專利名稱：：水包油乳劑皮膚護理組合物中不穩(wěn)定類視色素的穩(wěn)定作用的制作方法在水包油型乳劑中包含視黃醇或其短鏈酯的皮膚護理組合物。天然的和人工合成的維生素A的衍生物已經(jīng)廣泛用來治療各種皮膚病和用作皮膚修復(fù)或更新劑。已經(jīng)使用視黃酸治療皮膚病，例如痤瘡、皺紋、牛皮癬、老年斑和褪色。例如見Vahlquist，A.等人J.Invest.Dermatol.，Vol.94，HollandD.B.andCunliffe，W.J.(1990)，第496-498頁；Ellis，C.N.等人“有關(guān)皮膚的視黃醇藥理學(xué)”，Vasel，Karger，第三卷(1989)，第249-252頁；Lowe，N.j.等人“有關(guān)皮膚的視黃醇藥理學(xué)”，第三卷(1989)，第240-248頁；PCT專利申請第WO93/19743。據(jù)信使用視黃醇或視黃醇的短鏈酯優(yōu)先于使用視黃酸。視黃醇為天然存在于人體中的內(nèi)源性物質(zhì)，它對于正常上皮細胞分化是必需的。視黃醇的短鏈酯在體內(nèi)水解產(chǎn)生視黃醇。據(jù)認為視黃醇和視黃基酯比視黃酸更安全。長鏈視黃基酯尤其棕櫚酸視黃酯已經(jīng)廣泛用在皮膚化妝組合物中。該組合物可以是水包油型乳劑，例如由Chsebrough-Pond’s生產(chǎn)的AgeDefyingComplexR。作為本發(fā)明的一部分已發(fā)現(xiàn)視黃醇或視黃醇的短鏈酯比視黃醇的長鏈酯，例如棕櫚酸視黃酯(見實施例7)更有效。據(jù)信棕櫚酸視黃酯在體內(nèi)不水解產(chǎn)生視黃醇和/或不滲透皮膚。遺憾的是視黃醇和短鏈視黃基酯比視黃酸或長鏈視黃基酯更不穩(wěn)定。見Idson，“維生素和皮膚”，Cosmetics&Toiletries，第108卷，1993年12月，第79-94頁，AlluredPublishingCorp.(1993)；Hoffman-LaRocheInc.，DataSheet“維生素A-‘正?；瘎?，RocheVitamins&FineChemicals；Hoffman-LaRocheInc.，ProductData“維生素A醇共混物”。它們尤其在水存在下迅速降解。包含無水視黃醇的組合物在本
技術(shù)領(lǐng)域：
是公知的。例如見Dulak等人美國專利第4888363號和Wilmott等人美國專利第4826828號。但是這類組合物一般不包含水溶性有益于皮膚的成分，尤其所包含的成分含量很高時更是如此。包含油相的視黃醇的水包油乳劑也是公知的。例如見歐洲專利第440398號(Johnson&Johnson)、國際專利申請WO93/00085(Johnson&Johnson)和歐洲專利申請631772(Johnson&Johnson)。無水組合物和油包水型乳劑共有的一系列缺點是因為其連續(xù)相為油相，所以它們與水包油型乳劑相比更滑膩和作為化妝品缺乏吸引力。因而，需要將視黃醇或視黃醇的短鏈酯配制成水包油型乳劑。但是，由于在該體系中(與無水體系或油包水乳劑相比)，類視色素更多的暴露于水相中，所以，使不穩(wěn)定的類視色素在該體系中穩(wěn)定一直是不可能的。例如見上述歐洲專利第440398號(第一頁，34-37行)所述水包油型乳劑中的類視色素“是不穩(wěn)定的…并發(fā)生化學(xué)降解，因而不能達到其效果。”上述國際專利申請第WO930085(第8頁，2-7行)所述“由于未明確理解的原因，只有通過利用特定形式的乳劑即油包水型乳劑，然后，僅使用特定的穩(wěn)定體系，才能得到作為工業(yè)品的令人滿意的穩(wěn)定性?！北景l(fā)明部分基于如下發(fā)現(xiàn)借助于幾個重要參數(shù)的結(jié)合，例如使用特定的油相以便形成包含溶解的不穩(wěn)定的類視色素的油滴和使用固體化合物的可選組合物以便形成特定粒度結(jié)晶組成的所述油滴的阻擋層，使不穩(wěn)定的類視色素即視黃醇或其短鏈酯在水包油型乳劑中穩(wěn)定。在本發(fā)明中用來形成由結(jié)晶阻擋層包圍的油滴的固體化合物和/或油已經(jīng)用在皮膚護理組合物中，例如作為潤膚劑。其中一些組合物也包含類視色素，一般多為視黃酸或棕櫚酸視黃酯。例如見羅馬尼亞專利文摘RO92576，RO93807，RO84823；美國專利第3906108號(Felty等人)；美國專利第5380764號(Herzog)；美國專利第4981845號(Pereira)；美國專利第5037850號(Elliott等人)；美國專利第4333924號(Bowley等人)；美國專利第5492894號(Bascom等人)。但是，這些組合物與本發(fā)明的不同之處至少在于在由一定粒度結(jié)晶的阻擋層包圍的油滴中，它們不包含不穩(wěn)定的類視色素(視黃醇或其短鏈酯)?，F(xiàn)有技術(shù)不提供包含視黃醇或其短鏈酯的穩(wěn)定的水包油型乳劑。本發(fā)明部分包括用于皮膚潤濕的水包油型乳劑，該乳劑包括(a)包含占所述乳化劑重量的0.1％-50％的含流體油的油滴和占所述乳化劑重量的0.001％-10％的選自視黃醇和視黃醇的C2-C3酯的類視色素(其中，該類視色素溶于該油)的油相；(b)占所述乳化劑重量的50％-98％的水相；和(c)占所述乳化劑重量的1％-20％的阻擋層成分，其中該阻擋層成分提供在所述油滴和所述水相之間的結(jié)晶阻擋層。