專(zhuān)利名稱(chēng)：膦酰甲基二肽的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明總的涉及具有膦酰甲基的二肽及其類(lèi)似物、含有這些化合物的藥物組合物、制備這些化合物的方法，用于這些方法中的中間體，以及抑制內(nèi)皮素產(chǎn)生的方法。這些化合物抑制內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶，因而可用于治療與抑制內(nèi)皮素的生成有關(guān)的癥候。
在內(nèi)皮細(xì)胞中存在的肽大內(nèi)皮素被內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶(ECE)裂解生成內(nèi)皮素肽。內(nèi)皮紊是21個(gè)氨基酸肽，為血管收縮劑，是由內(nèi)皮細(xì)胞、腎小球膜、腎和上皮細(xì)胞，以及人的各種癌細(xì)胞系和人巨噬細(xì)胞所產(chǎn)生。
內(nèi)皮素的生物學(xué)效應(yīng)有對(duì)血管平滑肌、非血管平滑肌、心臟、神經(jīng)組織、腎和腎上腺有作用。內(nèi)皮素收縮動(dòng)脈和靜脈，增高平均動(dòng)脈血壓，降低心輸出量，體外增加心收縮力，體外可刺激血管平滑肌的有絲分裂，體外可收縮血管平滑肌，包括豚鼠支氣管、人膀胱條和大鼠子宮，體內(nèi)增加氣道阻力，誘導(dǎo)產(chǎn)生消化道遺瘍，體內(nèi)和體外刺激動(dòng)脈排鈉因子的釋放，增加血漿內(nèi)血管加壓素、醛甾酮和兒茶酚胺水平，體外抑制胃素的釋放，體外刺激促性腺激素的釋放，例如可參閱PCT專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)WO92/13545。
內(nèi)皮素產(chǎn)生的抑制劑可用的適應(yīng)癥包括治療心血管疾病(如心肌缺血、充血性心衰、心律失常、不穩(wěn)性心絞痛和高血壓)；支氣管收縮(肺原性高血壓和哮喘)；神經(jīng)元作用紊亂(腦血管痙攣和蛛網(wǎng)膜下出血)；內(nèi)分泌紊亂(子癇前期)；腎病(急/慢性腎衰衰)；血管疾病(動(dòng)脈硬化，血栓閉塞性脈管炎、高安氏動(dòng)脈炎、雷諾現(xiàn)象和糠尿病綜合癥)；癌癥(尤其是肺癌)；消化道粘膜損傷(胃腸道疾病)；內(nèi)毒素性休克和敗血癥?？蓞㈤咼.Med.Chem.35(9)1493—1508(1992)；Neurology 4225—31(1992)和Drug DevelopmentResearch 26361—387(1992)。
式I的化合物、其主體異構(gòu)體、水合物、內(nèi)鹽或藥用鹽、含有式I的組合物和用式I化合物治療這樣的癥候，即通過(guò)抑制了內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶而改善了癥候。 式中，R1和R2各自獨(dú)立為氫、C1—6烷基、(CH2)m—芳基、R4—C(O)O—CH(R5)—或當(dāng)形成內(nèi)鹽時(shí)，什么都沒(méi)有，若R1或R2中一個(gè)是氫、C1—6—烷基、或(CH2)m—芳基時(shí)，另一個(gè)是氫或若形成內(nèi)鹽時(shí)什么都沒(méi)有；R3是氫、C1—C6—烷基，(CH2)m—環(huán)烷基，或(CH2)m—芳基；
R4是C1—10—烷基、(CH2)m—環(huán)烷基或(CH2)m—芳基；R5是C1—10烷基、(CH2)m—環(huán)烷基或氫；R6是H或H2，此時(shí)R1或R2中一個(gè)什么都沒(méi)有，因而形成了內(nèi)鹽；R7是CH3或H；R8是H、Br、CH3、或OCH3，前提是R7或R8中一個(gè)是H；Z是(CH2)m—芳基或C1—12—烷基；X是H或C1—6—烷基；上述的m各自獨(dú)立為0、1、2或3；n為1、2或3。
本文所用的一些術(shù)語(yǔ)具有下述的特定含義“環(huán)烷基”系指含有3—8個(gè)碳原子的飽和碳環(huán)，包括(但不限于)環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基等，該環(huán)烷基可被1、2或3個(gè)如下取代基作各自獨(dú)立地取代C1—6—烷基、鹵烷基、烷氧基、硫烷氧基、氨基、烷胺基、二烷胺基、羥基、鹵代、巰基、硝基、醛基、羧基、烷氧羰基和羧酰氨基。
“C1—6—烷基”系指含有1—6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，包括(但不限于)甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、1—甲基丁基、2，2—二甲基丁基、2—甲基戊基、2，2—二甲基丙基、正己基等。其它碳原子數(shù)如C1—10同樣代表1到10個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基。
式I的吲哚基的5位可被H、Br、CH3或OCH3取代(于式I中用R8表示)在4、5、6或7位可被H或CH3取代(在式I中用R7表示)。然而R7或R8中的一個(gè)必須是氫。 “芳基”系指含有1個(gè)或多個(gè)芳環(huán)的單環(huán)或雙環(huán)體系，包括(但不限于)苯基、萘基、四氫萘基、茚基等。芳基可被1、2或3個(gè)如下取代基各自獨(dú)立地取代C1—6—烷基、鹵烷基、烷氧基、硫烷氧基、氨基、烷胺基、二烷胺基、羥基、鹵代、巰基、硝基、醛基、羧基、烷氧羰基和羧酰氨基。
