專利名稱：：磁共振聚焦的用于外科手術(shù)和治療的超聲術(shù)的方法作為參考文獻(xiàn)的在審申請(qǐng)本申請(qǐng)是1995年3月9日遞交的在審申請(qǐng)?zhí)枮?8/401,974的繼續(xù)部分，而該申請(qǐng)又是1994年3月11日遞交的在審申請(qǐng)?zhí)枮?8/212,553的繼續(xù)部分，這兩個(gè)申請(qǐng)全部引入本文作為參考，并且也要求保護(hù)其優(yōu)先權(quán)申請(qǐng)內(nèi)容。于1993年6月11日遞交的在審申請(qǐng)?zhí)枮?8/076,250的申請(qǐng)公開了包括含有一種治療劑的氣體填充的微球體的治療藥物釋放系統(tǒng)，該申請(qǐng)?zhí)貏e強(qiáng)調(diào)了利用超聲技術(shù)監(jiān)測(cè)和測(cè)定在患者體內(nèi)所述微球體的存在，然后使所述微球體破裂，以便在患者體內(nèi)的存在所述微球體的該區(qū)域釋放所述治療劑。所述的該申請(qǐng)是于1991年6月18日遞交的美國(guó)申請(qǐng)?zhí)枮?16,899和717,084的繼續(xù)部分，而它們依次是1990年8月20日遞交的美國(guó)申請(qǐng)?zhí)枮?69,828的繼續(xù)部分，而該申請(qǐng)又依次是1989年12月22日遞交的美國(guó)申請(qǐng)?zhí)?55,707的繼續(xù)部分。與剛才在上文中提出的在審申請(qǐng)?zhí)枮?8/076,250的申請(qǐng)具有相同的在先申請(qǐng)來源的于1993年6月11日遞交的在審申請(qǐng)?zhí)枮?8/076,250的申請(qǐng)公開了用于制備適用于在超聲成象術(shù)中用作為對(duì)比劑或用作為藥物釋放劑的氣體填充的微球體的方法和設(shè)備。于1994年9月16日遞交的在審申請(qǐng)?zhí)枮?8/307,305和同時(shí)于1993年11月30日遞交的在審申請(qǐng)?zhí)枮?8/159,687及08/160,232的申請(qǐng)(其依次分別是同時(shí)于1993年6月11日遞交的申請(qǐng)?zhí)枮?8/076,239和申請(qǐng)?zhí)枮?8/076,250的申請(qǐng)的繼續(xù)部分)公開了制備用于診斷和治療的氣體和氣體前體填充的微球體和多相液體和氣體組合物的新的治療釋放系統(tǒng)和方法。本申請(qǐng)要求申請(qǐng)?zhí)枮?8/307,305，08/159,687，08/160,232，08/076,239和08/076,250和其在先申請(qǐng)的申請(qǐng)日為優(yōu)先權(quán)日，并且它們?nèi)恳氡疚淖鳛閰⒖?。?990年4月10日遞交的申請(qǐng)?zhí)?7/507,125也作為本文的參考文獻(xiàn)，它公開了單獨(dú)的或與一種或多種對(duì)比劑例如順磁、超順磁和質(zhì)子密度對(duì)比劑混合的生物可溶性聚合體的應(yīng)用。多種或一種聚合體/對(duì)比劑混合物可非強(qiáng)制性地與一種或多種生物可溶性氣體混合以便增強(qiáng)得到的制劑的松散性。
背景技術(shù)：
：發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及磁共振成象
技術(shù)領(lǐng)域：
，更具體地說，涉及穩(wěn)定化的氣體填充的泡囊作為磁共振成象(MRI)指導(dǎo)的超聲手術(shù)的對(duì)比介質(zhì)的用途。已有各種各樣的成象技術(shù)用于診斷人的疾病。應(yīng)用最早的成象技術(shù)之一是X-射線。對(duì)于X-射線，所產(chǎn)生的患者身體的圖象反映出身體結(jié)構(gòu)的不同密度。為了提高這一成象技術(shù)的診斷用途，利用了對(duì)比劑提高所需組織相對(duì)周圍組織的密度，以便在X-射線下所需組織可見度更大。例如對(duì)于X-射線胃腸研究可廣泛利用鋇和碘化的對(duì)比介質(zhì)以觀察食管、胃、腸和直腸。另外對(duì)于X-射線計(jì)算機(jī)化的層面X-射線照相術(shù)研究技術(shù)(也就是計(jì)算機(jī)輔助的層面X-射線照相術(shù)即CAT)可利用這些對(duì)比劑以便改善胃腸道的可見度以及例如提高胃腸道與其鄰接組織例如血管和淋巴結(jié)的對(duì)比度。使用所述對(duì)比劑可以提高食管、胃、腸和直腸內(nèi)部的密度，并且可以將胃腸系統(tǒng)與周圍結(jié)構(gòu)區(qū)分開。磁共振成象技術(shù)是比較新的成象技術(shù)，它與X-射線不同，不利用離子化的輻射線。類似于計(jì)算機(jī)輔助的層面X-射線照相術(shù)(CAT)，MRI制備身體的交叉截面圖象，但是，MRI具有能夠使任何掃描平面(即中軸的，頭頂?shù)?，矢形的或正交?成象的其它優(yōu)點(diǎn)。不幸的是，由于對(duì)新的或更好的對(duì)比劑的需要使得MRI作為身體的診斷方式的充分應(yīng)用受到限制。沒有合適的對(duì)比劑，利用MRI區(qū)分靶組織與相連組織經(jīng)常是困難的。如果獲得更好的對(duì)比劑，將會(huì)提高M(jìn)RI作為成象工具的全面的應(yīng)用，并且大大地提高該方式的診斷精確性。MRI利用磁場(chǎng)、射頻能量和磁場(chǎng)梯度以便使身體成象。組織之間對(duì)比度和信號(hào)強(qiáng)度的不同主要反映出組織的T1(縱向的)和T2(橫向的)松散值和質(zhì)子密度(有效的是游離水含量)。在通過利用對(duì)比介質(zhì)改變患者的一個(gè)區(qū)域的信號(hào)強(qiáng)度時(shí)，可利用幾種可能的途徑。例如，可以設(shè)計(jì)對(duì)比介質(zhì)以便改變T1，T2或質(zhì)子密度?，F(xiàn)有技術(shù)的簡(jiǎn)述在過去，主要將注意力集中在用于MRI的順磁對(duì)比介質(zhì)。順磁對(duì)比劑含有在主要磁場(chǎng)內(nèi)具有局部小磁場(chǎng)作用的未配對(duì)的電子以便提高縱向(T1)和橫向(T2)松散比例。大多數(shù)順磁對(duì)比劑在多數(shù)情況下是有毒的金屬離子。為了減低毒性，通常利用配體絡(luò)合這些金屬離子。得到的順磁金屬離子復(fù)合物具有降低的毒性。已經(jīng)對(duì)作為MRI的對(duì)比劑的金屬氧化物，最顯著的是鐵的氧化物進(jìn)行了測(cè)試。例如低于20nm直徑的小顆粒的鐵的氧化物可能具有順磁松散特性，而其主導(dǎo)效果是由于大的磁化率。因此，磁性顆粒對(duì)T2松散性具有主導(dǎo)作用。硝基氧是另一類也是順磁性的MRI對(duì)比劑。它們的松散性相對(duì)較低，并且通常其作為MRI對(duì)比劑的效果低于順磁離子。在一定場(chǎng)合使用時(shí)所有這些對(duì)比劑具有某些毒性作用，就其本身用作為灌注對(duì)比劑時(shí)沒有一種是理想的。現(xiàn)有的MRI對(duì)比劑受到許多限制。例如，已知陽性對(duì)比劑由于其固有的蠕動(dòng)和呼吸或心血管活動(dòng)產(chǎn)生的運(yùn)動(dòng)使圖象噪音增加。陽性對(duì)比劑例如Gd-DTPA還有更復(fù)雜的情況，其信號(hào)強(qiáng)度取決于對(duì)比劑的濃度和所用的脈沖的連貫性。胃腸道對(duì)對(duì)比劑的吸收例如使圖象的譯釋更復(fù)雜，特別是在小腸的末端部分，除非使用足夠高濃度的順磁性物質(zhì)(Kornmesser等人，Magn.Reson.Imaging，6124(1988))。比較而言，陰性對(duì)比劑對(duì)脈沖連貫性的變化較不敏感，并且提供了更一致的對(duì)比性。但是，在高濃度時(shí)，例如鐵酸鹽顆粒能夠產(chǎn)生假的磁化率，尤其是例如在出現(xiàn)腸液吸收并且使超順磁物質(zhì)濃縮的直腸，證據(jù)更明確。通常陰性對(duì)比劑顯示對(duì)脂肪的良好的對(duì)比性，但是，對(duì)于T1加權(quán)的圖象，陽性對(duì)比劑相對(duì)于正常組織有良好的對(duì)比性。由于大多數(shù)病理組織比正常組織具有更長(zhǎng)的T1和T2，因此它們?cè)赥1加權(quán)的圖象上顯示黑暗，而在T2加權(quán)的圖象上顯示明亮。這表明理想的對(duì)比劑應(yīng)該在T1加權(quán)的圖象上顯示明亮，而在T2加權(quán)的圖象上顯示黑暗?，F(xiàn)在可以購(gòu)買的許多MRI對(duì)比介質(zhì)沒有滿足這種雙重標(biāo)準(zhǔn)。毒性是現(xiàn)有的對(duì)比劑的另一個(gè)問題。任何藥物都有一些毒性，通常毒性與劑量相關(guān)。對(duì)于鐵酸鹽，在口服以后經(jīng)常出現(xiàn)惡心以及腸胃氣脹和血清鐵瞬間提高。順磁對(duì)比劑Gd-DTPA是一種釓與復(fù)合劑二乙撐三胺戊乙酸偶合的有機(jī)金屬?gòu)?fù)合物。不進(jìn)行偶合，游離的釓離子是極有毒的。此外，例如其中胃分泌酸和腸道釋放堿的胃腸道的獨(dú)特性產(chǎn)生了去偶合和將游離釓或其它順磁劑從復(fù)合物分離的可能性，從而在胃腸道使用期間發(fā)生多種pH值變化。當(dāng)然，使順磁劑的劑量降低至最低對(duì)于使?jié)撛诘亩拘越档偷阶钚∈侵匾?。在磁共振成象以及改進(jìn)的成象技術(shù)中使用新和/或更好的對(duì)比劑是必需的。本發(fā)明特別涉及這些重要的結(jié)果。在上文于1990年4月10日遞交的申請(qǐng)?zhí)?7/507,125描述的有關(guān)MRI對(duì)比劑的研究中，已經(jīng)公開了如何將氣體與聚合物組合物和順磁或超順磁劑結(jié)合用作為MRI對(duì)比劑。其中已經(jīng)證明由所說聚合物穩(wěn)定的氣體如何作為有效的磁化率的對(duì)比劑的作用以便降低在T2加權(quán)圖象上的信號(hào)強(qiáng)度；所述系統(tǒng)用作為胃腸道MRI對(duì)比介質(zhì)是特別有效的。Widder等人在公開的歐洲專利申請(qǐng)EP-A-0324938中公開了由熱變性的生物相容性蛋白質(zhì)如白蛋白、血紅蛋白、和膠原蛋白產(chǎn)生的穩(wěn)定的微氣泡型超聲成象劑。還可提及的是Moseley等人于1991年在加里福尼亞州納帕召開的一次醫(yī)學(xué)磁共振協(xié)會(huì)的會(huì)議上作過的一次報(bào)告，該報(bào)告概括成一摘要，標(biāo)題為“微氣泡一種新的磁共振敏感性對(duì)比劑”(MicrobubblesANovelMRSusceptibilityContrastAgent)。所利用的微氣泡包括涂布有人白蛋白殼的空氣。但是，該文獻(xiàn)未揭示本發(fā)明這樣的穩(wěn)定的充有氣體的泡囊。但是對(duì)于血管內(nèi)使用，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)用柔性化合物使氣體穩(wěn)定對(duì)于獲得最佳結(jié)果是有利的?？衫玫鞍踪|(zhì)例如白蛋白使氣泡穩(wěn)定，但是得到的氣泡殼可以是易碎的和堅(jiān)硬的。由于幾種原因，蛋白質(zhì)是不理想的。首先，易碎的覆蓋層限制了氣泡擴(kuò)張和衰退的能力。由于氣泡在體內(nèi)遇到不同的壓力區(qū)(例如，經(jīng)由心臟的循環(huán)從靜脈系統(tǒng)移動(dòng)到動(dòng)脈系統(tǒng))，易碎的殼破碎，氣體將會(huì)跑掉。這限制了身體從氣泡的對(duì)比劑中獲得有用的對(duì)比性的時(shí)間的有效期。所述易碎的、破碎的片段可能也是有毒的。另外易碎覆蓋層例如自蛋白的堅(jiān)硬特性以及生硬得到的氣泡使得測(cè)量體內(nèi)壓力十分困難。Quay公開的申請(qǐng)WO93/05819公開了具有高Q數(shù)的氣體對(duì)于形成穩(wěn)定的氣體是理想的，但是其公開的內(nèi)容局限于穩(wěn)定的氣體，而不是其穩(wěn)定化以及包囊作用，如本發(fā)明所述。在第31頁描述的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，利用三梨醇提高粘度，據(jù)說它依次可延長(zhǎng)微氣泡在溶液中的壽命。這不是本發(fā)明的基本需求，所涉及的氣體具一定Q值或可擴(kuò)散因子。Lanza等人在公開的申請(qǐng)WO93/20802中公開了聲反射片層脂質(zhì)體，該脂質(zhì)體是在雙層之間具有增大的水相空間的多片層脂質(zhì)體或含有嵌套在雙層間的非向心方式脂質(zhì)體，并因此含有內(nèi)分離的雙層。該文獻(xiàn)還敘述了其作為加強(qiáng)超聲成象的超聲對(duì)比劑以及在給患者給藥時(shí)監(jiān)測(cè)脂質(zhì)體釋放的藥物的應(yīng)用。D’Arrigo在美國(guó)專利4,684,479和5,215,680中分別公開了液包氣乳化液和類脂涂層微氣泡。根據(jù)本發(fā)明，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)穩(wěn)定化的氣體填充的泡囊對(duì)于同時(shí)的磁共振聚焦的非侵入性超聲術(shù)是非常有效的非毒性對(duì)比劑。發(fā)明概述本發(fā)明涉及磁共振成象聚焦的用于外科手術(shù)和治療的超聲術(shù)的方法，該方法包括以用于磁共振成象的對(duì)比介質(zhì)給需要外科手術(shù)的患者給藥，該對(duì)比介質(zhì)含有氣體填充的泡囊，利用所述對(duì)比介質(zhì)用磁共振成象術(shù)對(duì)患者掃描以便鑒定患者的需要外科手術(shù)的區(qū)域，對(duì)進(jìn)行外科手術(shù)的區(qū)域應(yīng)用超聲術(shù)。應(yīng)用超聲以后跟隨第二個(gè)掃描步驟，其中用磁共振成象對(duì)患者掃描。在超聲應(yīng)用的同時(shí)可應(yīng)用磁共振成象。掃描和外科超聲步驟可重復(fù)進(jìn)行直到獲得所需的效果。氣體填充的泡囊含有在超聲時(shí)釋放到患者的特定區(qū)域的治療劑。另外，本發(fā)明包括利用磁共振成象聚焦的治療的超聲術(shù)控制治療劑釋放到患者的某一區(qū)域的方法。該方法包括以含有治療化合物的氣體填充的泡囊對(duì)患者給藥；利用磁共振成象監(jiān)測(cè)泡囊以便測(cè)定在該區(qū)域存在的泡囊；并且利用超聲術(shù)使泡囊破碎以便在該區(qū)域釋放治療劑。本發(fā)明還涉及利用磁共振成象聚焦的用于外科手術(shù)的超聲術(shù)的方法，包括對(duì)需要手術(shù)的患者以含有氣體前體填充的泡囊的用于磁共振成象的對(duì)比介質(zhì)給藥，使氣體前體發(fā)生從液體到氣體的相轉(zhuǎn)變，用磁共振成象術(shù)對(duì)患者掃描以便鑒定患者的需要手術(shù)的區(qū)域，并且在該區(qū)域應(yīng)用外科手術(shù)超聲術(shù)。相轉(zhuǎn)變步驟和磁共振掃描步驟可以同時(shí)進(jìn)行。對(duì)比介質(zhì)包括穩(wěn)定化的氣體填充的泡囊，其中氣體是生物可溶性氣體，例如氮?dú)饣蛉?，但是它也可以來源于氣體前體，例如，全氟辛基溴，以及由穩(wěn)定作用的化合物例如生物可溶性類脂或聚合體形成而穩(wěn)定該泡囊。本發(fā)明利用氣體前體實(shí)施形成填充氣體的泡囊的氣體，經(jīng)常伴隨相當(dāng)大的優(yōu)點(diǎn)。這些氣體前體可由許多因子活化，優(yōu)選的是被溫度活化。所述氣體前體是一種化合物，其中在選定的活化或相變溫度時(shí)，該化合物發(fā)生從液體或固體到氣體的相變化。因此，通過將化合物的溫度從低于活化或相變溫度提高到高于活化或相變溫度而發(fā)生活化。用類脂形成泡囊時(shí)，類脂可以是單層或雙層形式，并且可以用單層或雙層類脂形成一系列向心單層或雙層。因此，類脂可用于構(gòu)成單層脂質(zhì)體(由一單層或雙層類脂組成)，寡層脂質(zhì)體(由兩或三個(gè)單層或雙層類脂組成)或多層脂質(zhì)體(由多于三層的單層或雙層類脂組成)。優(yōu)選地，生物相容性類脂包括磷脂。非強(qiáng)制性地，對(duì)比介質(zhì)包括順磁和/或超順磁對(duì)比劑，優(yōu)選地由泡囊包被。非強(qiáng)制性地，對(duì)比介質(zhì)也進(jìn)一步包括液體氟化碳合物，例如一種全氟化碳，以便進(jìn)一步使該泡囊穩(wěn)定。優(yōu)選地，液體氟化碳有泡囊包被。本發(fā)明的這些和其它方面根據(jù)下列詳細(xì)描述將變得更顯而易見。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及磁共振成象聚焦的用于外科手術(shù)和治療的超聲術(shù)方法，該方法包括以用于磁共振成象的對(duì)比介質(zhì)對(duì)需要外科手術(shù)的患者給藥，該對(duì)比介質(zhì)含有氣體填充的泡囊，利用所述對(duì)比介質(zhì)用磁共振成象術(shù)對(duì)患者掃描以便鑒定患者的需要外科手術(shù)的區(qū)域，并且在實(shí)施手術(shù)的區(qū)域應(yīng)用超聲術(shù)。在超聲步驟的同時(shí)可應(yīng)用磁共振成象。應(yīng)用超聲以后跟隨第二個(gè)掃描步驟，其中用磁共振成象對(duì)患者掃描。氣體填充的泡囊含有在超聲時(shí)釋放到患者的特定區(qū)域的治療劑。掃描和外科超聲步驟可重復(fù)進(jìn)行直到獲得所需的效果。根據(jù)本發(fā)明，同時(shí)是指用超聲和磁共振掃描可同時(shí)存在或同步使用；依次或連續(xù)使用；以便可觀察到超聲對(duì)泡囊和組織的破碎。因此，超聲和磁共振可同時(shí)進(jìn)行，或一個(gè)跟隨另一個(gè)進(jìn)行。磁共振成象技術(shù)與超聲術(shù)一起使用可提高現(xiàn)在獲得的成像療法的精確性。磁共振成象技術(shù)與超聲術(shù)一起使用的精確性證實(shí)泡囊的位置，因?yàn)榭捎么殴舱癯上髮?duì)整個(gè)身體進(jìn)行掃描，提供了可見的大區(qū)域，并且一旦定位，在身體的給定區(qū)域可用超聲使泡囊破碎。