專利名稱：：制備最佳尺寸的充氣泡囊的裝置和方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及制備充氣泡囊的方法和裝置，特別是用于超聲成像的充氣泡囊的制備方法和裝置。更具體地說，本發(fā)明涉及通過振動(dòng)制備充氣泡囊的方法和裝置，其中通過控制振動(dòng)參數(shù)在最短的時(shí)間內(nèi)提供最佳尺寸的泡囊。
背景技術(shù)：
：超聲技術(shù)的一種較之其它診斷技術(shù)有許多優(yōu)點(diǎn)的診斷成像技術(shù)。與核醫(yī)學(xué)及x-射線不同，超聲技術(shù)并不會(huì)讓患者接受可能有害的離子化電子輻射，這種輻射有可能造成對生物體物質(zhì)如DNA、RNA和蛋白質(zhì)的損害。此外，超聲技術(shù)與CT診斷或磁共振成像技術(shù)比相對價(jià)廉。超聲技術(shù)的原理是基于以下事實(shí)，根據(jù)被觀察的組織或血管的組成和密度，聲波對組織的反射不同。根據(jù)組織的組成不同，超聲波會(huì)通過吸收而消耗、穿透組織或反射回來。反射也稱之為背散射或反射能力，它是超聲成像的基礎(chǔ)。一種超聲波振子可用來敏感地測量返回的聲波，這種振子通常能在臨床上探測到1MHz-10MHz的聲波。這些波再整合成為一種定量圖像。再將定量波轉(zhuǎn)化成被觀測組織的圖像。盡管在超聲技術(shù)方面已有很大進(jìn)展，但仍然希望使得到2圖像進(jìn)行更精確，特別是考慮到充滿血液的那些血管和組織。因此，仍要求找到那些有助于觀察血管和血管相關(guān)的器官的試劑。泡囊為超聲技術(shù)理想的造影劑，這是因?yàn)?，聲音在?氣界面如泡囊的表面上的反射極其有效。作為有效的超聲造影劑，泡囊應(yīng)盡可能大而富有彈性，因?yàn)檫@些泡囊(泡大小和彈性)對于盡可能地反射來自泡囊的聲音是非常重要的。此外，泡囊在受壓下應(yīng)對壓力穩(wěn)定，即，在壓力下保持超過50％的氣體含量。同樣，希望泡囊在釋放壓力后應(yīng)能重新擴(kuò)展開。進(jìn)而，為了得到最大的反射并因此造影，希望有高泡囊濃度。從而，泡囊濃度成為確定泡囊效力的重要因素。具體說來，希望每毫升有泡囊100×106個(gè)以上，更優(yōu)選超過500×106個(gè)。但是，大小依然是確定成像用泡囊適應(yīng)性的關(guān)鍵因素。對于能安全通過毛細(xì)血管的泡囊，反射信號(瑞利散射)可能是泡囊大小的函數(shù)，泡囊提高至六次方，使得4μm直徑泡囊的散射能力為2μm直徑泡囊散射能力的64倍。由于泡囊直徑大于10μm可能是危險(xiǎn)的，大小也非常重要。靜脈內(nèi)或血管內(nèi)注射后，大的泡囊有可能阻塞靜微管。因此，重要的是即要使泡囊盡可能大以有效地反射聲波，又足以小至能通過毛細(xì)血管。為此，希望99％的泡囊小于10μm。進(jìn)而，平均泡囊大小應(yīng)至少為0.5μm，優(yōu)選超過1μm，更優(yōu)選接近2μm以便于最有效地造影。此外，體積加權(quán)平均值應(yīng)在7μm數(shù)量級。由于泡囊彈性越大，能擠壓通過毛細(xì)管的能力越大，因此泡囊的彈性也影響其最大可容許尺寸。不幸的是，有許多因素可能會(huì)阻止高彈性泡囊的形成，因而更進(jìn)一步增加了要使泡囊大小最佳化的重要性。未包衣的泡囊的彈性最大，但通常它們又是不穩(wěn)定的。結(jié)果，人們通常試圖通過包被來增加泡囊的穩(wěn)定性，但這又會(huì)降低它們的彈性。此外，已建議使用包封在蛋白外殼內(nèi)的氣體或氣體前體，蛋白質(zhì)與生物可降解交聯(lián)劑交聯(lián)，同時(shí)使用與生物相容化合物共價(jià)交聯(lián)的非蛋白泡囊?？梢栽O(shè)想，這種交聯(lián)劑將會(huì)增加泡囊的剛性成分，因而降低其彈性。公所周知，通過振動(dòng)表面活性劑在液體介質(zhì)中的溶液制備脂質(zhì)體(參見U.S.4,684,479，D’Arrigo)，但是迄今并未開發(fā)出在盡可能少的時(shí)間內(nèi)制備具有最佳大小之泡囊的方法。因此，由于上述各種原因，人們?nèi)韵Ｍ业揭环N制備泡囊的方法和裝置，其中可控制振動(dòng)參數(shù)以在最短的時(shí)間內(nèi)生產(chǎn)出最佳大小的泡囊。發(fā)明概述本發(fā)明的目的是提供一種制備泡囊的方法和裝置，其中可控制振動(dòng)變量以在最短的時(shí)間內(nèi)生產(chǎn)出最佳尺寸的泡囊。按以下方法可實(shí)現(xiàn)該目的和其它目的，所述方法中，使用往復(fù)運(yùn)動(dòng)來振動(dòng)包含含水懸浮液相和氣相的容器。往復(fù)運(yùn)動(dòng)由振動(dòng)臂產(chǎn)生，該振動(dòng)臂使容器在兩個(gè)基本上垂直的方向上運(yùn)動(dòng)。第一個(gè)方向上的運(yùn)動(dòng)是沿著一條弧形路徑進(jìn)行，該路徑的曲率半徑至少為6cm，并包容至少3°的角度。運(yùn)動(dòng)的整體路徑以8字形進(jìn)行。振動(dòng)頻率至少為2800RPM，振動(dòng)幅度至少為0.3cm，容器在每一循環(huán)中的運(yùn)行總長度至少為0.7cm。本發(fā)明也提供了使用上述方法振動(dòng)包含含水懸浮液相和氣相的裝置。該裝置優(yōu)選具有一個(gè)振動(dòng)臂，其長度至少為6cm，旋轉(zhuǎn)通過至少3°的角度。附圖簡述圖1為本發(fā)明振動(dòng)裝置容器部分的正視圖，其中通過本發(fā)明的振動(dòng)方法制備泡囊。圖2為不包括容器的本發(fā)明振動(dòng)裝置的立體圖。圖3為不含蓋子但包括安裝圖1所示容器的圖2所述振動(dòng)裝置的縱剖面圖。圖4和5分別為當(dāng)圖1所示容器安裝在圖2所示振動(dòng)裝置上運(yùn)行路徑的正視圖和平面圖，圖5是沿圖4所示V-V線剖開的。圖6為圖2所示振動(dòng)裝置的主要內(nèi)部組件的立體圖。圖7和8為振動(dòng)臂安裝于驅(qū)動(dòng)軸上的區(qū)域附近圖2所示振動(dòng)裝置的縱剖面圖，當(dāng)偏心套管為圖8所示取向時(shí)振動(dòng)臂的位置以幻影形式示于圖7。圖9(a)和(b)為圖7所示振動(dòng)臂沿IX-IX線剖開的示意圖，只是在圖9(a)和(b)中偏心套管分別從圖7所示的取向旋轉(zhuǎn)了90°和270°。圖10為沿圖9(b)所示X-X線的剖面圖，幻影示出了當(dāng)偏心套管旋轉(zhuǎn)180°時(shí)套筒的取向。圖11為安裝于驅(qū)動(dòng)軸上的偏心套管的立體圖。圖12為類似圖9的示意圖，示出了當(dāng)采用較低的彈簧張力時(shí)振動(dòng)臂的取向。圖13為表明振動(dòng)頻率(RPM)、振動(dòng)臂長度L(cm)、軸承偏角θ間關(guān)系的關(guān)系圖，用以獲得圖14-16所示的試驗(yàn)結(jié)果。圖14(a)-(c)為表明軸承偏角θ為6°，根據(jù)圖13變化振動(dòng)臂長度和RPM時(shí)，泡囊小于10μm的百分?jǐn)?shù)、數(shù)目加權(quán)平均值大小、顆粒數(shù)/ml與振動(dòng)臂長度L(mm)間關(guān)系的關(guān)系圖。圖15(a)-(c)為類似圖14(a)-(c)的關(guān)系圖，只是比較了軸承偏角θ為9°下與圖14(a)-(c)所獲得的結(jié)果。圖16(a)-(c)為表明泡囊小于10μm的百分?jǐn)?shù)、數(shù)目加權(quán)平均值大小、顆粒數(shù)/ml與振動(dòng)路徑總長度(cm)間關(guān)系的關(guān)系圖。圖17為表明振動(dòng)頻率(RPM)、振動(dòng)路徑總長度(cm)間關(guān)系的關(guān)系圖，用以得到圖16所示的試驗(yàn)結(jié)果。圖18(a)-(c)為表明泡囊小于10μm的百分?jǐn)?shù)、數(shù)目平均值尺寸和顆粒數(shù)/ml在三種不同類型的振動(dòng)設(shè)備中的關(guān)系圖。優(yōu)選實(shí)施方案描述按照本發(fā)明的方法，如圖1所示，首先將優(yōu)選包含類脂的含水懸浮液34置于容器9中來制備最佳尺寸的泡囊。本文中術(shù)語“泡囊”是指球狀實(shí)體，特征是在球面內(nèi)部是中空。優(yōu)選的泡囊是由類脂制成的，類脂包括本文描述的各種類脂。在任一種給出的泡囊中，類脂可以為單層或雙層，單層或雙層類脂可用來形成一個(gè)或多個(gè)單層或雙層。對于多于單層或雙層的情形，單層或雙層通常為同心的。本文所述泡囊有時(shí)也被稱之為泡或微泡，包括通常被稱作脂質(zhì)體和微膠粒等的實(shí)體。因此，類脂可用于形成單層狀泡囊(包含一個(gè)單層或雙層)、幾層的泡囊(包含約兩個(gè)或三個(gè)單層或雙層)或多層的泡囊(包含多于三個(gè)單層或雙層)。泡囊的內(nèi)部空隙可以用液體(包括，例如含水液體)、氣體、氣體前體和/或固休或可溶性物質(zhì)(包括，例如導(dǎo)向配體和/或生物活性試劑)?！爸|(zhì)體”是指通常為兩親化合物的球形簇或聚集物，包括類脂化合物，通常為一種或多種同心層的形式。充氣的脂體最好由單層或單個(gè)的單層類脂構(gòu)成。各種類脂可用于構(gòu)造脂質(zhì)體，其包括磷脂和非離子表面活性劑(如niosomes)。在生理溫度下，含類脂的充氣脂質(zhì)體最好為凝膠狀態(tài)。脂質(zhì)體可被交聯(lián)或聚合，可在其表面上負(fù)載聚合物如聚乙二醇。導(dǎo)向內(nèi)皮細(xì)胞的配體被結(jié)合至充氣的脂質(zhì)體表面上。導(dǎo)向配體為結(jié)合至泡囊并使泡囊導(dǎo)向特定細(xì)胞型(如但不限于內(nèi)皮組織和/或細(xì)胞)的物質(zhì)。導(dǎo)向配體可通過共價(jià)或非共價(jià)鍵與泡囊結(jié)合。本文中脂質(zhì)體也可被稱作類脂泡囊。脂質(zhì)體最好在其內(nèi)部基本上不含水?！拔⒛z粒”是指當(dāng)類脂化合物如十二烷基硫酸酯的濃度高于其臨界濃度時(shí)由類脂化合物形成的膠體。由于形成微膠粒的許多化合物也具有表面活性劑的性質(zhì)(即能降低表面張力，且既具有親水性又具有親油性區(qū)域結(jié)構(gòu))，這些相同的物質(zhì)也可用于穩(wěn)定泡囊。通常，這些微膠粒物質(zhì)優(yōu)先采用單怪或六方形H2相構(gòu)型，也可采用雙層構(gòu)型。當(dāng)微膠粒物質(zhì)用于形成充氣的泡囊時(shí)，該化合物通常將采用徑向構(gòu)型，其中親油部分指向泡囊和親水區(qū)背向泡囊表面。為導(dǎo)向內(nèi)皮細(xì)胞，導(dǎo)向配體可附著于微膠?；衔锘蚺c微膠?；衔锘旌系挠H油物質(zhì)上。另外，導(dǎo)向配體也可吸附在穩(wěn)定泡囊的微膠粒物質(zhì)上。容器9的其余部分或液面上空間32，于含水懸浮相34的上方為氣體相。如果將空氣外的其它氣體用作氣相，則通過用氣體吹掃容器9而引入氣相，使氣體占據(jù)含水懸浮液34上面的液面上空間32。因此，在振動(dòng)以前，容器9包含含水懸浮相及氣相。然后，將容器9安裝在本發(fā)明的振動(dòng)裝置1的振動(dòng)臂7上，優(yōu)選的方式示于圖2、3和6-11，經(jīng)充分振動(dòng)而形成所需的泡囊。雖然在振動(dòng)后可使用過濾器來進(jìn)一步改善泡囊的大小分布情況，但本發(fā)明的著眼點(diǎn)是控制振動(dòng)參數(shù)以在任何后振動(dòng)過濾前生產(chǎn)出具有最佳尺寸的泡囊。為此，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，通過振動(dòng)產(chǎn)生的泡囊的尺寸主要為以下四個(gè)變量的函數(shù)(i)含水懸浮液相的組成；(ii)液面上空間中氣相的組成；(iii)容器的體積及由氣相初始占據(jù)的液面上空間的相對體積，及(iV)主要振動(dòng)參數(shù)的定義，即振動(dòng)期間由容器傳輸?shù)穆窂降男螤?、振?dòng)運(yùn)動(dòng)的振幅、振動(dòng)的持續(xù)時(shí)間和頻率。