其中，所述阻擋層中結(jié)晶的粒度經(jīng)顯微測定結(jié)晶粒度試驗(MicroscopicCrystalSizingTest)(下文敘述)測試為1μm-50μm；其中，在所述阻擋層中，單個油滴與單個結(jié)晶的粒度比在5∶1-100∶1的范圍內(nèi)；其中，所述流體油和所述阻擋層成分的混合物的熔點在40℃-100℃的范圍內(nèi)。在此，所用術(shù)語“潤濕”指的是預(yù)防和治療干性皮膚、光致?lián)p傷皮膚、表面皺紋、老年斑、老化皮膚，增加角質(zhì)層的柔韌性和一般增加皮膚的發(fā)光、紅潤和質(zhì)量。所述組合物可以用來改善皮膚脫屑和上皮分化。根據(jù)本發(fā)明，通過制備包含溶解的不穩(wěn)定的類視色素和由一定粒度范圍的結(jié)晶阻擋層包圍的油滴，在水包油型乳劑中的類視色素的穩(wěn)定性基本改善。根據(jù)本發(fā)明，通過選擇流體油和具有令人滿意的熔點、結(jié)晶粒度和溶解性要求的所述結(jié)晶阻擋層(在下文中將詳細敘述)保證包含類視色素和由結(jié)晶阻擋層包圍的油滴的存在。除非另外指明，水包油型乳劑的所有用量以重量計算。在本發(fā)明組合物中包括的水包油型乳劑包含在連續(xù)水相中的油滴。所述油滴包含作為第一必需成分，選自視黃醇和視黃醇的C2-C3酯的類視色素。如實施例7中所述，這些化合物比棕櫚酸視黃酯更有效。在此，所用術(shù)語“視黃醇”包下列視黃醇的異構(gòu)體全反式視黃醇、13-順式視黃醇、11-順式視黃醇、9-順式視黃醇、3，4-二脫氫視黃醇。優(yōu)選的異構(gòu)體是全反式視黃醇、13-順式視黃醇、3，4-二脫氫視黃醇、9-順式視黃醇。由于全反式視黃醇的廣泛的商業(yè)可獲得性，所以，最為優(yōu)選。視黃基酯是視黃醇酯。術(shù)語“視黃醇”以上已定義。適合用于本發(fā)明中的視黃基酯為視黃醇的C2和C3酯，也稱為乙酸視黃酯和丙酸視黃酯。特別優(yōu)選乙酸視黃酯，因為它最有效，商業(yè)上最易得和最便宜?；谕瑯釉?，在本發(fā)明中最優(yōu)選使用視黃醇。視黃醇或視黃基酯在本發(fā)明組合物中的用量為占所述乳劑重量的0.001％-10％，優(yōu)選用量為0.01％-0.5％，最優(yōu)選用量為0.05％-0.2％。在本發(fā)明乳劑中，所述油相的第二必需成分為流體油。本發(fā)明乳劑的油相可以由單一化合物或化合物的混合物所形成。根據(jù)本發(fā)明的油相必須是流體和在儲存溫度下(一般為25℃)，必須能使需要量的視黃醇或其C2-3酯溶解。此外，所述油相和所述阻擋層成分的混合物必須滿足熔點試驗的要求(以下將詳細討論)。在此，所用術(shù)語“流體”指的是至少50％的油在25℃下為液體。形成所述油相的合適化合物包含(但不限于此)脂肪酸或脂肪醇的酯和烴類化合物，優(yōu)選脂肪酸或脂肪醇的一元酯，只要它們滿足在此所述熔點和溶解度的要求即可。最優(yōu)選，流體油選自棕櫚酸異十八烷基酯、水楊酸十三烷基酯、辛酸C12-15酯、硬脂酸異丙基酯、十四烷酸異丙基酯和棕櫚酸異丙酯。包含所述類視色素的油滴可以以占所述乳劑重量的0.1％-50％，優(yōu)選1％-30％，最優(yōu)選5％-15％的用量包含在本發(fā)明乳劑中。本發(fā)明乳劑的第三必需成分為阻擋層成分。此處所用術(shù)語“阻擋層成分”指的是至少兩種化合物的混合物第一種化合物為用于形成結(jié)晶的化合物(“成結(jié)晶化合物”)；第二種為用于控制結(jié)晶粒度的化合物(“控制結(jié)晶粒度化合物”)。作為本發(fā)明的一部分發(fā)現(xiàn)，如果只使用成結(jié)晶化合物，那么所形成結(jié)晶就太大(見實施例4)并且所述類視色素在該組合物中不穩(wěn)定。也發(fā)現(xiàn)，第二種化合物，控制結(jié)晶粒度化合物盡管本身不能形成足夠粒度的結(jié)晶，但是可以控制所述結(jié)晶的粒度(見實施例5)。為穩(wěn)定所述類視色素，所述成結(jié)晶和控制結(jié)晶粒度化合物共存是必需的。所述結(jié)晶粒度對于保證本發(fā)明乳劑的穩(wěn)定性是至關(guān)重要的。如果包圍所述油滴的結(jié)晶太大，那么所述結(jié)晶將遷移離開油/水界面并在所述乳劑中作為獨立本體存在。如果所述結(jié)晶太小，那么增加油相在水相中的暴露。在這兩種情況下，均損害了類視色素在油相中的穩(wěn)定性。經(jīng)顯微測定結(jié)晶粒度試驗測試，在本發(fā)明乳劑中的單個結(jié)晶的平均粒度在1μm-50μm的范圍內(nèi)，優(yōu)選在1μm-20μm的范圍內(nèi)，最優(yōu)選5μm-10μm的范圍內(nèi)。組成所述流體相和所述結(jié)晶阻擋層的成分的一致性和用量決定所述結(jié)晶的粒度。顯微測定結(jié)晶粒度試驗使預(yù)期的流體油和形成阻擋層的化合物以作為最終乳劑的相同比例共熔。將一滴該共熔混合物置于顯微鏡的載薄片上，加蓋薄片。在顯微鏡下觀察所述結(jié)晶的大小和形狀。結(jié)晶應(yīng)該為小的和相對平滑的(不像尖銳的針晶)。通過拍照顯微照片和用尺子測量結(jié)晶并考慮放大因素來確定粒度。必須測定幾個結(jié)晶(即至少5個結(jié)晶，優(yōu)選至少10個結(jié)晶)，并取其平均值，以便防止可能測到不規(guī)則結(jié)晶或簇晶。一開始，可以使用光學(xué)顯微鏡在交叉極化(crosspolar)的條件下，定性地觀察所述結(jié)晶形式。如果最初的觀察結(jié)果為所述結(jié)晶的粒度合適，如上所示進行所述顯微測定結(jié)晶粒度試驗。