專利名稱：含分泌型免疫球蛋白a的制品及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬生物制品技術(shù)領(lǐng)域。
分泌型免疫球蛋白A(簡稱SIgA)是存在于人體呼吸道、消化道、泌尿道等部位的外分泌液中的局部抗體。在唾液、乳液、淚液、胃液、鼻和支氣管分泌液中也廣泛存在，但以人體初乳中的含量最高。以人體初乳為原料經(jīng)提取的粗制液(又稱乳寶)所含SIgA的濃度較高，具有抗細(xì)菌和抗病毒的抗體，能廣泛用于醫(yī)療、保健、食品、化妝品等領(lǐng)域。
本發(fā)明的目的是利用人體初乳中提取的SIgA作為活性成分與藥用或食用及外用的載體配制成用于醫(yī)療、保健、食品、化妝用品等領(lǐng)域的制品。
本發(fā)明公開了含有從人體初乳中提取的分泌型免疫球蛋白A(SIgA)的醫(yī)療、保健、食品、化妝用品等制品(又稱“乳寶”制品)及其制備方法。
本發(fā)明的“乳寶”制品的特點是治療面廣、無毒、無副作用。另外，由于它是取之于人體的天然物質(zhì)，與人體有親本關(guān)系，易于吸收，生產(chǎn)效應(yīng)快，特別對嬰幼兒既可彌補先天免疫功能差、又可免受打針之苦。“乳寶”中還含有微量元素及其它因子，對人類健康有極高的價值。
“乳寶”與藥用載體可以配制成噴霧劑、滴眼藥、口服液等廣泛地用于疾病防治。在臨床上可以治療上呼吸道感染、支氣管炎、肺部感染、急慢性喉炎、急性化膿性扁桃體炎、病毒性角膜炎、過敏性鼻炎、小兒、成人腹瀉、菌痢、傷寒性帶菌者、口腔潰瘍、斑禿、脂禿、色素斑、皮損皮炎等。
“乳寶”與食用載體可以配制成保健口服液、飲料、糖果、糕點等。
“乳寶”與外用載體可以配制成化妝用品，具有促進(jìn)人體皮膚、頭發(fā)新陳代謝的功效，滋潤面容、煥發(fā)容顏、烏黑頭發(fā)的作用。“乳寶”還能配制成“人造初乳”，給新生兒喂養(yǎng)，可以提高新生兒的免疫功能。
此外，“乳寶”對愛滋病、肺癌的防治研究方面也有廣闊的前景。
乳寶臨床使用情況如下一.乳寶(SIgA粗制液)治療嬰幼兒腹瀉的觀察。
治療方法采用乳寶(SIgA粗制液)口服治療。以1.9mg/30ml劑量濃度按3-6ml/kg/日計算。以五天內(nèi)資料列入療效統(tǒng)計，＞五天者即算無效標(biāo)準(zhǔn)。
小兒腹瀉病例分對照組和治療組，對照組只用常規(guī)抗生素治療，治療組僅用“乳寶”治療。
結(jié)果見表1、表2。
表1.嬰兒腹瀉療效分析治愈顯效有效總有效率療效例數(shù)%例數(shù)%例數(shù)%%治療組18956.259728.87236.8491.06對照組3421.384125.79116.9254.69無效合計例數(shù)%例數(shù)%治療組278.04336100對照組7345.91159100
表2.腹瀉好轉(zhuǎn)天數(shù)療效分析好轉(zhuǎn)天數(shù)<2天%3-5天%>5天%合計%治療組16047.6212336.615315.77336100對照組1815.934438.945145.13113100注1.治愈表示無論輕、中或重度腹瀉，經(jīng)治療后大便成形或不瀉者。
2.顯效表示凡重度腹瀉治療后大便次數(shù)由＞10次/在減少至＜5次/日者。
3.好轉(zhuǎn)表示凡重度經(jīng)治療后轉(zhuǎn)成中度或中度轉(zhuǎn)成輕度或稀水樣便轉(zhuǎn)成糊狀者。
4.無效表示凡以上各種程度腹瀉，治療后未見好轉(zhuǎn)者。
結(jié)果分析總有效率與無效率，治療組與對照組統(tǒng)計學(xué)處理，兩者均P＜0.01，有高度顯著性差異。
治療組與對照組有效天數(shù)(＜5天)及無效天數(shù)＞5天經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理后，P＜0.01，有高度顯著性差異。＜2天與＜5天，P＜0.01亦有高度顯著性差異。均以治療組為好。
因此，乳寶(SIgA粗制液)對小兒腹瀉有一定的治療效果。
二.乳寶液噴霧綜合治療支氣管肺炎臨床觀察。
治療方法在綜合治療法基礎(chǔ)上(包括抗菌素)，使用乳寶2.5mg，加生理鹽水15ml噴霧、每日兩次，每次約10-15分鐘。療程根據(jù)病情選擇4-17天不等。
療效見表3.
