專(zhuān)利名稱(chēng)：交聯(lián)的酸性多糖及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種通過(guò)與雙酐或聚酐反應(yīng)而交聯(lián)的酸性多糖，優(yōu)選的是與雙酐交聯(lián)的透明質(zhì)酸。這種交聯(lián)透明質(zhì)酸可以用來(lái)作為一種藥物輸送載體治療關(guān)節(jié)炎，以減少手術(shù)后形成粘合的發(fā)病率，促進(jìn)慢性傷口和潰瘍的愈合，并且可以作為化妝品配方的一種組份。
人們發(fā)現(xiàn)哺乳動(dòng)物關(guān)節(jié)內(nèi)的潤(rùn)滑流體具有潤(rùn)滑劑和震動(dòng)吸收劑的作用，潤(rùn)滑流體中最重要的組份是透明質(zhì)酸鈉，它對(duì)流體的上述機(jī)械性能具有重要的作用。透明質(zhì)酸是一種具有一個(gè)通過(guò)β1-3糖苷鍵連接的D-葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基葡糖-2-乙酰氨基-2-脫氧-D-葡萄糖而形成的重復(fù)雙糖單元的天然存在的高分子葡糖胺聚糖。雙糖通過(guò)β1-4糖苷鍵連接形成一條無(wú)支鏈不交聯(lián)的多糖鏈。除了存在于潤(rùn)滑流體中，透明質(zhì)酸還出現(xiàn)在細(xì)胞層、細(xì)胞周凝膠、脊椎動(dòng)物結(jié)締組織的細(xì)胞外基質(zhì)物、眼睛玻璃體、人體臍帶組織、公雞雞冠和某些細(xì)菌中。
健康的潤(rùn)滑流體中，透明質(zhì)酸鈉的分子量很大，范圍從1,600,000至10,900,000。由于分子量如此的大，即使是稀的溶液也表現(xiàn)出顯著的粘彈性質(zhì)。在一般的人體潤(rùn)滑流體中透明質(zhì)酸鈉的濃度約0.3％。
骨關(guān)節(jié)炎或類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎引起的關(guān)節(jié)發(fā)炎期間，透明質(zhì)酸的分子量和濃度都在下降，這種分子量的減小降低了潤(rùn)滑流體作為震動(dòng)吸收劑的性能，因此流體不能對(duì)關(guān)節(jié)軟骨提供足夠的保護(hù)，關(guān)節(jié)炎嚴(yán)重的話(huà)會(huì)造成軟骨被侵蝕掉，當(dāng)關(guān)節(jié)處于運(yùn)動(dòng)時(shí)引起疼痛(參見(jiàn)"THEMERCK MANUAL OF DIAGNOSIS ANDTHERAPY-16TH EDITION”P(pán)1338-42)。
相對(duì)中等分子量的透明質(zhì)酸鈉已經(jīng)成功地作為增補(bǔ)潤(rùn)滑流體用到賽馬的腿關(guān)節(jié)中(BALAZS等，J.EQ UINE VET.SCI.P217-228，1985)。然而，與馬關(guān)節(jié)的潤(rùn)滑流體相比，人體關(guān)節(jié)潤(rùn)滑流體實(shí)際上包含著更大分子量的透明質(zhì)酸鈉。
作為人類(lèi)骨關(guān)節(jié)炎患者的增補(bǔ)潤(rùn)滑流體，人們還做過(guò)通過(guò)注射透明質(zhì)酸鈉的溶液到關(guān)節(jié)內(nèi)的試驗(yàn)。Weiss等，Semin.Arthritis Rheum.11，P143，(1981)報(bào)導(dǎo)了注射透明質(zhì)酸鈉治療關(guān)節(jié)炎的方法；同樣的報(bào)導(dǎo)還披露在Nakimi等J.Clin.Pharmcol.Therapy，20，P501(1982)；Grecomoro等，Pharmatherapeutica，5，P137(1987)以及Briganiti等，Clinical Tri-als Journal，24，P333，(1987)中。然而對(duì)這些方法最新的評(píng)價(jià)指出透明質(zhì)酸鈉溶液的關(guān)節(jié)內(nèi)注射與對(duì)照劑間沒(méi)有可測(cè)定的差異(Dahlberg等，“Arthritis Rheumatism，37，P521，1994)。Brown等在其“Exp.Physio1.”76，P125(1991)中指出注射到關(guān)節(jié)內(nèi)的透明質(zhì)酸其半衰期僅約為13小時(shí)。Dahlberg，videsupra，早已指出13小時(shí)的半衰期對(duì)于治療值來(lái)說(shuō)是短暫的。
透明質(zhì)酸鈉從潤(rùn)滑液腔中快速損失的一個(gè)原因是分子被酶和羥基降解，人體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的酶如透明質(zhì)酸酶，葡萄糖醛酸酶和葡糖苷酶(A.J.Bollet，J.BiologicalChem.238，P3522，1963)。最具活性的酶是透明質(zhì)酸酶，它沿著主鏈切斷透明質(zhì)酸鈉。其他兩種酶從末端進(jìn)攻聚合物。
羥基有兩個(gè)來(lái)源，其一來(lái)源是白細(xì)胞，其中巨噬細(xì)胞和中性白細(xì)胞釋放出黃嘌呤過(guò)氧化酶和其他酶形成超氧化物陰離子，過(guò)氧化氫和次氯酸鹽，它們經(jīng)過(guò)斷裂形成羥基。羥基的另一個(gè)來(lái)源是在鐵存在下借助還原劑還原氧。人體內(nèi)常見(jiàn)的還原劑是抗壞血酸。氧被鐵(II)還原成超氧化物陰離子，然后和鐵(III)反應(yīng)形成過(guò)氧化氫。過(guò)氧化氫又被還原成羥基。
迄今已經(jīng)有許多種通過(guò)交聯(lián)而增加透明質(zhì)酸鈉分子量的方法。Sakurai等人在US4,716,224中公開(kāi)了通過(guò)用一種多官能環(huán)氧化物交聯(lián)透明質(zhì)酸或其鹽以制備交聯(lián)透明質(zhì)酸或其鹽的方法。該專(zhuān)利中描述這種交聯(lián)組分可以抵抗透明質(zhì)酸酶并且可以用于治療關(guān)節(jié)炎以及作為化妝品的一種組分。Sakurai等人在US4,863,907中公開(kāi)了通過(guò)用一種多官能環(huán)氧化合物交聯(lián)葡糖胺聚糖或其鹽以制備交聯(lián)葡糖胺聚糖或其鹽的方法。該專(zhuān)利中描述這種交聯(lián)組分具有顯著的抵抗葡糖苷酶的作用，可用于醫(yī)藥用品，眼科藥物和化妝品中。