熔點此外，必須以所述用量選擇阻擋層成分和流體油，以使其混合物的熔點為40℃-100℃。其熔點必須在該范圍內(nèi)，以保證所述結(jié)晶阻擋層在儲存中的存在。優(yōu)選所述混合物的熔點在40℃-75℃的范圍內(nèi)，最優(yōu)選在45℃-55℃的范圍內(nèi)。此外，所述流體油和所述阻擋層成分組成的混合物的熔點必須非常準確，即在所述阻擋層成分和所述流體油中的組成必須都彼此非常一致。其熔點的變化范圍必須不大于25℃，優(yōu)選不大于10℃，最優(yōu)選其熔點在使用差式掃描量熱法(DSC)測定時為單一的銳峰。在本發(fā)明的組合物中，所述阻擋層成分(即至少兩類形成阻擋層的化合物的混合物)的用量為占所述乳劑重量的1％-20％，優(yōu)選用量為約5％-約15％，最優(yōu)選用量為約8％-約12％。正如上述，根據(jù)本發(fā)明的阻擋層是通過至少兩類化合物的相互作用形成的成結(jié)晶化合物和控制結(jié)晶粒度化合物。所述控制結(jié)晶粒度化合物的加入量為占所述結(jié)晶形成化合物重量的1％-75％，優(yōu)選5％-40％，最優(yōu)選10％-20％。用在本發(fā)明乳劑中的合適的結(jié)晶形成化合物包含(但不限于此)脂肪酸、脂肪酸與其皂鹽的混合物、脂肪醇和脂肪酸或脂肪醇的乙氧基化的衍生物、甾醇(例如羊毛脂或膽甾醇)和它們的混合物。優(yōu)選所述結(jié)晶形成化合物為選自C12-C22(優(yōu)選C16-C22)的脂肪酸或脂肪醇或它們的乙氧基化衍生物及它們的混合物。最優(yōu)選，所述結(jié)晶形成化合物選自棕櫚酸、硬脂酸、十八烷醇、十六烷醇、二十二烷酸、二十二醇、膽甾醇和脫水山梨醇硬脂酸酯及它們的混合物。所述控制結(jié)晶粒度化合物選自羥基化的脂肪酸或脂肪醇(C12-C22)和它們的乙氧基化衍生物。優(yōu)選使用羥基化的脂肪酸或脂肪醇或混合物。其優(yōu)選的鏈長度為C16-C22。最優(yōu)選所述控制結(jié)晶粒度化合物為選自甘油羥基硬脂酸一酯、羥基硬脂酸、異硬脂醇、異硬脂酸和它們的混合物。所述控制結(jié)晶粒度化合物可以含在或不含在形成結(jié)晶阻擋層的實際結(jié)晶中。該控制結(jié)晶粒度化合物調(diào)節(jié)所述結(jié)晶的粒度，因而對于形成合適的結(jié)晶阻擋層是必需的，然而，其所處位置可以在所述結(jié)晶中或可以在所述油滴中或兩種位置都有。在本發(fā)明乳劑中，單個油滴與單個結(jié)晶的相對大小在5∶1-100∶1的范圍內(nèi)，優(yōu)選在5∶1-50∶1的范圍內(nèi)，最優(yōu)選在5∶1-20∶1的范圍內(nèi)。通過上述顯微結(jié)晶粒度試驗測定結(jié)晶粒度。也可通過使用顯微測定結(jié)晶粒度試驗或通過使用粒度分析儀(例如MastersizerR)測定油滴大小。根據(jù)本發(fā)明，由油滴和包圍該油滴的結(jié)晶所形成的粒子的整體粒度也是非常重要的。所述類視色素在該粒子中的半衰期與該粒子的粒度成反比。粒子越大，所述類視色素擴散得越慢。而且，如果所述粒子的粒度過大，也影響所述乳劑的物理穩(wěn)定性。因此，所述粒子的粒度必須如此，以便既能獲得所述類視色素的化學(xué)穩(wěn)定性，又保留所述乳劑的物理穩(wěn)定性。作為本發(fā)明的一部分已發(fā)現(xiàn)，平均粒子粒度(容重)在5μm-500μm的范圍內(nèi)，優(yōu)選在10μm-50μm的范圍內(nèi)。可以使用粒度分析儀(例如MastersizerR)測定其粒度，如依照Mastersizer手冊所述測定d(5，3)或d(4，3)平均粒徑。本發(fā)明乳劑的另一必需成分在含水相中。本發(fā)明乳劑的水相包含至少20％的水。然而，本發(fā)明乳劑的具體優(yōu)點在于它們可以摻入大量的水。優(yōu)選的乳劑包含至少40％的水，優(yōu)選40％-95％的水，最優(yōu)選60％-70％的水。含水相可選包含其它的水溶性溶劑或成分。特別優(yōu)選摻入含水相的水溶性成分為以下將詳細敘述的羥基酸?？偟暮鄡?yōu)選至少占所述乳劑重量的65％，最優(yōu)選至少占70％。本發(fā)明組合物具有的半衰期在50℃下，至少為15天，優(yōu)選20天-45天，最優(yōu)選35-45天?！鞍胨テ凇倍x為在一定的溫度下，視黃醇或其短鏈酯降低到其原有濃度一半時所用的時間。優(yōu)選的根據(jù)本發(fā)明的組合物基本不含有低鏈的簡單醇例如甲醇、乙醇或丙醇，以避免該醇類對皮膚的干燥和刺激作用。所述組合物的pH在2.5-10的范圍內(nèi)。優(yōu)選的本發(fā)明組合物具有的pH為約6-約9，最優(yōu)選約6.5-約7.5。應(yīng)該理解，本發(fā)明乳劑可以與其它乳劑共混，包括復(fù)乳。此外，本發(fā)明乳劑可以包含其它的油滴，該油滴可以不含本發(fā)明的流體油或類視色素。只要組合物包含水包油乳劑，其油相包含約0.1％-約50％在此所述的油滴，那么它在本發(fā)明的范圍內(nèi)。可選對皮膚有益的物質(zhì)和化妝品添加劑在本發(fā)明的化妝品乳劑中，可以包含各種有益于皮膚的成分。盡管對這類成分沒有加以限制，一般實例包含抗皺化合物和防曬劑和鞣劑。特別優(yōu)選的成分為羥基酸。本發(fā)明乳劑的優(yōu)點之一為它們可以摻入所述高含量的含水相中。因而，一般來說，高含量的水溶性活性成分尤其羥基酸可以與類視色素活性成分共存。