專利名稱：作為磷酸二酯酶ⅲ、ⅳ和tnf抑制劑的亞酰胺的制作方法
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詳述本發(fā)明涉及抑制磷酸二酯酶(特別是磷酸二酯酶Ⅲ和磷酸二酯酶Ⅳ)的作用及抑制腫瘤壞死因子α即TNFα，和核因子κB即NFκB形成的一類化合物。這些化合物可由下式表示
R1和R2之一是R3-X-，另一個是氫、硝基、氰基、三氟甲基、羰基(低級)烷氧基、乙?；被柞；⒁阴Ｑ趸?、羧基、羥基、氨基、低級烷基、烷基氨基、低級烷氧基、鹵素、HF2CO、F3CO或R3-X-；R3是有至多18個碳原子的單環(huán)烷基、雙環(huán)烷基或苯并環(huán)烷基、四氫吡喃或四氫呋喃；X是碳-碳鍵、-CH2-、-O-或-N=；R5是(ⅰ)未被取代的或被一個或多個獨(dú)立地選自硝基、氰基、鹵素、三氟甲基、羰基(低級)烷氧基、乙?；幕鶊F(tuán)取代的鄰-亞苯基，或是未被取代的或被低級烷基、乙酰氧基、羧基、羥基、氨基、低級烷基氨基、低級酰氨基、氨基烷基或低級烷氧基取代的氨基甲酰基；(ⅱ)吡啶、吡咯烷酮、咪唑、萘或噻吩的連位的二價基團(tuán)，其中二價鍵在連位的環(huán)碳原子上；(ⅲ)有4-10個碳原子的連位的二價環(huán)烷基或環(huán)烯基，它們是未取代的或被一個或多個獨(dú)立地選自硝基、氰基、鹵素、三氟甲基、羰基(低級)烷氧基、乙酰基、氨基甲?；⒁阴Ｑ趸?、羧基、羥基、氨基、低級烷氨基、低級烷基、低級烷氧基或苯基的基團(tuán)所取代；(ⅳ)被低級烷基二取代的1，2-亞乙烯基；或(ⅴ)未取代的或被低級烷基單取代或二取代的1，2-亞乙基；R6是-CO-、-CH2-或-CH2CO-；Y是-COZ、-C≡N、-OR8、低級烷基或芳基；Z是-NH2、-OH、-NHR、-R9或-OR9；R8是氫或低級烷基；R9是低級烷基或芐基；和n為0、1、2或3。
本文使用的術(shù)語烷基表示單價飽和支鏈或直鏈烴鏈。除非另作說明，這類烴鏈可含1-18個碳原子。這類烷基的代表是甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、新戊基、叔戊基、己基、異己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基、十六烷基、十七烷基、十八烷基等。當(dāng)定性為“低級”時，烷基含1-6個碳原子。相同的碳原子量適用于根源術(shù)語“烷”和衍生的術(shù)語，如“烷氧基”。
本文使用的術(shù)語環(huán)烷基表示單價飽和的環(huán)烴鏈。除非另作說明，這類鏈可含至多18個碳原子。單環(huán)烷基指有單個環(huán)的基團(tuán)。多環(huán)烷基指有兩個或多個環(huán)中原子共享的兩個或多個環(huán)系統(tǒng)的烴基團(tuán)。苯并環(huán)烷基指與一個苯環(huán)稠合的單環(huán)或多環(huán)基團(tuán)。
單環(huán)基團(tuán)的例子是環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基、環(huán)壬基、環(huán)癸基、環(huán)十一烷基、環(huán)十二烷基、環(huán)十三烷基、環(huán)十四烷基、環(huán)十五烷基、環(huán)十六烷基、環(huán)十七烷基和環(huán)十八烷基。多環(huán)烷基的例子是雙環(huán)[2．2．1]庚基、雙環(huán)[3．2．1]辛基和雙環(huán)[2．2．2]辛基。苯并環(huán)烷基的典型例子是四氫萘基、2，3-二氫化茚基和苯并環(huán)庚基。
本發(fā)明也涉及降低細(xì)胞因子及其前體在哺乳動物中水平的方法，本發(fā)明也涉及其中有用的組合物。
TNFα是最初由單核吞噬細(xì)胞對免疫刺激劑應(yīng)答所釋放的細(xì)胞因子。當(dāng)給予動物或人體時，TNFα?xí)?dǎo)致炎癥、發(fā)熱、心血管作用、出血、凝血和與急性感染和休克狀態(tài)出現(xiàn)的反應(yīng)相似的急性期反應(yīng)。
NFκB是多向轉(zhuǎn)錄激活因子(Lenardo等，細(xì)胞1989，58，227-29)，它與各種疾病和炎癥狀態(tài)有關(guān)。NFκB被認(rèn)為能調(diào)節(jié)包括(但不限于)TNFα的細(xì)胞因子的水平，并是HIV轉(zhuǎn)錄的激活因子(Dbaibo等，生物化學(xué)雜志1993，17762-66；Duh等，Proc．Natl．Acad．Sci．1989，86，5974-78；Bachelerie等，自然1991，350，709-12；Boswas等，AIDS雜志1993，6，778-786；Suzuki等，生物化學(xué)和生物物理研究通訊(Biochem．a(chǎn)nd Biophys．Res．Comm．)1992，189，1709-15；Suzuki等，Biochem．Mol．Bio．Int．1993，31(4)，693-700；Shakhov等，1990，171，35-47；和Staal等，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 1990，87，9943-47。)這樣，對NFκB結(jié)合的抑制能調(diào)節(jié)細(xì)胞因子基因的轉(zhuǎn)錄，通過該項(xiàng)調(diào)節(jié)和其它機(jī)制來抑制眾多疾病狀態(tài)。TNFα和NFκB水平受交互反饋環(huán)所影響。
與炎癥病情和包括哮喘、發(fā)炎和其它疾病有關(guān)的許多細(xì)胞功能受3’，5’-環(huán)腺苷酸(cAMP)水平的調(diào)節(jié)。參見，如，Lowe和Cheng，未來藥物，17(9)，799-807，1992。現(xiàn)已證明，在炎癥的白血球中cAMP的升高抑制了它們的活性，并抑制了隨后的炎癥調(diào)節(jié)因子的釋放。升高的cAMP水平也導(dǎo)致呼吸道平滑肌的松弛。使cAMP失活的基本細(xì)胞機(jī)制是通過稱為環(huán)核苷酸磷酸二酯酶(PDE)的同功酶族使cAMP分解，所述的同功酶有7個是已知的。例如，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)抑制PDE Ⅳ型可特別有效地抑制炎癥調(diào)節(jié)因子釋放并松弛呼吸道平滑肌。這樣，抑制PDE Ⅳ的化合物可特異性地抑制炎癥并使呼吸道平滑肌松弛，而諸如心血管或抗-血小板作用等不需要的副作用則極小。現(xiàn)已知抑制TNFα的產(chǎn)生是抑制PDE Ⅳ的結(jié)果。
TNFα的過量或無節(jié)制的產(chǎn)生與許多疾病有關(guān)。這些疾病包括內(nèi)毒素血癥和／或中毒性休克綜合癥(Tracey等，自然330，662-664(1987)和Hinshaw等，循環(huán)休克30，279-292(1990))；惡病質(zhì)(Dezube等，柳葉刀，335(8690)，662(1990))；和成人呼吸窘迫綜合癥，其中在成人呼吸窘迫綜合征患者肺部呼出氣體中檢出TNFα的濃度超過12，000pg／ml(Millar等，Lancet 2(8665)，712-714(1989))。用重組TNFα進(jìn)行全身輸注也使成人呼吸窘迫綜合征有典型的改變。(Ferrai-Baliviera等，Arch．Surg．124(12)，1400-1405(1989))。
TNFα似乎也與包括關(guān)節(jié)炎的骨再吸收疾病有關(guān)，其中已測定出，白細(xì)胞被激活時會產(chǎn)生骨再吸收活性，資料表明，TNFα與該活性有關(guān)(Bertolini等，自然319，516-518(1986)，和Johnson等，內(nèi)分泌學(xué)124(3)，1424-1427(1989))?，F(xiàn)已測出TNFα通過刺激破骨細(xì)胞的形成和激活及抑制成骨細(xì)胞的功能而在體內(nèi)和體外刺激骨吸收并抑制骨形成。雖然TNFα涉及許多骨吸收疾病，包括關(guān)節(jié)炎，但與疾病最令人注目的聯(lián)系是由腫瘤或宿主組織產(chǎn)生的TNFα和與高鈣血癥有關(guān)的惡性腫瘤之間的聯(lián)系(鈣組織研究(Calci．Tissue Int．)，美國46(增刊)，S3-10(1990))。在抗移植物宿主疾病中，增加的血清TNFα水平的增加與急性同種基因骨髓移植后出現(xiàn)的主要的并發(fā)癥有關(guān)(Holler等，血液，75(4)，1011-1016(1990))。
