專利名稱：：2－(2,3,5,6－四氟－4－吡啶基)－1,2,5－噻二唑烷－3－酮1,1－二氧化物和其組合物...的制作方法
背景技術：
：(a)發(fā)明的領域本發(fā)明涉及2-(2，3，5，6-四氟-4-吡啶基)-1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物，含有它們的藥物組合物以及用它們治療退化性疾病的方法。(b)公開情報陳述無毒試劑對蛋白水解酶的抑制作用可用于治療退化性疾病，例如氣腫、類風濕關節(jié)炎和胰腺炎，在這些疾病中蛋白水解是基本的要素。在生物藥物研究中蛋白酶抑制劑有廣泛的應用。絲氨酸蛋白酶是蛋白水解酶中分布最廣泛的類型。根據底物的特異性，一些絲氨酸蛋白酶具有類胰凝乳蛋白酶或類彈性蛋白酶的特性。胰凝乳蛋白酶和類胰凝乳蛋白酶通常會切斷蛋白質的肽鍵，斷點處蛋白質羧基側鏈的氨基酸殘基是典型的Trp，Tyr，Phe，Met，Leu，或含有芳香或大體積烷基側鏈的其它氨基酸殘基。彈性蛋白酶和類彈性蛋白酶通常會切斷蛋白質的肽鍵，斷點處蛋白質在羧基側鏈的氨基酸殘基是典型的Ala，Val，Ser，Leu，或其它類似的，較小的氨基酸殘基。已經發(fā)現(xiàn)類胰凝乳蛋白酶和類彈性蛋白酶兩種酶存在于高等生物體的白細胞、巨細胞和胰液中，由許多種類細菌、酵母菌和寄生物均可分泌這兩種酶。Cha，于生化藥理學(Biochem.Pharmacol.)，1975，24，2177-2185中討論了研究抑制劑與大分子如酶的結合動力學方法，以及測定諸如抑制常數(shù)、反應速率和結合和未結合酶濃度等參數(shù)的方法。Groutas等人在生物化學和生物物理學研究通訊(BiochemicalandBiophysicalResearchCommunication)，1994，198(1)，341-349中公開了下式化合物其中R1是H、甲基、芐基、CH2COOt-Bu或CH2COOBzl，以及它們對人體白細胞彈性蛋白酶的體外抑制活性。Muller和DuBois在有機化學雜志(J.Org.Chem.)，1989，54，4471-4473中公開了下式化合物其中R是H、CH3、芐基或(CH2)2SCH3。試驗了該化合物的甜味活性，發(fā)現(xiàn)沒有甜味或者有比蔗糖小10倍的甜味。Lee等人在有機化學雜志(J.Org.Chem.)，1989，54，3077-3083中公開了下式化合物的合成其中R是苯乙基、苯基或1-萘基，沒有公開這些化合物的應用。Lee和Kohn在藥劑學雜志(JournalofPharmaceuticalScience)，1990，79(8)，716-718中公開了下式化合物其中R4是苯乙基、苯基或1-萘基和R4′是H，或R4和R4′兩者都是苯基。試驗了該化合物的抗驚厥活性，發(fā)現(xiàn)四種化合物中有三種沒有抗驚厥活性。Hanewacker等人在制藥文獻(Arch.Pharm.)，1993，326，497-498中公開了下式化合物的合成其中R是CH2CH(CH3)2、環(huán)丙基甲基、CH2Ph、(CH2)2Ph、2-呋喃基甲基、1-萘基甲基或3-吲哚乙基。Unterhalt和Hanewacker，制藥文獻(Arch.Pharm.)，1988，321，375-376中公開了下式化合物其中R是氫、甲基、異丙基、CH2CH(CH3)2或芐基，沒有指出其應用。Unterhalt和Hanewacker，制藥文獻(Arch.Pharm.)，1988，321，749-751中公開了下式化合物其中R＝CH3，R1＝H，和R2＝3-吲哚甲基；R＝CH3，R1＝H，和R2＝苯基；R＝C2H5，R1＝H，和R2＝苯基；R＝異丙基，R1＝H，和R2＝苯基；R＝甲基，R1＝CH3O(O)CCH2，和R2＝H；R＝CH3，R1＝HO(O)CCH2，和R2＝H；R＝CH3，R1＝C2H5，和R2＝苯基；R＝R1＝R2＝CH3；R＝C2H5，R1＝R2＝CH3。