本發(fā)明還涉及利用磁共振成象聚焦的外科手術(shù)超聲術(shù)的方法，包括對(duì)需要手術(shù)的患者以含有氣體前體填充的泡囊的用于磁共振成象的對(duì)比介質(zhì)給藥，使氣體前體發(fā)生從液體到氣體的相轉(zhuǎn)變，用磁共振成象術(shù)和所述對(duì)比介質(zhì)對(duì)患者掃描以便鑒定患者的需要手術(shù)的區(qū)域，并且在該區(qū)域應(yīng)用外科手術(shù)超聲術(shù)。另外，本發(fā)明包括利用磁共振聚焦的治療的超聲術(shù)控制治療劑釋放到患者的某一區(qū)域的方法。該方法包括以含有治療化合物的氣體填充的泡囊的對(duì)比介質(zhì)對(duì)患者給藥；利用磁共振成象監(jiān)測(cè)泡囊以便測(cè)定在該區(qū)域存在的泡囊；并且利用超聲術(shù)破碎泡囊以便在該區(qū)域釋放治療劑。如在上述和整個(gè)說明書中公開的，除非另有說明，否則下列術(shù)語將具有下列含義?！按殴舱癯上笮g(shù)”(MRI)使用靜態(tài)主磁場(chǎng)；脈沖的射頻能量和脈沖的磁梯度以制備圖象，即，使泡囊可見?？衫蒙漕l和電梯度導(dǎo)致局部能量?jī)?chǔ)存，并且活化泡囊，但是為了活化泡囊超聲是優(yōu)選的能量。在實(shí)施本發(fā)明的磁共振成象方法時(shí)，對(duì)比介質(zhì)可單獨(dú)或與其它診斷劑、治療劑或其它藥劑結(jié)合使用。所述其它藥劑包括賦形劑，例如增味和增色物質(zhì)。所應(yīng)用的磁共振超聲術(shù)是常規(guī)的并且描述于例如D.M.Kean和M.A.Smith“磁共振成象術(shù)原理和應(yīng)用”(MagneticResonanceImagingPrinciplesandApplications)(William和Wilkins，Baltimore1986)。所述的MRI技術(shù)包括但不限于，核磁共振(NMR)和電子的自旋共振(ESR)，和磁共振成血管細(xì)胞術(shù)(MRA)。優(yōu)選的成象方式是NMR。當(dāng)然，除MRI以外，也可以利用磁成象術(shù)檢測(cè)本發(fā)明范圍內(nèi)的泡囊。磁成象術(shù)利用磁場(chǎng)，不需要利用脈沖梯度或射頻能量。磁成象術(shù)可用于檢測(cè)磁性泡囊，例如但不限于鐵磁泡囊。利用磁強(qiáng)計(jì)超導(dǎo)量子在下側(cè)測(cè)量裝置(SQUID)完成磁成象術(shù)。SQUID可快速地對(duì)所有的身體組織的磁顆粒進(jìn)行篩選；然后將超聲定位于那些區(qū)域。對(duì)于這方面的應(yīng)用，磁共振成象術(shù)包括磁成象術(shù)，但應(yīng)該了解磁成象術(shù)是磁性泡囊的圖象并且不包括其核共振?！俺暢上笮g(shù)”是在所需的組織上進(jìn)行的，并且一旦到達(dá)其預(yù)定的組織目的地就利用超聲的能量激活或破碎泡囊。聚焦的或涉及的超聲是指將超聲能量應(yīng)用到身體的特定區(qū)域，從而使超聲能量集中到選定的區(qū)域或靶圈內(nèi)。另外，聚焦是指磁共振，它通過使泡囊和靶圈可見而引導(dǎo)超聲；從而用超聲同時(shí)觀察和破碎所述組織。非侵入性是指不切開皮膚而使體內(nèi)組織破碎或失調(diào)。在本發(fā)明中定義的超聲是指導(dǎo)致組織壞死的外科手術(shù)，即組織的破碎和破壞；組織上的孔、穴、破裂處或劃破的修復(fù)(例如疝)，整個(gè)或部分疾病組織(例如腫瘤)的減輕；由超聲能量將鄰接組織的泡囊活化或破碎。超聲術(shù)是與核藥和X-射線不同的診斷成象技術(shù)，因?yàn)樗鼪]有將患者與離子化輻射產(chǎn)生的毒害作用接觸。此外，與磁共振成象技術(shù)不同，超聲術(shù)相對(duì)便宜，可用作為便于移動(dòng)的檢測(cè)。在利用超聲技術(shù)時(shí)，借助于一個(gè)傳感器將聲音傳送到患者或動(dòng)物。當(dāng)聲波傳播過身體時(shí)，它們遇到組織和體液的界面?；隗w內(nèi)組織和體液的聲學(xué)特性，超聲波部分或全部被反射或吸收。當(dāng)聲波被界面反射時(shí)由傳感器中的接收器檢測(cè)并加工形成圖象。體內(nèi)的組織和體液的聲學(xué)特性確定了在得到的圖象中出現(xiàn)了對(duì)比性。另一種可選的方法，利用超聲使泡囊可見，磁共振成象技術(shù)可用于激活泡囊。另外，超聲能量的強(qiáng)烈強(qiáng)度可導(dǎo)致泡囊的破碎和活化。泡囊的活化依次破碎鄰接組織以便導(dǎo)致該組織壞死。任何類型的診斷超聲成象裝置可用于實(shí)施本發(fā)明，該裝置的特定類型或模型不是本發(fā)明方法的關(guān)鍵。設(shè)計(jì)用于超聲檢測(cè)體溫過高的裝置也是合適的，所述裝置描述于美國(guó)專利4,620,546，4,658,828和4,586,512，其所有公開的內(nèi)容作為本文的參考文獻(xiàn)。優(yōu)選地，該裝置具有共振頻(RF)光譜分析儀。傳感器探測(cè)儀可以外部使用或被移植。通常在較低強(qiáng)度時(shí)啟動(dòng)超聲術(shù)，并優(yōu)選的是在峰共振頻率時(shí)持續(xù)，然后提高強(qiáng)度，時(shí)間和/或共振頻率直到微球體破碎?！芭菽摇笔侵柑卣鳛榇嬖趦?nèi)部空隙的球狀整體。優(yōu)選的泡囊是用類脂包括本文中描述的各種類脂配制而成。對(duì)于給定的泡囊，類脂可以是單層或雙層形式，并且可以用單層或雙層類脂形成一個(gè)或多個(gè)單層或雙層。對(duì)于一個(gè)以上的單層或雙層，單層或雙層通常是向心的。本文中描述的泡囊包括通常稱作為脂質(zhì)體、微胞、氣泡、微氣泡、氣凝膠、籠形束縛的泡囊等等的實(shí)體。因此，類脂可用于構(gòu)成單層泡囊(由一單層或雙層類脂組成)、寡層泡囊(由兩或三個(gè)單層或雙層類脂組成)或多層泡囊(由多于三層的單層或雙層類脂組成)。按照需要，泡囊的內(nèi)部空隙可以用液體，包括例如含水液體、氣體、氣體前體和/或固體或溶質(zhì)物質(zhì)，包括例如靶擊配體和/或生物活化劑填充?！爸|(zhì)體”通常是指兩親性化合物的球束或集合體，包括通常一個(gè)或多個(gè)向心層形式的類脂化合物。最優(yōu)選的氣體填充的脂質(zhì)體被構(gòu)建成單純類脂層(即單層)或類脂的單個(gè)單層。可用各種各樣的類脂制作脂質(zhì)體，包括磷脂和非離子表面活性劑(例如niosomes)。最優(yōu)選的包括氣體填充的脂質(zhì)體的類脂是在生理溫度下呈凝膠狀態(tài)?？蓪⒅|(zhì)體交聯(lián)或聚合，并且在其表面攜帶聚合體例如聚乙二醇。將針對(duì)表皮細(xì)胞的靶擊配體結(jié)合到氣體填充的脂質(zhì)體的表面。靶擊配體是結(jié)合到泡囊的一種物質(zhì)，并且它將泡囊導(dǎo)向特定的細(xì)胞類型例如但不限于表皮組織和/或細(xì)胞。靶擊配體可以通過共價(jià)鍵或非共價(jià)鍵結(jié)合到泡囊。本文中脂質(zhì)體也被稱為類脂泡囊。最優(yōu)選的脂質(zhì)體在其內(nèi)部實(shí)質(zhì)上是不含水的?！拔笔侵府?dāng)類脂化合物十二烷基硫酸酯的濃度在臨界溫度以上時(shí)由類脂化合物形成的膠體。由于形成微胞的許多化合物也具有表面活性劑特性(即能夠降低表面張力以及喜歡水和脂肪的親水和親脂區(qū)域)，也可用這些物質(zhì)穩(wěn)定氣泡。通常，這些微胞物質(zhì)喜歡采用單層或六方形H2相構(gòu)型，也還采用雙層構(gòu)型。當(dāng)用微胞物質(zhì)形成氣體填充的泡囊時(shí)，通常該化合物采用含有朝向泡囊的脂肪族(脂肪喜歡的)成份和背向泡囊表面的親水區(qū)的徑向構(gòu)型。為了靶擊表皮細(xì)胞，將靶擊配體結(jié)合到微胞化合物上或結(jié)合到與微胞化合物混合的兩親性物質(zhì)上。另一種可選的方法，靶擊配體可吸附到使泡囊穩(wěn)定的微胞物質(zhì)表面。“水凝膠”是指類似于微球體的結(jié)構(gòu)，所不同的是通常水凝膠的內(nèi)部結(jié)構(gòu)由多個(gè)小空隙而不是一個(gè)空隙組成。另外，優(yōu)選的水凝膠由合成物質(zhì)組成(例如從烘烤間苯二酚和甲醛制備的泡沫體)，但是例如聚多糖或蛋白質(zhì)的天然物質(zhì)也可以用于制備水凝膠。靶擊配體可吸附到水凝膠的表面。“籠形體”通常是指固體物質(zhì)，它與作為宿主的泡囊結(jié)合，而不是覆蓋泡囊的表面。固體、半多孔或多孔籠形體可用作為穩(wěn)定泡囊的藥劑，但是籠形體本身不能覆蓋泡囊的整個(gè)表面。而是，籠形體形成已知為“籠”的具有固定泡囊的空間的結(jié)構(gòu)，籠形體可吸附一個(gè)或多個(gè)泡囊。與微球體類似，一種或多種表面活性劑可摻入籠形體并且這些表面活性劑將幫助穩(wěn)定泡囊。通常表面活性劑覆蓋泡囊并且?guī)椭S持泡囊與籠形體的結(jié)合。穩(wěn)定泡囊的有用的籠形體物質(zhì)包括多孔的磷灰石例如羥基磷灰石鈣和聚合體與金屬離子的沉淀例如藻酸與鈣鹽。針對(duì)表皮細(xì)胞的靶擊配體可摻入到籠形體本身或摻入到與籠形體結(jié)合的表面活性劑物質(zhì)。不受任何特定的操作理論的束縛，據(jù)認(rèn)為本發(fā)明至少部分依賴于如下的事實(shí)氣體、液體和固體相有不同的磁化率。在氣體和水的界面，例如磁區(qū)域被改變，這導(dǎo)致例如氫核的自旋的相位移后。在成象時(shí)可看到表現(xiàn)為與氣體/水界面鄰接的信號(hào)強(qiáng)度降低。在T2加權(quán)的圖象中這種作用更明顯，并且最主要表現(xiàn)在梯度回聲脈沖連貫性。利用窄譜帶寬度的延伸讀出的脈沖連貫性可提高這種作用。對(duì)梯度回聲脈沖連貫性的回聲時(shí)間越長(zhǎng)，作用越大(即信號(hào)損失的程度和大小越大)。據(jù)認(rèn)為用于本發(fā)明中的穩(wěn)定化的氣體填充的泡囊依賴于該相磁化率的不同以及在本文中描述的其它特性，并且提供高效水平的磁共振成象對(duì)比介質(zhì)以及使對(duì)比介質(zhì)的泡囊的有效破碎。從穩(wěn)定化的化合物的基質(zhì)形成即制備泡囊，所述化合物建立起氣體填充的泡囊并且之后在磁共振成象技術(shù)中使用所需的時(shí)間內(nèi)保留其大小及形狀。該化合物還允許在一定的能量水平破碎泡囊，優(yōu)選的所述能量是超聲能量。最典型的這些穩(wěn)定化化合物是那些具有疏水/親水特性的化合物，以便它們?cè)谒嬖谙滦纬蓡螌踊螂p層等，以及泡囊。因此，通常在本文常稱為稀釋劑的水，鹽水或其它水基介質(zhì)是本發(fā)明的穩(wěn)定化氣體填充的泡囊對(duì)比介質(zhì)。事實(shí)上，穩(wěn)定化化合物可以是授予穩(wěn)定化的泡囊各種所需的特性的化合物的混合物。例如，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)有助于基本的穩(wěn)定化的化合物的溶解和分散的化合物具有優(yōu)點(diǎn)。穩(wěn)定化的泡囊的其它元素是氣體，它在制備泡囊時(shí)是氣體，或可以是氣體前體，它對(duì)活化因子例如溫度易起感應(yīng)，并且從液體或固體相轉(zhuǎn)變?yōu)闅庀唷，F(xiàn)在將描述用于本發(fā)明的穩(wěn)定化的氣體填充的對(duì)比介質(zhì)的各個(gè)方面。使用方法根據(jù)本發(fā)明，提供了磁共振聚焦的同步的非侵入性超聲術(shù)方法。通過將用于磁共振成象的對(duì)比介質(zhì)對(duì)需要外科手術(shù)的患者給藥，該對(duì)比介質(zhì)含有氣體填充的泡囊，用磁共振成象術(shù)給患者掃描以便鑒定患者的需要外科手術(shù)的區(qū)域，并且在該區(qū)域應(yīng)用超聲術(shù)和磁共振技術(shù)，從而實(shí)施本發(fā)明的成象方法?；颊叩膮^(qū)域是指整個(gè)患者或患者的特定區(qū)域或部分。在對(duì)患者給藥后，采用MRI觀察在磁共振成象中可見的泡囊。當(dāng)根據(jù)MRI確定泡囊的位置是在患者的所需區(qū)域，然后將能量?jī)?yōu)選的是超聲能量應(yīng)用到該區(qū)域。該能量使泡囊活化，加熱和直接和快速地使周圍組織凝固壞死(外科超聲術(shù))。同時(shí)，如果需要，通過磁共振成象技術(shù)也可觀察該區(qū)域。優(yōu)選的是，用于泡囊活化的能量是高能量的連續(xù)的超聲波，優(yōu)選的是高于50毫瓦/cm2，更優(yōu)選的是100毫瓦/cm2。取決于所需的治療效果，能量可以是更高，最高達(dá)10瓦/cm2。最優(yōu)選的是利用手掌握的磁共振相容性超聲傳感器將能量?jī)?chǔ)存在該組織。超聲傳感器是由非亞鐵離子和非鐵磁性物質(zhì)制備的。將能量供應(yīng)給超聲傳感器的電纜具有法拉第常數(shù)護(hù)罩以便降低由電能穿過電纜供應(yīng)傳感器引起膺像的可能。用于治療的超聲的能量和脈沖的持續(xù)時(shí)間將取決于治療目的。優(yōu)選的是將超聲能量集中并且選定焦點(diǎn)圈以便靶擊預(yù)定的泡囊區(qū)域。聚焦的超聲手術(shù)以約2瓦/cm2的能量進(jìn)行。聚焦超聲手術(shù)能量可以是至少2瓦/cm2-約10瓦/cm2。導(dǎo)致組織的直接的和快速的凝集壞死。同時(shí)對(duì)用于觀察靶圈或區(qū)域的泡囊實(shí)施MRI。然后與超聲技術(shù)一起在該靶圈泡囊加強(qiáng)該手術(shù)的效果。從約500毫瓦/cm2-約10瓦/cm2，優(yōu)選的是約1瓦的能量范圍對(duì)氣穴現(xiàn)象的組織的破壞有效。泡囊降低了氣穴現(xiàn)象的臨界值，以便在靶組織的范圍內(nèi)以導(dǎo)致組織破壞的低能量的臨界值出現(xiàn)氣穴現(xiàn)象。在從約50毫瓦/cm2-500毫瓦/cm2的能量范圍內(nèi)發(fā)生泡囊的破碎或活化。通過非氣穴作用可以破碎泡囊。當(dāng)泡囊被超聲能量足夠快速和強(qiáng)烈地脈沖時(shí)，泡囊膜退化。當(dāng)將能量和脈沖以指定的能量范圍應(yīng)用時(shí)，與泡囊破碎相關(guān)的瞬間微區(qū)域的溫度提高出現(xiàn)，而該方法沒有損害周圍組織。破碎泡囊的這種效果有利于用于治療劑的定位釋放。由此，利用該技術(shù)可看見治療劑釋放到身體的一定區(qū)域。再者，來自泡囊破碎的能量可用于制造沖擊波，以便也將儲(chǔ)存的治療劑釋放到鄰接組織。這特別適用于基因治療，其中可利用沖擊波在鄰接細(xì)胞膜瞬間打開孔，有助于細(xì)胞吸收遺傳物質(zhì)。以泡囊作為核，可利用約500毫瓦/cm2-5瓦/cm2范圍的能量提高高能量聲音在為定位的組織的轉(zhuǎn)變，從而將組織加熱和誘導(dǎo)體溫過高。對(duì)于氣體前體的情況，當(dāng)超聲能量集中于該前體時(shí)，它可引起前體轉(zhuǎn)變?yōu)闅怏w狀態(tài)。擴(kuò)大的氣體空穴制造了磁化率提高的一個(gè)區(qū)域，并且在磁共振成象中被快速地監(jiān)測(cè)。通過選擇合適限定的液體轉(zhuǎn)變?yōu)闅怏w的溫度例如全氟己烷在56℃，選定前體可特別加強(qiáng)監(jiān)測(cè)效果。因此本發(fā)明還可用于在MRI過程中監(jiān)測(cè)非侵入性溫度。當(dāng)從氣體前體形成泡囊時(shí)，氣體前體周圍的物質(zhì)被破碎。另外，治療劑可局部釋放到鄰接組織，而治療劑被共破碎于泡囊內(nèi)。當(dāng)泡囊形成時(shí)由泡囊界面吸收的能量增加。這可用于增加體溫過高的加熱以及破碎泡囊。對(duì)比介質(zhì)特別適用于提供心血管和胃腸區(qū)域的成象并且允許在心血管和胃腸區(qū)域?qū)嵤┏暿中g(shù)和/或藥物釋放，但是也能夠更廣泛地用于例如血管系統(tǒng)的成象或以本領(lǐng)域內(nèi)技術(shù)人員顯而易見的其它方式使用。在本文中使用的術(shù)語心血管區(qū)域是指由心臟和導(dǎo)向心臟和來自心臟的血管系統(tǒng)的患者的區(qū)域。在本文中使用的術(shù)語胃腸區(qū)域或胃腸道包括由食管、胃、小腸和大腸和直腸限定的患者的區(qū)域。在本文中使用的術(shù)語血管系統(tǒng)是指身體的或身體的器官或部分的血管(動(dòng)脈、靜脈等等)?；颊呖梢允侨魏晤愋偷牟溉閯?dòng)物，但是最優(yōu)選的是人。將會(huì)發(fā)現(xiàn)在同步的磁共振聚焦的非侵入性超聲術(shù)中用作為對(duì)比介質(zhì)的新的穩(wěn)定化的氣體填充的泡囊適合于在所有使用MRI的區(qū)域使用。如本領(lǐng)域內(nèi)技術(shù)人員將會(huì)認(rèn)識(shí)到，用于本發(fā)明中的穩(wěn)定化氣體填充的泡囊的給藥可以以各種不同的方式，例如血管內(nèi)、口服、直腸內(nèi)等等方式，以各種劑量形式給藥。當(dāng)待掃描的區(qū)域是心血管區(qū)域時(shí)，優(yōu)選的是本發(fā)明的對(duì)比介質(zhì)以血管內(nèi)給藥。當(dāng)待掃描的區(qū)域是胃腸區(qū)域時(shí)，優(yōu)選的是本發(fā)明的對(duì)比介質(zhì)以口服或直腸內(nèi)形式給藥。有效的給藥劑量和給藥的特定方式取決于患者的年齡、重量、特定的哺乳動(dòng)物和待掃描的區(qū)域以及將會(huì)使用的特定的本發(fā)明的對(duì)比介質(zhì)。通常，起始時(shí)供給較低水平的劑量，然后提高到獲得所需的對(duì)比度加強(qiáng)?？衫酶鞣N結(jié)合的穩(wěn)定化的氣體填充的泡囊以便修飾介質(zhì)的松散性行為或改變例如粘度、滲透性或可口性(對(duì)于口服給藥的材料的情況)的特性。在實(shí)施本發(fā)明的同步的磁共振聚焦的非侵入性超聲方法時(shí)，對(duì)比介質(zhì)可以單獨(dú)使用或與其它診斷、治療或其它藥劑結(jié)合給藥。所述其它藥劑包括賦形劑例如調(diào)味劑或調(diào)色劑。所使用的磁共振成象技術(shù)是常規(guī)技術(shù)，可參見例如D.M.Kean和M.A.Smith“磁共振成象技術(shù)原理和應(yīng)用”(William和Wilkins，Baltimore1986)。