專利名稱：旋光氨基香豆冉衍生物的晶體鹽及其制備和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及旋光的氨基香豆冉衍生物的晶體鹽，它們?cè)谒帉W(xué)上特別是在改善、治療和預(yù)防與腦中風(fēng)或顱損傷有關(guān)的大腦機(jī)能障礙方面特別有效。
因?yàn)橹愡^(guò)氧化物的形成及體內(nèi)有關(guān)的自由基反應(yīng)被發(fā)現(xiàn)通過(guò)膜障礙、酶障礙等對(duì)于活體有許多不利的影響，因而出現(xiàn)了各種抗氧化劑和脂類過(guò)氧化物形成抑制劑的藥學(xué)應(yīng)用的種種嘗試。
目前藥學(xué)上使用的主要的脂類過(guò)氧化物形成抑制劑是天然抗氧化劑如維生素C、維生素E等的衍生物以及酚類衍生物[Kenji Fukuzawa，Japanese Journal of Clinical Medicine Vol.46.pp2269-2276(1988)]，但是因?yàn)樗鼈兓钚匀趸蛴懈弊饔?，在?shí)際使用中均是不滿意的。
然而，本發(fā)明人公開(kāi)了以下述通式(A)表示的氨基香豆冉衍生物或其鹽，它們能有效地抑制脂類過(guò)氧化物的形成并且已經(jīng)提交了專利申請(qǐng)(EP-A-0483772)
其中R1和R2相同或不同，可以是氫原子，?；檠豸驶?，可任意取代的脂族基或可任意取代的芳基;R3、R4、R5相同或不同，為可任意?；牧u基，可任意取代的氨基，可任意取代的烷氧基或可任意取代的脂族基，或者R3、R4、R5中的兩個(gè)可以聯(lián)在一起形成任意取代的碳環(huán)基;R6和R7可相同或不同，為任意取代的脂族基，其條件是R6和R7中的至少一個(gè)在α-位上有亞甲基;R8和R9可相同或不同，并且是氫原子或可任意取代的脂族基或可任意取代的芳基。
在通式(A)表示的氨基香豆冉衍生物中，以通式(B)表示的5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃
作為微溶于水的游離形式在上述專利中被公開(kāi)。因其在分子結(jié)構(gòu)中有不對(duì)稱碳原子，所以該衍生物(B)有兩種旋光異構(gòu)體，即(R)構(gòu)型和(S)構(gòu)型。在上述公開(kāi)中，衍生物(B)作為上述對(duì)映體的混合物(外消旋體)被描述。但因其吸濕性并因此不穩(wěn)定，不適宜用作藥物制劑。另外，從活性、水溶性、穩(wěn)定性(儲(chǔ)存穩(wěn)定性)和其它方面看還沒(méi)有滿意的可注射的脂類過(guò)氧化物形成抑制劑。因此要求開(kāi)發(fā)這樣一種從上述各方面看均滿意的藥劑。
本發(fā)明人研究了解決上述問(wèn)題的方法，具體地說(shuō)，本發(fā)明人試圖從上述通式(A)表示的化合物中選出的化合物B即5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃中分離出旋光異構(gòu)體并形成鹽，使它們可以用于改善、治療及預(yù)防與腦中風(fēng)或顱損傷有關(guān)的大腦機(jī)能障礙。雖然通常任何化合物一開(kāi)始很難形成結(jié)晶，但本發(fā)明人成功地制備了化合物B的對(duì)映體的結(jié)晶鹽，并且意外地發(fā)現(xiàn)它是穩(wěn)定的并是水溶性的，因而可用于制備注射劑。本發(fā)明人在此發(fā)現(xiàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行了進(jìn)一步研究從而提出了本發(fā)明。
因此，本發(fā)明提供了5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃的對(duì)映體的晶體鹽，特別是其雙鹽酸鹽和其富馬酸鹽，還提供了它們的制備方法及含有它們的脂類過(guò)氧化物形成抑制劑。
本發(fā)明的晶體鹽是下式(Ⅰ)或(Ⅱ)表示的化合物(對(duì)映體)的晶體鹽。
(R)-構(gòu)型本發(fā)明的晶體鹽是對(duì)映體(Ⅰ)或(Ⅱ)的5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃和藥理學(xué)上可接受的酸形成的鹽的結(jié)晶，上述酸例如是無(wú)機(jī)酸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸以及有機(jī)酸如乙酸、富馬酸、馬來(lái)酸、酒石酸、扁桃酸、甲磺酸、苯磺酸或甲苯磺酸，或者是氨基酸如天冬氨酸或谷氨酸。
本發(fā)明的晶體鹽可以是酸的單鹽或雙鹽。
