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用于改善飼料效率的腸促胰酶肽抗體的制作方法

文檔序號(hào):836813閱讀:479來(lái)源:國(guó)知局
專利名稱:用于改善飼料效率的腸促胰酶肽抗體的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及通過(guò)被動(dòng)傳遞抗體或用含抗體物質(zhì)飼養(yǎng)動(dòng)物而激發(fā)哺乳動(dòng)物或家禽的生物學(xué)應(yīng)答,具體地,本發(fā)明涉及通過(guò)使用(CKK)抗體在動(dòng)物和人類中增加食物效率、降低胃腸蠕動(dòng)以及降低厭食性。
背景技術(shù)
基于幾種特殊的血液白細(xì)胞的免疫系統(tǒng)是高度特異的防御系統(tǒng),其識(shí)別、消除并記憶外來(lái)大分子和細(xì)胞。當(dāng)其功能正常時(shí),其可區(qū)分“自身”和“非自身”(外來(lái))物質(zhì)。例如,其將腫瘤細(xì)胞視為非自身細(xì)胞并因此攻擊它們,保護(hù)動(dòng)物抵抗引起癌癥的腫瘤細(xì)胞,正如其抵抗其它入侵大分子一樣。
抗原是一種外源物質(zhì),當(dāng)其被導(dǎo)入具有正常功能的免疫系統(tǒng)的動(dòng)物中時(shí),可以激發(fā)如上所述的特異的免疫應(yīng)答。當(dāng)免疫應(yīng)答被激發(fā)后,其涉及在循環(huán)系統(tǒng)中產(chǎn)生特異于該抗原的抗體。有五類不同的抗體,也稱為免疫球蛋白,最豐富的是IgG,其余四種是IgM、IgA、IgD和IgE。這些抗體與抗原結(jié)合,中和或抵消導(dǎo)入動(dòng)物的抗原引起的效應(yīng)。它們是通過(guò)結(jié)合抗原由此中和抗原并防止抗原與其它特異細(xì)胞受體結(jié)合而完成這一功能。
免疫系統(tǒng)不僅可用于抵抗病理性抗原或有害的外來(lái)分子,也可以用來(lái)激發(fā)非天然發(fā)生的有益的應(yīng)答。例如,可以通過(guò)導(dǎo)入特異于動(dòng)物中某些天然存在的蛋白質(zhì)的抗體而中和這些天然存在的蛋白質(zhì),由此中和該蛋白質(zhì)對(duì)動(dòng)物系統(tǒng)的正常生理影響。
可以有幾種方式使動(dòng)物變成免疫應(yīng)答性的,例如,某些抗體可以從母親的循環(huán)系統(tǒng)穿過(guò)胎盤而進(jìn)入胎兒的循環(huán)系統(tǒng),其結(jié)果是在出生前通過(guò)“遺傳”母親的抗體而使胎兒受到天然的免疫保護(hù)。
激發(fā)免疫應(yīng)答的第二種方式是將抗原導(dǎo)入一種動(dòng)物,使該動(dòng)物產(chǎn)生特異于該抗原的抗體,這些抗體隨后可從該動(dòng)物中分離并導(dǎo)入第二種動(dòng)物,從而使第二種動(dòng)物具有可以結(jié)合該特定抗原的抗體。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及在動(dòng)物和人類中激發(fā)免疫應(yīng)答以增加食物效率。用于本發(fā)明的抗體是特異于腸促胰酶肽(CKK)的抗體,腸促胰酶肽抗體(CCK抗體)在導(dǎo)入動(dòng)物后,可以增加食物轉(zhuǎn)化為體重增重的效率,并通過(guò)一明顯降低的胃腸蠕動(dòng)而增加食物效率。
CKK肽如下所示Asp-Tyr-Met-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2|SO3HCCK肽也可以是非酰胺形式Asp-Tyr-Met-Gly-TrP-Met-Asp-Phe|SO3HCCK是一種八肽,已證明其對(duì)食物攝取有負(fù)影響并因此在哺乳動(dòng)物中(Gibbs et al.1973)和鳥中(Savory and Hodgkiss,1984)均可抑制生長(zhǎng)。在豬(Pekas and Trout,1990;Pekas 1991)和大鼠(MacLaughlin et al.1985)中均已成功地內(nèi)源產(chǎn)生了CCK抗體。在兩種物種中,通過(guò)CCK抗體的內(nèi)源循環(huán)可防止CCK對(duì)食物攝取和增重的副作用。