腦型瘧是與高血濃度TNFα有關(guān)的超急性致命神經(jīng)學(xué)綜合癥，它是瘧疾病人中出現(xiàn)的最嚴(yán)重的并發(fā)癥。血清TNFα水平與急性瘧疾患者疾病的嚴(yán)重程度和預(yù)后直接相關(guān)(Grau等，N．Engl．J．Med．320(24)，1586-1591(1989))。
TNFα似乎還參與慢性的肺部炎癥。二氧化硅顆粒的沉積會導(dǎo)致硅肺，這是一種由纖維變性反應(yīng)引起的進(jìn)行性呼吸衰竭疾病。TNFα的抗體在大鼠中能夠完全抑制由二氧化硅引起的肺部纖維變性(Pignet等，自然(Nature)344245-247(1990))。已經(jīng)證明了在二氧化硅和石棉引起的纖維變性動物模型中有大量TNFα產(chǎn)生(在血清和分離的巨噬細(xì)胞內(nèi))(Bissonnette等，《炎癥》(Inflammation)13(3)，329-339(1989))。人們發(fā)現(xiàn)，與正常供體的巨噬細(xì)胞相比，肺結(jié)核患者的肺泡巨噬細(xì)胞自發(fā)地分泌大量的TNFα(Baughman等，《實(shí)驗(yàn)和臨床醫(yī)學(xué)雜志》(J．Lab．Clin．Med．)115(1)，36-42(1990))。
TNFα還與再灌注(再灌注損傷)后的炎性反應(yīng)有關(guān)，而且是導(dǎo)致失血后組織損傷的主要原因(Vedder等，PNAS 87，2643-2646(1990))。TNFα還改變內(nèi)皮細(xì)胞的性質(zhì)，而且具有多種前促凝劑活性，例如提高組織因子的前促凝劑活性和抑制抗促凝蛋白C路徑并對凝血調(diào)節(jié)蛋白的表達(dá)進(jìn)行負(fù)調(diào)節(jié)(Sherry等，《細(xì)胞生物學(xué)雜志》(J．Cell Biol．)107，1269-1277(1988))。TNFα的致炎原活性和它的早期產(chǎn)生使它很可能是一些重要疾病中組織損傷的介導(dǎo)者，這些疾病例包括但不限于心肌梗塞、中風(fēng)和循環(huán)休克。尤其重要的可能是TNFα誘導(dǎo)的粘附分子的表達(dá)，例如胞間粘附分子(ICAM)或內(nèi)皮細(xì)胞上的內(nèi)皮白細(xì)胞粘附分子(ELAM)(Munro等，《美國病理學(xué)雜志》(J．Am．Path．)135(1)，121-132(1989))。
而且，還已知TNFα是一種包括HIV-1激活在內(nèi)的逆病毒復(fù)制作用的強(qiáng)激活劑(Duh等，《美國科學(xué)院院報(bào)》(Proc．Nat．Acad．Sci．)86，5974-5978(1989)；Poll等，《美國科學(xué)院院報(bào)》87，782-785(1990)；Monto等，《血液》(Blood)79，2670(1990)；Clouse等，《免疫學(xué)雜志》(J．Immunol．)142．431-438(1909)；Poll等，《AIDS研究與人類逆病毒》(AIDS Res．Hum．Retrovirus)191-197(1992))。AIDS是由于T淋巴細(xì)胞被人免疫缺陷病毒(HIV)感染所致。至少已經(jīng)鑒定了三種HIV毒株，即HIV-1、HIV-2和HIV-3。HIV感染的結(jié)果是由T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫作用受損，被感染的患者表現(xiàn)出嚴(yán)重的機(jī)會性感染和／或異常贅生物。HIV進(jìn)入T淋巴細(xì)胞需要T淋巴細(xì)胞激活作用。諸如HIV-1和HIV-2的其它病毒在T細(xì)胞激活后感染T細(xì)胞，這些病毒的蛋白質(zhì)表達(dá)和／或復(fù)制是由這種T細(xì)胞激活作用介導(dǎo)或維持的。一旦被激活的T細(xì)胞被HIV感染，該T細(xì)胞必須被維持在激活狀態(tài)從而使HIV基因得以表達(dá)和／或復(fù)制。細(xì)胞因子，尤其是TNFα，在維持T淋巴細(xì)胞活化作用方面與由活化T細(xì)胞介導(dǎo)的HIV蛋白的表達(dá)和／或病毒的復(fù)制有關(guān)。所以，干擾HIV感染的個體內(nèi)細(xì)胞因子的活性，例如阻止或抑制尤其以TNFα為例的細(xì)胞因子的產(chǎn)生將有助于削弱由HIV感染引起的T淋巴細(xì)胞活化作用的持續(xù)性。
單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞，如枯氏細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞，也被發(fā)現(xiàn)與HIV感染的持續(xù)性有關(guān)。這些細(xì)胞和T細(xì)胞一樣，是病毒復(fù)制的目標(biāo)，而且病毒的復(fù)制水平取決于細(xì)胞的活化狀態(tài)(Rosenberg等，《HIV感染的免疫病原性，免疫學(xué)進(jìn)展》57(1989))。諸如TNFα的細(xì)胞因子已被發(fā)現(xiàn)在單核細(xì)胞和／或巨噬細(xì)胞中激活HIV的復(fù)制(Poli等，《美國科學(xué)院院報(bào)》87，782-784(1990))，所以，阻止或抑制細(xì)胞因子的產(chǎn)生或其活性將象前文就T細(xì)胞所述的那樣有助于限制HIV的發(fā)展。進(jìn)一步的研究已經(jīng)表明TNFα是體外活化HIV的常見因子，而且已經(jīng)提出了明確的利用存在于細(xì)胞質(zhì)中的核調(diào)節(jié)蛋白的活化機(jī)制(Osborn等，PNAS，86，2336-2340)。這表明，減少TNFα的合成可能通過減少轉(zhuǎn)錄并繼而減少病毒的產(chǎn)生而具有對HIV感染的抗病毒作用。
TNFα可能誘導(dǎo)T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞系內(nèi)潛伏HIV的AIDS病毒性復(fù)制(Folks等，PANS，86，2365-2368(1989))。病毒誘導(dǎo)活性的分子機(jī)制被認(rèn)為是TNFα具有的激活細(xì)胞質(zhì)內(nèi)某基因調(diào)控蛋白(NFκB)的活性，這種蛋白通過與病毒調(diào)控基因序列(LTR)結(jié)合來促進(jìn)HIV的復(fù)制(Osborn等，PANS，86，2336-2340(1989))?；颊哐錞NFα升高和外周血單核細(xì)胞內(nèi)高水平的自發(fā)性TNFα生成表明TNFα參與AIDS相關(guān)性惡病質(zhì)(Wright等，《免疫學(xué)雜志》)141(1)，99-104(1988))。
由于與以上所述類似的原因，TNFα還與其它病毒感染如巨細(xì)胞病毒(CMV)、流感病毒、腺病毒和皰疹族病毒有關(guān)。
人們已經(jīng)認(rèn)識到，抑制TNFα的作用對許多病癥有利，而且，諸如地塞米松和潑尼松龍之類甾體以及多克隆和單克隆抗體過去已被用于此目的(Beutler等，《科學(xué)》(Science)234，470-474(1985)；WO92／11383)。需要抑制TNFα或NFκB的病癥包括敗血性休克、膿毒癥、內(nèi)毒素性休克、血液動力性休克和膿毒綜合癥、局部缺血后的再灌注性損傷、瘧疾、分支桿菌感染、腦膜炎、牛皮癬、充血性心力衰竭、纖維變性疾病、惡病質(zhì)、移植排斥反應(yīng)、癌癥、自身免疫性疾病、AIDS中的機(jī)會性感染、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕脊椎炎、骨關(guān)節(jié)炎和其它關(guān)節(jié)病、Crohn氏病、潰瘍性結(jié)腸炎、多發(fā)性硬化癥、全身性紅斑狼瘡、麻風(fēng)病中的ENL、輻射損傷和過氧化性肺泡損傷。
在有經(jīng)驗(yàn)的專業(yè)人員的指導(dǎo)下，這些化合物可以被用來抑制TNFα、NFκB或磷酸二酯酶的不良作用。這些化合物可以通過口服、直腸使用或非腸胃給藥，單獨(dú)或與例如抗生素和甾體等其它治療藥物一起給需要治療的哺乳動物使用?？诜┬桶ㄆ瑒?、膠囊、糖衣片及類似形狀的壓制藥物劑型。含藥量為20-100毫克／毫升的等滲生理鹽水溶液可以用于非腸胃給藥，其中包括通過肌內(nèi)、鞘內(nèi)、靜脈內(nèi)和動脈內(nèi)途徑給藥。直腸給藥可使用以諸如可可脂的常規(guī)載體配制而成的栓劑來進(jìn)行。