所述羥基酸可以選自α-羥基酸、β-羥基酸(例如水楊酸)、其它的羥基酸(例如二羥基羧酸、羥基二羧酸、羥基三羧酸)和其混合物或它們的立體異構(gòu)體(DL、D或L)的混合物。優(yōu)選的羥基酸為選自具有通式(1)的α-羥基酸，其中，M為氫或包含1-27個碳原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈烴鏈。更優(yōu)選的羥基酸選自羥基乙酸、乳酸、2-羥基辛酸、羥基月桂酸和它們的混合物。當有立體異構(gòu)體存在時，最優(yōu)選L-異構(gòu)體。在根據(jù)本發(fā)明的乳劑中所述羥基酸成分的用量優(yōu)選占所述乳劑重量的0.01-20％，更優(yōu)選0.05-12％，最優(yōu)選0.5-8％。防曬劑包含那些常用來阻止紫外線的物質(zhì)。例證性化合物為PABA的衍生物、肉桂酸酯和水楊酸酯。例如，可以使用甲氧基肉桂酸辛酯和2-羥基-4-甲氧基二苯酮(也稱氧苯酮)。甲氧基肉桂酸辛酯和2-羥基-4-甲氧基苯二酮分別以商品名ParsolMCX和Benzophenone-3可買到。使用在所述乳劑中防曬劑的確切用量可根據(jù)需要防護太陽紫外輻射的程度來變化。在本發(fā)明化妝品組合物中可選的添加成分為增稠劑。增稠劑通常的用量為占所述乳劑重量的0.1-20％(重量)，優(yōu)選0.5-10％(重量)。典型的增稠劑為由B.F.GoodrichCompany提供的以商品名Carbopol可得到的交聯(lián)聚丙烯酸酯材料。可以使用樹膠例如合成生物聚合膠、角叉菜膠、明膠、刺梧桐樹膠、果膠和刺槐豆膠。在某些情況下，所述增稠功能可以由同時作為硅氧烷或潤滑劑的物質(zhì)來完成。例如，超出10厘沲的硅橡膠純膠料和酯例如甘油硬脂酸酯具有雙重功能?？梢詫⒎勰﹦饺氡景l(fā)明化妝品組合物中。這些粉末劑包含白堊粉、滑石粉、漂白土、高嶺土、淀粉、綠土粘土、化學(xué)改性的硅酸鋁鎂、有機改性的蒙脫石粘土、水合硅酸鋁、鍛制二氧化硅、鋁淀粉琥珀酸辛酯和它們的混合物。也可以將其它添加劑微量成分摻入所述化妝品組合物中。這些成分可以包含著色劑、遮光劑和芳香劑。這些其它添加劑微量成分的用量為占所述乳劑重量的0.001％-20％(重量)。此外，重要的是保證其它成分不干擾所述結(jié)晶的位置，例如如果使用高HLB的乳化劑，它將破壞所述結(jié)晶。制備所述組合物制備本發(fā)明組合物的優(yōu)選方法包含下列步驟(1)制備水相并加熱到75-80℃，同時混合；(2)制備油相，它包含流體油和阻擋層成分化合物，但不包含類視色素，并加熱到75-80℃，同時混合；(3)緩慢將所述油相加入所述水相中(兩相均在75-80℃)；(4)于75-80℃，混合步驟(3)所得混合物至少15分鐘；(5)將所述混合物冷卻到50-55℃后，加入類視色素，同時混合；(6)裝入儲存容器中。如果該最終組合物包含羥基酸，優(yōu)選在步驟(4)后，于50-60℃下將其單獨加入。根據(jù)本發(fā)明的組合物主要用作人皮膚表面涂敷的產(chǎn)品，特別是作為潤濕和潤滑皮膚的制劑，及用來防止或降低皮膚表面干燥、皺紋或老化皮膚。使用時，將少量的在合適的容器或涂敷器中的所述組合物，例如1-100ml涂敷在皮膚裸露的表面上，然后，如需要，使用手或手指或合適的裝置使其分布和/或擦進皮膚中。產(chǎn)品的形式和包裝可以將本發(fā)明乳劑配制成洗劑、流體乳膏、乳膏和凝膠?？蓪⑺鼋M合物以適應(yīng)其粘度方便消費者使用的合適容器來包裝。例如，洗劑或流膏乳劑可以裝于瓶子或滾球涂敷器或膠囊(capsule)或霧化氣溶膠裝置(propellant-drivenaerosoldevice)或配有適合手指操作的泵的容器中。當所述組合物為乳膏時，可將其簡單地存放于不變形的瓶子或擠壓容器中例如管子或帶蓋的瓶子中。因此，本發(fā)明也提供在此定義的包含化妝品可接受的組合物的密閉容器。下列特定實施例進一步解釋本發(fā)明。穩(wěn)定性的評價制備待試驗的組合物并裝在瓶子中或高密度聚乙烯(HDPE)管內(nèi)。將所述瓶子或管子封口并置于在30℃、41℃或50℃的烘箱中。在50℃下進行的穩(wěn)定性研究為加速穩(wěn)定性研究。半衰期以1∶6∶9∶18(50℃∶30℃∶25℃∶20℃)比例決定于溫度。例如，在50℃下40天的半衰期相當于30℃下8個月，25℃下(標準室溫)1年和20℃下2年。此外，通過在下述過量氧氣存在的不利條件下儲存樣品，使穩(wěn)定性研究加速。就商品的最佳穩(wěn)定性而言，我們建議置于惰性氣體氬(優(yōu)選)或氮氣體系中。缺少過量的空氣將至少通過兩方面因素增加視黃醇的穩(wěn)定性至少一倍或兩倍。就充氣條件下所做的穩(wěn)定性研究而言，將所述管子或瓶子裝入1/3的組合物，同時上面2/3的空間充入氣體。每隔一定時間，分析該組合物，直到未被氧化的視黃醇低于最初視黃醇的10％時為止。在下列實施例中的所有穩(wěn)定性研究都是在充氣下進行的。我們的研究結(jié)果已表明作為本發(fā)明評價的組合物中的視黃醇的氧化反應(yīng)遵循按照視黃醇濃度的一級動力學(xué)反應(yīng)。因此，為測定其反應(yīng)半衰期，制作視黃醇濃度的自然對數(shù)(lnC)對儲存時間(t)的曲線，得到斜率為k的直線，其中，k為以時間單位為倒數(shù)的視黃醇氧化速度。然后通過ln2/k的比值確定該研究體系中視黃醇的半衰期(t1/2)。