膠柱色譜法〔展開溶劑氯仿-甲醇-濃氨水(70∶1∶0.1)〕提純化所得殘液，得到80毫克(收率91%)12-0-丙基-11-氧-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物60)白色粉末。
實施例52向化合物6(10.5克)在70毫升二氯甲烷中的溶液中加入4.5毫升吡啶和2.6毫升乙酸酐，再在室溫下攪拌2小時。向該反應(yīng)溶液中加入碳酸氫鈉飽和水溶液，然后用二氯甲烷萃取。用無水硫酸鈉干燥此二氯甲烷熔液，然后蒸除溶劑。用硅膠柱色譜法〔展開溶劑氯仿-甲醇(250∶1)〕提純所得殘液，得到8.5克(收率76%)異丙基-降-2′-0-乙?；?12-0-甲基-11-氧-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物61)白色粉末。
實施例53向化合物61(8.5克)在70毫升二氯甲烷中的溶液中加入5.20克二甲氨基吡啶和6.33克1，1′0硫代羰基二咪唑，再在室溫下攪拌3天。向該反應(yīng)溶液中加入3毫升濃氨水，并攪拌15分鐘，其后向該溶液中加入二氯甲烷，然后用碳酸氫鈉飽和水溶液洗滌該溶液。用無水硫酸鈉干燥有機層，并蒸除溶劑。用硅膠柱色譜法〔展開溶劑氯仿-甲醇(400∶1)〕提純所得殘液得到7.50克(收率77%)異丙基-降-2′-0-乙酰基-4″-0-硫代羰基咪唑基-12-0-甲基-11-氧-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物62)白色粉末。
將化合物62(350毫克)，243毫克氫化三苯基錫和13毫克α，α′-偶氮二(異丁腈)在7毫升甲苯中的溶液加熱回流2小時。向該反應(yīng)溶液中加入碳酸氫鈉飽和水溶液，然后用乙酸乙酯萃取。用無水硫酸鈉干燥此乙酸乙酯溶液，并蒸除溶劑。用硅膠柱色譜法〔展開溶劑乙酸乙酯-正己烷(1∶2)〕提純所得殘液，得到156毫克(收率52%)異丙基-降-2′-0-乙?；?4″-脫氧-12-0-甲基-11-氧-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物63)白色粉末。
將3毫升甲醇和0.5毫升二氯甲烷加入化合物63(153毫克)使其溶解，向該溶液中加入0.3毫升碳酸氫鈉飽和水溶液，然后在室溫下攪拌過夜。向該反應(yīng)溶液中加水，然后用二氯甲烷萃取。用無水硫酸鈉干燥此二氯甲烷溶液，并蒸除溶劑。然后用硅膠柱色譜法〔展開溶劑氯仿-甲醇-濃氨水(100∶1∶0.1)〕提純所得殘液，得到129毫克(收率89%)異丙基-降-4″-脫氧-12-0-甲基-11-氧-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物64)白色粉末。
實施例54將化合物64(3，60克)和2.0克乙酸鈉在70毫升80%甲醇/水中的溶液加熱至55℃，并在攪拌下加入1.85毫克碘。在此溫度下攪拌此混合物，同時加入適宜量的IN氫氧化鈉水溶液使此溶液PH值保持在8-9。將反應(yīng)溶液倒入其中含3毫升濃氨水的50毫升水中，用氯仿萃取，用無水硫酸鈉干燥，然后蒸除溶劑。用硅膠柱色譜法〔展開溶劑氯仿-甲醇-濃氨水(15∶1∶0.1)〕提純所得殘液，得到712毫克(收率21%)脫(N-甲基)-4″-脫氧-12-0-甲基-11-氧-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物65)白色粉末。
向化合物65(430毫克)在10毫升乙醇中的溶液中加入528毫克甲醛溶液，0.070毫升乙酸和90毫克10%鈀-碳，并在室溫氫氣氛下攪拌此混合物1天。過濾該反應(yīng)溶液，蒸除溶劑，向所得殘液中加入碳酸氫鈉飽和水溶液，再用二氯甲烷萃取。用無水硫酸鈉干燥此二氯甲烷溶液并蒸除溶劑。用硅膠柱色譜法〔展開溶劑氯仿-甲醇-濃氨水(100∶1∶0.1)〕提純所得殘液，得到327毫克(收率74%)4″-脫氧-12-0-甲基-11-氧-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物66)白色粉末。