Aouf等人在四面體快報(TetrahedonLetter)，1991，32(45)，6545-6546公開了4-苯基甲基-1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物。Dewynter等人在四面體(Tetrahedon)，1993，49(1)，65-76公開了下式化合物的合成其中R是CH2Ph或CH2CH(CH3)(C2H5)。Dunlap等人，USP5,236,917，1993年8月17日公布，其中公開了一系列2-取代的糖精衍生物，例如4-(1-甲基乙基)-2-[(3-氧代-1，2，5-噻二唑烷-2-基)甲基]-1，2-苯并異噻唑-3(2H)-酮S，S，1，1-四氧化物，2-(1-甲基-1H-四唑-5-基-巰甲基)糖精和各種取代2-鹵代甲基糖精衍生物，據稱可用于治療退化性疾病。Strasser等人，德國專利申請DE4141218，公布于1993年6月17日，公開了一系列噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物衍生物，是合成各種1，1-二氧代-[1，2，6]噻二唑甲酰胺的中間體，所述化合物可能用作止痛藥、退熱藥和炎癥抑制劑。發(fā)明概述本發(fā)明涉及下式I化合物，或其藥學上可接受的酸加成鹽，或其可利用的對映體或外消旋混合物其中R1是氫、低級烷基或苯基-低級烷基；R2是氫、低級烷基或苯基-低級烷基；R3是氫或低級烷基；或本發(fā)明化合物可抑制絲氨酸蛋白酶，特別是人的白細胞彈性蛋白酶的活性，因此可用于治療退化性疾病，例如氣腫、類風濕關節(jié)炎、胰腺炎、胰囊性纖維變性、慢性支氣管炎、成人呼吸窘迫綜合癥、炎性腸疾病、牛皮癬、大皰性類天皰瘡、牙周疾病和α-1-抗胰蛋白酶缺失。優(yōu)選的上述式I化合物具有下述定義R1是氫或低級烷基；R2是氫或低級烷基；和R3是氫或低級烷基。特別優(yōu)選的上述式I化合物具有下述定義R1是氫或低級烷基；R2是氫或低級烷基；和R3是低級烷基。此外，本發(fā)明還涉及用于治療退化性疾病的藥物組合物，它包括抑制蛋白水解酶有效量的式I化合物，同時還包括藥學上可接受的載體、輔劑、稀釋劑或媒介物。此外，本發(fā)明還涉及用于治療退化性疾病的方法，該方法包括給需要這種治療的患者施用抑制蛋白水解酶有效量的式I中化合物。優(yōu)選實施方案的詳細描述此文中使用的術語低級烷基是指有1至大約5個碳原子的直鏈或支鏈烴基鏈，包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、3-甲基丁基、正戊基，及其類似物。此文中使用的術語鹵素、鹵或鹵化物是指氯、溴、碘和氟。整個說明書中使用的編號系統(tǒng)是如下文所示的環(huán)系此環(huán)系在化學文獻中被命名為1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物。本發(fā)明化合物的合成如流程A所示流程A溫度范圍在約室溫到所用溶劑沸點或溶劑混合物的沸騰溫度，優(yōu)選所用溶劑沸點或溶劑混合物的沸騰溫度，在適當?shù)挠袡C溶劑如乙腈，或二甲基甲酰胺或所述溶劑的混合物之中，在至少1摩爾適當?shù)墓诿?，?yōu)選15-冠-5存在下，把其中M+是堿金屬如鈉的適當取代的式II的1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物的堿金屬鹽用至少1摩爾五氟吡啶(式III)進行處理，由此得到式I化合物，取代的2-(2，3，5，6-四氟-4-吡啶基)-1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物?？梢岳斫獾氖牵絀化合物在1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物環(huán)的C-4位置有不對稱碳原子，因此就可能存在對映體。除非另有說明，本發(fā)明延伸到各個對映體形式，包括外消旋體。