根據(jù)本發(fā)明的方法，可在制備泡囊的過程中調(diào)節(jié)上述變量以得到所需的泡囊大小分布和濃度，優(yōu)選的泡囊大小分布是，泡囊的平均大小為至少約0.5μm，優(yōu)選至少95％、更優(yōu)選至少99％的泡囊的直徑小于10μm，產(chǎn)生的泡囊的濃度至少為100×106個(gè)泡囊/ml，更優(yōu)選至少為500×106個(gè)泡囊的且經(jīng)小于10μm，產(chǎn)生的泡囊的濃度至少為100×106個(gè)泡囊/ml，更優(yōu)選至少為500×106個(gè)泡囊/ml。下面在第I-IV節(jié)，分別討論上述四個(gè)變量。在第V節(jié)，描述了實(shí)施本發(fā)明方法的優(yōu)選裝置。第VI節(jié)則討論了本發(fā)明制備的泡囊的一些應(yīng)用情況。I.含水懸浮液相的組成各種泡囊包被劑均可用于含水懸浮液相中。優(yōu)選該包被劑為類脂。按需要，類脂可為飽和或不飽和的，可為直鏈或支鏈形式。這種類脂可包括，例如，含寬范圍碳原子的脂肪酸分子，優(yōu)選含約12-22個(gè)碳原子。也可采用由類異戊二烯單元構(gòu)成的烴基、含異戊二烯基的和/或甾醇部分(如膽甾醇、膽甾醇硫酸酯及其類似物)。類脂也可帶有聚合物鏈，如兩親聚合物聚乙二醇(PEG)或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)或其衍生物(用于體內(nèi)導(dǎo)向)，或帶電荷的氨基酸如聚賴氨酸或聚精氨酸(用于負(fù)電化合物的鍵合)，或碳水化合物(用于體內(nèi)導(dǎo)向)(如U.S.4,310,505所述)，或糖脂(用于體內(nèi)導(dǎo)向)，或抗體和其它肽和蛋白質(zhì)(用于體內(nèi)導(dǎo)向)等。這種導(dǎo)向化合物或鍵合化合物可簡單地加至含水類脂懸浮液相中，或者可被特定地化學(xué)結(jié)合至類脂上。類脂也可為陰離子或陽離子類脂，從而它們自身能鍵合其它化合物如藥物、遺傳物質(zhì)或其它治療物。適宜的類脂和特別適宜的類脂的實(shí)例包括磷脂酰膽堿，如一油酰基磷脂酰膽堿、二肉桂?；字Ｄ憠A、二棕櫚?；字Ｄ憠A(DPPC)、二硬脂?；字Ｄ憠A；磷脂酰乙醇胺，如二棕櫚?；字Ｒ掖及?DPPE)、二油?；字Ｒ掖及泛蚇-琥珀?；?二油?；字Ｒ掖及?；磷脂酰絲氨酸；磷脂酰甘油；鞘脂類；糖脂，如神經(jīng)節(jié)苷脂GM1，糖脂；硫苷脂；糖鞘脂；磷脂酸，如二棕櫚?；字?DPPA)；棕櫚酸；硬脂酸；花生四烯酸；月桂酸；肉豆蔻酸；月桂烯酸；抹香鯨酸；肉豆蔻烯酸；棕櫚烯酸；巖芹酸；油酸；異月桂酸；異肉豆蔻酸；異棕櫚酸；異硬脂酸；膽甾醇和膽甾醇衍生物，如膽甾醇半琥珀酸酯、膽甾醇硫酸酯及膽甾醇-(4′-三甲基銨基)丁酸酯；聚氧乙烯脂肪酸酯；聚氧乙烯脂肪醇；聚氧乙烯脂肪醇醚；聚氧乙烯化山梨醇脂肪酸酯；甘油聚乙二醇氧基硬脂酸酯；甘油聚乙二醇蓖麻醇酸酯；乙氧基化大豆甾醇；乙氧基化蓖麻油；聚氧乙烯-聚氧丙烯脂肪酸聚合物；聚氧乙烯脂肪酸硬脂酸酯；12-(((7′-二乙氨基香豆素-3-基)-羰基)-甲氨基)-硬脂酸；N-[12-(((7′-二乙氨基香豆素-3-基)-羰基)-甲氨基)硬脂?；鵠-2-氨基-棕櫚酸；1，2-二油酰基-sn-甘油；1，2-二棕櫚?；?sn-3-琥珀?；视?；1，3-二棕櫚?；?2-琥珀?；?甘油；1-十六烷基-2-棕櫚?；?甘油磷酰乙酰胺和棕櫚?；甙腚装彼幔辉鹿鸹谆寤@；鯨蠟基三甲基溴化銨；肉豆蔻基三甲基溴化銨；烷基二甲基芐基氯化銨，如其中烷基為C12、C14或C16烷基；芐基二甲基十二烷基溴化銨；芐基二甲基十二烷基氯化銨、芐基二甲基十六烷基溴化銨；芐基二甲基十六烷基氯化銨；芐基二甲基十四烷基溴化銨；芐基二甲基十四烷基氯化銨；十六烷基二甲基乙基溴化銨；十六烷基二甲基乙基氯化銨；十六烷基溴化吡啶鎓；十六烷基氯化吡啶鎓；N-[1-2，3-二油酰氧基-丙基]-N，N，N-三甲基氯化銨(DOTMA)；1，2-二油酰氧基-3-(三甲基銨基)丙烷(DOTAP)；1，2-二油酰基-e-(4′-三甲基銨基)-丁酰-sn-甘油(DOTB)。本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以看出，上述類脂僅為舉例性的，通過以上描述，可以采用其它有用的類脂、脂肪酸和其衍生物及其組合，這些化合物同樣也屬本文中術(shù)語類脂的范圍。普通的專業(yè)技術(shù)人員知道，這些類脂和/或其組合經(jīng)容器振動(dòng)后會(huì)形成脂質(zhì)體(即具有內(nèi)部中空的類脂球)，這些脂質(zhì)體能收集在其內(nèi)部間隙氣相中的氣體。脂質(zhì)體可由單一類脂層(類脂單層)、兩類脂層(類脂雙層)或多于兩層的類脂層(類脂多層)組成。一般說來，優(yōu)選類脂保持凝膠狀態(tài)，即低于類脂物質(zhì)的凝膠態(tài)至液晶相轉(zhuǎn)化溫度(Tm)，特別是在振動(dòng)過程中。各種類脂從凝膠態(tài)至液晶態(tài)相轉(zhuǎn)化溫度均是公知的。這種溫度也易于使用公知技術(shù)進(jìn)行計(jì)算。例如，下表1示出了各種代表性飽和磷脂酰膽堿類脂的主鏈相轉(zhuǎn)化溫度，來自于DerekMarsh，“類脂雙層的CRC手冊(CRCHandbookofLipidBilayers，139頁，CRCPress，BocaRaton，F(xiàn)lorida(1990)”。表1飽和二?；?sn-甘油-(3)-磷酰基膽堿主鏈熔化轉(zhuǎn)化在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，含水類脂相還包含一種聚合物，優(yōu)選一種兩親聚合物，并且優(yōu)選直接鍵合(化學(xué)結(jié)合)至類脂上的聚合物。兩親聚合物優(yōu)選聚乙二醇或其衍生物。最優(yōu)選的組合是鍵合至聚乙二醇(PEG)，特別是平均分子量為約5000的PEG上的類脂二棕櫚酰基磷脂酰乙醇胺(DPPE)，即DPPE-PEG5000?？赏ㄟ^共價(jià)鍵如通過酰胺、氨基甲酸酯或胺鍵將PEG或其它聚合物鍵合至DPPE或其它類脂上。另外，也可以將PEG或其它聚合物通過酯、醚、硫酯、硫代酰胺或二硫化物(硫酯)鍵與膽甾醇或其它磷脂鍵合。特別優(yōu)選的類脂組合為DPPC、DPPE-PEG5000和DPPA，特別是DPPC∶DPPE-PEG5000∶DPPA的比值約為82％∶8％∶10％(摩爾％)。其它在含水懸浮液相中可選用或填加的包被劑包括聚合物如蛋白質(zhì)、大然及半天然碳水化合物和合成聚合物。各種不同的蛋白質(zhì)可用于本發(fā)明中以生產(chǎn)充氣的泡囊。這些蛋白質(zhì)包括來自天然(人和動(dòng)物)及重組源的清蛋白、血纖維蛋白、膠原蛋白、抗體和彈性硬蛋白。天然多糖包括淀粉、纖維素、藻酸、果膠、葡聚糖、肝素、透明質(zhì)酸。半天然多糖包括甲基纖維素、羥丙基纖維素羧甲基纖維素和羥乙基淀粉。合成聚合物包括聚乙烯吡咯烷酮、乙二醇和丙二醇的共聚物(如環(huán)氧乙烷-環(huán)氧丙烷的嵌段共聚物F-68和其它環(huán)氧乙烷-環(huán)氧丙烷的嵌段共聚物類)、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚乳酸、乳酸與乙醇酸的共聚物、聚甲基丙烯酸酯和雙酯聚合物。本發(fā)明中也可用無機(jī)介質(zhì)如羥基磷灰石和焦磷酸鈣。在所有這些情形下，在容器中將泡囊包被劑懸浮在含水相中，液面上空間為所選氣體，然后振動(dòng)。從而形成穩(wěn)定的包被的泡囊。本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以看出，根據(jù)本發(fā)明的原理，通過以上描述，可以采用各種不同的穩(wěn)定劑制備泡囊。在采用人血清清蛋白的實(shí)驗(yàn)中(BRL-LifeTechnologies，Gaithersburg，Maryland)，將包含清蛋白溶液及液面上空間為全氟丙烷氣體的10ml玻璃小管(液體體積為6ml，5mg/ml清蛋白溶液)在2800RPM下用Wig-L-BugTM振動(dòng)2分鐘，生產(chǎn)出濃度為50×106顆粒/ml，平均直徑為5μm的血清蛋白包被的全氟丙烷泡囊。此外，本發(fā)明的用途與各種懸浮劑和/或粘度劑相容。本文所使用的術(shù)語懸浮劑是指有助于在造影介質(zhì)中提供相對均勻性或均一性的化合物。可使用許多這類試劑，包括黃原膠、金合歡樹膠(阿拉伯膠)、瓊脂、藻酸、單硬脂酸鋁、黃蓍膠糖、刺梧桐樹膠、阿拉伯膠、未純化的膨潤土、純化的膨潤土、膨潤土糊、聚羧乙烯934P、羧甲基纖維素鈣、羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈉12、角叉膠、纖維素(微晶纖維素)、葡聚糖、明膠、瓜爾膠、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、硅酸鋁鎂、甲基纖維素、果膠、酪蛋白、明膠、聚環(huán)氧乙烷、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、丙二醇、藻酸鹽、二氧化硅、二氧化硅膠體、藻酸鈉和其它藻酸鹽及黃蓍膠。本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以看出，如果需要的話，各種懸浮劑可用于本發(fā)明的造影介質(zhì)中。這些試劑的用量可以根據(jù)所選的泡囊穩(wěn)定介質(zhì)變化，振動(dòng)參數(shù)也可根據(jù)所用的物質(zhì)而改變。由于類脂具有生物相容性、低素性、易于得到純的藥品級物質(zhì)等性能，因而成為優(yōu)選的制備本發(fā)明充氣泡囊的泡囊包被劑。為了制備含水相，如本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的那樣，使類脂或其它包被劑與水(優(yōu)選蒸餾水)、生理鹽水、磷酸鹽緩沖的生理鹽水或其它水基溶液混合。通過以上描述，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以看出，在本發(fā)明的含水懸浮液相中可采用各種添加劑以穩(wěn)定懸浮液相，或者穩(wěn)定振動(dòng)后的充氣的泡囊。如果需要，可將這些添加劑在振動(dòng)前加到含水懸浮液中。當(dāng)然，本領(lǐng)域的技術(shù)人員也易于看出這種添加劑的使用取決于所形成的充氣的泡囊的特定用途。本發(fā)明中可采用許多種穩(wěn)定劑，它們包括黃原膠、金合歡樹膠(阿拉伯膠)、瓊脂、瓊脂糖、藻酸、藻酸鹽、藻酸鈉、角叉膠、葡聚糖、糊糖、明膠、瓜爾膠、黃蓍膠、刺槐豆膠、黃蓍膠糖、刺梧桐樹膠、阿拉伯膠、果膠、酪蛋白、膨潤土、未純化的膨潤土、純化的膨潤土、膨潤土糊、膠體、纖維素、纖維素(微晶)、甲基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素、羧甲基纖維素鈣、羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈉12，以及其它天然或改性天然纖維素、聚山梨酸酯、聚羧乙烯934P、硅酸鋁鎂、單硬脂酸鋁、聚環(huán)氧乙烷、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、丙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、二氧化硅、二氧化硅膠體。此外，諸如全氟辛基溴(PFOB)、全氟辛基碘、全氟三丙基胺及全氟三丁基胺等化合物均可作為穩(wěn)定劑用于類脂相。在體溫下，超過五個(gè)碳原子的全氟化碳通常為液體，因此這類全氟化碳也優(yōu)選用作穩(wěn)定劑。適宜的全氟化碳包括全氟己烷、全氟庚烷、全氟辛烷、全氟萘烷和全氟十二靈。此外，為了穩(wěn)定，全氟化類脂或部發(fā)氟化的類脂也可使用。本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以看出，可以使用本發(fā)明所述類脂的各種全氟化和部分氟化的類脂物。由于它們相對于烴類脂具有相對的疏水性，考慮穩(wěn)定性，這種全氟化或部分氟化類脂甚至更有優(yōu)越性。