本發(fā)明的晶體鹽優(yōu)選雙鹽酸鹽，富馬酸鹽等，更優(yōu)選(S)-構(gòu)型的雙鹽酸鹽等。
本發(fā)明的晶體鹽用下述方法制備(1)使5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃(化合物B)和旋光的有機(jī)酸反應(yīng);(2)使化合物B的對(duì)映體和酸反應(yīng)。
在上述方法(1)中，本發(fā)明的晶體鹽具體地能用下述方法(a)或(b)來(lái)制得。
(a)制備晶體鹽的方法包括在溶劑中將化合物B和一種旋光的有機(jī)酸混合以便得到均勻的溶液;
(b)制備晶體鹽的方法包括使化合物B和一種旋光的有機(jī)酸縮合形成酰胺的非對(duì)映體混合物，分離并提純，再進(jìn)行水解。
在上述方法(a)或(b)中，典型旋光的有機(jī)酸包括其分子中有不對(duì)稱中心的有機(jī)羧酸、有機(jī)膦酸或有機(jī)磺酸，旋光的有機(jī)酸的優(yōu)選實(shí)例在方法(a)中包括取代的(-)或(+)酒石酸類如(-)或(+)雙乙?；剖帷?-)或(+)雙甲苯甲?；剖?、(-)或(+)雙苯甲?；剖岬?，(-)或(+)酒石酸，(-)或(+)蘋(píng)果酸，(-)或(+)扁桃酸，(-)或(+)乳酸，(+)樟腦-10-磺酸，(+)-3-溴樟腦-10-磺酸，MTPA(α-甲氧基-α-(三氟甲基)苯乙酸)，薄荷氧乙酸(menthoxyacetic acid)等，特別是(-)或(+)扁桃酸，在方法(b)中包括MTPA，薄荷氧乙酸等。
在方法(a)中所用溶劑包括水，醇類(如甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇)，醚類(如乙醚、四氫呋喃、二噁烷)，酯類(如乙酸乙酯、乙酸甲酯)，酮類(如丙酮)，腈類(如乙腈)，酰胺類(如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺)及二甲亞砜。它們可單獨(dú)使用或結(jié)合使用，優(yōu)選使用甲醇、乙腈、乙酸乙酯、乙醚等的混合溶劑。
在方法(a)中，對(duì)于每當(dāng)量的化合物B通常使用約0.5-5當(dāng)量比例的旋光的有機(jī)酸，優(yōu)選0.5-2當(dāng)量。雖然相對(duì)于化合物B所使用的溶劑的量依賴于溶劑的類型而不同，但在使用甲醇-乙腈溶劑情況下，對(duì)于每份重量的化合物B，通常使用約5-30份重量的溶劑。該方法(a)于0-100℃下進(jìn)行，優(yōu)選20-50℃，一旦將化合物B和旋光的有機(jī)酸混合，結(jié)晶鹽立即生成。
在方法(b)中，酰胺的非對(duì)映體混合物能按照常規(guī)方法如酰氯法等使化合物B和旋光的有機(jī)酸進(jìn)行縮合來(lái)制備。
在方法(b)中，酰胺的非對(duì)映體混合物能用常規(guī)的分離和提純方法如分步結(jié)晶法或硅膠色譜法分離并提純。
在方法(b)中，水解反應(yīng)可以是酸性水解(用無(wú)機(jī)酸如鹽酸、硫酸或磷酸及有機(jī)酸如甲磺酸或者酸性離子交換樹(shù)脂)或者是堿性水解(使用堿如氫氧化鈉或氫氧化鉀，并單獨(dú)用水或?qū)⑺陀袡C(jī)溶劑如甲醇或乙醇結(jié)合使用)。
另外，如果需要，可往方法(1)得到的含結(jié)晶鹽的溶液中加能使鹽稍溶的有機(jī)溶劑(如乙醚，己烷，乙酸乙酯等)，其數(shù)量(重量)為溶液量的約1-50倍，優(yōu)選3-10倍?？蓪⒒旌衔镉诩s0-30℃靜置約0.5-24小時(shí)，并將所得沉淀(旋光的有機(jī)酸的鹽)用過(guò)濾方法收集。
同時(shí)，也可以在使方法(1)得到的含結(jié)晶鹽的溶液于20-100℃下濃縮(減壓或其它條件)，直到其體積減少到原體積的1/2-1/4為止以后，再往其中加入能使該鹽稍溶的有機(jī)溶劑。
在方法(2)中，化合物B的對(duì)映體和酸、例如和上述藥理學(xué)上可接受的酸反應(yīng)。具體地說(shuō)是在溶劑中使化合物B的對(duì)映體和一種酸混合以便形成均勻的溶液。
該方法中使用的溶劑和方法(1)相同，溫度和時(shí)間也和方法(1)相同。
另外，假如需要，可按照和方法(1)相同的方法，將所需產(chǎn)品從方法(2)所得到的含所需結(jié)晶鹽的溶液中分離出來(lái)。
在方法(2)中用作原料的化合物B的對(duì)映體可用下述方法制備將無(wú)機(jī)堿水溶液如堿金屬碳酸鹽、碳酸氫鹽或氫氧化物例如碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉或氫氧化鉀加到方法(1)中得到的旋光的有機(jī)酸鹽中，并用分離法如過(guò)濾法或溶劑萃取法進(jìn)行分離，所用堿的數(shù)量為每份重量的鹽用約1-10份重量的堿。