在某些情況下，使用特定的對映體治療退化性疾病時可能有優(yōu)勢，例如與使用其它對映體或外消旋體相比有更好的效力，對本領域熟練技術人員而言這種優(yōu)勢很容易確定。單一對映體可由手性原料合成，或者用化學領域熟知的方法如手性色譜、非對映異構體鹽的分步結晶等方法進行拆分外消旋體來制備。式I化合物可以游離堿和酸加成鹽兩種形式使用，兩種形式都在本發(fā)明的范圍之內。酸加成鹽常常是更方便的使用形式；在實踐中鹽形式本質上同堿形式的使用。制備酸加成鹽所用的酸優(yōu)選包括與游離堿結合能生成藥學上可接受鹽的那些酸，即所述鹽的陰離子在鹽的藥物劑量范圍內對動物機體相對而言是無毒的，這樣游離堿固有的優(yōu)異性能就不會被陰離子的副作用所破壞。在本發(fā)明的實際應用中，可以方便地使用游離堿形式，或者其鹽酸鹽、富馬酸鹽、甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽或馬來酸鹽。但是，由其它無機酸或有機酸衍生的其它適當?shù)乃帉W上可接受的鹽也在本發(fā)明的范圍內。堿性化合物的酸加成鹽可用本領域已知的標準方法制備，這些方法包括但不限于把游離堿溶于含有適當酸的含水醇溶液中，通過蒸發(fā)溶液分離出鹽，或者使游離堿和酸在有機溶劑中進行反應，在此情況下可直接分離出鹽，或者用第二種有機溶劑使其沉淀出來，或者可通過濃縮溶液而得到。雖然本發(fā)明堿性化合物藥用可接受鹽是優(yōu)選的，但是所有酸加成鹽都在本發(fā)明的范圍內。所有的酸加成鹽可作為游離堿形式的來源，既使一具體的鹽本身只是作為中間產物使用的，例如，當形成該鹽只是為了純化或鑒別，或作為中間體來使用，如采用離子交換法制備藥用可接受鹽。式II的適當取代的堿金屬鹽可按照流程B所示制備流程B在約室溫，在適當?shù)牡图壨榇既軇┤缂状贾校瑢⑹絀V的適當取代的1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物用大約1摩爾堿金屬的低級烷醇鹽如甲醇鈉處理，得到式II化合物。式IV的適當取代的1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物可按流程C所示制備。流程C溫度在約室溫到所用溶劑的沸騰溫度范圍內，在適當?shù)牡图壨榇既軇┤缂状贾?，將其中R是低級烷基的適當取代的式V化合物用過量的堿金屬低級烷醇鹽如甲醇鈉處理，接著再用質子源，如BIO-RAD50W-X8H+離子交換樹脂處理，得到式IV化合物。另外，當需要其中R3不是氫的式IV化合物時，一種方法是可如流程D說明制備流程D溫度在約室溫到所用溶劑沸點或溶劑混合物的沸騰溫度范圍內，在適當?shù)挠袡C溶劑如甲苯、二甲基甲酰胺或所說有機溶劑混合物之中，在有催化量的四低級烷基鹵化銨，優(yōu)選四丁基溴化銨存在下，用過量的，其中X是氯、溴、氟或碘，優(yōu)選溴的式VI的芐基鹵化物處理R3是氫的式IV化合物，得到式VII化合物。然后，在約0℃到所用溶劑的沸騰溫度，優(yōu)選在約0℃到室溫的溫度范圍內，在適當?shù)挠袡C溶劑如四氫呋喃中，在過量堿如叔丁醇鉀存在下，將式VII化合物用過量的式VIII的烷基化試劑(R3X’，其中R3是低級烷基和X’是氯、溴、氟或碘，優(yōu)選碘)進行處理，得到式IX化合物。然后，在約室溫到所用溶劑的沸騰溫度范圍內，在適當?shù)拇呋瘎?，?yōu)選鈀/碳存在下，在適當?shù)牡图壨榇既軇┤缂状贾校眠^量的適當氫給體，優(yōu)選甲酸銨處理式IX化合物以脫芐基，得到其中R3是低級烷基的式IV化合物。用于合成式IV化合物的式V化合物可如流程E說明制備流程E在約-10℃到約室溫的溫度范圍內，在適當?shù)挠袡C溶劑如二氯甲烷中，在過量堿如三乙胺存在下，將其中X是鹵素，優(yōu)選氯的式X鹵代磺?；惽杷狨ビ眠^量的式XI的α-氨基酸酯和過量的芐醇進行處理，其中式XI中的R是低級烷基和X-是鹵素，優(yōu)選氯，得到式XII化合物(注如果需要，可以把α-氨基酸用作限定試劑而不用鹵代磺?；惽杷狨?。