CCK對(duì)于家禽的影響是公知的(Savory et al,1981),CCK代表一種當(dāng)食物進(jìn)入小腸時(shí)釋放的多肽激素。在腸粘膜中存在的CCK改變了胃腸(GI)的蠕動(dòng),沙囊控制食物在腸道穿行的速率,而進(jìn)食后正常釋放的CCK導(dǎo)致沙囊收縮的降低而增加腸道的收縮,由此導(dǎo)致在腸道中食物和營(yíng)養(yǎng)素的吸收時(shí)間短。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)傳遞CCK抗體給家禽可增加飼料效率,也即每磅食物雞增重增加。
CCK的存在還會(huì)改變進(jìn)食欲望,CCK可導(dǎo)致所謂的厭食性,厭食性是一種大大降低禽類食欲的生理反應(yīng)。如果一種抗體可結(jié)合CCK,CCK被中和,則可抑制厭食性,并且內(nèi)源CCK對(duì)于胃腸蠕動(dòng)的副作用可以避免,因此,每單位攝食的雞增重會(huì)更大。以前并未發(fā)現(xiàn)CCK抗體能在禽類中起作用或口服可起作用并且能中和CCK的負(fù)面影響。
神經(jīng)肽Y和韓蛙皮素對(duì)于哺乳動(dòng)物系統(tǒng)和禽類系統(tǒng)具有與CCK相似的生理作用,這些神經(jīng)肽也在腸中發(fā)現(xiàn)并可改變進(jìn)食行為。
CCK抗體對(duì)食物效率和增重的作用可通過(guò)如下途徑達(dá)到(1)CCK抗體從母親到后代的被動(dòng)傳遞(例如,給孵卵母雞注射CCK抗體,由此幼雞可具有增加的CCK抗體水平),(2)將高CCK抗體含量的蛋黃制品直接喂養(yǎng)動(dòng)物,或者(3)直接給動(dòng)物注射高CCK抗體含量的物質(zhì)。
產(chǎn)生被動(dòng)免疫應(yīng)答的方法涉及用特異抗原接種雌性禽類,由此將抗體被動(dòng)傳遞給該雌性的幼鳥。現(xiàn)有技術(shù)中未見報(bào)道將CCK抗體從母親被動(dòng)傳遞給后代能增強(qiáng)食物轉(zhuǎn)化為體重增重。
本發(fā)明還涉及從用所選抗原免疫的母雞的卵中生產(chǎn)的含特異抗體的物質(zhì),其中該物質(zhì)與飼料混合并隨后喂養(yǎng)家禽,從而激發(fā)改變的但改善的生理應(yīng)答。CCK抗體可以在下蛋的母雞中產(chǎn)生,傳遞給蛋黃,從蛋黃中收獲抗體,或者以干蛋黃喂養(yǎng),以及用作家禽飼料添加劑以改善飼料效應(yīng),這一點(diǎn)在現(xiàn)有技術(shù)中也未有報(bào)道。
本發(fā)明具有許多優(yōu)點(diǎn),一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是在商業(yè)肉類工業(yè)中的人員使用較少的時(shí)間和飼料即可達(dá)到家畜或家禽的市場(chǎng)體重,從而大大降低成本。
本發(fā)明的第二個(gè)優(yōu)點(diǎn)是,CCK抗體轉(zhuǎn)化CCK但沒有有害的副作用并且看起來(lái)不影響肉質(zhì)。另外,即使大規(guī)模使用本發(fā)明的費(fèi)用也是相對(duì)較低的,因?yàn)槊?磅飼料僅需要0.1-1個(gè)含CCK抗體的蛋。
另外,使用給家養(yǎng)動(dòng)物喂抗體的方法在勞動(dòng)力成本上相對(duì)較低,因?yàn)榭贵w可與飼料簡(jiǎn)單混合,因此,不是每個(gè)動(dòng)物都必需注射抗體。另外,也不需要將抗體從蛋中分離,因?yàn)檎盎虻包S可簡(jiǎn)單地噴霧干燥,然后直接喂養(yǎng)。