全氟化或部分氟化的類脂的實(shí)例為F6C11磷脂酰膽堿(PC)和F8C5PC。類似物可參見Santaella等的“FederationofEuropeanBiochemicalSocieties(FEBS)”，Vol.336，No.3，PP.418-484(1993)，該文獻(xiàn)引入本文作參考。各種生物相容的油也可用于輔助穩(wěn)定，如花生油、carola油、橄欖油、紅花油、玉米油、杏仁油、棉籽油、桃仁油、芝麻油、豆油、礦物油、礦物油輕餾分、油酸乙酯、肉豆蔻醇、肉豆蔻酸異內(nèi)酯、棕櫚酸異丙酯、十八碳醇、丙二醇、甘油、角鯊烯，或任何其它公知的可消化油。也包括卵磷脂、鞘磷脂、膽甾醇、膽甾醇硫酸酯和甘油三酸酯。也可以通過加入各種粘度調(diào)節(jié)劑實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定作用，粘度調(diào)節(jié)劑可用作本發(fā)明的穩(wěn)定劑。這類化合物包括但不限于(1)碳水化合物和其磷酸化和磺化衍生物；(2)分了量為400-8000的聚醚；(3)二和三羥基烷烴及它們的分子量為800-8000的聚合物。脂質(zhì)體也可與乳化劑和/或增溶劑起結(jié)合使用，這些試劑包括但不限于阿拉伯膠、膽甾醇、二乙醇胺、單硬脂酸甘油酯、羊毛脂醇、卵磷脂、單酸和二酸甘油酯、二乙醇胺、油酸、油醇、泊洛沙姆、聚氧乙烯50硬脂酸酯、聚氧35蓖麻油、聚氧10油醚、聚氧20鯨蠟硬脂酰醚、聚氧40硬脂酸酯、聚山梨酯20、聚山梨酯40、聚山梨酯60、聚山梨酯80、丙二醇二乙酸酯、丙二醇單硬脂酸酯、十二烷基硫酸鈉、硬脂酸鈉、山梨醇單月桂酸酯、山梨醇單油酸酯、山梨醇單棕櫚酸酯、山梨醇單硬脂酸酯、硬脂酸、三乙醇胺、乳化蠟、環(huán)氧乙烷-環(huán)氧丙烷的嵌段共聚物F61、環(huán)氧乙烷-環(huán)氧丙烷的嵌段共聚物F64和環(huán)氧乙烷-環(huán)氧丙烷的嵌段共聚物F68。其它可加入的試劑包括張力劑如聚醇，如甘油、丙二醇、聚乙烯醇、聚乙二醇、葡萄糖、木糖醇、山梨糖醇、氯化鈉等。如果需要的活，在制劑中也可包含抗菌劑和/或防腐劑。這些試劑包括苯甲酸鈉、所有的季銨鹽、疊氮化鈉、對羥苯甲酸甲酯、對羥苯甲酸丙酯、山梨酸、山梨酸鉀、山梨酸鈉、抗壞血酸棕櫚酸酯、丁基化羥基茴香醚、丁基化羥基甲苯、氯丁醇、脫氫乙酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、單硫代甘油、苯甲酸鉀、偏亞硫酸氫鉀、山梨酸鉀、亞硫酸氫鈉、二氧化硫，有機(jī)汞鹽。如果需要的話，可采用滲透性試劑來控制滲透性。透宜的滲透活性物質(zhì)包括生理相容的化合物如單糖、二糖、糖醇、氨基酸和各種合成化合物。適宜的單糖或糖醇包括，例如赤蘚糖、蘇糖、核糖、阿糖、木糖、來蘇糖、阿洛糖、阿卓糖、葡萄糖、甘露糖、艾杜糖、半乳糖、塔羅糖、海藻糖、核酮糖、果糖、山梨醇、甘露醇、景天庚酮糖，優(yōu)選的單糖為果糖、甘露糖、木糖、阿糖、甘露醇和山梨醇。適宜的二糖包括，例如乳糖、蔗糖、麥芽糖和纖維素二糖。適宜的氨基酸包括，例如甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、賴氨酸、精氨酸、組氨酸。合成化合物包括，例如甘油、丙二醇、聚丙二醇、乙二醇、聚乙二醇和聚乙烯吡咯烷酮。其它各種適宜的滲透活性物質(zhì)為本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，它們也屬本發(fā)明所述滲透性劑范圍之內(nèi)。為各種不同目的和用途也可添加各種如上所述的聚合物。本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以看出，添加劑如上述懸浮劑可根據(jù)需要，依據(jù)具體的最終應(yīng)用目的，以各種用量用于本發(fā)明的含水懸浮液相中。雖然再高或再低一些也可以，但添加劑的用量通常約為形成的造影劑制劑的0.01％-95％(體積)。一般說來，懸浮劑的用量通常為至少約0.5％(體積)，優(yōu)選至少約1％(體積)，最好至少約10％(體積)。通常，該懸浮劑的用量應(yīng)小于約50％(體積)，優(yōu)選小于約40％(體積)，最好小于約30％(體積)。例如，懸浮劑之常規(guī)用量為約20％(體積)。同樣，為實(shí)現(xiàn)最佳滲透性，滲透活性物質(zhì)的用量通常小于約25g/l，優(yōu)選小于約20g/l，更優(yōu)選小于約15g/l，最好小于約10g/l，在某些情形下，不用滲透活性物質(zhì)。滲透活性物質(zhì)的最佳用量范圍是約0.002-10g/l。在理解了本發(fā)明后，本領(lǐng)域的技術(shù)人員易于看出這些及其它添加劑用量的適宜范圍。通過將所需治療劑或診斷劑簡單地加至含水懸浮液相中可將各種治療劑和/或診斷劑摻入該相中。在理解本發(fā)明后，本領(lǐng)域的技術(shù)人員易于想到適宜的治療劑和診斷劑。這些試劑可摻入類脂膜中或引入類脂膜上，或包被在形成的脂質(zhì)體中。為了進(jìn)一步改善形成的用于MRI的充氣泡囊的磁作用，可添加例如一種或多種MRI造影增強(qiáng)劑，如順磁性或超順磁性造影增強(qiáng)劑。有用的MRI造影增強(qiáng)劑包括順磁離子，如過渡金屬，包括鐵(Fe+3)、銅(Cu+2)和錳(Mn+2)和鑭系元素如釓(Gd+3)和鏑(Dy+3)，硝基氧、氧化鐵(Fe3O4)、亞硫酸鐵和順磁顆粒如錳(Mn+2)取代的羥基磷灰石。同樣，可采用的其它順磁性離子的實(shí)例為試劑如鉻(Cr+3)、鎳(Ni+2)、鈷(Co+2)和銪(Eu+2)。也可使用其它造影增強(qiáng)劑如硝基氧基團(tuán)或任何其它具有順磁性保持不成對電子旋轉(zhuǎn)的原子。最好在振動(dòng)之前，將造影增強(qiáng)劑加至含水懸液相中，應(yīng)設(shè)法使造影增強(qiáng)劑在振動(dòng)后進(jìn)入形成的充氣泡囊或在其表面上，當(dāng)然，也可在制備完泡囊再加入。形成的充氣的泡囊其松弛性得到很大增強(qiáng)，對磁共振成像提供了特別有效的造影。至于具體的實(shí)例，當(dāng)磷脂酰膽堿或磷脂酰絲氨酸用于含水類脂相中時(shí)，錳(Mn+2)將其自身引入類脂的頭部基團(tuán)上。如果需要的話，可用脂溶性化合物來鰲合金屬，這些化合物如可參見U.S.5,312,617，該文獻(xiàn)引入本文以作參考。這類脂溶性化合物是非常有用的，其原因就是它們易于引入類脂膜中。為了實(shí)現(xiàn)向類脂表面的引入，鐵氧化物和其它顆粒通常應(yīng)較小，優(yōu)選小于約1μ，更優(yōu)選小于約200nm，首選小于100nm。為改善引入效果，可使用脂肪族化合物或親脂化合物包被的鐵氧化物，這是因?yàn)樗鼈兛杀灰肱荼砻娴念愔恢?。含水懸浮液相包含一種引起膠凝的成份也屬本發(fā)明的范圍，所述成份使在類脂聚合物和金屬內(nèi)引起膠凝，它們不會(huì)自發(fā)凝膠，或者所述成分可增強(qiáng)膠凝作用?？刹捎玫哪z凝劑實(shí)例為多價(jià)金屬陽離子、糖和多元醇。用作膠凝劑的多價(jià)金屬陽離子包括鈣、鋅、錳、鐵和鎂。有用的糖包括單糖如葡萄糖、半乳糖、果糖、阿糖、阿洛糖和阿卓糖，二糖如麥芽糖、蔗糖、纖維素二糖和乳糖，多糖如淀粉。優(yōu)選采用簡單糖，即單糖或二糖。多元醇膠凝劑包括，例如，縮水甘油、肌醇、甘露醇、山梨醇、季戊四醇、半乳糖醇，和聚乙烯醇。本發(fā)明采用的膠凝劑首選蔗糖和/或鈣。在理解了本發(fā)明后，本領(lǐng)域的技術(shù)人員易于看出可用于本發(fā)明各種制劑的特定膠凝劑。類脂如磷脂酸與鈣或鎂鹽和聚合物如藻酸、透明質(zhì)酸或羧甲基纖維素的組合可用于穩(wěn)定類脂?？梢约僭O(shè)，在類脂和聚合物間二價(jià)陽離子形成金屬橋，從而穩(wěn)定了類脂/聚合物體系內(nèi)充氣的脂質(zhì)體。類似地，可制備包含脫乙酰殼多糖(或殼多糖基物質(zhì))、聚賴氨酸、聚乙二胺和藻酸(或其衍生物)或透明質(zhì)酸混合物的懸浮液。業(yè)已發(fā)現(xiàn)，含水相中的不同物質(zhì)對控制形成的氣體增充泡囊大小是非常重要的。表2顯示出振動(dòng)裝有含水相及液相上空間的氮?dú)獾臒o菌容器而生產(chǎn)的脂質(zhì)體的尺寸。在各種情形下，可用顆粒測定大小系統(tǒng)770型光測顆粒儀(ParticleSizingSystems，SantaBarbara，CA)測量脂質(zhì)體的大小。如數(shù)據(jù)表明，含水相中類脂的比例影響形成的充氣脂質(zhì)單元大小分布。具體而言，下表2顯示出類脂組成對平均脂質(zhì)體大小的影響。表2類脂組成對平均脂質(zhì)體大小的影響</tables>*二棕櫚?；字Ｄ憠A∶二棕櫚?；字帷枚貦磅；字Ｒ掖及?PEG5000間的摩爾％。表3示出了限定類脂組成的混合物濃度對平均脂質(zhì)體大小的影響。如表3所示，類脂的總濃度在影響振動(dòng)后脂質(zhì)體大小方面也是重要的。在這些實(shí)驗(yàn)中，三種不同類脂成分的比值保持恒定，而類脂在水相中的濃度在0.5-5.0mg/ml間變化。所用的氣體為氮?dú)?。?dāng)含水相中類脂的濃度為1.0mg/ml時(shí)，生產(chǎn)液面上空間的全氟丁烷的最佳尺寸的超聲診斷用泡囊。表3類脂濃度對平均脂質(zhì)體大小的影響</tables>*對各個(gè)試樣類脂濃度均基于摩爾％比為82∶l0∶8(二棕櫚?；字Ｄ憠A∶二棕櫚酰基磷脂酸∶二棕櫚?；字Ｒ掖及?PEG5000。所用氣體為氮?dú)?。泡囊大小也取決于穩(wěn)定介質(zhì)如類脂的濃度。例如，已發(fā)現(xiàn)，使用氮?dú)鈱︻愔瑵舛葹?.0mg/ml與使用全氟丁烷時(shí)類脂濃度為5.0mg/ml所產(chǎn)生的充氣脂質(zhì)體直徑基本相同。但是，還發(fā)現(xiàn)，濃度高可能會(huì)使分布更偏向于較大的充氣脂質(zhì)體。這種現(xiàn)象反映出類脂濃度高會(huì)增加充氣脂質(zhì)體的穩(wěn)定性。因而可以相信，高濃度類脂可作為含水相穩(wěn)定劑起到穩(wěn)定作用，或可在氣體周圍提供更多的薄片，使其更穩(wěn)定，因而，可保持更大比例的大的脂質(zhì)體。同樣可相信，當(dāng)考慮其它變量時(shí)，在充氣泡囊界面和含水介質(zhì)的表面張力也是優(yōu)化充氣泡囊大小的附加決定因素。II.氣相組成本發(fā)明的氣相中可以采用各種不同的氣體。優(yōu)選氣體基本上不溶于含水懸浮液相。所謂“基本上不溶”是指氣體在20℃和1大氣壓下的溶解度等于或小于18ml氣體/kg水。照此，基本上不溶性氣體的溶解度應(yīng)小于氮?dú)獾娜芙舛取Ｈ芙舛葍?yōu)選等于或小于15ml氣體/kg水，更優(yōu)選等于或小于10ml氣體/kg水(20℃，1大氣壓)。在上述溫度和壓力下，優(yōu)選氣體的溶解度為約0.001-18ml氣體/kg水，或約0.01-15ml氣體/kg水，或約0.1-10ml氣體/kg水，或約1-8ml氣體/kg水，或約2-6ml氣體/kg水。例如在20℃及1大氣壓下，全氟化碳和氟化氣體六氟化硫的溶解度小于10ml氣體/kg水，因此而成為優(yōu)選的氣體。本文中將那些非“基本上不溶”的氣體稱之為可溶性氣體。