Huang等在EP0507604A2中公開(kāi)了離子交聯(lián)的含羧基的多糖，其中所用的交聯(lián)劑是一種含有三價(jià)陽(yáng)離子的化合物。這種組分用于預(yù)防外科手術(shù)以后的術(shù)后粘合癥狀。
Malson等人在US4,716,154中公開(kāi)了用雙官能或多官能環(huán)氧化物或者其相應(yīng)的鹵代醇，表鹵代醇或鹵代物，以及二乙烯基砜交聯(lián)透明質(zhì)酸的方法，其中所說(shuō)的交聯(lián)物質(zhì)可以用于眼睛玻璃體的代用品。 Malson等人在US4,772,419中還公開(kāi)了用多官能環(huán)氧化物交聯(lián)透明質(zhì)酸的方法。
della Valle等在US4,957,744中公開(kāi)了通過(guò)用多元醇酯化透明質(zhì)酸的羧基以生產(chǎn)交聯(lián)的透明質(zhì)酸酯的方法，提出這種交聯(lián)物質(zhì)可作治療劑如治療關(guān)節(jié)炎的藥物，以及作為化妝品配方中的組成成份。
Balazs等在US4,582,865，US4,605,691和US4,636,524中公開(kāi)了通過(guò)與二乙烯基砜反應(yīng)交聯(lián)透明質(zhì)酸及其鹽，以及交聯(lián)其他多糖的方法。 Balazs等在US5,128,326和US4,582,865中還公開(kāi)了用甲醛，環(huán)氧化物，聚吖丙啶化合物(Polyaziridyl compound)和二乙烯基砜交聯(lián)透明質(zhì)酸。Balazs等在US4,713,448中公開(kāi)了通過(guò)與醛類(lèi)如甲醛，戊二醛和乙二醛反應(yīng)對(duì)透明質(zhì)酸進(jìn)行化學(xué)改性，并且指出可能發(fā)生了交聯(lián)反應(yīng)。US4,582,865，US4,605,691，US4,636,524，US5,128,326，US4,582,865，和US4,713,448中公開(kāi)了產(chǎn)品應(yīng)用于化妝品配方和藥物輸送系統(tǒng)中。
KUO等在US5,356,883中公開(kāi)了通過(guò)與雙碳化二亞胺反應(yīng)以交聯(lián)透明質(zhì)酸的方法，由此產(chǎn)生的水凝膠具有作為生物配伍凝膠，薄膜或海棉的效用。
本發(fā)明涉及一種交聯(lián)組份，包括含有酸性基團(tuán)或其鹽的連接的多糖，其中每一個(gè)連接的多糖上的至少一個(gè)羥基基團(tuán)與包含至少四個(gè)羧基基團(tuán)的聚羧酸上的一個(gè)羧基基團(tuán)酯化，并且聚羧酸上的至少兩個(gè)羧基基團(tuán)和多糖上的羥基基團(tuán)酯化。這種交聯(lián)組份的一個(gè)新特征在于多糖的羥基和四羧酸形成的酯鍵。
在一種優(yōu)選的實(shí)施方案中，多糖包括透明質(zhì)酸或一種透明質(zhì)酸鹽；所用的聚羧酸是一種四羧酸，并且這種交聯(lián)組份實(shí)際上具有比透明質(zhì)酸或其鹽更強(qiáng)的抵抗酶透明質(zhì)酸酶和羥基的能力。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及一種交聯(lián)含有酸性基團(tuán)的多糖的方法，包括將雙酐或聚酐與多糖反應(yīng)。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案還涉及能治療哺乳動(dòng)物關(guān)節(jié)炎，防止手術(shù)后粘合現(xiàn)象的發(fā)生及促進(jìn)慢性傷口愈合的藥物組合物，其中的藥物組合物包括作為活性成分的本發(fā)明所說(shuō)的交聯(lián)透明質(zhì)酸，或其藥物可接受的鹽。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案還涉及包括本發(fā)明的交聯(lián)透明質(zhì)酸的藥物傳送系統(tǒng)和化妝品組合物。
另外，本發(fā)明的實(shí)施方案還涉及治療哺乳動(dòng)物關(guān)節(jié)炎、減少發(fā)生手術(shù)后粘合現(xiàn)象及促進(jìn)慢性傷口和潰瘍愈合的方法，包括注射或提供一定效用量的藥物組合物，其中的藥物組合物包括作為活性成分的本發(fā)明所說(shuō)的交聯(lián)透明質(zhì)酸，或其藥物可接受的鹽。
本發(fā)明的交聯(lián)組份包括連接的含有酸性基團(tuán)或其鹽的多糖，其中每一個(gè)連接的多糖上的至少一個(gè)羥基與包含至少四個(gè)羧基的聚羧酸上的一個(gè)羧基酯化，并且聚羧酸上的至少兩個(gè)羧基和多糖上的羥基酯化。
優(yōu)選的酸性基團(tuán)包括至少選自由羧基，硫酸基，亞硫酸基和磷酸基中的一種。最優(yōu)選的酸性基團(tuán)是羧基基團(tuán)。
用于本發(fā)明的優(yōu)選的多糖包括那些選自以下的多糖透明質(zhì)酸，硫酸軟骨素，硫酸角質(zhì)素，硫酸皮膚素，硫酸乙酰肝素，肝素，羧甲基纖維素，果膠，藻酸，聚半乳糖醛酸，聚甘露糖醛酸，聚葡萄糖醛酸和角叉菜膠。最優(yōu)選的多糖是透明質(zhì)酸。
本發(fā)明中使用的優(yōu)選的鹽包括堿金屬鹽或堿土金屬鹽，鋁鹽或銨鹽。最優(yōu)選的鹽是一種鈉鹽。
本發(fā)明中優(yōu)選的聚羧酸是四羧酸，選自以下組中 和
其中Y1是一種四價(jià)有機(jī)基團(tuán)，選自脂肪族基團(tuán)，芳香族基團(tuán)，環(huán)脂肪族基團(tuán)，雜環(huán)基團(tuán)和聚合基團(tuán)；Y2是一種二價(jià)有機(jī)基團(tuán)，選自脂肪族基團(tuán)，芳香族基團(tuán)，環(huán)脂肪族基團(tuán)，雜環(huán)基團(tuán)和聚合基團(tuán)。