用HPLC分析視黃醇使用高壓液相層析分析所有樣品的視黃醇含量(硬件Waters600MS系統(tǒng)控制器，Waters717自動進樣器，Waters996光電二極管矩陣檢測器，軟件Millenium2010)。用于視黃醇分析的柱參數(shù)如下柱子NucleosilC185μm(Sigma-Aldrich)250mm×4.6mm種類#Z226181流動相47％(v/v)乙腈45％(v/v)甲醇8％(v/v)二氯甲烷均為HPLC級溶劑進樣體積10μl流速1ml/min運行時間10分鐘檢測器UV/可見光，于325mm，帶有光電二極管矩陣保留時間視黃醇為約5分鐘。標準溶液的制備每次分析樣品的視黃醇含量后，產(chǎn)生標準曲線。視黃醇標準溶液按如下方法制備逐次在并丙醇中稀釋所述視黃醇共混物，產(chǎn)生最終濃度為0、10、20、30、40和50ppm(w/w)的標準溶液。標準溶液一周制備一次，并在-21℃下儲存。樣品的制備大多數(shù)樣品通過在異丙醇中簡單稀釋而得，因而，最終視黃醇的濃度在所述標準曲線的范圍內(nèi)，優(yōu)選約30ppm。乳劑樣品例如包含樹膠的粘稠的乳膏更難以制備。為了保證從所述乳劑中能完全提取視黃醇，將所述樣品按下列方式處理將約0.5g樣品精確稱量，開始與6-7克水混合并旋轉(zhuǎn)形成淤漿。然后，將約10克異丙醇加入所述淤漿中，接著第二次旋轉(zhuǎn)。然后，用異丙醇使所述樣品達到最終重量。接著使用帶有0.2μm的一次性濾膜的一次性注射器過濾所述樣品。所有樣品使用分析天平以w/w為基準的三倍量或四倍量制備。使用HPLC分析乙酸視黃酯使用與視黃醇相同的方法和流動相。乙酸視黃酯的洗脫大約比視黃醇滯后30秒鐘。實施例1制備組合物1、2和3(均在本發(fā)明的范圍內(nèi))。下列過程用于制備所述組合物1.將水相(A)加熱到75-80℃，同時在壓力混合器(overheadmixer)中混合2.將油相(B)力熱到75-80℃，同時混合；3.在兩相均為75-80℃下，緩慢將油相(B)加入到水相(A)中；4.使用來自加熱到75-80℃的(C)中的水洗滌油相的剩余部分；5.于75-80℃，混合至少15分鐘；6.開始冷卻；7.于室溫下制備相(D)并于50-60℃加入到(ABC)中；8.于50-55℃，將視黃醇共混物(E)加入批料中，同時混合；9.混合，同時冷卻到40℃；10.于40℃，加入(F)，同時混合；11.停止混合并裝入儲存容器中。觀察當在光學(xué)顯微鏡下觀察時，組合物1、2、和3基本上具有類似的特性當在交叉極化下觀察時，通過在每個油滴周圍存在的明亮的雙折射光圈測定的由結(jié)晶阻擋層所包圍的球形油滴直徑約為50微米。通過所述本體水相基本上不含單個結(jié)晶的事實也證實這一點。使用顯微測定結(jié)晶粒度試驗，發(fā)現(xiàn)結(jié)晶為規(guī)則型，直徑約為8微米。比較實施例2制備比較實施例A、B、C、D、E、F和G(均在本發(fā)明范圍以外)</tables>視黃醇共混物完全溶于或容易分散于A-G中。組合物A-G不包含阻擋層成分。根據(jù)上述過程(使用充氣試驗)測定組合物1-3(實施例1)和比較組合物A-G的儲存穩(wěn)定性。所得結(jié)果歸總于表1、1A和1B中。表1儲存穩(wěn)定性表1A儲存穩(wěn)定性</tables>表1B儲存穩(wěn)定性觀察組合物A和B(表1A)的儲存穩(wěn)定性測定結(jié)果表明視黃醇在油環(huán)境(組合物A)中比在水環(huán)境(組合物B)中穩(wěn)定得多A的t1/2于50℃為34天(于30℃為297天)，作為比較，B于50℃為2天(于30℃為24天)。出乎意外的是，組合物1-3顯示視黃醇的穩(wěn)定性類似于視黃醇在礦物油中(組合物A)的穩(wěn)定性于50℃，1、2和3的t1/2分別為20、39和20天，于30℃，分別為120、260和149天。鑒于這些體系包含80％(w/w)連續(xù)水相，組合物1-3的視黃醇穩(wěn)定性是顯著的。因為視黃醇保存在有本發(fā)明的界面結(jié)晶阻擋層存在的所述乳劑中的分散油的微環(huán)境中，所以它是穩(wěn)定的。組合物C-G表明，視黃醇在極性環(huán)境中例如吐溫20、丁二醇、甘油或癸醇(t1/2于90℃，分別為36小時、14小時、19小時和25小時)中比其在非極性環(huán)境例如礦物油(t1/2于90℃為77小時)中更不穩(wěn)定。因為所述環(huán)境極性越大，所述類視色素越不穩(wěn)定，我們可以理解為什么在含水乳劑體系中，視黃醇或短鏈視黃醇酯比長鏈酯例如棕櫚酸視黃酯更不穩(wěn)定。視黃醇或短鏈視黃醇酯比長鏈酯例如棕櫚酸視黃酯極性更大，由于極性更大，所以，它們比長鏈酯更趨向于分配在極性溶劑例如水中。它們離開油分配進入極性溶劑越多，越不穩(wěn)定，這解釋了在乳劑體系中，為什么棕櫚酸視黃酯一般比視黃醇或乙酸視黃酯更穩(wěn)定(參見B.Idson，C&T，108卷，86頁“棕櫚酸維生素A酯是所能得到的最穩(wěn)定的維生素A酯”，Roche“視黃醇比維生素A脂肪酸酯更敏感”)。比較實施例3制備組合物G1和H(二者均在本發(fā)明范圍之外)。這兩種組合物均包含視黃醇膠囊，即在凡士林中的視黃醇分散在硬化的聚丙烯酸/角叉菜凝膠中形成膠囊，使其進一步再分散(冷)在最終組合物(G1或H)中。所形成的組合物在本發(fā)明范圍之外。視黃醇膠囊組成A雪白凡士林17.1％A視黃醇共混物3.1％BAculyn33溶液(4％中和到pH7)45.3％BGelcarin6p-911(kappacarraghenan)34.5％膠囊的制備于40-45℃，混合視黃醇和雪白凡士林形成相A。