專利名稱：：泰克薩菲瑞在制備用于診斷和治療眼部疾病的藥物中的應(yīng)用的制作方法視網(wǎng)膜是排列在眼睛背面的內(nèi)壁上的一薄層光敏組織。光進(jìn)入眼睛時被角膜和晶狀體聚焦在視網(wǎng)膜上。然后視網(wǎng)膜將光圖像轉(zhuǎn)變成電脈沖，這些電脈沖通過視神經(jīng)被傳送到腦。斑是造成中心視覺和彩色視覺的視網(wǎng)膜上的極小區(qū)域。斑使我們能閱讀、駕駛和進(jìn)行詳細(xì)的工作。斑的周圍是造成邊視覺和暗視覺的外周視網(wǎng)膜。斑惡化是斑點、下方組織或鄰近組織的的損傷或破裂。斑變性是造成視覺靈敏度的降低和對閱讀的損害以及輕微近視的主導(dǎo)原因。與老化有關(guān)的斑變性(ARMD)是在中年人中產(chǎn)生正常視力喪失的最普遍原因。斑變性的最普遍的形式被稱為“干”或退化的斑惡化，它是由于斑區(qū)域內(nèi)視網(wǎng)膜下方的血管和其它結(jié)構(gòu)或營養(yǎng)組織變薄而造成的。而更為嚴(yán)重的形式被稱為“濕”或滲出性斑惡化。在這種形式下，在脈絡(luò)膜層(在視網(wǎng)膜下方給視網(wǎng)膜提營養(yǎng)的一膜層)上的血管破裂位于這兩個組織之間的稀薄的保護(hù)性膜層。這些血管可以在視網(wǎng)膜正下方以快速地不可控制的方式異常生長；造成滲出物，出血，或最終導(dǎo)致在斑點上形成疤痕組織，從而造成嚴(yán)重的中樞性視覺喪失。該過程被稱為脈絡(luò)膜血管再生(CNV)。CNV是一種預(yù)后不佳的病癥；采用熱激光光致凝固法的有效治療取決于對損傷的檢測和結(jié)果的對其邊緣的描繪。血管造影術(shù)被用于對損傷的囊泡的泄漏進(jìn)行檢測，但是CNV經(jīng)常比常規(guī)的血管造影術(shù)所指示的要大，因為囊泡較大，具有不定層、突出進(jìn)入到視網(wǎng)膜下方并且與著色的上皮細(xì)胞相連。血管再生導(dǎo)致了其它眼睛疾病中的視覺喪失，這些疾病包括血管再生性青光眼，視覺組織胞漿菌病綜合癥，糖尿病，翼狀胬肉以及感染性和炎性疾病。在組織胞漿菌病綜合癥中，在眼睛背面的內(nèi)底的脈絡(luò)膜層上發(fā)生一系列的變化，造成脈絡(luò)膜局部發(fā)炎和隨后的結(jié)疤及所累及的視網(wǎng)膜功能的喪失，并且產(chǎn)生盲點(盲點Scotoma)。有些情況下，引起脈絡(luò)膜層產(chǎn)生比正常血管更為脆弱的血管。它們趨于出血，并伴隨結(jié)疤、上方視網(wǎng)膜功能的喪失。糖尿病性視網(wǎng)膜病與視網(wǎng)膜而不是脈絡(luò)膜血管有關(guān)，它造成出血，血管不規(guī)則，帶白色滲出物。視網(wǎng)膜血管再生可以最為嚴(yán)重的方式發(fā)生。目前對于眼睛異常的診斷通常包括在血管造影中采用熒光素或靛氰綠之類的染料。熒光素是一種從很快地從囊泡中泄漏出來的低分子量的分子，但是，由于它的吸收度低、發(fā)射波長小以及由于自身熒光的原因，只能對表面形態(tài)進(jìn)行成像；視網(wǎng)膜下的出血阻礙了對下方脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜脈管系統(tǒng)的檢測。相反，ICG在805nm處有一個吸收帶而在835nm處有熒光，它與熒光素相比能更好地對更深層的囊泡進(jìn)行成像，原因在于光譜的不同以及它能更持久地被保留在病變脈管系統(tǒng)中，而且也可能與白蛋白結(jié)合。