另外，化合物B的對(duì)映體也可用下述方法制備即使用對(duì)映體分離柱(手性柱)如ENANTIO-OVM(Tosoh Corporation)或CHIRALCEL Series(Daisel Chemical Industries，Ltd.)將化合物B或其鹽(例如和上述藥理學(xué)上可接受的酸形成的鹽)進(jìn)行色譜法分離，并用一種或多種有機(jī)溶劑如水、各種緩沖劑(如磷酸緩沖液)、醇類(如甲醇、乙醇)、腈類(如乙腈)、醚類(如四氫呋喃)和烴類(如正己烷)展開(kāi)。
作為制備本發(fā)明的晶體鹽的原料的化合物B可按照EP-A-0483772所述的方法制備。
本發(fā)明的晶體鹽能改進(jìn)高級(jí)不飽和脂肪酸(如亞油酸、γ-亞麻酸、α-亞麻酸、花生四烯酸、雙-高-γ-亞麻酸、二十碳五烯酸)的代謝，并且特別顯示了循環(huán)系統(tǒng)改善作用和抗變應(yīng)性作用如脂類過(guò)氧化物形成抑制作用(抗氧化劑作用)，5-脂肪氧合酶系統(tǒng)代謝物[例如白三烯類(Leukotrienes)、5-氫過(guò)氧化二十碳四烯酸(HPETE)、5-羥基二十碳四烯酸(HETE)、脂毒素(lipoxins)、白細(xì)胞毒素)產(chǎn)生抑制作用，凝血惡烷A2合成酶抑制作用，前列腺素I2合成酶滯留促進(jìn)作用，LTD4受體拮抗作用和活性氧類清除作用。
在上述作用中，本發(fā)明的晶體鹽顯示了明顯的脂類過(guò)氧化物形成抑制活性(抗氧化劑作用)。
本發(fā)明的晶體鹽毒性低，副作用一般可以接受。
因此本發(fā)明的晶體鹽對(duì)于哺乳動(dòng)物(如小鼠、大鼠、兔、狗、猴、人)的下述疾病有治療及預(yù)防效果由于血小板凝聚引起的血栓，由于心臟、肺、腦或腎的動(dòng)脈平滑肌收縮或血管痙攣引起的局部缺血癥(如心肌梗死、腦中風(fēng))，神經(jīng)退化疾病(如帕金森氏病，早老性癡呆，Lou Gehrig's病，肌營(yíng)養(yǎng)障礙)，由于中樞神經(jīng)損傷如顱損傷和脊柱損傷引起的功能性障礙，記憶和感情性疾病(由于缺氧、腦損傷、腦中風(fēng)、腦梗死、腦血栓等引起的與神經(jīng)細(xì)胞壞死有關(guān)的疾病)，由于腦中風(fēng)、腦梗死、腦外科或顱損傷引起的驚厥或癲癇，腎炎，肺衰竭，支氣管哮喘，炎癥，動(dòng)脈硬化，動(dòng)脈粥樣硬化，肝炎，急性肝炎，肝硬化，過(guò)敏性肝炎，免疫缺陷，由于活性氧類(如超氧化物、羥基化的自由基)引發(fā)的因酶、組織、細(xì)胞等損傷導(dǎo)致的循環(huán)系統(tǒng)疾病(心肌梗死、腦中風(fēng)、腦浮腫、腎炎等)，組織纖維化，癌以及其它疾病。本發(fā)明的晶體鹽在藥學(xué)上可用作抗血栓藥、抗血管痙攣藥、抗哮喘藥、抗過(guò)敏劑、心/腦循環(huán)改善劑、腎炎治療藥，肝炎治療藥，組織纖維化抑制劑，活性氧類清除劑，花生四烯鏈物質(zhì)調(diào)節(jié)改善劑及其它藥劑。
本發(fā)明的晶體鹽能以其本身安全地口服或非口服給藥，或者以和藥理學(xué)上可接受的載體、賦形劑及其它添加劑形成的組合物(如片劑、膠囊劑、溶液劑、注射劑、栓劑)安全地口服或非口服給藥。本發(fā)明的晶體鹽能溶于水，因而有利于以注射劑形式給藥。雖然劑量依治療對(duì)象、給藥方式、癥狀及其它因素而改變，但當(dāng)對(duì)患循環(huán)系統(tǒng)疾病的成年病人非口服給藥時(shí)，通常為每劑量約0.01mg/Kg-20mg/kg體重，優(yōu)選約0.1-10mg/kg體重，更優(yōu)選約0.5mg-10mg/kg體重，并且每日一至三次給藥是有益的。
下面通過(guò)制備實(shí)施例，分析實(shí)施例及試驗(yàn)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作更詳盡的描述，它們不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的限制。