將預(yù)先中和到pH7的Aculyn33溶液加熱到60-70℃，并加入所述carraghenan。將B加入A中并使用低剪切勻化過程(例如Denver浮選設(shè)備)，以650rpm，乳化4分鐘。通過將所述乳劑逐滴倒入由10％KCl和0.5％tritonX-100制成的硬化浴中，制備膠囊。將該膠囊在濾紙上干燥，稱重和在冷的情況下，人工慢慢攪拌，加入到本發(fā)明的濃縮乳劑中。將表2中所列的其它成分在冷的情況下，溫和攪拌下加入。所測定組合物G1和H中的視黃醇含量在開始儲存時為0.1％。*除了不包含相D和E外，與實施例1中組合物1的組成相同。盡管組合物G1和H包含如實施例1中組合物1的阻擋層成分，但是，這些成分沒有作為包圍視黃醇的阻擋層以便制備組合物G1和H，因為視黃醇膠囊是后加入組合物1中的。組合物G1和H均包含溶解在流體油相中的視黃醇，但是該油相未被形成根據(jù)本發(fā)明的結(jié)晶阻擋層的阻擋層成分的混合物所包圍。熒光顯微照片顯示視黃醇位于所述膠囊的凡士林相中。光學(xué)顯微鏡未顯示存在不均勻的界面阻擋層，但是顯示在所述幾士林中存在無規(guī)律分散的結(jié)晶。根據(jù)上述過程(使用充氣試驗)測定組合物G1和H的儲存穩(wěn)定性。所得結(jié)果歸總于表3中。將表3中的儲存穩(wěn)定性結(jié)果與表1中組合物1和2的儲存穩(wěn)定性相比較。與組合物G1和H相比，組合物1和2包含包圍視黃醇液滴的阻擋層成分。在沒有包圍視黃醇液滴的本發(fā)明阻擋層成分存在的情況下，于50℃，組合物1的半衰期由20天降低到組合物G1的6天；組合物2的半衰期由39天降低到組合物H的12天。這證明包圍視黃醇液滴的阻擋層的存在對穩(wěn)定本發(fā)明組合物中類視色素起著關(guān)鍵的作用。該實施例也表明使用本發(fā)明方法在制備本發(fā)明組合物中的臨界性。比較實施例4制備組合物K(在本發(fā)明范圍以外)。所述組合物包含在所述阻擋層成分中的控制結(jié)晶粒度化合物，但不包含結(jié)晶形成化合物。除不包含結(jié)晶形成化合物即組合物K中缺少硬脂酸和硬脂醇外，組合物K與組合物1(pH＝3.6)相同。根據(jù)上述過程(使用充氣試驗)測定組合物K的儲存穩(wěn)定性。所得結(jié)果歸總于表4中。</tables>將表4中的儲存穩(wěn)定性結(jié)果與組合物1和2的儲存穩(wěn)定性(表1)相比較。在沒有本發(fā)明的結(jié)晶形成化合物存在的情況下，于50℃，其半衰期由20天(組合物1)降低到4天(組合物K)。這證明，所述結(jié)晶形成化合物在穩(wěn)定本發(fā)明組合物中的類視色素方面起著關(guān)鍵的作用。組合物K的顯微鏡觀察表明存在非常小的結(jié)晶，其直徑小于1微米(超出本權(quán)利要求書所述范圍)。比較實施例5制備組合物L(fēng)(在本發(fā)明范圍之外)。該組合物包含在所述阻擋層成分中的結(jié)晶形成化合物，但不包含控制結(jié)晶粒度化合物。首先，通過于73℃將B加到A中，同時于45-55℃以500rpm混合15分鐘制備視黃醇濃縮物。然后，于35-40℃，將所述濃縮物加入組合物1中(除了不加相D和E外)，產(chǎn)生的視黃醇的濃度約為0.1％。加入α羥基酸到pH＝3.6。視黃醇濃縮物A去離子水59.25％AKeltrol10000.5％ATEA(99％)0.25％B二十二烷酸12％BISP20％B視黃醇共混物8％組合物L(fēng)改進組合物174.96％去離子水5％羥基乙酸(70％)11.4％氫氧化銨(29％)2.5％羥基辛酸0.1％視黃醇濃縮物3.3％去離子水2.51％紅沒藥醇0.2％香料0.03％測定組合物L(fēng)的儲存穩(wěn)定性。所得的結(jié)果歸總于表5中在不加入所述控制結(jié)晶粒度化合物的情況下，于50℃，其半衰期由20天(組合物1)降低到8天(組合物L(fēng))。這表明，所述控制結(jié)晶粒度化合物在穩(wěn)定本發(fā)明化合物中的類視色素方面具有關(guān)鍵的作用。沒加控制結(jié)晶粒度化合物其本身可通過在顯微鏡下觀察時，大的不規(guī)則結(jié)晶(直徑約為60微米)的存在而證明。比較實施例6制備組合物M和N(均在本發(fā)明范圍之外)。所述組合物包含與視黃醇不相容的流體油(高分子量的硅油)。首先，制備分散在所述不相容的油(由Dow得到的高分子量硅油)中的濃縮視黃醇。然后，于50-55℃將所述濃縮物加入組合物1中(只是不含相D和E)產(chǎn)生的視黃醇濃度約為0.05％。視黃醇濃縮物分散液10000cst的Dow200流體79.4％cab-o-silTS7200(二氧化硅)9％視黃醇共混物(Roche)11.6％組合物M改進組合物174.96％去離子水16.8％視黃醇濃縮物分散液8％紅沒藥醇0.2％香料0.03％pH7.4％組合物N改進組合物174.96％去離子水2.81％羥基乙酸(70％)11.4％氫氧化銨(29％)2.5％羥基辛酸0.1％視黃醇濃縮物分散液8％紅沒藥醇0.2％香料0.03％pH3.7測定組合物M和N的儲存穩(wěn)定性。所得結(jié)果歸納于表6中表6儲存穩(wěn)定性</tables>在沒有本發(fā)明的類視色素相容油存在的情況下，于50℃下，所述半衰期由20天(組合物1)降低到4天(組合物N)及由39天(組合物2)降低到13天(組合物M)。