在該過程中，通過手臂的靜脈將染料注射到血流中。將特殊的濾光器放置在光路上并位于底片前方，在熒光染料經(jīng)過視網(wǎng)膜上的血管時使該染料為可見。在染料經(jīng)過眼睛背面的血管時拍攝視網(wǎng)膜和斑點的血管解剖圖。血管閉寒或染料發(fā)生泄漏則一般提示異常的脈管系統(tǒng)。但是，熒光素的問題在于泄漏。光學(xué)相干性X線斷層攝影術(shù)是另一種采用無觸點成像的技術(shù)，它在交叉組合的X線斷層攝影裝置上提供視網(wǎng)膜的深處高分辨率的圖像。目前對于血管再生的治療依賴于采用熱激光光致凝固法所進(jìn)行的血管切除術(shù)。但是，這種治療是非選擇性的，需要熱破壞組織，并伴隨有對視網(wǎng)膜的完整厚度的破壞，同時也損傷了介質(zhì)和大的脈絡(luò)膜血管。進(jìn)一步在患者上遺留萎縮性疤痕和視覺盲點。而且，經(jīng)常會復(fù)發(fā)，患者病癥的預(yù)后也不良。開發(fā)中的治療策略，已尋求更多選擇性的血管閉合以保護(hù)上方的感覺神經(jīng)視網(wǎng)膜。它是一種采用產(chǎn)生細(xì)胞毒素物質(zhì)的光敏性染料的治療技術(shù)，如由良性前體在氧存在下受到照射時產(chǎn)生純態(tài)氧。還可以涉及其它的活性種類如過氧化物，過氧化氫或羥基自由基。在使用劑量中，單獨的光或藥物對病變目標(biāo)都不具備任何活性。PDT的療效通過三個附加因素進(jìn)行評判i)在PDT中所用的光敏性染料優(yōu)選具有定位于治療部位而對周圍組織則相反的能力。ii)被激活的氧具有高度的活性和短暫的壽命，這意味著它的范圍非常小(～0.1/μm)并且不可能從產(chǎn)生它的細(xì)胞中脫逸；因此細(xì)胞毒素被限制在被光敏化藥物的精確區(qū)域。iii)光輸送的展開如激光，光發(fā)射二極管和纖維光學(xué)系統(tǒng)能將強烈而非損傷性的光精確地輸送到身體的許多部位。為回顧光動力學(xué)治療，參見美國專利5,252,720(本文引用它作為參考)。已嘗試采用常規(guī)的卟啉衍生物如血卟啉衍生物(二血卟啉醚)和PHOTOFRIN卟菲爾鈉和乙基初羥基茜草素錫對以血管再生為特征的眼睛的癥狀進(jìn)行光動力學(xué)治療。在其范圍內(nèi)已遇到了來自眼睛色素的干擾的問題，例如Williams等人的美國專利5,576,013所描述的。此外，在光動力學(xué)治療中已采用了酞花青和苯并卟啉衍生物。PCT公開WO95/24930和Miller等，(眼科學(xué)檔案(ArchivesofOphthalmology)，六月，1995)提到對以不期望的血管再生為特征的眼睛癥狀的治療包括給予該血管再生患者一種綠卟啉并用波長為550-695nm的光照射該血管再生患者。據(jù)說美國專利5,166,197和5,484,778提出了將酞花青衍生物用于治療斑惡化。Asrani和Aeimer(英國眼科雜志，BritishJournalofOphthalmology，1995，79766-770)提出采用用熱敏性脂質(zhì)體膠囊包束的酞花青進(jìn)行眼睛血管的光堵塞。Levy(Semin.Oncol.1994，21/6，suppl，15(4-10))提到用卟菲爾鈉(PHOTOFRIN，要求630nm的光并能造成可長達(dá)6個星期光敏性)和苯并卟啉衍生物(BPDverteporfin，造成持續(xù)數(shù)天的皮膚的光敏性)進(jìn)行光動力學(xué)治療。