實(shí)施例1(S)-(+)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃(S)-(+)扁桃酸鹽往35.4g(±)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃于500ml氯仿的溶液中加14.78g(S)-(+)扁桃酸于300ml甲醇中的溶液，隨后進(jìn)行濃縮。往殘余物中加約500ml乙醚，過(guò)濾收集所得沉淀，再用乙醚洗滌沉淀。將得到的35.4g粗品晶體進(jìn)行如下的重結(jié)晶操作。即將粗品晶體溶在甲醇-乙腈(2∶1)(1升)中，溶液濃縮至體積約為100ml后，加大約500ml乙醚，將混合物于20℃靜置，將所得沉淀研細(xì)，過(guò)濾，用乙醚洗滌，上述操作重復(fù)兩次(第1次得21.96g)得到19.90g(S)-(+)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃(S)-(+)扁桃酸鹽。
熔點(diǎn)186-190℃[α]27+57.1°(C＝1.230，甲醇)元素分析(C24H32N2O·C8H8O3)計(jì)算值C，74.39;H，7.80;N，5.42測(cè)定值C，74.31;H，7.83;N，5.38實(shí)施例2(R)-(-)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃(R)-(-)-扁桃酸鹽將實(shí)施例1的母液濃縮至干，將所得28.2g殘留物分配到500ml乙酸乙酯和500ml 0.5N氫氧化鈉水溶液中，有機(jī)層連續(xù)用0.5N氫氧化鈉水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和食鹽水洗滌，然后用無(wú)水碳酸鈉干燥，再濃縮至干，將所得的20g殘留物和8.35g(R)-(-)-扁桃酸用和實(shí)施例1相同的方法處理，得20.41g(R)-(-)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃(R)-(-)-扁桃酸鹽。
熔點(diǎn)186-191℃[α]27-57.0°(C＝1.090，甲醇)元素分析(C24H32N2O·C8H8O3)計(jì)算值C，74.39;H，7.80;N，5.42測(cè)定值C，74.26;H，7.78;N，5.54實(shí)施例3
(S)-(+)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃雙鹽酸鹽19.8g(S)-(+)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃(S)-(+)-扁桃酸鹽被分配在500ml乙酸乙酯和500ml 0.5N氫氧化鈉水溶液中，有機(jī)層連續(xù)用0.5N氫氧化鈉水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和食鹽水洗滌，用無(wú)水碳酸鈉干燥，濃縮至干，將所得約15g殘留物溶于140ml甲醇和4N鹽酸中的23.3ml乙酸乙酯溶液中，隨后濃縮至干，所得殘余物從乙酸乙酯中重結(jié)晶得到粗品晶體，將其再用甲醇-乙酸乙酯重結(jié)晶，得13.84g(S)-(+)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃雙鹽酸鹽。
熔點(diǎn)226℃(分解)[α]26+27.8°(C＝1.054，甲醇)元素分析(C24H32N2O·H2Cl2):
計(jì)算值C，65.90;H，7.83;N，6.40;Cl，16.21測(cè)定值C，65.60;H，7.89;N，6.37;Cl，16.01實(shí)施例4(R)-(-)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃雙鹽酸鹽按照和實(shí)施例3相同的方法，從20.03g(R)-(-)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃(R)-(-)-扁桃酸鹽得到15.55g(R)-(-)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃雙鹽酸鹽。
熔點(diǎn)226℃(分解)[α]26-27.9°(C＝1.284，甲醇)元素分析(C24H32N2O·H2Cl2)計(jì)算值C，65.90;H，7.83;N，6.40;Cl，16.21測(cè)定值C，65.76;H，7.95;N，6.31;Cl，16.04實(shí)施例5(S)-(+)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃雙甲磺酸鹽800mg(S)-(+)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃雙鹽酸鹽被分配在乙酸乙酯(10ml)和0.5N氫氧化鈉水溶液(10ml)中，有機(jī)層連續(xù)用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和食鹽水洗，然后用無(wú)水碳酸鈉干燥，濃縮至干，將所得殘留物和351mg甲磺酸溶于甲醇中，隨后濃縮至干。往所得晶體殘留物中加乙酸乙酯，過(guò)濾收集所得沉淀，用乙酸乙酯洗滌，得950mg(S)-(+)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃雙甲磺酸鹽晶體。