然后，在低級烷醇溶劑如甲醇中，在催化劑，優(yōu)選鈀/碳存在下，在氫氣壓力為大約50-55psi的情況下，使式XII化合物氫化，生成式V化合物。式III化合物五氟吡啶以可買到。式VI的芐基鹵、式VIII的烷基化試劑、式X的鹵代磺酰基異氰酸酯和式XI的α-氨基酸酯可買到，或者用本領域已知的方法制備，或者用下文實施例所描述的方法制備。本發(fā)明化合物的結構由合成模式，以及一或多種元素分析、紅外、核磁共振和質譜來確定，反應過程和產品的鑒定與產品的均勻性由一或多種薄層色譜(TLC)、高壓液相色譜(HPLC)或氣-液色譜(GLC)評價。下面的實施例將進一步說明，但不限制本發(fā)明。所有的熔點(m.p.)以攝氏溫度(℃)給出，溫度未經校正。實施例1(a)于0-5℃，在攪拌著的14.72ml(0.17mol)氯磺?；惽杷狨サ?00ml二氯甲烷溶液中加入苯甲醇(17.69ml，0.17mol)，將上述溶液攪拌1.5小時后，于0-5℃，向其中加入含有三乙胺(71ml，0.5mol)的31.24g(0.186mol)2-氨基-戊酸甲酯鹽酸化物的1100ml二氯甲烷溶液，將此混合物攪拌過夜，溫熱至室溫。把反應混合物傾倒入10％HCl水溶液，用氯化鈉飽和，分離有機層。水層用二氯甲烷/乙酸乙酯(4∶1，2×)萃取，合并的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥和真空濃縮得到4.77g(82％)2-(N-羰基芐氧基氨基磺?；?氨基戊酸甲酯(式XIIR＝CH3；R1＝丙基；R2＝H；R3＝H)，m.p.76-78℃。(b)將2-(N-羰基芐氧基氨基磺?；?氨基戊酸(46.7g)、甲醇(350ml)和10％Pd/C的混合物于55psi氫化2小時。用CELITE塞濾出催化劑，真空除去濾液和用硅膠柱色譜純化，用50％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到25.6g(90％)2-(氨基磺?；被?戊酸甲酯(式VR＝CH3；R1＝丙基；R2＝H；R3＝H)，m.p.63-64℃。(c)將2-(氨基磺?；被?戊酸甲酯(24.6g，0.11mmol)的甲醇(150ml)溶液加入甲醇鈉(8.86g，0.164mol)的150ml甲醇溶液，把得到的反應混合物回流18小時。然后，把混合物冷卻，用BIO-RAD50W-X8H+離子交換樹脂中和及過濾，真空濃縮濾液后得到油狀物，將其用甲醇/己烷結晶得到20.73g(理論值)4-丙基-1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氫化物(式IVR1＝丙基；R2＝R3＝H)。(d)將4-丙基-1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物(20.74，0.117mol)、苯甲基溴(22.09g，0.129mol)和四丁基溴化銨(3.77g，0.012mol)于甲苯(400ml)和DMF(50ml)中的混合物回流40小時，冷卻，傾入冰/水。粗產物用快速色譜純化得到11.1g2-苯甲基-4-丙基-1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物(式VIIR1＝丙基；R2＝R3＝H)。(e)0℃下，把叔丁醇鉀(1.83g，14.9mmol)加入2-苯甲基-4-丙基-1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物(4g，14.9mmol)的150mlTHF溶液中，混合物于此溫度下攪拌1小時。在此混合物中加入10.58g(74.6mmol)甲基碘，反應混合物于0℃攪拌0.5小時，和在室溫攪拌6小時，用飽和氯化銨溶液分解。得到的混合物用二氯甲烷萃取，有機層用鹽水洗滌干燥和真空濃縮，得到4.19g(定量)2-苯甲基-5-甲基-4-丙基-1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物(式IXR1＝丙基；R2＝H；R3＝甲基)。