專利名稱：穩(wěn)定的油包水乳狀液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明描述了穩(wěn)定的油包水乳狀液。此乳狀液用于向飼料、食品或化妝品組合物中加入不穩(wěn)定化合物。
用于食品、飼料和化妝品的幾種添加劑被認為是不穩(wěn)定的，例如著色劑、維生素、疫苗或酶。
添加劑與組合物中其他化合物可能是化學(xué)不相容的或酶不相容的。另外，添加劑可能是熱不穩(wěn)定的，因此，在升溫過程中可能會失活。例如，飼料或食品經(jīng)常經(jīng)擠壓過程來制備。為了得到所需形狀的食品或飼料顆粒，擠壓過程是非常必要的。此外，有一種增長的趨勢，那就是基本的飼料或食品含有各種添加劑。飼料或食品組合物更經(jīng)常的是由各種添加劑構(gòu)成，這些添加劑以前是單獨使用的。
已建議采用幾種辦法解決不穩(wěn)定化合物降解的問題。一種辦法是在提高的溫度下，在一個工序之后，例如擠壓工序之后，加入所需化合物。關(guān)于不穩(wěn)定化合物的成分和向食品或飼料中加入這種化合物的方法，已經(jīng)有不同的報道。
DE 26 02260描述了酶懸浮液在一種液體或一種熔融食用脂肪中的應(yīng)用?；旌衔锢鋮s后，原料必須?；＝?jīng)過粗略破壞后，顆?？蛇M一步處理例如，通過碾磨。此過程的缺點是，保證小顆粒尺寸而進行的粉劑研磨非常費時而且會導(dǎo)致粉塵出現(xiàn)。
國際專利申請WO 93/14645解決了這個問題，在擠壓過程后，加入含熱不穩(wěn)定化合物的油懸浮液。在降低的壓力下向顆粒中加入懸浮液。
國際專利申請WO 92/06599描述了用于保護疫苗的油包水乳狀液的應(yīng)用。沒有提到作為乳狀液一部分的(蛋白質(zhì))穩(wěn)定劑(即水活性低的)的使用。不穩(wěn)定化合物，例如酶，在這樣的乳狀液中會導(dǎo)致酶活性很快的損失。在熱的天氣里這種損失每月可能達到50％，這對于商業(yè)產(chǎn)品來說是不可接受的。此專利申請也描述了基于卵磷酯的乳化劑的優(yōu)選應(yīng)用。
國際專利申請WO 93/16175描述了含有作為穩(wěn)定劑的脲和/或多元醇的穩(wěn)定的含水酶溶液。脲和多元醇是熟知的用于穩(wěn)定水環(huán)境中酶的穩(wěn)定劑。
在化妝品領(lǐng)域，也有一個增長的趨勢，即在含有最后產(chǎn)物的油中含有不穩(wěn)定化合物。用于皮膚防護，清潔和恢復(fù)活力的化合物顯然是令人感興趣的。不穩(wěn)定化合物在這方面有著有益的效果，包括酶，例如蛋白酶。
為了在延長的存放期內(nèi)保證化妝品成分中酶的活性，基本不含水、疏水化合物例如蠟，植物或礦物油常用于酶配制劑中。盡管這種方法預(yù)示了在化妝配制品中酶的高貯藏穩(wěn)定性，一個嚴重缺點是，只有通過把配制品置于大量水中，酶才能活化。(在此過程中，最初的不含水的酶被溶解)。一個隨之而來的問題是酶活性比較低，浪費了大量的初始酶活性。這種方法在幾種化妝品應(yīng)用中不太方便。
J03004791中描述的一種可替代方法中，通過把多糖加入酶水溶液中使要在化妝品中使用的蛋白分解酶穩(wěn)定。盡管這種方法能夠用最少量的水使酶重新活化，但此法不考慮在化妝品配方中使用親油相。
本發(fā)明公開了穩(wěn)定的油包水乳狀液。特別的是，本發(fā)明公開一種油包水乳狀液，其特征是，乳狀液含有下列成分水、油、所研究的一種不穩(wěn)定化合物、一種穩(wěn)定劑和一種乳化劑。