表3.乳寶液噴霧綜合治療支氣管肺炎療效分析組別病例數(shù)治愈數(shù)好轉(zhuǎn)數(shù)無效數(shù)總有效率(%)治療組291512293.1對照組291312486.21結(jié)果乳寶液霧化吸入可以作為肺炎之綜合治療之一。
三.“乳寶”超聲霧化吸入治療支氣管哮喘的療效觀察。
治療方法乳寶5mg溶于20ml生理鹽水中作超聲霧化吸入，每日一次，兩周為一療程。
結(jié)果經(jīng)對7例支氣管嘟喘發(fā)作期患者應(yīng)用支氣管解痙藥合并乳寶超聲霧化治療后，氣喘癥狀大都減輕，部分病例的支氣管解痙藥也減量，肺功能有改善傾向。
四.“乳寶”治療小兒呼吸道感染疾病的臨床觀察。
治療方法二組病例，對照組常規(guī)用抗菌素及止咳、平喘藥，嚴(yán)重的加用激素治療。治療組并用乳寶，一般每次1/4乳寶(2.5mg)每天一次進(jìn)行超聲霧化治療。
結(jié)果見表4、表5、表6.
表4.治療組與對照組的治療療程的比較治療組對照組療程(天)病例數(shù)%病例數(shù)%1-31860004-5723.3826.64-1026.72066.7>1131026.7合計3030表5.治療組與對照組的療效比較療效組別病例數(shù)治愈數(shù)%顯效數(shù)%好轉(zhuǎn)數(shù)%無效數(shù)%治療組302480413.413.31*3.3對照組302066.7723.331000表6.治療組與對照組療效比較組別治愈率(%)顯較率(%)好轉(zhuǎn)率(%)無效率(%)治療組8093.496.73.3對照組66.790100結(jié)果乳寶中含有的SIgA是粘膜局部抗感染免疫的重要因素。在治療和預(yù)防呼吸道感染中有著重要作用，是一種較理想的藥物，既可縮短療程、又可提高療效。
五.乳寶液噴霧治療成人慢性支氣管炎的觀察。
治療方法治療組病人除常規(guī)治療外，并用乳寶液噴霧。該噴霧液為乳寶液5mg+慶大霉素8萬m+糜蛋白酶5mg配制成10ml，療程一般為10天。結(jié)果見表7.
表7.乳寶液噴霧治療成人慢性支氣管炎觀察病情程度治療病例數(shù)合并有效數(shù)有效率天數(shù)咳痰多喘(+- )嚕音(廿- )用藥 (%)3-564424161006-74442444100合計108848510結(jié)論本藥治療過程中，病員均感到噴霧后很舒服，感覺輕松，癥狀改善。
六.乳寶治療上呼吸道感染的觀察。
治療方法將乳寶10mg/1支分裝成8mg(二日量)及4mg(一日量)，裝于塑料眼藥水瓶中?；純好啃r滴鼻或滴口腔4滴，滴時必須仰臥，使藥液能流入鼻咽部。(夜間一般停用)結(jié)果見表8.
