專利名稱：E-選擇蛋白，P-選擇蛋白或L-選擇蛋白與Sialyl-Lewis的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抑制E-選擇蛋白(selectin)，P-選擇蛋白或L-選擇蛋白與Sialyl(唾液酸基)-Lewisx和Sialyl-Lewisa結(jié)合的化合物以及用所說化合物抑制E-選擇蛋白，P-選擇蛋白或L-選擇蛋白與Sialyl-Lewisx或Sialyl-Lewisa結(jié)合的方法。本發(fā)明還涉及含有抑制E，P或L-選擇蛋白與Sialyl-Lewisx或Sialyl-Lewisa結(jié)合的化合物的藥物活性組合物。
背景技術(shù)：
E-選擇蛋白，也可稱為內(nèi)皮性白細(xì)胞粘連分子-1(ELAM-1)和植物血凝素細(xì)胞粘連分子(LECAM-2)，是在內(nèi)皮細(xì)胞表面被發(fā)現(xiàn)的糖蛋白；內(nèi)皮細(xì)胞連成毛細(xì)血管內(nèi)壁。E-選擇蛋白識(shí)別并連接到碳水化合物sialyl-Lewisx(sLex)上，sLex存在于某些白血細(xì)胞表面。E-選擇蛋白幫助白血細(xì)胞識(shí)別和粘連到毛細(xì)血管周圍的組織已經(jīng)被感染或破壞的毛細(xì)血管壁，現(xiàn)在知道，E-選擇蛋白實(shí)際上是三種選擇蛋白之一，另外兩種是L-選擇蛋白和P-選擇蛋白。P-選擇蛋白在發(fā)炎的內(nèi)皮和血小板上被表達(dá)，并有與E-選擇蛋白非常相似的結(jié)構(gòu)，而且也能識(shí)別Sialyl-Lewisx。L-選擇蛋白在白細(xì)胞上被表達(dá)，并且也有與P-和E-選擇蛋白非常相似的結(jié)構(gòu)。Sialyl-Lewisx和Sialyl-Lewisa(sLea)的結(jié)構(gòu)如下面式Ia和Ib所示 當(dāng)組織被微生物侵入或被損壞時(shí)，白血細(xì)胞(也稱作白細(xì)胞)在對(duì)感染的反應(yīng)方面將發(fā)揮重要作用。對(duì)感染的反應(yīng)最重要的方面之一就是細(xì)胞粘連。一般，白血細(xì)胞在血流周圍出現(xiàn)，但是，當(dāng)組織被感染或被損壞時(shí)白血細(xì)胞必須能夠認(rèn)出被侵入或被損壞的組織，并能夠粘結(jié)到被侵害組織附近的毛細(xì)血管壁上，從而通過毛細(xì)血管擴(kuò)散到被感染的組織中。E-選擇蛋白幫助兩種特殊類型的白血細(xì)胞識(shí)別被感染部位，并粘結(jié)到毛細(xì)血管壁，從而使這些白血細(xì)胞可以擴(kuò)散到被感染的組織中。
有三種主要類型的白血細(xì)胞粒細(xì)胞，單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞。這些類型中，E-選擇蛋白識(shí)別以糖蛋白或糖脂形式存在于單核細(xì)胞和中性白細(xì)胞表面的sLex。中性白細(xì)胞是粒細(xì)胞的一種；粒細(xì)胞吞噬和破壞小的生物體，特別是細(xì)菌。
單核細(xì)胞離開透過毛細(xì)血管壁的血流之后，成長為巨噬細(xì)胞，吞噬和消化侵入的微生物，外來物和衰老細(xì)胞。
當(dāng)毛細(xì)血管周圍組織被感染或破壞時(shí)，單核細(xì)胞和中性白細(xì)胞通過結(jié)合E-選擇蛋白能夠識(shí)別被損壞組織所在部位；E-選擇蛋白產(chǎn)生于連成毛細(xì)血管的內(nèi)皮細(xì)胞的表面。典型地，當(dāng)毛細(xì)血管周圍組織被感染時(shí)，E-選擇蛋白和P-選擇蛋白的產(chǎn)生增加。P-選擇蛋白主要存在于儲(chǔ)存顆粒之中，一旦內(nèi)皮被激活之后，它可以迅速被轉(zhuǎn)移到細(xì)胞表面。相反，E-選擇蛋白需要RNA和蛋白從頭合成，而且直到被激活后約4-6小時(shí)才達(dá)到峰值表達(dá)，而減退到基本水平要到約24-48小時(shí)之后。由于sLex部分存在于結(jié)合E-選擇蛋白和P-選擇蛋白的白血細(xì)胞表面，使白血細(xì)胞識(shí)別被感染的部位。這種結(jié)合放慢了血流中的白血細(xì)胞流，因?yàn)樗谡纤亟閷?dǎo)吸附和遷移之前介導(dǎo)了白細(xì)胞沿激活內(nèi)皮的滾動(dòng)，并且?guī)椭鷮籽?xì)胞定位在受傷或感染部位。
盡管，遷移到受傷部位的白血細(xì)胞能幫助戰(zhàn)勝外來物質(zhì)的感染和破壞，但多數(shù)情況下這種遷移會(huì)失去控制，伴隨著大量白血細(xì)胞涌到受傷部位，造成大范圍組織損壞。因此，能夠阻止這種情況發(fā)生的化合物就可以成為有利的治療劑。而且，開發(fā)這種能防止白血細(xì)胞與E-選擇蛋白或P-選擇蛋白結(jié)合的抑制劑是有用的。例如，可以通過抑制選擇蛋白與sLex結(jié)合來治療的某些疾病包括(但不限于)ARDS，節(jié)段性回腸炎，敗血性休克，創(chuàng)傷性休克，多器官衰竭，自身免疫疾病，哮喘，腸感染性疾病，牛皮癬，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和心臟病發(fā)作，中風(fēng)及器官移植之后出現(xiàn)的再灌注損傷。除了在一些白血細(xì)胞上發(fā)現(xiàn)外，在多種癌細(xì)胞如肺和結(jié)腸癌細(xì)胞上也發(fā)現(xiàn)了sLea[一種與sLex關(guān)系密切的區(qū)域化學(xué)異構(gòu)體]。這說明涉及sLea的細(xì)胞粘結(jié)可能與某些癌癥轉(zhuǎn)移有關(guān)。
發(fā)明概述本發(fā)明提供具有下面式II結(jié)構(gòu)的化合物，及其藥物上可接受的鹽，酯，酰胺和藥物前體 其中X選自-CN，-(CH2)nCO2H，-O(CH2)mCO2H，-(CH2)nCOZ，-(CH2)nZ，-CHCO2H(CH2)mCO2H，-(CH2)nO(CH2)mCO2H，-CONH(CH2)mCO2H，-CH(OZ)(CO2H)，-CH(Z)(CO2H)，-(CH2)nSO3H，-(CH2)nPO3D1D2，-NH(CH2)mCO2H，-CONH(CHR6)CO2H，(1-H-四唑基-5-烷基-)，和-OH；R1和R2獨(dú)立選自氫，烷基，鹵素，-OZ，-NO2，-(CH2)nCO2H，-NH2和-NHZ；R3選自氫，鹵素，烷基，-OZ和-NHZ；R4選自氫，鹵素，烷基，羥基，羥基-O-硫酸酯，-OZ；R5選自羥基，-CN，-N3，-NH2，-NHNH2，-NE1E2，-NHE1，-NHCO(CH2)nCO2H，-S(CH2)mCO2H和-NHCHNHNH2；及R6選自氫，烷基，芳烷基，羥基烷基，氨基烷基，烷基羧酸和烷基羧酰胺；其中，n是0-6，m是1-6，p是0-6，b是0-2，Z是烷基，芳基或芳烷基，D1和D2獨(dú)立地為氫或烷基，E1是烷基或-(CH2)aCO2H，其中a是1-18，E2是烷基。
尤其是，本發(fā)明提供式III化合物及其藥物上可接受的鹽，酯，酰胺和藥物前體 其中X是-Q，-(CH2)nQ，-O(CH2)nQ，-(CH2)nO(CH2)mQ，-CONH(CH2)nQ，-NH(CH2)mQ，-O(CH2)nO(CH2)mQ，或-CONH(CHR6)Q；R1和R2獨(dú)立選自氫和-(CH2)nQ；R4是羥基或氫；R6選自氫，烷基，芳烷基，羥基烷基，氨基烷基，烷基羧化物和烷基羧酰胺；Q是-CO2H，n是0-6，m是1-6。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式IV化合物及其藥物上可接受的鹽，酯，酰胺和藥物前體 其中W是氫，烷基或α-D-甘露糖基，Y選自H/H，氧，H/羥基，H/NH2，H/NHE1，H/NE1E2，NH，NE1，肟和O-烷基肟。
本發(fā)明還提供了抑制E-選擇蛋白或P-選擇蛋白與sLex或sLea結(jié)合的方法，包括給病人使用有效量的具有式II，III或IV結(jié)構(gòu)的化合物以及含有式II，III或IV化合物和藥物上可接受的載體的藥物活性組合物，以抑制E-，P-或L-選擇蛋白與sLex或sLea結(jié)合。
另外，還提供了治療下列疾病的方法ARDS，節(jié)段性回腸炎，敗血性休克，創(chuàng)傷性休克，多器官衰竭，自身免疫疾病，哮喘，腸感染性疾病，牛皮癬，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和心臟病發(fā)作，中風(fēng)及器官移植之后出現(xiàn)的再灌注損傷，該方法包括給需要這種治療的動(dòng)物使用有治療效果量的式II，III或IV化合物，以緩解癥狀。
優(yōu)選實(shí)施方案詳述已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，式II，III或IV化合物能夠抑制E-，P-或L-選擇蛋白與sLex或sLea結(jié)合。
式II化合物含有兩個(gè)主要部分吡喃甘露糖苷衍生部分(碳水化合物)和聯(lián)苯基部分。對(duì)于吡喃甘露糖苷部分，D-吡喃甘露糖苷比L-吡喃甘露糖苷更優(yōu)選，示于式II的在甘露糖C3和C4位的絕對(duì)立體化學(xué)是優(yōu)選的。但是，碳水化合物部分(用吡喃葡糖苷)的C2位上的差向立體異構(gòu)的立體化學(xué)是允許的。為簡單起見，碳水化合物部分在這里被稱作吡喃甘露糖苷。另外，α-異頭物比β-異頭物優(yōu)選。
吡喃甘露糖苷部分通過-O-(CH2)b-橋連到聯(lián)苯基部分，其中b是0-2。優(yōu)選吡喃甘露糖苷連到苯環(huán)的鄰位或間位。
另外，吡喃甘露糖苷部分可以被取代。特別優(yōu)選的是在C2和C6位有取代基的吡喃甘露糖苷。例如，甘露糖6-位可以被例如下列基團(tuán)取代羥基，-CN，-N3，-NH2，-NHNH2，-NE1E2，-NHE1，-NHCO(CH2)nCO2H，-S(CH2)mCO2H或-NHCHNHNH2，其中，n是0-6，m是1-6，E1是烷基或-(CH2)8CO2H，以及E2是烷基。類似地，C2位可以被氫，鹵素，烷基，羥基，羥基-O-硫酸酯或烷氧基取代。優(yōu)選烷基是低級(jí)烷基。還發(fā)現(xiàn)，可以在吡喃甘露糖苷部分的C2或C6位或同時(shí)在兩個(gè)位置上有取代基。
本發(fā)明化合物的第二部分是聯(lián)苯基部分。聯(lián)苯基部分可以在兩個(gè)苯基上都有取代基，或只在一個(gè)苯基上有取代基。而且，每個(gè)苯基可以有不止一個(gè)取代基。
不直接連到甘露糖部分的苯基是被取代的。優(yōu)選該苯基在3或4位(間或?qū)ξ?被至少一個(gè)下列基團(tuán)取代-(CH2)nCH3，-CN，-(CH2)nCO2H，-O(CH2)mCO2H，-(CH2)nO(CH2)mCO2H，-(CCH2)nCOZ，-(CH2)nZ，-CHCO2H(CH2)mCO2H，-CONH(CH2)mCO2H，-CH(OZ)(CO2H)，-CH(Z)(CO2H)，-(CH2)nSO3H，-(CH2)nPO3D1D2，-NH(CH2)mCO2H，-CONH(CHR6)CO2H，(1-H-四唑基-5-烷基-)，和-OH，其中，n是0-6，m是1-6，Z是烷基或芳基，D1和D2獨(dú)立地為氫或烷基，R6選自氫，烷基，芳烷基，羥基烷基，氨基烷基，烷基羧酸和烷基羧酰胺。
如果不直接連到吡喃甘露糖苷部分的苯基被一個(gè)以上取代基取代，則一個(gè)取代基位于3或4位，并且優(yōu)選下列基團(tuán)-(CH2)nCH3，-CN，-(CH2)nCO2H，-O(CH2)mCO2H，-(CH2)nO(CH2)mCO2H，-(CH2)nCOZ，-(CCH2)nZ，-CHCO2H(CH2)mCO2H，-CONH(CH2)mCO2H，-CH(OZ)(CO2H)，-CH(Z)(CO2H)，-(CH2)nSO3H，-(CH2)nPO3D1D2，-NH(CH2)mCO2H，-CONH(CHR6)CO2H，和(1-H-四唑基-5-烷基-)，其中，n是0-6，m是1-6，Z是烷基或芳基，R6選自氫，烷基，芳烷基，羥基烷基，氨基烷基，烷基羧酸和烷基羧酰胺，D1和D2獨(dú)立地為氫或烷基。另外的取代基則獨(dú)立地選自氫，鹵素，烷基，NO2，CO2H和OH。
直接連到吡喃甘露糖苷部分的苯環(huán)上也可以有取代基。這些取代基優(yōu)選氫，鹵素，烷基，烷氧基，和烷基氨基。
最優(yōu)選的本發(fā)明化合物是式III化合物。
這里所用術(shù)語“烷基”指一價(jià)直鏈或支鏈有1-12個(gè)碳原子的基團(tuán)，包括(但不限于)甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，仲丁基，異丁基，叔丁基等等。
術(shù)語“低級(jí)烷基”指任何有1-6個(gè)碳原子的烷基。
術(shù)語“鹵素”指下列原子氯，氟，溴，和碘。
術(shù)語“烷氧基”指烷基通過一個(gè)氧原子連到一個(gè)分子上，包括(但不限于)甲氧基，乙氧基，異丙氧基，正丁氧基，仲丁氧基，異丁氧基，叔丁氧基等等。
術(shù)語“烷基氨基”指有下列結(jié)構(gòu)的基團(tuán)-NH-(烷基)，或-N-(烷基)2，例如包括甲氨基，乙氨基，異丙氨基等等。
術(shù)語“芳基”指未取代或取代的碳環(huán)芳香基，包括(但不限于)苯基，聯(lián)苯基，1或2-萘基，芴基，(1，2)-二氫萘基，茚基，2，3-二氫化茚基，噻吩基等等。取代基包括其它芳基或其它取代基如烷基，烷氧基，烷基羧酸和甘露糖基。
術(shù)語“芳烷基”(也叫芳基烷基)指取代或未取代的芳基連在烷基上，包括(但不限于)芐基，1和2-萘甲基，鹵代芐基，烷氧基芐基，羥基芐基，氨基芐基，硝基芐基，胍基芐基，芴基甲基，苯甲基(芐基)，1-苯乙基，2-苯乙基，1-萘乙基等等。
術(shù)語“羥基烷基”指-OH附在烷基上。
術(shù)語“氨基烷基”指有結(jié)構(gòu)-NRxRy的基團(tuán)連在一個(gè)烷基上。Rx和Ry獨(dú)立選自，例如，氫，烷基和芳基。
術(shù)語“烷基羧酸”指羧基(-CO2H)連到烷基上。
術(shù)語“烷基羧酰胺”指有式-CONRxRy的基團(tuán)連到一個(gè)烷基上，其中Rx和Ry的定義同上述在氨基烷基中的定義。