Lin等人(IOVS341303Abstract2953，1993)提出采用苯并卟啉衍生物BPD-MA進(jìn)行脈絡(luò)膜血管的光動力學(xué)堵塞。Baumal等人(InvestOphthalmol，Vis，Sci，37/3；S122(abstract)1996)提到采用乙基初羥基茜草素錫(SnET2)和655nm的照射對實驗性脈絡(luò)膜血管再生進(jìn)行PDT治療。BPD和乙基初羥基茜草素錫(SnET2)不溶于水溶液并要求疏水性賦形劑以供服用?，F(xiàn)有技術(shù)的光敏劑進(jìn)一步的局限性包括出血和被著色的組織的不恰當(dāng)光穿透，全身皮膚的光敏性，缺乏選擇性，異常的組織損傷和病變血管的再次開始。在照射前疏水性囊泡增溶劑需要清除時間。不能實現(xiàn)造影劑團(tuán)注射和瞬間照射。泰克薩菲瑞為芳香族五齒狀大環(huán)“擴(kuò)展的卟啉”，并用作MRI對照試劑，放射致敏劑、化學(xué)感應(yīng)劑以及用于光動力學(xué)治療。泰克薩菲瑞被認(rèn)為是一種含有18π-和22π-電子離域作用軌跡的芳香族苯輪烯(benzannu-lene)。泰克薩菲瑞分子在組織透明的700-900nm范圍內(nèi)發(fā)生強烈吸收，而且它們表現(xiàn)出固有的被選擇性攝取和在一些組織中的生物定位，尤其是在如肝、動脈粥樣化或腫瘤組織中。已用磁共振成像和熒光檢測檢測到泰克薩菲瑞表現(xiàn)出具有重大意義的腫瘤選擇性。泰克薩菲瑞和水溶性泰克薩菲瑞，其制備方法和各種用途在以下文獻(xiàn)中有過描述美國專利號4,935,498、5,162,509、5,252,720、5,256,399、5,272,142、5,292,414、5,369,101、5,432,171、5,439,570、5,451,576、5,457,183、5,475,104、5,504,205、5,525,325、5,559,207、5,565,552、5,567,687、5,569,759、5,580,543、5,583,220、5,587,371、5,587,463、5,591,422、5,594,136、5,595,726、5,599,923、5,599,928、5,601,802、5,607,924、5,622,946，PCT公開WO90/10633、94/29316、95/10307、95/21845和96/09315、96/38461、96/40253、97/26915和97/35617；PCT申請PCT/US97/09501、被準(zhǔn)許的美國專利公開08/458,347、08/484,551和08/591,31；和未決的美國專利申請08/763,451、08/903,099和08/914,272；本文引用每個專利，公開和申請作為參考。本發(fā)明提供了用于眼睛的診斷和治療的泰克薩菲瑞。泰克薩菲瑞的應(yīng)用部分地繞開了現(xiàn)有技術(shù)的方法中所看到的問題，原因在于它的具有光的雙波長光吸收、在水溶液中可溶、清除速度快、采用造影劑團(tuán)注射和為觀察和治療提供了單一試劑。本發(fā)明提供了泰克薩菲瑞在制備用于眼睛的診斷和治療的藥物組合物中的應(yīng)用，具體地說，治療包括對以異常脈管系統(tǒng)為特征的眼睛的癥狀的光動力學(xué)治療。因此，本發(fā)明一方面指的是用泰克薩菲瑞對眼睛施行血管造影術(shù)的應(yīng)用，也就是觀察受試者的眼睛的脈管系統(tǒng)。該應(yīng)用包括的步驟為給予受試者可檢測的泰克薩菲瑞，并對該眼睛的脈管結(jié)構(gòu)的癥狀進(jìn)行觀察。