“內(nèi)鹽”又稱(chēng)兩性離子，是分子中帶有正和負(fù)電荷，實(shí)施例1中就是一個(gè)例子。
“主體異構(gòu)體”是對(duì)某個(gè)分子的所有異構(gòu)體的通稱(chēng)，它們之間的區(qū)別只是它們的原子在空間方向的不同。包括鏡像異構(gòu)體(對(duì)映異構(gòu)體)，幾何異構(gòu)體(順/反)，以及含有多于1個(gè)手性中心時(shí)它們互相不關(guān)鏡像關(guān)系的化合物(差向異構(gòu)體)。氨基酸的L/D或R/S是采用IUPAC—IUB生化命名聯(lián)合委員會(huì)所述的定義。Eur.J.Biochem.1389—37(1984)。
“藥用鹽”系指既有酸加成鹽也有金屬和銨鹽，這些都是無(wú)毒的并且在制備適于最終應(yīng)用的藥用配方時(shí)是有用的衍生物。
藥用酸加成鹽包括已知的有機(jī)或無(wú)機(jī)酸與式I的堿化合物形成的加成鹽。形成適宜的有說(shuō)明性的有機(jī)酸包括一元、二元和三元羧酸。這些酸例如是乙酸、羥乙酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、丁二酸、戊二酸、富馬酸、蘋(píng)果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、馬來(lái)酸、羥基馬來(lái)酸、苯甲酸、羥基苯甲酸、苯乙酸、肉桂酸、水楊酸、和2—苯氧基苯甲酸。形成適宜鹽的其它有機(jī)酸有磺酸，例如甲烷磺酸和2—羥乙基磺酸。用標(biāo)準(zhǔn)的方法制成一元或二元酸的鹽，例如把游離堿溶解于含有適宜酸的水—醇溶液或其它適宜的溶劑的溶液，蒸發(fā)該溶液后分離出鹽，或?qū)⒂坞x堿在有機(jī)溶劑中與酸反應(yīng)，此時(shí)直接析出鹽，或者濃縮溶液后得到鹽。本發(fā)明化合物的酸加合鹽一般是結(jié)晶性物質(zhì)，它可溶于水和各種親水性介質(zhì)中，有較高的熔點(diǎn)和提高的穩(wěn)定性。
藥用金屬和胺鹽是在室溫條件下穩(wěn)定的鹽，而且該陽(yáng)離子不應(yīng)有明顯的生物活性。適宜的金屬鹽包括有鈉、鉀、鈣、鋇、鋅和鋁鹽。優(yōu)選的是鈉和鉀鹽。適宜的胺鹽是用足以能形成穩(wěn)定鹽的堿性的胺，優(yōu)選的胺是常常用于藥物化學(xué)中的有低毒性和可醫(yī)用的胺。包括有三烷基胺，例如三乙胺，以及普魯卡因、二芐胺、N—芐基—β—萘胺、N—乙基哌啶、芐胺、和二環(huán)己胺。
“水合物”是以水分子形式與水結(jié)合的分子。
“治療”疾病或癥候系指可阻止或減輕患者的疾病或癥狀。
“患者”系指溫血?jiǎng)游铮绱笫?、小鼠、狗、貓、豚鼠、靈長(zhǎng)類(lèi)和人。
本發(fā)明化合物可用本領(lǐng)域已知類(lèi)似的化學(xué)反應(yīng)來(lái)制備，用的反應(yīng)試劑是已知的或用本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)方法和技術(shù)加以制備。本質(zhì)上講，式I化合物的一般制法可以用如下反應(yīng)式來(lái)表示。在反應(yīng)式中的各名詞有如下的含義“L”系指離去基團(tuán)，適宜的離去基團(tuán)包括三氟甲基磺酸酯或芳磺酸酯(即CF3SO2O，甲苯磺酸酯，甲磺酸酯)和鹵化物(Br、Cl、或I)。
“Pg”系指適宜的保護(hù)基團(tuán)。該詞匯用于對(duì)原子的保護(hù)基，例如氮或氧，它們對(duì)不希望發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)是敏感的。適宜的保護(hù)基可以在例如“有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán)”第二版，Theodora W.Greene編John Wiley ＆ Sons，Inc.，紐約，1991中所列的找到。
R1、R2、R3、X和Z的含義如前所述。R1’、R2’、R3’和R4’都是保護(hù)基團(tuán)(Pg)。應(yīng)當(dāng)指出，Pg可以是R1、R2和R3，但氫除外。 反應(yīng)流程B與反應(yīng)流程A相對(duì)的另一種途徑
二肽骨架用皆知的策略建造，它是由肽鍵所構(gòu)成，肽鍵是將有適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基(如叔丁氧羰基，BOC)的氨基酸與肽酯經(jīng)適宜的偶聯(lián)劑偶聯(lián)而成。這包括用二環(huán)己基碳二亞碳(DCC)活化羧酸，或用另外方法，即混合酐法。 BOC選擇性去保護(hù)生成游離的氨基酸，是用氯化氫、三氟乙酸或甲酸的醚溶液處理實(shí)現(xiàn)的。生成肽鍵的實(shí)施例例如可見(jiàn)“Peptide Chem-istry，A Practical textbook”，Miklos Bodansky著，Springer—Verlag柏林，海德堡，1988所引證的文獻(xiàn)。原料可以買(mǎi)到，例如Aldrich公司有亞磷酸二芐酯，亞磷酸二乙酯、亞磷酸二丙酯和亞磷酸二丁酯。瑞士的Bachem有Boc—Leu；Leu—OMe，HCl；Boc—phe—OH；BOC—Ho-mophe—OH，BOC—D—Leu，H2O；和Tro—OBz，HCl。