表8.乳寶治療上呼吸道感染的療效
結(jié)論乳寶對上呼吸道感染，特別是病毒引起的感染也能治療。給藥方便、安全、宜于推廣使用。
七.乳寶對病毒性眼病的治療觀察。
治療方法乳寶凍干劑10mg/1支，用生理鹽水5ml溶解成水溶液用于病毒性角膜炎及病毒性結(jié)膜炎患者，局部點滴，每2小時1次。
結(jié)果見表9.
表9.乳寶治療病毒性眼病的療效治愈天數(shù)平均治組別例數(shù)1-3天4天5-7天8天以上愈天數(shù)綜合治療組85例57例10例18例03.36天單用SIgA組10例2例8例6.6天常規(guī)治療組20例0015例5例7.2天注綜合治療組為乳寶+常規(guī)藥物。
結(jié)論乳寶滴眼液pH呈中性，無刺激性，當(dāng)與常規(guī)藥物聯(lián)合使用時，能縮短療程，促進(jìn)愈合。
除上述之外，乳寶還能用于治療耳、鼻、咽喉科等的疾病。
本發(fā)明的另一目的是公開了含分泌型免疫球蛋白A(SIgA)制品(乳寶制品)的制備方法。
本發(fā)明的具體工藝如圖五表示。
本發(fā)明的方法，其特征在于采用低溫離心、壓濾法從人體初乳中提取SIgA，改進(jìn)了現(xiàn)有技術(shù)的鹽析上柱法。
本發(fā)明的方法包括以下步驟(1)從人體初乳中提取分泌型免疫球蛋白A(SIgA)粗制液(或干品)(乳寶)取無肝炎病史及HBsAg(乙型肝炎表面抗原)陰性的產(chǎn)婦產(chǎn)后三天的初乳收集在清潔容器中，再檢測一次HBsAg，將HBsAg陰性的初乳存放在4℃的冰箱內(nèi)一星期，析出脂肪層，取脂肪層以下的初乳吸入清潔容器中，進(jìn)行離心30分鐘，進(jìn)一步除去脂肪，然后用醋酸微孔濾膜進(jìn)行二次粗濾和精濾，濾液用1NHCl調(diào)節(jié)pH3～7然后生化合成，除菌過濾，抽樣檢查化驗。即得“乳寶”粗制液，經(jīng)冷凍保藏或經(jīng)冷凍干燥得凍干品保存。
(2)制備“乳寶”制品將“乳寶”粗制液(或干品)與藥用或食用或外用載體配制成各種醫(yī)療、保健、食品、化妝用品的制品，其中“乳寶”與載體的用量按重量比為含“乳寶”0.01～99.9%與含載體99.9～0.01%以任意比例配制而成100%的組成。
上述藥用、食用或外用載體為葡萄糖、蜂蜜、β-胡蘿卜素、維生素C、單硬脂酸甘油酯、硬脂酸、液體石臘、尼泊金、月桂醇硫酸鈉、甘油、三乙醇胺及其他常規(guī)載體。
本發(fā)明的制備方法工藝簡單，尤其是采用低溫離心、壓濾法從人體初乳中提取SIgA，提取率提高一倍，還可節(jié)約60%的原材料。每100千克乳寶可節(jié)省人民幣6萬元，為工業(yè)化生產(chǎn)創(chuàng)造有利條件。
用本發(fā)明制備方法得到的人體初乳提取液(乳寶)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)如下1.含量SIgA40mg/100ml。
2.乙型肝炎表面抗原(HBSAg)檢測陰性。
3.蛋白含量1g/100ml。
4.無菌試驗陰性。
5.主要成份分泌型免疫球蛋白(SIgA)性質(zhì)監(jiān)定(1)圖一.分泌型免疫球蛋白檢測。
其中上孔為樣品，下孔為α重鏈、槽為抗人α重鏈血本圖證明乳寶提取液與α重鏈相對應(yīng)，并含有SIgA。
(2)圖二.分泌型免疫球蛋白檢測其中1、3孔為樣品，2、4孔為α重鏈下排各孔均為抗人α重鏈血清。
本圖可見樣品與α重鏈、相鏈、證明乳寶提取液含SIgA。