(f)將2-苯甲基-5-甲基-4-丙基-1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物(4.15g)、10％Pd/C(2.0g)、甲酸銨(8.0g)和甲醇的混合物在室溫攪拌過夜。除去溶劑，粗產物用快速色譜純化得到2.3g(80.9％)5-甲基-4-丙基-1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物(式IVR1＝丙基；R2＝H；R3＝甲基)。(g)在5-甲基-4-丙基-1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物的鈉鹽(5.2mmol，用甲醇鈉處理制備)懸浮于30ml乙腈的混合物中加入五氟吡啶(0.57ml，5.2mmol)和1.14g(5.17mmol)的15-冠-5和DMF(25ml)，將得到的混合物回流20小時，冷卻，真空濃縮。殘余物用水稀釋，用二氯甲烷萃取，有機層用水和鹽水洗滌。真空濃縮有機層，粗產物用快速色譜純化得到0.39g(22％)2-(2，3，5，6-四氟-4-吡啶基)5-甲基-4-丙基-1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物(式IR1＝丙基；R2＝H；R3＝甲基)。實施例2(a)在N-叔丁氧基羰基-肌氨酸(50g，0.264mol)的700ml苯溶液中一次加入1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]-十一碳-7-烯(DBU；40.19g，0.264mol)。在上述澄清溶液中一次加入74.84g(0.528mol)甲基碘，將得到的澄清溶液回流7小時。再加入甲基碘(16ml)以后，混合物攪拌回流反應，然后冷卻至室溫，再攪拌過夜。過濾反應混合物，殘余物用乙醚洗滌，，合并的濾液用水、飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌。得到的有機層用硫酸鈉干燥，過濾和真空濃縮后得到46.38g(86.4％)N-叔丁氧基羰基-肌氨酸甲酯，為黃色油。(b)在氮氣中，于-78℃，用注射器把2MLDA(70.32ml，0.14mol)溶液加入N-叔丁氧基羰基-肌氨酸甲酯(26g，0.1279mol)的40ml無水THF的溶液中，混合物在此溫度下攪拌30分鐘。于-78℃，在上述混合物中一邊攪拌一邊加入4-溴-2-甲基-2-丁烯(20g，0.134mol)，將得到的混合物溫熱至室溫。于-78℃，在反應混合物中加入6ml飽和氯化銨溶液使反應停止，加20ml水，得到的反應混合物用乙酸乙酯萃取。有機層用水和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，和真空濃縮得到黃色油狀物，將此油狀物用硅膠柱色譜純化(在己烷中含有20％乙酸乙酯)得到22.1g(63.7％)N-叔丁氧基羰基-2-(3-甲基-2-丁烯基)肌氨酸甲酯為油狀物。(c)將N-叔丁氧基羰基-2-(3-甲基-2-丁烯基)肌氨酸甲酯(22.1g，81.44mmol)的400ml甲醇溶液在氮氣下冷卻至0℃，加入1.5g10％Pd/C，將此混合物放在帕爾儀中氫化6小時。用CELITE塞過濾出催化劑，真空濃縮濾液得到22.04g(99％)N-叔丁氧基羰基-2-(3-甲基丁基)肌氨酸甲酯為油狀物。(d)將N-叔丁氧基羰基-2-(3-甲基丁基)肌氨酸甲酯(22.04g，80.62mmol)于350mlHCl乙醚液中的混合物于室溫攪拌3天。得到的混合物于冰浴中冷卻，真空濃縮溶劑，干燥后得到13.17g(78％)2-(3-甲基丁基)-肌氨酸甲酯鹽酸化物(式XIR＝CH3；R1＝(CH2)2CH(CH3)2；R2＝H；R3＝CH3；X-＝Cl-)，用甲醇/乙醚重結晶，m.p.110-111℃。(e)氮氣中，于0-5℃，在攪拌著的5.77ml(66.78mmol)氯磺?