專利名稱：：用(s)－奧昔布寧和(s)－去乙基奧昔布寧治療尿失禁的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及用光學(xué)純(S)-奧昔布寧(Oxybutynin)和(S)-去乙基奧昔布寧(S-DEO)治療尿失禁的一種方法，并涉及含有光學(xué)純(S)-奧昔布寧或S-DEO的藥物組合物和制備DEO單一對映體的方法。外消旋的奧昔布寧用于治療腸蠕動過強(qiáng)和由于迫肌不穩(wěn)定性引起的尿失禁。外消旋的奧昔布寧對平滑肌直接施予抗痙作用并抑制乙酰膽堿對平滑肌的作用。它對兔迫肌的抗膽堿活性只有阿托品的五分之一，但抗痙活性為其4至10倍。它在有煙堿受體存在下對毒蕈堿受體具有相當(dāng)?shù)倪x擇性，其結(jié)果是觀察不到對骨骼神經(jīng)肌接點(diǎn)或自律神經(jīng)節(jié)的阻斷作用。外消旋奧昔布寧能舒張膀胱平滑肌并且對具有不隨意的膀胱收縮特性病人的膀胱內(nèi)壓測量研究表明，外消旋奧昔布寧可以增加膀胱的容量，減少迫肌的不隨意收縮頻率并延遲開始排泄的要求。所以它對于治療和預(yù)防尿失禁和經(jīng)常隨意排尿都是有用的。外消旋奧昔布寧對膀胱的效用在于抗毒蕈堿樣直接解痙和對迫肌平滑肌局部麻醉的綜合。因為外消旋藥物的抗毒蕈堿樣活性，口腔干燥(口干)和瞳孔放大(瞳孔舒張)是很常見的副作用，這些現(xiàn)象涉及乙酰膽堿能毒蕈堿樣受體。事實上，至少一位研究者提到“不可避免的瞳孔放大、口腔干燥、心動過速等”是伴隨使用外消旋奧昔布寧產(chǎn)生的(Lishetal.Arch.Int.Pharmacodyn.156，467-488(1965).481)。抗膽堿能副作用的高發(fā)生率(40至80％)常導(dǎo)致減少劑量或中斷治療。對單獨(dú)的對映體的藥理學(xué)研究提出R-對映體是有效的對映體。Noronha-Blob等人(J.Pharmacal.Exp.Ther.256，562-567(1991))得出結(jié)論是，外消旋奧昔布寧的膽堿能拮抗作用(在體外由它對M1、M2和M3受體亞型的親和力，而在體內(nèi)由其各種生理反應(yīng)來測定)可以主要地歸結(jié)于R-對映體的活性。他們發(fā)現(xiàn)，對所有的生理反應(yīng)外消旋奧昔布寧和其對映體的強(qiáng)度排列順序是相似的，即(R)-奧昔布寧強(qiáng)于或等于外消旋奧昔布寧，而比(S)-奧昔布寧要強(qiáng)的多，(S)-奧昔布寧比(R)-奧昔布寧要弱1至2個數(shù)量級。本發(fā)明概述出乎意料地發(fā)現(xiàn)，實質(zhì)上光學(xué)純的奧昔布寧S-對映體和其去乙基代謝物對治療尿失禁提供優(yōu)良的治療作用。光學(xué)純的(S)-奧昔布寧(S-OXY)和(S)-去乙基奧昔布寧(S-DEO)提供這種治療并且實質(zhì)上減低了那些與使用外消旋奧昔布寧有關(guān)的并主要由抗膽堿能活性所產(chǎn)生的不良反應(yīng)。這些包括，但不局限于，口腔干燥、瞳孔放大、困倦、惡心、便秘、心悸和心動過速。由給以(S)-奧昔布寧或S-DEO使外消旋奧昔布寧的心血管副作用減輕，例如心動過速和心悸，是特別具有治療價值的。這些組合物和方法的活性化合物是奧昔布寧和去乙基奧昔布寧的光學(xué)異構(gòu)體。外消旋奧昔布寧的制備在英國專利說明940,540中已經(jīng)敘述。在化學(xué)上，活性化合物為(1)α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸4-(二乙氨基)-2-丁炔基酯，也稱為苯基環(huán)己基甘醇酸4-(二乙氨基)-2-丁炔基酯，在下文中稱為奧昔布寧的S-對映體，和(2)α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸4-(乙氨基)-2-丁炔基酯，在下文中稱為去乙基奧昔布寧的S-對映體。由USAN委員會對外消旋奧昔布寧鹽酸鹽定的同屬名為氯化奧昔布寧，它以商品名Ditropan出售。奧昔布寧具有S絕對立體化學(xué)的異構(gòu)體(登記號119618-22-3)為右旋光性的，如式I所示去乙基奧昔布寧的S對映體如式II所示曾敘述過(S)-奧昔布寧的合成(Kachuretal.，J.Pharmacol.Exp.Ther.247，867-872(1988))，但現(xiàn)在(S)-奧昔布寧并無商品供應(yīng)。