本發(fā)明的油包水乳狀液含有溶解于水相中、通過加入穩(wěn)定劑使其穩(wěn)定的不穩(wěn)定化合物，優(yōu)選穩(wěn)定劑是一種水活性降低劑，更優(yōu)選多元醇。多元醇以高濃度加入油包水乳狀液的水相中，即至少占總量的10％，優(yōu)選10-70％，最優(yōu)選30～70％(重量百分比)。
優(yōu)選的組成包括油包水乳狀液，水相中不穩(wěn)定化合物與多元醇共存，乳狀液用乳化劑穩(wěn)定，乳化劑在高濃度的多元醇下是有活性的。優(yōu)選使用的乳化劑是蒸餾過的單酸甘油酯或聚甘油聚蓖麻油酸酯。
此外，所研究的化合物優(yōu)選是酶、維生素、著色劑或疫苗。
本發(fā)明的乳狀液可用于保護加入到食品、飼料、化妝品或油性組合物之前的不穩(wěn)定化合物。
本發(fā)明的油包水乳狀液在更長的期間內(nèi)是穩(wěn)定的。它們可以用于制備人類或動物食物。例如，本發(fā)明的油包水乳狀液被噴灑到食品或飼料顆粒上。優(yōu)選乳狀液在油或脂肪中稀釋后再噴灑到飼料或食品顆粒上。另外，本發(fā)明的乳狀液可用于化妝品組合物的制備。
本發(fā)明公開了一種油包水乳狀液，乳狀液的水相中含有所研究的一種不穩(wěn)定化合物和一種穩(wěn)定劑，用一種適當(dāng)?shù)娜榛瘎┓€(wěn)定乳狀液。
油包水乳狀液含有以下成分水，油，所研究的一種不穩(wěn)定的化合物，一種穩(wěn)定劑和一種乳化劑。不穩(wěn)定化合物存在于水相中。穩(wěn)定劑加到水相中以穩(wěn)定所需的化合物。
不穩(wěn)定化合物可以是任何一種化合物，此化合物與其它化合物在化學(xué)上或酶學(xué)上是不相容的。不相容的化合物可以存在于乳狀液中或存在于加入了乳狀液的組合物中。另外，不穩(wěn)定化合物可以是任何熱不穩(wěn)定化合物。
本發(fā)明公開了在水相中含有不只一種不穩(wěn)定化合物的穩(wěn)定油包水乳狀液。本發(fā)明還公開了另一種穩(wěn)定的油包水乳狀液，此乳狀液在水相中含有一種不穩(wěn)定化合物和一種與不穩(wěn)定化合物不相容的化合物。本發(fā)明能夠制備含有互不相容的水溶性化合物的乳狀液。通過不相容化合物并入乳狀液油相中的單個水滴，可完成不相容化合物的物理分離。
不穩(wěn)定化合物優(yōu)選含有例如可以做為前生命期的微生物。不穩(wěn)定化合物更優(yōu)選酶、維生素、著色劑或疫苗。合適的酶包括蛋白酶、植酸酶、糖酶、脂肪酶、磷脂酶和氧化還原酶。合適的維生素包括水溶性維生素，例如維生素C。
本發(fā)明的乳狀液對配制互不相容的化合物，例如，其中之一是蛋白水解酶的酶混合物，是特別有用的。
此外，本發(fā)明的乳狀液能夠使不穩(wěn)定化合物有準(zhǔn)確的劑量。首先是因為不穩(wěn)定化合物的穩(wěn)定性能夠保證，另外是因為液體乳狀液的劑量，特別是稀釋在油中的乳狀液的劑量，比粉劑的劑量更準(zhǔn)確。例如，在飼料加工過程中，象熱、壓力、濕度、氧化還原反應(yīng)和摩擦等因素可能會對維生素穩(wěn)定性有驚人的影響，這是眾所周知的。特別是維生素E、維生素K和維生素C(抗壞血酸)的不穩(wěn)定性是眾所周知的(例如，參見M.B Coelho，F(xiàn)eed International，December 1991，p39-45)。抗壞血酸是水溶性的，對象鐵這樣經(jīng)常加到飼料中的痕量礦物質(zhì)是極其敏感的?？箟难岵⑷氲奖景l(fā)明的油包水乳狀液的水相對于盡量減少維生素用量是很有吸引力的選擇。