所述的MRI技術(shù)包括(但不限于)核磁共振(NMR)和電旋轉(zhuǎn)共振(ESR)。優(yōu)選的成象方式為NMR。如上所述，氣體填充的泡囊的應(yīng)用區(qū)域和給藥方式不僅限于血量空間，即血管系統(tǒng)。如果由口攝入泡囊，以便使胃腸道成象并且破碎其中的泡囊，那么利用在本發(fā)明中使用的氣體填充的泡囊可以完成同步的磁共振成象技術(shù)聚焦的非侵入性超聲技術(shù)。另一種可選的方法是，以這些穩(wěn)定化的氣體填充的泡囊的直腸給藥可以導(dǎo)致使較低級(jí)的胃腸道包括直腸、降結(jié)腸、橫結(jié)腸、和升結(jié)腸以及闌尾極好地成象，并且破碎其中的泡囊。借助于腸道途徑也可以獲得空腸的成象和回腸可想象地成象；并且破碎這些區(qū)域的泡囊。直接的腹膜內(nèi)給藥可觀察腹膜并且破碎其中的泡囊。也涉及將穩(wěn)定化的氣體泡囊直接給藥到耳導(dǎo)管內(nèi)，以便人們可以看到管道以及咽鼓管，和如果存在穿孔術(shù)，可看到內(nèi)耳。此外，也可以發(fā)生耳內(nèi)泡囊的激活和破碎。也涉及將穩(wěn)定化的氣體泡囊鼻內(nèi)給藥以便幫助觀察鼻隔膜以及鼻竇，并且破碎其中的泡囊。也可以組織間隙給藥。因此可以增加本發(fā)明的泡囊對(duì)比劑的其他給藥途徑和成象以及破碎泡囊的組織區(qū)域，包括(但不限于)1)鼻內(nèi)給藥，以便使鼻通道和鼻竇包括鼻區(qū)域和竇和竇狀腺成象；2)鼻內(nèi)和口內(nèi)給藥，以便使呼吸道的其余部分包括氣管、支氣管、細(xì)支氣管和肺成象；3)蝸管內(nèi)給藥，以便使聽覺通道和咽鼓管，鼓室膜和外和內(nèi)耳和耳管成象；4)眼內(nèi)給藥，以便與視覺相關(guān)區(qū)域成象；5)腹膜內(nèi)給藥，以便使腹膜可見；以及6)膀胱內(nèi)即通過膀胱給藥，以便借助于該區(qū)域使生殖泌尿道區(qū)域包括但不限于尿道、膀胱、輸尿管、腎臟和腎的血管系統(tǒng)以及更遠(yuǎn)的部位成象，例如，實(shí)施膀胱造影術(shù)或證實(shí)輸尿管反流的存在。另外，也可以類似的方法使腦、脊柱、肺區(qū)域、以及例如和不包括肥胖組織的軟組織、肌肉、和器官成象并且可利用超聲技術(shù)完成這些區(qū)域的外科手術(shù)。利用本發(fā)明的程序可實(shí)施超聲介導(dǎo)的外科手術(shù)。超聲介導(dǎo)的外科手術(shù)是指有效地導(dǎo)致組織壞死的外科手術(shù)，即破碎、破壞或組織的修復(fù)例如組織膜上小損傷(孔、破裂處或劃破)的修復(fù)(例如疝)；整個(gè)或部分疾病組織(例如腫瘤)的減輕；由超聲能量將鄰接組織的泡囊活化或破碎。氣體和氣體前體本發(fā)明的泡囊包裹氣體和/或氣體前體。本文中所用的術(shù)語“氣體和/或氣體前體填充的”是指本發(fā)明所述的泡囊具有內(nèi)腔，該內(nèi)腔至少含有10％氣體和氣體前體，優(yōu)選的是至少含有約25％氣體和氣體前體，較優(yōu)選的是含有至少約50％氣體和氣體前體，更優(yōu)選的是含有75％氣體和氣體前體，最優(yōu)選的是含有至少約90％的氣體和氣體前體。在使用中氣體的存在是重要的，較好的是泡囊內(nèi)腔至少含有約10％氣體，優(yōu)選的是至少含有約25％，50％，75％，和最優(yōu)選的是至少含有90％氣體。任何生物可溶性氣體和氣體前體都可以用于本發(fā)明的氣體和氣體前體填充的泡囊。所述氣體包括例如空氣、氮?dú)狻⒍趸?、氧氣、氬氣、氟氣、氙氣、氖氣、氦氣、銣加?qiáng)的(高度極化)氙氣、銣加強(qiáng)的氬氣、銣加強(qiáng)的氦氣、銣加強(qiáng)的氖氣或它們的組合。例如，NMR與19F一起使用比使用液體或固體能提高更靈敏的可見度。另外，各種氟化的化合物例如各種全氟化碳、氫氟化碳、和六氟化硫氣體可以用于制備氣體填充的泡囊。也可以使用在Quay公開的申請(qǐng)WO93/05819中氣體，包括本文中描述的“Q”因子氣體(該文獻(xiàn)引入本文作為參考)。此外，可以使用順磁氣體和例如17O的氣體。氧氣應(yīng)該是穩(wěn)定的，因?yàn)檠鯕馐强扇苡谘旱?。采用?yōu)選的是聚合的或交聯(lián)的脂質(zhì)體或氰基丙烯酸酯微球體的非滲透性殼；或與全氟化碳例如全氟戊烷或全氟丁烷一起使用可以達(dá)到穩(wěn)定化。所用的氣體中，全氟化碳和六氟化硫是優(yōu)選的。合適的全氟化碳?xì)怏w包括例如全氟丁烷、全氟環(huán)丁烷、全氟甲烷、全氟乙烷、全氟丙烷、全氟戊烷、全氟己烷、最優(yōu)選地是全氟丙烷。不同類型的氣體的混合物也是優(yōu)選的，例如全氟化碳?xì)怏w和其它類型的氣體例如氧氣等等。的確，據(jù)認(rèn)為氣體的組合特別適合用于同步的磁共振聚集的非侵入性超聲技術(shù)。氣體前體也可以是固體形式?；诠腆w前體形式的激活，碳酸鈉晶體產(chǎn)生二氧化碳?xì)怏w。固體和液體氣體前體特別適用于體溫過高的超聲處理，可以將前體激活為氣體狀態(tài)。不管是由穩(wěn)定化合物所制備的充氣和氣體前體的泡囊的要求，最好同樣使用具有相當(dāng)高穩(wěn)定性的氣體。高穩(wěn)定性氣體是指那些選自在含水介質(zhì)中具有低(有限的)溶解性和擴(kuò)散性的氣體。氣體如全氟化碳具有較低的擴(kuò)散性和相對(duì)不溶性，因此在含水介質(zhì)中更易穩(wěn)定成氣泡形式。使用氣體前體是本發(fā)明一種任選的方案。特別是已發(fā)現(xiàn)全氟化碳適合用作氣體前體。正如專業(yè)人員所認(rèn)識(shí)到的，當(dāng)本發(fā)明中所用的泡囊被首先形成時(shí)，已知的全氟化碳可被用作氣體前體，即為液態(tài)，或可直接被用作氣體，即為氣態(tài)，以構(gòu)成充氣和氣體前體泡囊。當(dāng)然，這樣一種全氟化碳是氣體還是液體或固體依賴于其液/氣相或固/氣相變溫度，或沸點(diǎn)。例如，較優(yōu)選的全氟化碳之一是全氟戊烷，其液/氣相變溫度或沸點(diǎn)為27℃，這意味著在普通室溫下此化合物為液體形式，但在人體的環(huán)境下將變成氣體，這是由于人體溫度高于其液/氣相變溫度或沸點(diǎn)。因此，在正常情況下，全氟戊烷為氣體前體。至于另外的實(shí)施例，有全氟丁烷和全氟己烷，它們?yōu)槿焱榈淖羁拷耐滴?。全氟丁烷的?氣相變溫度為4℃且全氟己烷為57℃，使前者成為有效的氣體前體，但可能作為氣體更有用，然而通常后者卻不得不作為氣體前體，除非是在獨(dú)特情況下，因?yàn)槠涓叻悬c(diǎn)的緣故。本發(fā)明的另一方面是使用氟化的化合物，特別全氟化碳幫助或增強(qiáng)所述充氣和氣體前體泡囊的穩(wěn)定性，所述全氟化碳在本發(fā)明泡囊的使用溫度下為液態(tài)。所述氟化化合物包括各種液體氟化化合物，例如由杜邦公司(Wilmington，DE)制造的氟化表面活性劑即ZONYLTM，以及液體全氟化碳。這種作為附加穩(wěn)定劑有用的全氟化碳包括全氟辛基溴(PFOB)、全氟萘烷、perfluorodo萘烷、全氟辛基碘、全氟三丙胺、全氟三丁胺。通常，長(zhǎng)度超過六個(gè)碳原子的全氟化碳在正常人體溫度下將不是氣體，即非氣態(tài)，而是液體，即為液態(tài)。然而，這些化合物又可在制備本發(fā)明中使用的穩(wěn)定的/充氣和氣體前體泡囊中使用。最好這種全氟化碳是全辛基溴或全氟己烷，其在室溫下為液態(tài)。存在的氣體可以是如全氟丙烷或氮?dú)?，或可由氣體前體衍生得到，此氣體前體也可以是全氟化碳，如全氟戊烷。假使那樣的話，本發(fā)明泡囊將由全氟化碳混合物制備，可給出的全氟化碳實(shí)例有全氟丙烷(氣體)和全氟戊烷(氣體前體)和氟辛基溴(液體)。盡管不打算引用任何理論，但據(jù)推理液體氟化合物位于氣體和泡囊膜表面間的界面上。從而在用于形成泡囊的穩(wěn)定化化合物即生物可溶性類脂的內(nèi)表面上形成全氟化碳穩(wěn)定層，此全氟化碳層也可用于防止氣體擴(kuò)散通過泡囊膜。本發(fā)明范圍之內(nèi)的氣體前體在制備和/或貯藏的溫度下為液體，但至少在使用時(shí)或使用期間變成氣體。例如，已發(fā)現(xiàn)液體氟化化合物例如全氟化碳當(dāng)與通常用于制備本發(fā)明的泡囊的氣體或氣體前體結(jié)合時(shí)可以給予比單獨(dú)使用氣體或氣體前體得不到的附加的程度的穩(wěn)定性。因此，在本發(fā)明范圍內(nèi)可以將或氣體前體如全氟化碳?xì)怏w前體，如全氟戊烷與患者給藥后仍保持液體的全氟化碳一同使用，即與其液體至氣體的相變溫度高于患者體溫的全氟化碳一同使用，如全氟辛基溴。任何生物溶性氣體或氣體前體均可用于形成穩(wěn)定的充氣和氣體前體泡囊?！吧锟扇苄浴笔侵笟怏w或氣體前體導(dǎo)入病人的組織內(nèi)時(shí)將不會(huì)產(chǎn)生任何程度的不可接受的毒性，包括變應(yīng)原應(yīng)答和疾病狀態(tài)，并且最好為隋性。這樣的一種氣體或氣體前體也應(yīng)當(dāng)適于制備可用作本文中所述的充氣和氣體前體的泡囊。使用本文中穩(wěn)定的化合物，氣體和氣體前體填充的泡囊變得更加穩(wěn)定，然后調(diào)整泡囊的大小以適應(yīng)特定的MRI的應(yīng)用。例如，血管系統(tǒng)的磁共振成象技術(shù)需要不大于30μ直徑的泡囊，優(yōu)選的是較小的泡囊，例如不大于約12μ的直徑的泡囊，如果需要，氣體和氣體前體填充的泡囊的大小可通過一系列措施加以調(diào)節(jié)，這些措施包括微乳化、渦旋、擠壓、過濾、超聲處理、均化、重復(fù)凝固和融化循環(huán)，通過給定大小的微孔加壓擠出，以及類似的方法。對(duì)于血管內(nèi)使用，通常泡囊的平均直徑低于30μ，優(yōu)選的是平均直徑低于12μ。對(duì)于靶擊的血管內(nèi)使用，例如，結(jié)合到一定的組織如腫瘤，泡囊的直徑可以是低于1um的，甚至低于100nm的可看得見的范圍。對(duì)于腸內(nèi)即胃腸道給藥，可以使用大一些的泡囊，例如最高為1毫米的尺寸，但是平均直徑在20μ和100μ之間是優(yōu)選的。如上所述，相對(duì)于它們的制備、形成和用途，本發(fā)實(shí)施方案還可包括被溫度激活的氣體前體。在下面表1中列出一系列液態(tài)至氣態(tài)相變溫度接近政黨體溫(37℃)或更低的氣體前體和形成10微米最大尺寸的微氣泡所需乳化液滴的大小。表1氣體前體的物理性質(zhì)和形成10μm泡囊的乳化液滴的直徑*</tables>*引自ChemicalRubberCompanyHandbookotChemistryandPhysics，RobertC.WeastandDavidR.Lide，eds.，CRCPress，Inc.BocaRaton，F(xiàn)lorida(1989-1990).下文列出了可能的氣體前體目錄，這些氣體前體可用于形成規(guī)定大小的泡囊。然而，此目錄并非限制性，因?yàn)橛锌赡苁褂闷渌鼩怏w前體實(shí)現(xiàn)此目的。其實(shí)，針對(duì)于各種不同應(yīng)用，實(shí)際上可使用任何液體來制備氣體前體，只要它們處在適當(dāng)溫度時(shí)能夠發(fā)生向氣相的相轉(zhuǎn)移以便在使用的某些時(shí)刻提供氣體。在本發(fā)明中使用的適用氣體前體為六氟丙酮、異丙基乙炔、丙二烯、四氟丙二烯、三氟化硼、異丁烷、1，2-丁二烯、2，3-丁二烯、1，3-丁二烯、1，2，3-三氯-2-氟-1，3-丁二烯、2-甲基-1，3-丁二烯、六氟代-1，3-丁二烯、丁二炔、1-氟-丁烷、2-甲基丁烷、十氟代丁烷、1-丁烯、2-丁烯、2-甲基-1-丁烯、3-甲基-1-丁烯、全氟代-1-丁烯、全氟代-2-丁烯、4-苯基-3-丁烯-2-酮、2-甲基-1-丁烯-3-炔、硝酸丁酯、1-丁炔、2-丁炔、2-氯-1，1，1，4，4，4-六氟丁炔、3-甲基-1-丁炔、全氟代-2-丁炔、2-溴丁醛、羰基硫化物、丁烯腈、環(huán)丁烷、甲基環(huán)丁烷、八氟環(huán)丁烷、全氟環(huán)丁烯、3-氯環(huán)戊烯、八氟環(huán)戊烯、環(huán)丙烷、1，2-二甲基環(huán)丙烷、1，1-二甲基環(huán)丙烷、1，2-二甲基環(huán)丙烷、乙基環(huán)丙烷、甲基環(huán)丙烷、聯(lián)乙炔、3-乙基-3-甲基二吖丙啶、1，1，1-三氟重氮乙烷、二甲胺、六氟代二甲胺、二甲基乙基胺、二(二甲膦)胺、全氟己烷、2，3-二甲基降冰片烷、全氟代二甲基胺、二甲基氧翁氯化物、1，3-二氧戊環(huán)-2-酮、4-甲基-1，1，1，2-四氟代乙烷、1，1，1-三氟乙烷、1，1，2，2-四氟乙烷、1，1，2-三氯-1，2，2-三氟乙烷、1，1-二氯乙烷、1，1-二氯-1，2，2，2-四氟乙烷、1，2-二氟乙烷、1-氯-1，1，2，2，2-五氟乙烷、2-氯-1，1-二氟乙烷、1，1-二氯-2-氟乙烷、1-氯-1，1，2，2-四氯乙烷、2-氯-1，1-二氟乙烷、氯乙烷、氯代五氟乙烷、二氯三氟乙烷、氟乙烷、六氟乙烷、硝基-五氟乙烷、亞硝基五氟乙烷、全氟代乙胺、乙基乙烯基醚、1，1-二氯乙烷、1，1-二氯-1，2-二氟乙烷、1，2-二氟乙烷、甲烷、三氟化甲磺酰氯、三氟化甲磺酰氟、溴化二氟化亞硝基甲烷、溴氟甲烷、溴氯氟甲烷、三氟溴甲烷、硝基二氟氯甲烷、二硝基氯甲烷、氟氯甲烷、三氟氯甲烷、二氟氯甲烷、二氟二溴甲烷、二氧二氯甲烷、氟二氯甲烷、二氟甲烷、碘二氟甲烷、二硅烷醇甲烷、氟甲烷、碘甲烷、三氟碘甲烷、三氟硝基甲烷、三氟亞硝基甲烷、四氟甲烷、氟三氯甲烷、三氟甲烷、2-甲基丁烷、甲醚、甲基異丙基醚、乳酸甲酯、亞硝酸甲酯、甲基硫化物、甲基乙烯基醚、氖、新戊烷、氮?dú)?N2)、一氧化二氮、1，2，3-十九碳烷三羧酸-2-羥基三甲基酯、1-壬烯-3-炔、氧氣(O2)、1，4-戊二烯、正戊烷、全氟戊烷、4-氨基-4-甲基-2-戊酮、1-戊烯、2-戊烯(順)、2-戊烯(反)、3-溴代-1-戊烯、全氟化-1-戊烯、四氯代鄰苯二甲酸、2，3，6-三甲基哌啶、丙烷、1，1，1，2，2，3-六氟代丙烷、1，2-環(huán)氧丙烷、2，2-二氟丙烷、2-氨基丙烷、2-氯丙烷、1-硝基七氟丙烷、1-亞硝基七氟代丙烷、全氟丙烷、丙烯、六氟丙烷、2，3-二氯-1，1，1，2，3，3-六氟丙烷、1-氯丙烯、氯代丙烯(反)、2-氯代丙烷、3-氟代丙烷、丙炔，3，3，3-三氟代丙炔、3-氟苯乙烯、六氟化硫、十氟化二硫(S2F10)、2，4-二氨基甲苯、三氟乙腈、三氟甲基過氧化物、三氟甲基硫化物、六氟化鎢、乙烯基乙炔、乙烯基醚、氬氣。正如前面早已指出那樣，全氟化碳是用作氣體前體以及附加穩(wěn)定組分的優(yōu)選成分。這類全氟化碳成分包括飽和全氟化碳，不飽和全氟化碳，以及環(huán)狀全氟化碳。通常優(yōu)選飽和全氟化碳，它具有CnF2n+2分子式，其中n為1至12，優(yōu)選2至10，較優(yōu)選4至8，且最優(yōu)選5。適宜的飽和全氟化碳的實(shí)例包括四氟甲烷、六氟乙烷、八氟丙烷、十氟丁烷、十二氟戊烷、全氟己烷、以及全氟庚烷。還優(yōu)選具有CnF2n分子式的環(huán)狀全氟化碳，其中n為3至8，優(yōu)選3至6，并且包括如六氟環(huán)丙烷、八氟環(huán)丁烷和十氟環(huán)戊烷。使用有限溶解性氣體使泡囊的功效最佳也是本發(fā)明的一部分。術(shù)語“有限溶解性”是指氣體在四周含水介質(zhì)中憑借其溶解性從泡囊中擴(kuò)散出的能力。在含水介質(zhì)中的較高的溶解性對(duì)泡囊中的氣體賦于了氣壓梯度，這樣使得氣體具有從所述泡囊中擴(kuò)散出來的趨勢(shì)。另一方面，在含水介質(zhì)中較低的溶解性會(huì)降低或削減泡囊和界面之間的梯度，這樣使得氣體從泡囊中擴(kuò)散出來將會(huì)受阻。優(yōu)選包裹在泡囊中的氣體具有比氧低的溶解度，即1份氣體溶于32份水中。參見MathesonGasDataBook，1996MathesonCompanyInc.。較優(yōu)選包裹在泡囊中的氣體具有比空氣要低的水中溶解度；甚至更優(yōu)選包裹中泡囊中的氣體包含具有比氮?dú)庖偷乃腥芙舛鹊臍怏w。穩(wěn)定化合物使用一種或多種穩(wěn)定化合物構(gòu)成泡囊，并確保后續(xù)的氣體或氣體前體的包裹。甚至對(duì)于相對(duì)不溶性、不擴(kuò)散性氣體，如全氟丙烷或六氟化硫，當(dāng)在形成充有氣休和氣體前體的泡囊的過程中使用一種或多種穩(wěn)定化合物，可得到改進(jìn)泡囊制品。相對(duì)于泡囊的大小、形狀和/或其它特性，這些穩(wěn)定化合物保持其穩(wěn)定性和完整性。本文中所用的術(shù)語“穩(wěn)定”或“穩(wěn)定的”意指在有用的時(shí)間周期內(nèi)泡囊基本上是抗降解的，即抗微球體結(jié)構(gòu)或包裹的氣體或氣體前體損失。一般本發(fā)明的泡囊具有良好的貯存期限，在正常環(huán)境條件下在至少約二或三周期間內(nèi)，常常能保持至少約90％原結(jié)構(gòu)的體積。不過優(yōu)選該期間為至少一個(gè)月，較優(yōu)選至少二個(gè)月，甚至更優(yōu)選至少6個(gè)月，更進(jìn)一步優(yōu)選18個(gè)月，且最優(yōu)選三年。因此，充有氣體和氣體前體的泡囊一般具有令人滿意的貯存期限，有時(shí)甚至在不利條件下，如高于或低于那些在正常環(huán)境條件下所得到經(jīng)驗(yàn)溫度和壓力下也如此。在本發(fā)明中使用的泡囊的穩(wěn)定性至少部分可歸于制備所述泡囊的材料，并且常常沒必要使用附加穩(wěn)定添加劑，盡管這種使用是任選的并且常常優(yōu)選如此使用，這類附加穩(wěn)定劑及其特性下文中將給予更詳盡描述。構(gòu)成本發(fā)明泡囊的材料優(yōu)選為生物可溶性類脂或聚合物材料，其中特別優(yōu)生物可溶性類脂。此外，由于在給藥之前配制，即產(chǎn)生微球體或泡沫體能力的簡(jiǎn)單性，這些泡囊可以很方便地當(dāng)場(chǎng)制備。在制備本發(fā)明泡囊中所用的類脂和聚合物是生物相溶的?！吧锵嗳艿摹笔窃谥割愔蚓酆衔飳?dǎo)入到病人組織里時(shí)，它們將不會(huì)產(chǎn)生任何程度的不可接受的毒性，包括變應(yīng)原應(yīng)答和疾病狀態(tài)。優(yōu)選上述類脂或合物為隋性。生物相溶性類脂對(duì)于生物相溶性類脂材料，優(yōu)選這類在自然界中常常被稱作“兩親的”類脂材料(即極性類脂)，它們是指一方面具有親脂性即疏水性，而另一方面同時(shí)又具有疏脂性即親水性的材料的任一組分。