如果該可檢測的泰克薩菲瑞具有熒光，可以通過熒光進(jìn)行觀察；如果該可檢測的泰克薩菲瑞與順磁性陽離子發(fā)生復(fù)合，則可以通過磁共振成像進(jìn)行觀察。進(jìn)一步地，可以采用X-射線、拉曼散射、磁力測定(生物學(xué)之發(fā)光)或光粘著X射線斷層攝影術(shù)。在本發(fā)明的進(jìn)一步方面，提供了泰克薩菲瑞在治療以異常脈管系統(tǒng)為特征的眼部疾病中的應(yīng)用。該應(yīng)用的方法包括的步驟為給予受試者光敏性泰克薩菲瑞，并對該脈管系統(tǒng)進(jìn)行光照射。該應(yīng)用的方法可以進(jìn)一步包括通過本文所述的對泰克薩菲瑞進(jìn)行成像的方法來觀察受試者的眼睛疾病的步驟。本發(fā)明再另一方面是泰克薩菲瑞在對受試者的斑惡化進(jìn)行光動力學(xué)治療中的應(yīng)用，該應(yīng)用的方法包括以下步驟給予受試者光敏性泰克薩菲瑞，并對該斑點施以光照射。本發(fā)明還有一個方面是泰克薩菲瑞在采用單一試劑對以異常脈管系統(tǒng)為特征的受試者眼睛疾病進(jìn)行觀察和治療中的應(yīng)用。該應(yīng)用的方法包括以下步驟給予受試者光敏性具有熒光的泰克薩菲瑞，通過泰克薩菲瑞的熒光觀察受試者的眼睛的癥狀，并對該脈管系統(tǒng)施以光照射。為進(jìn)行血管造影，可用400-500nm的光(Soret帶)或700-800nm的光(Q帶)來激活泰克薩菲瑞，從而提供適用于人的多種用途(參見圖1)。為進(jìn)行光線療法，可使泰克薩菲瑞在眼睛組織相對透明的400-500nm或更長波長處接受光照射，特別是其中的光可以穿過血液和血管組織的波長處，也就是700-800nm，尤其是在約732nm。泰克薩菲瑞由于定位于滲透性異常或損傷的區(qū)域而在眼睛血管的血管造影術(shù)中作為一種極為有效的目測試劑。如在USSN08/914,272所述，泰克薩菲瑞在PDT中極為有效的原因在于與泰克薩菲瑞一起使用的光波容易通過血和其它內(nèi)原性染料而被傳送，從而對被著色或與染料有關(guān)的組織發(fā)生光動力學(xué)調(diào)節(jié)的破壞起作用，本文引該文獻(xiàn)作為參考。PDT要求比成像更高水平的光。與BPD、mTHPC或要求溶解囊泡如脂環(huán)境下的SnET2相比，如果要以造影劑團(tuán)的形式進(jìn)行快速灌輸，泰克薩菲瑞的水溶性則是本文所提供的視覺應(yīng)用方法的一個優(yōu)點；而它進(jìn)一步排除了親脂性載體、采用脂質(zhì)體或使用泵的需要。泰克薩菲瑞主要激發(fā)(470nm)和發(fā)射峰(750nm)被第二激發(fā)峰分隔得很遠(yuǎn)，如果可能的話該第二激發(fā)峰存在紅外區(qū)域(732nm)?？梢詫⑻┛怂_菲瑞以造影劑團(tuán)注射的形式給予，以使血液中存在大量充足的藥物并在服藥和治療之間進(jìn)行快速轉(zhuǎn)變。泰克薩菲瑞從體內(nèi)被快速地清除；在血管造影術(shù)中使用泰克薩菲瑞時沒有觀察到對眼睛產(chǎn)生了毒性。快速清除的進(jìn)一步優(yōu)點是較大的血管清除得較快，從而能對血管再生復(fù)合體進(jìn)行成像和治療。可以以單一試劑形式采用泰克薩菲瑞作為血管造影劑和PDT劑進(jìn)行診斷成像和治療，從而能在治療前精確地確定染料的定位并在治療之后快速地確認(rèn)光動力學(xué)閉合。