本發(fā)明的油包水乳狀液包括含有高濃度所需化合物的水相。以0.01-30％(重量比，以活性化合物的干重計)的量向水相中加入此化合物。
通過向水相中加入穩(wěn)定劑使不穩(wěn)定化合物穩(wěn)定。優(yōu)選水活性降低劑作穩(wěn)定劑。優(yōu)選的水活性降低劑是鹽，更優(yōu)選的是多元醇。特別適用的多元醇是甘油、山梨醇、蔗糖、聚丙二醇、海藻糖、麥芽糖糊精、乳糖和葡萄糖。
另外，水活性降低劑有抑制乳狀液水相中微生物生長的作用。如果需要，可以通過與苯甲酸酯和山梨酸酯這樣可被接受的(食物級)抗菌劑的結(jié)合，提高水相的微生物穩(wěn)定性。
水活性降低劑加到水相中的量取決于達到所需穩(wěn)定效果或抗菌效果所要求的劑量。加入水相中多元醇至少為10％，優(yōu)選10～70％，更優(yōu)選30～70％(重量百分比)。
使用乳化劑以獲得穩(wěn)定的乳狀液。乳化劑是表面活性物質(zhì)，能夠使一種液相分散到另一種液相中。乳化劑含有親水基和親油基，親水基和親油基的比值稱為HLB值。
一般地，脂溶疏水乳化劑的HLB值范圍為0-9，而水溶性物質(zhì)的HLB值在11和20之間。用于穩(wěn)定油包水乳狀液的合適的乳化劑或乳化劑混合物的HLB值要求在較低的范圍內(nèi)。
令人吃驚的是，大家熟知的乳化劑，例如SpanTM80(HLB＝4.3)，TweenTM80(HLB＝15)及其混合物在相對較多的多元醇存在情況下沒有產(chǎn)生穩(wěn)定的油包水乳狀液?；诼蚜字娜榛瘎?，象EmulbestoTM200，EmulfluidTME同樣會導(dǎo)致快速分相。
本發(fā)明首次描述了在較多的多元醇存在情況下有活性的乳化劑。已發(fā)現(xiàn)了在高達50％多元醇存在情況下仍有效的乳化劑。
適用的乳化劑是單酸甘油酯(例如HymonoTM1163和HymonoTM8704)和聚甘油聚蓖麻油酸酯(AdmulTMWOL 1403)。由于所選擇的乳化劑在較多的多元醇存在情況下的有效性，油相中單個水滴的聚結(jié)是很少的。這樣，本發(fā)明的乳狀液可適當(dāng)阻止非油溶化合物在乳狀液單個水滴之間的遷移。
聚甘油聚蓖麻油酸酯(AdmulTMWOL 1403)與植酸酶結(jié)合是非常有用的。
聚甘油聚蓖麻油酸酯在室溫下是液體，在與油混合前或混合過程中不需要加熱。使用聚甘油聚蓖麻油酸酯時，乳狀液的粘度仍然很低，而且?guī)缀醪话l(fā)生液滴絮凝。另外，使用聚甘油聚蓖麻油酸酯允許在乳狀液中有高濃度的水相。
本發(fā)明乳狀液所用的油是在食品、飼料或化妝品制備中常用的油。包括魚油、豆油、菜子油、橄欖油、玉米油、棕櫚油、鱷梨油和不同的礦物油。
本發(fā)明進一步公開了油包水乳狀液的制備方法。
制備乳狀液需輸入大量的能量。例如通過劇烈的攪拌或通過很大的剪切力。用這種方法，可得到穩(wěn)定的乳狀液，乳狀液可以此形式穩(wěn)定地貯藏。
本發(fā)明公開了在長期貯存中保持穩(wěn)定的乳狀液。乳狀液在一個月貯存期內(nèi)是穩(wěn)定的，更優(yōu)選6個月貯存期是穩(wěn)定的，最優(yōu)選超過一年。
本發(fā)明的油包水乳狀液可以做為食品、飼料或化妝品的添加劑。