親水基團(tuán)可以是帶電部分或其它對(duì)水具有親合性的基團(tuán)。對(duì)制備用于本發(fā)明的穩(wěn)定泡囊有用的類脂的實(shí)例包括天然和合成磷脂。它們包含帶電磷酸鹽“頭部”基團(tuán)，該基團(tuán)是親水的，連接在疏水長(zhǎng)碳鏈尾端。這種結(jié)構(gòu)容許磷脂實(shí)現(xiàn)單雙層(單片層)排列，其中所有水不溶性烴端相互接觸，留出多電荷磷酸鹽頭部區(qū)自由與極性含水環(huán)境相互作用。容易認(rèn)識(shí)到一系列向心雙層是可能的，即寡層和多層，并且這種排布也構(gòu)成了本發(fā)明的一個(gè)方面。形成這種雙層排布的能力是本發(fā)明中有用的類脂材料的一個(gè)特征。另一方面類脂也可為單層形式，并且這種單層類脂可用于形成單一單層(單層)排列。另一方面，單層類脂也可用于形成一系列向心單層，即寡層或多層，并且這種排列也被認(rèn)為是包括在本發(fā)明范圍之內(nèi)。我們還發(fā)現(xiàn)獲得本發(fā)明的穩(wěn)定泡囊的重要性，這些泡囊可以在低于用作穩(wěn)定化合物的類脂的凝膠態(tài)至液晶態(tài)相變溫度下制備。這種相變溫度是指類脂雙層從凝膠態(tài)轉(zhuǎn)變成液晶態(tài)的溫度。例如參見Chapman等人“生物化學(xué)雜志”(J.Biol.Chem.)1974年第249期第2512-2521頁。一般認(rèn)為，凝膠態(tài)至液晶態(tài)的相變溫度越高，在給定溫度下則充氣和氣體前體泡囊的氣體不透性越好。參見DerekMarsh，CRCHandbookofLipidBilayers(CRCPress，BocaRaton，F(xiàn)L1990)，第139頁，給出了飽和二?；?Sn-甘油基-3-膽堿磷酸的主鏈熔點(diǎn)轉(zhuǎn)變。各種類脂的凝膠態(tài)至液晶態(tài)的相變溫度對(duì)本專業(yè)人員而言顯然是顯而易見的，例如，見Gregoriadis編輯的LiposomeTechnology，Vol.I，1-18(CRCPress，1984)中所列。下表2中列出了某些代表性類脂和其相變溫度表2飽和二?；?Sn-甘油基(3)膽堿磷酸主鏈相變溫度*</tables>*DerekMarsh“CRCHandbookofLipidBilayers”，CRCPress，BocaRaton，F(xiàn)lorida(1990)，P.139.已發(fā)現(xiàn)通過向用于形成充氣和氣體前體泡囊的類脂中摻入至少少量帶負(fù)電荷的類脂，有可能提高本發(fā)明所用泡囊的穩(wěn)定性，“至少少量”是指總類脂量的約1至10摩爾百分比。適宜的負(fù)電類脂包括如磷脂酰絲氨酸、磷脂酸和脂肪酸。這類負(fù)電類脂通過阻礙泡囊一起融合而破裂的趨勢(shì)，可以提供附加穩(wěn)定性，即負(fù)電類脂有助于在泡囊外表面上構(gòu)成一均勻負(fù)電荷層，它將被其它泡囊上類似的帶電外層所排斥。這樣，可防止泡囊彼此之間近距離接觸，這種接觸常常導(dǎo)致有關(guān)泡囊的膜或皮層破裂并且導(dǎo)致觸泡囊合并成單一較大的泡囊。當(dāng)然這種合并過程的持續(xù)將導(dǎo)致泡囊顯著降解。用于構(gòu)成泡囊的類脂材料或其它穩(wěn)定化合物還優(yōu)選為柔性的，在本申請(qǐng)中充有氣體和氣體前全的泡囊的柔性是指結(jié)構(gòu)改變其形狀以通過尺寸小于泡囊的孔洞的能力。在選擇適合制備本發(fā)明穩(wěn)定泡囊的類脂時(shí)，發(fā)現(xiàn)各種類脂均適于泡囊的形成。任何本專業(yè)人員已知的適合脂質(zhì)體制備的材料或其組合均特別有用。所用的類脂可以是天然的、合成的或半合成的。可用于制備本發(fā)明所用的充氣和氣體前體泡囊的類脂包括但不限于類脂如脂肪酸、溶血類脂類、具有飽和和不飽和類脂的磷脂酰膽堿，它包括二油酰磷脂酰膽堿、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿、二(十五烷酰)磷脂酰膽堿、二月桂酰磷脂磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)、二硬脂酰磷脂酰膽堿(DSPC)、磷脂酰乙醇胺如二油酰磷脂酰乙醇胺和二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺(DPPE)、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇、神經(jīng)鞘脂類如神經(jīng)鞘磷脂、糖基類脂如神經(jīng)節(jié)苷脂CM1和CM2、糖脂、硫苷脂、糖神經(jīng)鞘脂、磷脂酸如二棕櫚酰磷脂酸，棕櫚酸、硬脂酸、花生四烯酸、油酸、載有聚合物的類脂、所述聚合物如聚乙二醇即PEGY化類脂、幾丁質(zhì)、透明質(zhì)酸或聚乙烯吡咯烷酮、載有磺化的單-、二-、寡-或聚糖的類脂、膽甾醇、膽甾醇硫酸酯以及膽甾醇半琥珀酸酯、維生素E半琥珀酸酯、含有通過醚和酯連結(jié)的脂肪酸的類脂、聚合類脂為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的各種類脂、二乙?；姿狨?、二鯨蠟基磷酸酯、十八烷胺、心磷脂、含有鏈長(zhǎng)為6-8個(gè)碳原子的短鏈脂肪酸的磷脂、具有不對(duì)稱?；湹暮铣闪字?如一條為6碳原子酰基鏈而另一條為12碳原子?；湹暮铣闪字?、神經(jīng)酰胺、非離子類脂包括niosomes如聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪醇、聚氧乙烯脂肪醇醚、聚氧乙烯化脫水山梨醇肪酸酯、聚羥基硬脂酸乙二醇甘油酯、聚蓖麻油酸乙二醇甘油酯、乙氧化大豆甾醇、乙氧化蓖麻油、聚氧乙烯、聚氧丙烯聚合物以及聚氧乙烯脂肪酸硬脂酸酯，甾醇脂肪酸酯包括硫酸膽甾醇酯、丁酸膽甾醇酯、異丁酸膽甾醇酯、棕櫚酸膽甾醇酯、硬脂酸膽甾醇酯、乙酸羊毛甾醇酯、棕櫚酸麥角甾醇酯、以及正丁酸植物甾醇酯，甾醇的糖酸酯包括葡糖苷酸膽甾醇酯、葡糖苷酸羊毛甾醇酯、葡糖苷酸7-脫氫膽甾醇酯、葡糖苷酸麥角甾醇酯、葡糖酸膽甾醇酯、葡糖酸羊毛甾醇酯和葡糖酸麥角甾醇酯，糖酸和醇形成的酯包括葡糖苷酸月桂酯、葡糖苷酸硬脂基酯、葡糖苷酸十四烷酯、葡糖酸月桂酯、葡糖酸十四烷酯、以及葡糖酸十八烷酯，糖與脂肪酸形成的酯包括蔗糖月桂酸酯、果糖月桂酸酯、蔗糖棕櫚酸酯、蔗糖硬脂酸酯、葡糖醛酸、葡糖酸、accharicacid、以及多糖醛酸，皂草苷包括薩灑皂草配基、菝葜配基、常春配基、石竹素和毛地黃毒苷配基，甘油二月桂酸酯、甘油三月桂酸酯、甘油二棕櫚酸酯、甘油和甘油酯包括甘油三棕櫚酸酯、甘油二硬脂酸酯、甘油三硬脂酸酯、甘油二肉豆蔻酸酯、甘油三肉豆蔻酸酯、長(zhǎng)鏈醇包括正癸醇、月桂醇、肉豆蔻醇、鯨蠟醇、以及十八烷醇、6-(5-膽甾烯-3β-基氧基)-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷、二半乳糖二甘油酯、6-(5-膽甾烯-3β-基氧基)-6-氨基-6-脫氧-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖、6-(5-膽甾烯-3β-基氧基)己基-6-氨基-6-脫氧-1-硫代-α-D-吡喃甘露糖苷、12-(((7′-二乙基氨基香豆素-3-基)羰基)甲氨基)十八烷酸、N-[12-(((7′-二乙基氨基香豆素-3-基)羰基)甲氨基)十八?；鵠-2-氨基棕櫚酸、4′-三甲銨基丁酸膽甾烯酯、N-琥珀酰二油酰磷脂酰乙醇胺、1，2-二油酰-Sn-甘油、1，2-二棕櫚酰-Sn-3-琥珀酰甘油、1，3-二棕櫚酰-2-琥珀酰甘油、1-十六烷基-2-棕櫚酰甘油磷酰乙醇胺以及棕櫚酰高半胱氨酸和/或它們的結(jié)合。如果需要，可使用各種陽離子類脂如DOTMA、N-[1-(2，3-二油酰氧基)丙基]-N，N，N-三甲基氯化銨、DOTAP、1，2-二油酰氧基-3-(三甲銨基)丙烷和DOTB、1，2-二油酰基-3-(4′-三甲基銨基)丁?；?Sn-甘油。一般而言，脂質(zhì)體中陽離子類脂與非陽離子類脂的摩爾比可以是如1∶1000，1∶100，優(yōu)選在2∶1至1∶10之間，較優(yōu)選在1∶1至1∶2.5之間，且最優(yōu)選為1∶1(陽離子類脂的摩爾量與非陽離子類脂摩爾量之比，例如DPPC)。當(dāng)陽離子類脂用于構(gòu)成泡囊時(shí)，各種類脂可由非陽離子類脂組成。這種非陽離子類脂優(yōu)選為二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺或二油酰磷脂酰乙醇胺。代替上述陽離子類脂，帶有陽離子聚合物如多熔素或聚精氨酸的類脂，以及膦酸烷基酯、次磷本酸烷基酯和亞磷酸烷基酯也可被用于構(gòu)成泡囊。最優(yōu)選的類脂為磷脂，優(yōu)選DPPC，DPPE，DPPA和DSPC，且最優(yōu)選DPPC。此外，可用于制造本發(fā)明中使用的穩(wěn)定泡囊(為充有氣體和氣體前體的混合微泡形式)的飽和和不飽和脂肪酸的實(shí)例可包括最好含有12至22個(gè)碳原子的直鏈或支鏈形式的分子。也可使用由類異戊二烯單元組成和/或含異戊二烯基的烴基。適宜的飽和脂肪酸實(shí)例包括(但不限于)月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、以及硬脂酸，可使用的不飽和脂肪酸的實(shí)例包括(但不限于)月桂烯酸、抹香鯨酸、肉豆蔻腦酸、棕櫚油酸、6-十八烯酸、以及油酸，可用的支鏈脂肪酸的實(shí)例包括(但不限于)異月桂酸、異肉豆蔻酸、異棕櫚酸、以及異硬脂酸。除飽和和不飽和基團(tuán)外，充有氣體和氣體前體的混合泡囊也可由5碳類異二烯和含異戊二烯的基團(tuán)構(gòu)成。另外，部分氟化磷脂可用作為包裹泡囊的穩(wěn)定化合物。生物相溶性聚合物用作制備本發(fā)明充氣和氣體前體泡囊的穩(wěn)定化合物的生物相溶性聚合物可以是天然的、半合成的(經(jīng)修飾的天然物)或合成的。此處術(shù)語“聚合物”表示由兩個(gè)或多個(gè)重復(fù)單體單元，優(yōu)選10個(gè)或更多個(gè)重復(fù)單體單元組成的化合物。此處術(shù)語“半合成聚合物(或改性的天然聚合物)”是指在某些方面被化學(xué)改性的天然聚合物。適于本發(fā)明使用的典型天然聚合物包括天然存在的多糖。這類多糖包括如阿聚糖、果聚糖、脫氧半乳聚糖、半乳聚糖、聚半乳糖醛酸、葡聚糖、甘露聚糖、木糖(如葡糖)、左聚糖、巖藻依聚糖、角叉菜膠、galatocarolose、果膠酸、果膠酶、直鏈淀粉、茁霉多糖、糖原、支鏈淀粉、纖維素、右旋糖酐、石臍素、幾丁質(zhì)、瓊脂糖、角質(zhì)素、軟骨素、皮膚素、透明質(zhì)酸、藻酸、山噸膠、淀粉和各種不同的天然均聚物或雜聚物如那些含有一種或多種下述醛糖、酮糖、酸或胺的聚合物赤蘚糖、蘇糖、核糖、阿糖、木糖、來蘇糖、阿洛糖、阿卓糖、葡萄糖、甘露糖、古洛糖、艾杜糖、半乳糖、塔羅糖、赤蘚酮糖、核酮糖、木酮糖、阿洛酮糖、果糖、山梨糖、塔洛糖、甘露醇、山梨糖醇、乳糖、蔗糖、海藻糖、麥芽糖、纖維二糖、甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖酸、葡萄糖二酸、半乳糖醛酸、甘露糖醛酸、葡萄糖胺、氨基半乳糖、和神經(jīng)氨酸以及它們天然存在的衍生物。典型的半合成聚合物包括羧甲基纖維素、羥甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素和甲氧基纖維素。典型的適合在本發(fā)明中使用的合成聚合物包括聚乙烯類(如聚乙二醇、聚氧乙烯、及聚對(duì)苯二甲酸乙酯)、聚丙烯類(如聚丙二醇)、聚亞胺酯(如聚乙烯醇(PVA)、聚氯乙烯和聚乙烯吡咯烷酮)、包括尼龍的聚酰胺、聚苯乙烯、聚乳酸、氟代烴、氟化碳(如聚四氟乙烯)和聚甲基丙烯酸甲酯，以及它們的衍生物。本專業(yè)人員一旦掌握了本申請(qǐng)內(nèi)容，結(jié)合本申請(qǐng)和本專業(yè)公知的資料，如見Unger的美國(guó)專利5,205,290中所述內(nèi)容(此文獻(xiàn)內(nèi)容可全部并入本文用作參考)，制備這種聚合物基泡囊的方法就變得顯而易見。優(yōu)選的是，當(dāng)打算用于胃腸道時(shí)，所使用的聚合物是具有相對(duì)強(qiáng)水結(jié)合能力的聚合物。在使用時(shí)，例如在胃腸區(qū)域，具有強(qiáng)的水結(jié)合能力的聚合物結(jié)合大量的游離水，使聚合物攜帶大量的液體穿過胃腸道，從而充滿胃腸道并且使之膨脹。被充滿和膨脹的胃腸道使該區(qū)域具有更清晰的圖象。另外，當(dāng)需要胃腸道區(qū)域成象時(shí)，優(yōu)選的是所使用的聚合物是一種在胃腸道區(qū)域基本上不被降解并且不被吸收的聚合物。使胃腸道區(qū)域內(nèi)的代謝和吸收降低到最小是優(yōu)選的，以便避免對(duì)比劑從胃腸道區(qū)域去除以及避免由于其降解而在胃腸道內(nèi)產(chǎn)生氣體。此外，特別是對(duì)于胃腸道使用的劑量，優(yōu)選的聚合物是它們能夠置換空氣，并使該聚合物組合物中的大量氣泡的形成降低到最小。本發(fā)明特別優(yōu)選的實(shí)施例包括泡囊，其中形成穩(wěn)定的氣體和氣體前體填充的泡囊的穩(wěn)定化化合物包括三種成份(1)中性(例如，非離子和兩性離子)類脂，(2)帶負(fù)電荷的類脂，和(3)攜帶親水聚合物的類脂。優(yōu)選的是，所述帶負(fù)電荷的類脂的量大于占存在的總類脂的1摩爾％，攜帶親水聚合物的類脂的量大于占存在的總類脂的1摩爾％。所述帶負(fù)電荷的類脂是一種磷脂酸也是優(yōu)選的。令人滿意的是，攜帶親水聚合物的類脂是一種共價(jià)結(jié)合到所述聚合物上的類脂，并且所述聚合物優(yōu)選的是具有從400到100,000的平均分子量。所述親水聚合物優(yōu)選的是選自于下列組聚乙二醇、聚丙二醇、聚乙烯醇、和聚乙烯吡咯烷酮和它們的共聚物。PEG和其它的聚合物可以通過共價(jià)鍵與DPPE或其它類脂結(jié)合，例如酰胺、氨基甲酸鹽或胺鍵合。另一種可選的方法，可將酯，醚，硫酯，硫酰胺或二硫鍵(硫酯)與PEG或其它聚合物一起使用以便將該聚合物結(jié)合到例如膽固醇或其它磷脂。如果親水聚合物是聚乙二醇，攜帶這樣一種聚合物的類脂被認(rèn)為是“PEG化的”，對(duì)于聚乙二醇已有文獻(xiàn)將其縮寫為“PEG”。所述攜帶親水聚合物的類脂優(yōu)選的是二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇5000，即具有相互其上攜帶平均分子量為5000的聚乙二醇的二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺類脂(DPPE-PEG5000)；或二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇5000。本發(fā)明所述的優(yōu)選的泡囊的實(shí)例包括例如具有12.5摩爾％的二棕櫚酰磷脂酸(DPPA)和具有10摩爾％的二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇5000(DPPE/PEG5000)的77.5摩爾％的二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)。摩爾百分比分別為82/10/8的這些組合物也是優(yōu)選的。有效的是DPPC組分是中性，因?yàn)榱字２糠质菐ж?fù)電荷的，并且膽堿部分是帶正電荷的。因此，根據(jù)描述的原理將帶負(fù)電荷的DPPA成份加入以增強(qiáng)穩(wěn)定性，進(jìn)一步涉及以帶負(fù)電荷的類脂作為添加劑。第三種成份DPPE、PEG提供了由DPPE成份結(jié)合到類脂膜或泡囊外層上的PEG化的材料，其中游離的PEG成份環(huán)繞著泡囊的膜或外層，并且從而形成了阻擋各種身體的酶和功能是降解外源材料的其它內(nèi)源劑的物理屏障。理論也認(rèn)為PEG化的材料由于與水結(jié)構(gòu)的類似，能夠擊敗人免疫系統(tǒng)的巨噬細(xì)胞的作用，否則所述巨噬細(xì)胞環(huán)繞和去除外源物質(zhì)。結(jié)果是穩(wěn)定化泡囊作為對(duì)比劑時(shí)發(fā)揮作用的時(shí)間提高。其它和輔助穩(wěn)定化合物使用除上面所述的生物相溶性類脂和聚合物之外的物質(zhì)成分制備穩(wěn)定的充氣和氣體前體泡囊也是本發(fā)明的一部分，其條件是如此制備的泡囊滿足本文所述的穩(wěn)定性和其它要求。這些成分可以是基礎(chǔ)和基本的，即形成產(chǎn)生或制備穩(wěn)定的充氣和氣體前體泡囊的主要基料。另一方面，它們可以是輔助性的，即作為輔助或增補(bǔ)劑，它們能增強(qiáng)基本穩(wěn)定化合物的作用，或者能另外提供一些除基本穩(wěn)定化合物所提供的特性之外的所需性質(zhì)。然而，很難確定所給定的化合物是基本化合物還是輔助劑，這是由于所述化合物的作用是由根據(jù)生成穩(wěn)定泡囊所產(chǎn)生的結(jié)果來實(shí)驗(yàn)確定。作為這些基本和輔助化合物怎樣起作用的實(shí)例，已觀察到搖動(dòng)生物相溶性類脂和水或生理鹽水進(jìn)行簡(jiǎn)單結(jié)合常常得到混濁溶液，隨后高壓滅菌。這種混濁溶液可以起對(duì)比劑的作用，但美學(xué)上是令人討厭的并且具有呈不溶或不擴(kuò)散類脂顆粒形式的不穩(wěn)定性。因此，可加入丙二醇通過促進(jìn)類脂顆粒的溶解或擴(kuò)散來除去混濁。丙二醇也起著增稠劑的作用，通過增加泡囊膜或表層的表面張力，可以改進(jìn)泡囊的形成及穩(wěn)定作用。有可能丙二醇進(jìn)一步起著附加層的作用，該層包裹泡囊的膜或表層，因此提供了附加穩(wěn)定性。有關(guān)其它這類基本或輔助穩(wěn)定化合物的實(shí)例，可使用常規(guī)表面活性劑；參見D′Arrigo的美國(guó)專利4,684,479和5,215,680。另外的輔助和基本穩(wěn)定化合物包括這類物質(zhì)如花生油、Canola油、橄欖油、紅花油、玉米油或任何其它通常已知的并且按照本說明書中所列出的要求及說明，適宜用作穩(wěn)定化合物的食用油。