二肽有吲哚環(huán)、環(huán)上R7和R8中的一個(gè)不是氫時(shí)，其制法是由維司康辛的米爾沃基的Aldrich化學(xué)公司買(mǎi)到的氨基酸(5—溴色氨酸、5—甲氧色氨酸或5—甲基色氨酸)，美國(guó)的Sigma化學(xué)公司(4—甲基色氨酸或7—甲基色氨酸)，和瑞士的Fluka化學(xué)公司(6—甲基色氨酸)制成的。
關(guān)于反應(yīng)流程A，膦酰甲基的引入是用A.Foucaud方法[Synthe-sis 916(1982)]制備的羥甲基膦酸酯(2)。羥基作為離去基團(tuán)(L)(3)被活化時(shí)，優(yōu)選用三氟甲基磺酸酯，羥基被二肽的末端氨基所置換(4)，二肽的末端羧基通常用酯如R3’保護(hù)之。
例如，羥甲基膦酸酯(2)活化成三氟甲烷磺酸酯，是通過(guò)與三氟甲烷磺酸酐或三氟甲烷磺酰氯在非質(zhì)子性溶劑中于低溫-60℃到0℃下反應(yīng)，溶劑例如是CH2Cl2、四氫呋喃、乙醚或二甲基甲酰胺或這些溶劑的混合物。質(zhì)子用有位阻的堿中和，例如同2，6—二甲基吡啶或用金屬氫化物如氫鈉。
二肽(4)與活化的膦酸酯(3)反應(yīng)，是將(4)的非質(zhì)子性溶劑的溶液加入，溫度為0℃～40℃，反應(yīng)時(shí)間1小時(shí)到3天。為生成三氟甲烷磺酸酯用同樣的堿。加入六甲基磷酰胺、二甲基甲酰胺等會(huì)提高收率。
另一個(gè)反應(yīng)流程B，也可方便地將被保護(hù)的中間體(5)與氨基酸酯(6)反應(yīng)，生成膦酰甲基氨基酸酯(7)，該酯(7)去酯化，與氨基酯(8)偶聯(lián)，生成被保護(hù)的膦酰甲基二肽(1.1)。
例如被保護(hù)的中間體(5)與氨基酸酯(6)反應(yīng)，反應(yīng)條件與(3)同(4)的反應(yīng)相似，生成膦酰甲基氨基酸酯(7)，酯(7)去酯化用堿如氫氧化鈉、氫氧化鉀或氫氧化鋰的水性甲醇、水性甲氧基乙醇或水性四氫呋喃水解，于室溫下反應(yīng)1～24小時(shí)。
氨基酯(8)與(7)去酯基后的酯偶聯(lián)，生成被保護(hù)的膦酰甲基二肽(1.1)，羧基之活化用二環(huán)己基碳二亞胺、形成混合酐(例如用氯甲酸異丁酯)或用二苯基磷酰疊氮化物(DPPA)形成酰疊氮物的方法，與氨基酯的反應(yīng)溫度為-20℃～40℃，這取決于所生成活化酯的性質(zhì)。酰疊氮物的反應(yīng)在-10℃到10℃。反應(yīng)時(shí)間為1小時(shí)到3天。
被保護(hù)的膦酰甲基二肽(1.1)然后可部分或完全去保護(hù)基。當(dāng)所有保護(hù)基都是芐基時(shí)，式I的完全去保護(hù)化合物(1.3)可方便地在堿性條件和兩相系統(tǒng)中氫解得到。式I的部分去保護(hù)化合物(1.2或1.4)可用氫解、與稀酸或稀堿，或與三甲基鹵硅反應(yīng)。
下面所述的是本發(fā)明優(yōu)選的化合物及其制備方法。然而要認(rèn)識(shí)到本發(fā)明決不只限于這些范例，已知在本領(lǐng)域的其它制備這些化合物的方法也可以使用。實(shí)施例1 N—(N—膦酰甲基—L—亮氨酰)—L—色氨酸步驟AN—(N—二芐氧基氧膦基甲基—L—亮氨酰)—L—色氨酸芐酯于無(wú)水二氯甲烷5ml中的二芐氧基氧膦基甲醇372mg慢慢地加到冷卻到-50℃的新蒸的2，6—二甲基吡啶0.36ml與三氟甲烷磺酰酐0.25ml的二氯甲烷10ml的溶液中?；旌衔镉?50℃攪拌10分鐘，然后使溫度保溫到0℃1小時(shí)。
不必分離，向生成的三氟甲烷磺酸、二芐氧基氧膦基甲基酯中于0℃加入L—亮氨酰—L—色氨酸芐酯500mg(作為游離胺)于5ml的無(wú)水二氯甲烷的溶液。0℃攪拌該混合物1小時(shí)，室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。真空下蒸發(fā)反應(yīng)混合物得橙色油狀物1.60g，用快速硅膠層析(55g，230—400目)純化，乙酸乙酯與庚烷(由1∶1變到1∶0)洗脫，蒸除溶劑，得本標(biāo)題化合物為無(wú)色油狀物240mg，31P NMRCDCl3δ(相對(duì)于外標(biāo)H3PO4)多重峰(8峰)(J＝9H2)，27.0ppm。步驟2N—(N—膦酰甲基—L—亮氨酰)—L—色氨酸N—(N—二芐氧基氧膦基甲基—L—亮氨酰)—L—色氨酸芐酯240mg與10％鈀碳40mg于乙酸乙酯10ml和碳酸氫鉀(89mg)的水溶液(10ml)構(gòu)成的兩相溶液中，常壓氫化，室溫?cái)嚢?小時(shí)。混合物去氫氣，濾除催化劑，分出水層，用乙酸乙酯洗滌，過(guò)濾，冷凍干燥得白色粉末192mg。將此物質(zhì)再溶于10ml水中，慢慢加入鹽酸水溶液以中和(0.1N，11ml)。濾集生成的沉淀，真空干燥得本標(biāo)題化合物，為白色粉末115mg。31P NMRDMSOδ(相對(duì)于外標(biāo)H3PO4)，14ppm，多重峰。元素分析C18H26N3O6P.1.2H2O理倫值 C49.93H6.61N9.70實(shí)測(cè)值 C49.91H6.53N9.65MP用DSC測(cè)232℃(吸熱)實(shí)施例2 N—(N—芐氧基羥基氧膦基甲基—L—亮氨酰)—L—色氨酸芐酯將N—(N—二芐氧基氧膦基甲基—L—亮氨酰)—L—色氨酸芐酯100mg(實(shí)施例1，步驟A)溶解于5ml乙酸乙酯，加10％鈀碳15mg常壓室溫氫化8小時(shí)?