使用本發(fā)明的乳狀液能夠使食品、飼料或化妝品生產(chǎn)廠家把不穩(wěn)定化合物應(yīng)用于用其它方法將導(dǎo)致不穩(wěn)定化合物失活的工序。而且，使用本發(fā)明的乳狀液適當(dāng)?shù)胤乐沽朔怯腿芑衔飶娘暳?、食品或化妝品組合物遷移到乳狀液的水相。這樣，所研究的存在于乳狀液水相中的不穩(wěn)定化合物被適當(dāng)?shù)乇Ｗo，避免了加入了乳狀液的組合物中存在的化學(xué)不相容性或酶不相容性。
本發(fā)明的乳狀液用于人食品或動物飼料顆粒的制備，特別是用于魚或家禽飼料顆粒的制備。優(yōu)選通過噴灑將乳狀液加到食品或飼料顆粒上。象在國際專利申請WO 93/14645中描述的那樣，乳狀液的加入可以在減壓情況下操作。
乳狀液可以照這樣應(yīng)用于食品或飼料顆粒。優(yōu)選在加入食品或飼料前，乳狀液在油或脂肪中稀釋。這個方法的一個優(yōu)點是，濃縮的不穩(wěn)定化合物可以容易地(即輸入能量低)均勻地與油混合。用這種方法，能夠保證活性化合物在油中的均勻分配。然后可將含有稀釋過的所需化合物的油噴灑到食品或飼料顆粒上。在制備要噴灑到顆粒上的最終混合物方面，此方法所需投資最少。
在另一個應(yīng)用中，本發(fā)明的乳狀液可用于改善醬油和菜子油的脫膠。此情形中，乳狀液含有磷脂酶A2。脫膠是從指定的油中除去卵磷脂。在EP 0513 709中，磷脂酶用于脫膠已經(jīng)有詳盡描述。這種酶可以改善非水合磷脂酶的水溶性，促進它們從油中除去。本發(fā)明的油包水乳狀液便于磷脂酶加入到指定油中。
下面提出一些實施例，它們只是用于說明本發(fā)明絕不用來限制本發(fā)明的范圍。
實施例1使用不同乳化劑和不同酶的油包水乳狀液的物理穩(wěn)定性1a.酶溶液的組成用食品級中性蛋白酶和飼料級植酸酶說明各種油包水乳狀液的穩(wěn)定性。
蛋白酶標(biāo)準(zhǔn)溶液含有溶于80克水中的20克蛋白酶B500(Gist-brocades，Holland)。完全溶解后，加入山梨醇或甘油，溶解以達到標(biāo)明的濃度。植酸酶標(biāo)準(zhǔn)溶液含有粗發(fā)酵濃縮物(NatuphosRUF濃縮物，通過超濾無菌的曲酶屬培養(yǎng)物濾液獲得)或含有含40％山梨醇的標(biāo)準(zhǔn)發(fā)酵產(chǎn)品Natuphos5000(Gist-brocades，Holland)。在各種實驗中使用的植酸酶溶液，含有最終濃度在35～50％之間的甘油或山梨醇。1b.用SpanTM80/TweenTM80混合物制備的乳狀液0.5克SpanTM80或TweenTM80乳化劑(兩者都來自Brocacef，the Netherlands)加入到5克魚油(毛鱗魚油，從Skretting，Norway獲得)中。另外，制備了含有不同比率上述SpanTM80和TweenTM80溶液的乳化劑混合物。徹底混合后，加入0.18克上述穩(wěn)定過的酶溶液，接著進行充分漩流。
含有與各種SpanTM80和/或TweenTM80乳化劑中的一種乳化劑結(jié)合的蛋白酶或植酸酶的乳狀液，在室溫下，幾小時內(nèi)顯示出了油層和水層的分離。1c.用基于卵磷脂的乳化劑制備的乳狀液EmulbestTM2000，EmulfluidTME和VP627都是基于卵磷脂的乳化劑，得自Lucas Meyer，Germany。經(jīng)過1b中已概括的步驟后，用0.5克上述每種基于卵磷脂的乳化劑制備乳狀液。在幾個小時內(nèi)，用這些乳化劑產(chǎn)品制備的乳狀液就顯示出了油層和水層的分離。1d.用單酸甘油酯乳化劑制備的乳狀液HymonoTM1163和HymonoTM7804得自Quest，Holland。