所有報道的臨床結(jié)果都是由外消旋混合物得到的，雖然單獨(dú)的對映體在豚鼠和大鼠的藥理學(xué)已被敘述過(見Kachur等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.247，867-872(1988)和Noronha-Blob等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.256，562-567(1991))。(S)-去乙基奧昔布寧在以前并未被敘述過；它的合成是按下述方法進(jìn)行的。本發(fā)明涉及的一個方面是治療尿失禁而避免伴隨的不良反應(yīng)的方法，其中包括對需要這種治療的人給以治療有效劑量的實質(zhì)上不含相應(yīng)R-對映體的(S)-奧昔布寧、(S)-去乙基奧昔布寧或它們的藥用可接受的鹽。其中所有的術(shù)語“實質(zhì)上不含其R-對映體”意指組合物中含至少90重量％的(S)-奧昔布寧或(S)-去乙基奧昔布寧和10重量％或更低的(R)-奧昔布寧或(R)-去乙基奧昔布寧。在一個更優(yōu)選的實施例中，此組合物含有至少99重量％的S-對映體和1重量％或更少的R對映體。此實質(zhì)上光學(xué)純的(S)-奧昔布寧或(S)-去乙基奧昔布寧可以經(jīng)非腸道、直腸、膀胱內(nèi)、透皮、口服或氣霧給藥，口服和透皮給藥是優(yōu)選的，給藥速率為每天約1mg至約100mg。本發(fā)明涉及的另一方面為含有治療有效量的實質(zhì)上不含相應(yīng)R立體異構(gòu)體的(S)-奧昔布寧、(S)-去乙基奧昔布寧或它們的藥用可接受的鹽和藥用可接受的載體的片劑或膠囊劑藥用單劑量劑型。片劑或膠囊優(yōu)選地含有從0.5至25mg的(S)-奧昔布寧或(S)-去乙基奧昔布寧，系應(yīng)用本領(lǐng)域熟知的通常方法制備的。本發(fā)明也涉及一種透皮裝置的劑量形式。此透皮給藥系以在透皮給藥裝置中加入一種滲透促進(jìn)劑加以改進(jìn)的。例如像在PCT申請WO92/20377所敘述的那樣。本發(fā)明涉及的更進(jìn)一步方面是制備去乙基奧昔布寧，優(yōu)選的是DEO的單一對映體，最優(yōu)選的是S-DEO的方法，包括的步驟是，首先使α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸甲酯與4-[N-乙基-(4-甲氧苯基)甲基氨基]-2-丁炔-1-醇在無水堿存在下反應(yīng)，生成α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸4-[N-乙基-(4-甲氧苯基)甲基氨基]-2-丁炔基酯；隨后與碳酰氯酯和甲醇反應(yīng)，生成α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸4-(乙氨基)-2-丁炔基酯(去乙基奧昔布寧)。此方法可進(jìn)一步包括N-乙基-4-甲氧基苯甲胺與2-丙炔-1-醇和甲醛或甲醛的等同化合物在銅(I)鹽存在下反應(yīng)，生成第一步所需要的4-[N-乙基-(4-甲氧苯基)甲基氨基]-2-丁炔-1-醇。本發(fā)明的詳細(xì)說明奧昔布寧和DEO的S對映體可由中間體苯乙醇酸拆分、然后酯化得到。OXY酯化反應(yīng)可按Kachur等人所描述的方法進(jìn)行(OP.cit.)或是用下列圖A描繪的改進(jìn)方法制備S-DEO。圖A其中使用的外消旋、雙標(biāo)度的以及標(biāo)度的或?qū)τ丑w的化合物圖形表示系取自Maehr.J.Chem.Ed.62，114-120(1985)。實體的或虛線的楔形(如式I所示)用于標(biāo)注手性元素的絕對構(gòu)型，楔形外形和虛線(如式III所示)標(biāo)注對映體純的中間體化合物的絕對構(gòu)型。DEO的整個方法包括(a)N-乙基-4-甲氧苯甲胺與2-丙炔-1-醇和聚甲醛在惰性溶劑中有氯化亞銅存在下反應(yīng)，生成4-[N-乙基-(4-甲氧苯基)甲基氨基]-2-丁炔-1-醇(V)；(b)α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸甲酯(IV)的單一對映體與4-[N-乙基-(4-甲氧苯基)甲基氨基]-2-丁炔-1-醇(V)在甲苯中于催化量的甲醇鈉存在下反應(yīng)生成α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸4-[N-乙基-(4-甲氧苯基)甲基氨基]-2-丁炔基酯(VI)的單一對映體；和(c)α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸4-[N-乙基-(4-甲氧苯基)甲基氨基]-2-丁炔酯(VI)隨后與α-氯代乙基碳酰氯酯在二氯乙烷中反應(yīng)，接著與甲醇反應(yīng)得到DEO(VII)的單一對映體。