這里所用術(shù)語“藥物上可接受的鹽，酯，酰胺和藥物前體”指本發(fā)明化合物的羧酸鹽，氨基酸加成鹽，酯，酰胺和藥物前體以及，如果可能，還包括本發(fā)明化合物的兩性離子形式，它們?cè)诤侠淼尼t(yī)療判斷范圍之內(nèi)適用于患者的組織，而且沒有過分毒性，刺激，過敏反應(yīng)等等；與合理的效益/危險(xiǎn)率成適當(dāng)比例，而且對(duì)其預(yù)定用途有效。術(shù)語“鹽”指相對(duì)無毒性的本發(fā)明化合物的無機(jī)或有機(jī)酸加成鹽。這些鹽可以在本發(fā)明化合物最后分離和純化過程中就地制備，或?qū)⒓兓衔镆云溆坞x堿形式與適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)或無機(jī)酸反應(yīng)，分離這樣形成的鹽。代表性的鹽包括氫溴酸鹽，鹽酸鹽，硫酸鹽，硫酸氫鹽，硝酸鹽，乙酸鹽，草酸鹽，戊酸鹽，油酸鹽，棕櫚酸鹽，硬脂酸鹽，月桂酸鹽，硼酸鹽，苯甲酸鹽，乳酸鹽，磷酸鹽，甲苯磺酸鹽，檸檬酸鹽，馬來酸鹽，富馬酸鹽，琥珀酸鹽，酒石酸鹽，萘甲酸鹽，甲磺酸鹽，葡庚糖酸鹽，乳糖酸鹽，月桂基磺酸鹽等等。這些鹽可以包括堿金屬和堿土金屬陽離子，如鈉，鋰，鉀，鈣，鎂離子等，以及無毒銨，季銨和胺陽離子，包括(但不限于)銨，四甲銨，四乙銨，甲胺，二甲胺，三甲胺，三乙胺，乙胺等等。(例如，參見S.M.Berge等人，“藥用鹽(Pharmaceutical Salts)”，藥學(xué)科學(xué)雜志(J.Pharm.Sci.)，661-19(1977)，該文在此引作參考。)本發(fā)明化合物藥物上可接受的無毒酯的實(shí)例包括C1-C6烷基酯，其中烷基部分可以是直鏈或支鏈的?？山邮艿孽ミ€包括C5-C7環(huán)烷基酯，以及芳基烷基酯如(但不限于)芐基。C1-C4烷基酯是優(yōu)選的。本發(fā)明化合物的酯可以根據(jù)常規(guī)方法制備。
本發(fā)明化合物藥物上可接受的無毒酰胺的實(shí)例包括從氨、C1-C6烷基伯胺和C1-C6二烷基仲胺衍生的酰胺，其中烷基部分可以是直鏈或支鏈的。在仲胺情況時(shí)，胺也可以是含有一個(gè)氮原子的5或6元雜環(huán)。從氨衍生的酰胺，C1-C3烷基伯酰胺和C1-C2二烷基仲酰胺是優(yōu)選的。本發(fā)明化合物的酰胺可以根據(jù)常規(guī)方法制備。
術(shù)語“藥物前體”指那些在體內(nèi)例如，通過在血液中水解被迅速轉(zhuǎn)化成上式母體化合物的化合物。關(guān)于藥物前體的全面討論請(qǐng)見T.Higuchi和V.Stella，“作為新的輸送體系的藥物前體(Pro-drugs asNovel Delivery Systems)”，A.C.S.論文集(A.C.S.Symposium Series)，Vol.14，和藥物設(shè)計(jì)中的生物可逆載體(Bioreversible Carriers in DrugDesign)，Edward B.Roche編輯，American Pharmaceutical Associationand Pergamon Press，1987，兩篇文獻(xiàn)在此引作參考。
本發(fā)明還提供了含有本發(fā)明化合物的藥物活性組合物。而且還認(rèn)為，藥物活性組合物可以含有本發(fā)明化合物和其它抑制或可與E-，P-或L-選擇蛋白與sLex或sLea包括sLex和sLea本身結(jié)合競爭的化合物。
本發(fā)明藥物活性組合物含有生理學(xué)載體和式II，III或IV化合物。
本發(fā)明藥物組合物可以含有一個(gè)或多個(gè)式II，III或IV化合物和與其一起制劑的一種或多種無毒的、生理上可接受的載體、輔助劑或賦形劑(它們?cè)诖硕甲鳛檩d體)。該組合物用于非腸道注射，固體或液體形式的口服給藥，直腸或局部給藥等等。
本發(fā)明組合物既可以給人類和動(dòng)物經(jīng)口、直腸、非腸道(靜脈，肌內(nèi)，或皮下)、腦池內(nèi)、陰道內(nèi)、腹膜內(nèi)、局部(粉劑，油膏或滴劑)給藥，也可以作成頰或鼻噴劑。
適于非腸道注射的組合物可以包括生理上可接受的滅菌水或非水溶液，分散劑，懸浮劑或乳劑，以及可重新制成消毒注射液或分散液的滅菌粉劑。適當(dāng)?shù)乃曰蚍撬d體、稀釋劑、溶劑或賦形劑的例子包括水，乙醇，多元醇(丙二醇，聚乙二醇，甘油等等)，它們適當(dāng)?shù)幕旌衔?，植物?如橄欖油)和可注射用有機(jī)酯如油酸乙酯。例如，通過使用包衣如卵磷脂，或在分散劑中保持所需顆粒的大小或用表面活性劑來保持適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)性。
本發(fā)明組合物還可以含有輔助劑如防腐劑，潤濕劑，乳化劑和分散劑?？捎酶鞣N殺菌劑和殺真菌劑如對(duì)羥苯甲酸酯，氯丁醇，苯酚，山梨酸等等保證阻止微生物的作用。等滲劑可能也是需要的，如糖，氯化鈉等等?？梢酝ㄟ^使用延緩吸收劑如一硬脂酸鋁和明膠來延緩可注射藥物制劑的吸收。
如果需要，而且為了更有效地分布，本發(fā)明化合物可以被混入慢或緩釋或目標(biāo)傳遞系統(tǒng)如聚合物基質(zhì)，脂質(zhì)體和微球體中。它們可以被消毒，例如，經(jīng)過濾菌器過濾，或使用前與滅菌水形式的消毒劑或其它滅菌注射介質(zhì)混合，之后立即使用。
用于口服給藥的固體劑型包括膠囊劑，片劑，丸劑，粉劑和粒劑。在這些固體劑型中，活性化合物或藥物前體酯與至少一種例如下列常用的惰性物質(zhì)混合賦形劑(或載體)如檸檬酸鈉或磷酸二鈣；或(a)填充劑或增容劑如淀粉，乳糖，蔗糖，葡萄糖，甘露糖醇和硅酸；(b)粘合劑如羧甲基纖維素，藻酸鹽，明膠，聚乙烯吡咯烷酮，蔗糖和阿拉伯膠；(c)濕潤劑如甘油；(d)崩解劑如瓊脂，碳酸鈣，馬鈴薯或木薯淀粉，藻酸，某些復(fù)合硅酸鹽和碳酸鈉；(e)溶液阻滯劑如石蠟；(f)吸收加速劑如季銨化合物；(g)潤濕劑如鯨蠟醇和甘油單硬脂酸酯；(h)吸附劑如高嶺土和膨潤土；和(i)潤滑劑如滑石，硬脂酸鈣，硬脂酸鎂，固體聚乙二醇，月桂基硫酸鈉；或它們的混合物。在膠囊劑，片劑和丸劑情況時(shí)，藥劑還可以含有緩沖劑。
相似類型的固體組合物還可以用作軟或硬膠囊中的填充劑，同時(shí)用如乳糖以及高分子量的聚乙二醇等等作賦形劑。
固體劑型如片劑，糖錠劑，膠囊劑，丸劑和粒劑可以通過包衣或包殼如(包)腸衣和現(xiàn)有技術(shù)中已知的方法來制備，它們可以含有不透明劑，也可以具有能以延緩方式在腸道中某個(gè)地方釋放活性化合物(一種或多種)的組合物。可用的包埋組合物(embedding composition)的實(shí)例是聚合物和蠟。
如果需要，活性化合物也可以是用一種或多種上述賦形劑微囊化的形式。
用于口服給藥的液體劑型包括藥物上可接受的乳液，溶液，懸浮液，糖漿和酏劑。除了活性化合物外，液體藥劑還可以包含現(xiàn)有技術(shù)中常用的惰性稀釋劑如水或其它溶劑，增溶劑和乳化劑，例如，乙醇，異丙醇，碳酸乙酯，乙酸乙酯，芐醇，苯甲酸芐酯，丙二醇，1，3-丁二醇，二甲基甲酰胺，油，特別是棉籽油，花生油，玉米油，橄欖油，蓖麻油和芝麻油，甘油，四氫糠醇，聚乙二醇和脫水山梨醇的脂肪酸酯，以及它們的混合物等等。
除了這些惰性稀釋劑外，本發(fā)明組合物還可以含有輔助劑，如潤濕劑，乳化劑和懸浮劑，甜味劑，調(diào)味劑和香味劑。
除含有活性化合物外，懸浮液可以含有懸浮劑，例如乙氧基化的異硬脂醇，聚氧乙烯山梨醇和脫水山梨醇酯，微晶纖維素，偏鋁酸(aluminum metahydroxide)，膨潤土，瓊脂和黃蓍膠或這些物質(zhì)的混合物等等。
直腸給藥的組合物優(yōu)選栓劑，可以通過將本發(fā)明化合物與適當(dāng)?shù)臒o刺激賦形劑或載體如可可油，聚乙二醇或栓劑用蠟來制備，它們?cè)诔叵率枪腆w，但達(dá)到體溫后變成液體，可熔融于直腸或陰道內(nèi)，并釋放出活性成份。
用于局部施用的本發(fā)明化合物的劑型包括油膏，粉劑，噴霧劑和吸入劑。
活性成份在無菌條件下與生理上可接受的載體及任何必需的防腐劑，緩沖劑或推進(jìn)劑混合。眼科制劑，眼膏，粉劑和溶液也可以認(rèn)為在本發(fā)明范圍之內(nèi)。
本發(fā)明化合物也可以脂質(zhì)體形式使用。如本領(lǐng)域已知的，脂質(zhì)體一般由磷脂或其它類脂物質(zhì)得到。脂質(zhì)體由分散在水性介質(zhì)中的單層或多層水化液體晶體形成?？梢允褂萌魏螣o毒的，生理上可接受的和可代謝的能形成脂質(zhì)體的類脂均可使用。在脂質(zhì)體形式的本發(fā)明組合物中除含有本發(fā)明選擇蛋白結(jié)合抑制劑外，還含有穩(wěn)定劑、防腐劑、賦形劑等。優(yōu)選的類脂是天然和合成的磷脂和磷脂酰膽堿(卵磷脂)。制備脂質(zhì)體的方法是本領(lǐng)域熟知的。
本發(fā)明組合物中的活性成份的實(shí)際劑量水平可以各種各樣。為獲得所需的治療效果，可根據(jù)具體的組合物和給藥方法選擇活性成份的有效量。因此，所選擇的劑量水平取決于所需治療效果，給藥途徑，所需治療時(shí)間和其它因素。
給患者施用本發(fā)明化合物一天的總劑量(一次或分幾次)可以在每公斤體重約5mg到250mg范圍。單位劑量組合物可以含有上述劑量的幾分之一，然后幾個(gè)湊成一天的劑量。然而，應(yīng)該理解，對(duì)任何具體的患者，無論是人還是動(dòng)物，具體使用的劑量水平將取決于體重，健康狀況，性別，飲食，給藥時(shí)間和途徑，吸收和排泄率，與其它藥結(jié)合使用情況，以及所要治療的具體疾病的嚴(yán)重程度等諸多因素。
特別是，本發(fā)明化合物可用于治療多種涉及炎癥和細(xì)胞-細(xì)胞識(shí)別和粘結(jié)的疾病。例如，本發(fā)明化合物可用于需要治療敗血性休克，慢性炎癥如牛皮癬和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的病人，以及心臟病發(fā)作，中風(fēng)和器官移植引起的再灌注組織損傷，創(chuàng)傷性休克，多器官衰竭，自身免疫疾病，哮喘和腸炎的病人。在各種情況下，有效量的本發(fā)明化合物既可以單獨(dú)使用，也可以作為藥物活性組合物的一部分給需要這種治療的病人使用。還應(yīng)該認(rèn)識(shí)到，可以將多個(gè)化合物結(jié)合在一起給需要這樣用藥的病人使用。本發(fā)明化合物還可以用于治療與細(xì)胞-細(xì)胞粘結(jié)有關(guān)的其它疾病。由于本發(fā)明化合物抑制E-，P-或L-選擇蛋白與sLex或sLea結(jié)合，所以，任何與這個(gè)相互作用有關(guān)的疾病均有可能通過抑制這個(gè)結(jié)合作用來治療。
除了在一些白血細(xì)胞上發(fā)現(xiàn)了sLea以外，在多種癌細(xì)胞上也發(fā)現(xiàn)了sLea，包括在肺和結(jié)腸癌細(xì)胞上。人們認(rèn)為，涉及sLea的細(xì)胞粘結(jié)可以引起某些癌癥的轉(zhuǎn)移，因此，sLea結(jié)合抑制劑可用于某些形式癌癥的治療。
本發(fā)明化合物可以根據(jù)流程1所示的一般合成方法進(jìn)行合成流程1 其中R選自-(CH2)nCO2H，-O(CH2)mCO2H，-(CH2)nO(CH2)mCO2H，-CONH(CH2)mCO2H，-CH(OZ)(CO2H)，-CH(Z)(CO2H)，-(CH2)nSO3H，-(CH2)nPO3D1D2，-NH(CH2)mCO2H，-CONH(CHR6)CO2H，和(1-H-四唑基-5-烷基-)；其中，n是0-6，m是1-6，Z是烷基，D1和D2獨(dú)立地為氫或烷基，R6選自氫，烷基，芳烷基，羥基烷基，氨基烷基，烷基羧酸和烷基羧酰胺，及其藥物上可接受的鹽，酯，酰胺，和藥物前體。
在此流程中，所需的聯(lián)苯部分被合成，接著與所需的吡喃甘露糖苷部分反應(yīng)，形成本發(fā)明化合物。合成本發(fā)明化合物的具體實(shí)例見下面實(shí)驗(yàn)一節(jié)，其中R定義如上。
其它的化合物可以根據(jù)下列流程合成，其中R定義如上。
流程2 在該反應(yīng)流程中，取代的苯乙酸酯在鈀催化劑和堿存在下與芳基硼酸偶合，得到聯(lián)苯化合物。苯酚官能團(tuán)在三氟化硼醚合物存在下與保護(hù)的吡喃甘露糖苷反應(yīng)。通過用堿水解酯處理得到所需的化合物。
流程3
取代的溴苯酚首先與丁基鋰反應(yīng)，然后與硼酸三甲酯反應(yīng)，接著用酸水解，得到硼酸衍生物。該化合物與取代的溴苯在鈀(O)存在下反應(yīng)，催化偶合，得到聯(lián)苯化合物。將聯(lián)苯化合物與保護(hù)的吡喃甘露糖苷偶合，產(chǎn)物通過堿水解脫保護(hù)，形成所需的化合物。
流程4 將溴芐基溴在回流甲醇中用氰化鈉處理得到溴芐基腈。該化合物在鈀催化劑和堿存在下與硼酸衍生物偶合，得到取代的聯(lián)苯化合物。通過用疊氮化鈉和氯化鋁在回流甲苯中處理腈官能團(tuán)將之轉(zhuǎn)化成四唑。聯(lián)苯基四唑與保護(hù)的甘露糖衍生物偶合，用三氟化硼醚合物催化。用堿給甘露糖脫保護(hù)得到所要的化合物。
流程5
將溴苯基乙酸酯用二異丙基氨化鋰和烷基鹵處理，得到α-烷基溴苯基乙酸酯。將該化合物與硼酸衍生物偶合，產(chǎn)生聯(lián)苯化合物。聯(lián)苯化合物與保護(hù)的吡喃甘露糖苷用三氟化硼合物醚偶合，并采用堿水解將該化合物脫保護(hù)，得到所要的化合物。
流程6 該流程說明了帶有多種酰胺功能團(tuán)的化合物一般的合成路線。首先，酚基硼酸與溴苯甲酸在二甲基甲酰胺和水中用磷酸鉀和催化量的四(三苯膦)鈀(O)反應(yīng)，得到聯(lián)苯。然后，聯(lián)苯部分被酯化，然后與甘露糖五乙酸酯偶合。然后，用甲醇鈉在甲醇中，接著通過丙酮和二甲氧基丙烷與催化量的對(duì)甲苯磺酸反應(yīng)，將乙酸酯保護(hù)基轉(zhuǎn)化成丙酮化合物保護(hù)基。該酯被堿水解得到一種酸，該酸可通過在標(biāo)準(zhǔn)偶合劑存在下與特定的氨基酯反應(yīng)被轉(zhuǎn)化成各種酰胺基團(tuán)。然后，該化合物被脫保護(hù)，得到所要的酰胺。
流程7 試劑和條件a)LiBH4，THF/甲苯；b)MsCl，Et3N；c)硫代乙酸鉀；d)過硫酸氫鉀制劑，H2O/MeOH；e)Dess-Martin periodinane，CH2Cl2；f)KCH(PO3Et2)2，THF；g)H2，Pd/C，MeOH；h)H+，H2O；i)NaOH，H2O，Δ。
在上面流程6的合成中，有聯(lián)苯部分和丙酮化合物保護(hù)的吡喃甘露糖苷部分的化合物可以與硼氫化鋰在四氫呋喃和甲苯中反應(yīng)，得到在聯(lián)苯部分上有苯乙醇基團(tuán)的化合物。產(chǎn)物與甲磺酰氯和三乙胺，接著與硫代乙酸鉀反應(yīng)，得到硫代乙酸烷基酯；該硫代乙酸酯可以進(jìn)一步在水和甲醇中與過硫酸氫鉀制劑反應(yīng)，得到磺酸取代的聯(lián)苯化合物?；蛘?，該苯乙醇可以與Dess-Martin試劑反應(yīng)，得到一種醛。將該醛再與四乙基亞甲基二膦酸陰離子反應(yīng)，得到α，β-不飽和膦酸酯。用氫和鈀催化劑還原得到相應(yīng)的二膦酸二乙酯，然后用堿水將該酯部分水解，得到乙基膦酸。
流程8 將流程2制備的含有保護(hù)的甘露糖的取代的聯(lián)苯化合物先用甲醇鈉在甲醇中處理，然后用二甲氧基丙烷在丙酮中用催化酸處理，得到雙丙酮化合物。通過柔和酸水解將其部分脫保護(hù)，然后通過伯6-羥基與甲苯磺酰氯的反應(yīng)得到羥基甲苯磺酸酯，它在吡啶中被乙酐乙酰化。在二甲基甲酰胺中用碘化鈉使甲苯磺酸基被碘替代。在DMF中用疊氮化鈉處理該碘化物，得到疊氮化合物；可以將其脫保護(hù)得到6-疊氮化合物，也可以將其還原成胺，然后除去乙酸保護(hù)基。接著用催化酸在甲醇中進(jìn)行處理，然后水解，進(jìn)一步除去殘余的保護(hù)基，得到所要的6-氨基化合物。