劑量必需根據(jù)患者的具體適應(yīng)征、年齡、體重、一般生理情況以及所需的反應(yīng)來確定，但是，一般劑量是每日一次或多次給藥約1至約1000毫克／天。通常，在治療開始時可延用在其它由TNFα介導(dǎo)的疾病中本發(fā)明化合物已知可有效干擾TNFα活性的方法。定期檢查接受治療的患者的T細(xì)胞數(shù)量和T4／T8之比和／或例如逆轉(zhuǎn)錄酶或病毒蛋白水平的病毒血癥的程度，和／或例如惡病質(zhì)或肌肉退化等與細(xì)胞因子介導(dǎo)性疾病相關(guān)的問題的發(fā)展情況。如果一般療法無效，就加大細(xì)胞因子活性干擾劑的用量，例如每周增加50％。
本發(fā)明化合物還可以通過局部使用來治療或預(yù)防由TNFα的過量產(chǎn)生介導(dǎo)或加劇的局部性病癥，例如由皰疹病毒引起的病毒感染或病毒性結(jié)膜炎、牛皮癬、其它皮膚不適和疾病等。
這些化合物還可以用在獸醫(yī)上對除人以外的哺乳動物預(yù)防或抑制TNFα的產(chǎn)生。TNFα在動物中介導(dǎo)的需要處理、治療或預(yù)防的疾病包括上文所述的那些，但尤其是病毒感染。其中例如貓免疫缺陷病毒、馬感染性貧血病毒、羊關(guān)節(jié)炎病毒、綿羊髓鞘病毒、maedi病毒、以及其它慢病毒屬。
本發(fā)明化合物具有至少一個手性中心，所示的苯基即與之結(jié)合，所以本發(fā)明化合物以光學(xué)異構(gòu)體的形式存在。這些異構(gòu)體的兩種外消旋體、各異構(gòu)體本身、以及當(dāng)具有兩個或兩個以上手性中心時的非對映異構(gòu)體都屬于本發(fā)明的范圍之內(nèi)。外消旋體可以原樣使用，也可以利用例如使用手性吸附劑的色譜法將它們機(jī)械拆分成單獨(dú)的異構(gòu)體?；蛘撸梢酝ㄟ^與某種手性酸成鹽來由混合物制備手性形式的單獨(dú)異構(gòu)體或化學(xué)拆分成單獨(dú)異構(gòu)體，這些酸例如10-樟腦磺酸、樟腦酸、α-溴樟腦酸、甲氧基乙酸、酒石酸、二乙?；剖帷ⅠR來酸、吡咯烷酮-5-羧酸等的一種對映體，然后使所拆分堿的一種或兩種異構(gòu)體游離，可以選擇性地重復(fù)以上步驟，從而得到各自完全純的一種或兩種異構(gòu)體，即，光學(xué)純度大于95％。
利用本領(lǐng)域已知方法可以對這些化合物對TNFα產(chǎn)生的抑制作用進(jìn)行常規(guī)檢測。例如，可以利用多種已知方法來進(jìn)行TNFα抑制測試。
來自正常供體的PBMC是利用Ficoll-Hypaque密度離心獲得的。在添加了10％AB+血清、2mM L-谷胺酰胺、100U／ml青霉素和100mg／ml鏈霉素的RPMI中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。將活性化合物溶解在DMSO(Sigma Chemical)中，然后用補(bǔ)加RPMI進(jìn)一步稀釋。在加或不加藥物的PBMC懸浮液中，DMSO的最終濃度是0．25wt％。被測的候選藥物以從50mg／ml開始的半對數(shù)稀釋液接受測試，它們被加在96孔測試板內(nèi)的PBMC(106細(xì)胞／毫升)中，1小時后加入LPS。加或不加化合物的PBMC(106細(xì)胞／毫升)用來自明尼蘇達(dá)沙門氏菌R595(List Biological Labs，Campbell，CA)進(jìn)行激發(fā)。然后細(xì)胞將在37℃培養(yǎng)18-20小時。然后收獲上清液并立即測試TNFα水平，或者冷藏在-70℃(不超過4天)直至測試。使用人TNFαELISA試劑盒(ENDOGEN，Boston，MA)按照制造商的說明測定上清液中TNFα的濃度。
特別好的化合物其R5是鄰位非取代的或是被取代的亞苯基，R1是低級烷氧基，R3是至多10個碳原子的單環(huán)烷基，R6是-CO-或-CH2-，Y是低級烷基、-COZ或-C≡N，z是-NH2，-OH或-O(低級烷基)，n是0或1。
本發(fā)明化合物可以利用已知方法來制備。例如，可以用環(huán)酸酐或內(nèi)酯與適當(dāng)?shù)亩〈交衔锓磻?yīng)
其中的R1、R2、R5、R6、Y和n的定義同前文。反應(yīng)可以簡單地通過加熱來進(jìn)行，這和本文引用參考的英國專利說明書No．1，036，694中所述的方法相似?？梢赃x擇性地加入含有或不含乙酸鈉的乙酸。
作為酸酐或內(nèi)酯，可以使用結(jié)構(gòu)式如下的N-乙酯基衍生物
在另一種實(shí)施方式中，可以用本文引用參考的Griggs等在《化學(xué)協(xié)會雜志與化學(xué)通訊》(J．Chem．Soc．，Chem．Comm．)1985，1183-1184中所述的方法，通過二醛與二取代苯基化合物在回流乙酸存在下縮合形成R6是-CH2-的化合物。
二取代苯基起始物可以制備如下，即將適當(dāng)取代的醛與丙二酸縮合，形成中間產(chǎn)物苯基脒，然后進(jìn)行脫羧反應(yīng)。
二取代醛可以利用醚形成的經(jīng)典方法來制備；例如在碳酸鉀存在下與合適的溴化物反應(yīng)。現(xiàn)有文獻(xiàn)中記載了多種環(huán)烷氧基苯甲醛以及它們的制造方法。例如可參見，Ashton等，《醫(yī)學(xué)化學(xué)雜志》(J．Med．Chem．)1994，37，1696-1703；Saccomano等，《醫(yī)學(xué)化學(xué)雜志》1994，34，291-298；Cheng等，《有機(jī)化學(xué)和醫(yī)學(xué)化學(xué)文獻(xiàn)》(Org．a(chǎn)nd Med．Chem．Lett．)1995，5(17)，1969-1972，以上文獻(xiàn)均在此引用參考。
代表性的起始物包括3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯甲醛、3-環(huán)戊氧基-4-乙氧基苯甲醛、3-環(huán)己氧基-4-甲氧基苯甲醛、3-(外二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧)-4-甲氧基苯甲醛、3-(內(nèi)二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧)-4-甲氧基苯甲醛、3-(二環(huán)[2．2．2]辛-2-基氧)-4-甲氧基苯甲醛、3-(二環(huán)[3．2．1]辛-2-基氧)-4-甲氧基苯甲醛、3-(1，2-二氫化茚-2-基)氧-4-甲氧基苯甲醛和3-(內(nèi)苯并二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧)-4-甲氧基苯甲醛。
以下實(shí)施例將用來進(jìn)一步說明本發(fā)明的特征，但不應(yīng)認(rèn)為是對本發(fā)明范圍的限定。本發(fā)明的范圍僅由所附的權(quán)利要求來限定。
實(shí)施例13-氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酸于氮?dú)夥障拢瑢?-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯甲醛(10．0g，45．4mmol)和乙酸銨(7．00g，90．8mmol)在乙醇(95％，30ml)中的懸浮液攪拌加熱至45-50℃并加入丙二酸(4．72g，45．4mmol)。溶液在回流溫度加熱24小時。令混合物冷卻至室溫，然后過濾。集得的固體用乙醇洗滌，吹干、然后真空干燥(60℃，＜1mm)，得到7．36g(58％)產(chǎn)物mp225-226℃；1H NMR(D2O／NaOH／TSP)d 7．05-6．88(m，3H)，4．91-4．78(m，1H)，4．21-4．14(m，1H)，3．79(s，3H)，2．59-2．46(m，2H)，2．05-1．48(m，8H)。微量雜質(zhì)峰出現(xiàn)在6．39和7．34ppm處。13C NMR(D2O／NaOD／TSP)d 182．9，150．7，149．1，140．6，121．6，116．0，114．9，83．9，58．5，55．3，49．8，34．9，26．3。