在慢慢攪拌下，在溫度為70℃(對HymonoTM1163)或50℃(對HymonoTM7804)下，24克HymonoTM(一種單酸甘油酯；E471)溶解于700克魚油中。隨后，溶液至少冷卻到50℃，用高速均化器(Ultra Turrax)將200克酶溶液分散到含乳化劑的油相中，乳狀液冷卻到室溫。幾天以后，水相中只有少量沉積物。通過加入棕櫚酸可使沉積物最少。1e用聚甘油聚蓖麻油酸酯制備乳狀液AdmulTMWOL 1403(聚甘油聚蓖麻油酸酯)得自Quest，Holland。與不穩(wěn)定化合物結(jié)合，這種乳化劑有其它優(yōu)點，事實上AdmulTMWOL1403在室溫下是液體，很容易在油相中溶解。這就不需要加熱油，使得處理更加容易，不穩(wěn)定化合物可以在室溫下加到油/乳化劑的混合物中，因此，使熱應(yīng)力最小。
為了用AdmulTMWOL 1403制備乳狀液，把3克AdmulTMWOL1403與87.5克魚油混合，接著加入25克Natuphos5000(用50％山梨醇穩(wěn)定)。乳狀液的粘度仍然很低，水相液滴大小大約為2μ，而且沒有液滴締合作用發(fā)生。這表明了在這個體系中，AdmulTMWOL1403具有很好的乳化性能。乳狀液的低粘度能夠允許濃度高得多的含酶水相存在于最終的乳狀液中。
把AdmulTM的量從3克增加到9克，乳化75克Natuphos5000液體在87.5克魚油中的混合物似乎是可能的。至少在6個月內(nèi)，此乳狀液是物理穩(wěn)定的。就凝絮作用而言，含植酸酶的AdmulTM乳狀液優(yōu)于HymonoTM乳狀液，而且物理穩(wěn)定性更高(參見表1)。表 1 HymonoTM1163和 AdmulTMWOL 1403乳狀液的物理參數(shù)和特性的比較
實施例2中性蛋白酶油包水乳狀液中的酶活性溶液A在慢慢攪拌下，5克噴霧干燥的蛋白酶B500制劑溶解在20克軟化水中。用甘油稀釋蛋白酶溶液，使甘油最終濃度為50％。溶液B在70℃、慢慢攪拌下，6克HymonoTM1163溶解于175克魚油中。隨后，將溶液冷卻到50℃。
使用高速均化器，把溶液A分散于溶液B中。將乳狀液冷卻到室溫。
蛋白酶油包水乳狀液的蛋白酶活性大約為17,000U/g乳狀液。蛋白酶從溶液A和從油包水乳狀液中的回收率大約為90％，這表明乳化作用對蛋白質(zhì)分解活性沒有顯著的不利影響。25℃或35℃下保持的乳狀液貯藏穩(wěn)定性示于表2。
表2 蛋白酶乳狀液制品的貯藏穩(wěn)定性
*一個蛋白酶活性單位是pH7.0和37℃下從酪蛋白(Hammer-sten，Merck)產(chǎn)生一定量水解產(chǎn)物的酶活性量，在275nm下與1.5μg/ml酪氨酸有類似的光密度。
實施例3穩(wěn)定的植酸酶油包水乳狀液中的酶活性溶液A在慢慢攪拌下，100克山梨醇溶解于100克NatuphosUF濃縮物中。溶液B在70℃、慢慢攪拌下，24克HymonoTM1163溶解在700克魚油中。隨后，溶液冷卻至50℃。
使用高速均化器，把溶液A分散于溶液B中。乳狀液冷卻到室溫。
植酸酶活性從溶液A和植酸酶油包水乳狀液中的回收率大約為90％。這說明，乳化作用對酶的植酸降解活性沒有不利影響。用如EP 0 420 358所述方法測定植酸酶活性。
25℃或35℃下保持的乳狀液貯藏穩(wěn)定性示于表3。
表3 植酸酶乳狀液制品的貯藏穩(wěn)定性