其它適宜的基本上不溶性或可溶性氣體包括但不限于六氟丙酮、異丙基乙炔、丙二烯、四氟丙二烯、三氟化硼、1，2-丁二烯、1，3-丁二烯、1，2，3-三氯丁二烯、2-氟-1，3-丁二烯、2-甲基-1，3-丁二烯、六氟-1，3-丁二烯、丁二炔、1-氟丁烷、2-甲基丁烷、十氟丁烷(全氟丁烷)、十氟異丁烷(全氟異丁烷)、1-丁烯、2-丁烯、2-甲基-1-丁烯、3-甲基-1-丁烯、全氟-1-丁烯、全氟-2-丁烯、4-苯基-3-丁烯-2-酮、2-甲基-1-丁烯-3-炔、硝酸丁酯、1-丁炔、2-丁炔、2-氯-1，1，1，4，4，4-六氟-丁炔、3-甲基-1-丁炔、全氟-2-丁炔、2-溴-丁醛、硫化羰、丁烯腈、環(huán)丁烷、甲基環(huán)丁烷、八氟環(huán)丁烷(全氟環(huán)丁烷)、全氟異丁烷、3-氯環(huán)戊烯、環(huán)戊烷、1，2-二甲基環(huán)丙烷、1，1-二甲基環(huán)丙烷、乙基環(huán)丙烷、甲基環(huán)丙烷、聯(lián)乙炔、3-乙基-3-甲基二氮環(huán)丁烷、1，1，1-三氟重氮乙烷、二甲胺、六氟二甲胺、二甲基乙基胺、雙(二甲基膦)胺、2，3-二甲基-2-降冰片烷、全氟二甲胺氯化二甲基氧鎓、1，3-二氧雜戊烷-2-酮、1，1，1，1，2-四氟乙烷、1，1，1-三氟乙烷、1，1，2，2-四氟乙烷、1，1，2-三氯-1，2，2-三氟乙烷、1，1-二氯乙烷、1，1-二氯-1，2，2，2-四氟乙烷、1，2-二氟乙烷、1-氯-1，1，2，2，2-五氟乙烷、2-氯-1，1-二氟乙烷、1-氯-1，1，2，2-四氟乙烷、2-氯-1，1-二氟乙烷、氯乙烷、氯-五氟乙烷、二氯三氟乙烷、氟乙烷、硝基五氟乙烷、亞硝基五氟乙烷、全氟乙烷、全氟乙胺、乙基乙烯基醚、1，1-二氯乙烯、1，1-二氯-1，2-二氟乙烯、1，2-二氟乙烯、甲烷、三氟磺酰氯、三氟甲磺酰氟、(五氟硫代)三氟甲烷、溴-二氟-亞硝基甲烷、溴-氟-甲烷、溴-氯-氟甲烷、溴-三氟甲烷、氯-二氟-硝基甲烷、氯-二硝基甲烷、氯-氟甲烷、氯-三氟甲烷、氯-二氟甲烷、二溴-二氟甲烷、二氯二氟甲烷、二氯氟甲烷、二氟甲烷、二氟碘甲烷、乙硅烷甲烷、氟甲烷、碘三氟甲烷-碘甲烷、硝基三氟甲烷、亞硝基三氟甲烷、四氟甲烷、三氯氟甲烷、三氟甲烷、三氟甲亞磺酰氯、2-甲基丁烷、甲醚、甲基異丙基醚、乳酸甲酯、亞硝酸甲酯、二甲硫、甲基乙烯基醚、新戊烷、氮?dú)?N2)、一氧化二氮、1，2，3-十九烷三甲酸-2-羥基三甲基酯、1-壬烯-3-炔、氧氣(O2)、氧17(17O2)、1，4-戊二烯、正戊烷、十二氟戊烷(全氟戊烷)、十四氟己烷(全氟己烷)、全氟異戊烷、全氟新戊烷、4-氨基-4-甲基-2-戊酮、1-戊烯、2-戊烯(順)、2-戊烯(反)、3-溴-1-戊烯、全氟1-戊烯、四氯苯二酸、2，3，6-三甲基哌啶、丙烷、1，1，1，2，2，3-六氟丙烷、1，2-環(huán)氧丙烷、2，2-二氟丙烷、2-氨基丙烷、2-氯丙烷、七氟-1-硝基丙烷、七氟-1-亞硝基丙烷、全氟丙烷、丙烯、1，1，1，2，3，3-六氟-2，3-二氯丙烷、1-氯丙烯、氯丙烯(反)、2-氯丙烯、3-氟丙烯、全氟丙烯、丙炔、3，3，3-三氟丙炔、3-氟苯乙烯、六氟化硫、十氟化二硫(S2F10)、2，4-二氨基甲苯、三氟乙腈、三氟甲基過氧化物、三氟甲基硫化物、六氟化鎢、乙烯基乙炔、乙烯基醚、氖、氦、氪、氙(特別是富銣的超極性氙氣體)、二氧化碳、氦和空氣。優(yōu)選氟化氣體(即，包含一個(gè)或多個(gè)氟分子的氣體，如六氟化硫)和全氟化碳?xì)怏w(即氟化碳?xì)怏w，全部氟化，如全氟丙烷和全氟丁烷)。雖然實(shí)際上任何氣體在理論上均可用于本發(fā)明的氣相中，但是，可選擇特定的氣體以優(yōu)化形成的造影介質(zhì)的所需性質(zhì)，以及滿足特定的診斷需求。例如，業(yè)已發(fā)現(xiàn)，某些氣體比起另一些氣體來更適合制備更穩(wěn)定的充氣泡囊，這類氣體是優(yōu)選采用的。已發(fā)現(xiàn)，某些氣體對診斷成像如超聲或MRI提供了更好的成像結(jié)果。作為增加充氣泡囊穩(wěn)定劑的實(shí)例，業(yè)已發(fā)現(xiàn)，二氧化碳＜氧氣＜空氣＜氮?dú)猓寄蕷猓己猓既細(xì)怏w。因?yàn)檫@些及其它原因，優(yōu)選氟化氣體，特別是全氟化碳?xì)怏w。同樣，雖然在一些情形下可溶性氣體也適宜作本發(fā)明的氣相，但基本上不溶的氣體趨于比較高溶解性的氣體有更大的穩(wěn)定性，特別是對經(jīng)振動(dòng)產(chǎn)生造影劑更是如此。另外，根據(jù)本發(fā)明，在振動(dòng)前易于使這種不溶性氣體基本上與含水懸浮液相分離。因此，優(yōu)選前面定義的基本不溶性氣體。超聲成像的質(zhì)量和這種圖像的持續(xù)時(shí)間也與含水介質(zhì)中氣體的溶解性相關(guān)。通常，氣體溶解性降低會(huì)使超聲波得到的圖像分辨率更好，更持久。此外，業(yè)已觀測到，通過振動(dòng)產(chǎn)生的充氣泡囊的大小與含水介質(zhì)中氣體的溶解性有關(guān)，氣體溶解度大會(huì)導(dǎo)致充氣的泡囊大。同樣可以相信，泡囊的大小也受氣體與泡囊內(nèi)壁間界面的影響。具體而言，據(jù)信界面處的相互作用會(huì)影響張力，結(jié)果內(nèi)部氣體對泡囊的內(nèi)部泡囊壁有向外的力。通過降低由內(nèi)部氣體施加的力而使張力降低從而使泡囊減小，由此通過水介質(zhì)與氣體增充泡囊接觸使力施加至泡囊的外部。使用亨利定律可估算氣體在含水溶劑中的溶解度，該定律適用于至多1個(gè)大氣壓的壓力及微溶性氣體(Daniels，F(xiàn).和Alberty，R.A.的《物理化學(xué)》第三版，Wiley&Sons，Inc.，NewYork，1966)。例如，25℃時(shí)，氧氣的溶解度為31.6ml/kg水，大氣的溶解度為21.36ml/kg水，氮?dú)獾娜芙舛葹?8.8ml/kg水。而六氟化硫在25℃時(shí)的溶解度約為5.4ml/kg?？偠灾?，由于穩(wěn)定性、不溶性和形成的泡囊大小，優(yōu)選采用氟化氣體，氟化碳?xì)怏w及全氟化碳?xì)怏w。特別優(yōu)選氟化氣體六氟化硫，和全氟化碳?xì)怏w全氟丙烷、全氟丁烷、全氟環(huán)丁烷、全氟甲烷、全氟乙烷、全氟戊烷，特別是全氟丙烷和全氟丁烷。需要指出，少于5個(gè)碳原子的全氟化碳在室溫下為氣體。例如在全氟戊烷直至約27℃才為液體。在高于該溫度時(shí)，它將占據(jù)容器液面上的空間。業(yè)已表明，即使在室溫下，全氟戊烷也可用于填充液面上空間(即小瓶中類脂懸浮相上面的空間)。選擇經(jīng)計(jì)算確定量的液體全氟戊烷填充到液面上空間中，在低溫如-20℃下將液體加入容器中，然后抽空容器(有效地除去空氣占據(jù)的液面上空間)，然后密封容器，全氟戊烷將在低于其1大氣壓的沸點(diǎn)溫度下實(shí)現(xiàn)從液相至汽相的相變。因此，在室溫下，它將占據(jù)氣體的液面上空間的部分或全部。本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以看出，通過應(yīng)用常規(guī)“經(jīng)驗(yàn)法則”估計(jì)，可估算出從液相至氣相轉(zhuǎn)變溫度的下降。具體說來，壓力降低一半，沸點(diǎn)將降低約10℃。另外，使用基于理想氣體定律(基于波爾定律)的關(guān)系式，可以溫度降低作為壓力降低的函數(shù)進(jìn)行計(jì)算。另一種用全氟戊烷填充液面上空間的方法是，首先抽空，然后用高于27℃的全氟戊烷填充液面上空間。當(dāng)然，該方法并不僅限于全氟戊烷，而可應(yīng)用于所有全氟化碳?xì)怏w，及一般意義上的其它氣體，只要這種氣體的沸點(diǎn)是公知的。如果需要的話，可用兩種或多種不同氣體一起來填充液面上空間。氣體混合物在形成的氣體填充泡囊的各種應(yīng)用中有許多優(yōu)點(diǎn)(如用于超聲成像，MR成像等)。業(yè)已發(fā)現(xiàn)，可將少量基本不溶的氣體與可溶性氣體混合，其穩(wěn)定劑將超過預(yù)期的組合的穩(wěn)定性。例如，少量的全氟化碳?xì)怏w(如通常至少約1mol％)可與空氣、氮?dú)狻⒀鯕?、二氧化碳或其它更易溶的氣體混合。采用這種混合氣體經(jīng)后振動(dòng)處理產(chǎn)生的充氣泡囊造影劑其穩(wěn)定性優(yōu)于單獨(dú)采用空氣、氮?dú)?、氧氣、二氧化碳或其它更易溶的氣體所得結(jié)果。此外，使用氣體混合物可用于抵消充氣泡囊尺寸的增加，這種增加是包含純?nèi)細(xì)怏w泡囊被注入體內(nèi)時(shí)會(huì)在體內(nèi)發(fā)生的。業(yè)已發(fā)現(xiàn)，一些全氟化碳?xì)怏w可能會(huì)吸收其它氣體如氧氣。因此，如果全氟化碳?xì)怏w經(jīng)靜脈內(nèi)注入體內(nèi)時(shí)，它可能會(huì)吸收溶解在循環(huán)血液中的氧氣或其它可溶性氣體。然后，形成的泡囊可能在體內(nèi)由于這種吸收而膨脹。從這種現(xiàn)象可以看出，我們可以使全氟化碳?xì)怏w與可溶性氣體如空氣、氮?dú)?、氧氣、二氧化碳預(yù)混合，從而飽和全氟化碳的吸收性。從而，這將延緩甚至消除充氣泡囊在血流中的膨脹可能性?？紤]到如下事實(shí)這一點(diǎn)顯得更為重要，即如果給藥于血液中，泡囊會(huì)長至其尺寸大于10μm，可能發(fā)生很危險(xiǎn)的栓塞事故。通過用比全氟化碳?xì)怏w更易溶的氣體與全氟化碳一起填充液面上空間，形成的充氣泡囊在注射到體內(nèi)后通常將不會(huì)發(fā)生這種尺寸的增長。因此，根據(jù)本發(fā)明，由于泡囊膨脹而引起的栓塞問題可通過生產(chǎn)已消除或充分延緩了這種膨脹的泡囊而得以解決。因此，根據(jù)本發(fā)明，如果需要的話，基本不溶性氣體可與可溶性氣體合并以便有效地生產(chǎn)高效且穩(wěn)定的充氣泡囊。將于2ml小瓶(實(shí)際大小為3.7ml)(WheatonIndustries(MillvilleNJ))中的多種類脂溶液樣品(1mg/ml；82∶10∶8mol％比，DPPC∶DPPA∶DPPE-PEG-5000)，溶劑為8∶1∶1重量比的生理鹽水∶甘油∶丙二醇，置于改進(jìn)型EdwardsS04型凍干機(jī)中(容積4立方英寸)，進(jìn)行減壓。小瓶上的空間為總體積的60％，其被分別充入80％PFP與20％空氣，60％PEP與40％空氣，50％PFP與50％空氣，20％PFP與80％空氣，100％空氣。通過氣相色譜確定不同樣品的液面上空間中氣體的百分比(HewlettPackardGasChromatographModel1050L，采用HewlettPackardChemTMsoftward。檢測方式為火焰電離檢測法。然后用標(biāo)準(zhǔn)Wig-L-BugTM3110B型在3,300RPM下振動(dòng)樣品60秒，通過光學(xué)粒度儀大小測量法測定泡囊數(shù)和其大小。光學(xué)粒度儀(ParticleSizingSystems，SantaBarbara，CA)用于分析充氣泡囊的大小和總數(shù)。每次分析采用5μl的樣品，每次檢測采用4份樣品。結(jié)果示于表4中。如表4所示，即使當(dāng)僅有20％的氣體為PFP(基本上不溶的氣體)和80％的氣體為空氣(可溶性氣體的混合物)，比僅使用空氣(0％PFP)產(chǎn)生的泡囊數(shù)多100倍。進(jìn)而，當(dāng)僅使用空氣(0％PFP)時(shí)，泡囊的穩(wěn)定性更低，大部分超過10μm。但是，20％PFP和80％空氣泡囊其穩(wěn)定性恰好與80％PFP和20％空氣泡囊相同，也與其它中間PFP濃度試樣相同，而20％PFP與80％空氣和80％PFP與20％空氣相比，產(chǎn)生大致相同數(shù)目的充氣泡囊。表4全氯內(nèi)烷百分比對泡囊大小和數(shù)目的影響</tables>表4中，STDev＝標(biāo)準(zhǔn)偏差，CV＝方差系數(shù)。E+表示方次，例5.45E+05=5.45×105。業(yè)已發(fā)現(xiàn)，僅需少量相對不可溶的氣體(如PFP)來穩(wěn)定泡囊，而大部分氣體仍是可溶性氣體。雖然由下式計(jì)算的兩種或多種氣體成分的實(shí)際溶解度僅與可溶性氣體的溶解度略有差異，但是，僅用少量的不溶性氣體就可使充氣泡囊的數(shù)目和穩(wěn)定性均提高雖然并無確切的理論給予解釋，但據(jù)信，基本上不溶的氣體對膜穩(wěn)定作用是重要的。的確，據(jù)信，基本上不容的氣體(如PFP)作用為抗類脂膜的屏蔽，可在膜的內(nèi)表面上形成一層，它可延緩可溶性氣體(如空氣、氮?dú)獾?的流出。這一發(fā)現(xiàn)是驚人的也是有用的，這使得我們僅需要少量的基本不溶的氣體(如全氟化碳或其它氟化氣體)，主要為更具生物相容性(較少毒性)氣體，如空氣或氮?dú)庹紦?jù)泡囊的大部分。如本領(lǐng)域技術(shù)人員所能看出的，基本上不溶的氣體和可溶性的氣體在任一混合物中的量是可變的。通常，氣體總量的至少約0.01％為基本上不溶的氣體，更優(yōu)選至少約0.1％，最好至少為約1％，首選至少約10％?；旧喜蝗苄詺怏w的適宜范圍可根據(jù)諸如所采用的可溶性氣體、類脂的類型、特定用途等因素而改變。