；旌衔镞^(guò)濾，得到的固體用甲醇萃取，蒸發(fā)溶劑，得本標(biāo)題化合物70mg，為白色固體。31P NMRCD3ODδ(相對(duì)于外標(biāo)H3PO4)9.6ppm，多重峰。微量分析C23H38N3O6P·0.5H2O理論值 C63.99H6.54N7.00實(shí)測(cè)值 C64.06H6.32N6.98實(shí)施例3 N—(N—芐氧基羥基氧膦基甲基—L—亮氨酰)—L—色氨酸100mg N—(N—(二芐氧基氧膦基甲基—L—亮氨酰)—L—色氨酸芐酯于5ml乙醇的溶液用1N氫氧化鉀溶液0.30ml處理，室溫下攪拌4天。反應(yīng)畢，減壓蒸除溶劑，剩余物再溶于水中，加入稀鹽酸沉淀出本標(biāo)題化合物。實(shí)施例4 N—(N—膦酰甲基—L—亮氨酰)—DL—高色氨酸步驟AL—亮氨?！狣L—高色氨酸乙酯4—(β—吲哚基)—2—酮基于酸乙酯溶解于乙醇，加入過(guò)量的濃氨水和10％Pd/C。于5巴壓力下氫化，濾除催化劑，真空蒸發(fā)濾液，得到粗品于二氯甲烷中用二環(huán)己基碳二惡胺和羥基苯并三唑與N—叔丁氧羰基亮氨酸偶聯(lián)。濾除二環(huán)己基脲，得到的肽粗品在除去溶劑后硅膠層析得N—(N—叔丁氧羰基—L—亮氨酰)—DL—高色氨酸乙酯。與甲酸反應(yīng)，用碳酸鈉水溶液—乙酸乙酯萃取游離堿，得本標(biāo)題化合物。步驟BN—(N—二芐氧基氧膦基甲基—L—亮氨酰)—DL—高色氨酸乙酯用類(lèi)似于實(shí)施例1制備N(xiāo)—(N—二芐氧基氧膦基甲基—L—亮氨酰)—L—色氨酸芐酯的方法，制備本標(biāo)題化合物。步驟CN—(N—二芐氧基氧膦甲基—L—亮氨酰)—DL—高色氨酸N—(N—二芐氧基氧膦基甲基—L—亮氨酰)—DL—高色氨酸乙酯于2—甲氧基乙醇的溶液用氫氧化鋰水溶液(1當(dāng)量，2—甲氧基乙醇/水9/1(體積/體積))處理。蒸除溶劑，酸化生成本標(biāo)題化合物。步驟DN—(N—膦酰基甲基—L—亮氨酰)—DL—高色氨酸按照實(shí)施例1所述制備N(xiāo)—(N—膦酰甲基—L—亮氨酰)—L色氨酸的方法，氫化N—(N—二芐氧基氧膦基甲基—L—亮氨酰)—DL—高色氨酸，得本標(biāo)題化合物。實(shí)施例5 N—[N—(二—(新戊酰氧甲基)—膦?；?—甲基—亮氨酰]—L—色氨酸乙酯步驟AN—(N—膦酰甲基—L—亮氨酰)—L—色氨酸乙酯于室溫下用三甲基溴硅的二氯甲烷溶液處理N—(N—二甲基膦酰甲基—L—亮氨酰)—L—色氨酸溶液?；旌衔餄饪s，剩余物用水處理，過(guò)濾，干燥得本標(biāo)題化合物。步驟BN—[N—(二—(新戊酰氧甲基)—膦酰基)—亮氨酰]—L—色氨酸乙酯N—(N—膦酰甲基—L—亮氨酰)—L—色氨酸乙酯和18冠醚—6的甲苯溶液冷卻至0℃，用2當(dāng)量雙—(三甲基硅酰胺)鉀處理。該混合物與新戊酰碘甲酯(2當(dāng)量)反應(yīng)18小時(shí)。加入乙酸乙酯，混合物用水洗滌，干燥、濃縮，硅膠層析，得到本標(biāo)題化合物。實(shí)施例6 N—(N—新戊酰氫甲氧基羥基氧膦基—L—亮氨酰)—L—色氨酸乙酯N—[N—(二—新戊酰氧甲基)—膦酰)—亮氨酰]—L—色氨酸乙酯的乙醇溶液冷卻至0℃，滴加1當(dāng)量氫氧化鈉溶液。繼續(xù)攪拌15分鐘，反應(yīng)混合物用1N鹽酸中和(1當(dāng)量)。減壓濃縮，剩余物于二氯甲烷和冷水間分配，有機(jī)相干燥后減壓濃縮。膦酸單酯最后用硅膠快速層析純化。實(shí)施例7 N—(N—膦酰甲基—L—亮氨酰)—DL—5—甲基色氨酸三鉀鹽步驟ADL—5—甲基色氨酸芐酯鹽酸鹽2.03g DL—5—甲基色氨酸溶于甲醇中，與2.17g二碳酸二叔丁酯和三乙胺(1.02g)于室溫反應(yīng)4小時(shí)。反應(yīng)混合物蒸發(fā)、用乙酸乙酯/水萃取。pH2酸化水相(用稀鹽酸)，乙酸乙酯萃取，硫酸鎂干燥，蒸發(fā)溶劑得N—(叔丁氧羰基)—DL—5—甲基色氨酸，為白色固體。
2.72g該化合物溶解于二氯甲烷和乙腈(1∶1，100ml)，于0℃與二環(huán)己基碳二亞胺(1.80g)和羥基苯并三唑水合物(1.31g)反應(yīng)。于0℃攪拌半小時(shí)，后加入0.97g芐醇和96mg 4—二甲胺基吡啶。室溫下攪拌1周，混合物用乙酸乙酯稀釋?zhuān)^(guò)濾。用乙酸乙酯萃取，5％檸檬酸水溶液萃取，有機(jī)相用碳酸氫鈉和食鹽水溶液洗滌，硫酸鎂干燥，蒸發(fā)溶劑，得粗品，經(jīng)硅膠層析(230—400目，90g)純化，洗脫劑乙酸乙酯/庚烷1∶4，得到N(—叔丁氧羰基)—DL—5—甲基色氨酸芐酯，為白色固體(1.08g)。將其懸浮于甲酸中，室溫?cái)嚢?小時(shí)。蒸發(fā)甲酸，剩余物用甲醇與稀鹽酸溶解，蒸發(fā)后發(fā)生本標(biāo)題化合物，為白色固體。步驟BN—[N—(叔丁氧羰基)—L—亮氨酰]—DL—5—甲基色氨酸芐酯249g N—(叔丁氧羰基)亮氨酸水合物與DL—5—甲基色氨酸芐酯鹽酸鹽344mg偶聯(lián)，堿用三乙胺(152mg)，偶聯(lián)劑為二環(huán)己基碳二亞胺(209mg)，方法按實(shí)施例4步驟A所述進(jìn)行。粗品為白色固體(472mg)，于乙酸乙酯/庚烷混合溶劑中重結(jié)晶，得329mg。步驟CN—L—亮氨?！狣L—5—甲基色氨酸N—[N—(叔丁氧羰基)—L—亮氨酰]—DL—5—甲基色氨酸芐酯321mg于甲酸中裂解，方法如前所述。粗品用乙酸乙酯和碳酸鈉水溶液萃取。有機(jī)層用食鹽水溶液洗滌，硫酸鈉干燥。蒸發(fā)溶劑，得本標(biāo)題化合物，為油狀物(241mg)。