此方法很明顯也可以應(yīng)用于從外消旋的α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸甲酯制備外消旋的DEO。多聚甲醛做為甲醛的方便來源物而被使用，但它可以被本領(lǐng)域熟知的其他甲醛的來源物所代替。同樣的，α-氯乙基碳酰氯酯被用為去烷基化試劑，但其他的碳酰氯酯(如乙烯酯)也可被使用。替代的方法，OXY和DEO的S-對映體可由外消旋的奧昔布寧或DEO用通常的方法拆分，例如與手性酸形成非對映體鹽經(jīng)分步結(jié)晶得到。其他為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的標(biāo)準(zhǔn)拆分方法包括，但不局限于，簡單結(jié)晶法和在手性基質(zhì)上色層分析法也可以使用。(S)-奧昔布寧或S-DEO在預(yù)防或治療所要處治的急性或慢性疾病需要的劑量大小將隨所要治療病癥的嚴(yán)重性和性質(zhì)及給藥途徑而變化。劑量或者給藥頻率也將隨個體病人的年齡、體重和反應(yīng)而變化。一般來說，(S)-奧昔布寧或S-DEO對此中所描述的病癥每日總劑量范圍為由約1mg至約100mg，可以單次劑量或分次劑量，優(yōu)選的為分次劑量。在處理病人時，治療應(yīng)該從較低的劑量開始，可能是約0.25mg至約25mg，然后依病人的總體反應(yīng)增加至約100mg。對于年齡超過65歲和那些腎和肝功能有損傷的病人更進(jìn)一步推薦在起始時接受低的劑量，并在個體反應(yīng)和學(xué)藥濃度的基礎(chǔ)上做逐漸的調(diào)整。對某些病例，如那些本領(lǐng)域技術(shù)人員所了解的，可能需要超出此范圍的劑量。更且，需要指出的是，臨床醫(yī)生或治療醫(yī)生結(jié)合個體病人的反應(yīng)將會知道何時中斷、調(diào)整或終結(jié)治療。“治療有效劑量”和“足夠治療尿失禁但不足以引起不良反應(yīng)的劑量”的詞句是包含在上述的劑量和給藥頻率時間表之中的。可以用任何適宜的給藥途徑以提供病人有效劑量的(S)-奧昔布寧或S-DEO。例如，可使用口服、直腸、非腸道(皮下、肌內(nèi)、靜脈)、透皮、氣霧和類似的形式給藥。而且，可以直接經(jīng)尿道向膀胱內(nèi)給藥，如Massad等人對外消旋奧昔布寧所描述的那樣〖J.Urol.148，595-597(1992)〗。劑型包括片劑、錠劑、分散劑、混懸劑、溶液、膠囊、透皮給藥系統(tǒng)等。本發(fā)明的藥物組合物包括(S)-奧昔布寧和S-DEO做為有效的成分，或是其藥物可接受的鹽，也可包含一種藥物可接受的載體和任選的其也治療成分。術(shù)語“藥物可接受的鹽”或“其藥物可接受的鹽”是指由藥物學(xué)上可接受的無毒性酸制備的鹽。適宜與本發(fā)明化合物加成的藥物可接受的酸包括乙酸、苯磺酸(besylate)、苯甲酸、樟腦磺酸、構(gòu)櫞酸、乙烷磺酸、富馬酸、葡糖酸、谷氨酸、氫溴酸、鹽酸、羥乙磺酸、乳酸、馬來酸、蘋果酸、苯乙醇酸、甲烷磺酸、粘酸、硝酸、雙羥萘酸、泛酸、磷酸、丁二酸、硫酸、酒石酸、對甲苯磺酸等。鹽酸是特別有用的，并且事實上下面所敘述的研究中使用的是鹽酸鹽。本發(fā)明的組合物包括混懸劑、溶液、酏劑、或固體劑型。載體如淀粉、糖，和微晶纖維素、稀釋劑、制粒劑、潤滑劑、結(jié)合劑、崩解劑等適用于口服固體制劑的情況(例如粉末、膠囊，和片劑)，同時口服固體制劑比口服液體制劑更優(yōu)選。片劑和膠囊由于它們?nèi)菀捉o藥，代表一種更有利的口服單劑量劑型，在這種情況下要用固體藥用載體。如果需要片劑可用標(biāo)準(zhǔn)的水溶液或非水溶液法包衣。除上面給出的普通劑型外，本發(fā)明的化合物也可以用控制釋放方法和給藥裝置給藥，如在美國專利3,845,770；3,916,899；3,536,809；3,598,123和4,008,719及PCT申請WO92/20377所敘述的，它們的內(nèi)容在此并入作為參考。本發(fā)明的藥物組合物適用于口服給藥的可用單粒的單劑量形式如膠囊劑、扁囊劑、片劑代表，每粒中都含有預(yù)先測定量的有效成分，如粉末或顆粒，或在水性液體或非水性液體中的溶液或混懸液，或水包油的乳劑或油包水的液體乳劑。這些組合物可以用任何的藥學(xué)方法制備，但所有的方法都包括把活性成分與構(gòu)成一種或多種必要成分的載體締合的步驟。