此外，用于制備混合膠束體系的化合物也適于用作基本或輔助穩(wěn)定化合物，這些包括(但不限于)月桂基三甲基溴化銨(十二烷基-)、鯨蠟基三甲基溴化銨(十六烷基-)、肉豆蔻基三甲基溴化銨(十四烷基-)、烷基二甲基芐基氯化銨(烷基＝C12，C14，C16)、芐基二甲基十二烷基溴/氯化銨、芐基二甲基十六烷基溴/氯化銨芐基二甲基十四烷基溴/氯化銨、鯨蠟基二甲基乙基溴/氯化銨或鯨蠟基溴/氯化吡啶鎓。已發(fā)現(xiàn)通過選擇不同的本申請(qǐng)中所述的附加或輔助穩(wěn)定劑，可以控制本發(fā)明中所用的充氣和氣體前體泡囊的大小、溶解性和熱穩(wěn)定性。這些穩(wěn)定劑不僅通過它們與類脂涂層的物理作用，而且也通過它們改進(jìn)充有氣體和氣體前體的泡囊的粘性和表面張力的能力來影響泡囊的這些參數(shù)。因此，本發(fā)明所用的充氣和氣體前體的泡囊可通過加入一種或多種下述各種成分被適當(dāng)改進(jìn)并且被進(jìn)一步穩(wěn)定(a)粘度調(diào)節(jié)劑，包括(但不限于)碳水化合物及其磷酸化和磺酸化衍生物；以及聚醚類，優(yōu)選分子量在400和100,000之間的聚醚，二-和三-羥基烷烴及其聚合物，優(yōu)選具有200和50,000之間分子量的；(b)乳化劑和/或加溶劑也可與類脂結(jié)合使用，此得到理想的改良和進(jìn)一的穩(wěn)定作用，這類物質(zhì)包括(但不限于)阿拉伯膠、膽甾醇、二乙醇胺、甘油單硬脂酸酯、羊毛脂醇、卵磷脂、單-和二-甘油酯、單乙醇胺、油酸、油醇、Poloxamer(如Poloxamer188，Poloxamer184和Poloxamer181)、硬脂酸聚氧乙烯50、聚烴氧基35蓖麻油、聚烴氧基10油醚、聚烴氧基20鯨硬脂醚、聚烴氧40硬脂酸酯、聚山梨酸酯20、聚山梨酸酯40、聚山梨酸酯60、聚山梨酸酯80、丙二醇二乙酸酯、丙二醇單硬脂酸酯、十二烷基硫酸鈉、硬脂酸鈉、脫水山梨醇單月桂酯、脫水山梨醇單油酸酯、脫水山梨醇單棕櫚酸酯、脫水山梨醇單硬脂酸酯、硬脂酸、三乙醇胺和乳化蠟；(c)可以與類脂一同使用的懸浮劑和/或粘度增加劑包括(但不限于)阿拉伯膠、瓊脂、藻酸、單硬脂酸鋁、膨潤(rùn)土、巖漿、聚羧乙烯制劑934P、羧甲基纖維素、鈣及鈉和鈉12、角叉菜膠、纖維素、糊精、明膠、瓜耳樹膠、刺槐豆膠、硅酸鎂鋁、羥乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、硅酸鋁鎂、甲基纖維素、果膠、聚環(huán)氧乙烷、聚烯吡酮、丙二醇藻酸酯、二氧化硅、藻酸鈉、黃蓍膠和黃原膠、α-d-葡萄酸內(nèi)酯、甘油、甘露糖醇，(d)還可被使用的合成懸浮劑，如聚乙二醇(PEG)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚乙烯醇(PVA)、聚丙二醇以及多乙氧基醚；以及(e)還可包括張力提高劑，這些試劑包括(但不限于)山梨糖醇、丙二醇及甘油。含水稀釋劑如上早已描述的那樣，當(dāng)泡囊為天然類脂時(shí)，穩(wěn)定泡囊的特定組成為某些種類含水環(huán)境，這種環(huán)境誘導(dǎo)類脂(由于基疏水/親水性質(zhì))形成泡囊(這種環(huán)境中可得到的最穩(wěn)定構(gòu)型)。可用于產(chǎn)生這種含水環(huán)境的稀釋劑包括(但不限于)水，可以是脫離子的或含有任何數(shù)量的溶解鹽等，它們將不會(huì)干擾穩(wěn)定微球體的產(chǎn)生和保持或影響它們作為MRI對(duì)比劑的應(yīng)用，以及常規(guī)鹽水和生理鹽水。順磁和超順磁對(duì)比劑在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的基于穩(wěn)定化氣體填充的泡囊的對(duì)比介質(zhì)進(jìn)一步含有其它對(duì)比劑，例如常規(guī)的對(duì)比劑，它們起著提高用于同步的磁共振聚集的非侵入性超聲術(shù)的對(duì)比介質(zhì)的效力的作用。許多這樣的對(duì)比劑是本領(lǐng)域內(nèi)技術(shù)人員已知的，并且包括順磁和超順磁對(duì)比劑。適用于本發(fā)明的順磁性對(duì)比劑的例子包括穩(wěn)定的游離的基團(tuán)(例如，穩(wěn)定的硝基氧化物)，以及包括過渡、鑭系和錒系元素，如果需要，它們可以是鹽形式或與復(fù)合劑(包括其親脂衍生物)，或與蛋白質(zhì)大分子共價(jià)或非共價(jià)結(jié)合。優(yōu)選的是過渡、鑭系和錒系元素包括Gd(III)、Mn(II)、Cu(II)、Cr(III)、Fe(II)、Fe(III)、Co(II)、Er(II)、Ni(II)、Eu(III)和Dy(III)。更優(yōu)選的所述元素包括Gd(III)、Mn(II)、Cu(II)、Fe(II)、Fe(III)、Eu(III)和Dy(III)，尤其是Mn(H)和Gd(III)。如果需要這些元素可以是鹽形式，例如錳鹽如氯化錳、碳酸錳、乙酸錳、和錳有機(jī)酸鹽例如葡萄糖酸錳和羥磷灰石錳鹽；以及例如鐵鹽，例如硫化鐵和亞鐵鹽例如氯化亞鐵。如果需要，這些元素可以和復(fù)合劑(包括其親脂衍生物)，或與蛋白質(zhì)大分子共價(jià)或非共價(jià)結(jié)合。優(yōu)選的復(fù)合劑包括例如二乙烯三胺-戊酸(DTPA)、乙烯二胺四乙酸(EDTA)、1，4，7，10-四氮雜環(huán)十二烷-N，N’，N’，N-四乙酸(DOTA)、1，4，7，10-四氮雜環(huán)十二烷N，N’，N”-三乙酸(DO3A)、3，6，9-三氮雜-12-氧雜-3，6，9-三羧甲基烯-10-羧基-13-苯基-三癸酸甘油酸(B-19036)、羥基芐基乙烯基-二胺二乙酸(HBED)、N，N’-雙(pyridoxyl-5-磷酸)乙烯二胺，N，N’-二胺(DPDP)、1，4，7-三氮雜環(huán)壬烷-N，N’，N”-三乙酸(NOTA)、1，4，8，11-四氮雜環(huán)四癸烷N，N’，N’，N-四乙酸(TETA)、kryptands(即大環(huán)混合物)、和去鐵敏。更優(yōu)選的是，復(fù)合劑是EDTA、DTPA、DOTA、DO3A和kryptands，最優(yōu)選的是DTPA。優(yōu)選的親脂復(fù)合物包括復(fù)合劑EDTA、DOTA等的烷基化衍生物，例如，EDTA-DDP，即N，N’-雙-(羧基-癸基酰胺甲基-N-2，3-二羥基丙基)-1，2-乙二胺-N，N’二乙酸鹽；EDTA-ODP，即N，N’-雙-(羧基-十八烷基酰胺甲基-N-2，3-二羥基丙基)-1，2-乙二胺-N，N’二乙酸鹽；EDTA-LDP，即N，N’-雙-(羧基-十二烷酰胺甲基-N-2，3-二羥基丙基)-1，2-乙二胺-N，N’二乙酸鹽等等；如在1992年5月22日遞交的美國(guó)申請(qǐng)?zhí)枮?87,290中公開的那些復(fù)合劑，該文獻(xiàn)引入本文作為參考文獻(xiàn)。優(yōu)選的蛋白質(zhì)大分子包括白蛋白、膠原、多精氨酸、多賴氨酸、多組氨酸、γ-球蛋白和β-球蛋白。更優(yōu)選的是，蛋白質(zhì)大分子包括白蛋白、多精氨酸、多賴氨酸、多組氨酸。合適的復(fù)合物包括Mn(II)-DTPA、Mn(II)-EDTA、Mn(II)-DOTA、Mn(II)-DO3A、Mn(II)-kryptand、Gd(III)-DTPA、Gd(III)-DOTA、Gd(III)-DO3A、Gd(III)-kryptands、Cr(III)-EDTA、Cu(II)-EDTA，或鐵-去鐵敏，尤其是Mn(II)-DTPA或Gd-(III)-DTPA。順磁性螯合劑包括例如在美國(guó)專利5,312,617(引入本文作為參考)公開的順磁性離子的烷基化螯合劑，如在美國(guó)專利5,385,719中公開的用于結(jié)合到氣體填充的脂質(zhì)體和結(jié)合到氣體填充的聚合體脂質(zhì)體的表面的順磁性共聚合螯合劑，用于結(jié)合到氣體填充的脂質(zhì)體的磷脂以及結(jié)合到用于構(gòu)建氣體填充的脂質(zhì)體的硝基氧化物的穩(wěn)定化游離基(NSFRs)，和含有一種或多種順磁性離子的最接近于一種或多種NSFRs的螯合劑成份(如在美國(guó)專利5,407,657中概括的)的雜合復(fù)合劑，所述螯合劑可用于構(gòu)建順磁性氣體填充的脂質(zhì)體。這些雜合復(fù)合劑大大地提高了松弛性，因此在磁共振中大大地提高了對(duì)泡囊的敏感性。硝基氧化物是順磁性對(duì)比劑，它借助于硝基分子的一個(gè)未配對(duì)的電子提高T1和T2之間的松散性比例。作為MRI對(duì)比劑的給定的化合物的順磁性效果至少部分與順磁性核或分子的未配對(duì)電子的數(shù)量有關(guān)，特別是未配對(duì)電子數(shù)量的平方有關(guān)。例如，鎘有七個(gè)未配對(duì)的電子，硝基氧化物分子僅有一個(gè)未配對(duì)電子；因此通常鎘是比硝基氧化物更強(qiáng)的MRI對(duì)比劑，但是，有效的相關(guān)時(shí)間，用于評(píng)價(jià)對(duì)比劑效力的另一個(gè)參數(shù)，可能使硝基氧化物的松散性提高。當(dāng)有效的相關(guān)時(shí)間非常接近于質(zhì)子Larmour頻率，松散性比例可急劇提高。當(dāng)下降比例被減慢時(shí)，例如由于順磁性對(duì)比劑結(jié)合到大結(jié)構(gòu)上，使下降變慢，從而更有效地將能量轉(zhuǎn)移，促進(jìn)水的質(zhì)子的松散。但是對(duì)于鎘，電子旋轉(zhuǎn)松散性時(shí)間是快速的，并且將限制到慢速旋轉(zhuǎn)時(shí)間可以提高松散性的程度。但是對(duì)于硝基氧化物，電子旋轉(zhuǎn)相關(guān)時(shí)間則更好，通過使這些分子的旋轉(zhuǎn)相關(guān)時(shí)間變慢，可以使松散性趨向于提高。本發(fā)明的氣體填充的泡囊對(duì)于到達(dá)變慢的旋轉(zhuǎn)相關(guān)時(shí)間和得到松散性的提高的目的是理想的。雖然不打算與特定的操作理論結(jié)合，但是例如通過制備其烷基化衍生物，硝基氧化物可以包被氣體填充的泡囊的周邊，以致于使得到的相關(guān)時(shí)間最佳。此外，可以看到得到本發(fā)明的對(duì)比介質(zhì)為磁球，是松散性最大的幾何構(gòu)型。如果需要，可將硝基氧化物烷基化或者將其制備成衍生物，例如硝基氧化物2，2，5，5-四甲基-1-吡咯烷基氧、游離基和2，2，6，6-四甲基-1-哌啶氧、游離基(TMPO)。適用于本發(fā)明的超順磁對(duì)比劑的例子包括經(jīng)歷過磁場(chǎng)區(qū)的金屬氧化物金屬硫化物、鐵磁化合物、例如純鐵、磁鐵氧化物(磁鐵礦)、γ-Fe2O3、Fe3O4、硫化鐵、磁性鐵酸錳、鐵酸鈷和鐵酸鎳和用磁鐵礦填充的鐵蛋白或其它的磁性活性物質(zhì)例如鐵磁和超順磁物質(zhì)。上文中描述的例如順磁和超順磁對(duì)比劑可用作為泡囊內(nèi)的成份或用于含有泡囊的對(duì)比介質(zhì)。它們被用作泡囊內(nèi)部成份，以溶液形式與泡囊一起給藥，或摻入到形成泡囊壁的穩(wěn)定化的化合物中。將超順磁劑用作為籠形包合物，以吸附到泡囊和使泡囊穩(wěn)定。例如，各種全氟化碳的乳液，例如全氟己烷或與不規(guī)則形狀的鐵氧化物混合的全氟氯碳。鐵氧化物中的疏水的裂縫電子液體氣體前體的毫微小滴吸附到固體物質(zhì)的表面。如果需要例如可將順磁或超順磁對(duì)比劑以烷基化或其它衍生物的形式摻入到穩(wěn)定化合物，尤其是泡囊的類脂壁。具體地說，借助于許多的不同的鍵例如乙酰氧基，硝基氧化物2，2，5，5-四甲基-1-吡咯烷基氧、游離基和2，2，6，6-四甲基-1-哌啶氧，游離基可以與長(zhǎng)鏈脂肪酸在環(huán)上不被甲基占領(lǐng)的位置形成加合物。所述加合物非常適合于摻入到穩(wěn)定化合物中，尤其是類脂的特性，可以形成本發(fā)明的泡囊的壁。同樣一種或多種順磁劑和/或超順磁劑的混合物可用于對(duì)比介質(zhì)。如果需要，上述順磁劑和超順磁劑也可分別用于共給藥。用于本發(fā)明中的氣體填充的泡囊不僅可用作為超順磁劑的有效的載體例如鐵氧化物，而且顯示具有可增加對(duì)比劑磁化率的作用。超順磁對(duì)比劑包括金屬氧化物，特別是鐵氧化物但包括氧化錳，并且作為鐵氧化物，含有各種數(shù)量的經(jīng)歷了磁場(chǎng)區(qū)的錳，鈷和鎳。這些藥劑是毫微或微顆粒，具有非常高的磁化率和橫向的松散性比例。較大的顆粒例如100nm直徑，具有比R1松散性高得多的R2松散性，但較小的顆粒例如10-15nm直徑，具有較低的R2松散性，但是具有更平衡的R1和R2值。最小的顆粒例如直徑為3-5nm的單晶的鐵氧化物顆粒具有較低的R2松散性，但是可能具有最平衡的R1和R2松散性比例。也可能將鐵蛋白進(jìn)行配制以便包被一個(gè)非常高松散性比例的超順磁鐵的核。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在本發(fā)明中使用的氣體填充的泡囊能夠提高基于這些常規(guī)的鐵氧化物的MRI對(duì)比劑的效力和安全性。將鐵氧化物簡(jiǎn)單地?fù)饺氲接糜谥苽渑菽业姆€(wěn)定化合物中。特別是，將鐵氧化物摻入到基于類脂的泡囊的壁，例如吸附到泡囊的表面，或束縛于泡囊的內(nèi)部，如在1992年2月18日授權(quán)的美國(guó)專利5,088,499中描述的。雖然不打算將本發(fā)明的行為方式限定到特定的理論，但是據(jù)認(rèn)為泡囊通過幾種原理提高超順磁對(duì)比劑的效力。首先，據(jù)認(rèn)為泡囊的功能使鐵氧化物顆粒的表觀的磁濃度提高，第二，據(jù)認(rèn)為泡囊提高包括順磁和超順磁劑的MRI對(duì)比劑的表觀的旋轉(zhuǎn)相關(guān)時(shí)間。最后，泡囊似乎以提高表觀的對(duì)比介質(zhì)的磁區(qū)域的新機(jī)理發(fā)揮功能，并且據(jù)認(rèn)為以下文中緊接著描述的方式發(fā)揮作用。泡囊被認(rèn)作為具有不同的懸浮介質(zhì)磁化率的彈性球區(qū)域，所述懸浮介質(zhì)即含水的對(duì)比介質(zhì)懸浮液，和對(duì)于胃腸道給藥的情況是胃腸液，對(duì)于血管內(nèi)注射和注射到另一身體空間是血液或其它體液。當(dāng)考慮鐵酸鹽或鐵氧化物顆粒時(shí)，應(yīng)該注意這些對(duì)比劑對(duì)比性的作用依賴于顆粒大小，即它取決于鐵氧化物顆粒的顆粒直徑。該現(xiàn)象是非常普遍的，并且經(jīng)常被稱作為水分子的“長(zhǎng)期的”松散性。以更物理化的方式描述，松散性機(jī)理是取決于該分子復(fù)合物的效果大小，該復(fù)合物中居留了一個(gè)順磁原子，或一個(gè)順磁分子，或幾個(gè)順磁分子。在下面的SolomonBloembergen等式中描述了一個(gè)物理解釋，其中以被順磁離子困擾的旋磁比例g定義順磁性對(duì)旋轉(zhuǎn)1/2核的T1和T2相關(guān)時(shí)間的關(guān)系1/T1M＝(2/15)S(S+1)γ2g2β2/r6[3Tc/(1+ωl2Tc2)+7Tc/(1+ωs2Tc2)]+(2/3)S(S+1)A2/h2[Te/(1+ωs2Te2)]以及1/T2M＝(1/15)S(S+1)γ2g2β2/r6[4Tc+3Tc/(1+ωl2Tc2)+13Tc/(1+ws2Tc2)]+(1/3)S(S+1)A2/h2[Te/(1+ωs2Te2)]其中S＝電子旋轉(zhuǎn)量子數(shù)；g＝電子的g因子；β＝波爾磁子；ωl和ωs(＝657wl)＝核旋轉(zhuǎn)和電子旋轉(zhuǎn)的拉莫爾角操作頻率；γ＝離子-核的距離；A＝極微小的偶合常數(shù)；Tc和Te＝分別是二極的和梯狀的相互作用的相關(guān)時(shí)間；和h＝普朗克常數(shù)。參見例如Solomon，I.Phys.Rev.99，559(1955)和Bloembergen，N.J.Chem.Phys.27，572，595(1957)，引入本文作為參考。通常一些大顆粒比更大量的小得多的顆粒具有更大的效果，這主要由于較大的相關(guān)時(shí)間。如果將鐵氧化物的顆粒制得更大，然而它們將會(huì)是有毒的，堵塞肺和激活復(fù)雜的串聯(lián)系統(tǒng)。此外，顆粒的總的大小沒有關(guān)系，但是特別是其邊緣或外表面的顆粒的直徑是關(guān)鍵。磁化區(qū)域和磁化率效果相對(duì)于與顆粒的表面呈指數(shù)下降。一般地說，對(duì)于二極(通過表面)松散性機(jī)理的情況，呈指數(shù)下降顯示與r6的依賴性。根據(jù)文獻(xiàn)，離開順磁表面4個(gè)埃的水分子受到的影響比離開順磁表面2個(gè)埃的水分子受到的影響低64倍。對(duì)于將對(duì)比性效果實(shí)現(xiàn)最大的理想情形是鐵氧化物顆粒中空，有彈性，并且盡可能地大。直到現(xiàn)在，還沒有可能做到這一點(diǎn)；此外，直到現(xiàn)在可能已經(jīng)認(rèn)識(shí)到這些利益。通過用對(duì)比劑包被泡囊的內(nèi)部或外表面，即使單個(gè)的對(duì)比劑例如鐵氧化物毫微顆?；蝽槾烹x子是相對(duì)小的結(jié)構(gòu)，對(duì)比劑的效果可能是大大地得到加強(qiáng)。其中，對(duì)比劑作為效力大得多的球起作用，該球中由泡囊的直徑確定磁化的有效區(qū)域，在泡囊的表面磁化區(qū)域最大。這些對(duì)比劑具有彈性，即依從性。而堅(jiān)硬的泡囊裝載于肺或其它器官，并且引起電子毒性反應(yīng)，這些彈性的泡囊更易滑過毛細(xì)管。制備方法用于本發(fā)明的穩(wěn)定化氣體和氣體前體填充的泡囊可用多種合適方法制備。這些對(duì)于泡囊是充氣的，是氣體前體填充的情況分別在下面描述，盡管具有氣體和氣體前體的泡囊是本發(fā)明的部分。應(yīng)用氣體一個(gè)優(yōu)選的方案包含在低于類脂的凝膠向液晶的相變溫度的溫度下，在氣體存在下，攪動(dòng)含有穩(wěn)定化合物，優(yōu)選類脂的水溶液以形成氣體和氣體前體填充的泡囊。本文所用的術(shù)語攪動(dòng)和其變通形式，意指搖動(dòng)水溶液使氣體從周圍環(huán)境被導(dǎo)入水溶液中的任何運(yùn)動(dòng)。搖動(dòng)必須有足夠的力度以導(dǎo)致泡囊，特別是穩(wěn)定化的泡囊的形成。搖動(dòng)可以是渦旋，一側(cè)至另一側(cè)，或上下運(yùn)動(dòng)。