*一個植酸酶活性單位定義為，37℃、pH5.50下以1μmol/min速率從1.5mM肌醇六磷酸鈉釋放無機磷的酶量。
實施例4使用聚甘油聚蓖麻油酸酯的穩(wěn)定的植酸酶和蛋白酶油包水乳狀液的制備4a.植酸酶/油乳狀液3.0克或9.0克AdmulTMW 1403溶解在87.5克魚油中，于是在2*30秒期間內(nèi)在全速下使用Ultra Turrax，用75.0克含50％山梨醇的Natuphos5000來制備乳狀液。用40％山梨醇穩(wěn)定的Natuphos，在使用了另外的山梨醇后，已達到含山梨醇為50％。結(jié)果，計算的活性將是4100U/g而不是5000U/g。乳狀液的破碎將乳狀液緩慢深凍，直至-20℃為止，在這個溫度下保持20小時。然后，讓乳狀液的溫度回升到室溫，在20,000轉(zhuǎn)/分鐘下，在Sorvall離心器中(SM 24個轉(zhuǎn)子)，乳狀液被離心分離30分鐘。在此處理過程中，溫度為20-25℃。
這時，含有3.0克乳化劑的乳狀液分成3層，即清澈的油層，薄的中間相和清澈的水層。在水層內(nèi)，測得植酸酶活性為3750U/g，表明植酸酶活性回收率至少為90％。
含有9.0克乳化劑的乳狀液不能采用離心法分離。在室溫下，至少在6個月期間內(nèi)，此乳狀液可以保持穩(wěn)定。這與在實施例1中描述的植酸酶乳狀液的高穩(wěn)定性是一致的。4b.蛋白酶/油乳狀液用上述對植酸酶/油乳狀液所用的同樣方法，使在50％山梨醇溶液中的87.5克魚油、3.0克AdmulTMWOL 1403(溶解在魚油中)和75.0克蛋白酶B500的混合物變得均勻。出乎意料的是，蛋白質(zhì)分解酶與AdmulTMWOL乳化劑結(jié)合產(chǎn)生的乳狀液，同蛋白酶B500與HymonoTM乳化劑(見實施例2)結(jié)合產(chǎn)生的乳狀液穩(wěn)定性相比，此乳狀液顯示出了降低的穩(wěn)定性。顯然，在制備蛋白酶B500乳狀液中，將優(yōu)選HymonoTM乳化劑。
實施例5植酸酶在含蛋白酶的乳狀液中的穩(wěn)定性為了表明乳狀液對不相容化合物的保護效果，制備了含植酸酶和酸性蛋白酶的油包水乳狀液。本實施例表明，在水相中含有植酸酶或蛋白酶的乳狀液混合物，比在同一水相中含兩種混合酶的乳狀液更穩(wěn)定。原料NatuphosUF濃縮液(用通過稀釋得自Freres，F(xiàn)rance的70％山梨醇溶液而得到的50％山梨醇溶液穩(wěn)定)。Fromase150 TL(一種源于米黑毛霉(Mucor miehei)的液體酸性蛋白酶，得自Gist-brocades)AdmulTMWOL 1403(得自Quest，Holland)。魚油(毛鱗魚油，得自Skretting，Norway)。5a.Natuphos/油乳狀液按實施例4中已述方法，把6克AdmulTMWOL溶解在87.5克魚油中，隨后把75克NatuphosUF濃縮物與此魚油強烈混合而得到乳狀液。乳狀液在20℃下保存。第一個樣品立刻在-20℃下冷凍。5b.Fromase/油乳狀液2毫升Fromase150 TL加到含50％山梨醇的98毫升水中。通過混合87.5克魚油、6克AdmulTMWOL和75克Fromase溶液制備標(biāo)準(zhǔn)乳狀液。乳狀液在20℃下保存。5c.混合的乳狀液乳狀液(5a)和(5b)制備完畢后，通過立刻把100毫升Natuphos/油乳狀液加到100毫升Fromase/油乳狀液中制備混合的乳狀液。徹底地手動混合后，混合物在20℃下貯存。第一個樣品立即在-20℃下冷凍。