專利名稱：活性肽用于增強(qiáng)動(dòng)物免疫力和疫苗佐劑的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種增強(qiáng)動(dòng)物免疫力的方法，專用于提高動(dòng)物諸如雞、鴨、兔、豬、羊、犬、牛、鹿等家畜、家禽及各類經(jīng)濟(jì)動(dòng)物的免疫能力，并能提高疫苗的免疫效果。
畜禽養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展十分迅速，尤其是集約化飼養(yǎng)規(guī)模日益擴(kuò)大。目前阻礙養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的主要問題是疾病，尤其是傳染病。疫苗接種是預(yù)防傳染病最基本、最有效的方法，但是由于多種原因，目前許多疫苗的免疫效果還不十分理想，不能對(duì)動(dòng)物提供完全保護(hù)。因此人們進(jìn)行了大量的研究工作，試圖通過不同途徑來提高疫苗的效果，這些途徑包括提高疫苗質(zhì)量(如增加抗原含量、增強(qiáng)免疫原性、使用高效佐劑、優(yōu)化制苗工藝等)、改進(jìn)免疫方法(如采用粘膜免疫、胚胎免疫、超前免疫等)及增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體自身的免疫應(yīng)答能力(如使用免疫增強(qiáng)劑、減少有毒物質(zhì)對(duì)免疫系統(tǒng)的損害、控制免疫抑制性病原微生物的侵染、提供良好的飼養(yǎng)管理?xiàng)l件等)。而研究、開發(fā)新型高效佐劑是提高免疫效果的主要手段之一。
佐劑按其作用方式可分為兩大類，一是作用于疫苗，改善疫苗本身的性能，如傳統(tǒng)的化學(xué)佐劑氫氧化鋁膠和油類可以減緩疫苗抗原在體內(nèi)的釋放速率，但往往引起注射部位腫脹甚至感染化濃等不良反應(yīng)。皂素糖苷可以與某些抗原蛋白及膽固醇結(jié)合形成免疫刺激復(fù)合物，使非顆粒性的抗原形成顆粒結(jié)構(gòu)，從而增強(qiáng)疫苗的免疫效果，但因來源有限而使成本較高。另一類是直接作用于動(dòng)物機(jī)體細(xì)胞，增強(qiáng)機(jī)體的自主免疫應(yīng)答能力，如胸腺素直接作用于T淋巴細(xì)胞、白介素作用于T、B淋巴細(xì)胞及其它細(xì)胞，但均因其成本太高而無法用于動(dòng)物。
目前佐劑的品種較多，分別來自動(dòng)物(如胸腺素、白介素、干擾素、蜂蠟等)、植物(如植物血凝素、黃芪多糖、人參皂甙等)、微生物(如真菌多糖、分枝桿菌細(xì)胞壁等)及化學(xué)合成物(如左旋咪唑、氫氧化鋁、聚肌一胞等)。上述各種佐劑中，有些還在研究階段，尚未應(yīng)用于生產(chǎn)，如白介素、真菌多糖等；有些雖然已應(yīng)用于人類如胸腺素和干擾素，但因其價(jià)格較昂貴或來源有限而不可能用于動(dòng)物。目前動(dòng)物疫苗所用佐劑主要還是從物理學(xué)角度提高其免疫效果，例如氫氧化鋁、油類、蜂蠟等，但這些佐劑不但性質(zhì)粘稠，不易注射，而且容易引起局部腫脹、甚至感染化濃等副作用。因此目前還沒有具有直接增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體自身免疫應(yīng)答能力的生物活性佐劑來從治本角度提高免疫效果。
本發(fā)明的目的是，提供一種增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體自身免疫力的方法，一方面能增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體免疫能力，另一方面能使疫苗的免疫效果更確實(shí)、可靠，將疫苗免疫水平提高一個(gè)層次，具有直接的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。
本發(fā)明所提供的技術(shù)方案如下活性肽(Lys-His-Gly-NH2)用于增強(qiáng)動(dòng)物免疫力的方法，按動(dòng)物體重每公斤使用活性肽1～600納克，每只動(dòng)物采用注射或口服方法。
上述活性肽用于增強(qiáng)動(dòng)物免疫力的方法，如果選用注射方法，使用藥用級(jí)活性肽效果會(huì)更好。
活性肽(Lys-His-Gly-NH2)用作動(dòng)物疫苗佐劑的方法，其特征在于每1000毫升動(dòng)物疫苗與8～40微克活性肽配合使用，按疫苗常規(guī)劑量用于動(dòng)物。