不同形式的運(yùn)動(dòng)可以結(jié)合。而且，搖動(dòng)可通過搖動(dòng)盛類脂水溶液的容器，或通過搖動(dòng)容器內(nèi)的水溶液而不搖容器本身而進(jìn)行。而且，搖動(dòng)可以手動(dòng)或機(jī)動(dòng)?？捎玫臋C(jī)械搖動(dòng)器包括，例如，搖動(dòng)器平臺(tái)如VWRScientific(Cerrtos，CA)搖動(dòng)器平臺(tái)，或已被發(fā)現(xiàn)能產(chǎn)生極好結(jié)果的從CrescentDentalMfg.Ltd.，Lyons，Ill.得到的Wig-L-Bug搖動(dòng)器。本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選方案是某些類型的搖動(dòng)或渦旋被用于制造在優(yōu)選大小范圍的穩(wěn)定泡囊。搖動(dòng)是優(yōu)選的，而優(yōu)選的此搖動(dòng)用Wig-L-Bug機(jī)械搖動(dòng)器。根據(jù)優(yōu)選的方法，擺動(dòng)運(yùn)動(dòng)被用于產(chǎn)生氣體和氣體前體填充的泡囊是優(yōu)選的。更優(yōu)選的是運(yùn)動(dòng)以弧形擺動(dòng)。更優(yōu)選的是運(yùn)動(dòng)以約2°至20°之間的弧形擺動(dòng)，進(jìn)一步優(yōu)選的是弧度在約5°至約8°之間。最優(yōu)選的是運(yùn)動(dòng)在約6°至約7°之間擺動(dòng)，最特定地約6.5°?？梢云谕氖?，擺動(dòng)率及其弧度，對(duì)于確定形成的氣體和氣體前體填充的泡囊的量和大小是關(guān)鍵的。本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選方案是擺動(dòng)數(shù)值，即全循環(huán)振動(dòng)的數(shù)值在約每分鐘1000和約20000的范圍內(nèi)。更優(yōu)選的擺動(dòng)或振動(dòng)的數(shù)值將在2500至8000之間。上述Wig-L-Bug是指提供每10秒2000搗擊，即每分鐘6000次振動(dòng)。當(dāng)然，振動(dòng)數(shù)取決于被攪動(dòng)的內(nèi)容的，質(zhì)量越大，振動(dòng)數(shù)越小。產(chǎn)生搖動(dòng)的其它手段包括在高速或高壓下散發(fā)的氣體的作用。也應(yīng)該明白的是，優(yōu)選地，水溶液體積越大，力量的總量也相應(yīng)增加。劇烈搖動(dòng)被限定為每分鐘至少約60次搖動(dòng)運(yùn)動(dòng)，并且是優(yōu)選的。每分鐘至少60-300轉(zhuǎn)的渦旋更優(yōu)選。每分鐘300-1800的渦旋是最優(yōu)選的。基于搖動(dòng)的氣體和氣體前體填充的泡囊的形成可被視測(cè)。需用于形成所需穩(wěn)定化的泡囊水平的類脂的濃度將隨所用類脂的類型而變化。并可容易地通過常規(guī)實(shí)驗(yàn)測(cè)定。例如，在優(yōu)選的方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法用于形成穩(wěn)定化的泡囊的1，2-二棕櫚?；字Ｄ憠A(DPPC)的濃度為約0.1mg/ml至約30mg/ml的鹽水溶液，更優(yōu)選的約0.5mg/ml至約20mg/ml鹽水溶液，最優(yōu)選的為約1mg/ml至約10mg/ml鹽水溶液。用于優(yōu)選方案中的二硬脂酰基磷脂酰膽堿(DSPC)的濃度為約0.1mg/ml至約30mg/ml的食鹽水溶液，更優(yōu)選的為約0.5mg/ml至約20mg/ml的鹽水溶液，最優(yōu)選的為約1mg/ml至約10mg/ml的鹽水溶液。除了上述的簡(jiǎn)單搖動(dòng)法外，更復(fù)雜但由于該原因而不太優(yōu)選的方法也可被應(yīng)用，例如，液晶搖動(dòng)氣體滴注法，和真空干燥氣體滴注法，如在1993年6月11日提交的美國(guó)申請(qǐng)?zhí)?76250中所述的，該文獻(xiàn)全文被引作本文的參考。當(dāng)這類方法被使用時(shí)，將要被氣體和氣體前體填充的穩(wěn)定化的泡囊可在氣體注入之前用本專業(yè)技術(shù)人員顯而易見的任何一種常規(guī)脂質(zhì)體備技術(shù)制備。這些技術(shù)包括凍-熔，以及諸如聲處理、螯合透析、均化、溶劑擴(kuò)散、微乳化、自發(fā)形成、溶劑蒸發(fā)化、French壓胞技術(shù)、洗滌劑透析和其它方法，每種包括以各種方式在含有所需的活性成份的溶液中制備泡囊以使治療、美容或其它藥劑被包裹，網(wǎng)捕，或系于產(chǎn)生的極性類脂基的泡囊內(nèi)。參見，例如，Madden等人，ChemistryandPhysicsofLipids，1990，53，37-46，該文獻(xiàn)全文被引作本文的參考。根據(jù)上述方法制備的氣體填充的泡囊的范圍在低于1μ至高于100μ的大小。另外，應(yīng)該注意到，在擠壓和滅菌工藝后，攪動(dòng)或搖動(dòng)步驟產(chǎn)生氣體填充的泡囊，很少或沒有殘留的無水類脂相(Bangham，A.D.，Standish，M.M，&amp;Watkins，J.C.(1965)J.Mol.Biol.13，238-252)存在于溶液的殘留物中。產(chǎn)生的氣體填充的泡囊在室溫保存時(shí)穩(wěn)定一年或甚至更長(zhǎng)。如果需要，氣體填充的泡囊的大小可通過微乳化、渦旋、擠壓、過濾、聲化、均化、重復(fù)冷凍和熔融循環(huán)、加壓擠過固定大小的孔和類似的方法而調(diào)節(jié)。然而，一般最理想的是以如更后面所述形成的狀態(tài)使用本發(fā)明的微球體和泡沫，而不作任何企圖以修改其大小。氣體填充的泡囊可用擠過過濾器的簡(jiǎn)單方法確定大?。贿^濾器的孔徑大小控制產(chǎn)生的氣體和氣體前體填充的泡囊的大小分布。通過用兩個(gè)或更多串聯(lián)的，即迭加的過濾器，例如10μ接著是8μ，氣體填充的泡囊具有集中在7-9μm左右的極窄的大小分布。過濾后，這些穩(wěn)定化的氣體填充的泡囊保持穩(wěn)定超過24小時(shí)。通過在使用之前從無菌管去除懸浮液的時(shí)候，利用濾膜可以完成尺寸的篩選和過濾，優(yōu)選的是在使用期間，將濾膜引入到注射器中。篩選一定尺寸的泡囊的方法包括利用含有一個(gè)管筒，至少一個(gè)濾膜和針頭的注射器，并且采用榨出步驟來完成，所述榨出步驟包括從所述的管筒擠壓所述的泡囊，使之通過安裝在注射器的管筒和針頭之間的濾膜，從而在根據(jù)本發(fā)明應(yīng)用到以泡囊作為MRI對(duì)比劑的進(jìn)行治療的患者之前選出一定尺寸的泡囊。榨出步驟還包括將所述的泡囊擠入到所述的注射器，其中濾膜以相同的方式起作用，基于能否進(jìn)入到注射器篩選一定大小的泡囊。另一種可選的方法是，用泡囊填充所述的注射器，所述泡囊已以其它方式選擇了尺寸，在這種情況下濾膜的功能是保證通過從注射器擠壓后只有在所需尺寸范圍內(nèi)的泡囊或所需的最大尺寸范圍內(nèi)的泡囊用于給藥。用于實(shí)施尺寸的篩選和過濾步驟的典型的裝置是顯示于美國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?8/401,974(1995年3月9日申請(qǐng))的附圖2的注射器和濾膜的組合(該文獻(xiàn)引入本文作為參考)。在優(yōu)選的方案中，穩(wěn)定化合物溶液或懸浮液被擠過過濾器，而所說的溶液或懸浮液在搖動(dòng)前被加熱滅菌。氣體填充的泡囊一旦形成，它們將被過濾以如前述大小化。形成氣體和氣體前體填充的泡囊之前的這些步驟能帶來優(yōu)點(diǎn)，例如，減少非水合的穩(wěn)定化合物的量，因而提供明顯更高產(chǎn)率的氣體填充的泡囊，以及提供直接用于對(duì)患者給藥的無菌氣體填充的泡囊。例如，小瓶或注射器之類的混合容器可用過濾后的穩(wěn)定化合物填充，尤其是類脂懸浮液，然后懸浮液在混合容器內(nèi)，例如，通過高壓滅菌而滅菌。氣體可通過搖動(dòng)無菌容器被注入類脂懸浮液內(nèi)形成氣體填充的泡囊。優(yōu)選地，無菌容器裝有過濾器以使氣體填充的泡囊在接觸患者前通過過濾器。這一優(yōu)選方法的第一步，將穩(wěn)定化的尤其是類脂溶液擠過過濾器，通過破碎干燥的化合物并暴露更大的表面積水合而減少非水合化合物的量。優(yōu)選地，過濾器具有孔大小約0.1至約5μm，更優(yōu)選地，約0.1至約4μm，再更優(yōu)選地，約0.1至約2μm，最優(yōu)選地，約1μm。非水合的化合物，尤其是類脂，表現(xiàn)為非統(tǒng)一大小的無定形塊，并且是不理想的。第二步，滅菌提供可直接對(duì)需要MRI成象的患者給藥的組合物。優(yōu)選的是滅菌通過熱滅菌完成，優(yōu)選的是通過在至少約100℃高壓滅菌，更優(yōu)選的是，在約100℃至約130℃高壓滅菌，還更優(yōu)選為約110℃至約130℃，再更優(yōu)選為約120℃至約130℃，最優(yōu)選為約130℃。優(yōu)選加熱約至少1分鐘，更優(yōu)選為約1至約30分鐘，再更優(yōu)選為約10至約20分鐘，最優(yōu)選為約15分鐘。如果需要，上面概括的第一和第二步可以顛倒次序，或者只有兩個(gè)步驟中的一個(gè)被應(yīng)用。當(dāng)滅菌用不是在引起氣體和氣體前體填充的微球體爆裂的溫度的熱滅菌的方法進(jìn)行時(shí)，滅菌可以緊接著氣體填充的泡囊的形成而進(jìn)行，并且是優(yōu)選的。例如，γ射線可在氣體填充的泡囊形成之前和/或之后被使用。應(yīng)用氣體前體除前述方案外，也可用含于類脂基的泡囊內(nèi)的氣體前體，它可由被給藥的患者組織的溫度、光或pH或其它性質(zhì)活化，從捕集在類脂基的泡囊內(nèi)的液體或固體相變?yōu)闅鈶B(tài)，膨脹產(chǎn)生用于本發(fā)明的穩(wěn)定的充氣的泡囊。此技術(shù)詳細(xì)描述于1993年11月30日提出的專利申請(qǐng)?zhí)?8/160232和08/159687中，它們都被全文引作本文的參考。制備氣體前體填充的泡囊的技術(shù)通常類似于本文中描述的用于制備氣體填充的泡囊的技術(shù)，所不同的是用氣體前體替代氣體?；罨瘹怏w前體的優(yōu)選方法是溫度?；罨蜣D(zhuǎn)變溫度，和類似術(shù)語是指氣體前體的沸點(diǎn)，在該溫度下，氣體前體從液體向氣相的相變發(fā)生。有用的氣體前體是那些具有在約-100℃至70℃范圍的沸點(diǎn)的氣體?；罨瘻囟葘?duì)于各個(gè)氣體前體是特定的。約37℃，或人類體溫的活化溫度對(duì)于本發(fā)明的氣體前體是優(yōu)選的。這樣，液體氣體前體在37℃被活化變?yōu)闅怏w。然而，氣體前體可以液體或氣相用于本發(fā)明的方法。制備用于本發(fā)明的MRI對(duì)比劑的方法可在低于氣體前體沸點(diǎn)進(jìn)行，以使液體被摻入泡囊內(nèi)。另外，所說的方法可在氣體前體的沸點(diǎn)進(jìn)行以使氣體被摻入泡囊內(nèi)。對(duì)于具有低沸點(diǎn)溫度的氣體前體，液體前體可用冷至低溫的微流態(tài)劑裝置乳化。沸點(diǎn)也可用液體介質(zhì)中的溶劑降低以便以液體形成應(yīng)用前體。該方法也可以在整個(gè)過程中溫度被增加而進(jìn)行，使工藝以氣體的氣體前體開始，以氣體結(jié)束。氣體前體可被選擇以在目標(biāo)組織或流體中就地形成氣體，即當(dāng)其進(jìn)入患者或動(dòng)物體，使用前，儲(chǔ)存期間，和制造期間。生產(chǎn)溫度活化的氣體和氣體前體填充的泡囊的方法可在低于氣體前體沸點(diǎn)的溫度下進(jìn)行。在此方案中，氣體前體被捕集到泡囊內(nèi)使相變?cè)谏a(chǎn)期間不發(fā)生。實(shí)際上，氣體和氣體前體填充的泡囊以氣體前體的液相生產(chǎn)。相變的活化可在溫度被允許超過前體的沸點(diǎn)的溫度的任何時(shí)候進(jìn)行。而且，在已知液體氣體前體的微滴內(nèi)液體的量時(shí)，達(dá)到氣相后泡囊的大小可被測(cè)定。另外，氣體前體可被用于產(chǎn)生在用前預(yù)先形成的穩(wěn)定的充氣泡囊。在此方案中，氣體前體在低于各個(gè)氣體前體的液-氣相變溫度的溫度下被加到裝有懸浮的和/或穩(wěn)定介質(zhì)的容器中。如果溫度超出，乳液在氣體前體和液體溶液之間形成，氣體前體從液體向氣態(tài)相變。作為加熱和氣體形成的結(jié)果，氣體置換液體懸浮液上部空間內(nèi)的空氣以形成捕集氣體前體的氣體，周圍氣體(例如空氣)，或共同捕集氣相氣體前體的周轉(zhuǎn)空氣的充氣類脂球。這一相變可適用于MRI對(duì)比介質(zhì)的最佳混合和穩(wěn)定化。例如，氣體前體，全氟丁烷，可被捕集在生物共溶的類脂或其它穩(wěn)定化合物內(nèi)，隨著溫度升高超過4℃(全氟丁烷的沸點(diǎn))，穩(wěn)定化合物捕集的全氟丁烷氣體產(chǎn)生。作為附加的例子，氣體前體全氟丁烷，可被懸浮于含有乳化劑和穩(wěn)定化劑如甘油或丙二醇的水懸浮液中，并用商用渦旋機(jī)渦旋。渦旋在足夠低的使氣體前體為液體的溫度開始，并繼續(xù)，樣品的溫度上升經(jīng)過從液全向氣態(tài)的相變溫度。在這類操作中，在微乳化過程中，前體轉(zhuǎn)化為氣態(tài)。在適當(dāng)?shù)姆€(wěn)定化劑存在下，出乎意料地，產(chǎn)生穩(wěn)定的充氣泡囊。相應(yīng)地，氣體前體可被選擇以在體內(nèi)形成充氣的泡囊或被設(shè)計(jì)成在生產(chǎn)過程中，或貯存時(shí)，或使用之前的某時(shí)間就地產(chǎn)生充氣泡囊。作為本發(fā)明的另一方案，通過預(yù)先形成氣體前體的液相進(jìn)入水乳液中并保持已知大小，一旦實(shí)現(xiàn)相變?yōu)闅鈶B(tài)微泡的最大體積可用理想氣體定律確定。為了從氣體前體制造充氣的泡囊，氣相被假設(shè)瞬間形成，并且沒有新形成的泡囊的氣體由于擴(kuò)散到液體(通常是天然含水的)中而消耗。因而，從乳液中已知液體的體積可以預(yù)測(cè)充氣泡囊的大小上限。根據(jù)本發(fā)明，穩(wěn)定化合物如類脂的乳液，氣體前體，含固定大小液體的微滴可被配制，以達(dá)到特定的溫度，氣體前體的沸點(diǎn)，微滴將膨脹成確定大小的充氣泡囊。確定大小代表上限至實(shí)際大小，因?yàn)橹T如氣體擴(kuò)散到溶液中，失去氣體到大氣中，和增加壓力的作用之類的因素是理想氣體定律不能解決的因素。理想氣體定律和用于計(jì)算從液體至氣態(tài)相變時(shí)氣泡體積的增加方程如下PV＝nRT其中P＝以大氣壓為單位的壓力V＝以升為單位的體積n＝氣體摩爾數(shù)T＝以°K為單位的溫度R＝理想氣體常數(shù)＝22.4L大氣壓度-1摩爾-1由液體乳液中液體的體積、密度和溫度等，液體前體的量(例如摩爾數(shù))以集體一前體的體積可被計(jì)算。當(dāng)轉(zhuǎn)化為氣體時(shí)，將膨脹為已知體積的泡囊。計(jì)算的體積將反映充氣泡囊的大小的上限，假設(shè)瞬間膨脹為充氣的泡囊并且在膨脹的時(shí)間內(nèi)可忽略氣體的擴(kuò)散。這樣，對(duì)于在乳液中處于液態(tài)的前體的穩(wěn)定化，其中前體微滴是球形的，前體微滴的體積由如下方程測(cè)定體積(球)＝4/3πr3其中r＝球的半徑這樣，一旦體積被預(yù)定，并知道液體在所需溫度的密度，微滴中液體(氣體前體)的量可被測(cè)定。為更進(jìn)一步說明，可采用下列公式計(jì)算V氣＝4/3π(r氣)3由理想氣體定律PV＝nRT代入V氣＝nRT/P氣或(A)n＝4/3[πr氣3]P/RT數(shù)量n＝4/3[πr氣3P/RT]*MWn變回為液體體積(B)V液＝[4/3[πr氣3]P/RT]*MWn/D]其中D＝前體的密度解液體微滴的直徑(C)直徑/2＝[3/4π[4/3*[πr氣3]P/RT]MWn/D]1/3簡(jiǎn)化為直徑＝2[[r氣3]P/RT[MWn/D]]1/3作為制備用作本發(fā)明MRI對(duì)比劑的所需大小的泡囊的另外的手段，用穩(wěn)定化合物/前體液體微的體積和特定的半經(jīng)，可以用適當(dāng)大小的過濾器以確定氣體前體微滴的大小為適當(dāng)半徑的球體。代表性的氣體前體可用于形成規(guī)定尺寸例如10μ直徑的泡囊。在本實(shí)施例中在人的血流中形成泡囊，因此典型的溫度是37℃或310°K。在1大氣壓下和利用(A)中的等式，填充10μ直徑的泡囊的體積需要7.54×10-17摩爾的氣體前體。利用上面計(jì)算出的量的氣體前體，和具有76.11的分子量，32.5℃的沸點(diǎn)和在20℃時(shí)0.7789g/ml-1的密度的1-氟丁烷，進(jìn)一步計(jì)算預(yù)測(cè)對(duì)于10μ的泡囊需要5.74×10-15克的該前體。進(jìn)一步外推，并且通過密度用等式(B)進(jìn)一步預(yù)測(cè)形成最高限度為10μ的泡囊需要8.47×10-16毫升的液體前體。最后，利用等式(C)，制備最高限度為10μ的氣體前體填充的泡囊需要形成半徑為0.0272μ或相應(yīng)的0.0544μ的直徑的液滴乳液。特定大小的乳液可以通過用合適大小的過濾器容易地實(shí)現(xiàn)。另外，如可見的，必須用于形成規(guī)定大小的氣體前體微滴的過濾器的大小，該規(guī)格的過濾器也足以除去任何可能的細(xì)菌污染，因而，也可用作滅菌過濾。在本發(fā)明的方法中用于制備作為同步磁共振成象聚焦的非侵入性超聲對(duì)比劑的充氣泡囊的此方案可以被用于由溫度活化的所有氣體前體。實(shí)際上，降低溶劑系統(tǒng)的凝固點(diǎn)允許使用在低于0℃的溫度進(jìn)行液-氣相變的氣體前體。溶劑系統(tǒng)可被選擇以提供用于懸浮氣體前體的介質(zhì)。例如，可混溶于緩沖的鹽水中的20％丙二醇顯示的低于單獨(dú)水的凝固點(diǎn)。通過增加丙二醇的量或加入諸如氯化物的物質(zhì)，凝固點(diǎn)可以進(jìn)一步降低。適當(dāng)溶劑系統(tǒng)的選擇可通過物理方法等確定。當(dāng)物質(zhì)、固體或液體，本文稱作溶質(zhì)，被溶于溶劑、諸如水基緩沖液，凝固點(diǎn)被降低，其量取決于溶液組成。