以同樣的方法分別由3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯甲醛，3-環(huán)戊氧基-4-乙氧基苯甲醛和3-環(huán)己氧基-4-甲氧基苯甲醛制得3-氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酸、3-氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-乙氧基苯基)丙酸和3-氨基-3-(3-環(huán)己氧基-4-甲氧基苯基)丙酸。
實(shí)施例23-苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酸在于氮?dú)夥障?，?-氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酸(2．34g，8．40mmol)和碳酸鈉(0．96g，9．05mmol)在水(20ml)與乙腈(20ml)中的混合物中，邊攪拌邊加入N-乙酯基苯鄰二甲酰亞胺(1．9g，8．4mmol)。3小時后，抽真空去除乙腈。用鹽酸水溶液(4N)將溶液的pH調(diào)節(jié)至1。加入乙醚(5ml)并攪拌混合物1小時。將所得到的漿料過濾，固體用水洗滌，吹干，然后真空干燥(60℃，＜1mm)，得到2．92g(85％)白色固體產(chǎn)物mp159-162℃；1H NMR(DMSO-d6)d 12．40(br s，1H)，7．96-7．80(m，4H)，7．02(s，1H)，6．90(s，2H)，5．71-5．52(m，1H)，4．81-4．65(m，1H)，3．70(s，3H)，3．59-3．16(m，2H)，2．00-1．44(m，8H)；13C NMR(DMSO-d6)d 171．7，167．6，149．1，146．8，134．6，131．2，131．1，123．1，119．4，113．9，112．1，79．5，55．5，50．1，36．1，32．1，32．1，23．5；分析推測為C23H23NO6。理論值C，67．47；H，5．66；N，3．42。測得值C，67．34；H，5．59；N，3．14。
以同樣方法制得3-苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酸、3-苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-乙氧基苯基)丙酸、3-苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)己氧基-4-甲氧基苯基)丙酸、3-苯二甲酰亞氨基-3-{3-(二環(huán)[3．2．1]辛-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酸、3-苯二甲酰亞氨基-3-{3-(1，2-二氫化茚-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酸和3-苯二甲酰亞氨基-3-{3-(內(nèi)苯并二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酸。
實(shí)施例33-苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酰胺在約25℃，在氮?dú)夥障?，?-苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酸(2．05g，5．00mmol)、1，1’-羰基-二咪唑(0．91g，5．5mmol)和4-二甲基氨基吡啶(微量)在四氫呋喃(20ml)中的混合物攪拌1．5小時。在溶液中加入氫氧化銨(1．07ml，16．0mmol，28-30％)并繼續(xù)攪拌1．5小時。在此過程中形成少量固體。將混合物濃縮至其體積的一半，沉淀出了白色固體。將混合物過濾，用少量四氫呋喃洗滌，吹干，真空干燥(60℃，＜1mm)，得到1．27g產(chǎn)物。產(chǎn)物經(jīng)快速柱色譜法(硅膠柱，5％甲醇／二氯甲烷)進(jìn)一步純化，得到的白色固體經(jīng)真空干燥(60℃，＜1mm)后得1g(49％)產(chǎn)物mp165-166℃；1H NMR(CDCl3)d 7．85-7．61(m，4H)，7．16-7．04(m，2H)，6．85-6．75(m，1H)，5．80(dd，J=5．8，10．4Hz，1H)，5．66(br s，1H)，5．54(br s，1H)，4．82-4．70(m，1H)，3．80(s，3H)，3．71(dd，J=10．4，15Hz，1H)，3．06(dd，J=5．8，15Hz，1H)，2．06-1．51(m，8H)；13C NMR(CDCl3)d 171．8，168．3，149．8，147．7，133．9，131．8，131．3，123．3，119．9，114．6，111．8，80．4，56．0，51．6，37．9，32．7，24．1；分析推測為C23H24N2O5。理論值C，67．63；H，5．92；N，6．86。測得值C，67．25；H，5．76；N，6．68。
以同樣方法制得3-苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酰胺、3-苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-乙氧基苯基)丙酰胺、3-苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)己氧基-4-甲氧基苯基)丙酰胺、3-苯二甲酰亞氨基-3-{3-(內(nèi)二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酰胺、3-苯二甲酰亞氨基-3-{3-(二環(huán)[2．2．2]辛-2-基氧)-4-甲氧基苯基丙酰胺、3-苯二甲酰亞氨基-3-{3-(二環(huán)[3．2．1]辛-2-基氧)-4-甲氧基苯基丙酰胺、3-苯二甲酰亞氨基-3-{3-(1，2-二氫化茚-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酰胺和3-苯二甲酰亞氨基-3-{3-(內(nèi)苯并二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酰胺。
實(shí)施例43-氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯于氮?dú)夥障?，在冷卻(冰浴溫度)和攪拌的3-氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酸(3．00g，10．7mmol)的甲醇(20ml)混合物中用注射器滴加亞硫酰二氯(1．8ml，2．3mmol)。將所得的溶液于0℃攪拌1小時，去除冰浴后再在室溫下攪拌1小時，沉淀出白色固體。去除甲醇后，將固體在己烷中制成漿料。過濾混合物，白色固體用己烷洗滌，吹干，然后經(jīng)真空干燥(60℃，＜1mm)，得到2．69g(76％)鹽酸鹽產(chǎn)物mp183-184．5℃；1H NMR(DMSO-d6)d 8．76(br s，3H)，7．25(s，1H)，7．06-6．89(m，2H)，4．85-4．75(m，1H)，4．58-4．44(m，1H)，3．74(s，3H)，3．55(s，3H)，3．31-2．86(m，2H)，2．06-1．44(m，8H)；13C NMR(DMSO-d6)d 169．1，149．3，146．5，128．4，119．5，113．5，111．4，79．0，55．0，51．2，50．3，38．2，31．7，31．6，23．0；分析推測為C16H24ClNO4。理論值C，58．27；H，7．33；N，4．25。測得值C，58．44；H，7．34；N，4．13。
以同樣的方法制得3-氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯，3-氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-乙氧基苯基)丙酸甲酯和3-氨基-3-(3-環(huán)己氧基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯，以上酯都是鹽酸鹽形式的。