流程9 該流程表示流程8合成的6-碘吡喃甘露糖苷可以被硫基親核試劑置換，生成6-巰基-S-乙酸酯，接著，它可以被柔和酸然后是堿水解脫保護(hù)，得到目標(biāo)化合物。
流程10 在該流程中，取代的溴苯乙酸與取代的羥甲基苯硼酸偶合，用鈀(O)作催化劑，然后將產(chǎn)物酯化。所得酯在三氟化硼醚合物存在下用保護(hù)的吡喃甘露糖苷糖3基化。水解保護(hù)基，得到所要的化合物。
流程11 在氫化鈉存在下取代的溴苯酚與溴乙酸乙酯反應(yīng)，得到取代的溴苯醚；該醚與羥基苯硼酸偶合，用鈀(O)作催化劑，得到取代的聯(lián)苯。該酚用三氟化硼醚合物與保護(hù)的甘露糖單元反應(yīng)，得到保護(hù)的吡喃甘露糖苷。用堿水處理，得到所要的化合物。
流程12
在此流程中，取代的溴苯酚在適當(dāng)?shù)膲A存在下與溴乙酸乙酯反應(yīng)，得到溴苯醚。然后，該鹵化物與硼酸衍生物在催化劑鈀(O)存在下反應(yīng)，生成取代的聯(lián)苯化合物；在三氟化硼醚合物存在下它與保護(hù)的甘露糖單元偶合。然后用氫氧化物水溶液除去保護(hù)基，生成所要的化合物。
流程13 在此反應(yīng)流程中，溴苯基溴在甲醇中與氰化鈉反應(yīng)，得到氰甲基溴苯。然后，將該鹵化物與硼酸衍生物在催化劑四(三苯膦)鈀(O)存在下反應(yīng)，得到取代的聯(lián)苯化合物；在三氟化硼醚合物存在下，它與保護(hù)的甘露糖單元偶合。然后，用氫氧化物水溶液除去保護(hù)基，得到所要的化合物。
流程14 取代的2，2’-二羥基聯(lián)苯在氫化鈉存在下與溴乙酸乙酯反應(yīng)，得到酚聯(lián)苯醚。該酚用三氟化硼醚合物與保護(hù)的吡喃甘露糖苷反應(yīng)，然后用堿水除去保護(hù)基，得到所要的化合物。
流程15 該流程說明通過用適當(dāng)堿處理，然后引入硼酸三甲酯并水解，可以將取代的溴苯酚轉(zhuǎn)化成取代的苯硼酸。將所得硼酸衍生物在鈀(O)催化劑存在下與溴苯醚偶合，得到取代的聯(lián)苯酚。在三氟化硼醚合物存在下，該酚與保護(hù)的甘露糖單元反應(yīng)，然后用堿水除去保護(hù)基，得到所要的化合物。
流程16 該流程表示，流程2制備的溴苯醚可以在鈀(O)存在下與3-羥甲基苯基硼酸反應(yīng)，得到取代的聯(lián)苯化合物。用三氟化硼醚合物作共加合劑使該羥基與保護(hù)的甘露糖單元反應(yīng)；用堿水處理得到所要的化合物。
流程17
取代的3-溴苯酚在氫化鈉存在下與溴乙酸乙酯反應(yīng)，得到取代的溴苯醚；用鈀(O)作催化劑，將之與3-羥甲基苯硼酸偶合，得到取代的聯(lián)苯化合物。用三氟化硼醚合物將該芐醇與保護(hù)的甘露糖單元反應(yīng)，得到保護(hù)的吡喃甘露糖苷。用堿水處理得到所要的化合物。
流程18 該流程中取代的4-溴苯酚在氫化鈉存在下與溴乙酸乙酯反應(yīng)，得到溴苯醚；用鈀(O)作催化劑，將該鹵化物與3-羥甲基苯硼酸偶合，得到取代的聯(lián)苯化合物。引入保護(hù)的甘露糖部分，所得苷用堿水處理，得到所要的化合物。
流程19 該流程中溴苯甲酸與3-羥甲基苯基硼酸偶合，用鈀(O)作催化劑。與保護(hù)的甘露糖單元反應(yīng)，接著用堿脫保護(hù)，得到所要的化合物。

該流程中，實(shí)施例1部分B制備的3-(2-甲氧基苯基)苯乙酸甲酯在適當(dāng)溶劑中用氯化鋁與溴苯乙酰氯反應(yīng)，得到取代的苯乙酮。然后，在鈀(O)催化劑存在下與芳基硼酸反應(yīng)，接著在甲苯中與碳酸鈉水溶液反應(yīng)，得到取代的四芳基化合物。在鹵化溶劑中于低溫用三溴化硼處理，得到酚。用三氟化硼醚合物使其與保護(hù)的吡喃甘露糖苷反應(yīng)。用堿水處理，得到所要的化合物。
流程21 在該流程中，流程20中制備的四芳基用堿水處理，使酯官能團(tuán)轉(zhuǎn)化成羧酸鹽。接著，用肼和叔丁醇鉀處理，經(jīng)酸化生成二取代乙烷部分。在鹵化溶劑中用三溴化硼除去醚基團(tuán)，羧酸鹽被再次酯化，得到二苯酚的酯。將該酚與保護(hù)的甘露糖單元反應(yīng)，接著用堿脫保護(hù)，得到所要的化合物。
流程22 該流程中，在催化酸存在下用醇將苯基琥珀酸酯化，得到苯基二酯；然后將之用發(fā)煙硝酸和硫酸處理，得到硝基苯基二酯。該硝基用Raney鎳和肼或本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的其它適當(dāng)還原條件還原；所得氨基再與乙酐反應(yīng)，得到乙酰胺。通過在適當(dāng)溶劑中加入溴引入鹵素，然后用酸水水解該乙酰胺。通過用亞硝酸和次磷酸依次處理，除去產(chǎn)物中的氨基。該芳基鹵化物在鈀(O)催化劑存在下與羥苯基硼酸反應(yīng)，得到聯(lián)苯酚；然后它與保護(hù)的甘露糖單元反應(yīng)。用堿水處理除去保護(hù)基，得到所要的化合物。
流程23 將苯基二乙酸在催化酸存在下用醇處理，得到二酯。然后用發(fā)煙硝酸和硫酸硝化芳環(huán)，得到硝基苯基二酯。將該硝基基團(tuán)用Raney鎳和肼或本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的其它適當(dāng)還原條件還原。然后，所得氨基與乙酐反應(yīng)，得到乙酰胺。通過在適當(dāng)溶劑中加入溴引入鹵素，然后用酸水水解該乙酰胺。通過依次用亞硝酸和次磷酸處理，除去該氨基基團(tuán)，然后將芳基鹵化物在鈀(O)催化劑存在下與羥苯基硼酸反應(yīng)，得到聯(lián)苯酚。用保護(hù)的甘露糖單元和三氟化硼醚合物處理，得到吡喃甘露糖苷；再用堿水處理，得到所要的化合物。
流程24 用醇和催化酸首先將硝基苯乙酸轉(zhuǎn)化成酯，然后用溴和鐵在適當(dāng)溶劑中將該芳環(huán)鹵化。再用肼和Raney鎳還原該硝基基團(tuán)。所得氨基基團(tuán)用亞硝酸鈉在硫酸水溶液中重氮化，重氮鹽用酸水水解成酚。該酚用乙酐保護(hù)，所得芳香鹵化物再與羥苯基硼酸在鈀(O)催化劑存在下反應(yīng)，得到聯(lián)苯酚。用保護(hù)的甘露糖部分處理，接著用堿脫保護(hù)，得到所要的化合物。
流程25
該流程表示，流程24制備的溴苯酚可用烷基或芳基鹵化物和適當(dāng)?shù)膲A烷基化。所得芳基鹵代醚與羥苯基硼酸反應(yīng)，用鈀(O)作催化劑，得到聯(lián)苯酚；該酚然后與保護(hù)的甘露糖單元反應(yīng)。用堿水處理，得到所要的化合物。
流程26 在催化酸存在下用醇處理3-烷基苯乙酸，得到一種酯；將之用發(fā)煙硝酸和硫酸硝化。用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知方法還原該硝基，所得氨基用乙酐乙酰化。在適當(dāng)溶劑中用溴處理，接著進(jìn)行乙酰胺水解，得到溴苯胺。通過重氮化反應(yīng)然后用次磷酸將重氮鹽還原除去氨基基團(tuán)。該芳香鹵化物在鈀(O)催化劑存在下與羥苯基硼酸偶合，得到聯(lián)苯酚，其再與甘露糖五乙酸酯偶合。然后用堿水給該化合物脫保護(hù)，得到所要的化合物。
下面的實(shí)施例將進(jìn)一步說明本發(fā)明，不能認(rèn)為它們以任何方式對(duì)本發(fā)明說明書和權(quán)利要求書有所限制。
實(shí)施例實(shí)施例13-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸步驟A將3-溴苯乙酸(2.0g，9.3mmol)溶解于裝在50ml燒瓶中的甲醇(20ml)。加入濃硫酸(2滴)，將混合物在氮?dú)庀禄亓?0小時(shí)，然后減壓濃縮。剩余物與二氯甲烷(20ml)和飽和碳酸氫鈉溶液(10ml)混合。分離有機(jī)物，干燥(MgSO4)后減壓濃縮。剩余物通過硅膠用己烷/乙酸乙酯(3∶1)洗脫，濃縮后得到2.12g(99％)(3-溴苯基)乙酸甲酯，它無需進(jìn)一步純化即可使用。
步驟B將苯甲醚(2.16g，20.0mmol)溶解于裝在用氮?dú)鉀_洗的100ml干燥燒瓶中的無水THF(50ml)。混合物在干冰/2-丙醇浴中冷卻，加入正丁基鋰(在己烷中的2.3M溶液10.9ml，25mmol)，然后將冷卻浴換成冰水浴。反應(yīng)在0℃攪拌1小時(shí)，然后加入硼酸三甲酯(2.3ml，20mmol)，并將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。反應(yīng)混合物用2N HCl水溶液調(diào)至pH3，并充分混合30分鐘，然后用醚(3×15ml)萃取。合并有機(jī)物，干燥(MgSO4)后減壓濃縮，得到2.88g(95％)2-甲氧基苯硼酸為清澈油狀物。它無需進(jìn)一步純化即可用于下一步。
將(3-溴苯基)乙酸甲酯(2.06g，9.0mmol)，四(三苯膦)鈀(O)(115mg)，碳酸鈉(2.61g，25mmol，在2ml水中)和甲苯(10ml)在氮?dú)庀?，在裝有回流冷凝器的25ml燒瓶中脫氣。再加入2-甲氧基苯硼酸(1.5g，9.87mmol)的甲苯(1ml)液，并將混合物加熱回流過夜。然后，與1∶1飽和氯化鈉/乙酸乙酯(15ml)混合。分離有機(jī)物，干燥(MgSO4)后減壓濃縮，得到2.81g(3-(2-甲氧基苯基)苯基)乙酸甲酯。
步驟C在氮?dú)庀拢?50ml干燥燒瓶中將3-(2-甲氧基苯基)苯乙酸甲酯(2.0g，7.8mmol)溶解于二氯甲烷(100ml)，并在干冰/2-丙醇浴中冷卻。將三溴化硼(2.2ml，24mmol)緩慢滴加到燒瓶中，并將混合物在-10℃保持14小時(shí)，然后與冰水(100ml)混合。分離有機(jī)物，用飽和碳酸氫鈉溶液(50ml)，水(50ml)，飽和氯化鈉(60ml)洗滌，干燥(MgSO4)后減壓濃縮。剩余物用快速色譜(SiO2，3∶1己烷/乙酸乙酯)純化，得到1.25g(66％，自(3-溴苯基)乙酸甲酯)3-(2-羥苯基)苯乙酸甲酯為清澈油狀物。
步驟D將3-(2-羥苯基)苯乙酸甲酯(1.28g，5.28mmol)溶解于在50ml干燥燒瓶中的1，2-二氯乙烷(20ml)中。在其中一次加入α-D-甘露糖五乙酸酯(2.08g，5.34mmol)然后緩慢加入三氟化硼醚合物(2.32ml，18.5mmol)。氮?dú)庀聦⒒旌衔镌谑覝財(cái)嚢柽^夜，然后與水(50ml)混合。分離有機(jī)物，水相用二氯甲烷(3×5ml)萃取。萃取液與原來的有機(jī)部分合并，干燥(MgSO4)后減壓濃縮。剩余物用快速色譜(SiO2，己烷至3∶1己烷/乙酸乙酯梯度洗脫)純化，得到帶有少量與產(chǎn)物共洗脫的未反應(yīng)的α-D-甘露糖五乙酸酯的2.74g(91％)3-(2-(2，3，4，6-四-O-乙?；?α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯。
步驟E將3-(2-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(2.74g，4.78mmol)溶解于裝在50ml燒瓶中的乙腈(25ml)中，然后用氫氧化鋰一水合物(1.1g，26.3mmol)水(10ml)溶液處理，并將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。之后，用濃鹽酸酸化至pH2。減壓濃縮混合物，剩余物用HPLC(反相，梯度洗脫，5-50％乙腈的水溶液(0.1％三氟乙酸)，監(jiān)測254nm處)純化，得到0.87g(47％)3-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸為白色固體。
m.p.85-86℃。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)7.02-7.40(comp，8H)，5.31(s，1H)，3.25-4.00(comp，12H)ppm.
IR(KBr)3408，1791，1713，1478，1223，1171，1019，979，755cm-1.
元素分析C20H22O8·1.5[H2O]計(jì)算值C，57.55％；H，5.76％；實(shí)測值C，57.33％；H，5.59％。
實(shí)施例24-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸步驟A按實(shí)施例1步驟A操作但使用4-溴苯乙酸，以85％產(chǎn)率得到4-溴苯乙酸甲酯。
步驟B將2-溴苯酚(10.0g，57.8mmol)溶解于裝在用氮?dú)鉀_洗的250ml干燥燒瓶中的無水THF(100ml)中?；旌衔镌诟杀?2-丙醇浴中冷卻，加入正丁基鋰(在己烷中的2.3M溶液51ml，127.2mmol)，然后將冷卻浴換成冰水浴。反應(yīng)在0℃攪拌1小時(shí)，然后將硼酸三甲酯(6.9ml，60.7mmol)加到漿液中，幾分鐘后變成均相。混合物在室溫?cái)嚢柽^夜，之后，用2N HCl水溶液調(diào)至pH3。充分混合30分鐘，然后用醚(3×25ml)萃取。合并有機(jī)物，干燥(MgSO4)后減壓濃縮，得到7.6g(91％)2-羥基苯硼酸為白色固體。m.p.156-158℃。
將(4-溴苯基)乙酸甲酯(2.79g，12.2mmol)，四(三苯膦)鈀(O)(170mg)，磷酸鉀(9.71g，45.75mmol)和二甲氧基乙烷(50ml)在氮?dú)庀录把b有回流冷凝器的100ml燒瓶中脫氣。加入2-羥基苯硼酸(2.52g，18.3mmol)的二甲氧基乙烷(5ml)液，將混合物加熱回流過夜。然后，與1∶1飽和氯化鈉/乙酸乙酯(25ml)混合。分離有機(jī)物，干燥(MgSO4)后減壓濃縮。剩余物用快速色譜(SiO2，己烷至3∶1己烷/乙酸乙酯梯度洗脫)純化，得到2.21g(75％)(4-(2-羥基苯基)苯基)乙酸甲酯。
步驟C按實(shí)施例1步驟D操作但使用(4-(2-羥基苯基)苯基)乙酸甲酯，以86％產(chǎn)率得到4-(2-(2，3，4，6-四-O-乙?；?α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯。
步驟D按實(shí)施例1步驟E操作但使用4-(2-(2，3，4，6-四-O-乙?；?α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯，得到4-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸為吸濕性白色固體。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)7.02-7.50(comp，8H)，5.30(s，1H)，3.30-3.75(comp，12H)ppm.