一般，此組合物是把活性成分與液狀載體或細(xì)微分散的固體載體或兩者均有均勻地和緊密地混合，然后，如果需要，把產(chǎn)物做成需要的形狀，正如已知的外消旋混合物那樣。例如，片劑可任選地與一種或更多種附加成分一起用壓制法或模制法制備。壓制的片劑可用一種適宜的機(jī)械把自由流動形式的活性成分與任選的結(jié)合劑、潤滑劑、惰性稀釋劑、表面活性劑或分散劑的混合物如粉末或顆粒壓制而成。模制的片劑可用適合的機(jī)械把混合的粉末化合物用惰性液體稀釋劑濕潤模制而成。所有上述的技術(shù)精于藥學(xué)技術(shù)的人都是熟知的。每片中含有的活性成分由約0.5mg至約25mg。實施例實施例1口服單劑量配方片劑成分每片每批10,000片(S)-奧昔布寧或(S)-去乙基奧昔布丁5mg50g微晶纖維素30mg300g乳糖70mg700g硬脂酸鈣2mg20gFD&amp;C藍(lán)#1沉淀染料0.03mg300mg(S)-奧昔布寧或去乙基奧昔布寧與乳糖和纖維素混合至形成均勻的混合物。加入沉淀染料并進(jìn)一步混合。最后把硬脂酸鈣加入混合，形成的混合物用9/32英寸(7mm)的淺凹面沖頭壓制成片劑。其他強(qiáng)度的片劑可由改變活性成分與賦形劑的比例或片劑的最后重量而制備。OXY和DEO兩者的S對映體驚人的實用性是由下列的研究確立的。奧昔布寧對映體(R)-和(S)-奧昔布寧與人M1、M2、M3和M4毒蕈堿受體亞型的結(jié)合材料與方法實驗是在由桿狀病毒感染的SF9細(xì)胞以表達(dá)人重組M1、M2、M3和M4毒蕈堿亞型而制備的膜上進(jìn)行的。結(jié)合分析表1</tables>溫育后，分析物在真空下經(jīng)GF/B玻璃纖維過濾器(Whatman)快速過濾，并以冰冷的緩沖液用Brandel細(xì)胞收集器洗滌。結(jié)合的放射活性用液體閃爍計數(shù)器(LS6000，Beckman)以液體閃爍雞尾酒(Formula99，DupontNEN)測定。實驗方案化合物對每種受體以10種濃度作雙份測定來得到競爭曲線。每一次實驗中，研究的受體參比化合物也同時用8種濃度雙份測定以得到競爭曲線來證實此實驗。分析和結(jié)果的表達(dá)每種受體的特異性放射配體的結(jié)合是以總結(jié)合與在有過量未標(biāo)記的配體存在下測定的非特異性結(jié)合的差值來確定。以非線性回歸分析得到的競爭曲線來測出IC50值(抑制特異性結(jié)合50％時所需要的濃度)。這些參數(shù)為用SigmaplotTM軟件做曲線擬合得到的。R-和S-OXY的IC50見表2。表2R-奧昔布寧和S-奧昔布寧對人毒蕈堿受體亞型M1-M4的結(jié)合</tables>這些結(jié)果表明S-OXY比R-OXY對毒蕈堿受體亞型的親和力要弱。(R)-和(S)-奧昔布寧對鈣通道的結(jié)合材料和方法結(jié)合分析結(jié)合分析用下列方法進(jìn)行表3</tables>實驗條件為表4</tables>在溫育后，分析物在真空下經(jīng)GF/B或GF/C玻璃纖維過濾器(Whatman)快速過濾，并用Brandel細(xì)胞收集器用冰冷的緩沖液洗滌。結(jié)合的放射活性用液體閃爍計數(shù)器(LS6000，Beckman)以液體閃爍雞尾酒(Formula989，DupontNEN)測定。實驗方案化合物在10-5M濃度對每種受體測定兩次。每次實驗，參比化合物對研究的受體也同時用8種濃度測定兩份以得到競爭曲線來證實此實驗。分析和結(jié)果的表達(dá)每種受體的特異性放射配體的結(jié)合是以總結(jié)合與在有過量未標(biāo)記的配體存在下測定的非特異性結(jié)合的差值來確定。表5中給出的為特異性結(jié)合抑制百分?jǐn)?shù)的平均值。IC50值(抑制特異性結(jié)合50％所需的濃度)系由它們的競爭曲線的非線性回歸分析測出的。這些參數(shù)為用SigmaplotTM軟件作曲線擬合得到的。表5R-奧昔布寧與S-奧昔布寧對鈣通道的結(jié)合地爾硫和維拉帕米對鈣通道受體的結(jié)合抑制(以％表示)</tables>這些結(jié)果表明S-OXY對鈣進(jìn)入的阻滯活性與R-OXY相似。去乙基奧昔布寧對映體外消旋的奧昔布寧的主要代謝物為RS-去乙基奧昔布寧(DEO)。DEO的R和S對映體未曾被敘述過，R-和S-DEO單獨(dú)的對映體的解痙和鈣進(jìn)入阻滯活性在我們的研究之前是未知的。我們合成了這些對映體并以受體結(jié)合模型和膀胱功能研究了這些對映體的抗毒蕈堿的、解痙的和鈣進(jìn)入阻滯效用。