5d.Natuphos-Fromase/油乳狀液750微升的FromaseTL加到含山梨醇的75克NatuphosUF濃縮物中，然后混合。加入87.5克含6克AdmulTMWOL的魚油，緊接著強烈混合，制得所需乳狀液。乳狀液在20℃下貯藏。第一個樣品立刻在-20℃下冷凍。5c.植酸酶在各種乳狀液中的穩(wěn)定性各種乳狀液在20℃保存，經(jīng)過5天和10天貯藏后取出樣品，立刻在-20℃下冷凍。在-20℃下至少一夜后，把各樣品解凍，然后如實施例4中所述進行離心分離。通過得自水層的樣品測定植酸酶活性。假設(shè)得自Natuphos/油乳狀液(5a)的各樣品的活性為100％，分別經(jīng)過5天和10天貯藏后，記錄下列植酸酶活性。
在混合的乳狀液(5c)中分別具有94％和96％的初始植酸酶活性。
在Natuphos-Fromase油乳狀液(5d)中分別具有80％和78％的初始植酸酶活性。
考慮到由于山梨醇的存在，F(xiàn)romase的蛋白水解活性較低，數(shù)據(jù)表明乳狀液增加了合成的不穩(wěn)定化合物的穩(wěn)定性。當(dāng)與蛋白酶分別被乳化時，植酸酶被保護以防止蛋白水解的作用。
實施例6維生素C在具有化學(xué)不相容性飼料中的穩(wěn)定性除了在同一乳狀液中使用兩種不相容酶的實施例中所觀察到的穩(wěn)定效果以外，在把維生素C(抗壞血酸)與飼料顆粒接觸時，也觀察到類似的效果。
有許多文獻證明了抗壞血酸和象銅、鐵這樣痕量礦物質(zhì)的不相容性(例如參見CRC Handbook of Food Additives，second edition，page85及其以后內(nèi)容)。然而，對某一飼料的應(yīng)用，例如烤焙精制飼料，營養(yǎng)學(xué)家建議鐵與抗壞血酸結(jié)合使用。本實施例說明，混合到乳狀液里的抗壞血酸比與烤焙精制飼料顆?；旌虾鬀]有乳化的抗壞血酸更穩(wěn)定。原料
豆油(由OPG Farma，Holland精煉)。
AdmulTMWOL 1403甘油86％檸檬酸(一水合物p.a.)抗壞血酸(p.a.)烤焙精制飼料(得自Arkervaart，Holland)6a.抗壞血酸和檸檬酸的水溶液通過在45克軟化水中溶解1克檸檬酸和4克抗壞血酸來制備水相。所得到的水溶液混合物的pH約為2.4。完全溶解后，加入50克甘油，混合物被充分混合。6b.抗壞血酸/油乳狀液按實施例4中所述方法，把3克AdmulTM1403溶解在87.5克豆油中，再加入75克6a中所述的水相，可制得一種穩(wěn)定的乳狀液。6c.抗壞血酸/油乳狀液在脂肪中的稀釋在油或液化的脂肪中稀釋后再使用這些乳狀液。稀釋后的乳狀液被噴灑到顆粒狀或擠壓成形的飼料上。為使乳狀液與脂肪混合，把100毫升乳狀液(6b)加入100毫升豆油中，然后，液體被用手工充分地混合。6d.抗壞血酸/脂肪乳狀液和抗壞血酸水溶液與烤焙精制飼料的混合不論是從抗壞血酸脂乳狀液開始，還是從抗壞血酸水溶液開始，等量的抗壞血酸(最終濃度為200ppm)加到烤焙精制飼料顆粒上，此烤焙精制飼料顆粒來源于本地供應(yīng)商。為此，把200毫升油乳狀液噴灑到10千克在混凝土混合器中旋轉(zhuǎn)的飼料顆粒上。同樣，把50毫升含水抗壞血酸混合物(6a)噴灑到10千克在混凝土混合器中旋轉(zhuǎn)的飼料顆粒上。然后，把另外100毫升豆油噴灑到這些飼料顆粒上。噴灑并立刻取樣后，對樣品進行抗壞血酸和脫氫抗壞血酸分析。6e.在烤焙精制飼料中的抗壞血酸分析用如Methods of Biochemical Analysis and Food Analysis using Sin-gle Reagents(Boehringer Mannheim，1989)中所述的脫氫抗壞血酸/抗壞血酸檢驗方法，分析抗壞血酸和脫氫抗壞血酸。