這樣，如Wall定義的，可以由下列方程表達(dá)溶劑的凝固點(diǎn)降低Inxa＝In(1-xb)＝ΔH熔/R(1/T0-1/T)其中xa＝溶劑的摩爾分?jǐn)?shù)xb＝溶質(zhì)的摩爾分?jǐn)?shù)ΔH熔＝溶劑的熔化熱T0＝溶劑的正常凝固點(diǎn)通過解方程產(chǎn)生溶劑的正常凝固點(diǎn)。如果xb相對(duì)小于xa，上述方程可被寫作xb＝ΔH熔/R[T-To/ToT]≈ΔH熔ΔT/RT02上面的假設(shè)溫度的變化ΔT小于T2，該方程可以進(jìn)一步簡(jiǎn)化，假設(shè)溶質(zhì)的濃度(以每千克溶質(zhì)中的摩爾數(shù))可以重量摩爾濃度m表示，則xb＝m/[m+1000/ma]≈mMa/1000其中Ma＝溶劑的分子量，和m＝以每1000克摩爾為單位的溶質(zhì)的重量摩爾濃度。代入分?jǐn)?shù)xbΔT＝[MaRTo2/1000ΔH熔]m或ΔT＝Kfm，其中Kf=MaRTo2/1000ΔH熔Kf指摩爾凝固點(diǎn)并對(duì)于水在1大氣壓下等于每單位摩爾濃度1.86度。上述方程可被用于精確測(cè)量用于本發(fā)明的氣體前體填充的泡囊的摩爾凝固點(diǎn)。因此，上述方程可被用于估算凝固點(diǎn)降低并測(cè)定將溶劑的凝固溫度降到適當(dāng)值所需的液體或固體溶質(zhì)的適當(dāng)濃度。制備溫度活化的氣體和氣體前體填充的泡囊的方法包括(a)渦旋用于本發(fā)明的氣體前體填充的泡囊的水懸浮液；此方法的可變因素包括搖動(dòng)前任意地高壓滅菌，選擇性地加熱氣體前體和類脂的水懸浮液，選擇性地給裝懸浮液的容器開口，選擇性地?fù)u動(dòng)或使氣體前體泡囊自發(fā)形成并冷卻氣體前體填充的泡囊懸浮液，選擇性地將氣體前體和類脂的水懸浮液擠過約0.22μ的過濾器，另外，過濾可在產(chǎn)生的泡囊的體內(nèi)給藥期間進(jìn)行，應(yīng)用約0.22μ的過濾器；(b)進(jìn)行微乳化，其中本發(fā)明的氣體和氣體前體填充的泡囊的水懸浮通過在給患者給藥前攪動(dòng)和加熱以形成泡囊被乳化；和(c)通過加熱，和/或攪動(dòng)形成氣體前體在類脂中的懸浮液，其中低密底氣體和氣體前體填充的泡囊通過膨脹和轉(zhuǎn)換容器內(nèi)的其它泡囊而漂浮到溶液的頂部，并將容器開口以釋放空氣；和(d)在任一上述方法中，用密閉的容器盛氣體前體和穩(wěn)定化合物如生物共溶的類脂的水懸浮液，所說的懸浮液被保留在氣體前體的相變溫度之下，接著高溫滅菌將溫度移到高于相變溫度，選擇性地?fù)u動(dòng)，或使氣體前體泡囊自發(fā)形成，其中在密閉的容器中氣體前體膨脹增加所說的容器中的壓力，冷卻充氣的泡囊懸浮液，然后也可搖動(dòng)。在搖動(dòng)氣體注入法之前，凍干可用于從穩(wěn)定化合物中除去水和有機(jī)物。干燥-氣體注入法可被用于從泡囊中除去水。通過在干燥的泡囊中預(yù)捕集氣體前體(即干燥前)，溫?zé)岷?，氣體前體將膨脹而填充泡囊。氣體前體也可在其進(jìn)行具空后被用于填充干燥的泡囊。如干燥的泡囊被保持在低于其凝膠態(tài)至液晶溫度的溫度下，干燥的空腔可用處于氣態(tài)的氣體前體緩慢地填充，例如，全氟丁烷可被用于填充由二棕櫚?；字Ｄ憠A(DPPC)組成的干燥在4℃(全氟丁烷的沸點(diǎn))和低于4℃，生物共溶的類脂的相變溫度之間。在此情況下，在約4℃至約5℃的溫度填充泡囊將是最優(yōu)選的。用于制備溫度活化的氣體前體填充的泡囊的優(yōu)選方法包括在低于類脂的凝膠態(tài)向液晶態(tài)相變的溫度，在氣體前體存在下?lián)u動(dòng)具有諸如生物相溶類脂的穩(wěn)定化化合物的水溶液。本發(fā)明也期望制備氣體前體填充的泡囊之方法的應(yīng)用，包括在氣體前體存在下?lián)u動(dòng)包含穩(wěn)定化合物如生物相溶性類脂的水溶液，并分離出用于MRI成象的所得到氣體前體填充的泡囊。通過上述方法制備的泡囊這里被歸于通過凝膠態(tài)搖動(dòng)氣體前體注入法制備的氣體前體填充的泡囊。普通地，現(xiàn)有技術(shù)的充水脂質(zhì)體常規(guī)地在用于制造它們的類脂的相變溫度之上的溫度形成，因?yàn)樗鼈兏袕椥裕蚨强梢砸壕B(tài)用于生物體系。參見，例如，Szoka和Papahadjopoulos，Proc.Natl.Acad.Sci.1978，75，4194-4198。相對(duì)地，根據(jù)本文描述的優(yōu)選方案制造的泡囊是氣體前體填充的，它具有更大的彈性，因?yàn)闅怏w前體在氣體形成后比水溶液更有壓縮性和曲折性。因此，氣體前體填充的泡囊在低于類脂的相變溫度的溫度形成時(shí)可被用于生物體系，盡管凝膠相更有剛性。由本發(fā)明期望的方法提供在溫度活化的氣體前體存在下攪動(dòng)含有穩(wěn)定化合物，如生物相溶性類脂的水溶液。本文所用的搖動(dòng)被定義為攪動(dòng)水溶液使氣體前體從周圍環(huán)境被導(dǎo)入水溶液中的運(yùn)動(dòng)。任何類型的攪動(dòng)水溶液并導(dǎo)致導(dǎo)入氣體前體的運(yùn)動(dòng)都可被用于搖動(dòng)。搖動(dòng)必須是足夠有力的以在一個(gè)時(shí)期后形成合適數(shù)量的泡囊。優(yōu)選地，搖動(dòng)是足夠有力的，使泡囊在短的時(shí)期，如30分鐘，優(yōu)選20分鐘內(nèi)，更優(yōu)選在10分鐘內(nèi)形成。搖動(dòng)可以通過微乳化，通過微流化，例如，打漩，如渦旋，一側(cè)至另一側(cè)，或上下運(yùn)動(dòng)。在加入處于液態(tài)的氣體前體的情況下，除上面提出的搖動(dòng)法之外，聲處理可被應(yīng)用。而且，不同類型的運(yùn)動(dòng)可以組合，搖動(dòng)可通過搖動(dòng)裝類脂水溶液的容器，或通過搖動(dòng)容器內(nèi)的水溶液而不搖動(dòng)容器本身而進(jìn)行。進(jìn)一步地，搖動(dòng)可以手動(dòng)或機(jī)動(dòng)。可被應(yīng)用的機(jī)械搖動(dòng)器包括，例如，搖動(dòng)器平臺(tái)，如VWRScientific(Crritos，CA)搖動(dòng)器平臺(tái)，微流化器，Wig-L-BugTM(CrescentDentalManufacturing，Inc.，Lyons，IL)，后者已被發(fā)現(xiàn)能產(chǎn)生特別好的結(jié)果，和機(jī)械涂料混合器，以及其它已知機(jī)器。產(chǎn)生搖動(dòng)的其它手段包括在高速或高壓下散發(fā)的氣體前體的作用。也應(yīng)該懂得，優(yōu)選地，對(duì)于較大體積的水溶液，總力量了相應(yīng)地增加。劇烈搖動(dòng)被限定為每分鐘至少約60次搖動(dòng)運(yùn)動(dòng)，并且是優(yōu)選的。劇烈搖動(dòng)的一個(gè)例子，以每分鐘至少1000轉(zhuǎn)渦旋是更優(yōu)選的。以每分鐘1800轉(zhuǎn)渦旋是最優(yōu)選的?？繐u動(dòng)的氣體前體填充的泡囊的形成可通過在水溶液頂部的泡沫的存在檢測(cè)。這樣伴隨由于泡沫的形成而產(chǎn)生的水溶液體積的減小。優(yōu)選泡沫的最終體積為類脂水溶液初始體積的至少約兩倍；更優(yōu)選泡沫的最終體積為水溶液初始體積的至少約三倍；再更優(yōu)選泡沫的最終體積為水溶液初始體積的至少約四倍；最優(yōu)選所有的類脂水溶液都轉(zhuǎn)化為泡沫。所需的搖動(dòng)時(shí)間期限可通過檢測(cè)泡沫的形成而測(cè)定。例如10ml類脂溶液在50ml離心管中被渦旋約15-20分鐘，直至氣體和氣體前體填充的泡囊的粘度變得足夠稠使其在打漩時(shí)不再粘在側(cè)壁上。此時(shí)，泡沫將引起含氣體和氣體前體填充的泡囊的溶液升至30至35ml的水平。所需形成優(yōu)選的泡沫水平的穩(wěn)定化合物，尤其是類脂的濃度將隨所用穩(wěn)定化合物如生物相溶的類脂的類型而變化，并且一旦按本文公開的內(nèi)容準(zhǔn)備，將很容易被專業(yè)技術(shù)人員測(cè)定。例如，在優(yōu)選的方案中，用于形成根據(jù)由本發(fā)明期望的方法的氣體和氣體前體填充的泡囊的1，2-二棕櫚酰基磷脂酰膽堿(DPPC)的濃度為約20mg/ml至約30mg/ml鹽水溶液。用于優(yōu)選方案中的二硬脂?；字Ｄ憠A(DSPC)的濃度為約5mg/ml至約10mg/ml鹽水溶液。具體地，DPPC以濃度20mg/ml至30mg/ml，靠搖動(dòng)，產(chǎn)生總的懸浮液和捕集的氣體前體體積比單獨(dú)的懸浮液體積大四倍。DSPC以濃度10mg/ml，靠搖動(dòng)，產(chǎn)生完全沒有任何液體懸浮液體積并含全部泡沫的總體積。本專業(yè)技術(shù)人員應(yīng)該懂得，只要受本文公開的內(nèi)容準(zhǔn)備，用作原料的類脂和其它穩(wěn)定化合物，或泡囊最終產(chǎn)物，可在進(jìn)行本發(fā)明的方法之前或之后操作。例如，穩(wěn)定化合物如生物共溶的類脂可被水合然后凍干，進(jìn)行冷凍和熔融循環(huán)，或簡(jiǎn)單水合。在優(yōu)選的方案中，在形成氣體和氣體前體填充的泡囊之前，類脂被水合，然后凍干。根據(jù)本發(fā)明期望的方法，諸如但不限于空氣的氣體的存在，也可由周圍氣氛提供。周圍氣氛可以是密閉容器內(nèi)的氣氛，或在非密閉容器內(nèi)，可以是外部環(huán)境。另外，例如，氣體可被注入或其它方式或加入具有類脂水溶液的容器內(nèi)或類脂水溶液自身內(nèi)以提供非空氣的氣體。不比空氣重的氣體被加到密閉的容器內(nèi)，而比空氣重的氣體被加到密閉或非密閉的容器內(nèi)。因此，本發(fā)明包括空氣和/或其它與氣體前體一起的共捕集。如已在上面與穩(wěn)定化合物有關(guān)的段落中所述的，由本發(fā)明期望的優(yōu)選方法在低于所用類脂的凝膠態(tài)向液晶態(tài)相變溫度的溫度進(jìn)行。對(duì)“凝膠態(tài)向液晶態(tài)相變溫度”，意思是指類脂雙層將從凝膠態(tài)向液晶態(tài)轉(zhuǎn)化的溫度。參見，例如，Chapman等人，J.Biol.Chem.1974，249，2512-2512。因此，上述穩(wěn)定化的泡囊前體可以與用于本發(fā)明其它穩(wěn)定化泡囊相同的方式被使用，一旦通過施用于患者組織而活化，其中諸如溫度或pH等因素可被用于引起氣體的產(chǎn)生。優(yōu)選地是本方案其中氣體前體在接近所說的患者正常體溫從液體向氣態(tài)進(jìn)行相變，并由所說的患者組織的溫度活化以相變?yōu)闅庀?。更?yōu)選地，本方法中患者組織是具有約37℃正常溫度的人體組織，并且其中氣體前體在接近37℃正常溫度的人體組織，并且其中氣體前體在接近37℃進(jìn)行從液體到氣態(tài)的相變。所有包括制備用于本發(fā)明的穩(wěn)定化氣體和氣體前體填充的泡囊的上述方案，可被高壓滅菌或滅菌過濾，如果這些過程在氣體注入步驟之前或先于溫度介導(dǎo)的懸浮液中溫度敏感的氣體前體的氣體轉(zhuǎn)化。另外，一種或多種抗菌劑和/或防腐劑可被包括在穩(wěn)定化泡沫的制劑中，如苯甲酸鈉，所有的季銨鹽、疊氮化鈉、methylparaben、propylparaben、山梨酸、抗壞血酸棕櫚酸酯、丁基化的羥基茴香醚、丁基化的羥基甲苯、氯丁醇、脫氫乙酸、乙二胺、一硫代甘油、苯甲酸鉀、偏亞硫酸氫鉀、山梨酸鉀、亞硫酸氫鈉、二氧化硫和有機(jī)汞鹽。這類滅菌，也可由其它常規(guī)手段如輻射實(shí)現(xiàn)，對(duì)于將穩(wěn)定化微球體用于侵入性情況下如用于血管內(nèi)或腹膜內(nèi)將是必須的。合適的滅菌手段對(duì)于被穩(wěn)定化氣體和氣體前體填充的泡囊和其應(yīng)用的本發(fā)明所涉及的專業(yè)人員將是顯而易見的。通常對(duì)比介質(zhì)以水懸液形式貯存，但在干燥的泡囊或干燥的類脂球的情況下，對(duì)比介質(zhì)可以用前預(yù)備好重組的干粉儲(chǔ)存。本發(fā)明在下面所示的實(shí)例1-11中得到進(jìn)一步證實(shí)。但是所提供的實(shí)施例不以任何方式限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例實(shí)施例1將運(yùn)鐵蛋白結(jié)合到葡聚糖上，并且將其加入到鐵鹽溶液中。在裝備有氣壓艙的熱系統(tǒng)探測(cè)(HeatSystem，F(xiàn)armingdale，N.Y.)聲波處理機(jī)的厭氧環(huán)境的艙內(nèi)通過將亞鐵離子和三價(jià)鐵離子的混合物溶解到水和pH為1.0的鹽酸中，而制備超順磁鐵氧化物的溶液。利用標(biāo)準(zhǔn)尺寸的電極臂在介質(zhì)/高功率的情況下激活聲波處理機(jī)，當(dāng)氧氣穿過溶液氣泡時(shí)，將0pH突然提高到pH＝12。結(jié)果是得到由磁鐵礦、Fe3O4組成的鐵氧化物的毫微顆粒。將毫微顆粒在正常鹽水中洗滌，并且利用差級(jí)離心收獲直徑為20nm和更小的毫微顆粒。將這些毫微顆粒以10毫克/毫升的毫微顆粒的濃度懸浮于含有10毫克/毫升的二棕櫚酰磷脂酰膽堿的正己烷中。將正己烷蒸發(fā)并且將包被了磷脂的鐵氧化物的毫微顆粒凍干。因此，制備鐵氧化物毫微顆粒，所述顆粒用攜帶運(yùn)鐵蛋白的葡聚糖包被。將濃度為10毫克/毫升的超順磁鐵氧化物與2毫克/毫升的全氟戊烷和含有10毫克/毫升的二油酰磷脂酰膽堿的20毫克/毫升的普盧蘭尼克F-68在含有5.5％重量的甘露醇的無菌水中混合。將其微流體化，并且導(dǎo)致產(chǎn)生包被了運(yùn)鐵蛋白的全氟戊烷的膠體懸浮液，所述運(yùn)鐵蛋白以磁鐵礦顆粒作為代表。將其靜脈給藥(劑量＝5毫升)到25歲年齡的被懷疑子宮外孕的雌性患者。由于運(yùn)鐵蛋白結(jié)合到胎盤組織，磁性標(biāo)記的泡囊定位于子宮外孕，由MRI觀察。對(duì)子宮胎盤組織使用高能連續(xù)波超聲，2MHz，2.5瓦特/cm，由于泡囊導(dǎo)致的聲波能量吸收量提高，然后超聲波能量破壞子宮的胎盤組織。這避免了使用切開程序，例如剖腹術(shù)或更侵入性的操作例如剖腹鏡，因?yàn)樵诖殴舱裰笇?dǎo)下的超聲治療法通常經(jīng)皮完成的，沒有必要進(jìn)行外科手術(shù)進(jìn)入。實(shí)施例2在含有20毫克/毫升普盧蘭尼克F-68和5.5％重量的甘露醇的10毫克/毫升的磷脂(82摩爾％DPPC，7摩爾％DPPE-PEG5000和10摩爾％DPPA和1摩爾％DPPE-PEG5000抗血纖維蛋白抗體)中制備全氟己烷(0.2毫克/毫升)和全氟戊烷(0.2毫克/毫升)的膠懸體。向其中加入5毫克/毫升的鐵氧化物毫微顆粒并且如前面實(shí)施例所述將該材料微流體化。將該物質(zhì)給懷疑患有血管血栓的患者靜脈給藥。用超導(dǎo)量子INFEROMETRY裝置(SQUID)磁場(chǎng)計(jì)，一種磁成象類型對(duì)患者身體掃描，確定磁化率明顯提高的區(qū)域在患者的額骨靜脈。通過超聲成象證實(shí)凝塊的存在。然后將500毫瓦/cm2的高能量超聲波用于結(jié)合泡囊的凝塊區(qū)域。在SQUID或磁場(chǎng)計(jì)的指導(dǎo)下完成超聲處理。在超聲傳感器上安裝SQUID，作為傳感器的一部分。當(dāng)超聲處理出現(xiàn)時(shí)，用磁場(chǎng)計(jì)可檢測(cè)到磁化率的變化。微泡囊導(dǎo)致聲音能量的吸收提高；在超聲成象或磁成象中容易看到在乳化液中全氟己烷從液體到氣體的相轉(zhuǎn)變，因?yàn)樵跓釘U(kuò)張期間泡囊擴(kuò)張，導(dǎo)致凝塊局部裂解，并且減輕使用治療血栓的非侵入性外科手術(shù)。實(shí)施例3將在微泡囊膜上浸透順磁鐵氧化物顆粒的氣體填充的微泡囊注射到肘前的窩。泡囊首先被淋巴管接納，在用超導(dǎo)量子INFEROMETRY裝置(SQUID)進(jìn)行的磁共振中鑒定為載有腫瘤的淋巴結(jié)的清晰的輪廓。根據(jù)對(duì)淋巴結(jié)的鑒定，然后使用針對(duì)鑒定載有腫瘤的聚焦的超聲傳感器，在SQUID指導(dǎo)下使用連續(xù)的超聲波排序。制備微泡囊以便共振和釋放熱能形式的能量，從而加熱，隨后破壞腫瘤。利用SQUID，進(jìn)行再次磁共振成象，在淋巴系統(tǒng)中載有腫瘤的成象不再可鑒定，說明腫瘤被破壞，從而提高了非侵入性外科手術(shù)技術(shù)。實(shí)施例4在美國(guó)專利5,312,617中公開的由N，N’-雙-(羧基-癸基酰胺甲基-N-2，3-二羥基丙基)-1，2-乙二胺-N，N’二乙酸錳(MN-EDTA-DDP)和Mn-EDTA-ODP，一種順磁復(fù)合物制備了氣體填充的微泡囊(該文獻(xiàn)引入本文作為參考)，將該泡囊注射到患有惡性腫瘤的患者中。利用MRI鑒定淋巴鏈中的腫瘤的精確尺寸和位點(diǎn)，并且用磁共振成象和與磁共振成象相溶的傳感器同時(shí)進(jìn)行超聲技術(shù)處理，操作是在1.5瓦/cm2和0.75MHz的頻率進(jìn)行的。氣泡的存在導(dǎo)致沉積的能量提高，該組織加熱以及局部空穴。采用在裝備了回聲平面成象梯度的機(jī)器上進(jìn)行同步的磁共振成象而非侵入性地監(jiān)測(cè)組織壞死的程度以及組織的溫度，因此實(shí)現(xiàn)了非侵入性外科手術(shù)。實(shí)施例5對(duì)于患有腦動(dòng)靜脈畸形(AVM)的患者，制備頭蓋骨擋板，外科手術(shù)暴露硬腦膜。將患者置于MRT-0.5特斯拉，干涉磁共振成象技術(shù)系統(tǒng)，(GEMedicalSystem，Milwaukee，WI)。利用這種磁共振系統(tǒng)可以在有同步的磁共振成象術(shù)的外科手術(shù)期間進(jìn)入患者。用0.2毫升/千克的AerosomesTM注射到患者，所述AerosomesTM由2毫克/毫升的類脂組成，所述類脂含有75摩爾％DPPC，8摩爾％DPPE-PEG5000和8摩爾％DPPA和9摩爾％血小板激活因子(PAF)、AvantiPolarLipids、空氣和全氟丁烷氣體的混合物捕獲的AlabasterAlabama。使用PAF的目的是在從AerosomesTM釋放PAF之后將血小板激活，以便刺激AVM的血栓形成。在磁共振成象過程中，裝備了成象和治療功能的高能量的磁共振相溶的超聲傳感器定位于AVM。