我們發(fā)現(xiàn)每種對映體的代謝物均保留了它們的“母體”奧昔布寧對映體的有關(guān)藥理情況。毒蕈堿受體亞型結(jié)合由每種化合物(R-，S-和RS-DEO)三種濃度誘導(dǎo)的特異性放射性配體的抑制百分?jǐn)?shù)為用克隆的人毒蕈堿受體亞型(M1-M4)以如上所述的奧昔布寧對映體描述的方法來測定的。下列的表(表6和表7)給出對每種亞型的抑制百分?jǐn)?shù)。而且，測定的人受體亞型M1和M2的IC50值在表6中給出。表6</tables>表7</tables>這些結(jié)果表明S-DEO對毒蕈堿受體亞型的親和力弱于R-或消旋的DEO。鈣通道結(jié)合由各種化合物(R-、S-和RS-DEO)誘導(dǎo)的特異性放射配體結(jié)合的抑制百分?jǐn)?shù)為用L-型鈣通道的地爾硫和維拉帕米部位測定的。結(jié)果示于表8。表8</tables>這些結(jié)果表明S-DEO具有的鈣進(jìn)入阻滯活性與R-和外銷旋DEO的相似?？苟巨A/解痙活性的功能特性研究R-、S-和RS-奧昔布寧(OXY)和R-、S-與RS-DEO的體外對膀胱功能模型的作用。如下所述，分離出的豚鼠膀胱平滑肌的膀胱條被安置在一個組織浴中并用毒蕈堿樣激動劑氯化氨甲酰膽堿或是增加內(nèi)部鉀的濃度使其收縮。材料和方法膀胱條.實驗是使用類似于Kachur等(1988)和NoronhaBlob和Kachur(1991)所敘述的方法進(jìn)行的。組織條(約10mm長、1.5mm寬)從雄性體重400-600g的Hartley豚鼠(EIMHill繁殖實驗室，Chelmaford，MA)體內(nèi)分離出。組織懸浮于下列組合物并通氧的緩沖液中mMNaCl，133；KCl，4.7；CaCl2，2.5；MgSO4，0.6；NaH2PO4，1.3；NaHCO3，16.3；和葡萄糖，7.7。它們維持在37.5℃。收縮用等容換能器(FT-10型)和墨水多種描記器(7型)(Astro-Med，Inc.GrassInstrumentDiv.，WestWarwick，RI)記錄。所有組織每次的靜止張力均維持在0.5g。在每次實驗中從一個膀胱分離出多至7條，懸浮在各自的組織室中并在進(jìn)行實驗前于浴溶液中平衡一小時。氯化氨甲酰膽堿誘導(dǎo)的收縮。一系列的實驗集中在奧昔布寧的抗膽堿作用上。在這些實驗中，為了評價每個組織的可行性并做為參比的結(jié)構(gòu)，每個組織條對暴露于組織介質(zhì)中的最初應(yīng)答均被記錄，組織介質(zhì)中的NaCl用KCl代替，制成137.7mMKCl濃度的介質(zhì)。然后接著放回到標(biāo)準(zhǔn)的介質(zhì)中，然后暴露于漸進(jìn)增加濃度的氯化氨甲酰膽堿的介質(zhì)中，每次只暴露于一個濃度中，直至記錄到峰值應(yīng)答。然后把一條不做處理和/或一條暴露于17mM乙醇中做為對照組織，其余的肌條每次暴露在一種濃度的拮抗劑中一小時。當(dāng)被測物質(zhì)的溶解度不佳，貯備液需用乙醇配制時，則使用乙醇的對照，組織浴試驗的結(jié)果17mM乙醇是有效的濃度。最后，第二次記錄對增加濃度的氯化氨甲酰膽堿隨后暴露在137.7mMKCl的應(yīng)答。鉀誘導(dǎo)的收縮。第二系列實驗集中于被試物質(zhì)的解痙作用。記錄在介質(zhì)中順序增加鉀濃度的收縮應(yīng)答。數(shù)據(jù)分析。測定拮抗劑是否能降低激動劑的峰值應(yīng)答，每一個肌條在第二次測定中峰張力的擴(kuò)展是用第一次濃度-效應(yīng)測定中峰張力擴(kuò)展的百分?jǐn)?shù)來表示的。然后，對每種拮抗劑得到的數(shù)據(jù)都用單向變動分析(ANOVA)法分析處理-相關(guān)差。因為每一個膀胱條僅研究一種濃度的拮抗劑，Arunlakshana和Schild(1959)方法以改進(jìn)的形式用于估算pA2和Schild回歸斜率。首先由第二套濃度-效應(yīng)數(shù)據(jù)估算每一條膀胱肌激動劑產(chǎn)生半數(shù)最大應(yīng)答的濃度(EC50)。EC50是由藥物濃度的對數(shù)與包含半數(shù)最大應(yīng)答水平的應(yīng)答，線性擬合的線性回歸得到的。對每一條藥物處理的肌條要計算“濃度比值”(CR)，其算法為處理過的組織的EC50除以未處理過組織的EC50。對每次實驗，其中兩條或更多的肌條暴露在同種藥物但不同的濃度中，這個比值的對數(shù)減1，[也就是Log(CR-1)]與拮抗劑的濃度對數(shù)做圖，此拮抗劑是肌條曾暴露其中產(chǎn)生“Schild點(diǎn)”的。