根據(jù)長期有效的專利法慣例，本申請包括權(quán)利要求所用的術(shù)語”a”和”an”意思是“一或一以上”?？s寫ARMD-與老齡化有關(guān)的斑惡化(變性)BPD-苯并卟啉IN-鼻下的IT-顳下的CNV(M)-脈絡(luò)膜血管再生(膜)FWHN-全寬度半最大峰值HDL-高密度脂蛋白ICG-靛氰綠LDL-低密度脂蛋白Lu(III)T2BET-镥泰克薩菲瑞，T2BETmTHPC-四(m-羥苯基)氯NZW-新西蘭白OD-右眼OS-左眼PDT-光動力學(xué)治療SN-鼻上的SnET2-乙基初羥基茜草素錫ST-顳上的TGF-b-轉(zhuǎn)化生長因子-bTxp-泰克薩菲瑞VEGF-血管內(nèi)皮生長因子圖1LuT2BET的吸收光譜(實線)和熒光圖(虛線)。圖2NZW兔的LuT2BET熒光性血管造影照片，其中在進(jìn)行血管造影術(shù)的數(shù)周前鼻上方象限內(nèi)已發(fā)生損傷(激光光致凝固)。在注射4μmol的LuT2BET/kg之后快速地得到該圖像，揭示了視網(wǎng)膜血管是從在900鐘時為暗區(qū)域的視神經(jīng)盤出發(fā)，到達(dá)眼睛中部偏左。水平穿過的血管代表眼動脈的分支而垂直穿過的血管代表脈絡(luò)膜中的動脈和靜脈。急性傷口(閉塞)也位于從視神經(jīng)盤出發(fā)的主要動脈中的一支(在圖3的激光相血管造影照片中能更好地被看見)。在400和500鐘時位于視網(wǎng)膜的可見部分邊緣的圓形皮下動脈區(qū)域就是先前熱切除發(fā)生的地方。圖3圖2中詳述的動物的后期LuT2BET熒光性血管造影照片，它揭示了位于左手上方角落的閉合血管。稍偏中心的脈絡(luò)膜損傷很容易被看到。再生血管則被定義在位于無血管疤痕的周圍。圖4揭示了染料從急性傷口泄漏出來的早期熒光性血管造影照片。圖5在圖4中動物的右下手象限的后期熒光性血管造影照片。圖6右下手象限的后期ICG熒光性血管造影照片。與圖3所示相同傷口的泰克薩菲瑞熒光性血管造影照片。該ICG圖像為不定形且沒有詳細(xì)描述在圖3中清楚指示的再生血管。圖7具有在髓射線內(nèi)誘發(fā)的急性傷口的兔眼的熒光性血管造影照片。該熒光素從激光誘導(dǎo)的傷口發(fā)生泄漏。圖8在受到采用LuT2BET的PDT之后的圖7中的兔的熒光性血管造影照片。該圖像描述了由在PDT靶向病變被著色或保留的熒光素所證實的血管的閉合。本發(fā)明提供了泰克薩菲瑞在制備用于眼睛的診斷和治療，尤其是對以異常脈管系統(tǒng)為特征的眼病施行診斷性血管造影術(shù)和進(jìn)行光動力學(xué)治療的藥物組合物中的應(yīng)用。本文所用的“異常脈管系統(tǒng)”的意思是不良的脈管系統(tǒng)，血管再生、不規(guī)則、閉塞、流淚或發(fā)炎的眼睛血管或眼睛組織、炎性眼膜，與眼睛區(qū)域尤其是血管的液體的通道有關(guān)的異常病癥，并且它還包括的病癥有，例如斑惡化、青光眼、糖尿病性視網(wǎng)膜病中的盤或視網(wǎng)膜血管再生、使角膜或結(jié)膜發(fā)生異常表面血管再生的血管翳、使角膜上的球狀結(jié)膜增厚的翼狀胬肉眼、具有視網(wǎng)膜或脈絡(luò)膜的血管再生的病癥、眼莢膜組織胞漿菌病綜合癥、近視、眼睛的炎性疾病、漿液性中心性視網(wǎng)膜病、視網(wǎng)膜下血管再生膜、或由瘤引起的血管再生如黑素瘤或胚細(xì)胞瘤。對異常脈管系統(tǒng)的治療涉及到被著色和未被著色的眼睛腫瘤，包括也可將黑素瘤考慮在本發(fā)明的應(yīng)用中。眼睛腫瘤包括眼色素層黑素瘤，眼瞼表皮、結(jié)膜、眼眶的黑素瘤，或視網(wǎng)膜的黑素瘤。