優(yōu)選的Y1選自以下基團(tuán)1，2，3，4，-四取代基苯，1，2，4，5，-四取代基苯，1，2，5，6-四取代基萘，1，2，4，5-四取代基萘，1，2，6，7-四取代基萘，1，2，7，8-四取代基萘，2，3，6，7，-四取代基萘，1，4，5，8-四取代基萘，2，3，3′，-四取代基聯(lián)苯，3，4，2′3′-四取代基聯(lián)苯，3，4，3′，4′-四取代基聯(lián)苯，1，2，3，4-四取代基蒽，1，2，5，6-四取代基蒽，1，2，6，7-四取代基蒽，1，2，7，8-四取代基蒽，2，3，6，7-四取代基蒽，1，2，3，4-四取代基菲，1，2，7，8-四取代菲，1，2，6，7，四取代基菲，1，2，5，6-四取代基菲，2，3，6，7-四取代基菲，1，8，9，10-四取代基菲，3，4，9，10-四取代基苝，2，3，5，6-四取代基吡嗪，2，3，4，5-四取代基噻吩，2，3，4，5-四取代基吡咯烷， 其中R包括直鏈的、支鏈的或環(huán)狀烷基，芳香基，-O-，-S-，-SO2-，-CO-，-COO-，-NR1-，-CONR1-，-COS-，-N＝N-，-N(O)＝N-，-CR2R3-，-CH2-，-CHR2-，-R4-，-SiR2R3-，-OSiR2R3O-，-POR2-，-POR2O-，和-A-X-B-；其中R1是氫或C1-C5烷基；其中的R2，R3和R4，它們可以是相同的或不同的直鏈或環(huán)狀的烷基，芳香基，取代芳香基，全氟烴基和全氟芳香基；其中R5是氫，烷基，芳香基或芳烷基；其中A和B可以是相同的或不同的，是-O-，-S-，-CO-，-SO2-，-SO-，-POR2-，-POR2O-，-SIR2R3-，-CONHR2-，-CONH-，-NR1-和-NH-；以及其中的X是一種聚亞烷基醚，聚亞烷基硫醚，聚芳香基醚，聚酯，聚丁二烯，聚芳香基醚砜，聚醚酰亞胺，聚酰胺，聚酰胺基酸，聚酰胺酰亞胺，聚酰亞胺，聚烷基苯酚，聚苯酚，聚胺，聚硅氧烷，聚乙烯醇，聚氨基甲酸乙酯，聚脲和聚碳酸酯的低聚物。
優(yōu)選的Y2選自聚醚，聚硫醚，聚酯，聚酰胺，聚酰亞胺，聚酰胺基酸，聚酰胺酰亞胺，聚砜，聚乙內(nèi)酰脲，聚胺，聚氨基甲酸乙酯，聚脲，聚硅氧烷，四碳酸酯，和聚丁二烯。
具有代表性的四羧酸是3，4，3′，4′-二苯酮四羧酸，2，3，6，7-萘四羧酸，1，4，5，8-萘四羧酸，1，2，4，5-萘四羧酸，1，2，5，6-萘四羧酸，3，4，3′，4′-聯(lián)苯四羧酸，2，3，2′，3′-聯(lián)苯四羧酸，2，2-雙(3，4-二羧基苯基)丙烷，3，4，9，10-苝四羧酸，雙(3，4-二羧基苯基)醚，1，1-雙(2，3-二羧基苯基)乙烷，雙(3，4-二羧基苯基)甲烷，十氫化萘-1，4，5，8-四羧酸，4，8-二甲基-1，2，3，4，5，6，7-六氫化萘-1，2，5，6-四羧酸，1，2，4，5-苯四酸，2，6-二氯化萘-1，4，5，8-四羧酸，環(huán)戊烷四羧酸，吡咯烷-2，3，4，5-四羧酸，吡嗪-2，3，5，6-四羧酸，噻吩-2，3，4，5-四羧酸，1，2-乙二胺四乙酸，二亞乙基三胺五乙酸，4，4-磺?；蕉姿岷?-(3，4-二羧基苯基)-1，3，3-三甲基1，2-二氫化茚-5，6(6，7)-二羧酸，2，2′-雙(2，3-二羧基苯基)丙烷，1，1′-雙(3，4-二羧基苯基)乙烷，1-(3′4-二羧基苯基)-3-甲基1，2-二氫化茚-5，6(6，7)-二羧酸，3，4-二羧酸-1，2，3，4-四氫-1-萘琥珀酸，1-甲烷-3，4-二羧酸-1，2，3，4-四氫-1-萘琥珀酸，3，4，9，10-苝四羧酸，1，8，9，10-菲四羧酸，2，6-二氯化萘-1，4，5，8-四羧酸，2，7-二氯化萘-1，4，5，8-四羧酸，2，3，6，7-四氯化萘-1，4，5，8-四羧酸，2，3，3′，4′二苯酮四羧酸，2，3，2′，3′-二苯酮四羧酸，4，4′-氧代二苯二甲酸，3，3′-氧代二苯二甲酸，4，4′-硫代二苯二甲酸，3，3′-硫代二苯二甲酸，以及2，3，5，6-二環(huán)(2，2，2)辛烷四羥酸。
最優(yōu)選的四羧酸是1，2，4，5-苯四酸和3，4，3′，4′-二苯酮四羧酸。
可實(shí)施的具有四個(gè)以上羧基的聚羧酸選自苯乙烯/馬來(lái)酸共聚物，烷基乙烯醚/馬來(lái)酸共聚物和R[R′m-A-R″(COOH)n]p，其中的n為2或3，m是0或1，p為2至約100,000，R是芳香基或者是飽和或不飽和C1-C100,000烷基，R′是芳香基或者是飽和或不飽和C1--C10烷基，R″是芳香基或者是飽和或不飽和C2--C30烷基以及A是 基中R是芳香基或者是飽和或不飽和C1--C10烷基。
人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)當(dāng)交聯(lián)的組份衍生自透明質(zhì)酸或其鹽時(shí)，這種交聯(lián)組份實(shí)際上對(duì)羥基或酶尤其是透明質(zhì)酸酶引起的降解具有比透明質(zhì)酸本身或其鹽更強(qiáng)的抵抗能力。
例如，當(dāng)用透明質(zhì)酸酶處理透明質(zhì)酸鈉水溶液時(shí)，將其粘度降至以10分鐘測(cè)定的粘度的二分之一時(shí)，所花費(fèi)的時(shí)間(粘度半衰期)僅為0.5小時(shí)。然而，用本發(fā)明的交聯(lián)組份在相同條件下進(jìn)行試撿時(shí)，其粘度半衰期分別為34小時(shí)或30小時(shí)，其中的多糖為透明質(zhì)酸，其中的四羧酸為1，2，4，5-苯四酸或3，4，3′，4′-二苯酮四羧酸。
在羥基降解實(shí)驗(yàn)中，如Wong等在InorganicBiochemistry，14，P127(1981)中所述的那樣，利用氯化鐵和抗壞血酸反應(yīng)產(chǎn)生羥基。在一般實(shí)驗(yàn)中，透明質(zhì)酸的粘度半衰期為0.9小時(shí)。在同樣的條件下，對(duì)本發(fā)明的交聯(lián)化合物進(jìn)行相同的實(shí)驗(yàn)，其中的多糖是透明質(zhì)酸，四羧酸是1，2，4，5-苯四酸或3，4，3′，4′-二苯酮四羧酸，其粘度半衰期分別為24小時(shí)或6小時(shí)。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種酸性多糖或它們的鹽的交聯(lián)方法，包括多糖與二酐或聚酐反應(yīng)，其中聚酐被定義為每分子含有兩個(gè)以上酐基團(tuán)的酐。