步驟DN—[N—(二芐氫基氫膦基甲基)—L—亮氨酰]—DL—5—甲基色氨酸芐酯171mg二芐氧基氧膦基甲醇按實(shí)施例1所述方法與240mg N—L—亮氨酰—DL—5—甲基色氨酸芐酯偶聯(lián)，黃色油狀物用硅膠層析純化(85g硅膠)，乙酸乙酯/庚烷1∶1和純乙酸乙酯洗脫，蒸發(fā)溶劑后，得黃色油狀物136mg，31P NMRCDCl3δ(相對(duì)于外標(biāo)H3PO4)，26.9和26.7ppm，多重峰。步驟EN—(N—膦酰甲基—L—亮氨酰)—DL—5—甲基色氨酸三鉀鹽碳酸氫鉀(41mg)于水(5ml)的溶液和10％鈀碳(30mg)加到113mg N—[N—(二芐氧基氧膦基甲基)—L—亮氨酰]—DL—5—甲基色氨酸芐酯的乙酸乙酯(5ml)溶液中。在常溫常壓下攪拌混合物氫化過(guò)夜。過(guò)濾混合物，凍干，得本標(biāo)題化合物81mg，為米色固體。31P NMRD2Oδ(相對(duì)于外標(biāo)H3PO4)，12.2和9.8ppm，多重峰。元素分析C19H25N3O6P3K，2H2O理論值 C39.64，H5.08，N7.30實(shí)測(cè)值 C39.39，H5.30，N7.09實(shí)施例8為表明本化合物作為降壓藥的效果，用如下方案。
體重250—300g雄性Spague—Dawley大鼠用烏拉坦(1.25g/kg，腹腔注射)麻醉必要時(shí)補(bǔ)加。用Tygon導(dǎo)管插到右主頸動(dòng)脈和右股靜脈中，分別作監(jiān)栓動(dòng)脈壓和靜脈給藥用。在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)之前將藥物制劑穩(wěn)定化30分鐘。動(dòng)脈壓連續(xù)用TA 2000 Gould帶圖記錄器連接數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)(數(shù)據(jù)處理來(lái)自Crystal Biotech，美國(guó))進(jìn)行監(jiān)測(cè)。
大鼠隨機(jī)分組，靜脈藥用注射(100ml/100g，0.3ml生理食鹽水沖入)或是生理食鹽水，或是磷酰阿米冬(劑量1～100μmol/kg)，或本發(fā)明化合物。5分鐘后，給Pro—ET1(1nmol/kg)，是以靜脈藥用注射方法(10μl/100g，0.3ml生理食鹽水沖入)。動(dòng)脈壓的變化記錄30分鐘。為避免任何人為因素，每只大鼠只接受1次預(yù)處理和只1次Pro.ET1劑量。Pro—ET1產(chǎn)生升壓作用，磷酰阿米冬抑制此作用。本發(fā)明化合物對(duì)抗磷酰阿米冬的抑制作用。
人/豬的Pro—ET1來(lái)自肽研究所(日本大板)，溶解于0.1％乙酸中，得10-4M儲(chǔ)液，其精確濃度可用280nm的分光光度測(cè)定的吸收來(lái)核對(duì)，消光系數(shù)為7245M-1cm-1。儲(chǔ)液等分后凍干，存放于-20℃。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天將此肽再溶解并用生理食鹽水溶液稀釋。實(shí)施例9為了顯示本發(fā)明化合物治療蛛網(wǎng)膜下出血的效應(yīng)，可按于LifeSciences 49841—848(1991)所述方法進(jìn)行。實(shí)施例10為了呈現(xiàn)本發(fā)明化合物對(duì)治療哮喘的效應(yīng)，用兩種性別的Hartrey豚鼠，心內(nèi)注射于家兔(IgC)或豚鼠(IgG或IgE)抗特異抗泵(卵白蛋白)制備的抗血清，以被動(dòng)致敏?；衔锝o致敏豚鼠的途徑、劑量和時(shí)間，取決于實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。豚鼠經(jīng)噴霧抗原溶液造成免疫。噴霧后衰衰時(shí)間和5分鐘后的死亡率記錄下來(lái)。陰性對(duì)照是被動(dòng)致敏的豚鼠不接受治療，該組的死亡率一般為90～100％。陽(yáng)性對(duì)照藥用氯苯那敏和賽庚啶。實(shí)施例11為了呈現(xiàn)本發(fā)明化合物對(duì)治了充血性心力衰竭的效果，按照Cr-culation 86(6)2226—2230(1990)所述的方法進(jìn)行。該方法用于本發(fā)明化合物時(shí)對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物的預(yù)處理進(jìn)行了改進(jìn)。實(shí)施例12為了呈現(xiàn)本發(fā)明化合物對(duì)治療腎衰竭的效果，按照EuropeanJournal of pharmacology 22177—83(1992)所述方法進(jìn)行。實(shí)施例13為了體外內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶(ECE)的試驗(yàn)，用大鼠大腦切片的IP1形成作用。該試驗(yàn)測(cè)定的酶活性是負(fù)責(zé)由前內(nèi)皮素—1產(chǎn)生功能性?xún)?nèi)皮素—1，是通過(guò)測(cè)定對(duì)磷脂酰肌醇轉(zhuǎn)化的刺激作用作為內(nèi)皮素—1效應(yīng)的標(biāo)記物。原理業(yè)已證明，內(nèi)皮素—1(ET—1)可以以劑量依賴(lài)性地刺激磷脂酰肌醇的轉(zhuǎn)化，是通過(guò)激活內(nèi)皮素受體起作用的(Masaki等，Circala-tim，841457，1991)。