在靜脈注射AerosomesTM之后，它們穿過大導(dǎo)管，并且進(jìn)行AVM的微循環(huán)。利用磁共振成象技術(shù)和超聲術(shù)容易看到微泡。在磁共振成象時(shí)，在通過AVM轉(zhuǎn)移期間獲得的梯度回聲明亮的血成象上微泡描述為信號(hào)空白，在超聲術(shù)中氣泡表現(xiàn)為雪暴似的透明斑反射。將超聲傳感器集中于AVM，以便超聲顯示的病灶區(qū)域相當(dāng)于血管的病灶。當(dāng)超聲術(shù)的動(dòng)力水平提高時(shí)(例如高達(dá)幾瓦)實(shí)施同步的磁共振成象技術(shù)和超聲術(shù)。在超聲術(shù)中從空穴的輻射阻礙了許多骨骼的觀察，磁共振仍然顯示異常詳細(xì)的周圍組織。異常執(zhí)行高能量超聲術(shù)的外科醫(yī)生能更好地控制靶擊，射擊和高能量傳感器的能量水平并且避免損壞關(guān)鍵的周圍大腦血管結(jié)構(gòu)。該步驟導(dǎo)致AVM，凝結(jié)的壞死區(qū)域，以及血管病灶血栓的燒蝕。在該步驟結(jié)束時(shí)在超聲術(shù)中用于組織內(nèi)凝結(jié)的壞死，氣泡的集合，大多數(shù)的骨骼的成象受到阻礙，但是磁共振成象顯示了整個(gè)外科手術(shù)區(qū)域以及外科手術(shù)對(duì)處理的和周圍的組織的影響。實(shí)施例6用MRI對(duì)懷疑有出血的受傷犧牲者進(jìn)行掃描。掃描顯示脾臟出血。將上述實(shí)施例中使用的Aerosomes靜脈注射，不同的是Aerosomes也捕獲1毫克/毫升的凝血酶，同時(shí)進(jìn)行同步的磁共振成象技術(shù)和超聲成象技術(shù)。當(dāng)Aerosomes穿過脾的動(dòng)脈，外科醫(yī)生將磁共振相容的超聲傳感器的超聲動(dòng)力增加到約1.0瓦/cm2，并且Aerosomes爆開釋放出PAF和凝血酶。獲得血栓并且出血被停止。同步的磁共振血管造影術(shù)證實(shí)脾動(dòng)脈血栓的形成。該侵入性程度較低到最小的步驟是較便宜的并且比常規(guī)切開外科手術(shù)較少導(dǎo)致發(fā)病。實(shí)施例7給患有乳腺癌的患者靜脈注射100毫升的全氟戊烷泡囊，上述泡囊用磷脂、82摩爾％DPPC、8摩爾％DPPE-PEG2000和10摩爾％DPPA(平均直徑＝約1微米)和10摩爾％烷基化的攜帶錳的抗體的復(fù)合物(Mn-EDTA-ODP)、抗乳腺癌(人)CA-15-3的單克隆抗體、抗人乳腺癌的IgG1(SIGNETLABS，Dedham，MA)包被。泡囊還含有10摩爾％的結(jié)合到泡囊膜上的阿霉素的烷基化衍生物。四小時(shí)之后以MRI給患者掃描。在腋下鑒定出加強(qiáng)的淋巴結(jié)，表明轉(zhuǎn)移性的疾病。磁共振相溶的1MHz超聲探針定位于淋巴結(jié)，將200毫瓦/cm2的高能量的連續(xù)超聲波加到該淋巴結(jié)。以商品磁鐵例如1.5特斯拉(GESigmaMilwaukee，WI)，利用快速的脈沖序列，例如SpoiledGRASS，TR＝30毫秒和TE＝5毫秒，以30°的急轉(zhuǎn)角進(jìn)行實(shí)數(shù)時(shí)間同步的磁共振成象術(shù)。當(dāng)加熱期間泡囊被控制時(shí)，磁共振成象術(shù)上可以看到泡囊為低信號(hào)強(qiáng)度的增加區(qū)域，它對(duì)應(yīng)于由泡囊引起的磁化率區(qū)域。當(dāng)泡囊爆開時(shí)，可看到更能說明的次強(qiáng)度的瞬間區(qū)域。在泡囊爆開和清除之后泡囊消失。由于泡囊爆開在瘤形成的淋巴結(jié)中阿霉素前藥被釋放并且被激活。實(shí)施例8在裝備有氣壓艙的熱系統(tǒng)探測(cè)(HeatSystem，F(xiàn)armingdale，N.Y.)聲波處理機(jī)的厭氧環(huán)境的艙內(nèi)，通過將亞鐵離子和三價(jià)鐵離子鹽的混合物溶解到水和pH1.0的鹽酸，制備超順磁鐵氧化物。利用標(biāo)準(zhǔn)尺寸的電極臂在介質(zhì)/高功率的情況下激活聲波處理機(jī)，當(dāng)氧氣穿過溶液氣泡時(shí)，將pH突然提高到pH＝12。該結(jié)果是得到由磁鐵礦、Fe3O4組成的鐵氧化物的毫微顆粒。將毫微顆粒在正常鹽水中洗滌，并且利用差級(jí)離心收獲直徑為20nm和更小的毫微顆粒。將這些毫微顆粒以10毫克/毫升的毫微顆粒的濃度懸浮于含有10毫克/毫升的二棕櫚酰磷脂酰膽堿的正己烷中。將正己烷蒸發(fā)并且將包被了磷脂的鐵氧化物的毫微顆粒凍干。然后將10％重量的包被了磷脂的鐵氧化物的毫瓦顆粒加入到1毫克/毫升的磷脂中，所述磷脂由82摩爾％二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)、8摩爾％二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺-PEG5000(DPPE-PEG5000)和8摩爾％二棕櫚酰磷脂酸(DPPA)和2摩爾％棕櫚酰二氨二氯絡(luò)鉑衍生物。將磷脂、磷脂包被的鐵氧化物和棕櫚?；八幍幕旌衔镆?毫克/毫升的磷脂總濃度懸浮于密封的無菌容器中的普通鹽水中，該容器中全部空間有全氟丁烷氣體。將該物質(zhì)在Wig-L-BugTM中以4200rpm振搖2小時(shí)，導(dǎo)致泡囊攜帶磷脂包被的前藥，在其表面裝飾了鐵液化氣毫微顆粒。將20毫升劑量的泡囊(平均直徑＝約2微米，氣泡濃度＝1×109/毫升)靜脈注射到患者，利用磁共振成象技術(shù)獲得快速的GRASS序列。在磁共振成象技術(shù)中容易看到鐵氧化物標(biāo)記的泡囊為引起次強(qiáng)度區(qū)域的磁化劑。證明基于前藥泡囊的對(duì)比劑在形成血管的腫瘤的區(qū)域涉及淋巴結(jié)和其它組織中積累。按如上所述在磁共振指導(dǎo)下使用1MHz超聲波使泡囊爆開并且獲得局部藥物的釋放。實(shí)施例9將抗肌球蛋白抗體，ChickenMuscle，CatalogueNo.476123，(CALBIOCHEM，Jolla，CA)結(jié)合到二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺。將其0.1毫克/毫升加入到無菌水中的5.5％重量的甘露醇中的濃度為0.1毫克/毫升全氟戊烷以及5毫克/毫升的磷脂(90摩爾％的DPPC和10摩爾％DPPA)。用氧和氧-17使該混合物產(chǎn)生氣泡，然后利用微流體化計(jì)(Microfluidics，Newton，MA)以16000psi使其微乳化20輪次，導(dǎo)致攜帶乳化抗體的全氟戊烷的膠體。將10毫升的該材料注射到懷疑心肌梗塞的患者并且進(jìn)行磁共振成象術(shù)。在快速的GRASS磁共振成象技術(shù)證明在梗塞的心肌層區(qū)域是磁化率提高的區(qū)域。在心肌層定位磁共振相容的連續(xù)的超聲波傳感器，用0.100瓦/cm2超聲能量處理心肌層。這導(dǎo)致氣泡爆開并且將氧氣局部釋放到缺血性組織。實(shí)施例10按照實(shí)施例9所述制備泡囊，所不同的是用陽離子磷脂DOTMA，N-[1(-2，3-二油酰氧)丙基]N，N’-氯化三甲基銨替代DPPA和用DPPE替代DPPC。然后如上所述制備攜帶抗體的全氟戊烷的膠體顆粒，在全氟戊烷內(nèi)裝載了氧-17氣體。然后將10毫克/毫升的編碼血管表皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的基因的DNA加入并且在4℃，低動(dòng)力裝置將該懸浮液旋轉(zhuǎn)2分鐘。對(duì)懷疑心肌梗塞的患者進(jìn)行磁共振成象技術(shù)。在對(duì)比劑給藥后約30分鐘在心肌層鑒定低信號(hào)強(qiáng)度的一個(gè)區(qū)域。將磁共振相容的超聲傳感器集中于缺血性/梗塞的心肌層區(qū)域，利用梯度回聲的回聲平板成象技術(shù)在裝備了共振梯度，(AdvancedNMR，Woburn，MA)，被改型的1.5特斯拉(GESigmaSystem，Milwaukee，WI))的磁共振系統(tǒng)進(jìn)行實(shí)數(shù)時(shí)間的同步磁共振成象技術(shù)，全氟戊烷微泡發(fā)生“爆開”。這導(dǎo)致編碼VEGF的基因在梗塞的/缺血性心肌層中局部整合并且局部基因表達(dá)。新的血管對(duì)VEGF發(fā)生應(yīng)答而增殖，新血管的生長(zhǎng)提高。這導(dǎo)致更健康的區(qū)域性心肌層。實(shí)施例11通過用從全氟丁烷和氧-16的混合物制備的氣體的前部空間搖動(dòng)類脂82摩爾％DPPC，7摩爾％DPPE-PEG5000和5摩爾％DPPA和6摩爾％DOTMA的混合物而制備陽離子泡囊。在搖動(dòng)之后，如在前面用Wig-L-BugTM的實(shí)施例中公開的，加入100毫克/毫升的編碼VEGF的基因的DNA，將該混合物緩慢旋轉(zhuǎn)1分鐘。這導(dǎo)致DNA吸收到微泡囊的表面。對(duì)于在磁共振下觀察，較高數(shù)量的泡囊比泡囊磁標(biāo)記更是必要，但是在T2加權(quán)的旋轉(zhuǎn)回聲或快速旋轉(zhuǎn)回聲或梯度回聲脈沖序列仍檢測(cè)到泡囊。對(duì)于患有外周血管疾病的涉及較低的端點(diǎn)的糖尿病患者，利用2DTime的Flight脈沖序列進(jìn)行磁共振血管造影術(shù)(MRA)，一種類型的磁共振成象技術(shù)。在腘動(dòng)脈顯示顯著的變狹。將攜帶DNA的微泡囊靜脈給藥并且基于來自MRI和超聲術(shù)的泡囊信號(hào)，在皮膚表面的磁共振成象技術(shù)的指導(dǎo)下使用高能量的超聲波處理以便將能量聚焦于腘動(dòng)脈的變狹區(qū)域。這導(dǎo)致在動(dòng)脈變狹位點(diǎn)局部的泡囊捕獲和基因釋放。VEGF的局部表達(dá)促進(jìn)了旁支和新導(dǎo)管的形成，從而改善了血向遠(yuǎn)端腿的流動(dòng)。在本文中記載和描述的所有專利，專利申請(qǐng)和出版物其全部引入作為本文的參考。除了本文中描述以外，根據(jù)前面的描述對(duì)本發(fā)明作各種修飾對(duì)本領(lǐng)域內(nèi)技術(shù)人員而言是顯而易見的。所述修飾都在所附的權(quán)利要求的范圍內(nèi)。權(quán)利要求1.一種磁共振聚焦的用于外科手術(shù)超聲術(shù)的方法，包括以用于磁共振成象技術(shù)的對(duì)比介質(zhì)給需要外科手術(shù)的患者給藥，所述對(duì)比介質(zhì)含有氣體填充的泡囊，用磁共振成象技術(shù)，利用所述的對(duì)比介質(zhì)掃描所述的患者，以鑒定患者的需要外科手術(shù)的區(qū)域，以及給所述區(qū)域應(yīng)用超聲術(shù)以便實(shí)施所述的外科手術(shù)。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的超聲技術(shù)的應(yīng)用是與第二個(gè)掃描步驟同步進(jìn)行的，從而用磁共振成象技術(shù)掃描所述的患者。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的超聲技術(shù)的應(yīng)用之后跟隨第二個(gè)掃描步驟，從而用磁共振成象技術(shù)掃描所述的患者。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的外科手術(shù)是在下列區(qū)域之一完成的血管、心血管、胃腸道、鼻內(nèi)管道、聽覺管道、眼內(nèi)區(qū)域、腹膜內(nèi)區(qū)域、腎、尿道、生殖泌尿管道、腦、脊柱、肺區(qū)域和軟組織。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的泡囊包含靶擊藥劑。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的氣體填充的泡囊進(jìn)一步包括治療劑，在超聲技術(shù)應(yīng)用時(shí)所述治療劑被釋放。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中所述的治療劑選自于下列組寡聚核苷酸序列、反義序列、抗體、和化療藥劑。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的超聲術(shù)修復(fù)所述患者的所述區(qū)域的孔。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所述的孔是在所述患者的血管系統(tǒng)。10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的氣體填充的泡囊是靜脈內(nèi)給藥。11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的氣體是選自于下列一組氣體空氣、氮?dú)?、二氧化碳、氧氣、氟、氦、氬、氙和氖?2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的氣體是氟化的氣體。13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中所述的氟化氣體是選自于下列一組氣體全氟化碳和硫的六氟鹽。14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其中所述的全氟化碳?xì)怏w選自于下列一組氣體全氟丙烷、全氟丁烷、全氟環(huán)丁烷、全氟甲烷、全氟乙烷、全氟己烷和全氟戊烷。15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的氣體是17O。16.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的對(duì)比介質(zhì)進(jìn)一步包括順磁劑或超順磁劑。17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，其中所述的對(duì)比劑是順磁劑。18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中所述的順磁劑包括選自于下列一組的順磁離子過渡元素，鑭系和錒系元素。19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其中所述的順磁離子是選自于下列一組元素Gd(III)、Mn(II)、Cu(II)、Cr(III)、Fe(II)、Fe(III)、Co(II)、Er(II)、Ni(II)、Eu(III)及Dy(III)。20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中所述的順磁離子是Mn(II)。21.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中所述的順磁劑包括硝基氧。22.根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，其中所述的對(duì)比劑是超順磁劑。23.根據(jù)權(quán)利要求22所述的方法，其中所述的超順磁劑包括金屬氧化物或金屬硫化物。24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的方法，其中所述的超順磁劑包括金屬氧化物，其中金屬是鐵。25.根據(jù)權(quán)利要求22所述的方法，其中所述的超順磁劑是鐵蛋白、鐵、磁鐵氧化物、γ-Fe2O3、鐵酸錳、鐵酸鈷和鐵酸鎳。26.一種磁共振聚焦的用于外科手術(shù)的超聲術(shù)的方法，包括以用于磁共振成象技術(shù)的對(duì)比介質(zhì)給需要外科手術(shù)的患者給藥，所述對(duì)比介質(zhì)含有氣體前體填充的泡囊，使氣體前體發(fā)生從液體到氣體的相轉(zhuǎn)變，用磁共振成象技術(shù)，利用所述的對(duì)比介質(zhì)掃描所述的患者，以鑒定患者的需要外科手術(shù)的區(qū)域，以及給所述區(qū)域應(yīng)用超聲術(shù)以便實(shí)施所述的外科手術(shù)。27.根據(jù)權(quán)利要求26所述的方法，其中所述的氣體前體從液體到氣體的相轉(zhuǎn)變和用磁共振成象是同步發(fā)生的。28.利用磁共振聚焦的治療超聲技術(shù)使治療化合物在患者的特定區(qū)域控制釋放的方法，該方法包括以用于磁共振成象技術(shù)的對(duì)比介質(zhì)給需要外科手術(shù)的患者給藥，所述對(duì)比介質(zhì)含有氣體填充的泡囊和治療化合物；用磁共振成象技術(shù)，利用所述的對(duì)比介質(zhì)掃描所述的患者，以確定在該區(qū)泡囊的存在，以及給所述區(qū)域應(yīng)用超聲術(shù)以便使所述的泡囊破裂從而在該區(qū)域釋放治療化合物。29.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的氣體填充的泡囊是用19F填充的，所述磁共振成象技術(shù)是核磁共振技術(shù)。30.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其證實(shí)但是氣體填充的泡囊是組織間隙給藥的。31.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的氣體選自于下列一組氣體銣加強(qiáng)的氙，銣加強(qiáng)的氬，銣加強(qiáng)的氦，和銣加強(qiáng)的氖。全文摘要通過將磁共振成象(MRI)對(duì)比介質(zhì)給患者給藥,然后采用MRI技術(shù)對(duì)患者掃描并且然后利用超聲實(shí)施手術(shù)的磁共振聚焦的外科超聲術(shù)的新方法,其中所述對(duì)比介質(zhì)包含氣體填充的泡囊。這些方法也可以使用包含氣體前體填充的泡囊的MRI對(duì)比介質(zhì),所述泡囊在給藥之后在體內(nèi)完成從液體到氣體的相轉(zhuǎn)變。另外,MRI對(duì)比介質(zhì)含有治療化合物。文檔編號(hào)A61B8/13GK1180304SQ96192434公開日1998年4月29日申請(qǐng)日期1996年3月6日優(yōu)先權(quán)日1996年3月6日發(fā)明者埃文·C·翁格爾申請(qǐng)人:ImaRx藥物公司