IR(KBr)3404，1788，1712，1486，1218，1170，1018，752cm-1.
m.p.65-68℃。
元素分析C20H22O8·[C2HF3O2]計(jì)算值C，52.38％；H，4.59％；實(shí)測值C，52.02％；H，4.52％實(shí)施例33-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲酸鋰鹽步驟A按實(shí)施例1步驟A操作但使用3-溴苯甲酸，以95％產(chǎn)率得到3-溴苯甲酸甲酯。
步驟B按實(shí)施例1步驟B操作但使用3-溴苯甲酸甲酯，以64％產(chǎn)率得到3-(2-甲氧基苯基)苯甲酸甲酯。m.p.92-93℃。
步驟C按實(shí)施例1步驟C操作但使用3-(2-甲氧基苯基)苯甲酸甲酯，以84％產(chǎn)率得到3-(2-羥基苯基)苯甲酸甲酯。
步驟D按實(shí)施例1步驟D操作但使用3-(2-羥基苯基)苯甲酸甲酯，以85％產(chǎn)率得到3-(2-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲酸甲酯。
步驟E氮?dú)庀?，?0ml干燥燒瓶中，將3-(2-(2，3，4，6-四-O-乙?；?α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲酸甲酯(2.18g，3.9mmol)溶解于甲醇(20ml)，并用甲醇鈉(250mg)一批處理。混合物在室溫?cái)嚢柽^夜后減壓濃縮。剩余物用快速色譜(SiO2，7∶3二氯甲烷/甲醇)純化，以84％產(chǎn)率得到3-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲酸甲酯。
步驟F將3-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲酸甲酯(0.662g，1.7mmol)溶解于乙腈(15ml)，并加入氫氧化鋰一水合物的水溶液(0.12g，2.55mmol在1ml水中)?；旌衔镌谑覝?cái)嚢?小時(shí)，然后添加乙腈(約10ml)使之稀釋，沉淀出3-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲酸的鋰鹽。收集該固體并干燥，得到0.614g(94％)產(chǎn)物。
m.p.109-115℃。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)8.11(s，1H)，7.79(d，J＝7Hz，1H)，7.20-7.40(comp，5H)，7.06(t，J＝7Hz，1H)，5.43(s，1H)，5.25(br s，1H)，5.04(br s，1H)，4.70(br s，1H)，4.55(br s，1H)，3.25-3.70(comp，6H)ppm.
IR(KBr)3384，1560，1405，1389，1111，1057，1020，757cm-1.
元素分析C19H19O8Li·[H2O]·1.8[LiOH]計(jì)算值C，51.4％；H，5.18％；實(shí)測值C，51.62％；H，4.81％。
實(shí)施例44-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲酸步驟A按實(shí)施例1步驟A操作但使用4-溴苯甲酸，以90％產(chǎn)率得到4-溴苯甲酸甲酯。m.p.66-68℃。
步驟B按實(shí)施例1步驟B操作但使用4-溴苯甲酸酯，以51％產(chǎn)率得到4-(2-甲氧基苯基)苯甲酸甲酯。
步驟C按實(shí)施例1步驟C操作但使用4-(2-甲氧基苯基)苯甲酸甲酯，以71％產(chǎn)率得到4-(2-羥基苯基)苯甲酸甲酯。
步驟D按實(shí)施例1步驟D操作但使用4-(2-羥基苯基)苯甲酸甲酯，以95％產(chǎn)率得到4-(2-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲酸甲酯。
步驟E按實(shí)施例1步驟E操作但使用4-(2-(2，3，4，6-四-O-乙?；?α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲酸甲酯，以71％產(chǎn)率得到4-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲酸。
m.p.248-249℃。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)7.98(d，J＝8Hz，2H)，7.61(d，J＝8Hz，2H)，7.30-7.40(comp，3H)，7.05-7.16(comp，1H)，5.36(s，1H)，4.90-5.05(br s，1H)，4.76-4.90(br s，1H)，4.65-4.76(br s，1H)，4.40-4.58(brs，1H)，3.25-3.70(comp，6H)ppm.
IR(KBr)3511，3398，2929，1683，1614，1485，1419，1314，1259，1107，1013，986，746cm-1.
元素分析C19H20O8·0.25[H2O]計(jì)算值C，59.92％；H，5.43％；實(shí)測值C，59.80％；H，5.25％。
實(shí)施例53-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯氧基乙酸步驟A氮?dú)庀拢?00ml干燥燒瓶中，將3-溴苯酚(2.84g，16.4mmol)溶解于二甲基甲酰胺(50ml)。將氫化鈉(0.7g在礦物油中的60％懸浮液，用乙烷洗滌，16.7mmol)分批加到上述溶液中，并將混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。滴加溴乙酸乙酯(1.85ml，16.7mmol)，混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。減壓除去約2/3的溶劑，剩余物與水(150ml)混合并用二氯甲烷(3×20ml)萃取。合并萃取液，依次用水(50ml)、飽和氯化鈉水溶液(50ml)洗滌，干燥(MgSO4)。過濾溶液并濃縮，得到4.18g(98％)3-溴苯氧基乙酸乙酯。
步驟B按實(shí)施例2步驟B操作但使用3-溴苯氧基乙酸乙酯，以52％產(chǎn)率得到3-(2-羥基苯基)苯氧基乙酸乙酯。
步驟C按實(shí)施例1步驟D操作但使用3-(2-羥基苯基)苯氧基乙酸乙酯，以69％產(chǎn)率得到3-(2-(2，3，4，6-四-O-乙?；?α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯氧基乙酸乙酯。
步驟D按實(shí)施例1步驟E操作但使用3-(2-(2，3，4，6-四-O-乙?；?α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯氧基乙酸乙酯，以82％產(chǎn)率得到3-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯氧基乙酸。
m.p.58-60℃。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)7.25-7.38(comp，4H)，7.06-7.15(comp，2H)，6.97(s，1H)，6.90.(mult，1H)，5.34(mult，1H)，4.70(s，2H)，3.80-4.40(br s，4H)，3.30-3.75(comp，6H)ppm.
IR(KBr)3404，2943，1788，1737，1478，1424，1220，1173，1068，1016，979，755，696cm-1.
元素分析C20H22O9·[H2O]·1.1[C2HF3O2]計(jì)算值C，48.50％；H，4.60％；實(shí)測值C，48.70％；H，4.21％。
實(shí)施例64-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯氧基乙酸步驟A按實(shí)施例5步驟A操作但使用4-溴苯酚，以98％產(chǎn)率得到4-溴苯氧基乙酸乙酯。
步驟B按實(shí)施例2步驟B操作但使用4-溴苯氧基乙酸乙酯，以41％產(chǎn)率得到4-(2-羥基苯基)苯氧基乙酸乙酯。
步驟C按實(shí)施例1步驟D操作但使用4-(2-羥基苯基)苯氧基乙酸乙酯，以80％產(chǎn)率得到4-(2-(2，3，4，6-四-O-乙?；?α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯氧基乙酸乙酯。
步驟D按實(shí)施例1步驟E操作但使用4-(2-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯氧基乙酸乙酯，以69％產(chǎn)率得到4-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯氧基乙酸。
m.p.145-146℃。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)7.42(d，J＝8Hz，2H)，7.23-7.35(comp，3H)，7.07(t，J＝7Hz，1H)，6.95(d，J＝8Hz，2H)，5.30(s，1H)，4.71(s，2H)，3.30-3.80(comp，10H)ppm.
IR(KBr)3418，2930，1739，1521，1486，1240，1219，1110，1068，1013，834，756cm-1.
元素分析C20H22O9·1.5[H2O]計(jì)算值C，55.43％；H，5.81％；實(shí)測值C，55.81％；H，5.54％。
實(shí)施例73-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)芐氧基乙酸步驟A按實(shí)施例5步驟A操作但使用3-溴芐醇，以40％產(chǎn)率得到3-溴芐氧基乙酸乙酯。
步驟B按實(shí)施例2步驟B操作但使用3-溴芐氧基乙酸乙酯，以34％產(chǎn)率得到3-(2-羥基苯基)芐氧基乙酸乙酯。
步驟C按實(shí)施例1步驟D操作但使用3-(2-羥基苯基)芐氧基乙酸乙酯，以74％產(chǎn)率得到3-(2-(2，3，4，6-四-O-乙?；?α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)芐氧基乙酸乙酯。
步驟D按實(shí)施例1步驟E操作但使用3-(2-(2，3，4，6-四-O-乙?；?α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)芐氧基乙酸乙酯，以3O％產(chǎn)率得到3-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)芐氧基乙酸。
m.p.77-78℃。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)7.20-7.51(comp，7H)，7.15(mult，1H)，5.32(s，1H)，4.11(s，2H)，3.25-3.75(comp，6H)，3.47(s，2H)ppm.
IR(KBr)3417，2938，1787，1734，1220，1172，1112，1013，977，754cm-1.
MS(FAB)443.2(m＋Na)+元素分析C21H29O9·[C2HF3O2]·0.5[H2O]計(jì)算值C，50.83％；H，4.82％；實(shí)測值C，50.59％；H，4.74％。
實(shí)施例8N-(4-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲?；?甘氨酸步驟A將丙酮(5.6ml)和二甲氧基丙烷(5.6ml)加到4-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲酸(0.54g，1.43mmol)中，形成非均相混合物。加入催化量對(duì)甲苯磺酸一水合物，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?5分鐘，這時(shí)，成為清澈均勻的溶液。真空除去溶劑，將黃色油狀剩余物溶于乙酸乙酯，先用飽和碳酸氫鈉，然后用飽和氯化鈉溶液洗滌，干燥(MgSO4)和真空濃縮，得到4-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基)α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲酸(0.70g)。
步驟B將粗4-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基)α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲酸(0.70g)的無水二氯甲烷(4ml)溶液加到甘氨酸乙酯鹽酸鹽(0.20g，1.44mmol)和三乙胺(0.40ml，2.88mmol)的無水二氯甲烷(3ml)漿液中。加入N-羥基琥珀酰亞胺(0.16g，1.44mmol)和N，N’-二環(huán)己基碳化二亞胺(0.32g，1.55mmol)，然后將反應(yīng)混合物在氮?dú)夂褪覝叵聰嚢?小時(shí)。濾除沉淀的二環(huán)己基脲，濾液用二氯甲烷稀釋。所得溶液依次用水，1N HCl，飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)和減壓濃縮，得到0.69g(兩步的產(chǎn)率為89％)N-(4-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基)α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲酰基)甘氨酸乙酯。
步驟C將N-(4-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基)α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲?；?甘氨酸乙酯(0.69g，1.28mmol)溶解于四氫呋喃(2.5ml)。加入等體積1N HCl后將反應(yīng)混合物攪拌過夜。加入2N氫氧化鈉(2ml)，并將反應(yīng)物再攪拌8小時(shí)。用1N HCl將溶液重新酸化至pH4.5，通過在Dynamax 3005微米(21mm ID×25cm)C18柱上的制備性反相HPLC將產(chǎn)物分離。5-50％梯度的溶劑B以10ml/min的流量流過20分鐘，其中，溶劑A由5％乙腈/水和0.1％TFA組成，溶劑B由95％乙腈/水和0.1％TFA組成。在254nm處監(jiān)測流出物。合并純的流份并凍干，得到0.33g N-(4-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲酰基)甘氨酸。
1H NMR(300MHz，D2O)7.85(d，J＝7.8，2H)，7.61(d，J＝7.8，2H)，7.41(m，2H)，7.32(d，J＝9.0，1H)，7.20(t，J＝6.9，7.8，1H)，5.48(s，1H)，4.11(s，2H)3.94(s，1H)，3.60(br m，4R)，3.28(br m，1H).
IR(KBr)3404，2938，1734，1637，1544，1220，1107，1066cm-1m.p.127-129℃。
元素分析C21H23NO9·1/5[CF3CO2H]計(jì)算值C，56.34％；H，5.13％；N，3.07％；實(shí)測值C，56.36％；H，4.93％；N，2.98％。
實(shí)施例9N-(4-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲?；?-D-苯基丙氨酸步驟A將4-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲酸(0.25g，0.55mmol)和D-苯基丙氨酸甲酯鹽酸鹽(0.13g，0.60mmol)在無水二氯甲烷(2ml)中漿化。加入N-甲基嗎啉(0.13ml，1.18mmol)，羥基苯并三唑水合物(74mg，0.55mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(0.26g，1.35mmol)，將反應(yīng)物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。加入乙酸乙酯，溶液依次用水，1N HCl，飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)和真空濃縮。剩余物用硅膠色譜(2∶1己烷∶乙酸乙酯)純化，得到N-(4-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲?；?-D-苯基丙氨酸甲酯(0.26g，76％)為白色泡沫狀物。
步驟B用實(shí)施例8步驟C類似的方式進(jìn)行操作，但使用20分鐘內(nèi)20-80％梯度的溶劑B，以46％產(chǎn)率得到N-(4-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲?；?-D-苯基丙氨酸。
m.p.116-119℃。
IR(KBr)3424，2972，1738，1642，1539，1361，1215，1109，1070，1013cm-1；1H NMR(30C MHz，CD3OD)27.77(d，2H，J＝8.4)，7.54(d，2H，J＝8.4)，7.29(m，9H)，7.10(t，1H)，5.41(s，1H)，3.80(br s，1H)，3.67(m，4H)，3.49(br m，1H)，3.35(m，1H)，3.12 ppm(dd，2H，J＝13.8，9.6)；MS(CI)m/z＝524，362，163；
元素分析C28H29NO9計(jì)算值C，64.2％；H，5.6％；N，2.7％；實(shí)測值C，64.2％；H，5.6％；N，2.4％。
實(shí)施例103-(2-(6-疊氮基-6-脫氧-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸步驟A將3-(2-(2，3，4，6-四-O-乙?；?α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(3.96g，6.9mmol，得自實(shí)施例2步驟E)溶解于甲醇(50ml)。加入甲醇鈉(100mg)，將溶液在室溫?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)混合物用Dowex-50W離子交換樹脂(H+型)中和，過濾并真空濃縮。色譜(二氧化硅，9∶1CHCl3甲醇)分離，得到3-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(2.8g，定量產(chǎn)率(約為100％))。
步驟B將3-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(1.86g，4.6mmol)溶解于2，2-二甲氧基丙烷(30ml)和丙酮(30ml)中。加入對(duì)甲苯磺酸(100mg)，然后將溶液在室溫?cái)嚢柽^夜。將反應(yīng)混合物倒入飽和碳酸氫鈉，然后用乙酸乙酯萃取。干燥(MgSO4)合并的萃取液后真空濃縮。色譜(二氧化硅，6∶1 己烷∶乙酸乙酯洗脫)純化，得到3-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(1.87g，84％)。
步驟C將3-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(1.53g，3.2mmol)溶解于甲醇(50ml)。加入對(duì)甲苯磺酸(100mg)，并在室溫?cái)嚢柚钡絫.l.c.(9∶1 CHCl3甲醇作洗脫劑)顯示已最大限度地轉(zhuǎn)化成單丙酮化合物。通過添加少量飽和碳酸氫鈉淬滅反應(yīng)，然后減壓濃縮。剩余物在乙酸乙酯和水之間分配，水相用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)相用飽和氯化鈉洗滌一次，干燥(MgSO4)后減壓濃縮。色譜(二氧化硅，9∶1 CHCl3∶甲醇作洗脫劑)分離，得到3-(2-(2，3-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(0.92g，55％)。
步驟D將3-(2-(2，3-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(6.37g，14.3mmol)溶解于吡啶(100ml)，并將溶液冷卻至0℃。加入對(duì)甲苯磺酰氯(5.5g，28.9mmol)，接著加入4-二甲氨基吡啶(100mg)，然后將溶液在室溫?cái)嚢柽^夜。冷卻至0℃后加入乙酐(5ml，53mmol)，溶液在室溫?cái)嚢?4小時(shí)。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用稀鹽酸洗滌除去吡啶。有機(jī)相用稀碳酸氫鈉和飽和氯化鈉洗滌，干燥(MgSO4)后真空濃縮，得到3-(2-(4-O-乙?；?2，3-O-異亞丙基-6-O-對(duì)甲苯磺酰基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(9.19g，定量產(chǎn)率(100％))。
步驟E將3-(2-(4-O-乙?；?2，3-O-異亞丙基-6-O-對(duì)甲苯磺?；?α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(9.19g，14.4mmol)溶解于二甲基甲酰胺(100ml)。加入碘化鈉(4.3g，29mmol)，并將混合物在110℃加熱6小時(shí)。冷卻至室溫后真空除去大部分DMF，并將剩余物在乙酸乙酯和水之間分配。有機(jī)相用水，稀硫代硫酸鈉溶液，水和飽和氯化鈉洗滌，干燥(MgSO4)后真空濃縮。色譜(二氧化硅，2∶1 己烷∶乙酸乙酯作洗脫劑)分離，得到3-(2-(4-O-乙?；?6-碘-6-脫氧-2，3-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(6.42g，75％)。
步驟F用本實(shí)施例步驟E類似方法，但用疊氮化鈉替代碘化鈉，由3-(2-(4-O-乙?；?6-碘-6-脫氧-2，3-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯和疊氮化鈉制備3-(2-(4-O-乙酰基-6-疊氮基-6-脫氧-2，3-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(產(chǎn)率93％)。
步驟G將3-(2-(4-O-乙?；?6-疊氮基-6-脫氧-2，3-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(0.208g，0.41mmol)溶解于甲醇(6ml)和水(2ml)中。加入濃鹽酸(3滴)，然后將溶液在室溫?cái)嚢?天。溶液用稀氫氧化鈉溶液堿化，并在室溫?cái)嚢?小時(shí)。用稀鹽酸中和后真空濃縮。剩余物與甲醇一起搖動(dòng)，離心除去產(chǎn)生的白色固體。減壓濃縮溶液，剩余物溶于5％乙腈/水(0.1％三氟乙酸)中。用稀鹽酸調(diào)至pH3.5后，產(chǎn)物在Dynamax 3005微米C18柱(21.4×250mm)上以10ml/min流速用制備性反相HPLC純化。使用溶劑B 30分鐘20-80％梯度洗脫，其中溶劑B為95％乙腈/水(含有0.1％三氟乙酸)，溶劑A為5％乙腈/水(含有0.1％三氟乙酸)。在254nm處監(jiān)測流出物，合并純流份并凍干，得到3-(2-(6-疊氮基-6-脫氧-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸(44mg，26％)。
1H NMR(300MHz，D2O/DMSO-d6)3.3-3.4(m，3H，OH)，3.55(dd，J＝9.6，8.4，1H，CH2N3)，3.62(dd，J＝9.6，2.7，1H，CH2N3)，3.73(s，2H，CH2CO2H)，3.96(m，1H)，4.6-5.0(m，3H)，5.46(s，1H)，7.14-7.50(m，8H，arom.).IR(KBrcm-1)3421，2101，1717；質(zhì)譜m/e(CICH4)229，183(100％).