Log(CR-1)與拮抗劑濃度對數(shù)之回歸分析來估算pA2和回歸線的斜率。最后，實驗按藥物分組并計算pA2和斜率的平均值±S.E。用標(biāo)準(zhǔn)方法由其S.E估算斜率的95％置信限(CL)。對于那種只有一條肌條暴露在給定的藥物中的實驗，則以(拮抗劑的濃度)/(CR-1)計算pKD同時KD的負(fù)對數(shù)與pA2值聯(lián)合產(chǎn)生pA2值的擴(kuò)展組。結(jié)果外消旋奧昔布寧和DEO及它們各自的對映體對氯化氨甲酰膽堿誘導(dǎo)的收縮的效用總結(jié)于下列的表9中。給出的值為Schild分析的總結(jié)，它給出pA2值[平均值±SE]和斜率[平均值±SE]表9</tables>這些結(jié)果表明S-OXY和S-DEO兩者均為比R-和外消旋OXY和R-與外消旋DEO弱的膀胱毒蕈堿受體拮抗劑。外消旋奧昔布寧和其對映體對鉀誘導(dǎo)的收縮效用總結(jié)于下列表10中(給出的數(shù)值為暴露在化合物中60min后由137.7mMK+誘導(dǎo)的收縮大小除以暴露在藥物中以前誘導(dǎo)的收縮大小)表10<p>*與未處理的組織相應(yīng)值差異顯著(P＜0.01)這些結(jié)果表明奧昔布寧和它的對映體與去乙基奧昔布寧和它的對映體為等強(qiáng)度的膀胱平滑肌解痙劑。結(jié)論已知膀胱的排空是由膽堿能機(jī)制所調(diào)控的，而在患有尿失禁病人中所見的膀胱不穩(wěn)定性與非膽堿能收縮有關(guān)。Andersson等人[Neurourol.Urodyn.5，579-586(1986)]在動物中表明，抗阿托品迫肌對鈣拮抗劑是高度敏感的。上述(R)-和(S)-奧昔布寧與鈣拮抗劑地爾硫和維拉帕米受體部位的受體結(jié)合親和力研究可以得出結(jié)論，即(S)-奧昔布寧和(S)-去乙基奧昔布寧具有對不隨意排尿的治療作用，同時(不像R-異構(gòu)體和外消旋體)對正常排泄機(jī)制的作用很小。當(dāng)與相應(yīng)的R-異構(gòu)體和外消旋體比較時，兩者也具有顯著低的抗膽堿能副作用。避免由外消旋奧昔布寧抗膽堿能作用產(chǎn)生的心血管副作用是特別注目的。我們結(jié)論S-奧昔布寧和S-去乙基奧昔布寧對治療人尿失禁是有效的藥物，比外消旋體或純R-對映體的副作用大大降低。(R)-α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸甲酯(IV)向(R)-α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸(III)(12.2g，52.1mmol)和K2CO3(10.8g，78.2mmol)在100mL丙酮的混合物中，在0℃(冰浴)時滴加碘甲烷(MeI)(13.0mL，208mmol)。在加完MeI(約1h)后。反應(yīng)混合物在室溫攪拌過夜。反應(yīng)混合物通過一層Celite過濾，并用丙酮洗滌兩次。慮液濃縮得到白色漿狀物，然后用水稀釋以庚烷提取。合并提取液，用水洗，飽和鹽水洗，干燥并濃縮得產(chǎn)品(R)-IV(11.9g，收率92％)為白色固體。(S)-α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸甲酯(IV)按上述相同的方法由(S)-III(10.6g，45.3mmol)得到白色固體的(S)-IV(11.2g，收率100％)。(R)-α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸4-[N-乙基-(4-甲氧基苯基)甲基氨基]-2-丁炔基酯(VI)在(R)-IV(11.9g，47.7mmol)和4-[N-乙基-(4-甲氧基本基)甲基氨基]-2-丁炔-1-醇(V)(9.30g，39.9mmol)于120mL甲苯的溶液中加入NaOMe(0.222g，4.11mmol)。反應(yīng)混合物在攪拌下回流5h，并用Dean-Stark裝置蒸出總共6mL的溶劑。反應(yīng)混合物冷至室溫，用乙酸乙酯稀釋，水洗，飽和鹽水洗，干燥并濃縮。殘渣用硅膠層析(以1％，2.5％，然后5％的MeOH的CH2Cl2洗脫)，得(R)-VI油狀產(chǎn)物(14.1g，收率79％)。(S)-α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸4-[N-乙基-(4-甲氧基苯基)甲基氨基]-2-丁炔酯(VI)按上述同樣的方法自(S)-IV(40.7g，16.4mmol)和V(4.24g，18.2mmol)得到油狀(S)-VI(4.24g，收率58％)。