本文所述的“觀察脈管系統(tǒng)”的意思是進(jìn)行成像過程并從血管造影照片中或X射線中或磁共振圖像中收集信息，用來對眼睛的癥狀進(jìn)行解釋。例如，眼睛的癥狀可能是正常的，也可能有血管滲出或閉塞。這里所用的“眼睛(eye)”或“眼睛的(ocular)”包括眼睛，其下方和鄰近組織，以及在眼睛的附近和周圍對眼睛功能有影響的相關(guān)的組織。用于眼睛的診斷和光動學(xué)治療的泰克薩菲瑞或泰克薩菲瑞金屬復(fù)合體可具有結(jié)構(gòu)I或具有結(jié)構(gòu)IIM為二價或三價金屬陽離子，其中二價金屬陽離子選自由Ca(II)、Mn(II)、Co(II)、Ni(II)、Zn(II)、Cd(II)、Hg(II)、Fe(II)、Sm(II)和UO2(II)組成的組；其中的三價金屬陽離子選自Mn(III)、Co(III)、Ni(III)、Fe(III)、Ho(III)、Ce(III)、Y(III)、In(III)、Pr(III)、Nd(III)、Sm(III)、Eu(III)、Gd(III)、Tb(III)、Dy(III)、Er(III)、Tm(III)、Yb(III)、Lu(III)、La(III)和U(III)組成的組。R1-R4，R7和R8分別為氫原子、鹵化物、羥基、烷基、烯基、炔基、芳基、鹵代烷基、硝基、甲?；Ⅴ；?、羥烷基、烷氧基、羥基烷氧基、羥烯基、羥炔基、糖類、羧基、羧基烷基、羧酰胺基、羧酰胺基烷基、氨基、氨基烷基、部位導(dǎo)向分子、催化基或者與部位導(dǎo)向分子或催化基發(fā)生偶合的偶合物。R6和R9分別選自R1-R4，R7和R8的基團(tuán)，并且附帶條件為鹵化物中排除了碘化物，而鹵代烷基中排除了碘代烷基。R5和R10-R12分別為氫、烷基、烯基、炔基、芳基、羥烷基、烷氧基、羥基烷氧基、羥烯基、羥炔基、羧基烷基、羧酰胺基、羧酰胺基烷基、氨基、氨基烷基、或者與糖類、部位導(dǎo)向分子、或催化基偶合的偶合物；n為小于或等于5的整數(shù)。R13為烷基、烯基、氧烷基或具有至多約3個碳原子并且在第一結(jié)合碳原子附近具有旋轉(zhuǎn)靈活性的的羥烷基；旋轉(zhuǎn)靈活性使該基團(tuán)的其余部分可以位于泰克薩菲瑞的平面以外。因此，例如優(yōu)選的烯基為CH2-CH＝CH2。吡咯氮取代基最優(yōu)選為甲基。熒光性泰克薩菲瑞用于血管造影術(shù)。本文所用的術(shù)語“熒光性”意思是進(jìn)行與泰克薩菲瑞吸收分布圖相關(guān)的光照射時，由被照射的泰克薩菲瑞在較長的波長處發(fā)射光。所有的泰克薩菲瑞都具有熒光，只是程度上有所差異，而尤其優(yōu)選與如Y(III)、Lu(III)、Gd(III)、Dy(III)、Eu(III)或Mn(III)等配合的泰克薩菲瑞作為熒光性泰克薩菲瑞。例如，特別是镥泰克薩菲瑞在750nm(FWHM＝60nm)的近紅外中心處具有一強烈而寬的熒光發(fā)射圖線，因此它表現(xiàn)出與常規(guī)的熒光造影術(shù)相比的極大優(yōu)點。進(jìn)一步地，镥泰克薩菲瑞表現(xiàn)出在人身上血漿清除速度快(0.25小時的T1/2α)，因此它與其它的光敏劑相比最大限度地降低了對皮膚的光毒性。除了熒光檢測以外，可通過X-輻射、拉曼(Raman)散射或磁力測定對泰克薩菲瑞進(jìn)行成像。進(jìn)一步地，與順磁性金屬陽離子配合的泰克薩菲瑞可用于磁共振成像。