舉例性范圍包括約0.01％-99％上不溶的氣體，優(yōu)選約1％-95％，更優(yōu)選10％-90％，首選約30％-85％。對于除診斷超聲成像外的其它用途如診斷磁共振成像(MRI)，雖說也可采用其它的氣體，但優(yōu)選采用順磁性氣體如強(qiáng)順磁性氧17氣體(17O2)、氖、氙、氦、氬(特別是富銣的超極性氙氣)或氧氣(雖說其順磁性強(qiáng)度稍弱)來填充液面上空間。首選采用17O2氣體、氖、富銣的超極性氙氣體或氧氣與基本上不溶的氣體如全氟化碳?xì)怏w結(jié)合使用。順磁性氣體在本領(lǐng)域中是公知的，對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，順磁性氣體是很明顯的。MRI應(yīng)用中最優(yōu)選的氣體17O2，不論它是單獨(dú)使用還是與其它氣體組合使用。通過使用氣體混合物，17O2或其它順磁性氣體提供了最佳的造影劑，而全氟化碳穩(wěn)定了振動(dòng)后截留氣體內(nèi)的17O2氣體。如果不加全氟化碳?xì)怏w，氣體如17O2通常有效性會(huì)較差，其原因是，它的溶解度決定了它將會(huì)在靜脈內(nèi)注射后擴(kuò)散出類脂的束縛。此外，17O2氣體是非常昂貴的。使全氟化碳?xì)怏w與17O2結(jié)合使用將大大增加產(chǎn)品的效能，降低費(fèi)用，這是通過更有效地使用昂貴的17O2氣體而實(shí)現(xiàn)的。類似地，其它具有理想順磁性的氣體如氖也可與全氟化碳?xì)怏w混合。下表5顯示出各種可用于MR成像應(yīng)用的不同氣體。表5中，示出了在充氣泡囊中不同氣體的R2(1/T2/mmol/L·秒)，如表5所示，不同充氣的泡囊其松馳值越高表明泡囊作為MR成像劑的有效性越好。所示的氣體中，空氣的R2值最高。據(jù)信，空氣的該值最高是因?yàn)榭諝庵醒醯捻槾抛饔?。但是純氧氣的有效性又低一些，可能是由于氧氣的高溶解性及氧氣與包圍泡囊的含水介質(zhì)的平衡。而采用空氣時(shí)，氮?dú)?空氣中約80％為氮?dú)鈩t有助于將氧氣穩(wěn)定在泡囊內(nèi)。氮?dú)庠谒械娜芙舛刃∮诳諝?。如上指出，PFP或其它全氟化碳?xì)怏w可與更具順磁活性的氣體混合，如空氣、氧氣、17O2或富含銣的超極性氙。如此，優(yōu)選穩(wěn)定高順磁活性充氣的泡囊。表5大小分布和松馳度</tables>容器的液面上空間根據(jù)需要可用在環(huán)境壓力、降壓或增壓下的氣體進(jìn)行填充。在本發(fā)明的容器中，氣相與含水懸浮液相基本分開。所謂“基本分開”是指在振動(dòng)前，少于50％的氣體與含水懸浮液相結(jié)合。優(yōu)選少于約40％，更優(yōu)選少于約20％，首選少于10％氣體與含水懸浮液相結(jié)合。氣相保持與含水懸浮液相基本分開，直至使用時(shí)，此時(shí)振動(dòng)容器，氣相與含水懸浮液相結(jié)合而形成充氣泡囊的含水懸浮液相。以這種方式，生產(chǎn)出優(yōu)良的超聲或磁共振成像用造影劑。進(jìn)而，由于在使用前即刻制備造影劑，減少了貯存穩(wěn)定問題。III.容器體積和液面上空間業(yè)已發(fā)現(xiàn)，液面上空間氣體的大小也可用于影響充氣泡囊的大小。由于液面上空間大，相對于含水相大小就會(huì)成正比地包含更多的氣體，液面上空間大通常比空間小能產(chǎn)生更大的泡囊。因此，以占容器總體積百分?jǐn)?shù)表示的液面上空間不應(yīng)超過最大值。但是，如果液面上空間太小，又使得沒有充足的空間使流體在振動(dòng)時(shí)運(yùn)動(dòng)以有效地形成泡囊。例如，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，當(dāng)使用實(shí)際體積為3.7ml的小瓶(Wheaton300Borosilicateglass，WheatonIndustries，Millville，NJ，稱為2ml公稱尺寸，直徑×高度＝15mm×32mm)，含氣體的液面上空間的體積最好為小瓶總體積的約10％-60％。通常，小瓶中含氣的液面上空間體積為小瓶總體積的約10％-80％，雖說這取決于特定的環(huán)境及所要求的應(yīng)用場合，氣體或多或少均是適宜的。更優(yōu)選的是，液相上空間為總體積的約30％-70％。業(yè)已發(fā)現(xiàn)，最好的含氣液面上空間的體積為容器總體積的約60％。IV.振動(dòng)參數(shù)的最佳值A(chǔ).運(yùn)動(dòng)路徑的形狀和振動(dòng)幅度如前所述，除了含水懸浮液相與氣相的組成外，包含這兩相的容器的具體振動(dòng)方式也將影響泡囊的大小分布。通過四個(gè)參數(shù)可限定最佳振動(dòng)條件，即振動(dòng)期間容器的運(yùn)動(dòng)路徑的形狀、振動(dòng)的幅度、振動(dòng)的頻率及振動(dòng)的持續(xù)時(shí)間。業(yè)已發(fā)現(xiàn)，在形成適當(dāng)大小的泡囊方面，特別重要的就是振動(dòng)時(shí)容器運(yùn)動(dòng)的路徑。具體而言，已發(fā)現(xiàn)，當(dāng)振動(dòng)采取往復(fù)運(yùn)動(dòng)時(shí)可在最短的時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生小泡囊。其它類型的振動(dòng)，如渦旋運(yùn)動(dòng)也能產(chǎn)生小泡囊。但往復(fù)運(yùn)動(dòng)可大大減少振動(dòng)持續(xù)時(shí)間，而持續(xù)時(shí)間也是達(dá)到小泡囊高濃度所必要的。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，當(dāng)振動(dòng)幅度(具體說即振動(dòng)期間，容器運(yùn)動(dòng)往復(fù)路徑的長度C)至少為0.3cm時(shí)，在相對較短的時(shí)間即2分鐘或更少時(shí)可獲得小尺寸的泡囊。通常，振幅越大，泡囊越小。但是，如下所述，振動(dòng)頻率也是一個(gè)重要參數(shù)。由于當(dāng)振幅增至某一最大值時(shí)，通?？紤]到振動(dòng)設(shè)備，振動(dòng)頻率會(huì)降至非常低，因此，應(yīng)使振幅保持在足夠低以確保振動(dòng)頻率保持適中值。對于Wig-L-BugTM3110B型振動(dòng)設(shè)備，最大幅度約為2.5cm。本發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)，往復(fù)運(yùn)動(dòng)優(yōu)選沿圖4所示的弧形路徑20進(jìn)行，其中振動(dòng)幅度為C，由于高頻振動(dòng)更易于以這種方式完成。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，弧形路徑20定義為曲率半徑L，它是由振動(dòng)臂長度L形成的。優(yōu)選振動(dòng)臂7的長度L至少為6cm，旋轉(zhuǎn)通過的角度θ至少為3°。如下面將作的進(jìn)一步討論，根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，振動(dòng)臂的旋轉(zhuǎn)角θ是通過具有偏角等于θ的軸承達(dá)到的。進(jìn)而，振動(dòng)臂的長度L定義為偏心套管40的中心線與容器9的中心線(如圖3所示)間的距離，所說的套管40上安裝了振動(dòng)臂7軸承50(下面將進(jìn)一步討論)。使用較長的振動(dòng)臂長L和較大的旋轉(zhuǎn)角θ將會(huì)增加振動(dòng)幅度，從而將減小泡囊大小。但是，如前所述，所采用的振動(dòng)臂長L和旋轉(zhuǎn)角θ的最大值應(yīng)加以限制，以確保振幅C不至于大得使振動(dòng)頻率不適當(dāng)。此外，機(jī)械考慮也將限制振動(dòng)臂7的旋轉(zhuǎn)角的大小。對Wig-L-BugTM3110B型，所采用的最大振動(dòng)臂長度和旋轉(zhuǎn)角分別約為15cm和9°。此外，優(yōu)選振動(dòng)裝置在第一方向的往復(fù)運(yùn)動(dòng)上疊加第二方向近似垂直方向上的往復(fù)運(yùn)動(dòng)。優(yōu)選第二方向上的振幅C′至少約為第一方向上振幅C的十分之一。為便于說明，往復(fù)運(yùn)動(dòng)的第一方向稱之為縱向，而往復(fù)運(yùn)動(dòng)的第二方向稱之為橫向。最好調(diào)節(jié)在縱向和橫向上運(yùn)動(dòng)的時(shí)間以使在兩個(gè)方向上運(yùn)動(dòng)的總和形成容器9呈8字形振動(dòng)。以如前所述為基礎(chǔ)，當(dāng)本發(fā)明振動(dòng)裝置1的振動(dòng)臂7末端結(jié)合容器9時(shí)，圖4和5示出了由容器9所運(yùn)動(dòng)的優(yōu)選振動(dòng)路徑20。如圖5所示，振動(dòng)臂7使容器9隨容器在縱向中向后向前運(yùn)動(dòng)而在橫向上運(yùn)動(dòng)，這樣，容器9上的點(diǎn)以8字形運(yùn)動(dòng)，8字形的長度即是縱向振幅C，8字形的寬度即為橫向振幅C′。當(dāng)從側(cè)面觀察時(shí)，如圖4所示，在縱向上路徑為弧形，具體而言，為曲率半徑等于振動(dòng)臂7長度L的弧?；￠L度C是振動(dòng)臂長度L與振動(dòng)臂在縱向旋轉(zhuǎn)占據(jù)的角度θ的乘積，以弧度表示，即C＝L·θ。優(yōu)選8字形是由大約兩個(gè)直的部分21(這兩部分以角φ相交)及兩個(gè)近似半圓部分22組成。如下面進(jìn)一步討論，在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，由8字形所形成的角φ大約等于振動(dòng)臂7在縱向上旋轉(zhuǎn)的角度θ。如下討論，這是由彈簧46向振動(dòng)臂7施加足夠的實(shí)現(xiàn)的，從而在振動(dòng)期間保持在橫平面內(nèi)基本上在垂直方向，如圖9和10所示。如果調(diào)節(jié)彈簧的張力以使振動(dòng)臂7旋轉(zhuǎn)通過橫平面上一角度w，如圖12所示，那么容器9所經(jīng)過的8字形振動(dòng)的角φ將會(huì)大于θ。如果φ等于θ，那么，在圍繞路徑20的一個(gè)循環(huán)中運(yùn)行的總距離D將成為兩個(gè)變量的函數(shù)，即隨振動(dòng)臂在縱平面中運(yùn)行所形成的角度θ以及振動(dòng)臂的長度L。該距離D可近似由下列方程式表示D＝2L[(2sinθ/2+∏tan2θ/2)/(1+tanθ/2)]由于優(yōu)選長度L至少為6cm，角度θ至少為3°，因此，距離D應(yīng)優(yōu)選至少為約0.6cm。進(jìn)而，假如φ＝θ，橫向上的振幅C′將成為縱向上振幅C和角θ的函數(shù)，其可近似由下列方程式表示C′＝(2Ctanθ/2)/(1+tanθ/2)由于優(yōu)選縱向振幅C至少約0.3cm，角度θ至少約3°，因此，橫向振幅C′優(yōu)選應(yīng)至少為約0.02cm。通過一系列實(shí)驗(yàn)將可以確定如上所討論的振動(dòng)的振幅的最佳值和形狀，它們將在以下第C節(jié)討論。B.振動(dòng)頻率和持續(xù)時(shí)間。除了振動(dòng)的形狀和幅度外，振動(dòng)頻率也是形成適宜大小泡囊的重要參數(shù)。振動(dòng)頻率是以振動(dòng)臂7每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)“(RPM)”定量確定的，它定義為1分鐘內(nèi)振動(dòng)臂及與其相連的容器9穿過整個(gè)振動(dòng)路徑的次數(shù)。因此，在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，振動(dòng)頻率為3600RPM是指1分鐘內(nèi)容器9圍繞8字形路徑20進(jìn)行振動(dòng)3600次，或每秒鐘振動(dòng)了60次。業(yè)已發(fā)現(xiàn)，可使用100-10,000RPM的振動(dòng)頻率制備泡囊。