ET—1的前體是前內(nèi)皮素—1(Pro—ET1)，不能刺激磷脂肌醇的轉(zhuǎn)化，除非它被特異的磷酰阿米冬敏感的蛋白酶、即內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶(ECE)裂解。腦組織已知既含有ET—1受體也有ECE(Gulati和SrimalDrug Devel.Res.，26361，1992)。本試驗(yàn)所采用的方法是Brown et alJ.Neurochem.，421379，1984中所述方法。步驟肽的制備人/豬ET—1和Pro—ET—1購(gòu)自肽研究所(日本大板)，將其溶于0.1％乙酸溶液中，得到10-4M儲(chǔ)溶。該溶液準(zhǔn)確的濃度用280nm的分光光度的吸光度加以核對(duì)，公式為C＝A/LE280。[C為溶液中肽的濃度；A是測(cè)得的吸光度；L是溶液的光路長(zhǎng)度；E280是溶液中肽的消光系數(shù)(Pro—Et—1和ET—1的E280分別為8370和7025M-1cm-1)]。然后將儲(chǔ)液等分，凍干，貯于-20℃，試驗(yàn)當(dāng)天將肽重新溶解，用水稀釋(用于其它試驗(yàn)的肽也用此法制備)。組織的制備體重200—300g雄性Sprague Dawley大鼠(Charles河，法國(guó))擊昏、斷頭，迅速摘出大腦置于玻璃皿內(nèi)。迅速將紋狀體周?chē)慕M織剝離，置于麥?zhǔn)锨兴闄C(jī)的塑料盤(pán)中。為制備橫切片，將組織切成0.35mm厚的切片，轉(zhuǎn)90°后再切第二次。將切片懸浮于生理緩沖液中(mMNaCl 118，KCl 5.0，CaCl21.3，KH2PO41.0，MgSO41.2，NaHCO3，葡萄糖10，不斷用碳合氣充氣)，用于測(cè)定Pro—Et—1和ET—引發(fā)的磷酸肌醇的生成。Pro—ET—1對(duì)磷脂酰肌醇轉(zhuǎn)化的刺激作用6只大鼠得到的大腦切片懸浮于不斷用碳合氣充氣的緩沖液內(nèi)。在60分鐘的預(yù)溫育期間，使容器中的切片于37℃浴液中振搖，使緩緩攪動(dòng)不使其沉下。每15分鐘更換緩沖液一次。在此時(shí)間內(nèi)，將500μl樹(shù)脂(見(jiàn)下)放于小柱內(nèi)并用水浸漬直至浸出液pH呈中性。將適當(dāng)體積的[3H]—肌醇與少量體積水混合過(guò)柱。然后將此樹(shù)脂用水沖洗，使足以得到洗脫液的[3H]—肌醇體積達(dá)到所希望的濃度。
各個(gè)切片分放在5ml平底瓶?jī)?nèi)，其中含有5mM氯化鋰。每瓶中加入純化的[3H]—肌醇等分液，使個(gè)瓶?jī)?nèi)的最終濃度為0.1μm，將組織于37℃振蕩浴中溫育30分鐘，加入拮抗劑，使在瓶中的最終濃度為10-5M，15分鐘后加入10-6M Pro—Et—1；對(duì)照組瓶?jī)?nèi)加入等體積的緩沖液/溶劑。每次加入后，小瓶緩緩渦旋振蕩，吹入碳合氣，蓋蓋后，再放回到37℃振蕩浴中。溫育30分鐘后加入940μl氯仿/甲醇(1∶2，V/V)以中止反應(yīng)，并將樣品劇烈渦旋振蕩。再各加入310μl的氯仿和水，離心分開(kāi)兩相。水相的750μl等分液定量分析生成的[3H]—肌醇單磷酸酯。([3H]—IP1)在這些條件下，用測(cè)定[3H]—IP1的積累量可確定Pro—Et—1對(duì)磷脂酰肌醇轉(zhuǎn)化的刺激作用。
用陰離子交換層析將[3H]—IP1與[3H]—肌醇分開(kāi)。100只BioRad Econo—柱層析層柱(0.7×15cm)安置在有機(jī)玻璃支架上，以便每個(gè)柱洗脫下的直接進(jìn)入到20ml閃爍計(jì)數(shù)瓶的軌道上。每只柱含AG1—X8樹(shù)脂(100—200目)50％懸液1ml，為甲酸鹽型。洗脫緩沖液用蠕動(dòng)泵(一次洗20只柱)輸送。在加入水相之前，柱中樹(shù)脂用pH7.4的10mM Tris—甲酸鹽10ml洗3次。加入水相后，每只柱用10ml蒸餾水洗2次，再用10ml具有5mM四硼酸鈉的60mM甲酸銨洗滌，洗脫液棄去。IP1洗脫到含有8ml 0.2M甲酸銨于0.1M甲酸的閃爍瓶中。然后樹(shù)脂用10ml 1M甲酸鈉于0.1M甲酸的溶液洗滌，再用10ml 2M甲酸洗滌3次，使其再生。將柱塞死，用2M甲酸充滿。從柱上洗脫下的氚用液閃計(jì)數(shù)器定量。
AG1—X8樹(shù)脂在使用之前按Kakamoto和Armstrong在J.Biol.Chem.，237208，1962所述方法分批洗滌。在此洗滌步驟中，甲酸用HCl代替，丙酮洗滌后，將樹(shù)脂干燥數(shù)分鐘，再懸浮于1M甲酸(1∶1，重量/體積)中，貯存于4℃。結(jié)果分析每次實(shí)驗(yàn)，測(cè)定重復(fù)三次。
空白(無(wú)組織)和基準(zhǔn)(無(wú)刺激)值確定后，從測(cè)定的總IP1變化中減去。為使觀測(cè)標(biāo)準(zhǔn)化，每個(gè)實(shí)驗(yàn)要估計(jì)25μl[3H]—肌醇(IM，dpm)的活性，測(cè)得的IP1變化乘以因子106/IM。最后的數(shù)據(jù)的表示方法是在沒(méi)有抑制劑存在下被Pro—ET—1 10-6M引發(fā)的最大效應(yīng)的平均％(至少3次觀測(cè))。