實施例55向化合物65(278毫克)在5毫升甲醇中的溶液中加入0.56毫升二異丙基乙胺和0.19毫升乙基碘，再在室溫下攪拌5天。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥此氯仿溶液，并蒸除溶劑。用硅膠柱色譜法〔展開溶劑氯仿-甲醇-濃氨水(100∶1∶0.1)〕提純所得殘液，得到149毫克(收率51%)乙基-降-4″-脫氧-12-0-甲基-11-氧-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物67)白色粉末。
實施例56向化合物65(591毫克)在10毫升甲醇中的溶液中加入1.09克二異丙基乙胺和6.23克2-碘丁烷，在50℃下攪拌4天。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋反應(yīng)溶液，并用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥氯仿溶液，并蒸除溶劑。用硅膠柱色譜法〔展開溶劑氯仿-甲醇(400∶1)〕提純所得殘液，得到261毫克(收率40%)2-丁基-降-4″-脫氧-12-0-甲基-11-氧-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮(化合物68)白色粉末。
實施例57將化合物6(187毫克)和富馬酸(28.5毫克)溶于0.3毫升熱甲醇中得到溶液。向該溶液中加入異丙醇(1.0毫升)，所得混合物于室溫下結(jié)晶分離。過濾收取晶體得到異丙基-降-12-0-甲基-11-氧-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮富馬酸酯-水合物(化合物69)無色針雛晶。熔點135-137℃。
元素分析(C42H73NO15)計算值(%)C60.63，H8.84，N1.68實測值(%)C60.67，H8.78，N1.71
實施例58將化合物6(100毫克)和琥珀酸(15.6毫克)溶于0.3毫升熱甲醇中得到溶液。向該溶液中加入異丙醇(1.0毫升)，所得混合物在室溫下結(jié)晶分離。過濾收取晶體得到異丙基-降-0-甲基-11-氧-8，9-脫水紅霉素A6，9-半縮酮琥珀酸酯(化合物70)無色針雛晶。熔點115-121℃。
表1-1和1-2列出了上述實施例1-58中獲得的化合物2-70(但不包括化合物24，41，48，54，55，57，59，61-63和65)的多種物理性能試驗值。
測試?yán)?按下文所述方式進行胃動素受體結(jié)合試驗，〔V.Bormans等，《Regul.Peptides》15，143(1986)〕。
從死兔體內(nèi)取出十二指腸，從肌層分離其粘膜，然后在-50毫摩爾的Tris溶液(PH7.4)中均化，制備蛋白質(zhì)溶液。25℃下將25PM125I標(biāo)記的胃功素(購自O(shè)htsuka Assay實驗室)和蛋白質(zhì)溶液溫育120分鐘，然后用γ-射線計數(shù)器測定蛋白質(zhì)的放射性，未加胃動素與加有過量(1×10-7m)胃動素所測放射性之間的差值定義為比結(jié)合能力。樣品效能表示為IC50(M)，各試驗藥物使比結(jié)合能力降低至50%的濃度。將試驗藥物溶于DMSO溶液中并加入蛋白質(zhì)溶液中(DMSO最終濃度1%)。在考察耐酸性的試驗中，將試驗藥物溶于鹽酸溶液(pH2.5)，室溫下停放120分鐘，然后再加至蛋白質(zhì)溶液中進行試驗。
試驗結(jié)果為，化合物6在DMSO溶液中的IC50(M)值為4.1×10-9，EM-523的IC50值為2.6×10-9，此兩種試驗藥物的放射性為同一數(shù)量級。在鹽酸溶液中，EM-523的IC50(M)值為2.6×10-7，放射性比在DMSO溶液中降低了1%，而化合物6的IC50(M)值為9.1×10-9，與在DMSO溶液中的試驗值稍有不同。上述事實證明，化合物6受酸作用分解的可能性低于EM-523。