但是，也發(fā)現(xiàn)，存在一個(gè)最小頻率值，在該頻率值下可在相當(dāng)短的時(shí)間生產(chǎn)出最佳大小的泡囊。如在第C節(jié)將討論的那樣，業(yè)已發(fā)現(xiàn)，該最小頻率為2800RPM。一般說來，增加振動(dòng)頻率將減小泡囊大小，但振動(dòng)裝置的限制通常會(huì)設(shè)置最大可用率。對Wig-L-BugTM，最大可用頻率為約3300RPM。在頻率范圍2800-3300RPM內(nèi)，最佳振動(dòng)時(shí)間至少為約60秒，但是，最佳振動(dòng)時(shí)間與頻率相關(guān)，頻率高可減少振動(dòng)時(shí)間。因此，例如在4500RPM時(shí)，最佳振動(dòng)時(shí)間僅為50秒。C.試驗(yàn)結(jié)果通過如下的一系列試驗(yàn)，可找出最佳振動(dòng)頻率以及振動(dòng)形狀和幅度。第一組試驗(yàn)用于確定振動(dòng)頻率對泡囊大小的影響。將1mg/ml的類脂試樣加至稀釋劑中，由摩爾比為82mol％∶10mol％∶8mol％的二棕櫚?；字Ｄ憠A(DPPC)(AvantiPolarLipids，Alabaster，Ala)、二棕櫚?；姿?DPPA)(AvantiPolarLipids，Alabaster，Ala)和二棕櫚酰基磷脂酰乙醇胺共價(jià)鍵合的聚乙二醇單甲酯(分子量5000)(DPPEPEG-5000)(AvantiPolarLipids，Alabaster，Ala)組成的類脂試樣加到由生理鹽水、甘油(SpectrumChemicalCo.，Gardena，Calif)組成(8∶1∶1，v∶v∶v)組成的稀釋劑中。然后，將試樣在45℃下加熱10分鐘，然后使其平衡到室溫(25℃)。將樣品加至圖1所示類型的硼硅酸鹽小瓶中(VWRScientific，Boston，Mass)，小瓶的標(biāo)定尺寸為2.0ml(實(shí)際體積3.7ml)。用丁基橡膠塞將小瓶密封，并用鋁卷氣密封閉。小瓶的液相上空間約為小瓶總體積的60％。然后，將樣品用全氟丙烷(FluraCorporation，Nashville，Tenn)吹掃，并置于圖3所示振動(dòng)裝置中，該裝置將在第V節(jié)討論。使用圖4和5所示8字形運(yùn)動(dòng)振動(dòng)容器2分鐘。振動(dòng)臂長度L為7.7cm，軸承偏角θ及縱平面中振動(dòng)臂旋轉(zhuǎn)角為6°。使用如上討論的關(guān)系式，可以確定，縱向和橫向的振幅C和C′分別為0.8cm和0.1cm。所用的振動(dòng)頻率l500、2800和3300RPM。由Code-PalmerModel08210PistolGripTachometer(CodePalmer，Nile，Ill)測量頻率。由ParticleSizingSystemlightobscurationparticlesizer(Santa，Barbara，Calif)通過小顆粒光學(xué)大小測定法測量大小。表6顯示了這些試驗(yàn)的結(jié)果，結(jié)果表明，振動(dòng)頻率對形成的平均泡囊大小有影響。表6振動(dòng)頻率對平均泡囊尺寸的影響從上表看出，當(dāng)頻率超過2800RPM后，會(huì)大大降低振動(dòng)2分鐘后獲得泡囊的平均大小。第二組試驗(yàn)用于確定增加振動(dòng)臂長度L從而增加縱向和橫向振幅C和C′及每一循環(huán)的振動(dòng)距離D對泡囊大小的影響。除了振動(dòng)臂長度L為6.7-14.8cm的振動(dòng)臂振動(dòng)60秒外，該試驗(yàn)與上述試驗(yàn)過程相同。振動(dòng)臂長度變化導(dǎo)致振動(dòng)的頻率在2250-3260RPM間變化，隨振動(dòng)臂長的增加，振動(dòng)頻率降低。圖13示出了振動(dòng)頻率隨振動(dòng)臂長度L和振動(dòng)臂旋轉(zhuǎn)角θ的變化情況。因此，例如，當(dāng)振動(dòng)臂長度L為6.7cm，旋轉(zhuǎn)角θ為6°時(shí)，振動(dòng)頻率約為3200RPM，而當(dāng)振動(dòng)臂長度增至13.8cm時(shí)，保持同樣的旋轉(zhuǎn)角，頻率則降至約2700RPM。該組試驗(yàn)的結(jié)果示于圖14(a)-(c)。如圖14(a)所示，當(dāng)在縱平面上的旋轉(zhuǎn)角θ為6°時(shí)，不論振動(dòng)臂長度L為7.7cm或更大即當(dāng)縱向振幅C大于0.8cm時(shí)，至少98％的泡囊小于10μm。然而，在振動(dòng)臂長度L為9.8cm或更長即當(dāng)縱向振幅為1.0cm或更大時(shí)，泡囊小于10μm百分比平穩(wěn)達(dá)到99-99.5％。如圖14(b)所示，在這些相同的條件下，泡囊的數(shù)目加權(quán)平均大小平穩(wěn)達(dá)到2μm。雖然當(dāng)所有其它變量保持恒定時(shí)增加振動(dòng)頻率的作用通常會(huì)減小泡囊大小(如前討論及表6所示)，而如圖13所示，數(shù)據(jù)表明，通過增加振動(dòng)臂長度而增加振幅即使同時(shí)降低振動(dòng)頻率也會(huì)使泡囊大小下降。如圖14(c)所示，在所有振動(dòng)臂長度下得到泡囊超過400×106個(gè)/ml，事實(shí)上，振動(dòng)臂長為約10-12cm會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)生超過1000×106泡囊/ml。但是，如果振動(dòng)臂長度增至超過12cm時(shí)，顆粒/ml開始下降，當(dāng)14.8cm時(shí)達(dá)到800×106泡囊/ml。盡管圖13未示出，當(dāng)振動(dòng)臂長度為14.8cm，旋轉(zhuǎn)角為6°時(shí)，測得的頻率僅為2550RPM。因此，振動(dòng)臂長度為14.8cm產(chǎn)生的泡囊濃度下降的原因被認(rèn)為是由于振動(dòng)頻率下降，而這種頻率下降是隨如前討論的振幅增長而引起的。從而，這些數(shù)據(jù)表明，當(dāng)使用Wig-L-BugTM振動(dòng)裝置時(shí)，振動(dòng)臂長度優(yōu)選應(yīng)小于約15cm以使泡囊濃度達(dá)到最大。第三組試驗(yàn)采用如上討論的相同的原料和過程，只是軸承偏角及隨之在縱向振動(dòng)臂的旋轉(zhuǎn)角θ從6°增至9°，從而增加了縱向上振動(dòng)幅度。此外，振動(dòng)臂長度超過11.8cm未采用。這些試驗(yàn)的結(jié)果示于圖15(a)-(c)，并與前面兩組試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行了比較。從圖15(a)看出，將振動(dòng)臂的旋轉(zhuǎn)角θ從6°增至9°將減小泡囊大小，如圖13所示，它還具有減少振動(dòng)頻率的作用。因此，采用9°的振動(dòng)臂旋轉(zhuǎn)角。即使振動(dòng)臂長僅為6.7cm也會(huì)使99.5％以上的泡囊小于10μm，平均大小約為2μm。此外，如圖15(c)所示，在所有的振動(dòng)臂長度下，得到超過1000×106泡囊/ml的泡囊數(shù)。第四組試驗(yàn)采用如上討論的相同的原料和過程，只是軸承偏角及隨之在縱向上振動(dòng)臂的旋轉(zhuǎn)角θ為3°、5.2°、6°、7.8°和9°，同時(shí)振動(dòng)臂長為6.7cm-13.8cm(每次增加約1cm)。在每種情況下估計(jì)振動(dòng)路徑20的總長度D。如圖17所示，頻率成為總路徑長度的函數(shù)。結(jié)果作為總路徑長度D的函數(shù)示于圖16(a)-(c)?？梢钥闯?，在所有試驗(yàn)條件下，即在總路徑長度D為0.7cm和大于0.7cm時(shí)，超過95％的泡囊小于10μm，產(chǎn)生的泡囊濃度超過100×106/ml。進(jìn)而，在所有條件下，其中總路徑長度D為2.19cm或更大，超過98％的泡囊小于10μm。這表明，振動(dòng)的總路徑長度應(yīng)至少為0.7cm，更優(yōu)選至少2.2cm。因此，前述事實(shí)顯示出，當(dāng)進(jìn)行往復(fù)振動(dòng)并使振動(dòng)頻率至少約為2800RPM時(shí)，在約2分鐘或更少的時(shí)間里可得到小尺寸的泡囊。此外，振動(dòng)應(yīng)在兩個(gè)基本垂直的方向上完成，優(yōu)選以8字形完成。進(jìn)而，在主方向上的振幅應(yīng)至少為0.3cm，更優(yōu)選至少0.8cm，或振動(dòng)路徑總長度應(yīng)至少為0.7cm，更優(yōu)選至少為2.2cm。V.本發(fā)明的裝置A.優(yōu)選的振動(dòng)裝置本發(fā)明優(yōu)選的振動(dòng)裝置示于圖2和3。該裝置由基底2和鉸接的安全蓋3構(gòu)成。在外殼4上安裝有開一停扭6和速度控制撥盤5，外殼4包起基底2。臂7通過外殼4上部的開口12向上伸出。順時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)撥盤5增加振動(dòng)速度，而逆時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)撥盤會(huì)降低振動(dòng)速度。根據(jù)本發(fā)明，固定托架8連接在臂7的末端，由該托架將下面將討論的容器9卡緊在臂上。托架8配有幾個(gè)彈簧夾11和12，夾子將容器9緊固在位置上。另外，指旋螺絲型的托架也可用來甚至更緊固地連結(jié)容器9。如圖3所示，托架也可以角δ至水平方向取向，從而當(dāng)容器9安裝在裝置1上時(shí)，容器9的軸也將以角度δ取向至水平取向。優(yōu)選角δ為-5°至+5°，首選δ為0°。使用時(shí)，容器9緊固至托架8上，開啟振動(dòng)裝置1沿圖4和5所示運(yùn)行路徑劇烈振動(dòng)容器。圖6-12示出了本發(fā)明振動(dòng)裝置1的主要內(nèi)部構(gòu)件?？梢钥闯?，振動(dòng)臂7旋轉(zhuǎn)安裝在電機(jī)44的軸42上。如在圖6和9中所示，在振動(dòng)臂7的最近端形成圓筒形套筒41。套筒41包圍軸50，軸承50支撐著圓筒形偏心套管40。圖11示出的套管40與軸42固定連接，例如將其壓在軸上或與軸成一體地形成，并且套管40在軸承內(nèi)旋轉(zhuǎn)。如圖11所示，套管40的一端43相對軸42是偏心的，而其另一端45與軸同心。結(jié)果，如圖7所示，套管40的中心線間形成銳角θ/2。角θ被稱之為軸承偏角。如前所述，軸承偏角θ優(yōu)選至少為約3°。如圖7和8所示，當(dāng)軸42和套管40旋轉(zhuǎn)360°時(shí)，振動(dòng)臂在縱平面上向后和向前旋轉(zhuǎn)的角度等于θ(當(dāng)套管40如圖8所示取向時(shí)，振動(dòng)臂7的位置如圖7中幻影所示)。因此，軸42的旋轉(zhuǎn)使套筒41在縱平面上旋轉(zhuǎn)，并使其沿弧形路徑作直線運(yùn)動(dòng)至振動(dòng)臂7的遠(yuǎn)端，而振動(dòng)臂上如圖4所示緊固著容器9。由于套管40的偏心特性，軸42旋轉(zhuǎn)也使振動(dòng)壁7的套筒41如圖10所示旋轉(zhuǎn)通過橫平面中軸承偏角θ(當(dāng)套管旋轉(zhuǎn)180°時(shí)，振動(dòng)臂的位置為圖10中幻影所示)。因此，如果從圖7中由左向右觀察時(shí)，軸42順時(shí)針旋轉(zhuǎn)，那么當(dāng)偏心套管40為0°時(shí)由圖7中實(shí)線所示的是振動(dòng)臂7的取向，當(dāng)套管40為90°時(shí)，取向示于圖10的幻影，當(dāng)套管為180°時(shí)，取向示于圖8，當(dāng)套管為270°時(shí)取向示于圖10的實(shí)線。因此，如偏心套管40在軸承50內(nèi)旋轉(zhuǎn)360°，振動(dòng)臂使容器9在縱向和橫向兩個(gè)方向上運(yùn)動(dòng)，從而達(dá)到如前所述的8字形。如圖6所示，彈簧46從套筒41底部的固定中心延伸至振動(dòng)外殼的基板5。