本發(fā)明方法中可行的二酐選自 其中Y1是一種四價(jià)有機(jī)基團(tuán)，選自脂肪族基團(tuán)、芳香族基團(tuán)、環(huán)脂肪族基團(tuán)、雜環(huán)基團(tuán)和聚合基團(tuán)；Y2是一種二價(jià)有機(jī)基團(tuán)選自脂肪族基團(tuán)、環(huán)脂肪族基團(tuán)、雜環(huán)基團(tuán)和聚合基團(tuán)。
優(yōu)選的Y1選自1，2，3，4-四取代苯，1，2，4，5-四取代苯，1，2，5，6-四取代萘，1，2，4，5-四取代萘，1，2，6，7-四取代萘，1，2，7，8-四取代萘，2，3，6，7-四取代萘，1，4，5，8-四取代萘，2，3，2′，3′-四取代聯(lián)苯，3，4，2′，3′-四取代聯(lián)苯，3，4，3′，4′-四取代聯(lián)苯，1，2，3，4-四取代蒽，1，2，5，6-四取代蒽，1，2，6，7-四取代蒽，1，2，7，8-四取代蒽，2，3，6，7-四取代蒽，1，2，3，4-四取代菲，1，2，7，8-四取代菲，1，2，6，7-四取代菲，1，2，5，6-四取代菲，2，3，6，7-四取代菲，1，8，9，10-四取代菲，3，4，9，10-四取代苝，2，3，5，6-四取代吡嗪，2，3，4，5-四取代噻吩，2，3，4，5-四取代吡咯烷 其中R包括直鏈的、支鏈的或環(huán)狀的烷基，芳香基，-O-，-S-，-SO2-，-CO-，-COO-，-NR1-，-CONR1-，-COS-，-N＝N-，-N(O)＝N-，-CR2R3-，-CH2-，-CHR2-，-R4-，-SiR2R3，-OSiR2R3O，-POR2-，-POR2O-和-A-X-B；其中R1是氫或C1-C5烷基；其中R2，R3和R4，可以是相同的或不同的，是直鏈的或環(huán)狀的烷基、芳香基、取代芳香基、全氟烴基和全氟芳香基。
其中R5是氫、烷基、芳香基或芳烷基；其中A和B，可以是相同的或不同的，可以是-O-，-S-，-CO-，-SO2-，-SO-，-POR2-，-POR2O-，-SIR2R3-，-CONHR2，-CONH-，-NR1-和-NH-；其中X是聚亞烷基醚、聚亞烷基硫醚、聚芳香基醚、聚酯、聚丁二烯、聚芳香基醚砜、聚醚酰亞胺、聚酰胺、聚酰胺基酸、聚酰胺-酰亞胺，聚酰亞胺、聚烷基苯酚、聚苯酚、聚胺、聚硅氧烷、聚乙烯醇、聚氨基甲酸乙酯、聚脲和聚碳酸酯的一種低聚物。
Y2優(yōu)選自聚醚、聚硫醚、聚酯、聚酰胺、聚酰亞胺、聚酰胺基酸、聚酰胺酰亞胺、聚砜、聚乙內(nèi)酰脲、聚胺、聚氨基甲酸乙脂、聚脲、聚硅氧烷、四碳酸脂和聚丁二烯。
二酐優(yōu)選自3，4，3′，4′-二苯酮四羧酸二酐，2，3，6，7-萘四羧酸二酐，1，4，5，8-萘四羧酸二酐，1，2，4，5-萘四羧酸二酐，1，2，5，6-萘四羧酸二酐，3，4，3′，4′-聯(lián)苯四羧酸二酐，2，3，2′，3′-聯(lián)苯四羧酸二酐，2，2-雙(3，4二羧基苯基)丙烷二酐，3，4，9，10-苝四羧酸二酐，雙(3，4二羧基苯基)醚二酐，1，1-雙(2，3二羧基苯基)乙烷二酐，雙(3，4二羧基苯)甲烷二酐，十氫化萘-1，4，5，8-四羧酸二酐，4，8-二甲基-1，2，3，4，5，6，7-六氫化萘-1，2，5，6-四羧酸二酐，1，2，4，5-苯四酸二酐，2，6-二氯代萘-1，4，5，8-四羧酸二酐，環(huán)戊烷四羧酸二酐\吡咯烷--2，3，4，5-四羧酸二酐，吡嗪--2，3，5，6-四羧酸二酐，噻吩-2，3，4，5-四羧酸二酐，乙二胺四乙酸二酐，二亞乙基三胺五乙酸二酐，4，4-磺?；蕉姿岫?，2，2′-雙(2，3-二羧基苯)丙烷二酐，1-(3，4-二羧基苯)-1，3，3-三甲基1，2-二氫化茚-5，6(6，7)-二羧酸二酐，1，1′-雙(3，4-二羧基苯)乙烷二酐，1-(3′，4-二羧基苯)-3-甲基1，2-二氫化茚-5，6(6，7)-二羧酸二酐，3，4-二羧基-1，2，3，4-四氫-1-萘琥珀酸二酐，1-甲基-3，4-二羧基-1，2，3，4-四氫-1-萘琥珀酸二酐，3，4，9，10-苝四羧酸二酐，1，8，9，10-菲四羧酸二酐，2，6二氯化萘-1，4，5，8-四羧酸二酐，2，7-二氯萘-1，4，5，8-四羧酸二酐，2，3，6，7-四氯萘-1，4，5，8-四羧酸二酐，2，3，3′，4′-二苯酮四羧酸，2，3，2′，3′-二苯酮四羧酸二酐，4，4′-氧代二苯二甲酸二酐，3，3′-氧代二苯二甲酸二酐，4，4′-硫代二苯二甲酸二酐，3，3′-硫代二苯二甲酸二酐和2，3，5，6-二環(huán)(2，2，2)辛烷四羧酸二酐。
最優(yōu)選的二酐是1，2，4，5-苯四酸二酐和3，4，3′，4′-二苯酮四羧酸二酐。
實(shí)施本發(fā)明所述方法中可行的聚酐選自苯乙烯/馬來(lái)酐共聚物，烷基乙烯醚/馬來(lái)酐共聚物和如下通式 其中式中的n是0或1，m是0或1，p是2至約100,000，R是芳香基或飽和或不飽和C1-C100,000烷基，R′是芳香基或飽和或不飽和C1-C10烷基，R″是芳香基或飽和或不飽和C2-C30烷基，以及如下式的A 其中R是芳香基或飽和或不飽和C1-C10烷基。最優(yōu)選的聚酐是經(jīng)單體或聚合多元醇或聚胺與過(guò)量二酐反應(yīng)得到的，其中酐的當(dāng)量數(shù)至少相當(dāng)于兩倍的多元醇或聚胺中包含的羥基或胺的當(dāng)量數(shù)；或者經(jīng)單體或聚合多元醇或聚胺與過(guò)量還包含?；u的單酐反應(yīng)得到，其中酐加?；u的當(dāng)量數(shù)至少相當(dāng)于兩倍的多元醇或聚胺中羥基或胺的當(dāng)量數(shù)。