優(yōu)選的順磁性金屬陽離包括Mn(II)、Mn(III)、Fe(III)或除了La(III)、Lu(III)和Pm(III)之外的三價鑭系元素金屬。更為優(yōu)選的順磁性金屬是Mn(II)、Mn(III)、Dy(III)或Gd(III)；最優(yōu)選Gd(III)。各種不同類型的磁共振成像中的任何一種都可在本發(fā)明中實施，例如它包括核磁共振(NMR)，NMR光譜和電子自旋共振(ESR)。優(yōu)選的成像技術(shù)為NMR。將光敏性泰克薩菲瑞用于光動力學(xué)治療。光敏性泰克薩菲瑞可以是游離堿泰克薩菲瑞或被抗磁性金屬金屬化。這里所用的術(shù)語“光敏性”意思是在用與泰克薩菲瑞的吸收曲線有關(guān)的光照射時，泰克薩菲瑞影響細(xì)胞毒性的氧產(chǎn)物的產(chǎn)生。細(xì)胞毒性氧產(chǎn)物可以是純態(tài)氧、羥基基團(tuán)、過氧化物、過氧化氫基團(tuán)等等。為產(chǎn)生純態(tài)氧，優(yōu)選的金屬為為抗磁性金屬，而抗磁性金屬優(yōu)選為Lu(III)、La(III)、In(III)、Zn(II)或Cd(II)。最優(yōu)選的抗磁性金屬為Lu(III)。在上述的結(jié)構(gòu)I中，n代表小于或等于5的整數(shù)。在涉及到帶有二價或三價金屬陽離子的基本大環(huán)時，n為1或2；但是，在本說明書的啟發(fā)下，熟悉本技術(shù)的人可以認(rèn)識到n的值可以根據(jù)取代基R1-R12上的電荷和存在于共價鍵的部位導(dǎo)向分子上的電荷而變化。本技術(shù)技術(shù)人員可以認(rèn)為在本發(fā)明中所述的復(fù)合體具有一個或一個以上給金屬離子提供電中和和/或同等飽和的額外配位基。這樣的配位基包括其中的氯化物、硝酸鹽、乙酸鹽和氫氧化物。用作本發(fā)明烷基取代基的鏈烷的代表性實施例包括甲烷，乙烷，丙烷、丁烷、戊烷、己烷、庚烷、辛烷、壬烷和癸烷的直鏈、支鏈或環(huán)異構(gòu)體，優(yōu)選甲烷、乙烷和丙烷。本發(fā)明的烷基有至多約30或至多約50個碳原子。被取代的烷基的代表性的實施例包括被二個或二個以上上述的官能團(tuán)取代的烷基。用作為烯基取代基的烯烴的代表性實施例包括乙烯，丙烯、丁烯、戊烯、己烯、庚烯、辛烯、壬烯和癸烯的直鏈、支鏈或環(huán)異構(gòu)體，優(yōu)選乙烯和丙烯。本發(fā)明的烯基有至多約30或50個碳原子，和至多約五個雙鍵，更優(yōu)選至多約三個雙鍵。用作為炔基取代基的炔烴的代表性實施例包括乙炔，丙炔、丁炔、戊炔、己炔、庚炔、辛炔、壬炔和癸炔的直鏈、支鏈或環(huán)異構(gòu)體，優(yōu)選乙炔和丙炔。本發(fā)明的炔基有至多約30，或至多50個碳原子，并具有至多約五個或至多約三個叁鍵。芳基可以是其分子具有苯、萘、菲、蒽等環(huán)結(jié)構(gòu)特征的的化合物，也就是說，苯的6-碳環(huán)或其它芳香族衍生物的稠合的6-碳環(huán)。例如，芳基可以是苯基或萘基、未被取代的芳基或被硝基、羧基、磺酸、羥基、氧烷基或鹵化物取代基所取代的芳基。這種情況下，可在形成大環(huán)的稠合步驟之后將苯基或萘基上的取代基于合成步驟中加入。在鹵化物取代基中，在本發(fā)明的實施中可以預(yù)料到的有氯化物、溴化物、氟化物和碘化物，而R6和R9不采用碘化物。R6和R9可以是氯化物、溴化物或氟化物取代基。本發(fā)明所用的鹵代烷基的代表性的實施例包括甲烷、乙烷、丙烷、丁烷、戊烷、己烷、庚烷、辛烷、壬烷和癸烷的鹵代物，而鹵代物優(yōu)選甲烷、乙烷和丙烷的氯代物或溴代物。