(3)圖三.檢測乳寶提取液中SIgA活性上孔為原倍按須時針排分別為1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32。中孔為抗人α血清。
本圖可見樣品中SIgA有效高活性。
(4)圖四.飲料中不同pH對SIgA的影響左孔為pH6.0桔汁液+等量粗制液中孔為pH3.0桔汁液+等量粗制液右孔為pH7.0PBS+等量粗制液本圖可以看到擴(kuò)散圈大小一致，說明pH3.0-7.0不影響SIgA效價。
實施例一制備“乳寶”藥用口服液將“乳寶”原液300克，20%葡萄糖1000ml，按常規(guī)方法配制成每瓶5ml內(nèi)含SIgA1.5克的口服液。
實例二制備“乳寶”營養(yǎng)口服液將蜂蜜、β胡羅卜素、維生素C、乳寶按常規(guī)方法配制成每瓶10ml的口服液，其中含蜂蜜10%，β胡羅卜素1000Iu、維生素C30克、乳寶1ml。
實例三制備“乳寶”霜將單硬脂酸甘油酯100克、硬脂酸140克、液臘240克、尼泊金1克、月桂醇硫酸鈉4克、甘油100克、三乙醇胺15克、蒸餾水170ml、乳寶230ml按常規(guī)方法配制成總量為1000克的“乳寶”霜。
權(quán)利要求
1.含分泌型免疫球蛋白A的制品，其特征在于該制品是由從人體初乳中提取的分泌型免疫球蛋白作為活性成份與藥用或食用及外用的載體、以重量比活性成份為0.01～99.0%與載體為99.9～0.1%按任意比例配制而成的。
2.制備如權(quán)利要求1所述的含分泌型免疫球蛋白A的制品的方法，該方法的特征在于包括下列步驟(1)從人體初乳中提取分泌型免疫球蛋白A(SIgA)粗制液(或干品)(乳寶)取無肝炎病史及HBsAg(乙型肝炎表面抗原)陰性的產(chǎn)婦產(chǎn)后三天的初乳收集在清潔容器中，再檢測一次HBgAg，將HBsAg陰性的初乳存放在4℃的冰箱內(nèi)一星期，析出脂肪層，取脂肪層以下的初乳吸入清潔容器中，進(jìn)行離心30分鐘，進(jìn)一步除去脂肪，然后用醋酸微孔濾膜進(jìn)行二次粗濾和精濾，濾液用1NHCI調(diào)節(jié)pH3～7然后生化合成，除菌過濾，抽樣檢查化驗。即得“乳寶”粗制液，經(jīng)冷凍保藏或經(jīng)冷凍干燥得凍干品保存。(2)制備“乳寶”制品將“乳寶”粗制液(或干品)與藥用或食用或外用載體配制成各種醫(yī)療、保健、食品、化妝用品的制品，其中“乳寶”與載體的用量按重量比為“乳寶”0.01～99.9%與載體99.9～0.01%以任意比例配制面成100%的組成。上述藥用、食用或外用載體為葡萄糖、蜂蜜、β-胡羅卜素、維生素C、單硬脂酸甘油酯、硬脂酸、液體石臘、尼泊金、月桂醇硫酸鈉、甘油、三乙醇胺及其他常規(guī)載體。
3.含從人體初乳中提取的分泌型免疫球蛋白A的制品作為制備藥品、保健品、食品、化妝品的應(yīng)用。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含分泌型免疫球蛋A的制品，其特征在于其中所述的藥用或食用及外用的載體為葡萄糖、蜂蜜、β-胡羅卜素、維生素C、單硬脂酸甘油酯、硬脂酸、液體石臘、尼泊金、月桂醇硫酸鈉、甘油、三乙醇胺。
全文摘要
本發(fā)明公開了利用人體初乳提取的分泌型免疫球蛋白A(SIgA)作為活性成分與藥用或食用及外用的載體配制成用于醫(yī)療、保健、食品、化妝品等領(lǐng)域的制品，并且提供了它們的制備方法。
文檔編號A61K39/44GK1105270SQ9411201
公開日1995年7月19日 申請日期1994年1月14日 優(yōu)先權(quán)日1994年1月14日
發(fā)明者湯祥菊 申請人:中國韜奮基金會