因?yàn)轸男阅苁窃谒腥菀姿猓詢(xún)?yōu)選二酐或聚酐與多糖在極性的、非質(zhì)子傳遞溶劑中反應(yīng)。優(yōu)選的溶劑是N-甲基吡咯烷酮，N-乙基吡咯烷酮，N-環(huán)已基吡咯烷酮，4-甲基嗎啉N-氧化物，二甲基甲酰胺，四氫噻吩砜和二甲基亞砜。
酸性多糖的鹽可以不溶解于上述優(yōu)選的溶劑中。特別是，透明質(zhì)酸鈉鹽不溶解于該優(yōu)選溶劑中，所以一般為了便于實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的，將上述的鈉鹽轉(zhuǎn)化為四烷基銨鹽以增加可溶性。四烷基銨鹽與二酐交聯(lián)反應(yīng)之后，該產(chǎn)品可以接著通過(guò)離子交換轉(zhuǎn)化回鈉的形式。
在交聯(lián)反應(yīng)中，二酐或聚酐與多糖之間的比例最容易表示為以每當(dāng)量多糖中的重復(fù)單元計(jì)算二酐或聚酐中酐的當(dāng)量。對(duì)于本發(fā)明的目的，該比例為約0.05至約4酐當(dāng)量/重復(fù)單元當(dāng)量，優(yōu)選比例是從約0.08至約2，最優(yōu)選比例是從約0.4至約1.6。
在本發(fā)明其它實(shí)施方案中，涉及用于治療哺乳動(dòng)物關(guān)節(jié)炎、以及防止手術(shù)后粘連和促進(jìn)慢性傷口和潰瘍愈合的藥物組合物。這些藥物組合物的活性成份包括交聯(lián)透明質(zhì)酸或交聯(lián)透明質(zhì)酸的一種藥物可接受的鹽，其中每個(gè)連接的透明質(zhì)酸的至少一個(gè)羥基與包含至少四個(gè)羧基的聚羧酸的一個(gè)羧基酯化，而且聚羧酸的至少兩個(gè)羧基與透明質(zhì)酸的羥基酯化。
藥物可接受的鹽優(yōu)選為堿金屬或堿土金屬鹽，鋁鹽或銨鹽，最優(yōu)選的藥物可接受鹽是鈉鹽。
本發(fā)明所述方法和組合物可以用于防止在外科手術(shù)后對(duì)有害粘連形成敏感的任何動(dòng)物中的手術(shù)后的粘連。上述方法和組合物用于防止哺乳動(dòng)物生長(zhǎng)中的粘連，尤其是用于人類(lèi)。它們用于需要禁止術(shù)后粘連形成的各種類(lèi)型的外科手術(shù)，例如腹部手術(shù)、婦科手術(shù)、胸部手術(shù)、矯形手術(shù)、神經(jīng)外科手術(shù)和眼科手術(shù)。
預(yù)防粘連可以通過(guò)任何方便的方式在外科傷口處用藥，例如，通過(guò)灌洗，通過(guò)用凝膠\膏膜\泡沫材料直接涂在患處，或通過(guò)其它方便的方法。預(yù)防粘連的用藥可以在傷口顯著愈合之前的任何時(shí)候進(jìn)行，最好在手術(shù)完成時(shí)，且剛好在傷口愈合之前實(shí)施。但是在一些情況下預(yù)防的實(shí)施需要在一段時(shí)期內(nèi)持續(xù)不斷地進(jìn)行。預(yù)防粘連的有效量是必須達(dá)到減少外科手術(shù)后粘連發(fā)生的量。這個(gè)數(shù)量的優(yōu)選值應(yīng)足以覆蓋住暴露在外的外科傷口的全部表面，如果需要的話(huà)，再增加一定用量以足以覆蓋傷口鄰近部位的身體組織。該有效量通過(guò)實(shí)驗(yàn)容易測(cè)定。
本發(fā)明所述組合物也可以用于促進(jìn)慢性傷口愈合，例如燒傷和潰瘍?nèi)绮溉閯?dòng)物糖尿病腳部漬瘍，特別是針對(duì)人類(lèi)。透明質(zhì)酸能保持水份，也有使血管生成的特性，這使其能應(yīng)用于上述治療中。當(dāng)用于愈合傷口時(shí)，單獨(dú)使用該組合物的水溶液，優(yōu)選生理鹽水溶液或混有其它傷口愈合藥物和其它水溶聚合物的溶液。它們可以通過(guò)任何方便方式施用在傷口或潰瘍部位，例如通過(guò)灌洗，通過(guò)用凝膠、膏、膜或泡沫材料直接涂在患處，通過(guò)放入作用于傷口或潰瘍處的繃帶或傷口敷料中，或通過(guò)任何其它便利的方法。促進(jìn)愈合的有效量應(yīng)是以涂布傷口或潰瘍患處的全部表面，如果需要的話(huà)，再增加一部分藥量以足以涂布傷口或潰瘍患處鄰近的身體組織。該有效量能通過(guò)實(shí)驗(yàn)容易地測(cè)定。一種典型的酐-交聯(lián)透明質(zhì)酸可含有作為其它成份的水溶聚合物、抗生素、免疫抑制劑和去痛藥物。
本發(fā)明所述交聯(lián)透明質(zhì)酸用于治療哺乳動(dòng)物的關(guān)節(jié)炎，尤其是治療人類(lèi)關(guān)節(jié)炎，該交聯(lián)透明質(zhì)酸通常溶解于生理鹽水中以使其粘度足以能通過(guò)注射針，即不超過(guò)約50,000CPS，優(yōu)選值約5,000至約30,000CPS。接著，該治療液注射進(jìn)患病關(guān)節(jié)處。
一種典型的膝關(guān)節(jié)潤(rùn)滑流體增補(bǔ)注射方法類(lèi)似于Miller等人在J.Bone and Joint Surgery，40，P636(1985)中描述的那樣。2.5ml無(wú)菌溶液(氯化鈉8.5mg/ml，磷酸二代鈉鹽0.537mg/ml，磷酸二氫鈉0.016mg/ml，)即緩沖鹽水中的酐-交聯(lián)透明質(zhì)酸的鈉鹽溶液(其交聯(lián)透明質(zhì)酸濃度為10mg/ml)，緩慢注入注射器以確保不產(chǎn)生氣泡。然后作好注射準(zhǔn)備，即用肥皂清洗膝蓋，用十六烷基三甲基銨溴化物擦試，涂上碘酒。上述溶液通過(guò)一個(gè)預(yù)標(biāo)記的三角孤注射進(jìn)關(guān)節(jié)潤(rùn)滑腔，該三角孤位于被脛骨坪連接的關(guān)節(jié)的側(cè)面、韌帶髕骨旁邊和股骨髁側(cè)的彎曲部分。在注射之前可以進(jìn)行局部麻醉。在某些情況下，在增補(bǔ)注射潤(rùn)滑流體之前，需把緩沖鹽水溶液注入膝中。如此方法由Dahlberg等人在Arthritis Rheuma-tism，37，1994，Page521中描述。
該注射液除交聯(lián)透明質(zhì)酸以外還含有其它物質(zhì)。這些物質(zhì)包括水溶聚合物例如硫酸軟骨素、硫酸皮膚素和/或一種以提高溶液的潤(rùn)滑性的磷脂也可加入麻醉劑、抗炎試劑、抗生素、抗菌劑細(xì)胞毒素和糖。