外消旋(S)-α-環(huán)己基-α羥基苯乙酸4-[N-乙基-(4-甲氧基苯基)甲基氨基]-2-丁炔基酯按上述同樣方法由外消旋IV(2.8g，12.0mmol)和V(2.48g，10.6mmol)得油狀外消旋DEO前體(2.05g，收率43％)。(R)-α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸4-(乙氨基)-2-丁炔基酯鹽酸鹽(VII)-HCl(R)-VI(14.0g，31.2mmol)和α-氯乙基碳酰氯酯(4.0m1，37.4mmol)在1，2-二氯乙烷的溶液中攪拌回流1h。冷卻后，反應(yīng)混合物濃縮并向殘渣中加入200mLMeOH。反應(yīng)混合物在攪拌下回流20MiN并冷至室溫。混合物濃縮。殘渣用硅膠層析(用1％然后用50％MeOH的CH2Cl2洗脫)。然后用乙醚研磨得(R)-VII-HCl產(chǎn)物(8.93g，收率87％)為棕褐色固體。此棕褐色固體自EtOH/Et2O重結(jié)晶進(jìn)一步純化，并順序用10％K2CO3水溶液，EtOAc，活性碳和1NHCl的乙醚溶液處理得類白色固體(R)-固體HCl(6.44g)。(S)-α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸4-(乙氨基)-2-丁炔基酯鹽酸鹽(VII)-HCl按上述同樣方法自(S)-VI(11.4g，25.4mmol)得類白色固體(S)-DEO-HCl(5.27g，收率57％)。外消旋α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸4-(乙氨基)-2-丁炔基酯鹽酸鹽由(±)前體(2.28g，5.08mmol)按上述同樣方法得類白色固體(±)-DEO-HCl(0.63g)。用4-(二乙氨基)-2-丁炔-1-醇代替保護(hù)的中間體V，用同樣的路線可制備S-奧昔布寧。做為中間體應(yīng)用的4-[N-乙基-(4-甲氧基苯基)甲基氨基]-2-丁炔-1-醇(V)可如下制備N-乙基-4-甲氧基苯甲胺在茴香醛(15.6g，115mmol)和乙胺(2.0M的THF溶液，87mL，174mmol)的1，2-二氯乙烷(450mL)混合物中，在氮?dú)庀录尤氡姿?10.0mL，174mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30min然后用冰浴冷至0℃。分次加入NaBH(OAc)3(36.9g，174mmol)。反應(yīng)混合物在室溫攪拌過夜。混合物濃縮，殘渣用堿性溶液(10gNaOH溶于100mL水)稀釋制成微堿性的溶液。此水溶液層用乙醚提取。合并提取液，用水，飽和鹽水洗，干燥并濃縮。殘渣用硅膠層析(用5％MeOH的CH2Cl2洗脫。然后用含4％Et3N的50％MeOH的CH2Cl2洗脫得油狀產(chǎn)物(11.2g，收率59％)。4-[N-乙基-(4-甲氧基苯基)甲基氨基]-2-丁炔基-1-醇(V)N-乙基-4-甲氧基苯甲胺(13.3g，80.6mmol)，多聚甲醛(3.63g)、丙炔醇(6.33g，113mmol)和CuCl(0.311g)在350mL1，4-二氧六環(huán)中的混合物于攪拌下回流30min。反應(yīng)混合物冷至室溫并濃縮。殘渣用200mL50％NH4OH稀釋，并用EtOAc萃取。合并的提取液用水、鹽水洗滌，干燥并濃縮。殘渣用硅膠層析(用2.5％MeOH的CH2Cl2，然后用5％MeOH的CH2Cl2洗脫)，得油狀產(chǎn)物V(15.1g，收率81％)。權(quán)利要求1.一種治療尿失禁而避免伴隨產(chǎn)生的不良作用的方法，此法包括對需要這種治療的人給以有效治療量的從實質(zhì)上不含其R對映體的(S)-奧昔布寧和(S)-去乙基奧昔布寧或它們的藥物可接受的鹽中選擇的一個化合物。2.按照權(quán)利要求1的治療尿失禁而避免伴隨產(chǎn)生的不良作用的方法，此法包括對需要這種治療的人給以有效治療量的實質(zhì)上不含其R對映體的(S)-奧昔布寧或其藥物可接受的鹽。3.按照權(quán)利要求2的方法，其中(S)-奧昔布寧是以吸入給藥或是非腸道、透皮、直腸或口服給藥。4.按照權(quán)利要求3的方法，其中(S)-奧昔布寧和其藥物可以接受的鹽的給藥量為每天從約1mg至約100mg。5.按照權(quán)利要求2的方法，其中(S)-奧昔布寧或其藥物可接受的鹽為口服給藥。6.按照權(quán)利要求2的方法，其中(S)-奧昔布寧或其藥物可接受的鹽為透皮給藥。7.