本發(fā)明的另一優(yōu)點(diǎn)是其可抵消給家禽或家畜喂生大豆導(dǎo)致的副作用。例如,一份典型的雞食含40%大豆飼料,然而生大豆飼料不能喂給家禽,因?yàn)槠浜幸鹊鞍酌敢种苿?,其可抑制胰蛋白酶消化蛋白質(zhì)的能力,因此,生大豆飼料導(dǎo)致CCK水平增加,同時(shí)降低飼料效率。為消除這一作用,大豆必需加熱處理以便喂給家禽。制備大豆飼料的典型方法涉及加熱大豆,榨油,使用剩余物作雞飼料。具體地,大豆必需加熱到至少121℃,持續(xù)約20-40分鐘。用大豆制備家禽飼料伴有一些問題,第一是加熱過(guò)程必需在極高溫度下進(jìn)行以保證破壞胰蛋白酶抑制因子,第二,加熱對(duì)大豆飼料中的蛋白質(zhì)質(zhì)量有負(fù)面影響,使得變性蛋白難于消化。然而,本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)CCK抗體可對(duì)抗給家禽喂生大豆的負(fù)面影響。
除了大豆,還有其它一些植物含有胰蛋白酶抑制劑,包括小麥、大麥、lima豆和各種豆科植物。預(yù)計(jì)CCK抗體可對(duì)抗給家禽或家畜喂由小麥、大麥、lima豆或豆科植物制成的飼料的負(fù)面影響。
本發(fā)明與目前用于家禽和家畜工業(yè)中的物質(zhì)相比還有許多優(yōu)點(diǎn)。目前商用動(dòng)物工業(yè)中使用抗生素以增加食物效率和增重,但是抗生素在動(dòng)物組織中殘留藥物殘余物,因此,動(dòng)物必需經(jīng)過(guò)“停止服藥期間”(withdrawal time)。停止服藥期間是抗生素從動(dòng)物組織中清除所需的時(shí)間,在停止服藥期間,不能屠宰動(dòng)物用于人類消費(fèi)。另外,此時(shí)所生的蛋和所產(chǎn)的奶也不能用作人用。應(yīng)用這種預(yù)防措施是因?yàn)榭紤]到帶有痕量青霉素的人用奶例如會(huì)導(dǎo)致增加人對(duì)抗生素的抗性,最終會(huì)導(dǎo)致應(yīng)用對(duì)抗細(xì)菌性疾病的抗生素變得無(wú)用。
第二,長(zhǎng)時(shí)間使用抗生素可能會(huì)導(dǎo)致能感染動(dòng)物的微生物種類的增加,因?yàn)檫@些微生物經(jīng)常與抗生素接觸會(huì)慢慢獲得抗性,這樣,未來(lái)的細(xì)菌性疾病即使能治療,治療也會(huì)變得很困難。
在哺乳動(dòng)物中CCK也具有相同的增加GI蠕動(dòng)和抑制厭食癥的效果(Pekas and Trout,1990)。哺乳動(dòng)物種類與禽類一樣可以被動(dòng)傳遞抗體至子代以及哺乳動(dòng)物與禽類一樣對(duì)CCK自發(fā)免疫有應(yīng)答這一事實(shí)已是公認(rèn)的。母獸的抗體也與那些被動(dòng)傳遞到禽類和哺乳動(dòng)物的子代中的抗體相同。類似地,給哺乳動(dòng)物喂生大豆也會(huì)引起與禽類類似的CCK產(chǎn)量的增加(Weller et al,1990;Chohen et al,1993;Can J An Sci 73;401)。因此,基于上述事實(shí),在禽類觀察到的主動(dòng)喂予和被動(dòng)傳遞CCK抗體以抗厭食和由CCK導(dǎo)致的不良食物轉(zhuǎn)化率的效果同樣在哺乳動(dòng)物中也可看到。使用相同量的動(dòng)物飼料,對(duì)家畜如牛和豬應(yīng)用CCK將顯著增加它們的最終體重,因此,生產(chǎn)市場(chǎng)所需大小的動(dòng)物的成本得以降低,這將對(duì)家畜工業(yè)產(chǎn)生巨大的效益。
本發(fā)明對(duì)于體重過(guò)輕或難于保持體重的人們也是很有益的。另外,患有進(jìn)食紊亂的個(gè)體也將從本發(fā)明得到好處,因?yàn)樗麄兊臄z食能得以控制。
如前所述,還有其它的胃腸道肽或激素對(duì)動(dòng)物的進(jìn)食行為和消化具有效果。CCK和使用抗該肽的CCK抗體以防止CCK的負(fù)面作用的例子提示使用特異于胃腸道肽或激素的其它抗體可以達(dá)到類似的反應(yīng)。例如,胃泌素涉及刺激酸分泌,并對(duì)胃粘膜有營(yíng)養(yǎng)作用導(dǎo)致增生??刮该谒氐目贵w可用于在患有胃潰瘍的動(dòng)物中降低酸分泌或用于在由于長(zhǎng)期胃泌素過(guò)高癥(hypergastrinem ia)導(dǎo)致的胃ELC細(xì)胞類癌腫瘤的動(dòng)物中降低酸分泌。