酐-交聯(lián)透明質(zhì)酸可以用作藥物傳送系統(tǒng)。該交聯(lián)透明質(zhì)酸構(gòu)成一個(gè)分子籠，藥理活性分子可以分散在其中。籠中所含物質(zhì)通過(guò)分散傳送給周?chē)h(huán)境。藥分子或藥分子混合物以共價(jià)鍵或非共價(jià)鍵與透明質(zhì)酸連接，共價(jià)鍵可以連接到透明質(zhì)酸部分的羧酸或羥基上。酐-交聯(lián)透明質(zhì)酸的凝膠、膜、線(xiàn)、顆?；蚝＞d可以被放置、噴霧、攝入、注入或植入需要含藥物物質(zhì)的地方。這些物質(zhì)可以是治療藥(例如麻醉藥、止痛藥、抗炎藥、利尿藥、拮抗藥、抗生素、激素、抗風(fēng)濕藥、腎上腺素拮抗藥、細(xì)胞生長(zhǎng)抑制劑、抗高血壓藥或免疫抑制劑)，也可以是生長(zhǎng)素，酶或細(xì)胞抗粘連化合物。
本發(fā)明所述交聯(lián)透明質(zhì)酸也可以作為專(zhuān)門(mén)用于化妝品的成份。因?yàn)橥该髻|(zhì)酸已顯示出具有在低相對(duì)濕度條件下的持水性，和在高相對(duì)濕度條件下能產(chǎn)生令人愉快且柔滑的感覺(jué)，所以它已作為增濕劑用于化妝品的配方中。本發(fā)明所述交聯(lián)透明質(zhì)酸具有類(lèi)似效果。交聯(lián)透明質(zhì)酸與其它低成本水溶聚合物混合，例如可與羧甲基纖維素、果膠、藻酸鹽、大豆蛋白、干酪素和明膠混合。
天然植物源提取物，例如仙人掌蘆薈、藜蘆、螺旋豆、母菊屬春黃菊(Matricaria chamomilla)、tumeric、胡蘿卜、jojoba、玫瑰和其它植物提取物，可以混入含交聯(lián)透明質(zhì)酸的化妝品配方中。α-羥基酸例如乳酸和羥基醋酸可以加入該配方中，以提高皮膚的柔軟性。
一種典型的抗老化化妝品組合物為2-羥基醋酸7％，丙二醇15％，交聯(lián)透明質(zhì)酸溶液(1g/100ml)1％，水60％，以及乙醇17％，其中百分率以重量計(jì)。
一種面部軟膠配方是羧甲基纖維素懸濁液(3g/100ml)25％，三乙醇胺水溶液(10g/100ml)11％，Methyl Gluceth-10 5％，交聯(lián)透明質(zhì)酸水溶液(1g/100ml)1％，香料和防腐劑1％，水57％，其中所有百分率以重量計(jì)。
一種典型皮膚增濕劑的組合物是羥乙基纖維素0.5％，Methyl Gluceth-10 2％，甘油2％，交聯(lián)透明質(zhì)酸水溶液(1g/100ml)1％，水94％，防腐劑和香料0.5％，其中所有的百分率均以重量計(jì)。
下列實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行說(shuō)明，它們針對(duì)本發(fā)明有代表性的目的，并不能解釋為對(duì)本發(fā)明范圍的限制。除另有說(shuō)明，實(shí)施例中所有份數(shù)和百分率均以重量計(jì)。
實(shí)施例1本實(shí)施例描述的是制備透明質(zhì)酸甲基三辛?；@的方法。
在1000ml水中的10g透明質(zhì)酸鈉(發(fā)酵產(chǎn)品，Chisso Corporotion，Chiba，日本)溶液中加進(jìn)溶于50ml丙酮的50g甲基三辛酰基銨氯化物(Akuqyat336，Aldrich Chemi-cal，Milwaukee，Wisconsin)的溶液。將該混合物攪拌過(guò)夜，接著過(guò)濾橡膠狀的沉淀物，用水和丙酮清洗，然后真空干燥過(guò)夜。將其再一次浸入500ml丙酮中7小時(shí)，然后真空干燥過(guò)夜，得到46.9克橡膠狀物質(zhì)。
實(shí)施例2-9這些實(shí)施例描述的是透明質(zhì)酸甲基三辛?；@鹽與二酐的交聯(lián)。實(shí)施例1的產(chǎn)物，2.0g(重復(fù)單元0.4meeq)溶進(jìn)100mN-甲基吡咯烷酮中。向此溶液添加進(jìn)二酐，然后此混合物進(jìn)行轉(zhuǎn)鼓攪拌16小時(shí)。上述二酐使用的是乙二胺四乙酸二酐(EDTAA)，二亞乙基三胺五乙酸二酐(DETPAA)，3，4，3’4’-二苯酮四羧酸二酐(BTDA)和4，4’-氧代二苯二甲酸二酐(OPDA)。實(shí)施例2和3是未使用酐的對(duì)照實(shí)驗(yàn)表1的數(shù)據(jù)顯示在16小時(shí)攪拌期末期凝膠情況，證明了透明質(zhì)酸甲基三辛酰基銨鹽的交聯(lián)，粘度是Brook field粘度。
表1
實(shí)施例10-17這些實(shí)施例描述的是，將實(shí)施例4-9制備的交聯(lián)的透明質(zhì)酸甲基三辛酰基銨鹽轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的鈉鹽的方法。
于10℃下，向N-甲基吡咯烷酮中的交聯(lián)透明質(zhì)酸甲基三辛?；@鹽的溶液(實(shí)施例4-9)中加入溶于50ml水的1g鹽溶液。所得混合物攪拌10分鐘，再加進(jìn)10ml丙酮。20分鐘后，將得到的沉淀物過(guò)濾，用50ml4/l的丙酮/水清洗5次，用30ml丙酮清洗3次，接著在真空干燥箱中干燥直到獲得恒定的重量。將所得物再次溶解于100ml磷酸鹽緩沖水溶液中(PH＝7.4)，然后測(cè)量所得溶液的粘度。數(shù)據(jù)列于表2中。
在實(shí)施例12和16中可以看出粘度出現(xiàn)實(shí)質(zhì)性地增加，在實(shí)施例13-15和17中實(shí)際凝膠量的形成表明物質(zhì)的交聯(lián)特性。
表2<
實(shí)施例18本實(shí)施例說(shuō)明酐-交聯(lián)透明質(zhì)酸受到透明質(zhì)酸酶降解的耐受性。
用實(shí)施例1-17方法制備與1，2，4，5-苯四酸二酐(PMDA)或PMDA和BTDA的混合物(以重量計(jì)1/1)反應(yīng)交聯(lián)的透明質(zhì)酸樣品，它們根據(jù)下列方法測(cè)試和評(píng)價(jià)。