按照權(quán)利要求1的治療尿失禁而避免伴隨產(chǎn)生的不良作用的方法，此法包括對需要這種治療的人給以有效治療量的實質(zhì)上不含其(R)對映體的(S)-去乙基奧昔布寧或其藥物可接受的鹽。8.權(quán)利要求7的方法，其中(S)-去乙基奧昔布寧為經(jīng)吸入給藥或是經(jīng)非腸道、透皮、直腸或口服給藥。9.權(quán)利要求8的方法，其中(S)-去乙基奧昔布寧或其藥物可接受的鹽的給藥量為每天從約1mg至約100mg。10.按照權(quán)利要求7的方法，其中(S)-去乙基奧昔布寧或其藥物可接受的鹽為口服給藥。11.按照權(quán)利要求7的方法，其中(S)-去乙基奧昔布寧或其藥物可接受的鹽為透皮給藥。12.一種片劑或膠囊劑的藥物單劑量劑型，該劑型包含治療有效量的從實質(zhì)上不含(R)立體導(dǎo)構(gòu)體的(S)-奧昔布寧和(S)-去乙基奧昔布寧或其藥物可接受的鹽中所選擇的一種化合物；以及藥物可接受的載體。13.按照權(quán)利要求12的藥物單劑量劑型，含有從0.5至25mg的(S)-奧昔布寧。14.按照權(quán)利要求12的藥物單劑量劑型，含有從0.5至25mg的(S)-去乙基奧昔布寧。15.一種透皮給藥裝置的藥物劑量劑型，該劑型包含治療有效量的從實質(zhì)上不含(R)立體導(dǎo)構(gòu)體的(S)-奧昔布寧和(S)-去乙基奧昔布寧或其藥物可接受的鹽中所選擇的一種化合物，以及藥物可接受的載體。16.按照權(quán)利要求15的藥物劑量劑型，其中所述的藥物可接受載體包括滲透促進(jìn)劑。17.一種制備去乙基奧昔布寧的方法，包括的步驟為(a)α-環(huán)己基-α羥基苯乙酸甲酯與4-[N-乙基(4-甲氧基苯基)甲基氨基]-2-丁炔-1-醇在無水堿存在下反應(yīng)，生成α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸4-[N-乙基-(4-甲氧基苯基)甲基氨基]-2-丁炔基酯；和(b)上述α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸4-[N-乙基-(4-甲氧基苯基)甲基氨基]-2-丁炔基酯順序地與碳酰氯酯和甲醇反應(yīng)，生成α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸4-(乙氨基)-2-丁炔基酯。18.按照權(quán)利要求17的方法，包括附加的N-乙基-4-甲氧基苯甲胺與2-丙炔-1-醇和甲醛或甲醛的等同物在銅(I)鹽存在下反應(yīng)，生成4-[N-乙基-(4-甲氧基苯基)甲基氨基]-2-丁炔-1-醇的反應(yīng)步驟。19.按照權(quán)利要求18的方法包括(a)N-乙基-4-甲氧基苯甲胺與2-丙炔-1-醇和多聚甲醛在一種惰性溶劑中在氯化亞銅存在下反應(yīng)，生成4-[N-乙基-(4-甲氧基苯基)甲基氨基]-2-丁炔-1-醇；(b)α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸甲酯與上述4[N-乙基-(4-甲氧基苯基)甲基氨基]-2-丁炔-1-醇在甲醇鈉存在下在甲苯中反應(yīng)，生成α-環(huán)己-α-羥基苯乙酸4-[N-乙基-(4-甲氧基苯基)甲基氨基]-2-丁炔基酯；和(c)上述α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸4-[N-乙基-(4-甲氧基苯基)甲基氨基]-2-丁炔基酯順序與在二氯乙烷中的α-氯乙基-碳酰氯酯接著與甲醇反應(yīng)生成α-環(huán)己基-α-羥基苯乙酸4-(乙氨基)-2-丁炔基酯(去乙基奧昔布寧)。20.按照權(quán)利要求17的方法，其中所述的去乙基奧昔布寧富含單一的對映體。21.按照權(quán)利要求20的方法，其中所述的去乙基奧昔布寧為S-去乙基奧昔布寧。全文摘要揭示一種治療尿失禁而避免伴隨外消旋奧昔布寧產(chǎn)生的不良反應(yīng)的方法。此方法包括給予實質(zhì)上不含有相應(yīng)的R對映體的治療有效量的(S)－奧昔布寧、(S)－去乙基奧昔布寧或它們的藥物學(xué)可接受的鹽。也揭示了在片劑和透皮裝置形式中的藥物組合物包括(S)－奧昔布寧或(S)－去乙基奧昔布寧和一種可接受的載體,同時揭示了去乙基奧昔布寧的合成。文檔編號A61K9/66GK1179714SQ96192889公開日1998年4月22日申請日期1996年1月25日優(yōu)先權(quán)日1995年1月31日發(fā)明者古納爾·阿伯格,約翰·R·麥卡洛,方躍申請人:塞普拉科公司