元素分析C20H21N3O7·0.3[CF3CO2H]計(jì)算值C，55.9％；H，4.9％；N，9.6％；實(shí)測值C，56.1％；H，4.6％；N，9.5％。
實(shí)施例113-(2-(6-氨基-6-脫氧-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸鹽酸鹽步驟A將3-(2-(4-O-乙酰基-6-疊氮基-6-脫氧-2，3-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(1.26g，2.5mmol，得自實(shí)施例10步驟F)與甲醇鈉(100mg)一起在甲醇(15ml)中室溫?cái)嚢柽^夜。溶液用Dowex-50W離子交換樹脂(H+形式)中和，過濾并真空濃縮。色譜(二氧化硅，3∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫)分離，得到3-(2-(6-疊氮基-6-脫氧-2，3-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(1.02g，88％)。
步驟B將3-(2-(6-疊氮基-6-脫氧-2，3-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(0.79g，1.7mmol)溶解于甲醇(20ml)。加入Raney鎳(0.56g)，然后將混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將混合物過濾并真空濃縮。色譜(二氧化硅，9∶1 CHCl3甲醇洗脫)分離，得到3-(2-(6-氨基-6-脫氧-2，3-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(0.52g，69％)。
步驟C將3-(2-(6-氨基-6-脫氧-2，3-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(77mg，0.17mmol)溶解于甲醇(5ml)。加入對(duì)甲苯磺酸(40mg，0.21mmol)，然后將溶液在室溫?cái)嚢柽^夜。加入氫氧化鈉水溶液(2M，0.4ml)，在用稀鹽酸酸化前將溶液攪拌5分鐘。產(chǎn)物在Dynamax 3005微米C18柱(21.4×250mm)上以10ml/min的流速用制備性反相HPLC純化。使用溶劑B25分鐘10-40％梯度洗脫，其中溶劑B為95％乙腈/水(含有0.1％三氟乙酸)，溶劑A為5％乙腈/水(含有0.1％三氟乙酸)。在254nm處監(jiān)測流出物，合并純流份并真空濃縮。加入水(5ml)和稀鹽酸(0.2ml)，并將混合物重新濃縮。此過程再用鹽酸和水分別重復(fù)一次。剩余物溶解于水(5ml)，然后凍干，得到3-(2-(6-氨基-6-脫氧-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸鹽酸鹽(50.3mg，74％)。
實(shí)施例12N-(3-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲?；?-L-谷氨酸步驟A可用類似于實(shí)施例8步驟A的方法制備3-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲酸。
步驟B按實(shí)施例9步驟A類似方法操作，但使用L-谷氨酸二甲酯鹽酸鹽和3-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲酸，以89％產(chǎn)率得到N-(3-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲酰基)-L-谷氨酸二甲酯。
步驟C按實(shí)施例8步驟C類似方法操作，但使用溶劑B20分鐘內(nèi)10-60％的HPLC梯度洗脫，以19％產(chǎn)率得到N-(3-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲?；?-L-谷氨酸。
m.p.109-112℃ IR(KBr)3390，2938，1717，1635，1539，1416，1217，1100，1059，1011cm-1；1H NMR(300MHz，D2O)27.82(s，1H)，7.73(d，1H，J＝7.8)，7.65(d，1H，J＝7.5)，7.53(t，1H，J＝7.5)，7.37(d，2H，J＝7.8)，7.29(d，1H，J＝8.1)，7.17(t，1H，J＝7.2)，5.45(s，1H)，4.58(t，1H，J＝4.8)，3.92(s，1H)，3.57(m，6H)，3.19(br m，1H)，2.52(t，2H，J＝7.2)，2.27(m，1H)，2.11ppm (m，1H)；質(zhì)譜m/e(CICH4)344，163；
元素分析C24H27NO11·1/3[C2F3HO2]計(jì)算值C，54.5％；H，5.1％；N，2.6％；實(shí)測值C，54.4％；H，4.8％；N，2.6％。
實(shí)施例133-(2-(6-(羧基甲硫基)-6-脫氧-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸步驟A用己烷洗滌氫化鈉(60％wt的分散體，0.14g，3.4mmol)，然后加入四氫呋喃(5ml)，并將混合物脫氣。加入巰基乙酸甲酯(0.4ml，4.5mmol)，接著加入3-(2-(4-O-乙?；?6-脫氧-6-碘-2，3-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(0.83g，1.4mmol，得自實(shí)施例10步驟E)的THF(10ml)溶液。將溶液再次脫氣，然后在室溫?cái)嚢?2小時(shí)。用水淬滅反應(yīng)，然后在乙酸乙酯和水之間分配。有機(jī)相用稀硫代硫酸鈉，水和飽和氯化鈉洗滌，干燥(MgSO4)后真空濃縮。色譜(二氧化硅，2∶1 己烷∶乙酸乙酯洗脫)分離，得到3-(2-(4-O-乙?；?6-(甲氧羰基甲硫基)-6-脫氧-2，3-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(0.7g，87％)。
步驟B將3-(2-(4-O-乙?；?6-(甲氧羰基甲硫基)-6-脫氧-2，3-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(0.56g，1mmol)溶解于甲醇(30ml)。加入稀鹽酸(2ml)后在室溫?cái)嚢柽^夜，然后加熱回流30分鐘。冷卻至室溫后加入氫氧化鈉(2M，5ml)，并攪拌10分鐘。溶液用稀鹽酸中和，然后真空濃縮。剩余物與甲醇一起搖動(dòng)，離心除去產(chǎn)生的白色固體。真空濃縮溶液，剩余物溶于5％乙腈/水(含有0.1％三氟乙酸)。用稀鹽酸調(diào)至pH3.5后，產(chǎn)物在Dynamax 3005微米C18柱(21.4×250mm)上以10ml/min的流速用制備性反相HPLC純化。使用溶劑B20分鐘20-80％梯度洗脫，其中溶劑B為95％乙腈/水(含有0.1％三氟乙酸)，溶劑A為5％乙腈/水(含有0.1％三氟乙酸)。在254nm處監(jiān)測流出物，合并純流份并凍干，得到3-(2-(6-(羧基甲硫基)-6-脫氧-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸(0.40g，83％)。
1H NMR(300MHz，D2O)δ2.60(dd，J＝14.1，8.4，1H，6-H)，2.84(dd，J＝14.1，1.8，1H，6′-H)，3.04and3.30(both d，J＝14.4，1H，SCH2CO2H)，3.3-3.6(m，3H)，3.70(s，2H，CH2CO2H)，3.94(m，1H)，4.6-5.0(m，3H)，5.48(s，1H，1-H)，7.14-7.50(m，8H，arom.)；IR(KBrcm-1)3396，1710；質(zhì)譜m/e(CICH4)465(1％)，393，229，183(100％).
元素分析 C22H24O9S·0.8[H2O]計(jì)算值C，55.2％；H，5.4％；實(shí)測值C，55.25％；H，5.25％。
實(shí)施例142-(3-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯基)乙磺酸步驟A將3-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯乙酸甲酯(1.28g，2.6mmol，得自實(shí)施例10步驟B)溶解于乙醚(50ml)，并冷卻至0℃。滴加氫化鋁鋰(1M于THF中，50ml，5mmol)，小心加入水淬滅反應(yīng)接著加入冰冷的稀硫酸。有機(jī)相依次用水和飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，干燥(MgSO4)后真空濃縮，得到2-(3-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯基)乙醇(1.13g，94％)。
步驟B將2-(3-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯基)乙醇(0.73g，1.6mmol)溶解于二氯甲烷(50ml)，并冷卻至0℃。加入三乙胺(0.33ml，2.4mmol)，接著加入甲磺酰氯(0.15ml，1.9mmol)。在0℃5分鐘后反應(yīng)混合物用二氯甲烷稀釋，用稀鹽酸，水和飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，干燥(MgSO4)后真空濃縮，得到2-(3-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯基)乙醇1-O-甲磺酸酯(0.77g，90％)。
步驟C將2-(3-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯基)乙醇1-O-甲磺酸酯(0.22g，0.4mmol)溶解于乙醇(5m1)。加入硫代乙酸鉀(0.1g，0.88mmol)，將混合物在80℃加熱30分鐘。冷卻至室溫后反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和水之間分配。有機(jī)相用水洗滌兩次，干燥(MgSO4)后真空濃縮。色譜(二氧化硅，2∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫)分離，得到2-巰基-(3-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯基)乙烷S-乙酸酯(0.17g，80％)。
步驟D將2-巰基-(3-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基-α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯基)乙烷S-乙酸酯(0.15g，0.29mmol)溶解于甲醇(1ml)。在室溫用整整90分鐘時(shí)間滴加過硫酸氫鉀試劑溶液(約1meq/ml，在甲醇/水中，1.5ml)。攪拌7天后用60分鐘加入另一部分過硫酸氫鉀試劑溶液(1ml)，并再繼續(xù)攪拌3天。產(chǎn)物在Dynamax 3005微米C18柱(21×250mm)上用制備性反相HPLC分離。使用溶劑B以10ml/min流速0-70％梯度洗脫20分鐘，其中溶劑B為95％乙腈/水(含有0.1％三氟乙酸)，溶劑A為5％乙腈/水(含有0.1％三氟乙酸)。在254nm處監(jiān)測流出物，合并純流份并凍干，得到2-(3-(2-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)乙磺酸(50.8mg，38％)。1H NMR(300MHz，D2O)7.36(m，8H)，7.17(t，1H，J＝7.5)，5.44(s，1H)，3.93(s，1H)，3.61(m，1H)，3.57(m，4H)，3.25(br m，1H)，3.10ppm (m，4H)；質(zhì)譜m/e(CICH4)279，163；元素分析C20H24SO9·2[H2O]計(jì)算值C，50.4％；H，5.9％；實(shí)測值C，50.4％；H，6.0％。
實(shí)施例15N-(4-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲?；?-L-谷氨酸步驟A按照類似于實(shí)施例9步驟A的方法，但使用L-谷氨酸二甲酯鹽酸鹽，以89％產(chǎn)率得到N-(4-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基)-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯甲?；?-L-谷氨酸二甲酯。
步驟B按照類似于實(shí)施例8步驟C的方法，但使用HPLC的溶劑B在20分鐘內(nèi)以10-60％梯度洗脫，以43％產(chǎn)率得到N-(4-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲?；?-L-谷氨酸。
m.p.118-121℃。 IR(KBr)3390，2938，1717，1635，1539，1477，1217，1107，1059，1011cm-1；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.80(d，2H，J＝8.7)，7.55(d，2H，J＝8.4)，7.35(m，2H)，7.30(d，1H，J＝8.1)，7.18(t，1H，J＝7.5)，5.46(s，1H)，4.58(dd，1H，J＝9.9，5.7)，3.93(s，1H)，3.60(m，5H)，3.24(br m，1H)，2.53(t，2H，J＝7.2)，2.27(m，1H)，2.12ppm(m，1H)；質(zhì)譜m/e(CICH4)344，163；元素分析C24H27NO116，34·1/4[C2F3HO2]計(jì)算值C，54.0％；H，5.1％；N，2.6％；實(shí)測值C，53.7％；H，5.1％；N，2.4％。
實(shí)施例16N-(4-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲?；?-β-丙氨酸步驟A按照類似于實(shí)施例9步驟A的方法，但使用β-丙氨酸乙酯鹽酸鹽，以58％產(chǎn)率得到N-(4-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基)-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯甲?；?-β-丙氨酸乙酯。
步驟B按照類似于實(shí)施例8步驟C的方法，但使用HPLC的溶劑B在20分鐘內(nèi)以0-50％梯度洗脫，以53％產(chǎn)率得到N-(4-(2-(α-D-吡喃甘露糖基氧基)苯基)苯甲酰基)-β-丙氨酸。
m.p.101-104℃。
IR(KBr)3397，2938，1717，1635，1539，1484，1217，1107，1066，1011cm-1；1H NMR(300MHz，D2O)δ7.75(d，2H，J＝8.1)，7.54(d，2H，J＝7.8)，7.35(m，3H)，7.19(t，1H，J＝7.5)，5.47(s，1H)，3.93(s，1H)，3.64(m，7H)，3.26(br m，1H)，2.69ppm(t，2H，J＝6.4)；質(zhì)譜m/e(CICH4)448，286，163；
元素分析C22H25NO9·1/3[C2F3HO2]計(jì)算值C，56.1％；H，5.3％；N，2.9％；實(shí)測值C，56.1％；H，5.1％；N，3.0％。
實(shí)施例173-(3-(α-D-吡喃甘露糖基氧基甲基)苯基)苯乙酸步驟A將3-溴芐醇(2.0g，10.7mmol)溶解于裝在用氮?dú)鉀_洗過的100ml干燥燒瓶中的無水THF(50ml)中，混合物在干冰/丙酮浴中冷卻。加入正丁基鋰(11ml在己烷中的2.13M溶液，23.5mmol)。反應(yīng)物暖至室溫1小時(shí)，然后在冰水浴中冷卻。加入硼酸三甲酯(1.3ml，11.2mmol)，然后將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。用2N HCl水溶液調(diào)至pH2后再攪拌3小時(shí)。加入鹽水(15ml)，混合物用乙酸乙酯(3×15ml)萃取。合并有機(jī)物，干燥(MgSO4)后減壓濃縮，得到3-羥甲基苯硼酸(98％)為清澈油狀物。
氮?dú)庀拢瑢?-羥甲基苯硼酸(1.8g，11.8mmol)，3-溴苯乙酸(2.55g，11.8mmol)，磷酸三鉀(7.54g，35.5mmol)，DMF(55ml)和水(20ml)在裝有回流冷凝器的250ml燒瓶中脫氣。加入氯化雙[三苯膦]鈀(II)(0.17g，0.24mmol)，混合物在氮?dú)庀旅摎?，并?0℃加熱過夜。用2N HCl酸化，與鹽水(15ml)混合，用二氯甲烷(3×15ml)萃取。合并有機(jī)物，干燥(MgSO4)后減壓濃縮，得到3.0g 3-(3-羥甲基苯基)苯乙酸。
將3-(3-羥甲基苯基)苯乙酸(3.0g，12.4mmol)，甲醇(50ml)和濃硫酸(10滴)在100ml燒瓶中加熱回流過夜。用飽和碳酸氫鈉溶液淬滅，用水(10ml)稀釋，用二氯甲烷(3×15ml)萃取，用鹽水(1×15ml)洗滌，干燥(MgSO4)后減壓濃縮。剩余物通過快速色譜(二氧化硅，5∶1 己烷∶乙酸乙酯洗脫)純化，得到0.90g(30％，自3-溴苯乙酸)3-(3-羥甲基苯基)苯乙酸甲酯。
步驟B將3-(3-羥甲基苯基)苯乙酸甲酯(0.87g，3.4mmol)溶解于50ml干燥燒瓶中的1，2-二氯乙烷(17ml)中。一批加入D-甘露糖五乙酸酯(1.66g，4.24mmol)，然后緩慢加入三氟化硼醚合物(1.46ml，11.9mmol)。氮?dú)庀聦⒒旌衔镌谑覝財(cái)嚢柽^夜，然后與H2O(50ml)混合。分離有機(jī)物，水相用二氯甲烷(3×10ml)萃取。萃取液與原來的有機(jī)相合并，干燥(MgSO4)后減壓濃縮。剩余物通過快速色譜(二氧化硅，3∶1己烷∶乙酸乙酯梯度洗脫)純化，得到1.50g(75％)帶有少量與產(chǎn)物共洗脫的未反應(yīng)D-甘露糖五乙酸酯的3-(3-(2，3，4，6-四-O-乙?；?α-D-吡喃甘露糖基甲基)苯基)苯乙酸甲酯。
步驟C將3-(3-(2，3，4，6-四-O-乙?；?α-D-吡喃甘露糖基甲基)苯基)苯乙酸甲酯(1.0g，1.7mmol)溶解于50ml燒瓶中的乙腈(10ml)中，然后用氫氧化鋰一水合物(0.72g，17.0mmol)水(8ml)溶液處理。混合物在室溫?cái)嚢柽^夜，然后用濃鹽酸酸化至pH3.5。減壓濃縮混合物，剩余物用HPLC(反相C18，10-70％乙腈水溶液(含0.1％三氟乙酸)梯度洗脫，在254nm處監(jiān)測)純化，得到3-(3-(α-D-吡喃甘露糖基氧基甲基)苯基)苯乙酸(0.50g，73％)。
m.p.74-75℃。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)7.20-7.60(comp，8H)，4.73(d，2H，J＝12)，4.71(s，1H)，4.50(d，2H，J＝12)，3.25-3.75(comp，11H＋水)ppm；IR(KBr)3394，2934，1715，1366，1220，1130，1060cm-1；元素分析C21H24O8·0.15[C2HF3O2]計(jì)算值C，60.69％；H，5.77％；實(shí)測值C，60.60％；H，5.99％。
步驟D將3-(3-(α-D-吡喃甘露糖基氧基甲基)苯基)苯乙酸(0.05g，0.12mmol)，甲醇(10ml)和濃硫酸(2滴)在25ml燒瓶中加熱回流1小時(shí)，然后用飽和碳酸氫鈉溶液淬滅。用水(5ml)稀釋，用二氯甲烷(3×5ml)萃取，用鹽水(10ml)洗滌，干燥(MgSO4)后減壓濃縮。剩余物通過快速色譜(二氧化硅，3∶1 二氯甲烷∶甲醇洗脫)純化，得到3-(3-(α-D-吡喃甘露糖基氧基甲基)苯基)苯乙酸甲酯(0.04g，77％)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)7.2-7.6(comp，8H)，4.70(s，1H)，4.49-4.80(comp，7H)，3.75(s，2H)，3.62(s，3H)，3.30-3.50(comp，5H)ppm；IR3383，1738，1135，1066cm-1.