測試?yán)?根據(jù)前面介紹的方法測試狗胃腸蠕動性〔Itoh，Zen，JournaloftheSmoothMuscleResearch，13，33(1076)〕。給重約10kg的Besgle犬靜脈注射(i.v.)戊巴比妥鈉使其麻醉，并在無菌條件下打開其腹腔。將腹腔外力傳感器縫在胃竇(胃)，十二指腸及空腸的漿膜上，以測試環(huán)肌收縮，另外，將Silastic管(Frenchsize6.5，DowCorning，Misland，MI，U.S.A.)置于胃內(nèi)，向胃部將試驗藥物直接給藥。外力傳感器的導(dǎo)線與Silastic管引出腹腔并通過肩突之間做成的皮膚切口。手術(shù)后，將狗關(guān)在單獨的試驗籠中，每日投喂市售狗食一次。
腸胃運動活性記錄在熱量筆式記錄儀(WR-3101。Graphtec，Tokyo，Japan)上，傳感器的導(dǎo)線連接在放大器(UG-5，NihonKohden，Tokyo，Japan)的連接電纜上。手術(shù)后約兩周，可將腸胃收縮活性大致分為兩類活性類型，消化與消化間狀態(tài)。在消化間狀態(tài)，觀察到IMC(消化間遷移收縮)在胃竇中以100-120分鐘有規(guī)律的間隔出現(xiàn)，并以恒定速度遷移通過十二指腸和空腸。在所有動物中，進食都使有規(guī)律的IMC狀態(tài)中斷。在消化間狀態(tài)進行試驗。在胃竇中的IMC結(jié)束后15分鐘，將3毫升的試驗藥物經(jīng)置于胃內(nèi)的Silastic管直接注入胃中，將試驗藥物溶于乙醇，然后用0.9%生理鹽水稀釋。
為了定量測試蠕動性，將每100分鐘由胃竇發(fā)出的信號傳送至一臺個人微機(PC-9801，NEC，Tokyo，Japan)。計算收縮波與基線包圍的面積，亦即某一設(shè)定期間段的波幅(電壓)與時間的乘積，假設(shè)消化間遷移收縮的最大收縮(波幅)持續(xù)1分鐘進行計算，表示為面積百分數(shù)，并用作運動指數(shù)(MI)(見Inatomi等，“J.Pharmacol.Exp.Thet”251，707(1989)〕。按此方式計算出的自然出現(xiàn)在胃竇中的MI為約100-200。因此，使MI為150所需的試驗藥物劑量定義為MI150，用作試驗藥物的刺激作用指數(shù)或胃蠕動指數(shù)。
EM-523和化合物6向胃內(nèi)給藥，提高了腸胃收縮活性，它們的MI150值分別為14.6μg/kg和3.8μg/kg?；衔?對胃竇內(nèi)潛在收縮活性的影響與EM-523相比是其4倍以上。
工業(yè)實用性本發(fā)明的紅霉素衍生物具有腸蠕動刺激作用，其特征在于酸分解程度顯著低于現(xiàn)有技術(shù)中公知的紅霉素衍生物。因此，即使是口服，本發(fā)明的紅霉素衍生物也幾乎不被胃酸分解，不同于公知的紅霉素衍生物，因而表現(xiàn)了很強的腸蠕動刺激作用。
權(quán)利要求
1.由以下通式[Ⅰ]表示的化合物及其鹽
式中R1是氫原子或?；?；R2和R3可相同或不同，分別表示氫原子、羥基、酰氧基或氨基，或相互結(jié)合表示=0或=NOR10，其中R10表示氫原子或低級烷基；R4表示氫原子或低級烷基；Y表示-NR5R6或-N+R7R8R9X-，其中R5、R6、R7、R8和R9可以相同或不同，分別表示氫原子或取代或非取代低級烷基、低級鏈烯基、低級鏈炔基、環(huán)烷基或含氧原子、氮原子或硫原子為一雜原子的3-7員雜環(huán)基，X表示一陰離子，其中R5和R6或R7和R8可以分別與相鄰氮原子一起形成一氮雜環(huán)烷基。
全文摘要
公開了由以下通式[I]表示的化合物及其鹽，這些化合物及其鹽被胃酸分解程度顯著低于現(xiàn)有技術(shù)中公知的紅霉素衍生物并具有優(yōu)異的腸蠕動刺激作用。通式中各取代基含義見說明書。
文檔編號A61K31/00GK1081184SQ9310646
公開日1994年1月26日 申請日期1993年5月26日 優(yōu)先權(quán)日1992年5月26日
發(fā)明者古賀弘, 佐藤勉, 高梨契典 申請人:中外制藥株式會社