；惽杷狨サ亩燃淄槿芤褐屑尤氡郊状?6.89ml，66.57mmol)，在攪拌上述溶液1小時之后，于0-5℃向其中加入含有三乙胺(27.33ml，194.62mmol)的13.166g(62.78mmol)2-(3-甲基丁基)-肌氨酸甲酯鹽酸鹽的二氯甲烷溶液，將此混合物攪拌過夜，溫熱至室溫。將反應混合物傾入600ml10％HCl水溶液，用氯化鈉飽和，分離有機層。水層用二氯甲烷萃取，合并的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥和真空濃縮，用硅膠柱色譜(含20％乙酸乙酯的己烷)純化后得到21.22g(87.2％)的N-(羰基芐氧基氨基磺?；?-2-(3-甲基丁基)-肌氨酸甲酯(式XIIR＝CH3；R1＝(CH2)2CH(CH3)2；R2＝H；R3＝CH3)，為油狀物。(f)將N-(羰基芐氧基氨基磺?；?-2-(3-甲基丁基)-肌氨酸甲酯(20.6g，53.17mmol)的200ml甲醇溶液在氮氣下冷卻至0℃，加入1.5g10％Pd/C，將此混合物放在帕爾儀中于50psi氫化3.5小時。用CELITE塞過濾出催化劑，真空濃縮濾液得到13.24g(98.6％)N-(氨基磺酰基)-2-(3-甲基丁基)-肌氨酸甲酯(式VR＝CH3；R1＝(CH2)2CH(CH3)2；R2＝H；R3＝CH3)，為油狀物。(g)將N-(氨基磺?；?-2-(3-甲基丁基)-肌氨酸甲酯(12.25g，48.17mmol)的甲醇(150ml)溶液加入甲醇鈉(Na＝2.4g，)的150ml冰冷甲醇溶液中，把得到的反應混合物在氮氣中于室溫攪拌18.5小時。然后，混合物用25g離子交換樹脂(BIO-RAD50WX8；200-400目)處理40分鐘，過濾。真空濃縮濾液后得到10.7g(99.8％)4-(3-甲基丁基)-5-甲基-1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物(式IVR1＝(CH2)2CH(CH3)2；R2＝H；R3＝CH3)為固體，m.p.212-214℃。(h)將5-甲基-4-(3-甲基丁基)-1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物的鈉鹽(1g，4.13mmol用甲醇鈉處理制備)、五氟吡啶(0.54ml，4.97mmol)和0.91g(4.13mmol)15-冠-5懸浮于30ml乙腈的混合物回流17小時。使混合物冷卻，真空濃縮，殘余物用二氯甲烷萃取，有機層用水(3×)和鹽水洗滌。用硫酸鈉干燥后，真空濃縮有機層，粗產物用快速色譜純化(在己烷中含10％乙酸乙酯)得到0.62g(41％)2-(2，3，5，6-四氟-4-吡啶基)5-甲基-4-(3-甲基丁基)-1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物(式IR1＝(CH2)2CH(CH3)2；R2＝H；R3＝CH3)，為固體，m.p.80.5-81.5℃。實施例3(a)按照與實施例2(b)所述類似的方法，只是用2.1當量的甲基碘代替4-溴-2-甲基-2-丁烯，和用2.2當量的二異丙基氨化鋰(LDA)，預期可以制備下式化合物(CH3)2C(CO2CH3)N(CH3)(CO2tBu)。(b)按照與實施例2(d)所述類似的方法，只是用實施例3(a)化合物代替實施例2(c)，預期可以制備下式化合物(CH3)2C(CO2CH3)NH(CH3)·HCl。按照與實施例1(a)-(c)所述類似的方法，只是用適當?shù)氖絍的α-氨基酸酯代替實施例1(a)的正纈氨酸甲酯鹽酸鹽，預期可以制備表I所示的式IV化合物。表I實施例編號R1R2R3使用的酯4CH3CH3CH3(CH3)2C(NHCH3)CO2CH3·HCl5CH2PhHHC6H5CH2CH(CH2)CO2CH3·HCl</table>按照與實施例1(g)所述類似的方法，只是用適當?shù)氖絀V化合物代替4-丙基-5-甲基-1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物，預期可以制備表II所示的式I化合物。