腸道生長(zhǎng)激素抑制素在飼養(yǎng)動(dòng)物中抑制食物攝取以及其它許多腸道活性。抗生長(zhǎng)激素抑制素的抗體可以防止其抑制活性。韓蛙皮素刺激CCK的釋放,可以設(shè)想用特異于韓蛙皮素的抗體抑制韓蛙皮素可以產(chǎn)生類似于特異于CCK的抗體的反應(yīng)。據(jù)報(bào)道神經(jīng)肽Y是飼養(yǎng)中的刺激劑,也可以抑制其活性并調(diào)節(jié)動(dòng)物的體重以避免體重產(chǎn)生的問題。調(diào)節(jié)腸道蠕動(dòng)和腸道其它功能特性的其它肽的生物學(xué)活性也可使用上述技術(shù)加以調(diào)節(jié)。
總之,通過(guò)產(chǎn)生抗調(diào)節(jié)生化、代謝、生理和/或行為過(guò)程的肽、激素、細(xì)胞因子等的抗體,可以調(diào)節(jié)或改變動(dòng)物系統(tǒng)以彌補(bǔ)物理異?;驈?qiáng)調(diào)正常功能。優(yōu)選實(shí)施方案的詳細(xì)描述如前所述,在哺乳動(dòng)物或家禽中有三種模式激發(fā)對(duì)CCK的免疫應(yīng)答被動(dòng)傳遞、主動(dòng)喂養(yǎng)和主動(dòng)接種。
本發(fā)明的涉及被動(dòng)傳遞抗體的模式是給下蛋母雞注射CCK使母雞產(chǎn)生特異于CCK的抗體,結(jié)果是隨后這些抗體被動(dòng)傳遞到母雞下的蛋的蛋黃中。雞胚在胚胎發(fā)育過(guò)程中吸收CCK抗體,隨后CCK抗體在孵化小雞的血中循環(huán)并傳遞到胃腸道。
可以使用提純的CCK或合成的CCK肽。可以使用本領(lǐng)域熟知的手段提純CCK肽,例如分級(jí)分離、層析、沉淀或抽提。然而,CCK應(yīng)與載體或外源蛋白偶聯(lián)以用作抗原,CCK本身的分子量小于1500道爾頓,為激發(fā)免疫應(yīng)答,至少需要分子量為10000道爾頓,所以,CCK肽應(yīng)與分子量約為8000道爾頓或更大的載體蛋白偶聯(lián)以便使偶聯(lián)物能激發(fā)免疫應(yīng)答。載體包括多種常規(guī)已知的物質(zhì),但通常采用牛γ球蛋白或匙孔血藍(lán)蛋白。
與其載體蛋白偶聯(lián)的CCK肽與一種通用佐劑一起注射到靶動(dòng)物中,例如,CCK-載體偶聯(lián)物可在Freund’s完全佐劑中乳化。如果哺乳動(dòng)物是靶動(dòng)物,則后續(xù)的接種應(yīng)使用不完全佐劑。
本發(fā)明的另一模式涉及口服喂給從CCK免疫接種的母雞的蛋中生產(chǎn)的含CCK抗體物質(zhì),將含CCK抗體的蛋制備并混入動(dòng)物飼料中。吃了含有抗體的飼料的家禽或哺乳動(dòng)物通過(guò)防止特異于CCK的厭食作用而很快顯示出有益的應(yīng)答。
用于口服給予的CCK抗體的生產(chǎn)可通過(guò)公知的在蛋黃中生產(chǎn)抗體的技術(shù)而進(jìn)行,在次方法中,通過(guò)注射與載體蛋白偶聯(lián)的CCK而攻擊母雞,作為對(duì)接觸CCK抗原的應(yīng)答,由這些母雞產(chǎn)的蛋在蛋黃中含有高水平的CCK抗體。然后用自動(dòng)化系統(tǒng)分離蛋黃并將其噴霧干燥成粉末。蛋黃還可以凍干。這一標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)已在現(xiàn)有技術(shù)中有效地用于生產(chǎn)其它用途(例如,診斷、抗病原體等)的各種抗體。
也可以使用完整的蛋,因此不需將蛋黃和蛋清分離。典型地,每8磅飼料使用0.1-1個(gè)含CCK的蛋。
雞是最優(yōu)選的蛋來(lái)源,但是火雞、鵝、鴨等的蛋也可使用。
盡管邏輯上蛋是大量抗體的來(lái)源,但是當(dāng)將雞加工成雞肉時(shí)也可以從全血、血漿或血清中收集抗體。另外,來(lái)自接種的家畜的全血、血漿或血清也可以是抗體的另一種來(lái)源,來(lái)自接種的?;蛏窖虻哪桃彩强贵w的來(lái)源。抗體生產(chǎn)的另一種來(lái)源是使用雜交瘤技術(shù)的細(xì)胞融合,使用重組技術(shù)的遺傳改變的細(xì)胞培養(yǎng)或發(fā)酵。