通過使用二氧化硅以將所述類視色素密封在所述硅氧烷的液滴中，以便阻止類視色素擴散進入改進組合物1的油相中，其中，如在光學(xué)顯微鏡下觀察所證實的，所述類視色素為不溶性的(類視色素以獨立的液滴分散在高分子量的硅油中，但是，不溶解)。這證明所述流體油在穩(wěn)定本發(fā)明的組合物中的類視色素方面起著重要的作用。實施例7目標本研究的目的為評價下列制劑的效能1.8％L-乳酸對8％L-乳酸/0.174％乙酸視黃酯(二者均在乳劑的基本成分中)2.8％L-乳酸/8％L-乳酸/0.25％棕櫚酸視黃酯(二者均在乳劑的基本成分中)3.8％L-乳酸0.075％視黃醇對8％L-乳酸/0.09％乙酸視黃酯(二者均在乳劑的基本成分中)治療組1包括16名女性受試者(45歲或45歲以上)，而組2和組3各包括17名受試者。這些制劑不在本發(fā)明的范圍內(nèi)所述研究僅僅為證實視黃醇對乙酸視黃酯對棕櫚酸視黃酯的相對效能，不評價其穩(wěn)定性。在每一個治療組中，使試驗產(chǎn)物左/右隨機化。受試者在家中自己使用所述試驗產(chǎn)物，每日二次(早晚)，進行12周。所述試驗為雙盲試驗。50名其前臂上有適度皺紋(表面起皺紋)的女性受試者參與試驗。受試者可以繼續(xù)其日常清潔習(xí)慣，但是，她們被要求在開始就診前一周(第0周)必須停止在她們的前臂和手上涂敷任何增加水分的產(chǎn)品。自開始，在第2、4、8和12周，進行目測評價(評價內(nèi)容包括評價皺紋狀態(tài)和整個外觀)。每當可能時，在固定光照下在同一部位作出評價。在每次就診時，都要稱定所有產(chǎn)物，以便確定使用的順應(yīng)性。評價臨床評價下列參數(shù)由有經(jīng)驗的評價者做出。外前臂皺狀/皺紋皮膚-松弛/表面下陷/起皺紋/皺紋皮膚(改進的表現(xiàn)為皮膚變緊、起皺/皺紋減少)總的外觀(光致?lián)p傷)-關(guān)于所述部位肌膚結(jié)構(gòu)和總的表面特征狀況的總括評價(改進的表現(xiàn)為總的皮膚狀況較好)。所用的皺狀/皺紋皮膚的0-9級評價尺度輕度1-3小的環(huán)狀細紋。初看不明顯；仔細看皮膚有皺折。低于外前手臂/手背的25％。中度4-6明顯的皺紋，帶有“浮腫”感的環(huán)狀皺紋。覆蓋面積大于25％，但是，沒有包括整個外前手臂/手背。重度7-9覆蓋外前臂下部/手背的面積多至100％。非常明顯，很容易發(fā)現(xiàn)。帶有長的“浮腫”感(深度)縱向皺紋。中度等級不能歸于對整個等級增加的響應(yīng)。無論評價者還是受試者都不知道是何種試驗制劑。統(tǒng)計學(xué)分析使用基于SAS的宏計算機程序％WSIGNRNK，它執(zhí)行WilcoxonSigned-Rank，Pratt程序。分別根據(jù)每個配對產(chǎn)物的比較、試驗部位(外前臂，手背)、評價時級別和屬性測定，進行統(tǒng)計分析。對每個試驗組進行配對比較統(tǒng)計分析。當p＞95％時，判斷其差異在統(tǒng)計學(xué)上顯著。在治療組間比較差異的臨床評價歸總于下列表7A-7C中。表7A8％L-乳酸(8LL)對0.174％乙酸視黃酯(RA)有利于RA的正性皺紋等級差異9級皺紋等級周8LLRA差異04.284.28024.274.230.0444.434.400.0384.173.930.24*123.903.770.13*統(tǒng)計學(xué)上顯著表7B8％L-乳酸(8LL)對8％L-乳酸+0.25％棕櫚酸視黃酯(8LLRP)有利于8LLRP的正性皺紋等級差異9級皺紋等級周8LL8LLRP差異04.414.41024.324.35-0.0344.504.410.0984.264.230.03124.034.06-0.03表7C8％L-乳酸+0.075％視黃醇(8LLR)對8％L-乳酸+0.09％乙酸視黃酯(8LLRA)有利于8LLRA的皺紋等級差異9級皺紋等級周8LLR8LLRA差異04.744.74024.694.72-0.0344.564.68-0.1284.294.240.05123.874.23-0.36**統(tǒng)計學(xué)上顯著結(jié)果包含8％L-乳酸和0.25％棕櫚酸視黃酯的組合物對于皺狀的手臂皮膚沒有產(chǎn)生比在同一基礎(chǔ)制劑中的8％乳酸更顯著的改進。相反，包含8％L-乳酸和0.17％乙酸視黃酯的相同基礎(chǔ)制劑對皺狀手臂皮膚產(chǎn)生比同一基礎(chǔ)制劑中的8％L-乳酸臨床上所測定到的(由臨床醫(yī)師評價和強迫選擇，后者的結(jié)果未列出)更顯著的改進(在第8周P＞95％)。此外，包含8％L-乳酸和0.075％視黃醇的相同基礎(chǔ)制劑對皺狀皮膚產(chǎn)生比在同一基礎(chǔ)制劑中的8％L-乳酸和0.09％乙酸視黃酯臨床上所測定到的(由臨床醫(yī)師評價和強迫選擇)更顯著的改進(在第12周，P＞95％)。作為結(jié)論，棕櫚酸視黃酯不增加羥基酸制劑的抗老化效能，而乙酸視黃酯則可以。當使用視黃醇代替乙酸視黃酯時所述效能進一步改進，視黃醇為用在本發(fā)明中最優(yōu)選的類視色素。實施例8制備下列在本發(fā)明范圍內(nèi)的附加的組合物。它們是通過本發(fā)明方法制備。它們適合于化妝使用。所述組合物尤其適用于使用在起皺紋、粗糙、干燥、易脫屑、老化和/或UV損傷的皮膚上，以便改善外觀和感覺以及使用在健康的皮膚上以便防止或延緩皮膚的退化。