實(shí)施例53-苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯于氮?dú)夥障?，在鹽酸3-氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯(0．50g，1．52mmol)和碳酸鈉(0．16g，1．52mmol)在水(5ml)與乙腈(5ml)混合物中形成的溶液中，邊攪拌邊加入N-乙酯基苯鄰二甲酰亞胺(0．34g，1．52mmol)。將溶液在室溫下(RT)攪拌3小時。抽真空去除乙腈得到分成兩層的混合物，將該混合物以二氯甲烷萃取(3×15ml)。合并有機(jī)萃取液，在硫酸鎂上干燥，過濾后經(jīng)真空濃縮，得0．77g油狀粗產(chǎn)物。用快速柱色譜法純化粗產(chǎn)物(硅膠柱，35／65乙酸乙酯／己烷)，所得的玻璃狀固體經(jīng)真空干燥，得到0．48g(75％)白色固體產(chǎn)物mp76-78℃；1H NMR(CDCl3)d 7．86-7．60(m，4H)，7．19-7．00(m，2H)，6．88-6．72(m，1H)，5．84-5．67(m，1H)，4．85-4．70(m，1H)，3．80(s，3H)，3．80-3．69(m，1H)，3．63(s，3H)，3．34-3．15(m，1H)，2．10-1．48(m，8H)；13C NMR(CDCl3)d 171．0，168．0，149．8，147．6，133．9，131．8，130．9，123．2，120．1，114．6，111．7，80．4，55．9，51．8，50．7，35．9，32．7，24．0；分析推測為C24H25NO6。理論值C，68．03；H，5．95；N，3．31。測得值C，67．77；H，5．97；N，3．20。
以同樣的方法制得3-苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯，3-苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-乙氧基苯基)丙酸甲酯和3-苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)己氧基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯。
實(shí)施例63-氨基-3-(3-{外二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧}-4-甲氧基苯基)丙酸于氮?dú)夥障?，?-(外二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧)-4-甲氧基苯甲醛(6．00g，24．4mmol)和乙酸銨(3．76g，48．8mmol)在乙醇(95％，20ml)中的懸浮液攪拌加熱至45-50℃并加入丙二酸(2．53g，24．4mmol)。將溶液回流24小時，冷卻至室溫，過濾。固體以乙醇洗滌，吹干，經(jīng)真空干燥(60℃，＜1mm)，得到3．17g(43％)產(chǎn)物mp225-226℃；1H NMR(D2O／NaOD／TSP)d 7．09-6．90(m，3H)，4．41-4．28(m，1H)，4．27-4．15(m，1H)，3．82(s，3H)，2．64-2．48(m，2H)，2．44(s，1H)，2．31(s，1H)，1．92-1．76(m，1H)，1．69-1．38(m，4H)，1．30-1．05(m，3H)。
以同樣的方法，分別由3-(內(nèi)二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧)-4-甲氧基苯甲醛、3-(二環(huán)[2．2．2]辛-2-基氧)-4-甲氧基苯甲醛、3-(二環(huán)[3．2．1]辛-2-基氧)-4-甲氧基苯甲醛、3-(1，2-二氫化茚-2-基氧)-4-甲氧基苯甲醛和3-(內(nèi)苯并二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧)-4-甲氧基苯甲醛制備3-氨基-3-{3-(內(nèi)二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酸、3-氨基-3-{3-(二環(huán)[2．2．2]辛-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酸、3-氨基-3-{3-(二環(huán)[3．2．1]辛-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酸、3-氨基-3-{3-(1，2-二氫化茚-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酸和3-氨基-3-{3-(內(nèi)苯并二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酸。
實(shí)施例7鹽酸3-氨基-3-{3-(外二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酸甲酯于氮?dú)夥障?，在冰浴冷卻并攪拌的3-氨基-3-(3-{外二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧}-4-甲氧基苯基)丙酸(2．00g，6．55mmol)的甲醇(15ml)懸浮液中用注射器滴加亞硫酰二氯(1．56ml，13．1mmol)。將所得的溶液在0℃攪拌30分鐘，去除冰浴后再在室溫下攪拌2．5小時。去除甲醇，將固體在己烷(15ml)中形成漿料。過濾混合物，白色固體以己烷洗滌，吹干，經(jīng)真空干燥(60℃，＜1mm)，到得1．97g(85％)產(chǎn)物mp197．5-201．5℃；1H NMR(DMSO-d6)d 7．50(br s，3H)，7．18(s，1H)，7．07-6．88(m，2H)，4．56-4．42(m，1H)，4．30-4．19(m，1H)，3．74(s，3H)，3．54(s，3H)，3．41-2．85(m，3H)，2．37(s，1H)，2．27(s，1H)，1．92-1．75(m，1H)，1．64-1．03(m，6H)；13C NMR(DMSO-d6)d 169．4，149．6，146．4，128．8，120．0，119．9，113．8，111．8，80．1，79．9，55．5，51．6，50．7，40．5，39．2，38．6，34．8，27．8，23．7，23．6。
以同樣的方法，制得3-氨基-3-{3-(內(nèi)二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酸甲酯，3-氨基-3-{3-(二環(huán)[2．2．2]辛-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酸甲酯，3-氨基-3-{3-(二環(huán)[3．2．1]辛-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酸甲酯，3-氨基-3-{3-(1，2-二氫化茚-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酸甲酯和3-氨基-3-{3-(內(nèi)苯并二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酸甲酯。
實(shí)施例8按照實(shí)施例3的步驟，只是代以3-苯二甲酰亞氨基-3-(3-{外二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧}-4-甲氧基苯基)丙酸，獲得3-苯二甲酰亞氨基-3-(3-{外-二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧}-4-甲氧基苯基)丙酰胺。
同樣，制得3-苯二甲酰亞氨基-3-(3-{內(nèi)-二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧}-4-甲氧基苯基)丙酰胺、3-苯二甲酰亞氨基-3-{3-(二環(huán)[2．2．2]辛-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酰胺、3-苯二甲酰亞氨基-3-{3-(二環(huán)[3．2．1]辛-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酰胺、3-苯二甲酰亞氨基-3-{3-(2，3-二氫化茚-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酰胺、和3-苯二甲酰亞氨基-3-{3-(內(nèi)-苯并二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酰胺。