上述活性肽用作動(dòng)物疫苗佐劑的方法，如果每1000毫升動(dòng)物疫苗與8～40微克活性肽混合使用，使用藥用級(jí)活性肽效果會(huì)更好，更加方便。
活性肽(Lys-His-Gly-NH2)是存在于禽類法氏囊(也叫囊上腔)組織中的一種免疫活性物質(zhì)，由法氏囊的濾泡和樹突網(wǎng)狀上皮細(xì)胞產(chǎn)生。其化學(xué)本質(zhì)是由賴氨酸、組氨酸和甘氨酸組成的天然三肽，對(duì)熱及滅活劑穩(wěn)定。目前還沒有將該活性肽作為疫苗佐劑或?qū)⒒钚噪挠糜谠鰪?qiáng)動(dòng)物免疫力的報(bào)道。根據(jù)發(fā)明人研究，其體外生物學(xué)活性是可以刺激前體淋巴細(xì)胞分化、增殖，成為具有抗體產(chǎn)生潛力的B淋巴細(xì)胞和具有細(xì)胞免疫潛力的T淋巴細(xì)胞。在活性肽的刺激下，T、B淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率可以分別提高10％和30％，而T、B淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化及其數(shù)量代表著機(jī)體的免疫功能(見參考文獻(xiàn)，杜念興，《獸醫(yī)免疫學(xué)》上?？萍汲霭嫔?，1984，16-18，272)。因此，按照本發(fā)明所提供的方法將活性肽用于動(dòng)物，可使動(dòng)物機(jī)體自身免疫應(yīng)答能力提高。試驗(yàn)表明，活性肽作為疫苗佐劑，可促進(jìn)和增強(qiáng)宿主機(jī)體的自身免疫系統(tǒng)，提高各類動(dòng)物疫苗諸如雞新城疫、法氏囊、狂犬病疫苗、牛出敗、牛流行熱、鴨瘟、兔瘟、貂腸炎、豬瘟、豬肺疫、豬腦炎疫苗等的免疫保護(hù)率10-20％。
由于活性肽是動(dòng)物體內(nèi)存在的純天然物質(zhì)，分子量小，單獨(dú)或與疫苗同時(shí)使用沒有毒性，不產(chǎn)生抗活性肽的抗體，它是通過提高宿主自身的免疫應(yīng)答能力而提高機(jī)體免疫力，十分安全、可靠?；钚噪幕瘜W(xué)合成制造方便，成本低廉，使用藥用級(jí)活性肽更加安全、可靠。
活性肽單獨(dú)用于動(dòng)物既可注射，也可口服，注射比口服效果更好，口服比注射更方便，增強(qiáng)免疫效果?；钚噪淖鳛橐呙缱魟?，可以有針對(duì)性地提高疫苗的免疫保護(hù)率。由于活性肽是通過提高宿主自身免疫應(yīng)答能力而達(dá)到增強(qiáng)疫苗免疫效果的目的，絕無毒副作用、藥物殘留及接種部位局部損傷等，是一種理想佐劑。
畜禽、經(jīng)濟(jì)動(dòng)物及各類其他人工飼養(yǎng)動(dòng)物都要接種疫苗，動(dòng)物疫苗種類繁多，活性肽可以配合所有各種動(dòng)物疫苗作為免疫增強(qiáng)劑使用，應(yīng)用面寬，其經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益十分可觀。
實(shí)施例12月齡麻鴨，單獨(dú)注射活性肽50納克，3天后用鴨疫巴氏桿菌攻毒，死亡率為50％(15/30)，而未注射活性肽的對(duì)照組死亡率為60％(18/30)，試驗(yàn)組比對(duì)照組的保護(hù)率提高了10％。
實(shí)施例21日齡艾維茵肉雞，單獨(dú)口服活性肽30納克，1周后用傳染性支氣管炎病毒攻擊，發(fā)病率為65％(65/100)，而未口服活性肽的對(duì)照組發(fā)病率為76％(76/100)，試驗(yàn)組比對(duì)照組的降低發(fā)病率11％。
實(shí)施例31月齡肉鴿，單獨(dú)注射活性肽20納克后3天，再用雞新城疫病毒LaSota株疫苗點(diǎn)眼免疫。免疫后2周用新城疫F48E8株強(qiáng)毒攻擊，保護(hù)率為95％(190/200)，而未注射活性肽的對(duì)照組保護(hù)率只有83％(166/200)，試驗(yàn)組比對(duì)照組的保護(hù)率提高了12％。
實(shí)施例41月齡珍珠雞，注射新城疫IV系疫苗后3天，再注射活性肽20納克，2周后用新城疫F48E8株強(qiáng)毒攻擊，保護(hù)率為95％(95/100)，而未注射活性肽的對(duì)照組保護(hù)率只有85％(85/100)，試驗(yàn)組比對(duì)照組的保護(hù)率提高了10％。
實(shí)施例51月齡新西蘭大耳白兔，口服50納克活性肽，3天后注射兔出敗疫苗，免疫后3周用兔多殺性巴氏桿菌強(qiáng)毒攻擊，保護(hù)率為89％(89/100)，而未口服活性肽的對(duì)照組保護(hù)率只有77％(77/100)，試驗(yàn)組比對(duì)照組的保護(hù)率提高了12％。