當(dāng)一化合物于10-5M引起的抑制Pro—Et—1介導(dǎo)的效應(yīng)超過(guò)50％時(shí)，則用核抑制劑建立一完全的劑量—效應(yīng)曲線，用作圖法確定IC50(抑制10-6M Pro—ET—1效應(yīng)的50％時(shí)的濃度)。在這種情況下，了解這樣一化合物對(duì)ET1的影響也是很重要的，用如Pro—Et—1所述的同樣的實(shí)驗(yàn)步驟建立對(duì)ET1 10-6M的劑量一效應(yīng)曲線。然后用作圖法確定降低ET1 10-6M效應(yīng)的50％時(shí)的濃度(RC50的濃度。
若一化合物于3×10-5M濃度下不能降低Pro—Et—1或ET—1效應(yīng)之50％，該化合物用IC50或RC50，＞30μm進(jìn)行表征，記錄觀測(cè)到的最大降低量的％數(shù)。
式I化合物的藥理學(xué)最后用途最好是以藥用酸加合鹽形式用藥。當(dāng)然，化合物的有效劑量隨著適應(yīng)癥的不同、所用化合物的各自強(qiáng)度，受治疾病的嚴(yán)重程度和性質(zhì)以及患者個(gè)體情況而變動(dòng)。通?；衔锏娜碛盟幟咳談┝堪疵抗矬w重大約0.01mg到20mg可獲得有效結(jié)果。治療時(shí)開(kāi)始應(yīng)用較低劑量。劑型可口服固體劑型，例如膠囊、片劑或粉劑，或液體劑型，如溶液或懸浮液?；衔镆部梢詼缇芤夯驊腋∫盒问椒墙?jīng)腸注射給藥。
在實(shí)施本發(fā)明方法時(shí)，有效成分優(yōu)選以組合物方式制成，組合物含有藥用載體和大約5％或90％(重量％)的本發(fā)明化合物或它們的藥用鹽。“藥用載體”系指已知的藥用賦形劑，用于動(dòng)物內(nèi)服的含有效化合物的藥用劑型，它們?cè)趹?yīng)用條件下基本無(wú)毒或非致敏作用。組合物可用已知方法制成片劑、膠囊、酏劑、糖漿、乳劑、分散劑和可濕性粉劑及泡騰粉劑，并含有已知用于制備所需組合物的特定形態(tài)時(shí)的適宜賦形劑。
適宜的服用途徑是口服。口服式I化合物可制成固體或液體制劑，如膠囊劑、丸劑、片劑、糖錠劑、包衣劑、熔融劑、粉劑、溶液、懸浮劑或乳劑、固體單位劑型可以是膠囊劑，是通常的硬或軟明膠膠囊，含有例如表面活性劑、潤(rùn)滑劑或惰性填充劑例如乳糖、蔗糖、磷酸鈣和玉米淀粉。本發(fā)明化合物的另一具體實(shí)例是制成片劑，用常規(guī)的片劑基質(zhì)如乳糖、蔗糖、玉米淀粉與粘合劑合用，如阿拉伯膠、玉米淀粉或明膠、崩解劑是使服用后的片劑有助于裂解和溶解，如馬鈴薯淀粉、藻酸、玉米淀粉和瓜耳樹(shù)膠；潤(rùn)滑劑是改善片劑顆粒的流動(dòng)性，并防止片劑物料粘著在片模和片沖頭的表面上，例如用滑石粉、硬脂酸、硬脂酸鎂、鈣或鋅；染料，著色劑和增強(qiáng)香味的矯味劑，使患者更易于接受。用作口服液體劑型的適宜賦形劑包括有稀釋劑，如水和醇炎，如乙醇、芐醇和聚乙烯醇，或加入或不加入藥用表面活性劑、懸浮劑或乳化劑。
本發(fā)明式I化合物也可非經(jīng)腸用藥，即化合物與生理可接受的稀釋劑與藥用載體制成皮下注射、靜脈注射、肌肉注射或腹腔注射用注射劑，具有藥用載體的稀釋劑可以是滅菌液體或液體混合物，例如水、生理食鹽水溶液、葡萄糖水溶液和類(lèi)似的糖溶液，醇類(lèi)如乙醇、異丙醇或十六烷醇，二醇類(lèi)如丙二醇或聚乙二醇，甘油縮酮，如2，2—二甲基—1，3—二氧六烷—4—甲醇，醚類(lèi)，如聚乙二醇400，油類(lèi)如脂肪酸、脂肪酸酯或甘油酯，或乙?；闹舅岣视王ィ尤牖虿患铀幱帽砻婊钚詣?，如肥皂或洗滌劑；懸浮劑如果膠，Car-bomers、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素或羧甲基纖維素，或用乳化劑和其它藥用助劑、用于本發(fā)明非經(jīng)腸制劑的油類(lèi)是有石油、動(dòng)物油、植物油或合成來(lái)源的油，例如花生油、豆油、麻油、棉籽油、玉米油、橄欖油、石油及礦油。適宜的脂肪酸包括有油酸、硬脂酸和異硬脂酸，適宜的脂肪酸酯例如有油酸乙酯、肉豆蔻酸異丙酯。適宜的肥皂包括有脂肪酸堿金屬鹽、銨鹽和三乙醇胺鹽；適宜的洗滌劑包括陽(yáng)離子洗滌劑例如有鹵化二甲基二烷銨，鹵化烷基吡啶鎓；陰離子洗滌劑例如烷基、芳基或烯基磺酸鹽，硫酸烷基、烯基、醚基和一甘油酯鹽，和磺基琥珀酸鹽；非離子性洗滌劑，如脂肪胺氧化物，脂肪酸烷醇酰胺和聚氧乙烯聚丙烯共聚物；兩性洗滌劑，例如β—氨基丙酸烷基酯和2—烷基咪唑啉季銨鹽以及它們的混合物。本發(fā)明的胃腸道外用藥組合物有代表性的是在溶液中含有式I化合物大約0.5％到25％(重量％)。也可方便地用防腐劑和緩沖劑。為了降低或消除注射部位的刺激性，這類(lèi)組合物可含有非離子性表面活性劑，其親水—親脂平衡值(HLB)大約為12到17。這種制劑的表面活性劑量大約為5％到15％(重量)。表面活性劑可以是單一成分，具有上述的HLB值，或是由2個(gè)或多個(gè)具有所希望的HLB值的混合物。用于胃腸道外用藥劑型的有代表性的表面活性劑是類(lèi)聚乙烯山梨醇脂肪酸酯，例如山梨醇—油酸醌和環(huán)氧乙烷與流水性基質(zhì)的高分子量加成產(chǎn)物，是內(nèi)環(huán)氧丙烷與丙二醇縮合而成。
本發(fā)明化合物也可局部用藥。這可簡(jiǎn)單地制成化合物的溶液，優(yōu)選用的溶劑是促進(jìn)透皮吸收如乙醇或二甲基亞砜(DMSO)，有或沒(méi)有其它的賦形劑。優(yōu)選的局部用藥是用貯庫(kù)貼劑和帶孔膜型貼劑，或是各種固體基質(zhì)的貼劑。