表II生物試驗結果已經發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物有代表性的實施例具有有價值的藥理性質。具體地說，發(fā)現(xiàn)它們能抑制絲氨酸蛋白酶，特別是人的白細胞彈性蛋白酶，因此可用于治療退化性疾病，例如氣腫、類風濕關節(jié)炎、胰腺炎、胰囊性纖維變性、慢性支氣管炎、成人的呼吸窘迫綜合癥、炎性腸疾病、牛皮癬、大皰性類天皰瘡、牙周疾病和α-1-抗胰蛋白酶缺失。本發(fā)明化合物有代表性的實施例的藥理性質可通過下述常規(guī)的體外生物試驗方法來證明。在管形瓶中把試驗化合物(抑制劑)溶于DMSO以生成抑制劑儲備液，其濃度范圍為200-1000μM。在含有2.4ml緩沖溶液(50mMN-[2-羥基乙基]哌嗪-N′-[2-乙磺酸]/NaOH，500mMNaCl，在25℃pH7.8)的試驗用管形瓶(管形瓶分別為1，2和3)中將儲備液稀釋(1∶4，1∶16，1∶64)，加入DMSO，使各瓶溶液總體積是3.2ml。從試驗管形瓶取70μl、50μl、35μl和25μl抑制劑放于96-穴微量滴定板的第一組4個穴中，在每個穴中加入25％DMSO/緩沖溶液使各穴溶液總體積為90μl。以類似的方式處理由試驗管形瓶2和3中取出的抑制劑放于第5-12穴，得到12個不同的抑制劑濃度。同時對含有90μl25％DMSO/緩沖溶液但不合有抑制劑的4個穴(穴13-16)同加抑制劑的穴一樣處理，以作為對照。然后在16個穴中同時加入150μl底物溶液(在19.5ml緩沖溶液中加入500μl人的白細胞彈性蛋白酶(HLE)底物MeOSuc-AlaAla-Pro-Val-pNA(18.7mM，于DMSO中)而制備)，充分混合每個穴中的溶液。把96-穴微量滴定板放入微量滴定板讀數(shù)器#89815A分光光度儀，在16個穴的每個穴中同時加入110μl酶溶液(按下述方法制備在一個閃爍儀管形瓶中將20ml緩沖溶液和20mg小牛血清清蛋白的混合物緩慢渦流攪拌，加入5μlHLE儲備液(1mg/ml，溶于無離子水))，使每穴中的溶液充分混合，然后在410nM收集隨時間變化的吸收數(shù)據度，直到試驗完成。應該注意的是，雖然這些試驗方法可以用手工進行，但是優(yōu)選用HewlettPackardMicroAssaySystemRobot進行機器人試驗。這樣得到的吸收度對時間的曲線給出增長曲線，其最終斜率等于最終穩(wěn)態(tài)速度(Vf)。用ENZFITTER(Elseviersoftware)，4個對照試驗的增長曲線([I]＝0)應用線性回歸分析產生在沒有抑制劑時的酶反應速度值(V0)，將其平均，得到單一的固定值。然后，由下面的曲線得到抑制常數(shù)由此得到一線性曲線，其中和[S]是底物的的濃度，Km是米氏常數(shù)(Michaelisconstant)。按照上述方法對本發(fā)明有代表性的化合物，實施例1(g)和2(h)進行了對人的白細胞彈性蛋白酶的抑制活性的試驗，它們的Ki分別是10和＞100nM。本發(fā)明化合物可用本領域熟知的常規(guī)制藥方法制劑用于藥用；這就是說，(可用于固體或液體形式的口服給藥、腸胃外給藥、局部給藥或氣霧劑吸入給藥等)，制成藥物組合物，它含有本發(fā)明化合物或其藥學上可接受的鹽，同時還有一種或多種生理上可接受的載體、輔劑、稀釋劑或媒介物。用于口服給藥的固體組合物包括壓片、丸劑、散劑和顆粒劑。在這些固體組合物中，把活性化合物與至少一種惰性稀釋劑混合，所述稀釋劑例如淀粉、碳酸鈣、蔗糖或乳糖。這些組合物也可以含有其它非惰性稀釋劑的物質，例如潤滑劑如硬脂酸鎂、滑石和其類似物。用于口服給藥的液體組合物包括藥學上可接受的乳液、溶液、懸浮液、糖漿和酏劑，其中含有本領域常用的惰性稀釋劑，例如水和液體石蠟。除了惰性稀釋劑以外，這些組合物中還可以含有輔劑如濕潤劑和懸浮劑，以及甜味劑、矯味劑、芳香劑和防腐劑。