本發(fā)明的第三種模式是接種。為了激發(fā)所希望的對(duì)厭食的反應(yīng)并改善飼料轉(zhuǎn)化率,可以將CCK抗體直接注射給靶動(dòng)物。
接受CCK抗體的靶動(dòng)物有各種各樣。商用動(dòng)物如家畜、家禽和毛皮動(dòng)物(例如水貂、黑貂等)是理想的候選者。另外,增重困難的人也是本發(fā)明考慮的范圍。被動(dòng)傳遞的CCK抗體對(duì)幼年來(lái)亨雞的作用實(shí)施例1方法使用戊二醛將腸促胰酶肽(CCK-8)(帶有硫酸化酪氨酸的片段26-33酰胺)偶聯(lián)到匙孔血藍(lán)蛋白(KLH)上,并用Freund’s完全佐劑(1∶1)乳化,注射(100μgCCK)到11只單冠白色來(lái)亨蛋雞中。在Freund’s不完全佐劑中的CCK-8偶聯(lián)物的第二次注射是在最初注射后第7天進(jìn)行。還使用了另一組未接受CCK注射的對(duì)照母雞。將母雞(對(duì)照組和CCK注射組)受精(用采自New H am pshire公雞的精子人工受精)。在初次注射后第5個(gè)月收集的受精卵用于測(cè)定由被動(dòng)傳遞的CCK抗體導(dǎo)致的雞的行為。在孵蛋箱中培養(yǎng)由對(duì)照組母雞孵化的15只小雞和由CCK注射的母雞孵化的15只小雞,喂以玉米-大豆粉為基礎(chǔ)的飼料,共培養(yǎng)6周。收集體重增重和飼料消化數(shù)據(jù)。結(jié)果來(lái)自CCK注射的母雞的小雞具有改善的飼料轉(zhuǎn)化率(每磅增重所需飼料減少),優(yōu)于來(lái)自對(duì)照組母雞的小雞14%。另外,在CCK雞中攝食量也增加。結(jié)果如表1所示。
表16周變化 6周 變化 6周變化抗體處理 增重*百分率,%攝食量*百分率,%轉(zhuǎn)化率 百分率,%對(duì)照組297 745 2.51CCK組 352 +18 756 +1 2.15 -14*體重、體重增重和攝食量單位均為克。實(shí)施例2方法在初次接種后約第10個(gè)月收集用CCK免疫的母雞(如實(shí)施例1所示)和對(duì)照母雞所產(chǎn)的蛋。兩籠各13只小雞(代表對(duì)照和CCK免疫的母雞)喂以玉米-大豆粉為基的食物以確定被動(dòng)傳遞的CCK抗體是否如實(shí)施例1所示影響小雞的行為。飼養(yǎng)小雞4周,測(cè)定體重和飼料消耗。結(jié)果與來(lái)自對(duì)照母雞的小雞相比,來(lái)自CCK免疫的母雞的小雞的飼料轉(zhuǎn)化率提高2%,結(jié)果如表2所示。
表24周 變化 4周 變化 4周 變化處理 體重*百分率,%攝食量*百分率,%轉(zhuǎn)化率 百分率,%對(duì)照組158 3832.42CCK組 151-4360-6 2.38 -2*體重、體重增重和攝食量單位均為克。實(shí)施例3方法在初次接種后約第8個(gè)月收集對(duì)照母雞和CCK注射的母雞(如實(shí)施例1所述免疫)的受精卵,用于研究CCK免疫對(duì)子代行為的影響。將兩籠各17只來(lái)自CCK注射母雞的子代小雞和兩籠個(gè)17只來(lái)自對(duì)照母雞的子代小雞喂養(yǎng)4周,測(cè)定體重和飼料消耗。結(jié)果來(lái)自CCK注射的母雞的小雞的飼料轉(zhuǎn)化率比來(lái)自對(duì)照母雞的小雞高5.2%,結(jié)果如表3所示。
表34周變化 4周 變化 4周變化處理 體重*百分率,%攝食量*百分率,%轉(zhuǎn)化率 百分率,%對(duì)照組246 4731.92CCK組2450 447 -5.5 1.82 -5.2*體重、體重增重和攝食量單位均為克。實(shí)施例4方法在此項(xiàng)研究中,兩籠各15只來(lái)自CCK免疫的母雞(如實(shí)施例1所述,并在母雞的初次接種后第7個(gè)月)的小雞和兩籠各12只來(lái)自對(duì)照母雞的小雞用補(bǔ)加5%生大豆的玉米-大豆粉為基的食物喂養(yǎng)3周(生大豆用于刺激CCK的產(chǎn)生)。測(cè)定體重和飼料消化。結(jié)果來(lái)自CCK注射的母雞的小雞的飼料轉(zhuǎn)化率比來(lái)自對(duì)照母雞的小雞高10%,結(jié)果如表4所示。