在100ml交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉鹽水溶液(0.4％wt/vol，緩沖PH值為7.4)中加入1ml透明質(zhì)酸酶溶液(EC3.2.1.35；I-S型，來(lái)自牛試驗(yàn)，凍干，290單位/mg，Sigma Chemical，St.Louis，Mo.)，其濃度為290單位/ml。該混合物振蕩約10秒鐘，10分鐘后測(cè)定第一個(gè)粘度(Brook field)。接著，對(duì)粘度監(jiān)測(cè)一段時(shí)間。在10分鐘時(shí)測(cè)得的粘度值認(rèn)作100％。通過(guò)測(cè)量使粘度減少到10分鐘粘度值之50％的所需時(shí)間值(即粘度半衰期)來(lái)估計(jì)樣品的抗降解能力。對(duì)照樣品(實(shí)施例18A)由透明質(zhì)酸鈉組成。結(jié)果列于表3。
實(shí)施例19本實(shí)施例說(shuō)明受抗壞血酸與氯化鐵反應(yīng)而產(chǎn)生氫氧根作用酐-交聯(lián)透明質(zhì)酸的抗降解能力。
根據(jù)實(shí)施例1-17的方法制備透明質(zhì)酸與PMDA和BTDA交聯(lián)的樣品。根據(jù)下述方法對(duì)它們進(jìn)行測(cè)試和評(píng)價(jià)。
在100ml交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉鹽的水溶液(0.4％wt/vol，緩沖PH值為7.4)中，加入1ml0.34M氯化鐵溶液和1ml0.18M抗壞血酸溶液。該混合物被振蕩約10秒鐘，10分鐘后測(cè)定第一個(gè)粘度(Brook field)。此時(shí)的粘度值被認(rèn)作100％。通過(guò)測(cè)量粘度減少到10分鐘粘度值50％的所需時(shí)間值(即粘度半衰期)估價(jià)樣品的抗降解性。對(duì)照樣品(實(shí)施例19A)由透明質(zhì)酸鈉組成。結(jié)果列于表4。
實(shí)施例20本實(shí)施例描述的是透明質(zhì)酸甲基三辛?；@鹽與聚酐的交聯(lián)。聚酐式子如下
用10ml N-甲基吡咯烷酮中的0.1g(1meq)的1，2，4，5-苯四羧酸二酐和0.020g(0.45meq)的2-乙基-2-羥甲基-1，3-丙二醇的混合溶液制備。所得聚酐溶液接著加入溶于100ml N-甲基吡咯烷酮中的0.7g實(shí)施例1的產(chǎn)品溶液。1小時(shí)后，該溶液變成具有可見(jiàn)膠體顆粒的分散膠體。
實(shí)施例21本實(shí)施例描述的是透明質(zhì)酸甲基三辛?；@鹽與聚酐的交聯(lián)。
聚酐式子如下 在10ml N-甲基吡咯烷酮中，用0.1g(1meg)1，2，4-苯三酸酐酰氯化物、0.1g(0.45meq)的2-乙基-2-羥甲基-1，3-丙二醇和0.07g三乙胺溶液混合制備。所得聚酐溶液接著加入溶于100ml N-甲基吡咯烷酮的0.7g實(shí)施例1中的產(chǎn)品的溶液。1小時(shí)后，該溶液變成由可見(jiàn)膠體顆粒構(gòu)成的分散膠體。
本發(fā)明有關(guān)具體方案已得到描述。這不應(yīng)理解為對(duì)本發(fā)明意思進(jìn)行限制，許多變化和改進(jìn)都是可行的，并不脫離本發(fā)明的范圍。
權(quán)利要求
1.一種交聯(lián)組份，包括含有酸性基團(tuán)或其鹽的連接的多糖，其中每一個(gè)連接的多糖上的至少一個(gè)羥基與包含至少四個(gè)羧基的聚羧酸上的一個(gè)羧基酯化，并且聚羧酸上的至少兩個(gè)羧基和多糖上的羥基酯化。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的交聯(lián)組份，其中的多糖包括透明質(zhì)酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的交聯(lián)組份，其中的多糖包括透明質(zhì)酸的鈉鹽。
4.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)權(quán)利要求的交聯(lián)組份，其中的四羧酸包括以下至少一種組分，它們選自3，4，3′，4′-二苯酮四羧酸，2，3，6，7-萘四羧酸，1，4，5，8-萘四羧酸，1，2，4，5-萘四羧酸，1，2，5，6-萘四羧酸，3，4，3′，4-聯(lián)苯四羧酸，2，3，2′，3-聯(lián)苯四羧酸，2，2-雙(3，4-二羧基苯)丙烷，3，4，9，10-苝四羧酸，雙(3，4-二羧基苯)醚，1，1-雙(2，3-二羧基苯)乙烷，雙(3，4二羧基苯)甲烷，十氫化萘-1，4，5，8-四羧酸，4，8-二甲基-1，2，3，4，5，6，7-六氫化萘-1，2，5，6-四羧酸，1，2，4，5-苯四酸，2，6-二氯代萘-1，4，5，8-四羧酸，環(huán)戊烷四羧酸，吡咯烷-2，3，4，5-四羧酸，吡嗪-2，3，5，6-四羧酸，噻吩-2，3，4，5-四羧酸，乙二胺四乙酸二亞乙基三胺五乙酸，4，4-磺?；蕉姿岷?-(3，4-二羧基苯)-1，3，3-三甲基-1，2-二氫化茚-5，6(6，7)-二羧酸，2，2′-雙(2，3-二羧基苯)丙烷，1，1′-雙(3，4-二羧基苯)乙烷，1-(3′4-二羧基苯)-3-甲基-1，2-二氫化茚-5，6(6，7)-二羧酸，3，4-二羧基-1，2，3，4-四氫-1-萘琥珀酸， 1-甲基-3，4-二羧基-1，2，3，4-四氫-1-萘琥珀酸，3，4，9，10-四羧酸，1，8，9，10-菲四竣酸，2，6-二氯化萘-1，4，5，8-四羧酸，2，7-二氯化萘-1，4，5，8-四羧酸，2，3，6，7-四氯化萘-1，4，5，8-四羧酸，2，3，3′，4′-二苯酮四羧酸，2，3，2′，3′-二苯酮四羧酸，4，4′-氧代二苯二甲酸，3，3′-氧代二苯二甲酸，4，4′硫代二苯二甲酸，3，3′-硫代二苯二甲酸，以及2，3，5，6-二環(huán)(2，2，2)辛烷四羧酸。