實(shí)施例93-苯二甲酰亞氨基-3-(3-{外-二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧}-4-甲氧苯基)丙酸甲酯在氮?dú)庀拢瑢-乙酯基苯二甲酰亞胺(0．64g，2．81mmol)加入攪拌的溶液中，該溶液是鹽酸3-氨基-3-(3-{外-二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧}-4-甲氧苯基)丙酸甲酯(1．00g，2．81mmol)和碳酸鈉(0．3g，2．8mmol)在水(10ml)和乙腈(10ml)混合物中形成的。將溶液在室溫下攪拌3小時。真空除去乙腈，殘余物用二氯甲烷(3×30ml)抽提。合并有機(jī)抽提物，用硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮成1．44g產(chǎn)物。產(chǎn)物用快速柱色譜法(硅膠，20％，乙酸乙酯／二氯甲烷)進(jìn)一步純化，以形成一白色固體，然后將固體真空干燥成0．23g(18％)產(chǎn)物mp 47-48℃；1H NMR(CDCl3)d 7．86-7．61(m，4H)，7．14-7．00(m，2H)，6．82-6．74(m，1H)，5．75(dd，J=5．9，10Hz，1H)，4．25-4．14(m，1H)，3．84-3．69(m，1H)，3．79(s，3H)，3．63(s，3H)，3．23(dd，J=5．9，16．5Hz，1H)，2．51-2．41(m，1H)，2．34-2．24(m，1H)，1．86-1．06(m，8H)；13C NMR(CDCl3)d 171．1，168．1，149．7，147．2，133．9，131．8，130．9，123．3，120．1，120．0，114．5，114．4，111．8，81．1，56．0，51．9，50．8，41．1，41．0，39．9，39．8，35．9，35．5，35．3，28．4，24．3；HPLC97％；分析推測為C26H27NO6。理論值C，69．47；H，6．05；N，3．12。發(fā)現(xiàn)C，69．22；H，5．91；N，2．95。
同樣，制得3-苯二甲酰亞氨基-3-{3-(內(nèi)-二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酸甲酯、3-苯二甲酰亞氨基-3-{3-(二環(huán)[2．2．2]辛-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酸甲酯、3-苯二甲酰亞氨基-3-{3-(二環(huán)-[3．2．1]辛-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酸甲酯、3-苯二甲酰亞氨基-3-{3-2，3-二氫化茚-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酸甲酯、和3-苯二甲酰亞氨基-3-{3-(內(nèi)-苯并二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧)-4-甲氧基苯基}丙酸甲酯。
實(shí)施例101-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙胺在氮?dú)庀?，將丁基鋰的己烷溶?7．2ml，18mmol)經(jīng)注射器加入攪拌的冰浴冷卻的1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(2．5M，4．1ml，19．5mmol)的四氫呋喃(5ml)溶液中。除去冰浴，使溶液在室溫下攪拌30分鐘。然后將該溶液滴加入冰浴冷卻的3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯甲醛(3．3g，15mmol)的四氫呋喃(5ml)溶液中，將混合物攪拌20分鐘。然后滴加入溴化乙基鎂的乙醚溶液(3M，10ml，30mmol)。使反應(yīng)溶液達(dá)到室溫并在室溫下攪拌。用HPLC(Waters Nova-Pak／EC 18柱，3．9×150mm，4微米，1ml／min，240nm，35／65，CH3CN／0．1％H3PO4(水溶液))監(jiān)控反應(yīng)，3小時后，沒有起始物質(zhì)存在。將反應(yīng)混合物緩慢倒入氯化銨的飽和溶液(100ml)中。得到的混合物用二氯甲烷(3×20ml)抽提，合并有機(jī)抽提物，用硫酸鎂干燥，并在真空下濃縮，得到5．6g產(chǎn)物，產(chǎn)物用快速柱色譜法(硅膠，250／10／1，二氯甲烷／甲醇／氫氧化銨)進(jìn)一步純化，以形成2．5g(67％)的油狀產(chǎn)物1H NMR(CDCl3)6．91-6．77(m，3H)，4．85-4．74(m，1H)，3．83(s，3H)，3．74(t，J=6．8Hz，1H)，2．02-1．15(m，12H)，0．86(t，J=7．4Hz，3H)；13C MNR(CDCl3)_148．8，147．5，138．8，118．4，113．3，111．8，80．3，57．4，56．0，32．7，32．4，10．9。
實(shí)施例113-苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙烷在氮?dú)庀?，將N-乙酯基苯二甲酰亞胺(0．9g，4．0mmol)加入攪拌的溶液中，該溶液是1-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧苯基)丙胺(1g，4mmol)和碳酸鈉(0．42g，4．0mmol)在水(5ml)和乙腈(5ml)混合物中形成的。將溶液在室溫下攪拌2．5小時。真空除去乙腈，產(chǎn)生白色固體沉積。過濾混合物，固體用水洗滌和吹干，然后在真空下干燥，形成1．25g(83％)的產(chǎn)物mp 100．0-102．5℃；1H NMR(CDCl3)_7．87-7．61(m，4H)，7．21-7．01(m，2H)，6．85-6．75(m，1H)，5．15(dd，J=7，9．3Hz，1H)，4．86-4．74(m，1H)，3．81(s，3H)，2．66-2．20(m，2H)，2．08-1．47(m，8H)，0．95(t，J=7．3Hz，3H)；13C NMR(CDCl3)_168．4，149．4，147．5，133．8，132．2，131．9，123．1，120．5，115．0，111．5，80．3，55．6，55．9，32．7，24．4，11．6；HPLC(Waters Nova-Pak／EC 18柱，3．9×150mm，4微米，1ml／min，240nm，60／40，CH3CN／0．1％ H3PO4(水溶液))12分鐘，99％；分析推測為C23H25NO4。理論值C，72．80；H，6．64；N，3．69。測得值C，72．72；H，6．69；N．3．65。
實(shí)施例121-{3-(2，3-二氫化茚基氧基)-4-甲氧基苯基}丙胺在氮?dú)庀?，將丁基鋰的己烷溶?2．5M，4．8ml，12mmol)經(jīng)注射器加入攪拌的冰浴冷卻的1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(2．7ml，13mmol)的四氫呋喃(5ml)溶液中。除去冰浴，使溶液在室溫下攪拌25分鐘。然后將該溶液滴加入冰浴冷卻的3-(2，3-二氫化茚基氧基)-4-甲氧基苯甲醛(2．68g，10．0mmol)的四氫呋喃(4ml)溶液中，將混合物攪拌1小時。然后經(jīng)注射器滴加溴化乙基鎂的乙醚溶液(3M，6．7ml，20mmol)。將反應(yīng)混合物加熱回流，并用HPLC(Waters Nova-Pak／EC 18柱，3．9×150mm，4微米，1ml／min，240nm，40／60，CH3CN／0．1％H3PO4(水溶液))監(jiān)控。48小時后，反應(yīng)完成，使其冷卻至室溫。然后，將反應(yīng)混合物緩慢倒入氯化銨的飽和溶液(80ml)中。所得的混合物用二氯甲烷(3×15ml)抽提，合并有機(jī)抽提物，用硫酸鎂干燥，并濃縮形成產(chǎn)物，產(chǎn)物進(jìn)一步用快速柱色譜法(硅膠，250／10／1，二氯甲烷／甲醇／氫氧化銨)進(jìn)行純化，以形成0．27g(9％)的桔紅色固體產(chǎn)物。