表43周變化 3周 變化 3周變化處理 體重*百分率,%攝食量*百分率,%轉(zhuǎn)化率 百分率,%對(duì)照組 169 3952.34CCK組161-5338 -14 2.10 -10*體重、體重增重和攝食量單位均為克。被動(dòng)傳遞的CCK抗體對(duì)童子雞行為的效果的實(shí)驗(yàn)實(shí)施例5方法使用實(shí)施例1所述的方法,用與KLH偶聯(lián)的CCK免疫童子雞種禽。由于這些種禽是在地上喂養(yǎng),所以得到自然交配的受精卵。總共10只母雞接受了CCK免疫(如實(shí)施例1用于來(lái)克亨雞所述制備抗原),10只母雞作為對(duì)照。在初次接種后約21-30天,從對(duì)照和CCK免疫的母雞收集受精卵。在孵蛋箱中孵化并飼養(yǎng)7只來(lái)自對(duì)照母雞的童子雞以及7只來(lái)自CCK注射的母雞的童子雞,共進(jìn)行3周。測(cè)定體重和飼料消耗。結(jié)果與來(lái)自對(duì)照母雞的童子雞相比,來(lái)自CCK免疫的母雞的童子雞的飼料轉(zhuǎn)化率改善20%,體重增加8%。結(jié)果如表5所示。
表53周變化3周 變化 3周變化處理 體重*百分率,% 攝食量*百分率,%轉(zhuǎn)化率 百分率,%對(duì)照組 396604 1.53CCK組427+8 526 -131.23 -20*體重、體重增重和攝食量單位均為克。實(shí)施例6方法孵化兩籠各6只來(lái)自實(shí)施例5的初次接種7周后的CCK免疫的童子雞種禽的小雞和兩籠各6只來(lái)自對(duì)照母雞的小雞并用標(biāo)準(zhǔn)的童子雞型飼料喂養(yǎng)至3周齡。測(cè)定體重和飼料消耗。結(jié)果與來(lái)自對(duì)照母雞的小雞相比,來(lái)自CCK免疫的母雞的童子雞體重增加16%,食物轉(zhuǎn)化增加12.5%。結(jié)果見表6。
表63周變化 3周 變化 3周 變化處理體重*百分率,%攝食量*百分率,%轉(zhuǎn)化率 百分率,%對(duì)照組 380 5471.44CCK組 441+16 547 0 1.26 -12.5*體重、體重增重和攝食量單位均為克。用來(lái)自對(duì)照和CCK免疫的母雞的蛋黃喂養(yǎng)實(shí)施例7方法如實(shí)施例1所述制備對(duì)照或CCK免疫的母雞。在初次接種后至少21天收集來(lái)自對(duì)照和CCK免疫的母雞的蛋。從蛋中收集蛋黃(棄掉蛋清),將對(duì)照或抗CCK的蛋黃分開儲(chǔ)存、冷凍,然后凍干。然后磨碎對(duì)照和CCK抗體干蛋黃并以飼料的0.5、1.0或5%的量(重量/重量)加到標(biāo)準(zhǔn)的玉米-大豆為基的飼料中,進(jìn)行3次對(duì)照處理和3次抗CCK處理。每次飼料處理均喂予兩籠各9只來(lái)克亨小雞,共喂養(yǎng)4周。測(cè)定體重增重、飼料消耗以及飼料轉(zhuǎn)化率。結(jié)果隨著抗CCK蛋黃含量的增加,相對(duì)于喂給對(duì)照蛋黃,體重增重增加。在每種抗CCK蛋黃喂養(yǎng)的水平,相對(duì)于喂給對(duì)照蛋黃,飼料轉(zhuǎn)化率均改善。結(jié)果如表7所示。
表7---0-4周齡----處理喂給量,%攝食量*飼料轉(zhuǎn)化率對(duì)照蛋黃0.5 692 2.88CCK蛋黃 0.5 680 2.50對(duì)照蛋黃1.0 656 2.39CCK蛋黃 1.0 649 2.29對(duì)照蛋黃5 712 2.55CCK蛋黃 5 772 2.49*體重、體重增重和攝食量單位均為克。被動(dòng)傳遞CCK抗體對(duì)防止由于喂給生大豆對(duì)飼料轉(zhuǎn)化的負(fù)影響的作用實(shí)施例8方法如實(shí)施例1所述制備免疫的母雞(來(lái)克亨雞)。將母雞人工受精,收集受精卵并孵化。孵化小雞(單冠白來(lái)克亨×New Hampshire),將兩籠12只小雞進(jìn)行4次處理。處理包括2種來(lái)源的小雞(來(lái)自對(duì)照或CCK免疫的母雞的子代),按階乘排列進(jìn)行2次飲食處理(食物中加入5或10%生大豆)。用此飼料喂養(yǎng)小雞4周,測(cè)定體重和飼料消耗。結(jié)果對(duì)于其各自的對(duì)照食物相比,來(lái)自CCK免疫的母雞的小雞具有改善的飼料轉(zhuǎn)化率(11%-19%)。隨著生大豆的含量在食物中增加,飼料轉(zhuǎn)化率變差(在對(duì)照子代中下降12%,但在來(lái)自CCK注射的母雞的子代中僅下降6%),結(jié)果如表8所示。