熔點(diǎn)202-211℃[α]25+21.4°(C＝1.340，甲醇)元素分析(C24H32N2O·C2H8S2O6)計(jì)算值C，56.09;H，7.24;N，5.03;S，11.52測(cè)定值C，55.91;H，7.25;N，4.95;S，11.23實(shí)施例6(S)-(+)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃富馬酸鹽按照和實(shí)施例5相同的方法，從800mg(S)-(+)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃雙鹽酸鹽和212mg富馬酸得到543mg(S)-(+)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃富馬酸鹽。
熔點(diǎn)177-180℃[α]25+32.2°(C＝1.070，甲醇)元素分析(C24H32N2O·C4H4O4)計(jì)算值C，69.98;H，7.55;N，5.83測(cè)定值C，69.97;H，7.54;N，6.07實(shí)施例7(R)-(-)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃雙氫溴酸鹽將(R)-(-)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃(860mg)溶于甲醇中，往該溶液中加25%溴化氫的乙酸溶液(0.5ml)，然后濃縮，將殘留物溶于甲醇中并靜置，過(guò)濾收集所得晶體，用乙醇洗滌，得810mg(R)-(-)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃雙氫溴酸鹽。
熔點(diǎn)220.5℃(分解)[α]20D+23.6(C＝0.86%，甲醇)元素分析(C24H32N2O·2HBr計(jì)算值C，54.77;H，6.51;N，5.32測(cè)定值C，54.47;H，6.60;N，5.17
實(shí)施例8(R)-(-)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃L-酒石酸鹽將(R)-(-)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃(870mg)和L-酒石酸(354mg)溶于甲醇中，然后濃縮。將殘留物溶于乙醇中并靜置，過(guò)濾收集得到的晶體，用乙醇洗滌，得到970mg(R)-(-)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃L-酒石酸鹽單乙醇化物。
熔點(diǎn)130.5℃[α]20D+35.0°(C＝0.755%，甲醇)元素分析(C24H32N2O6·C4H6O6·C2H5OH)計(jì)算值C，64.26;H，7.90;N，5.00測(cè)定值C，64.32;H，8.11;N，4.92分析實(shí)施例11EP-A-0483772中的實(shí)施例67化合物和本發(fā)明實(shí)施例1的化合物用高效液相色譜法進(jìn)行分析，采用旋光拆分柱。
操作條件柱子Chiral Cell OD(4.6×250mm)流動(dòng)相正己烷-乙醇-二乙胺(100∶0.5∶0.1，V/V)流速1ml/分檢測(cè)器UV254nm分析結(jié)果如

圖1(EP-A-0483772實(shí)施例67的化合物)及圖2(本發(fā)明實(shí)施例1的化合物)所示。
橫坐標(biāo)為保留時(shí)間(分)，峰1和峰2分別相應(yīng)于(S)-(+)和(R)-(-)構(gòu)型。
分析實(shí)施例2本發(fā)明實(shí)施例3的化合物的粉末X光衍射圖(CuKa，40KV，40mA)如圖3所示(在點(diǎn)陣間距(d)為13.89、7.12、5.36、4.26、4.05、4.00、3.31、3.21處顯示出特征峰)。
試驗(yàn)實(shí)施例1給小鼠(spinal in trathecal)注射FeCl2引發(fā)行為變化來(lái)測(cè)定藥效。