5.根據(jù)權(quán)利要求1，2或3的交聯(lián)組份，其中所說(shuō)的含有四個(gè)以上羧基的聚羧酸選自苯乙烯/馬來(lái)酸共聚物，烷基乙烯醚/馬來(lái)酸共聚物和R-[R′m-A-R″-(COOH)n]p其中的n為2或3，m是0或1，p為2至約100,000，R是芳香基或者是飽和或不飽和C1-C100,000烷基，R′芳香基或者是飽和或不飽和C1-C10烷基，R″是芳香基或者是飽和或不飽和C2-C30烷基以及A是 其中R是芳香基或者是飽和或不飽和C1-C10烷基。
6.根據(jù)權(quán)利要求2或3的交聯(lián)組份，其中所說(shuō)的交聯(lián)組份實(shí)際上具有比透明質(zhì)酸或其鹽更強(qiáng)的抵抗透明質(zhì)酸酶的能力。
7.根據(jù)權(quán)利要求2或3的交聯(lián)組份，其中所說(shuō)的交聯(lián)組份實(shí)際上具有比透明質(zhì)酸或其鹽更強(qiáng)的抵抗羥基的能力。
8.一種含有酸性基團(tuán)或其鹽的多糖的交聯(lián)方法，包括將所說(shuō)的多糖和一種雙酐或聚酐反應(yīng)。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中所說(shuō)的酸性基團(tuán)包括以下至少一種，它們選自羧基，硫酸基，亞硫酸基和磷酸基。
10.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中所說(shuō)的多糖包括以下一種，它們選自透明質(zhì)酸，硫酸軟骨素，硫酸角質(zhì)素，硫酸皮膚素硫酸鹽，硫酸乙酰肝素，肝素，羧甲基纖維素，果膠，藻酸，聚半乳糖醛酸，聚甘露糖醛酸，聚葡萄糖醛酸和角叉菜膠。
11.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中所說(shuō)的多糖包括透明質(zhì)酸。
12.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中所說(shuō)的多糖包括一種透明質(zhì)酸的鹽。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中所說(shuō)的透明質(zhì)酸的鹽包括一種鈉鹽。
14.根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中所說(shuō)的透明質(zhì)酸的鹽包括一種四烷基銨鹽。
15.根據(jù)權(quán)利要求8，9，10，11，12，13或14的方法，其中所說(shuō)的雙酐選自以下基團(tuán) 其中Y1選自由脂肪族基，芳香族基，環(huán)脂肪族基，雜環(huán)基和聚合基組成的四價(jià)有機(jī)基，Y2選自由脂肪族基，芳香族基，環(huán)脂肪基，雜環(huán)基和聚合基組成的二價(jià)有機(jī)基。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中的二酐選自3，4，3′，4′-二苯酮四羧酸二酐，2，3，6，7-萘四羧酸二酐，1，4，5，8-萘四羧酸二酐，1，2，4，5-萘四羧酸二酐，1，2，5，6-萘四羧酸二酐，3，4，3′，4′-聯(lián)苯四羧酸二酐，2，3，2′，3′-聯(lián)苯四羧酸二酐，2，2-雙(3，4-二羧基苯)丙烷二酐，3，4，9，10-苝四羧酸二酐，雙(3，4-二羧基苯)醚二酐，1，1-雙(2，30-二羧基苯)乙烷二酐，雙(3，4-二羧基苯)甲烷雙酐，十氫化萘-1，4，5，8-四羧酸雙酐，4，8-二甲基-1，2，3，4，5，6，7-六氫化萘-1，2，5，6-四羧酸雙酐，1，2，4，5-苯四酸雙酐，2，6-二氯化萘-1，4，5，8-四羧酸雙酐，環(huán)戊烷四羧酸雙酐，吡咯烷-2，3，4，5-四羧酸雙酐，吡嗪-2，3，5，6-四羧酸雙酐，噻吩-2，3，4，5-四羧酸雙酐，乙二胺四乙酸雙酐，二亞乙基三胺五乙酸雙酐，4，4-磺?；蕉姿犭p酐和2，2′-雙(2，3，-二羧基苯)丙烷二酐，1-(3，4-二羧基苯)-1，3，3-三甲基-1，2-二氫化茚-5，6(6，7)-二羧酸雙酐，1，1′-雙(3，4-二羧基苯)乙烷二酐，1-(3′，4-二羧基苯)-3-甲基-1，2-二氫化茚-5，6(6，7)-二羧酸雙酐，3，4-二羧基-1，2，3，4-四氫-1-萘琥珀酸雙酐，1-甲基-3，4-二羧基-1，2，3，4-四氫-1-萘琥珀酸雙酐，3，4，9，10-苝四羧酸雙酐，1，8，9，10-菲四羧酸雙酐，2，6-二氯化萘-1，4，5，8-四羧酸雙酐，2，7-二氯化萘-1，4，5，8-四羧酸雙酐，2，3，6，7-四氯化萘-1，4，5，8-四羧酸雙酐，2，3，3′，4′-二苯酮四羧酸雙酐，2，3，2′，3′-二苯酮四羧酸雙酐，4，4′-氧代二苯二甲酸雙酐，3，3′-氧代二苯二甲酸雙酐，4，4′-硫代二苯二甲酸雙酐，3，3′-硫代二苯二甲酸雙酐，以及2，3，5，6-二環(huán)(2，2，2)辛烷四羧酸雙酐。
17.根據(jù)權(quán)利要求8，9，10，11，12，13或14的方法，其中所說(shuō)的聚酐選自苯乙烯/馬來(lái)酸酐共聚物，烷基乙烯醚/馬來(lái)酸酐共聚物和 其中的n為0或1，m是0或1，p為2至約100,000，R是芳香基或者是飽和或不飽和C1-C100,000烷基，R′是芳香基或者是飽和或不飽和C1-C10烷基，R″是芳香基或者是飽和或不飽和C2-C30烷基以及A是 其中R是芳香基或者是飽和或不飽和的C1-C10烷基。
18.根椐權(quán)利要求8-17的方法，其中雙酐或聚酐中的酐當(dāng)量以每當(dāng)量的多糖重復(fù)單元計(jì)算約為0.05至約4。
全文摘要
酸性多糖通過(guò)與雙酐或聚酐反應(yīng)而交聯(lián)。酐—交聯(lián)透明質(zhì)酸可以用作藥物傳送載體治療關(guān)節(jié)炎，以減少發(fā)生手術(shù)后粘合現(xiàn)象，促進(jìn)慢性傷口和潰瘍的愈合，并且可以作為化妝品配方中的一種組分。
文檔編號(hào)A61P29/00GK1131675SQ9511949
公開(kāi)日1996年9月25日 申請(qǐng)日期1995年12月22日 優(yōu)先權(quán)日1994年12月22日
發(fā)明者T·T·恩古耶 申請(qǐng)人:赫爾克里斯有限公司