彈簧46的張力的作用是在套管40旋轉(zhuǎn)時(shí)使振動(dòng)臂7保持豎直位置。優(yōu)選彈簧具有足夠的張力，從而使振動(dòng)臂在橫平面中保持基本垂直取向，如圖9(a)和(b)所示，盡管它會(huì)偏離縱平面θ/2角，如圖7所示。如圖12所示，采用較小彈簧常數(shù)的彈簧46將使振動(dòng)臂7在橫平面內(nèi)旋轉(zhuǎn)通過角ω。其作用是增加橫向振幅C′。優(yōu)選振動(dòng)裝置1通過對商購振動(dòng)裝置進(jìn)行改造而構(gòu)成，商購裝置由CrescentDentalManufacturing，Inc.，(7750West，47thStreet，Lyons，IL60534)生產(chǎn)，商品名為Wig-L-BugTM3110B振動(dòng)器。這種Wig-L-BugTM裝置采用8字形振動(dòng)式，并以下述參數(shù)值裝置出售，振動(dòng)臂長度L為4cm，軸承偏角及隨之縱向上振動(dòng)臂旋轉(zhuǎn)角θ為6°，并以固定速度3200RPM運(yùn)行。進(jìn)而，Wig-L-Bug的振動(dòng)臂特點(diǎn)是用一對匙狀物固定樣品。因此，本發(fā)明的振動(dòng)裝置可以通過改進(jìn)Wig-L-BugTM3110B振動(dòng)器制得，將加入含水懸浮液相和氣相(如前討論)的容器9引入振動(dòng)臂7的遠(yuǎn)端。優(yōu)選也對Wig-L-BugTM振動(dòng)器改進(jìn)以使固定容器9的緊固托架8置于振動(dòng)臂7上，如圖3和6所示。此外，根據(jù)含水相和氣相的組成及容器的大小等，通過進(jìn)一步改進(jìn)Wig-L-BugTM可獲得最佳結(jié)果，從而(i)提供以3200RPM之外的頻率振動(dòng)或使操作過程在振動(dòng)頻率范圍之外，(ii)采用除4cm外的振動(dòng)臂長度，或(iii)通過改進(jìn)偏心套管40使軸承偏角非6°。其它類型的往復(fù)式振動(dòng)裝置也可用于本發(fā)明，最優(yōu)選采用8字形振動(dòng)的裝置。除了Wig-L-BugTM外，這類裝置包括(i)DegussaHG，F(xiàn)rantfurt，Germany出售的Mixomat；(ii)EspeFabrikPharmazeutischerPraeparateGMBH&Co.，Seefeld，OberayGermany出售的Capmix；(iii)Vivadent，Lechtenstein出售的SilamatPlus和(iv)QuayleDental，Sussex，England出售的Vibros。圖18(a)-(c)示出并比較了Mixomat和Capmix與Wig-L-BugTM3110B裝置在采用相同原料和過程所得試驗(yàn)結(jié)果，所說原料及過程如前討論，相應(yīng)于圖13-17所示的試驗(yàn)結(jié)果，試驗(yàn)中振動(dòng)時(shí)間為60秒，Wig-L-BugTM在3200RPM下運(yùn)行，Mixomat在4100RPM下運(yùn)行，Capmix在4500RPM下運(yùn)行。結(jié)果看出，在每種情況下，超過98％的泡囊小于10μm，超過800×106泡囊/ml。B.優(yōu)選的容器根據(jù)本發(fā)明，緊固在振動(dòng)裝置1上的容器9可用各種不同形式。優(yōu)選的容器9如圖1所示，其包含殼體30和氣案帽10。填充后，容器9形成了液面上空間的氣體32和與氣體基本分開的含水懸浮液相34。另外，容器也可采用預(yù)填充注射器，如果需要的話，該注射器可配備一個(gè)或多個(gè)過濾器。相應(yīng)地，本發(fā)明中術(shù)語“容器”包括注射器。用含水相及液面上空間的預(yù)選立體填充的注射器優(yōu)選以其橫向取向的長軸安裝在振動(dòng)裝置1中，即其方向應(yīng)垂直于弧長度C。振動(dòng)后，在注射器中產(chǎn)生充氣的泡囊以備使用。不論采用何種容器，優(yōu)選應(yīng)使容器及其內(nèi)容物為無菌的。一般來說，雖然本發(fā)明根據(jù)用途有同已使含水相存于容器中，而采用的這種容器是無菌的，但穩(wěn)定介質(zhì)可以干態(tài)或凍干態(tài)貯存于容器內(nèi)。此時(shí)，只在振動(dòng)之前才將水溶液如無菌磷酸鹽緩沖液加至無菌容器中。這樣，在振動(dòng)過程中，含水相中再水合的穩(wěn)定介質(zhì)將再與液面上空間的氣體作用，從而產(chǎn)生如上所述的充氣泡囊。干燥或凍干的懸浮介質(zhì)的再水合必然進(jìn)一步使產(chǎn)品復(fù)雜化，通常這是不希望發(fā)生的。但對某些應(yīng)用來說，此舉可用于進(jìn)一步延長產(chǎn)品的儲存期限，例如，某些治療劑如環(huán)磷酰胺、肽和基因物質(zhì)(如DNA)長期貯存于水中會(huì)水解。以前凍干的樣品在振動(dòng)前再水合形成水相和液面上空間使得可生產(chǎn)出包含化合物的泡囊，否則這些化合物的儲存期限可能不足?？刹捎酶鞣N不同材料來生產(chǎn)容器，如玻璃、硼硅酸鹽玻璃、硅酸鹽玻璃、聚乙烯、聚丙烯、聚四氟乙烯、聚丙烯酸酯、聚苯乙烯或其它塑料。容器最好是不透氣的或在用充氣前包裹有外層不透氣的隔氣層。當(dāng)然，希望保護(hù)預(yù)選氣體在容器內(nèi)的一體性。氣密性注射器材料的實(shí)例包括但不限于硅酸鹽玻璃或硼硅酸鹽玻璃，硅化注射器或Luer-Lock注射器及特氟隆尖瑞或特氟隆涂層的柱塞。更具體地說，容器的大小及其重量將會(huì)影響充氣泡囊的大小。隨著容器重量增長超過一定值，振動(dòng)裝置通常會(huì)減慢振動(dòng)，如Wig-L-BugTM3110B振動(dòng)器，2ml小瓶(實(shí)際體積為3.7ml)的振動(dòng)快于10ml小瓶的。因而，根據(jù)所采用的特定振動(dòng)裝置，容器的體積不應(yīng)超過一定值。用10ml清潔的小瓶(WheatonIndustries，Millville，NewJersey)和2ml(實(shí)際體積3.7ml)安瓿小瓶(WheatonIndustries，Millville，NewJersey)在Wig-L-Bug上進(jìn)行了試驗(yàn)。開始試驗(yàn)后，用Code-PalmerPistolGrip轉(zhuǎn)速計(jì)(Code-Palmer，Nile，Ill.)測量振動(dòng)速度。表7列出了結(jié)果，結(jié)果表明增加小瓶容積會(huì)降低振動(dòng)頻率。表7小瓶大小對Wig-L-BugTM振動(dòng)頻率的影響</tables>從表中看出，對于Wig-L-Bug而言，標(biāo)定大小2ml的容器充許采用高振動(dòng)頻率。參考圖1所示尺寸，2ml標(biāo)定大小(實(shí)際3.7ml)的容器9其直徑D優(yōu)選為約0.7英寸，總高Ho約為1.4英寸，體高HB約為1英寸。VI.本發(fā)明生產(chǎn)的泡囊的應(yīng)用上面給出了影響充氣泡囊大小的各種參數(shù)。就最大生產(chǎn)效率和最小毒性而言，泡囊尺寸非常重要。此外，泡囊應(yīng)盡可能柔軟以提高效能并減少有害的組織相互作用如在肺內(nèi)的沉積。本發(fā)明產(chǎn)生了具有非常薄且柔性膜的理想尺寸的泡囊。因?yàn)榕菽夷と绱吮∏胰彳?，如為穩(wěn)定膜僅需要1mg/ml的類脂，業(yè)已發(fā)現(xiàn)，可以使用大直徑的充氣泡囊，不會(huì)產(chǎn)生肺動(dòng)脈高壓。例如，向豬給藥，劑量為必要診斷成像劑量的5倍，無肺動(dòng)脈高壓跡象出現(xiàn)。作為比較，在這些動(dòng)物中更低劑量的較小直徑的清蛋白包被空氣則會(huì)引起嚴(yán)重的肺動(dòng)脈高壓。由于本發(fā)明的泡囊如此柔軟及可變形，它們易于滑過肺毛細(xì)血管。另外，采用本申請的類脂(如聚乙二醇負(fù)載類脂)的包被技術(shù)也可降低有害的肺作用，同時(shí)，增強(qiáng)了產(chǎn)品體外和體內(nèi)的穩(wěn)定性及功效。由于普通超聲造影介質(zhì)的充氣泡囊的尺寸應(yīng)盡可能大(但不引起栓塞作用)，這是因?yàn)楫?dāng)頻率使充氣泡囊在瑞利散射范圍時(shí)，背散射或超聲作用是與半徑的六次方成正比關(guān)系。對MRI而言，也優(yōu)選采用本發(fā)明的大泡囊。與其它產(chǎn)品相比，本發(fā)明能制備并采用大尺寸的泡囊，且其無毒副作用，這增加了其功效。影響超聲造影的其它參數(shù)是泡囊膜的彈性。彈性越大則造影效果越好。由于本申請的泡囊用超薄類脂包被，其彈性類似于“裸氣體”，反射性和造影作用均可達(dá)到最大。本發(fā)明的振動(dòng)方法易于在無菌容器內(nèi)由水相和液面上空間氣體生產(chǎn)泡囊。本發(fā)明可有效地生產(chǎn)具有理想性能并用于超聲或磁共振成像的泡囊。但是，對選擇的應(yīng)用領(lǐng)域，可采用過濾器以產(chǎn)生具有大小分布更均勻及理想直徑的泡囊。例如，為了利用充氣泡囊的諧振現(xiàn)象以測量對超聲的體內(nèi)壓力，窄尺寸分布及嚴(yán)格限定泡囊直徑是有用的。通過注射泡囊(通過振動(dòng)含水相和液面上空間氣體的容器得到)通過限定尺寸的過濾器很容易達(dá)到此目的。形成的泡囊將不會(huì)超過過濾膜中過濾孔尺寸的最接近近似值。如上指出，對于大多數(shù)超聲或MRI應(yīng)用來說，充氣泡囊盡可能大是理想的。但是，對某些應(yīng)用領(lǐng)域，則希望更小的充氣泡囊。例如，導(dǎo)向腫瘤或其它患病組織時(shí)，充氣泡囊必須離開血管空間而進(jìn)入組織小間隙中，更小的充氣泡囊可用于這些用途中。這些更小的充氣泡囊(如直徑在1μm以下)基本上可通過改變水相中的化合物(組成和濃度)以及液面上空間(氣體組成及液面上空間的體積)來改變，但也可通過使其注射通過過濾器來完成。經(jīng)注射通過例如0.22μm的過濾器可生產(chǎn)基本無效大小基本均勻的非常小的充氣泡囊。形成的nm級大小的充氣泡囊具有理想的導(dǎo)向性能。上述實(shí)例的類脂懸浮液也可經(jīng)高壓鍋殺菌而無需明顯改變懸浮液的尺寸。在振動(dòng)步驟之前或之后，可通過高壓鍋和/或殺菌過濾或本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法完成造影介質(zhì)的殺菌。在用含水相及液面上空間的預(yù)選充氣容器后，可長期貯存密封瓶。要求顆粒不沉淀，充氣泡囊不破裂，及在充氣泡囊、顆粒、膠體或乳液間無不希望發(fā)生的相互作用。用含水相和液面空間充氣的容器的儲存期限應(yīng)僅與含水相中化合物的穩(wěn)定劑有關(guān)。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比其突出優(yōu)點(diǎn)就是儲存期限長及具有殺菌性能。在超聲造影領(lǐng)域穩(wěn)定性問題如顆粒的聚集和沉淀問題是普通存在的，這些問題本文已給出建議。業(yè)已發(fā)現(xiàn)，通過對本發(fā)明的多相容器振動(dòng)產(chǎn)生的充氣泡囊具有優(yōu)良的實(shí)用性，可用作診斷成像如超聲診斷成像或磁共振診斷成像用的造影劑。通常，泡囊可用于對患者成像，和/或診斷患者疾病組織的存在。成像過程包括將本發(fā)明的充氣泡囊施用于患者，然后用超聲或磁共振成像對患者掃描，得到患者內(nèi)部區(qū)域的可視圖像。所謂患者的區(qū)域是指整個(gè)患者，或患者的特定區(qū)域或部位。脂質(zhì)體造影劑可用于提供血管、心臟、肝和脾臟的圖像，及對胃腸區(qū)域或其它體腔成像，或用于對本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的其它方式如組織表征、血液池成像等。各種類型的超聲或磁共振成像裝置均可用于實(shí)施本發(fā)明，對本發(fā)明方法而言，裝置的具體類別或型號并不重要。本發(fā)明的充氣泡囊也可用于向患者傳輸各種治療劑以治療各種病癥和疾病，如本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的那樣。