實(shí)施例183-(3-(2-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯基)丙基膦酸乙酯步驟A將2-(3-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基)-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯基)乙醇(1.12g，2.46mmol)的二氯甲烷(15ml)溶液緩慢加到Dess-Martin periodinane(4.95g，11.7mmol)的無水二氯甲烷(5ml)懸浮液中，然后將反應(yīng)物在室溫?cái)嚢柽^夜?；旌衔镉靡颐严♂尣⑦^濾。濾液用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌兩次，用鹽水洗滌一次，然后用硫酸鎂干燥。真空除去溶劑，剩余物通過硅膠色譜(4∶1己烷∶乙酸乙酯)純化，得到2-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基)-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯乙醛(0.63g，57％)。
步驟B在氮?dú)鈱又袑喖谆⑺崴囊阴?0.37g，1.28mmol)溶解于無水四氫呋喃(3.6ml)中，然后將溶液冷卻至-78℃。滴加0.5M六甲基二硅疊氮化鉀(potassium hexamethyl-disilazide)的甲苯(2.56ml，1.28mmol)溶液，并將反應(yīng)物攪拌10分鐘。加入2-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基)-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯乙醛(0.58g，1.28mmol)的四氫呋喃(3.8ml)溶液，攪拌的同時(shí)在室溫放置過夜。加水，然后混合物用乙酸乙酯萃取。萃取液用水，1N HCl，飽和碳酸氫鈉溶液，鹽水洗滌，然后用硫酸鎂干燥。真空除去溶劑，剩余物用硅膠色譜(1∶2己烷∶乙酸乙酯)純化，得到3-(3-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基)-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯基)丙-1-烯基膦酸二乙酯(0.46g，63％)。
步驟C將3-(3-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基)-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯基)丙-1-烯基膦酸二乙酯(0.46g，0.80mmol)溶解于乙醇(25ml)，并氫解(40psi H2，10％Pd/C)3小時(shí)。用硅藻土過濾此懸浮液。減壓濃縮濾液，得到3-(3-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基)-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯基)丙基膦酸二乙酯(0.46g，定量)。
步驟D將3-(3-(2-(2，34，6-二-O-異亞丙基)-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯基)丙基膦酸二乙酯(0.23g，0.40mmol)溶解于甲醇(2ml)，然后加入2N鹽酸(0.5ml)，并將反應(yīng)物攪拌過夜。通過添加2N NaOH將溶液調(diào)至pH10，然后在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將反應(yīng)物在60℃加熱18小時(shí)，然后在80℃加熱116小時(shí)。冷卻溶液并用1N HCl酸化，產(chǎn)物在Dynamax 3005微米C18柱(21.4×250mm)上以10ml/min流速用制備性反相HPLC分離。使用溶劑B20分鐘內(nèi)以0-50％梯度洗脫，其中溶劑B為95％乙腈/水(含0.1％三氟乙酸)，溶劑A為5％乙腈/水(含0.1％三氟乙酸)。在254nm處監(jiān)測流出物，合并純流份并凍干，得到3-(3-(2-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯基)丙基膦酸乙酯(76.4mg，40％)為白色固體。m.p.67-70℃。
IR(KBr)3404，2931，1478，1454，1423，1222，1108，1043，1008，976，797，752，706cm-1；NMR(300MHz，D2O)d7.25(m，8H)，5.41(s，1H)，3.88(m，3H)，3.61(m，4H)，3.26(m，1H)，2.64(m，2H)，1.78(m，2H)，1.66(m，2H)，1.16(t，3H，J＝6.9).
實(shí)施例193-(2-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯乙腈步驟A在50ml燒瓶中將5.19g(20.77mmol)3-溴芐基溴溶解于甲醇(25ml)，然后用氰化鈉(1.29g，26.3mmol)的水(5ml)溶液處理。將混合物加熱回流3小時(shí)，然后減壓濃縮。將剩余物溶解于二氯甲烷(20ml)，并用水(2×25ml)和飽和氯化鈉(25ml)洗滌。干燥(MgSO4)后減壓濃縮，得到4.01g(98％)3-氰基甲基溴苯，為清澈油狀物。
將該粗腈的DME(10ml)液加到2-羥基苯硼酸(2.9g，21mmol)，磷酸三鉀(13.4g，63mmol)和氯化雙(三苯膦)鈀(II)(0.3g，0.42mmol)在DME(90ml)中的混合物中?；旌衔镌诘?dú)庀旅摎?，然后在氮?dú)庀录訜峄亓?小時(shí)。將反應(yīng)物與水(150ml)混合，并用2N HCl將溶液調(diào)至pH4。用乙酸乙酯(3×15ml)萃取，合并有機(jī)物，干燥(MgSO4)后減壓濃縮，得到3.8g(89％)2-(3-氰基甲基苯基)苯酚。從乙酸乙酯中重結(jié)晶得到分析樣品，為白色固體。m.p.113-114℃。
步驟B將2-(3-氰基甲基苯基)苯酚(0.5g，2.39mmol)溶解于1，2-二氯乙烷(10ml)，然后加入α-D-甘露糖五乙酸酯(1.4g，3.6mmol)和三氟化硼醚合物(1.05ml，8.4mmol)?；旌衔镌谑覝?cái)嚢柽^夜，然后與水(20ml)混合。分離有機(jī)相，用飽和氯化鈉(15ml)洗滌，干燥(MgSO4)后減壓濃縮。剩余物用快速色譜(SiO2，3∶1己烷/乙酸乙酯)純化，得到1.38g(105％)所要產(chǎn)物，其帶有少量與產(chǎn)物共洗脫的未反應(yīng)的甘露糖五乙酸酯。
步驟C將3-(2-(2，3，4，6-四-O-乙?；?-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯基)苯乙腈(0.82g，1.52mmol)溶解于THF(10ml)，然后加入氫氧化鋰一水合物(0.5g，12.0mmol)的水(2ml)溶液。將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜，然后減壓濃縮。剩余物用2N HCl酸化至pH4，然后用反相HPLC(C18，以0-50％乙腈的水(0.1％TFA)溶液梯度洗脫，在254nm處監(jiān)測)，得到202mg(37％)3-(2-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯乙腈，為白色固體。
m.p.70-72℃。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)7.10-7.50(comp，8H)，5.38(s，1H)，4.02(s，2H)，3.25-3.90(comp).IR(KBr)3424，2934，2258，1477，1425，1220，1109，1009，975，756.MS(CI)m/e 372(M+＋1)，228，115.
元素分析C19H21NO6·0.3TFA計(jì)算值C，61.00％；H，5.29％；N，3.45％；實(shí)測值C，61.03％；H，5.53％；N，3.49％。
實(shí)施例202-( 2’-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯氧基乙酸步驟A在用氮?dú)鉀_洗的50ml干燥燒瓶中將2，2’-二羥基聯(lián)苯(1.0g，5.37mmol)溶解于THF(5ml)。一批加入氫化鈉(0.24g，60％懸浮于礦物油中，5.91mmol)，并將混合物在室溫?cái)嚢?0分鐘。加入溴乙酸乙酯(0.61ml，5.5mmol)，混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。加熱回流30分鐘，冷卻后用飽和氯化銨淬滅反應(yīng)。用乙醚萃取混合物，合并有機(jī)物，干燥(MgSO4)后減壓濃縮，剩余物用快速色譜(SiO2，己烷到3∶1 己烷/乙酸乙酯梯度洗脫)純化，得到0.89g(61％)2-(2’-羥基苯基)苯氧基乙酸乙酯。
步驟B將2-(2’-羥基苯基)苯氧基乙酸乙酯(0.75g，2.75mmol)溶解于1，2-二氯乙烷(10ml)，然后加入α-D-甘露糖五乙酸酯(2.15g，5.51mmol)和三氟化硼醚合物(1.73ml，13.8mmol)?；旌衔镌谑覝?cái)嚢柽^夜，然后與水(20ml)混合。分離有機(jī)相，用飽和氯化鈉(15ml)洗滌，干燥(MgSO4)后減壓濃縮。剩余物用快速色譜(SiO2，3∶1己烷/乙酸乙酯)純化，得到1.11g(64％)所要產(chǎn)物，其帶有少量與產(chǎn)物共洗脫的未反應(yīng)的甘露糖五乙酸酯。
步驟C將2-(2’-(2，3，4，6-四-O-乙?；?-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯氧基乙酸乙酯(1.1g，1.84mmol)溶解于THF(10ml)，然后加入氫氧化鋰一水合物(0.53g，12.6mmol)的水(3ml)溶液。將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜，然后減壓濃縮。剩余物用2N HCl酸化至pH4，然后用反相HPLC(C18，以0-50％乙腈的水(0.1％TFA)溶液梯度洗脫，在254nm處監(jiān)測)，得到202mg(37％)2-(2’-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯氧基乙酸，為白色固體。
m.p.93-96℃。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)6.85-7.35(comp，8H)，5.25(s，1H)，4.60(s，2H)，3.25-4.20(comp，11H).IR(KBr)3417，2934，1735，1481，1443，1215，1107，1067，978，755.
MS(CI)m/e407(M+＋1)，245，199，115.
元素分析C20H22O9·0.3TFA，0.3H2O計(jì)算值C，55.70％；H，5.18％；實(shí)測值C，55.80％；H，5.47％。
實(shí)施例213-(2-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)-5-甲基-苯氧基乙酸步驟A在25ml干燥燒瓶中將3-溴-4-甲基苯酚(1.4g，7.5mmol)溶解于丙酮(15ml)。依次加入溴乙酸乙酯(0.96ml，8.66mmol)，碳酸鉀(1.03g，7.5mmol)和碘化鉀(25mg)，然后將反應(yīng)混合物在回流溫度攪拌1小時(shí)。之后，冷卻并濃縮。剩余物與水(15ml)和乙酸乙酯(10ml)混合。分離有機(jī)物，干燥(MgSO4)后減壓濃縮。將剩余物溶解于己烷，通過硅膠過濾，濃縮后得到2.1g(100％)3-溴-4-甲基苯氧基乙酸乙酯。它無需進(jìn)一步純化即可使用。
步驟B氮?dú)庀聦?-溴-4-甲基苯氧基乙酸乙酯(0.5g，1.83mmol)，四(三苯膦)鈀(O)(17mg)，磷酸鉀(0.55g，2.6mmol)和二甲基甲酰胺(8ml)在裝有回流冷凝器的25ml燒瓶中脫氣。加入2-羥基苯硼酸(0.3g，2.0mmol)的二甲基甲酰胺(1ml)液，并將混合物加熱回流過夜，然后與水(25ml)混合，并用二氯甲烷(3×3ml)萃取。分離有機(jī)物，干燥(MgSO4)后減壓濃縮。剩余物用快速色譜(SiO2，己烷到3∶1己烷/乙酸乙酯梯度洗脫)純化，得到130mg(25％)3-(2-羥基苯基)-4-甲基苯氧基乙酸乙酯。
步驟C將3-(2-羥基苯基)-4-甲基苯氧基乙酸乙酯(130mg，0.454mmol)溶解于10ml干燥燒瓶中的1，2-二氯乙烷(2ml)中。一批加入α-D-甘露糖五乙酸酯(0.4g，0.9mmol)，然后緩慢加入三氟化硼醚合物(0.3ml，2.3mmol)。氮?dú)庀聦⒒旌衔镌谑覝財(cái)嚢柽^夜，然后與水(15ml)混合。分離有機(jī)物，水相用二氯甲烷(3×1ml)萃取。萃取液與原來的有機(jī)相合并，干燥(MgSO4)后減壓濃縮。剩余物用快速色譜(SiO2，己烷到3∶1己烷/乙酸乙酯梯度洗脫)純化，得到0.42g(＞100％)3-(2-(2，3，4，6-四-O-乙酰基)-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)-4-甲基苯氧基乙酸乙酯，其帶有少量與產(chǎn)物共洗脫的未反應(yīng)的α-D-甘露糖五乙酸酯。
步驟D將3-(2-(2，3，4，6-四-O-乙?；?-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)-4-甲基苯氧基乙酸乙酯(2.74g，4.78mmol)溶解于乙腈(10ml)，然后用氫氧化鋰一水合物(0.25g，5.95mmol)的水(2ml)溶液處理。將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜，然后用濃鹽酸酸化至pH2。減壓濃縮混合物，剩余物用HPLC(反相，以5-50％乙腈水溶液梯度洗脫，在254nm處監(jiān)測)，得到101mg(53％，自3-(2-羥基苯基)-4-甲基苯氧基乙酸乙酯)3-(2-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)-4-甲基苯氧基乙酸。
m.p.87-89℃。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)7.32(s，2H)，7.05-7.18(comp，3H)，6.80(comp，1H)，6.60(br s，1H)，5.31(br s，1H)，5.11(br s，1H)，4.9(br s，1H)，4.60(s，2H)，4.59(br s，1H)，3.10-3.72(comp，7H)，2.00(s，3H).IR(KBr)3424，2931，1735，1484，1219，1193，1068，1010，976，757.MS(CI)m/e421(M+＋1)，259，241，213，163，145，127，115.