使用雄性SIcIcR小鼠(5周齡)(每組10只)，往腰脊髓Ⅵ至骶脊髓Ⅰ的蛛網(wǎng)膜下腔內(nèi)注射含50mM溶解的氯化亞鐵的生理食鹽水(5μl/每只鼠)后，從注射后15分鐘到1小時(shí)內(nèi)觀察每只動(dòng)物的行為變化，用下述標(biāo)準(zhǔn)記錄行為改變的得分。
得分 行為變化0正常，1常咬下肢及下腹部，2觀察到下述三種反應(yīng)之一a)猛烈地咬身體的下半部，偶爾打滾，b)對(duì)外部刺激的超敏感的攻擊行為，c)震顫3陣攣性驚厥4強(qiáng)直性驚厥，單側(cè)或雙側(cè)肢體麻痹。
5死亡百分抑制率由上述得分計(jì)算(百分抑制＝[(5-得分)/5×100)，注射氯化亞鐵后30分鐘內(nèi)口服本發(fā)明化合物的鹽。
表1表示口服實(shí)施例3和4的每種化合物后(25mg/kg)得到的平均得分和百分抑制率。
表1
這些結(jié)果說(shuō)明，本發(fā)明的晶體鹽對(duì)于由于氯化亞鐵引起的脂類過(guò)氧化物形成有關(guān)的中樞神經(jīng)障礙有極好的抑制活性。
本發(fā)明提供了脂類過(guò)氧化物形成抑制劑，特別是5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃的對(duì)映體的晶體鹽，它能很好地改善、治療和預(yù)防與腦中風(fēng)和顱損傷有關(guān)的大腦機(jī)能障礙，本發(fā)明的晶體鹽比該化合物的游離態(tài)更易溶于水且更穩(wěn)定。
權(quán)利要求
1.5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃的對(duì)映體的晶體鹽。
2.按照權(quán)利要求1的晶體鹽，其中對(duì)映體是(S)-(+)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃。
3.按照權(quán)利要求1的晶體鹽，其中對(duì)映體是(R)-(-)-5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃。
4.按照權(quán)利要求2的晶體鹽，它是雙鹽酸鹽。
5.按照權(quán)利要求4的晶體鹽，其粉末X-衍射圖特征峰的點(diǎn)陣間距(d)為13.89、7.12、5.36、4.26、4.05、4.00、3.31、3.21。
6.按照權(quán)利要求2的晶體鹽，它是富馬酸鹽。
7.5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃雙鹽酸鹽。
8.按照權(quán)利要求7的化合物，它是晶體。
9.5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃富馬酸鹽。
10.按照權(quán)利要求9的化合物，它是晶體。
11.制備5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃的對(duì)映體的晶體鹽的方法，它包括(1)使5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃和一種旋光的有機(jī)酸反應(yīng)，或(2)使5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃的對(duì)映體和一種酸反應(yīng)。
12.抑制脂類過(guò)氧化物形成的藥物組合物，它包括權(quán)利要求1的有效量的晶體鹽及藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
13.按照權(quán)利要求12的藥物組合物，它用作大腦機(jī)能障礙的預(yù)防和/或治療劑。
14.在患有由于活性氧類引起的疾病的患者體內(nèi)抑制脂類過(guò)氧化物形成的方法，它包括對(duì)患者施用結(jié)合了藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑的有效量的權(quán)利要求1的晶體鹽。
15.權(quán)利要求1的晶體鹽在制備用于抑制脂類過(guò)氧化物形成的藥物組合物中的用途。
全文摘要
5-氨基-2，4，6，7-四甲基-2-(4-苯基哌啶甲基)-2，3-二氫苯并[b]呋喃的對(duì)映體的晶體鹽，它們是穩(wěn)定的并溶于水，可用作極好的脂類過(guò)氧化物形成抑制劑。
文檔編號(hào)A61P39/06GK1093706SQ93120189
公開(kāi)日1994年10月19日 申請(qǐng)日期1993年12月9日 優(yōu)先權(quán)日1992年12月9日
發(fā)明者大川滋紀(jì), 三木正敬 申請(qǐng)人:武田藥品工業(yè)株式會(huì)社