實(shí)施例131-苯二甲酰亞氨基-1-{3-(2，3-二氫化茚基氧基)-4-甲氧基苯基}丙烷在氮?dú)庀拢厰嚢柽厡-乙酯基苯鄰二甲酰亞胺(0．19g，0．84mmol)加入1-{3-(2，3-二氫化茚基氧基)-4-甲氧基苯基}丙胺(0．25g，0．84mmol)和碳酸鈉(0．09g，0．84mmol)在水(2ml)和乙腈(2ml)混合物中的溶液中。將溶液在室溫下攪拌4小時。真空除去乙腈，所得的混合物用二氯甲烷(2×10ml)抽提，用硫酸鎂干燥，并在真空下濃縮至0．35g產(chǎn)物，產(chǎn)物用快速柱色譜法(硅膠，25／75，乙酸乙酯／己烷)進(jìn)一步純化，得到0．19g(48％)的固體產(chǎn)物mp 62℃；1H NMR(CDCl3)_7．86-7．63(m，4H)，7．29-7．04(m，6H)，6．87-6．78(m，1H)，5．30-5．14(m，2H)，3．77(s，3H)，3．52-3．14(m，4H)，2．66-2．21(m，2H)，0．97(t，J=7．3Hz，3H)；13C NMR(CDCl3)_168．4，149．6，147．1，140．7，140．6，133．8，132．2，131．8，126．5，124．6，123．1，121．2，115．3，111．7，79．0，56．5，55．9，39．6，39．6，24．4，11．6；HPLC(Waters Nova-Pak／EC18柱，3．9×150mm，4微米，1ml／min，240nm，60／40，CH3CN／0．1％H3PO4(水溶液))12分鐘，98％；分析推測為C27H25NO4。理論值C，75．86；H，5．89；N，3．28。測得值C，75．58；H，5．90；N，3．20。
實(shí)施例141-(1-氧代異二氫吲哚)-1-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙烷于氮?dú)庀?，將苯二甲?0．4g，3mmol)和1-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙胺(0．75g，3．0mmol)的冰醋酸(9ml)溶液在攪拌下加熱回流5分鐘。然后使反應(yīng)物攪拌冷卻至室溫，并在真空下濃縮形成一產(chǎn)物，將該產(chǎn)物進(jìn)一步用快速柱色譜法(在硅膠上進(jìn)行，先用40／60乙酸乙酯／己烷，然后用15／85乙酸乙酯／二氯甲烷洗脫)進(jìn)行純化，得到0．48g(44％)黃色油狀產(chǎn)物1H NMR(CDCl3)_7．97-7．76(m，1H)，7．61-7．31(m，3H)，7．06-6．74(m，3H)，5．54-5．39(m，1H)，4．87-4．66(m，1H)，4．28(d，J=17Hz，1H)，4．00(d，J=17Hz，1H)，3．82(s，3H)，2．25-1．45(m，10H)，0．99(t，J=7．3Hz，3H)；13C NMR(CDCl3)_168．3，149．4，147．5，141．1，132．7，132．2，130．9，127．7，123．5，122．6．119．3，114．9，111．6，80．3，55．9，55．8，45．3，32．6，32．5，24．2，23．8，10．9；HPLC(Waters Nova-Pak／EC 18柱，3．9×150mm，4微米，1ml／min，240nm，50／50，CH3CN／0．1％H3PO4)8分鐘，100％。
實(shí)施例153-(1-氧代異二氫吲哚)-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)-丙酸于氮?dú)庀?，將苯二甲?0．67g，5．00mmol)和3-氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酸(1．40g，5．01mmol)的冰醋酸(20ml)溶液在攪拌下加熱回流5分鐘。然后使反應(yīng)液攪拌冷卻至室溫，過夜。將所得的棕黃色溶液真空濃縮，固體在乙酸乙酯(25ml)中形成漿料。對漿料過濾，固體在真空下干燥，形成1．52g(77％)的白色粉末狀產(chǎn)物mp 161-163℃；1H NMR(DMSO-D6／TMS)_12．33(br s，1H，COOH)，7．75-7．4(m，4H，Ar)，7．05-6．8(m，3H，Ar)，5．66(app．t，J=7．9Hz，1H)，4．75(m，1H)，4．51(d，J=17．7Hz，1H)，4．11(d，J=17．7Hz，1H)，3．71(s，3H)，3．12(m，2H)，1．95-1．45(m，8H)；13C NMR(DMSO-D6／TMS)_171．8，149．1，146．8，141．6，132．1，131．5，131．3，127．8，123．4，122．8，119．2，114．0，112．2，79．4，55．5，51．0，46．3，36．7，32．1，32．0，23．4。分析推測為C23H25NO5。理論值C，69．86；H，6．37；N，3．54。測得值C，69．59；H，6．35；N，3．44。
實(shí)施例163-(1-氧代異二氫吲哚)-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯在氮?dú)庀?，?-(1-氧代異二氫吲哚)-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)-丙酸(0．758g，1．92mmol)的10ml甲醇(在冰浴中冷卻)懸浮液中邊攪拌邊加入0．3ml亞硫酰氯。在攪拌15分鐘后，使混合物升溫至室溫并攪拌過夜。蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶解在二氯甲烷中，并用飽和的碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。有機(jī)層用硫酸鈉干燥并在真空下濃縮。殘余物用快速柱色譜法(硅膠，1／9乙酸乙酯／二氯甲烷)進(jìn)一步純化，得到0．6g產(chǎn)物，將其在己烷中攪拌。過濾淤漿，形成0．32g白色固體產(chǎn)物mp 94．5-95．5℃；1H NMR(CDCl3／TMS)_7．85(d，J=6．7Hz，1H，Ar)，7．55-7．3(m，3H，Ar)，7．0-6．75(m，3H)，5．92(dd，J=9．1，7．0Hz，1H)，4．74(m，1H)，4．37(d，J=16．7Hz，1H)，4．07(d，J=16．7Hz，1H)，3．82(s，3H)，3．64(s，3H)，3．23(dd，J=9．1，15．0Hz，1H)，3．10(dd，J=9．1，15．0Hz，1H)，2．05-1．45(m，8H)；13C NMR(CDCl3／TMS)170．9，149．8，147．8，141．3，132．6，1313，131．0，127．9，123．8，122．7，119．0，114．6，111．8，80．5，56．0，52．0，51．7，46．6，40．0，32．7，32．7，24．0。分析推測為C24H27NO5。理論值C，70．40；H，6．65；N，3．42。測得值C，70．07；H，6．63；N，3．34。
實(shí)施例17每片含有50毫克活性成分的片劑可以下列方式制備組成(1000片)活性成分50．0克乳糖50．7克小麥淀粉 7．5克聚乙二醇6000 5．0克滑石汾 5．0克硬脂酸鎂 1．8克軟化水 q．s首先將固體組分加壓通過篩目寬0．6mm目篩。然后將活性成分、乳糖、滑粉、硬脂酸鎂和半量淀粉混合。另一半淀粉懸浮在40毫升水中，將該懸浮液加入有聚乙二醇的100毫升沸水溶液中。所得糊漿加入粉狀物質(zhì)中，將混合物制粒，如果需要可加水。顆粒在35℃下干燥過夜，加壓通過篩目寬1．2mm目篩，并壓制成直徑約為6mm兩面均為凹形的片劑。
實(shí)施例18每片含有100毫克活性成分的片劑可以下列方式制備組成(1000片)活性成分100．0克乳糖100．0克小麥淀粉 47．0克硬脂酸鎂 3．0克首先將所有固體組分加壓通過0．6mm目篩。然后將活性成分、乳糖、硬脂酸鎂和半量淀粉混合。另一半淀粉懸浮在40毫升水中，將該懸浮液加入100毫升沸水中。秘得糊漿加入粉狀物質(zhì)中，將混合物制粒，如果需要可加水。顆粒在35℃下干燥過夜，加壓通過1．2mm目篩，并壓制成直徑約為6mm、兩面均為凹形的片劑。