元素分析C21H24O9·0.3TFA計(jì)算值C，57.07％；H，5.39％；實(shí)測值C，56.90％；H，5.57％。
實(shí)施例223-(2-甲氧基-5-(3-(2-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)-2-苯基苯乙酮))苯乙酸步驟A將3-(2-甲氧基苯基)苯乙酸甲酯(0.82g，3.2mmol)和3-溴苯乙酰氯(0.77g，3.3mmol)溶解于二氯乙烷(11ml)，并在冰浴中冷卻。一批加入氯化鋁(0.88g，6.6mmol)，并將混合物在50℃加熱15分鐘，然后與冰水(20ml)混合。分離有機(jī)物，干燥(MgSO4)后減壓濃縮，得到1.68g3-(2-甲氧基-5-(3-溴苯基-2-苯基苯乙酮))苯乙酸甲酯，為黃色油狀物，無需進(jìn)一步純化即可使用。
將該粗鹵化物與2-甲氧基苯基硼酸(0.54g，3.55mmol)的甲苯(20ml)液混合，然后加入四(三苯膦)鈀(O)(120mg，3mol％)和碳酸鈉水溶液(6ml的2N溶液)，并將混合物在氮?dú)庀旅摎?。將混合物加熱回?4小時(shí)，然后與水(100ml)混合，并用乙酸乙酯(3×8ml)萃取。合并有機(jī)物，用飽和氯化鈉(15ml)洗滌，干燥(MgSO4)后減壓濃縮。剩余物用快速色譜(SiO2，己烷到3∶1己烷/乙酸乙酯梯度洗脫)純化，得到1.57g(77％)3-(2-甲氧基-5-(3-(2-甲氧基苯基)-2-苯基苯乙酮))苯乙酸甲酯，為清澈油狀物。
步驟B氮?dú)庀聦?-(2-甲氧基-5-(3-(2-甲氧基苯基)-2-苯基苯乙酮))苯乙酸甲酯(0.68g，1.42mmol)溶解于二氯甲烷(5ml)，然后在干冰/2-丙醇浴中冷卻。緩慢滴加三溴化硼(0.8ml，8.5mmol)，并將混合物在0℃保持1小時(shí)，然后與冰水(25ml)混合。分離有機(jī)物，用飽和碳酸氫鈉溶液(10ml)，水(10ml)和飽和氯化鈉(10ml)洗滌，干燥(MgSO4)后減壓濃縮，得到0.73g3-(2-甲氧基-5-(3-(2-羥基苯基)-2-苯基苯乙酮))苯乙酸甲酯，為清澈油狀物。
將此粗酚溶解于二氯乙烷(10ml)，一批加入α-D-甘露糖五乙酸酯(1.8g，4.5mmol)，然后緩慢加入三氟化硼醚合物(1.0ml，7.5mmol)。氮?dú)庀聦⒒旌衔镌谑覝財(cái)嚢柽^夜，然后與水(25ml)混合。分離有機(jī)物，水相用二氯甲烷(3×2ml)萃取。萃取液與原來的有機(jī)相合并，干燥(MgSO4)后減壓濃縮。剩余物用快速色譜(SiO2，己烷到3∶1己烷/乙酸乙酯梯度洗脫)純化，得到0.8g(73％)3-(2-甲氧基-5-(3-(2-(2，3，4，6-四-O-乙?；?-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)-2-苯基苯乙酮))苯乙酸甲酯，其帶有少量與產(chǎn)物共洗脫的未反應(yīng)的α-D-甘露糖五乙酸酯。
步驟C將3-(2-甲氧基-5-(3-(2-(2，3，4，6-四-O-乙?；?-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)-2-苯基苯乙酮))苯乙酸甲酯(0.8g，1.0mmol)溶解于四氫呋喃(6ml)，然后用氫氧化鋰一水合物(0.25g，6.0mmol)的水(3ml)溶液處理。將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜，然后用濃鹽酸酸化至pH2，并減壓濃縮。剩余物用HPLC(反相，以5-50％乙腈水溶液梯度洗脫，在254nm處監(jiān)測)，得到134mg(22％)3-(2-甲氧基-5-(3-(2-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)-2-苯基苯乙酮))苯乙酸為白色固體。
m.p.122-125℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)8.13(dd，J＝8.8，2.2Hz，2H)，7.95(d，J＝2.2Hz，1H)，7.22-7.43(comp，12H)，7.09(mult，1H)，5.34(d，J＝1.5Hz，1H)，4.44(dd，J＝19，15.8Hz，1H)，4.16(br s，4H)，3.85，(s，3H)，3.70(comp，1H)，3.62(s，2H)，3.34-3.55(comp，3H)，2.07(s，2H).IR(KBr)3415，1713，1669，1597，1269，1217，1135，1015.MS(CI)m/e 453(M+-C6H11O5).
實(shí)施例233-(2-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基-5-(2-(3-(2-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯基)乙基))苯乙酸步驟A將3-(2-甲氧基-5-(3-(2-甲氧基苯基)-2-苯基苯乙酮))苯乙酸甲酯(2.25g，4.68mmol)溶解于DMSO(15ml)。溶液用氫氧化鉀水溶液(2.5ml 2N溶液)處理，然后在氮?dú)夂?0℃加熱1小時(shí)。將混合物冷卻至室溫，用肼水合物(0.4ml，11.7mmol)處理，然后在60℃加熱1小時(shí)。加入叔丁醇鉀(1.31g，11.7mmol)，并將溫度增至100℃?；旌衔锢鋮s18小時(shí)后與水(50ml)混合，用2N HCl酸化至pH4?；旌衔镉寐然c飽和，用THF/乙酸乙酯(1∶1)萃取。合并萃取液，干燥(MgSO4)后減壓濃縮，得到2.29g深色油狀物。
將此粗產(chǎn)物溶解于二氯甲烷(25ml)，并在干冰/2-丙醇浴中冷卻。滴加三溴化硼(2.4ml，25mmol)，將混合物在-78℃攪拌2小時(shí)，暖至0℃2小時(shí)后重新冷卻至-78℃，并用水淬滅反應(yīng)。將混合物減壓濃縮，剩余物在THF和飽和氯化鈉之間分配。分離有機(jī)物，干燥(MgSO4)后濃縮。剩余物(2.63g)被溶解于甲醇(30ml)，再加入5滴濃硫酸，將混合物回流過夜后濃縮。剩余物用快速色譜(SiO2，己烷到3∶1己烷/乙酸乙酯梯度洗脫)純化，得到0.89g(43％)3-(2-羥基苯基-5-(2-(3-(2-羥基苯基)苯基)乙基))苯乙酸甲酯為清澈油狀物。
步驟B將3-(2-羥基苯基-5-(2-(3-(2-羥基苯基)苯基)乙基))苯乙酸甲酯(0.69g，1.57mmol)溶解于二氯乙烷(10ml)。一批加入α-D-甘露糖五乙酸酯(1.8g，4.5mmol)，然后緩慢加入三氟化硼醚合物(2.3ml，18.8mmol)。氮?dú)庀聦⒒旌衔镌谑覝財(cái)嚢柽^夜，然后與水(50ml)混合。分離有機(jī)物，水相用二氯甲烷(3×2ml)萃取。萃取液與原來的有機(jī)部分合并，干燥(MgSO4)后減壓濃縮。剩余物用快速色譜(SiO2，己烷到3∶1己烷/乙酸乙酯梯度洗脫)純化，得到1.38g(66％)3-(2-(2，3，4，6-四-O-乙?；?-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基-5-(2-(3-(2-(2，3，4，6-四-O-乙?；?-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯基)乙基))苯乙酸甲酯，為泡沫狀物。
將該產(chǎn)物溶解于乙腈(5ml)，然后用氫氧化鋰水合物(0.24g，5.6mmol，在5ml水中)溶液處理。將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜，然后用濃HCl酸化至pH3，并減壓濃縮。剩余物用反相HPLC(C18，以0-50％乙腈水(0.1％TFA)溶液梯度洗脫，在254nm處監(jiān)測)，得到142mg(18％)3-(2-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基-5-(2-(3-(2-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯基)乙基))苯乙酸，為白色固體。
m.p.129-134℃。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)7.10-7.40(comp，15H)，5.33(d，J＝1.7Hz，1H)，5.27(d，J＝1.7Hz，1H)，3.30-3.70(comp，14H，＋水)，2.92(2，4H).IR(KBr)3410，2935，1710，1478，1222，1113，1064，1011，977.
MS(CI)m/e 425(M+-C12H20O10).
元素分析C40H44O14·2.2H2O計(jì)算值C，60.94％；H，6.19％；實(shí)測值C，60.70％；H，5.84％。
實(shí)施例242，6-二甲基-4-(2-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯氧基乙酸步驟A將4-溴-2，6-二甲基苯酚(8.0g，39.8mmol)溶解于250ml燒瓶中的甲苯(80ml)中。加入雙(三甲基甲硅烷基)氨化鉀(80ml，39.8mmol)，然后加入三(2-(2-甲氧基乙氧基)乙基)胺(1.3ml，4.0mmol)，并在氮?dú)庀聰嚢?5分鐘。加入溴乙酸乙酯(5ml，43.8mmol)，在室溫?cái)嚢柽^夜。反應(yīng)混合物與飽和氯化銨溶液(30ml)混合，用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。合并有機(jī)物，干燥(MgSO4)后減壓濃縮。剩余物用己烷/乙酸乙酯(10∶1)沖洗通過硅膠，濃縮后得到11.3g(99％)4-溴-2，6-二甲基苯氧基乙酸乙酯。
1H NMR(400MHz，CDCl3)7.13(s，2H)，4.35(s，2H)，4.26-4.31(q，2H)，2.25(s，6H)，1.23-1.33(t，3H)ppm.IR(NaCl)2987，1749，1470，1287，1192cm-1.
步驟B氮?dú)庀聦?-羥基苯硼酸(2.0g，14.5mmol)，4-溴-2，6-二甲基苯氧基乙酸乙酯(4.2g，14.5mmol)，磷酸三鉀(7.7g，36.3mmol)和DME(30ml)在裝有回流冷凝器的100ml燒瓶中脫氣。加入氯化雙(三苯膦)鈀(II)(0.20g，0.3mmol)，混合物在氮?dú)庀旅摎?，?0℃加熱過夜，然后與鹽水(20ml)混合，用乙酸乙酯(3×20ml)萃取。合并有機(jī)物，干燥(MgSO4)后減壓濃縮。剩余物用快速色譜(SiO2，10∶1 己烷∶乙酸乙酯)純化，得到1.08g(23％)2，6-二甲基-4-(2-羥基苯基)苯氧基乙酸乙酯。1H NMR(500MHz，CDCl3)7.21-7.29(comp，6H)，4.48(s，2H)，4.32-4.37(q，2H)，2.38(s，6H)，1.35-1.39(t，3H)ppm.IR(NaCl)3438，1738，1484，1443，1203，1176，1080cm-1.
步驟C將2，6-二甲基-4-(2-羥基苯基)苯氧基乙酸乙酯(1.08g，3.6mmol)溶解于50ml干燥燒瓶中的1，2-二氯乙烷(10ml)中。一批加入α-D-甘露糖五乙酸酯(1.75g，4.5mmol)，然后緩慢加入三氟化硼醚合物(1.3ml，10.8mmol)。氮?dú)庀聦⒒旌衔镌谑覝財(cái)嚢柽^夜，然后與水(30ml)混合。分離有機(jī)物，水相用二氯甲烷(3×10ml)萃取。萃取液與原來的有機(jī)部分合并，干燥(MgSO4)后減壓濃縮。剩余物用快速色譜(SiO2，10∶1 己烷∶乙酸乙酯)純化，得到2.4g(95％)2，6-二甲基-4-(2-(2，3，4，6-四-O-乙酰基)-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯氧基乙酸乙酯，其帶有少量與產(chǎn)物共洗脫的未反應(yīng)的α-D-甘露糖五乙酸酯。1H NMR(500MHz，CDCl3)7.11-7.35(comp，6H)，5.42(s，1H)，4.47(s，2H)，4.29-4.34(comp，2H)，2.36(s，6H)，2.17-2.18(comp，6H)，1.97-2.14(7H)，1.32-1.35(comp， 3H)ppm.IR(NaCl)2972，1752，1471，1436，1375，1210，1176，1142，1080，1032，970cm-1.
步驟D將2，6-二甲基-4-(2-(2，3，4，6-四-O-乙?；?-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯氧基乙酸乙酯(2.4g，3.8mmol)溶解于50ml燒瓶中的乙腈(10ml)中，并用氫氧化鋰一水合物(1.5g，38.0mmol)的水(20ml)溶液處理，然后在室溫?cái)嚢柽^夜。減壓蒸發(fā)乙腈，剩余物用濃鹽酸酸化至pH2，然后用HPLC(反相，以10-60％乙腈水溶液梯度洗脫，在254nm處監(jiān)測)，得到0.88g(53％)2，6-二甲基-4-(2-α-D-吡喃甘露糖基氧基苯基)苯氧基乙酸。
m.p.95-96℃。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)7.06-7.31(comp，6H)，5.29(s，1H)，4.40(s，2H)，3.28-3.68(comp，10H＋水)，2.25(s，6H)ppm.
IR(KBr)3431，2931，1738，1477，1217，1176，1107，1066，1011cm-1.
元素分析C22H26O9·0.27TFA計(jì)算值C，58.19％；H，5.69％；實(shí)測值C，58.15％；H，5.98％。
實(shí)施例252，6-二甲基-4-(3-α-D-吡喃甘露糖基氧基甲基苯基)苯氧基乙酸步驟A按照實(shí)施例21步驟B操作，但使用3-羥甲基苯硼酸，以30％產(chǎn)率得到2，6-二甲基-4-(3-羥甲基苯基)苯氧基乙酸乙酯。
步驟B按照實(shí)施例21步驟C操作，但使用2，6-二甲基-4-(3-羥甲基苯基)苯氧基乙酸乙酯，以118％產(chǎn)率得到2，6-二甲基-4-(3-(2，3，4，6-四-O-乙酰基)-α-D-吡喃甘露糖基氧基芐基)苯氧基乙酸乙酯，其帶有少量與產(chǎn)物共洗脫的未反應(yīng)的α-D-甘露糖五乙酸酯。
步驟C按照實(shí)施例21步驟D操作，但使用2，6-二甲基-4-(3-(2，3，4，6-四-O-乙?；?-α-D-吡喃甘露糖基氧基甲基苯基)苯氧基乙酸乙酯，以25％產(chǎn)率得到2，6-二甲基-4-(3-α-D-吡喃甘露糖基氧基甲基苯基)苯氧基乙酸。
m.p.131-132℃。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)7.29-7.55(comp，6R)，4.50-4.76(comp，7H)，4.40(s，1H)，3.40-3.65(comp，7H)，2.30(s，6H)ppm.IR(KBr)3397，2924，1752，1710，1477，1443，1203，1135，1066cm-1.
元素分析C23H28O9·0.3TFA計(jì)算值C，58.73％；H，5.91％；實(shí)測值C，58.66％；H，6.22％。
實(shí)施例263-(3-α-D-吡喃甘露糖基氧基芐基)苯氧基乙酸步驟A將3-溴苯酚(9.0g，52.0mmol)溶解于250ml燒瓶中的DMF(105ml)中。加入氫化鈉(2.3g，57.2mmol，在礦物油中的60％分散液)，氮?dú)庀聰嚢?小時(shí)。加入溴乙酸乙酯(6.35ml，57.2mmol)，并在室溫?cái)嚢柽^夜。冰浴中攪拌的同時(shí)緩慢加水(800ml)，濾出形成的沉淀，得到11.9g(88％)3-溴苯氧基乙酸乙酯。
步驟B氮?dú)庀聦?-溴苯氧基乙酸乙酯(1.7g，6.6mmol)，氯化雙(三苯膦)鈀(II)(0.09g，0.13mmol)，磷酸三鉀(4.2g，19.7mmol)和DME(30ml)在裝有回流冷凝器的100ml燒瓶中脫氣。加入3-羥甲基苯硼酸(0.8g，5.3mmol)的DME(1ml)液，然后將混合物在80℃加熱過夜。與鹽水(20ml)混合，用乙酸乙酯(3×20ml)萃取。合并有機(jī)物，干燥(MgSO4)后減壓濃縮。剩余物用快速色譜(SiO2，10∶1己烷∶乙酸乙酯)純化，得到0.28g(19％)3-(3-羥甲基苯基)苯氧基乙酸乙酯。
步驟C按照實(shí)施例1步驟C操作，但使用3-(3-羥甲基苯基)苯氧基乙酸乙酯，以45％產(chǎn)率得到3-(3-(2，3，4，6-四-O-乙?；?-α-D-吡喃甘露糖基氧基芐基)苯氧基乙酸乙酯。
步驟D按照實(shí)施例1步驟D操作，但使用3-(3-(2，3，4，6-四-O-乙?；?-α-D-吡喃甘露糖基氧基芐基)苯氧基乙酸乙酯，以35％產(chǎn)率得到3-(3-α-D-吡喃甘露糖基氧基芐基)苯氧基乙酸。
m.p.73-75℃。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)6.90-7.60(comp，8H)，4.72(comp，4H)，4.51(d，1H)，3.50-3.66(comp，10H＋水)ppm.IR(KBr)3431，2931，1738，1608，1423，1210，1066cm-1.