表8生大豆含量 被動(dòng)CCK 4周變化百分率 4周變化百分率%抗體體重% 轉(zhuǎn)化率 %5 - 2022.635 + 205+1.52.34 -1110- 1922.9410+ 197+2.62.48 -19*體重、體重增重和攝食量單位均為克。
權(quán)利要求
1.一種傳遞腸促胰酶肽(CCK)抗體給動(dòng)物以便增加食物效率并降低腸道蠕動(dòng)的方法將含有CCK抗體的物質(zhì)給予所述動(dòng)物,其中所述物質(zhì)來(lái)自生產(chǎn)者動(dòng)物,其中所述的生產(chǎn)者動(dòng)物用腸促胰酶肽免疫。
2.權(quán)利要求1的方法,其中所述的給予通過(guò)接種進(jìn)行。
3.權(quán)利要求1的方法,其中所述的給予通過(guò)喂養(yǎng)進(jìn)行。
4.權(quán)利要求1的方法,其中所述的動(dòng)物為禽類。
5.權(quán)利要求4的方法,其中所述的禽類為家禽類。
6.權(quán)利要求1的方法,其中所述的動(dòng)物為哺乳動(dòng)物。
7.權(quán)利要求1的方法,其中所述的生產(chǎn)者動(dòng)物選自豬、牛、綿羊或山羊。
8.權(quán)利要求1的方法,其中所述的物質(zhì)來(lái)自所述生產(chǎn)者動(dòng)物的副產(chǎn)品。
9.權(quán)利要求8的方法,其中所述的副產(chǎn)品選自全血、血清、血漿或乳。
10.權(quán)利要求1的方法,其中所述的生產(chǎn)者動(dòng)物是雌性禽類。
11.權(quán)利要求10的方法,其中所述的雌性禽類為家禽類。
12.權(quán)利要求10的方法,其中所述的物質(zhì)來(lái)自全蛋。
13.權(quán)利要求10的方法,其中所述的物質(zhì)來(lái)自蛋黃。
14.權(quán)利要求1的方法,其中所述的CCK是提純的CCK肽。
15.權(quán)利要求1的方法,其中所述的CCK是合成的CCK肽。
16.權(quán)利要求1的方法,其中所述的CCK是硫酸化的。
17.權(quán)利要求1的方法,其中所述的CCK是非硫酸化的。
18.權(quán)利要求1的方法,其中所述的CCK是一種酰胺。
19.權(quán)利要求1的方法,其中所述的CCK與一種載體蛋白偶聯(lián)。
20.權(quán)利要求19的方法,其中所述的載體蛋白是匙孔血藍(lán)蛋白。
21.權(quán)利要求19的方法,其中所述的載體蛋白是牛γ球蛋白。
22.權(quán)利要求19的方法,其中所述的與所述的載體蛋白偶聯(lián)的CCK的分子量至少為8000道爾頓。
23.權(quán)利要求6的方法,其中所述的家禽類是雞。
24.權(quán)利要求7的方法,其中所述的哺乳動(dòng)物是嚙齒類。
25.權(quán)利要求7的方法,其中所述的哺乳動(dòng)物是人類。
26.權(quán)利要求7的方法,其中所述的哺乳動(dòng)物是家養(yǎng)哺乳動(dòng)物。
27.權(quán)利要求7的方法,其中所述的家養(yǎng)哺乳動(dòng)物選自豬、牛、綿羊或山羊。
28.一種在動(dòng)物中傳遞腸促胰酶肽(CCK)抗體以便增加食物效率并降低腸道蠕動(dòng)的方法用CCK免疫動(dòng)物以使所述的動(dòng)物產(chǎn)生抗CCK的抗體并將所述抗體被動(dòng)傳遞給所述動(dòng)物的子代,從而所述的子代顯示出增加食物效率和降低腸道蠕動(dòng)的免疫應(yīng)答。
29.權(quán)利要求28的方法,其中所述的動(dòng)物是禽類。