實(shí)施例19每片含有75毫克活性成分的咀嚼用片劑可以下列方式制備組成(1000片)活性成分 75．0克甘露糖醇230．0克乳糖150．0克滑石粉 21．0克甘氨酸 12．5克硬脂酸 10．0克糖精 1．5克5％明膠溶液 q．s首先將所有固體組分加壓通過一個0．25mm目篩。將甘露糖醇和乳糖混合，加入明膠溶液制粒，加壓通過2mm目篩，50℃干燥，并再次加壓通過1．7mm目篩。然后仔細(xì)混合活性成分、甘氨酸和糖精，加入甘露糖醇和乳糖的顆粒、硬脂酸和滑石粉，充分混合整個混合物，并壓制成直徑約10mm／兩面均為凹形且在上側(cè)有凹槽的片劑。
實(shí)施例20每片含有10毫克活性成分的片劑可以下列方式制備組成(1000份片劑)活性成分 10．0克乳糖 328．5克玉米淀粉 17．5克聚乙二醇6000 5．0克滑石粉25．0克硬脂酸鎂 4．0克軟化水 q．s首先將固體組分加壓通過0．6mm目篩。然后將活性成分、乳糖、滑石粉、硬脂酸鎂和半量的淀粉混合。另一半淀粉懸浮在65毫升水中，將該懸浮液加入聚乙二醇的260毫升沸水溶液中。所得的糊漿加入粉狀物質(zhì)中，將整個混合物混合制粒，如果需要可加水。顆粒在35℃下干燥過夜，加壓通過1．2mm目篩，并壓制成直徑約為10mm、兩面均為凹形且上側(cè)有凹槽的片劑。
實(shí)施例21每片含有100毫克活性成分的明膠干填充膠囊可以下列方式制備組成(1000個膠囊)活性成分 100．0克微晶纖維素 30．0克十二烷基硫酸鈉 2．0克硬脂酸鎂 8．0克將十二烷基硫酸鈉通過0．2mm目篩篩入活性成分中，兩種成分均勻混合10分鐘。然后將微晶纖維素通過0．9mm目篩加入混合物，整個混合物再次均勻混合10分鐘。最后，將硬脂酸鎂通過0．8mm目篩加入，再混合3分鐘，然后將混合物以每份140毫克加入0號(加長的)明膠干填充膠囊中。
實(shí)施例220．2％的注射液或輸液可按例如下列方式制備活性成分 5．0克氯化鈉 22．5克磷酸緩沖液pH7．4300．0克軟化水 至2500．0mL將活性成分溶解在1000毫升水中，過濾通過一個微過濾器，或在1000毫升水中形成漿料。加入緩沖液，并用水加至2500毫升。每個玻璃安瓿中加入1．0或2．5毫升，以制成劑量單位形式(每個分別含有2．0或5．0毫克活性成分)。
權(quán)利要求
1．一種下式化合物
其中R1和R2之一是R3-X-，另一個是氫、硝基、氰基、三氟甲基、羰基(低級)烷氧基、乙?；被柞；?、乙酰氧基、羧基、羥基、氨基、低級烷基、烷基氨基、低級烷氧基、鹵素、HF2CO、F3CO或R3-X-；R3是有至多18個碳原子的單環(huán)烷基、雙環(huán)烷基或苯并環(huán)烷基、四氫吡喃或四氫呋喃；X是碳-碳鍵、-CH2-、-O-或-N=；R5是(ⅱ)未被取代的或被一個或多個獨(dú)立地選自硝基、氰基、鹵素、三氟甲基、羰基(低級)烷氧基、乙?；幕鶊F(tuán)取代的鄰-亞苯基，或是未被取代的或被低級烷基、乙酰氧基、羧基、羥基、氨基、低級烷基氨基、低級酰氨基、氨基烷基或低級烷氧基取代的氨基甲?；?ⅱ)吡啶、吡咯烷酮、咪唑、萘或噻吩的連位的二價基團(tuán)，其中二價鍵在連位的環(huán)碳原子上；(ⅲ)有4-10個碳原子的連位的二價環(huán)烷基或環(huán)烯基，它們是未取代的或被一個或多個獨(dú)立地選自硝基、氰基、鹵素、三氟甲基、羰基(低級)烷氧基、乙?；?、氨基甲?；⒁阴Ｑ趸?、羧基、羥基、氨基、低級烷氨基、低級烷基、低級烷氧基或苯基的基團(tuán)所取代；(ⅳ)被低級烷基二取代的1，2-亞乙烯基；或(ⅴ)未取代的或被低級烷基單取代或二取代的1，2-亞乙基；R6是-CO-、-CH2-或-CH2CO-；Y是-COZ、-C≡N、-OR8、低級烷基或芳基；Z是-NH2、-OH、-NHR、-R9或-OR9；R8是氫或低級烷基；R9是低級烷基或芐基；和n為0、1、2或3。
2．根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中R1和R2之一是R3-O-，另一個是低級烷基、低級烷氧基或R3-O-；R3是有至多10個碳原子的環(huán)烷基或雙環(huán)烷基或四氫呋喃；R5是被一個或多個獨(dú)立地選自硝基、氰基、鹵素、三氟甲基、乙酯基、甲酯基、丙酯基、乙?；?、氨基甲?；幕鶊F(tuán)所取代的鄰-亞苯基，或是被有1-3個碳原子的烷基、乙酰氧基、羧基、羥基、氨基、有1-3個碳原子的烷基取代的氨基、有1-4個碳原子的烷基、有1-4個碳原子的烷氧基取代的氨基甲?；?；R6是-CO-或-CH2-；Y是COZ或低級烷基；Z是-NH2、-OH、-NHR、-R9或-OR9；R9是烷基或芐基；和n是1或2。
3．根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中R5是未被取代的或被一個或多個獨(dú)立地選自硝基、氰基、鹵素、三氟甲基、羰基(低級)烷氧基、乙?；幕鶊F(tuán)取代的鄰-亞苯基，或是未被取代的或被低級烷基、乙酰氧基、羧基、羥基、氨基、低級烷基氨基、低級酰氨基、氨基烷基或低級烷氧基取代的氨基甲?；?；R1是低級烷氧基；R3是有至多10個碳原子的單環(huán)烷基；R6是-CO-；Y是-COZ或-C≡N；Z是-NH2、-OH或-O(低級烷基)；和n為0或1。
4．一種化合物，它選自3-鄰苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酸、3-鄰苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酰胺、3-鄰苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯、3-鄰苯二甲酰亞氨基-3-(3-{外-二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧基}-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯、3-鄰苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯、3-鄰苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-羥基苯基)丙酸、3-鄰苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)己氧基-4-甲氧基苯基)丙酸、3-鄰苯二甲酰亞氨基-3-{3-(二環(huán)[3．2．1]辛-2-基氧基)-4-甲氧基苯基}丙酸、3-鄰苯二甲酰亞氨基-3-(3-二氫化茚-2-基氧基-4-甲氧基苯基)丙酸、3-鄰苯二甲酰亞氨基-3-{3-(內(nèi)-苯并二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧基)-4-甲氧基苯基}丙酸、3-鄰苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)戊氧基-4-羥基苯基)丙酰胺、3-鄰苯二甲酰亞氨基-3-(3-環(huán)己氧基-4-甲氧基苯基)丙酰胺、3-鄰苯二甲酰亞氨基-3-{3-(內(nèi)-二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧基)-4-甲氧基苯基}丙酰胺、3-鄰苯二甲酰亞氨基-3-{3-(二環(huán)[2．2．2]辛-2-基氧基)-4-甲氧基苯基}丙酰胺、3-鄰苯二甲酰亞氨基-3-{3-(二環(huán)[3．2．1]辛-2-基氧基)-4-甲氧基苯基}丙酰胺、3-鄰苯二甲酰亞氨基-3-{3-二氫化茚-2-基氧基-4-甲氧基苯基}丙酰胺和3-鄰苯二甲酰亞氨基-3-{3-(內(nèi)-苯并二環(huán)[2．2．1]庚-2-基氧基)-4-甲氧基苯基)丙酰胺。
5．一種抑制哺乳動物中磷酸二酯酶的方法，包括給對象使用有效量的如權(quán)利要求1所述的化合物。
6．一種抑制哺乳動物中TNFα的方法，包括給對象使用有效量的如權(quán)利要求1所述的化合物。
7．一種抑制哺乳動物中NFκB活化的方法，包括給對象使用有效量的如權(quán)利要求1所述的化合物。
8．一種藥物組合物，包括以單劑或多劑量能有效地抑制磷酸二酯酶的的的如權(quán)利要求1所述的化合物。
全文摘要
新穎的酰胺是TNFα和磷酸二酯酶的抑制劑,可用于抵御惡病質(zhì)、內(nèi)毒性休克、逆轉(zhuǎn)錄病毒復(fù)制、哮喘和炎癥。典型的例子是3－苯二甲酰亞氨基－3－(3－環(huán)戊氧基－4－甲氧基苯基)丙酰胺。
文檔編號A61P17/00GK1206405SQ9619941
公開日1999年1月27日 申請日期1996年12月24日 優(yōu)先權(quán)日1995年12月26日
發(fā)明者G·W·馬勒, M·夏爾 申請人:賽爾金有限公司