同樣，磁活性泡囊可用于由MRI估測壓力。泡囊增加了總體敏感度，從而增加了T2馳豫，但更增加了T2*馳豫。由于靜電場梯度的作用主要補(bǔ)償自旋回波實(shí)驗(yàn)(通過180°射頻重聚焦脈沖)，泡囊的作用對T2*加權(quán)脈沖序列較多，而對T2較小，而對T2*加權(quán)脈沖序列，靜電場梯度未起補(bǔ)償作用。增加壓力會(huì)使泡囊損失或泡囊破壞(對更易溶氣體)，同時(shí)使泡囊直徑降低。相應(yīng)地，1/T2隨壓力增長而降低。釋放壓力后，一些殘余泡囊會(huì)再次膨脹，1/T2會(huì)再次稍稍增加。由約80％PFP和20％空氣組成的泡囊隨釋壓后壓力回至基線表現(xiàn)出穩(wěn)定性增加，而1/T2略有下降(即，泡囊穩(wěn)定但顯示輕微1/T2壓力效應(yīng))。當(dāng)?shù)玫教荻然芈晥D像時(shí)，信號強(qiáng)度測量的這些作用更加明顯。信號強(qiáng)度隨壓力增力而增加(1/T2*隨壓力增加而降低)。由于實(shí)驗(yàn)進(jìn)行的相當(dāng)快(與測量T2相比僅花費(fèi)少于1/10的時(shí)間進(jìn)行梯度回聲成像)，暴露于壓力的持續(xù)時(shí)間更少，填充氮?dú)獾呐菽以卺寜汉蠓祷亟咏€(即，僅有很少的泡囊損失)。因此，在回到常壓時(shí)，對梯度回聲的信號強(qiáng)度回落至接近基線。為了用MRI測量壓力，可將泡囊設(shè)計(jì)成隨壓力增加分解，或隨壓力增加時(shí)穩(wěn)定但泡囊直徑下降。由于對MRI泡囊半徑影響1/T2*，這種關(guān)系可用于經(jīng)MRI估測壓力。本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以看出，可以各種方式向患者施用充氣的泡囊，如靜脈內(nèi)或動(dòng)脈內(nèi)注射、口服或直腸給藥，根據(jù)年齡、重量和待掃描或治療的具體哺乳動(dòng)物區(qū)域，采用的具體造影介質(zhì)或治療劑，改變給藥劑量和給藥方式。通常，初始劑量較低，并增加直至達(dá)到所需造影增強(qiáng)或治療作用。患者可為任何類型的哺乳動(dòng)物，首選人類。本文中引用或參考的專利和公開物的所有內(nèi)容完整引入本文作參考。除了本文中顯示及描述的內(nèi)容，從以上說明，本領(lǐng)域的技術(shù)人員易于看出本發(fā)明的各種改進(jìn)。這種改進(jìn)也屬本申請權(quán)利要求保護(hù)范圍。權(quán)利要求1.一種制備泡囊的方法，包括如下步驟a)將含水懸浮液相和基本上與含水懸浮液相分離的氣相放置在一個(gè)容器中；b)通過進(jìn)行往復(fù)運(yùn)動(dòng)來振動(dòng)容器直至形成泡囊。2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所說往復(fù)運(yùn)動(dòng)的幅度至少為約0.3cm。3.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中所說往復(fù)運(yùn)動(dòng)的幅度至少為約0.25cm。4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中在所說往復(fù)運(yùn)動(dòng)期間，所說容器運(yùn)行的總長度至少為約0.7cm。5.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所說往復(fù)運(yùn)動(dòng)的頻率至少為約2800RPM。6.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中所說往復(fù)運(yùn)動(dòng)的頻率不超過約4500RPM。7.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所說往復(fù)運(yùn)動(dòng)至少在第一個(gè)方向上進(jìn)行，所說的運(yùn)動(dòng)在所說的第一個(gè)方向上沿著弧形路徑進(jìn)行。8.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中由所說弧形路徑所占據(jù)的旋轉(zhuǎn)角至少為約3°。9.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中由所說弧形路徑所占據(jù)的旋轉(zhuǎn)角不超過約9°。10.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中所說弧形路徑的曲率半徑至少為約6cm。11.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中所說弧形路徑的曲率半徑不超過約15cm。12.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所說往復(fù)運(yùn)動(dòng)包括在第一方向的運(yùn)動(dòng)和與第一方向基本垂直的第二方向的運(yùn)動(dòng)。13.根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中所說往復(fù)運(yùn)動(dòng)沿著近似8字形的路徑進(jìn)行。14.根據(jù)權(quán)利要求13的方法，其中所說容器圍繞8字形路徑運(yùn)行的總長度至少為約0.7cm。15.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所說的含水懸浮液相包含類脂。16.根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中所說的含水懸浮液相包含二棕櫚?；字Ｄ憠A、二棕櫚?；字岷投貦磅；字Ｒ掖及贰?7.根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其中所說的氣相包含全氟化碳?xì)怏w。18.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所說的氣相開始占據(jù)所說容器體積的至少10％。19.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所說的振動(dòng)產(chǎn)生的95％的泡囊小于10μm。20.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其中所說的振動(dòng)持續(xù)時(shí)間不超過約2分鐘。21.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所說的振動(dòng)產(chǎn)生的泡囊平均尺寸小于2.5μm。22.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所說容器為注射器。23.一種制備泡囊的裝置，其包括a)包含有含水懸浮液相和基本上與含水懸浮液相分離的氣相的容器；b)用于通過進(jìn)行往復(fù)運(yùn)動(dòng)使容器振動(dòng)而形成泡囊的部件。24.根據(jù)權(quán)利要求23的裝置，其中所說的用于振動(dòng)的部件包括用于在幅度至少為約0.3cm下進(jìn)行振動(dòng)的部件。25.根據(jù)權(quán)利要求24的裝置，其中所說的用于振動(dòng)的部件包括用于在幅度不超過約2.5cm下進(jìn)行振動(dòng)的部件。26.根據(jù)權(quán)利要求23的裝置，其中所說的用于振動(dòng)的部件包括用于使所說的容器沿總長度至少為約0.7cm的路徑進(jìn)行振動(dòng)的部件。27.根據(jù)權(quán)利要求23的裝置，其中所說的用于振動(dòng)的部件包括用于在頻率至少為約2800RPM下進(jìn)行振動(dòng)的部件。28.根據(jù)權(quán)利要求27的裝置，其中所說的用于振動(dòng)的部件包括用于在頻率不超過約4500RPM下進(jìn)行振動(dòng)的部件。29.根據(jù)權(quán)利要求23的裝置，其中所說的用于振動(dòng)的部件包括沿著弧形路徑進(jìn)行振動(dòng)的部件。30.根據(jù)權(quán)利要求29的裝置，其中由所說弧形路徑所占據(jù)的旋轉(zhuǎn)角至少為約3°。31.根據(jù)權(quán)利要求30的裝置，其中由所說弧形路徑所占據(jù)的旋轉(zhuǎn)角不超過約9°。32.根據(jù)權(quán)利要求29的裝置，其中所說弧形路徑的曲率半徑至少為約6cm。33.根據(jù)權(quán)利要求32的裝置，其中所說弧形路徑的曲率半徑不超過約15cm。34.根據(jù)權(quán)利要求23的裝置，其中所說的用于振動(dòng)的部件包括在第一方向和與第一方向基本垂直的第二方向上振動(dòng)的部件。35.根據(jù)權(quán)利要求23的裝置，其中所說的用于振動(dòng)的部件包括沿著近似8字形的路徑進(jìn)行振動(dòng)的部件。36.根據(jù)權(quán)利要求35的裝置，其中所說容器圍繞8字形路徑運(yùn)行的總長度至少為約0.7cm。37.根據(jù)權(quán)利要求23的裝置，其中所說的含水懸浮液相包含類脂。38.根據(jù)權(quán)利要求37的裝置，其中所說的含水懸浮液相包含二棕櫚酰基磷脂酰膽堿、二棕櫚?；字岷投貦磅；字Ｒ掖及贰?9.根據(jù)權(quán)利要求38的裝置，其中所說的氣相包含全氟化碳?xì)怏w。40.根據(jù)權(quán)利要求23的裝置，其中所說的氣相開始占據(jù)所說容器體積的至少10％。41.一種制備泡囊的裝置，其包括a)包含有含水懸浮液相和基本上與含水懸浮液相分離的氣相的容器；b)用于通過進(jìn)行往復(fù)運(yùn)動(dòng)使容器振動(dòng)而形成泡囊的振動(dòng)部件，其中，所說的振動(dòng)部件包含(i)長度至少為約6cm的振動(dòng)臂，(ii)使所說振動(dòng)臂進(jìn)行往復(fù)振動(dòng)運(yùn)動(dòng)的部年，和(iii)用于將所說容器與所說振動(dòng)臂連接的部件。42.根據(jù)權(quán)利要求41的裝置，其中所說的振動(dòng)臂是被旋轉(zhuǎn)安裝在所說振動(dòng)裝置上的。43.根據(jù)權(quán)利要求41的裝置，其中所說的使振動(dòng)臂進(jìn)行往復(fù)振動(dòng)運(yùn)動(dòng)的部件包括用于旋轉(zhuǎn)所說的振動(dòng)臂通過至少約3°角的部件。44.一種制備泡囊的裝置，其包括a)包含有含水懸浮液相和基本上與含水懸浮液相分離的氣相的容器；b)用于振動(dòng)所說的容器而形成泡囊的振動(dòng)部件，其中，所說的振動(dòng)部件包含(i)振動(dòng)臂，(ii)使所說振動(dòng)臂在頻率至少約2800RPM下進(jìn)行往復(fù)振動(dòng)的部件，和(iii)用于將所說容器與所說振動(dòng)臂連接的部件。全文摘要本發(fā)明公開了一種適用于用作造影劑的泡囊的制備方法和裝置,其中通過往復(fù)運(yùn)動(dòng)使包含含水懸浮液相和分離的氣相的容器進(jìn)行振動(dòng)。往復(fù)運(yùn)動(dòng)是通過振動(dòng)臂產(chǎn)生的,該振動(dòng)臂使容器在兩個(gè)基本垂直的方向上運(yùn)動(dòng),在第一個(gè)方向上的運(yùn)動(dòng)是沿著弧形路徑運(yùn)行的。運(yùn)動(dòng)的整體路徑為8字形。振動(dòng)的頻率至少為2800RPM,振動(dòng)臂的長度至少為6cm,振動(dòng)臂在第一個(gè)方向旋轉(zhuǎn)通過的角度至少為3°,圍繞8字形路徑運(yùn)行的總長度至少為約0.7cm。文檔編號A61K49/22GK1186419SQ9619442公開日1998年7月1日申請日期1996年6月6日優(yōu)先權(quán)日1995年6月7日發(fā)明者埃文·C·翁格爾,托馬斯·姆克里里,戴維·耶洛海爾,特倫斯·R·巴雷特申請人:ImaRx藥物公司