30.權(quán)利要求28的方法,其中所述的動(dòng)物是哺乳動(dòng)物。
31.權(quán)利要求29的方法,其中所述的禽類是家禽類。
32.權(quán)利要求31的方法,其中所述的家禽類是雞。
33.權(quán)利要求28的方法,其中所述的CCK與一種載體蛋白偶聯(lián)。
34.權(quán)利要求33的方法,其中載體蛋白是匙孔血藍(lán)蛋白。
35.權(quán)利要求33的方法,其中載體蛋白是牛γ球蛋白。
36.權(quán)利要求33的方法,其中與載體蛋白偶聯(lián)的CCK的分子量至少為8000道爾頓。
37.權(quán)利要求30的方法,其中所述的哺乳動(dòng)物是嚙齒類。
38.權(quán)利要求30的方法,其中所述的哺乳動(dòng)物是人類。
39.權(quán)利要求30的方法,其中所述的哺乳動(dòng)物是家養(yǎng)哺乳動(dòng)物。
40.權(quán)利要求39的方法,其中所述的家養(yǎng)哺乳動(dòng)物選自豬、牛、綿羊或山羊。
41.一種由于動(dòng)物的飼料物質(zhì),包括一種有機(jī)食物;以及有效量的與CCK結(jié)合的抗體。
42.權(quán)利要求41的飼料,其中所述的抗體來(lái)自免疫的禽類的蛋。
43.權(quán)利要求41的飼料,其中所述的動(dòng)物為家養(yǎng)動(dòng)物。
44.權(quán)利要求43的發(fā)明,其中所述的家養(yǎng)動(dòng)物是家禽。
45.權(quán)利要求44的飼料,其中所述的家禽是雞。
46.權(quán)利要求43的飼料,其中所述的家養(yǎng)動(dòng)物是哺乳動(dòng)物。
47.權(quán)利要求46的飼料,其中所述的哺乳動(dòng)物選自豬、牛、綿羊或山羊。
48.一種當(dāng)將含有胰蛋白酶抑制劑的植物材料喂予動(dòng)物時(shí)對(duì)抗胰蛋白酶抑制劑的負(fù)作用的方法,包括喂給所述的動(dòng)物一種含有有效量的CCK抗體的食物。
49.權(quán)利要求48的方法,其中所述的植物材料是大豆。
50.一種傳遞腸道肽抗體給動(dòng)物以消除所述肽的生理作用的方法將特異于腸道肽的抗體給予所述動(dòng)物,其中所述的腸道肽來(lái)自生產(chǎn)者動(dòng)物,其中所述的生產(chǎn)者動(dòng)物被腸道肽免疫。
51.權(quán)利要求50的方法,其中所述的腸道肽選自韓蛙皮素、神經(jīng)肽Y、胃泌素或生長(zhǎng)激素抑制素。
52.一種在動(dòng)物中傳遞腸道肽抗體以便增加食物效率并降低厭食性的方法,包括用腸道肽免疫動(dòng)物以使所述的動(dòng)物產(chǎn)生抗所述腸道肽的抗體并將所述抗體被動(dòng)傳遞給所述動(dòng)物的子代,從而子代消除所述肽的生理作用。
53.權(quán)利要求52的方法,其中所述的腸道肽選自韓蛙皮素、神經(jīng)肽Y、胃泌素或生長(zhǎng)激素抑制素。
54.一種傳遞抗體給動(dòng)物以便修飾生物化學(xué)過(guò)程的方法,包括將一種含有抗體的物質(zhì)給予所述動(dòng)物,其中所述物質(zhì)來(lái)自生產(chǎn)者動(dòng)物,其中所述的生產(chǎn)者動(dòng)物用一種抗原免疫,其中所述的抗原調(diào)節(jié)一種生物化學(xué)過(guò)程。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種在禽類和哺乳動(dòng)物中增加食物效率的方法,采用抗腸促胰酶肽的抗體以激發(fā)生物學(xué)應(yīng)答,以降低胃腸道蠕動(dòng),降低厭食性并改善飼料效率。
文檔編號(hào)A61K39/395GK1155246SQ95194550
公開日1997年7月23日 申請(qǐng)日期1995年7月21日 優(yōu)先權(quán)日1994年8月5日
發(fā)明者馬克·E·庫(kù)克, 謝里爾·C·米勒, 朱利奧·L·皮門特爾 申請(qǐng)人:威斯康星校友研究基金會(huì)
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