按照本發(fā)明，口服給藥的組合物還包括可吸收物質膠囊，如明膠，含有所述的活性組分，加入或未加稀釋劑或賦形劑。按照本發(fā)明用于腸胃外給藥的制劑包括無菌水溶液、含水有機溶液和有機溶液，懸浮劑和乳劑。有機溶劑或懸浮介質的實例是丙二醇、聚乙二醇、植物油如橄欖油，以及可注射的有機酯類如油酸酯。這些組合物還可以含有輔劑如穩(wěn)定劑、防腐劑、濕潤劑、乳化劑和分散劑。按照本發(fā)明用于局部給藥或氣霧劑吸入給藥的制劑包括在藥學上可接受的媒介物如水、含水的醇、乙二醇、油溶液或油-水乳液和類似物之中溶解或懸浮本發(fā)明化合物。如果需要，本發(fā)明化合物可進一步與緩慢釋放或靶釋放系統(tǒng)如聚合物基質、脂質體和微球混合。在這些組合物中活性組分的百分數(shù)可以變化，這樣就可以得到適當?shù)膭┝?。對具體的患者給藥劑量可用下述標準根據醫(yī)生的判斷變化給藥途徑、治療時間、患者的體重和身體條件、活性化合物的效力和患者對該化合物的反應。醫(yī)生在對所有的標準給予考慮之后，即可從患者利益出發(fā)作出最佳診斷，很容易地確定活性化合物有效劑量。權利要求1.下式化合物，或其藥學上可接受的酸加成鹽，或其可應用的對映體或外消旋混合物其中R1是氫、低級烷基或苯基-低級烷基；R2是氫、低級烷基或苯基-低級烷基；R3是氫或低級烷基。2.按照權利要求1的化合物，其中R1是氫或低級烷基；R2是氫或低級烷基。3.按照權利要求2的化合物，其中R3是低級烷基。4.按照權利要求3的化合物，其中R1是氫、丙基或3-甲基丁基；R2是氫、丙基或3-甲基丁基；和R3是甲基。5.按照權利要求4的化合物，其中的化合物是4-丙基-5-甲基-2-(2，3，5，6-四氟-4-吡啶基)-1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物。6.用于治療退化性疾病的藥物組合物，包括藥學上可接受的載體、輔劑、稀釋劑或媒介物，以及抑制蛋白水解酶有效量的下式化合物，或其藥學上可接受的酸加成鹽，或其可應用的對映體或外消旋混合物其中R1是氫、低級烷基或苯基-低級烷基；R2是氫、低級烷基或苯基-低級烷基；R3是氫或低級烷基。7.按照權利要求6的藥物組合物，其中R1是氫或低級烷基；R2是氫或低級烷基。8.按照權利要求7的藥物組合物，其中R3是低級烷基。9.按照權利要求8的藥物組合物，其中的化合物是4-丙基-5-甲基-2-(2，3，5，6-四氟-4-吡啶基)-1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物。10.治療退化性疾病的方法，其中包括給需要這種治療的患者施用以抑制蛋白水解酶有效量的下式化合物，或藥學上可接受的酸加成鹽，或其可應用的對映體或外消旋混合物其中R1是氫、低級烷基或苯基-低級烷基；R2是氫、低級烷基或苯基-低級烷基；R3是氫或低級烷基。11.按照權利要求10方法的，其中R1是氫或低級烷基；R2是氫或低級烷基。12按照權利要求11的方法，其中R3是低級烷基。13按照權利要求12的方法，其中的化合物是4-丙基-5-甲基-2-(2，3，5，6-四氟-4-吡啶基)-1，2，5-噻二唑烷-3-酮1，1-二氧化物。14.按照權利要求10的方法，其中所述的退化性疾病選自氣腫、類風濕關節(jié)炎、胰腺炎、胰囊性纖維變性、慢性支氣管炎、成人的呼吸窘迫綜合癥、炎性腸疾病、牛皮癬、大皰性類天皰瘡、牙周疾病和α-1-抗胰蛋白酶缺失。15.按照權利要求14的方法，其中所述的退化性疾病選自氣腫、胰囊性纖維變性、慢性支氣管炎，和成人呼吸窘迫綜合癥。全文摘要本發(fā)明涉及2－(2,3,5,6－四氟－4－吡啶基)－1,2,5－噻二唑烷－3－酮1,1－二氧化物,含有它們的藥物組合物以及用它們治療退化性疾病的方法。文檔編號A61P29/00GK1173131SQ95197435公開日1998年2月11日申請日期1995年11月30日優(yōu)先權日1994年12月2日發(fā)明者R·C·德薩申請人:圣諾菲藥品有限公司