在美國(guó)專(zhuān)利No.374295l、3797494、3996934和4031894中敘述了一些適宜的透皮裝置。這些裝置通常含有背面膜，它是表面的一層，一種可使有效成分透入的粘合層，它是另一層，和至少一個(gè)貯庫(kù)，它含有有效成分，在這兩層之間。另外，有效成分可以含在多個(gè)微囊中，微囊分散在通透性的粘合層中。在這兩種情況下，每一種都是有效成分連續(xù)地從貯庫(kù)或微囊中轉(zhuǎn)運(yùn)到有效成分可通透的粘合層中后者與貼附的皮膚或粘膜相接觸。如果有效成分經(jīng)皮膚吸收，則給患者服用的要使有效成分受控地或按預(yù)定的方式流入。在微囊情況下，封囊劑也起到膜的作用。
本發(fā)明化合物透皮給藥的另一種裝置是將藥用有效成分含于基質(zhì)上，自該基質(zhì)上有效成分以所希望的、逐漸的、恒定的和受控速度而透入。該基質(zhì)對(duì)于經(jīng)擴(kuò)散或微孔流動(dòng)而使釋放的化合物得以透入。釋放速度是控制性的。這種不需要膜的系統(tǒng)敘述于美國(guó)專(zhuān)利No.3921636。在這些系統(tǒng)中至少可以有兩種釋放形式。當(dāng)基質(zhì)是非孔性的，是通過(guò)擴(kuò)散而釋放。藥用有效化合物溶解于基質(zhì)中，并經(jīng)過(guò)基質(zhì)本身擴(kuò)散。當(dāng)藥用有效成分經(jīng)液相穿越基質(zhì)的小孔時(shí)，發(fā)生的釋放是經(jīng)微孔流入。
本發(fā)明化合物也可按普遍已知的技術(shù)制成霧制劑。氣霧制劑制成局部應(yīng)用或吸入應(yīng)用，氣霧制劑可以是溶液或懸浮液形式，也可含有其它成分如溶劑、驅(qū)動(dòng)劑和(或)分散劑。氣霧制劑的有代表性實(shí)例可見(jiàn)于Remington’s Pharmacentical Sciences，18版，Mack出版公司，Easton Pennsylvania，PP.1694—1712(1990)。
與用作治療藥物的大多數(shù)化合物組一樣，某些亞組及特定化合物是優(yōu)選的。在該實(shí)例中，優(yōu)選的化合物是R1為氫、R2為什么都不是，R6是H2，R3是H、或(CH2)、芳基、Z是異丙基，n為1。
權(quán)利要求
1.式I的化合物、其立體異構(gòu)體、水合物、內(nèi)鹽或藥用鹽 式中，R1和R2各自獨(dú)立為氫、C1—6烷基、(CH2)m—芳基、R4—C(O)O—CH(R5)—或當(dāng)形成內(nèi)鹽時(shí)，什么都沒(méi)有，若R1或R2中一個(gè)是氫、C1—6—烷基、或(CH2)m—芳基時(shí)，另一個(gè)是氫或若形成內(nèi)鹽時(shí)什么都沒(méi)有；R3是氫、C1—C6—烷基，(CH2)m—環(huán)烷基，或(CH2)m—芳基；R4是C1—10—烷基、(CH2)m—環(huán)烷基或(CH2)m—芳基；R5是C1—6—烷基、(CH2)m—環(huán)烷基或氫；R6是H，或H2，此時(shí)R1或R2中一個(gè)什么都沒(méi)有，因而形成了內(nèi)鹽；R7是CH3或H；R8是H、Br、CH3、或OCH3，前提是R7或R8中一個(gè)是H；Z是(CH2)m—芳基或C1—12—烷基；X是H或C1—6—烷基；上述的m各自獨(dú)立為0、1、2或3；n為1、2或3。
2.權(quán)利要求1的化合物，其特征是，R1是H。
3.權(quán)利要求1的化合物，其特征是，R2什么都沒(méi)有，R6是H2。
4.權(quán)利要求1的化合物，其特征是，R3是H，或(CH2)—芳基。
5.權(quán)利要求1的化合物，其特征是，Z是異丁基。
6.權(quán)利要求1的化合物，其特征是，X是H。
7.權(quán)利要求1的化合物，其特征是，化合物選自如下化合物N—(N—膦酰甲基—L—亮氨酰)—L—色氨酸；N—(N—芐氧基羥基氧膦基甲基—L—亮氨酰)—L—色氨酸芐酯，N—(N—芐氧基羥基氧膦基甲基—L—亮氨酰)—L—色氨酸。N—(N—膦酰甲基—L—亮氨酰)—DL—高色氨酸，N—[N—(二—(新戊酰氧甲基)—膦?；?—亮氨酰]—L—色氨酸乙酯，N—(N—(新戊酰氧甲氧基羥基氧膦基—L—亮氨酰)—L色氨酸乙酯。
8.用作藥用有效化合物的權(quán)利要求1的化合物。
9.權(quán)利要求1的藥用組合物，任選地與藥用載體相組合。
10.權(quán)利要求1的化合物，用于治療心血管疾病，支氣管收縮，神經(jīng)作用的紊亂，血管疾病和腎病，這些是負(fù)責(zé)內(nèi)皮細(xì)胞受抑制的狀態(tài)。
11.權(quán)利要求1的化合物的用途，任選地與藥用載體合用，以制備用來(lái)治療與內(nèi)皮細(xì)胞受抑制的而產(chǎn)生的心血管疾病、支氣管收縮、神經(jīng)作用紊亂、血管疾病和腎病的藥用組合物。
全文摘要
本發(fā)明是關(guān)于式I化合物，其制備方法，含有這些化合物的藥用組合物以及用于治療與內(nèi)皮細(xì)胞受抑制而產(chǎn)生的各種疾病。這類(lèi)化合物是含有膦酰甲基的二肽及其類(lèi)似物，具有抑制內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶的作用。
文檔編號(hào)A61P25/00GK1120844SQ9419163
公開(kāi)日1996年4月17日 申請(qǐng)日期1994年2月22日 優(yōu)先權(quán)日1993年3月30日
發(fā)明者H·奧切蒙特, M·比格奧特 申請(qǐng)人:默里爾多藥物公司