用10毫升丙酮萃取10克顆粒10分鐘(用于溶解脂肪物質(zhì))，隨后加入90毫升含1克/升的乙底酸鈉的軟化水。把飼料顆粒與水相在Ultra Turrax混合1分鐘后，把樣品離心分離。使用試劑盒NO.409677(Boehringer Mannheim)，測定上清液中的抗壞血酸和脫氫抗壞血酸的水平。
從被噴灑了含水抗壞血酸的飼料顆粒中，可以回收20％的抗壞血酸。相反，從用稀釋過的抗壞血酸。相反，從用稀釋過的抗壞血酸/油乳狀液噴灑的飼料顆粒中，90％的抗壞血酸得到回收。這表明，在飼料制備中乳狀液對抗壞血酸穩(wěn)定性具有保護作用。
權(quán)利要求
1.一種油包水乳狀液，其特征是，它包含下列成分水，油，一種不穩(wěn)定化合物，一種穩(wěn)定劑和一種乳化劑。
2.一種根據(jù)權(quán)利要求1的乳狀液，其特征是，穩(wěn)定劑是水活性降低劑。
3.一種根據(jù)權(quán)利要求1的乳狀液，其特征是，穩(wěn)定劑是多元醇。
4.一種根據(jù)權(quán)利要求3的乳狀液，其特征是，多元醇選自乙二醇、山梨醇、蔗糖、聚丙二醇、乳糖、海藻糖、麥芽糖糊精和葡萄糖。
5.一種根據(jù)權(quán)利要求3或4的乳狀液，其特征是，多元醇在乳狀液水相中的濃度至少為10％，優(yōu)選的濃度為10-70％，更優(yōu)選的濃度為30-70％(重量百分比)。
6.一種根據(jù)權(quán)利要求1的乳狀液，其特征是，乳化劑選自能產(chǎn)生油包水乳狀液的乳化劑。
7.一種根據(jù)權(quán)利要求3至5任一權(quán)項的乳狀液，其特征是，在高濃度的多元醇存在情況下，乳化劑是有活性的。
8.一種根據(jù)權(quán)利要求6或7的乳狀液，其特征是，乳化劑選自單酸甘油酯和聚甘油聚蓖麻油酸酯。
9.一種根據(jù)權(quán)利要求1的乳狀液，其特征是，不穩(wěn)化合物選自酶、維生素、疫苗和著色劑。
10.一種根據(jù)權(quán)利要求9的乳狀液，其特征是，酶選自蛋白酶、糖酶、脂肪酶、磷脂酶、氧化還原酶和植酸酶。
11.將一種根據(jù)權(quán)利要求1至10中任一權(quán)項的乳狀液用于人或動物的食物或者化妝品的制備。
12.含有一種根據(jù)權(quán)利要求1至10中任一權(quán)項的乳狀液的人或動物的食物或者化妝品。
13.一種用于處理食物和飼料顆粒的方法，其特征是，用含有不穩(wěn)定化合物的穩(wěn)定的油包水乳狀液噴灑到顆粒上。
全文摘要
本發(fā)明描述了穩(wěn)定的油包水乳狀液，乳狀液含有如下成分水，油，一種不穩(wěn)定化合物，一種穩(wěn)定劑和一種乳化劑。通過加入優(yōu)選的多元醇穩(wěn)定劑使在水相中的不穩(wěn)定化合物穩(wěn)定。本發(fā)明描述了特定的乳化劑，此乳化劑在大量的多元醇存在情況下能產(chǎn)生穩(wěn)定的乳狀液。
文檔編號A61K8/04GK1126942SQ95190312
公開日1996年7月17日 申請日期1995年4月18日 優(yōu)先權(quán)日1994年4月18日
發(fā)明者L·埃登斯, D·梅杰爾, P·A·邁帕里當(dāng) 申請人:吉斯特-布羅卡迪斯有限公司