元素分析C21H24O9·0.25TFA計(jì)算值C，57.52％；H，5.44％；實(shí)測值C，57.29％；H，5.58％。
實(shí)施例274-(3-α-D-吡喃甘露糖基氧基芐基)苯氧基乙酸步驟A按照實(shí)施例26步驟A操作，但使用4-溴苯酚，以100％產(chǎn)率得到4-溴苯氧基乙酸乙酯。
步驟B按照實(shí)施例26步驟B操作，但使用4-溴苯氧基乙酸乙酯，以26％產(chǎn)率得到4-(3-羥甲基苯基)苯氧基乙酸乙酯。
步驟C按照實(shí)施例21步驟C操作，但使用4-(3-羥甲基苯基)苯氧基乙酸乙酯，以33％產(chǎn)率得到4-(3-(2，3，4，6-四-O-乙?；?-α-D-吡喃甘露糖基氧基芐基)苯氧基乙酸。
步驟D按照實(shí)施例21步驟D操作，但使用4-(3-(2，3，4，6-四-O-乙?；?-α-D-吡喃甘露糖基氧基芐基)苯氧基乙酸，以57％產(chǎn)率得到4-(3-α-D-吡喃甘露糖基氧基芐基)苯氧基乙酸。
m.p.83-85℃。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)6.98-7.60(comp，8H)，4.46-4.77(comp，8H)，3.37-4.2(comp， 7H).IR(KBr)3424，2931，1738，1608，1512，1436，1224，1073cm-1.
元素分析C21H24O9·0.2TFA計(jì)算值C，57.99％；H，5.50％；實(shí)測值C，57.98％；H，5.72％。
實(shí)施例283-(3-α-D-吡喃甘露糖基氧基芐基)苯甲酸步驟A氮?dú)庀聦?-羥甲基苯硼酸(2.0g，13.2mmol)、3-溴苯甲酸(2.1g，10.5mmol)、磷酸三鉀(8.3g，39.5mmol)、DMF(26ml)和水(20ml)在裝有回流冷凝器的100ml燒瓶中脫氣。加入氯化雙(三苯膦)鈀(II)(0.18g，0.26mmol)，混合物在氮?dú)庀旅摎?，然后?0℃加熱過夜。用2N HCl酸化，然后與鹽水(15ml)混合，用二氯甲烷(3×15ml)萃取。合并有機(jī)物，干燥(MgSO4)后減壓濃縮，得到1.57g(52％)3-(3-羥甲基苯基)苯甲酸。
步驟B按照實(shí)施例21步驟C操作，但使用3-(3-羥甲基苯基)苯甲酸，以53％產(chǎn)率得到3-(3-(2，3，4，6-四-O-乙酰基)-α-D-吡喃甘露糖基氧基芐基)苯甲酸。
步驟C按照實(shí)施例21步驟D操作，但使用3-(3-(2，3，4，6-四-O-乙酰基)-α-D-吡喃甘露糖基氧基芐基)苯甲酸，以29％產(chǎn)率得到3-(3-α-D-吡喃甘露糖基氧基芐基)苯甲酸。
m.p.90-91℃。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)7.38-8.18(comp，8H)，4.72-4.77(comp，2H)，4.51-4.55(d，1H)，3.40-3.71(comp，10H＋水)ppm.
IR(KBr)3424，2931，1704，1409，1244，1128，1059cm-1.
元素分析C20H22O8·0.24TFA計(jì)算值C，58.88％；H，5.37％；實(shí)測值C，58.85％；H，5.66％。
實(shí)施例293-(2-α-D-吡喃甘露糖基氧基-5-甲基苯基)芐氧基乙酸步驟A將2-溴-4-甲基苯酚(2.60ml，21.51mmol)溶解于無水乙醚(20ml)，然后將溶液冷卻至-78℃。緩慢加入正丁基鋰的己烷(19.0ml，47.5mmol)溶液，并將反應(yīng)在-78℃攪拌10分鐘，然后在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將燒瓶冷卻至0℃，加入硼酸三甲酯(2.44ml，10.73mmol)及無水THF(10ml)。將反應(yīng)物在室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后用水小心淬滅。酸化水相，并繼續(xù)攪拌30分鐘。用乙醚萃取混合物，有機(jī)相用飽和氯化鈉溶液洗滌，硫酸鎂干燥后減壓濃縮。所得棕色剩余物用己烷研制，過濾，得到2-羥基-5-甲基苯硼酸(1.35g，8.9mmol，41％)為白色固體。
步驟B將2-羥基-5-甲基苯硼酸(1.17g，7.70mmol)和3-溴苯氧基乙酸乙酯(1.99g，7.68mmol)溶解于二甲氧基乙烷(30ml)。該溶液被徹底脫氣，然后加入催化量的氯化雙(三苯膦)鈀(II)。將反應(yīng)混合物再次脫氣，然后在氮?dú)庀禄亓鬟^夜。加入乙酸乙酯和稀HCl，有機(jī)相依次用水和飽和氯化鈉溶液洗滌，硫酸鎂干燥后真空濃縮。所得剩余物在硅膠上進(jìn)行色譜分離(3∶1己烷∶乙酸乙酯)，得到3-(2-羥基-5-甲基苯基)苯氧基乙酸乙酯(1.25g，4.37mmol，57％)為黃色油狀物。
步驟C將3-(2-羥基-5-甲基苯基)苯氧基乙酸乙酯(0.30g，1.05mmol)和α-D-甘露糖五乙酸酯(0.45g，1.15mmol)溶解于無水1，2-二氯乙烷(4ml)。加入三氟化硼乙醚合物(0.52ml，4.21mmol)，并將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。用水小心淬滅反應(yīng)，用二氯甲烷萃取，有機(jī)相用硫酸鎂干燥后真空濃縮。剩余物通過硅膠色譜(2∶1己烷∶乙酸乙酯)純化，得到3-(2-(2，3，4，6-四乙?；?α-D-吡喃甘露糖基氧基)-4-甲基苯基)苯氧基乙酸乙酯(0.40g，0.65mmol，62％)為無色玻璃狀物。
步驟D將3-(2-(2，3，4，6-四乙?；?α-D-吡喃甘露糖基氧基)-4-甲基苯基)苯氧基乙酸乙酯(0.39g，0.63mmol)溶解于甲醇(3ml)，并加入2N氫氧化鈉溶液(1.70ml)。將反應(yīng)攪拌30分鐘，然后用1N鹽酸酸化。真空濃縮，微量過濾。產(chǎn)物在Dynamax 3005微米C18柱(21×250mm)上用制備性反相HPLC分離，用溶劑B以10-70％梯度，以10ml/min流速洗脫20分鐘，其中溶劑B含有95％乙腈/0.1％TFA，溶劑A含有5％乙腈/0.1％TFA。在254nm處監(jiān)測流出物，合并純流份并凍干，得到173.3mg(60％)3-(2-α-D-吡喃甘露糖基氧基-4-甲基苯基)苯氧基乙酸為白色固體。
m.p.83-84℃。
NMR(d6-DMSO)d7.31(t，1H，J＝8.0)，7.21(d，1H，J＝8.1)，7.10(m，3H)，6.95(s，1H)，6.87(d，2H，J＝8.1)，5.22(s，1H)，4.70(s，2H)，3.66(s，1H)，3.57(d，1H，J＝11.4)，3.44(m，3H)，3.33(m，1H)，2.29(s，3H).IR(KBr)3417，2931，1731，1215，1177，1066，1011cm-1.MS(CI)m/z＝259.
元素分析C21H24O9·1/4[CF3CO2H]計(jì)算值C，57.5％；H，5.4％；實(shí)測值C，57.7％；H，5.5％。
權(quán)利要求
1.具有下式的化合物及其藥物上可接受的鹽，酯，酰胺和藥物前體 其中X選自-CN，-(CH2)nCO2H，-O(CH2)mCO2H，-(CH2)nCOZ，-(CH2)nZ，-CHCO2H(CH2)mCO2H，-(CH2)nO(CH2)mCO2H，-CONH(CH2)mCO2H，-CH(OZ)(CO2H)，-CH(Z)(CO2H)，-(CH2)nSO3H，-(CH2)nPO3D1D2，-NH(CH2)mCO2H，-CONH(CHR6)CO2H，(1-H-四唑基-5-烷基-)，和-OH；R1和R2獨(dú)立選自氫，烷基，鹵素，-OZ，-NO2，-(CH2)nCO2H，-NH2和-NHZ；R3選自氫，鹵素，烷基，-OZ和-NHZ；R4選自氫，鹵素，烷基，羥基，羥基-O-硫酸酯和-OZ；R5選自羥基，-CN，-N3，-NH2，-NHNH2，-NE1E2，-NHE1，-NHCO(CH2)nCO2H，-S(CH2)mCO2H和-NHCHNHNH2；及R6選自氫，烷基，芳烷基，羥基烷基，氨基烷基，烷基羧酸和烷基羧酰胺；其中，n是0-6，m是1-6，p是0-6，b是0-2，Z是烷基，芳基或芳烷基，D1和D2獨(dú)立地為氫或烷基，E1是烷基或-(CH2)aCO2H，其中a是1-18，和E2是烷基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中X是-CH2CO2H；R1，R2和R3是氫；R4是-OH；R5是-SCH2CO2H；n和p是1；b是0；和吡喃甘露糖苷部分連到有R3的苯環(huán)的鄰位上。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中X是-CH2CO2H；R1，R2和R3是氫；R4是-OH；R5是-N3；n和p是1；b是0；和吡喃甘露糖苷部分連到有R3的苯環(huán)的鄰位上。
4.權(quán)利要求1的化合物，其中X是-CH2CO2H；R1，R2和R3是氫；R4和R5是-OH；n，p和b是1；和吡喃甘露糖苷部分連到有R3的苯環(huán)的間位上。
5.權(quán)利要求1的化合物，其中每個(gè)烷基取代基是低級(jí)烷基。
6.權(quán)利要求1的化合物，其中X是-CHCO2HCH2CO2H；R1，R2和R3是氫；R4是-OH和R5是-OH。
7.具有下式的化合物及其藥物上可接受的鹽，酯和酰胺 其中X是-Q，-(CH2)nQ，-O(CH2)nQ，-(CH2)nO(CH2)mQ，-CONH(CH2)nQ，-NH(CH2)mQ，-(CH2)nO(CH2)mQ，-CONH(CHR6)Q；R1和R2獨(dú)立選自氫和-(CH2)nQ；R4是羥基或氫；R6選自氫，烷基，芳烷基，羥基烷基，氨基烷基，烷基羧化物和烷基羧酰胺；Q是-CO2H，n是0-6，和m是1-6。
8.權(quán)利要求7的化合物，其中X是-CH2CO2H和R4是-OH。
9.權(quán)利要求7的化合物，其中X是-CO2H和R4是-OH。
10.權(quán)利要求7的化合物，其中X是-CH2OCH2CO2H和R4是-OH。
11.權(quán)利要求7的化合物，其中X是-CONHCH2CO2H和R4是-OH。
12.權(quán)利要求7的化合物，其中X是-OCH2CO2H和R4是-OH。
13.權(quán)利要求7的化合物，其中X是-CONHCH(CO2H)(CH2C6H5)和R4是-OH。
14.權(quán)利要求7的化合物，其中X是-CONHCH(CO2H)(CH2CH2CO2H)和R4是-OH。
15.權(quán)利要求7的化合物，其中X是-CO2Li和R4是-OH。
16.權(quán)利要求7的化合物，其中X是-(CH2)2SO3H和R4是-OH。
17.權(quán)利要求7的化合物，其中X是-CONHCH2CH2CO2H和R4是-OH。
18.式IV化合物及其藥物上可接受的鹽，酯，酰胺和藥物前體 其中X選自-CN，-(CH2)nCO2H，-O(CH2)mCO2H，-(CH2)nCOZ，-(CH2)nZ，-CHCO2H(CH2)mCO2H，-(CH2)nO(CH2)mCO2H，-CONH(CH2)mCO2H，-CH(OZ)(CO2H)，-CH(Z)(CO2H)，-(CH2)nSO3H，-(CH2)nPO3D1D2，-NH(CH2)mCO2H，-CONH(CHR6)CO2H，(1-H-四唑基-5-烷基-)，和-OH；W是氫，烷基或α-D-甘露糖基，Y選自H/H，氧，H/羥基，H/NH2，H/NHE1，H/NE1E2，NH，NE1，肟和O-烷基肟；n是0-6，m是1-6，p是0-6，b是0-2，Z是烷基，芳基或芳烷基，D1和D2獨(dú)立地為氫或烷基，E1是烷基或-(CH2)aCO2H，其中a是1-18，E2是烷基；R1和R2獨(dú)立選自氫，烷基，鹵素，-OZ，-NO2，-(CH2)nCO2H，-NH2和-NHZ；R3選自氫，鹵素，烷基，-OZ和-NHZ；R4選自氫，鹵素，烷基，羥基，羥基-O-硫酸酯和-OZ；R5選自羥基，-CN，-N3，-NH2，-NHNH2，-NE1E2，-NHE1，-NHCO(CH2)nCO2H，-S(CH2)mCO2H和-NHCHNHNH2；及R6選自氫，烷基，芳烷基，羥基烷基，氨基烷基，烷基羧酸和烷基羧酰胺。
19.權(quán)利要求18的化合物，其中X是-CH2CO2H；各b均是0；R1，R2和R3均是H；R4和R5是-OH；及p是1。
20.權(quán)利要求19的化合物，其中W是α-D-甘露糖基及Y是H/H。
21.權(quán)利要求19的化合物，其中W是甲基及Y是氧。
22.一種抑制E-，P-和/或L-選擇蛋白與存在于細(xì)胞表面的Sialyl-Lewisx或Sialyl-Lewisa結(jié)合的方法，包括給需要這種治療的動(dòng)物施用有抑制效果量的至少一種具有下面結(jié)構(gòu)式的化合物及其藥物上可接受的鹽，酯和酰胺 其中X選自-CN，-(CH2)nCO2H，-O(CH2)mCO2H，-(CH2)nCOZ，-(CH2)nZ，-CHCO2H(CH2)mCO2H，-(CH2)nO(CH2)mCO2H，-CONH(CH2)mCO2H，-CH(OZ)(CO2H)，-CH(Z)(CO2H)，-(CH2)nSO3H，-(CH2)nPO3D1D2，-NH(CH2)mCO2H，-CONH(CHR6)CO2H，(1-H-四唑基-5-烷基-)，和-OH；R1和R2獨(dú)立選自氫，烷基，鹵素，-OZ，-NO2，-(CH2)nCO2H，-NH2和-NHZ；R3選自氫，鹵素，烷基，-OZ和-NHZ；R4選自氫，鹵素，烷基，羥基，羥基-O-硫酸酯和-OZ；R5選自氫，羥基，-CN，-N3，-NH2，-NHNH2，-NE1E2，-NHE1，-NHCO(CH2)nCO2H，-S(CH2)mCO2H和-NHCHNHNH2；及R6選自氫，烷基，芳烷基，羥基烷基，氨基烷基，烷基羧酸和烷基羧酰胺；其中，n是0-6，m是1-6，p是0-6，b是0-2，Z是烷基，芳基或芳烷基，D1和D2獨(dú)立地為氫或烷基，E1是烷基或-(CH2)8CO2H和E2是烷基。
23.一種藥物活性組合物，含有權(quán)利要求1的化合物和藥物上可接受的載體。
24.一種治療下列任何一種疾病的方法敗血性休克，慢性炎癥，牛皮癬，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，心臟病發(fā)作、中風(fēng)及器官移植之后出現(xiàn)的再灌注損傷，創(chuàng)傷性休克，多器官衰竭，自身免疫疾病，哮喘，腸炎，節(jié)段性回腸炎，ARDS和癌癥，該方法包括給患有上述任何一種疾病的患者施用有療效量的權(quán)利要求1化合物以減輕癥狀。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有通式(Ⅱ)的化合物，該化合物能夠抑制E-選擇蛋白和/或P-選擇蛋白與存在于細(xì)胞表面的Sialyl-Lewis
文檔編號(hào)A61K31/7034GK1151117SQ95193539
公開日1997年6月4日 申請(qǐng)日期1995年4月28日 優(yōu)先權(quán)日1994年4月29日
發(fā)明者T·P·科根, B·杜普里, I·L·施科特, K·凱勒, H·道, P·J·貝克 申請(qǐng)人:得克薩斯生物技術(shù)公司