J6365(C)組合物8A8B8C成分化學(xué)名/CTFA名wt/wt％wt/wt％wt/wt％去離子水相同47.1047.2851.41EDTA二鈉相同0.050.050.05VeegumUltra硅酸鋁鎂0.600.600.60羥苯甲酸甲酯相同0.150.150.15AloeVeraPowderAloeVeraGel0.100.100.10三乙胺(99％)相同1.201.201.20AntifoamSimethicone0.010.010.01甘油相同2.002.002.00丁二醇相同3.003.003.00KeltrolCG1000合成生物聚合膠0.200.200.20Natrosol250HHR羥乙基纖維素0.300.300.50WaterDlFlush相同1.001.001.00PationicSSL硬脂酰基乳酸鈉0.50NaturchemGMHS羥基硬脂酸甘油酯1.501.501.50Lanette18DEO十八烷醇1.501.501.50ParsolMCX甲氧基肉桂酸辛酯、7.507.50對甲氧基肉桂酸乙基己酯UvirolM-40Benzophenone-3Oxybenzone2.502.50FinsolvTN苯甲酸C12-15烷基酯3.003.00ProtachemISP棕櫚酸并硬脂醇酯6.00HetesterFAO/FineC12-15烷基辛酸酯3.00SiliconeFluid50二甲聚硅氧烷1.00膽甾醇相同0.500.500.50Arlacel60脫水山梨醇硬脂酸酯1.001.001.00BHT丁基化羥甲苯0.050.050.05乙酸維生素E酯乙酸生育酚酯0.100.100.10Myrj59PEG-100硬脂酸酯2.002.002.00Pristerene4911硬脂酸3.003.003.00羥苯甲酸丙酯相同0.100.100.10SiliconeFluid10二甲聚硅氧烷2.002.00LinoleamideMEA相同1.001.00WaterDlFlush相同1.501.501.47去離子水相同8.008.008.29羥基辛酸相同0.10羥基乙酸70％相同5.705.705.70Ammonia，Aqua28％氫氧化銨1.301.301.20WaterDlFlush相同1.501.502.23棕櫚酸維生素A酯棕櫚酸視黃酯0.100.100.10紅沒藥醇相同0.200.200.20香料相同0.030.030.03J6365(C)視黃醇50％維生素A醇0.200.020.20乙酸視黃酯乙酸維生素A酯0.010.01總量100.00100.00100.00權(quán)利要求1.用作皮膚潤濕組合物的穩(wěn)定的水包油型乳劑，該乳劑包含(a)包含占所述乳化劑重量的0.1％-50％的含流體油的油滴和占所述乳化劑重量的0.01％-10％的選自視黃醇、乙酸視黃酯和丙酸視黃酯的類視色素(其中，該類視色素溶于該油)的油相；(b)50％-98％的水相；和(c)占所述乳化劑重量的1％-20％的阻擋層成分，它包含結(jié)晶形成化合物和控制結(jié)晶粒度化合物，其中該阻擋層成分提供在所述油滴和所述水相之間的結(jié)晶阻擋層。其中，所述阻擋層中單個結(jié)晶的平均粒度經(jīng)顯微測定結(jié)晶粒度試驗測試在1μm-50μm范圍內(nèi)；及其中，在所述阻擋層中，單個油滴與單個結(jié)晶的粒度比在5∶1-100∶1的范圍內(nèi)；及其中，所述流體油和所述阻擋層成分的混合物的熔點在40℃-100℃的范圍內(nèi)。2.權(quán)利要求1的乳劑，其中，所述形成結(jié)晶化合物選自C12-C22脂肪酸、C12-C22脂肪酸與其皂鹽的混合物、C12-C22脂肪醇、C12-C22脂肪酸的乙氧基化衍生物和C12-C22脂肪醇和它們的混合物。3.權(quán)利要求1或2的乳劑，其中，所述控制結(jié)晶粒度化合物選自羥基化的脂肪酸、羥基化的脂肪醇和其乙氧基化的衍生物，和它們的混合物。4.按照權(quán)利要求1-3中任一項的乳劑，其中，所述流體油選自棕櫚酸異硬脂醇酯、水楊酸三癸基酯、辛酸C12-15酯、硬脂酸異丙酯、十四烷酸異丙酯和棕櫚酸異丙酯。5.按照權(quán)利要求1-4中任一項的乳劑，其中，所述類視色素選自視黃醇和乙酸視黃酯。6.按照權(quán)利要求1-5中任一項的乳劑，其中，所述乳劑包含至少40％的水。7.按照權(quán)利要求1-6中任一項的乳劑，其中，所述組合物的水相包含α羥基酸。8.按照權(quán)利要求1-7中任一項的乳劑，其中，所述組合物的半衰期在50℃下，至少為15天。9.制備根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項的穩(wěn)定的水包油型乳劑的方法，該方法包括(1)制備水相并在75-80℃溫度范圍內(nèi)加熱，同時混合；(2)制備包含流體油和阻擋層成分化合物的混合物，并加熱該混合物到75-80℃的溫度范圍內(nèi)，同時混合；(3)緩慢將步驟(2)的混合物加入所述水相中；(4)在75-80℃的溫度范圍內(nèi)混合在步驟(3)中所得的混合物至少15分鐘；(5)將步驟(4)中所得的混合物冷卻到50-55℃溫度范圍后，加入類視色素，同時混合；(6)裝入儲存容器中。10.權(quán)利要求9的方法，還包括在步驟4后，在50-60℃的溫度范圍內(nèi)，加入羥基酸。全文摘要包含在油相中不穩(wěn)定的類視色素(視黃醇或其C文檔編號A61K8/00GK1185942SQ9711923公開日1998年7月1日申請日期1997年9月19日優(yōu)先權(quán)日1996年9月20日發(fā)明者S·S·哈比夫,A·利普斯,P·查達爾,M·E·雷雷克申請人:尤尼利弗公司