實(shí)施例61月齡水貂，口服活性肽50納克，2天后注射水貂病毒性腸炎疫苗，免疫后3周用貂細(xì)小病毒強(qiáng)毒攻擊，保護(hù)率為90％(18/20)，未口服活性肽的對(duì)照組保護(hù)率為80％(16/20)，試驗(yàn)組比對(duì)照組提高保護(hù)率10％。
實(shí)施例715日齡伊莎蛋用雛雞，注射含有8微克活性肽/千毫升的雞傳染性法氏囊病疫苗0.2毫升，免疫后4周用強(qiáng)毒攻擊，保護(hù)率為80％，而未加活性肽的疫苗對(duì)照組保護(hù)率只有60％，試驗(yàn)組比對(duì)照組的保護(hù)率提高了20％。
實(shí)施例830日齡家兔，接種含有10微克活性肽/千毫升的兔巴氏桿菌滅活疫苗1毫升，免疫后4周用強(qiáng)毒菌攻擊，保護(hù)率為90％，而未加活性肽的疫苗對(duì)照組保護(hù)率只有75％，試驗(yàn)組比對(duì)照組的保護(hù)率提高了15％。
實(shí)施例91日齡杜洛克商品仔豬，接種含有15微克活性肽/千毫升的豬肺疫菌苗2毫升(一頭份)，免疫后3周用強(qiáng)毒菌株攻擊，保護(hù)率為80％，而未加活性肽的疫苗對(duì)照組保護(hù)率只有70％，試驗(yàn)組比對(duì)照組的保護(hù)率提高了10％。
實(shí)施例101月齡土種犬，接種含有20微克活性肽/千毫升的細(xì)小病毒疫苗1毫升，免疫后3周用強(qiáng)毒攻擊，保護(hù)率為100％，而未加活性肽的疫苗對(duì)照組保護(hù)率只有85％，試驗(yàn)組比對(duì)照組的保護(hù)率提高了15％。
實(shí)施例116月齡犢牛，接種含有40微克活性肽/千毫升的牛出敗疫苗5毫升(一頭份)，免疫后4周用強(qiáng)毒攻擊，保護(hù)率為100％，而未加活性肽的疫苗對(duì)照組保護(hù)率只有80％，試驗(yàn)組比對(duì)照組的保護(hù)率提高了20％。
權(quán)利要求
1.活性肽(Lys-His-Gly-NH2)用于增強(qiáng)動(dòng)物免疫力的方法，其特征在于按動(dòng)物體重每公斤使用活性肽1～600納克，每只動(dòng)物采用注射或口服方法。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物活性肽用于增強(qiáng)動(dòng)物免疫力的方法，其特征在于每只動(dòng)物采用注射方法。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物活性肽用于增強(qiáng)動(dòng)物免疫力的方法，其特征在于每只動(dòng)物采用口服方法。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的化合物活性肽用于增強(qiáng)動(dòng)物免疫力的方法，其特征在于使用的活性肽為藥用級(jí)活性肽。
5.活性肽(Lys-His-Gly-NH2)用作動(dòng)物疫苗佐劑的方法，其特征在于每1000毫升動(dòng)物疫苗與8～40微克活性肽配合使用，按疫苗常規(guī)劑量用于動(dòng)物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物活性肽用作動(dòng)物疫苗佐劑的方法，其特征在于每1000毫升動(dòng)物疫苗與8～40微克活性肽混合使用，按疫苗常規(guī)劑量用于動(dòng)物。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物活性肽用作疫苗佐劑的方法，其特征在于使用的活性肽為藥用級(jí)活性肽。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種增強(qiáng)動(dòng)物免疫力的方法,專用于提高家畜、家禽及各類經(jīng)濟(jì)動(dòng)物的免疫能力,并能提高疫苗的免疫效果。技術(shù)方案為,化合物活性肽(Lys－His－Gly－NH
文檔編號(hào)A61K39/39GK1174082SQ9711196
公開日1998年2月25日 申請(qǐng)日期1997年7月8日 優(yōu)先權(quán)日1997年7月8日
發(fā)明者陳溥言, 王川慶, 蔡寶祥 申請(qǐng)人:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)