“羥烷基”意思是烷基的醇。優(yōu)選的羥烷基具有1到20，更優(yōu)選為1到10個羥基?！傲u烷基”將包括二元醇和多元醇，烷基二醇，優(yōu)選C1-10烷基二醇，更優(yōu)選C1-3烷基二醇；聚乙二醇、聚丙二醇和聚丁二醇以及同時含有亞乙基、亞丙基和亞丁基的聚亞烷基二醇。氧烷基的代表性的實施例包括這里所述的具有醚鍵的烷基。“氧烷基”意指包括具有一個或多個官能團(tuán)的聚醚。取代基內(nèi)重復(fù)的氧烷基的數(shù)目可達(dá)到200，優(yōu)選為1到20，更優(yōu)選為1-10，最優(yōu)選為1-5。優(yōu)選的氧烷基為O(CH2CH2O)xCH3，其中x＝1-100，優(yōu)選為1-10，更優(yōu)選為1-5。氧羥烷基意指具有醚或酯鍵、羥基、被取代的羥基、羧基、被取代的羧基等的烷基。硫烷基的代表性的實施例包括乙烷的硫醇，丙烷、丁烷、戊烷、己烷、庚烷、辛烷、壬烷和癸烷的直鏈、支鏈或環(huán)異構(gòu)體的硫醇，優(yōu)選乙烷(乙硫醇，C2H5SH)和丙烷(丙硫醇，C3H7SH)的硫醇。硫酸取代的烷基包括被一個或多個硫酸基取代上述的烷基，其代表性的實施例為硫酸二乙基酯((C2H5)SO4)。磷酸鹽(酯)的代表性的實施例包括磷酸鹽(酯)或聚磷酸鹽(酯)基團(tuán)。磷酸取代的烷基的代表性的實施例包括被一個或多個磷酸或聚磷酸基團(tuán)所取代的上述的烷基。膦酸取代的烷基的代表性的實施例包括被一個以上膦酸基團(tuán)所取代的上述的烷基。羧基的代表性實施例包括上述烷基的羧酸和芳基羧酸如苯甲酸。羧酰胺的代表性的實施例包括伯羧酰胺(CONH2)、仲羧酰胺(CONHR)和叔羧酰胺(CONR’R”)，其中每一個R’和R”為本文所述的官能團(tuán)。所用胺的代表性的實施例包括上述烷基的伯、仲或叔胺?！棒弱０吠榛币庵妇哂兄倩蚴艴０锋I等的烷基?！棒然榛币庵妇哂辛u基的烷基、羧基或氨基取代的醚、酯鍵、從醚上脫除的叔酰胺鍵等等。術(shù)語“糖類”包括氧化、還原或取代的糖類；己糖如D-葡萄糖、D-甘露糖或D-半乳糖；戊糖如D-核糖或D-阿拉伯糖；酮糖如D-核酮糖或D-果糖；二糖如蔗糖、乳糖或麥芽糖；衍生物如乙縮醛、胺、磷酸化糖；低聚糖和開鏈形式的各種糖等。胺衍生的糖為半乳糖胺、氨基葡萄糖、唾液酸和D-葡糖胺衍生物如1-氨基-脫氧山梨醇。在本發(fā)明的優(yōu)選實施方案中，將泰克薩菲瑞進(jìn)一步與部位導(dǎo)向分子偶合以形成在體內(nèi)轉(zhuǎn)運發(fā)生靶向作用的共軛物?！安课粚?dǎo)向分子”意思是對靶部位具有特異性?！皩Π胁课坏奶禺愋浴币馑纪ㄟ^泰克薩菲瑞-共軛物與靶部位的接觸，例如，在離子強度、溫度、PH等的生理狀態(tài)下，發(fā)生特異性的結(jié)合。這種相互作用可由于這種共軛物的某種殘基與靶部位的特異性殘基發(fā)生特異性靜電、疏水、熵或其它的相互作用而發(fā)生。部位導(dǎo)向分子具有在治療部位定位的結(jié)合特異性。在本發(fā)明中所考慮的代表性的部位導(dǎo)向分子包括但不限于包括低密度脂蛋的脂蛋白；膽固醇；包括與眼睛受體具有親合力的肽的聚酰胺；諸如抗體或其自身免疫學(xué)活性片段等的蛋白；與眼睛的DNA或RNA互補的低聚核苷酸；組胺；諸如嗎啡等的荷爾蒙模擬物；催化基和進(jìn)一步的諸如假藍(lán)寶石和假紅寶石的大環(huán)化合物。眼睛的特異性部位導(dǎo)向分子可以包括導(dǎo)向眼睛內(nèi)皮生長因子(VEGF)或整合素類的分子，它們二者都在眼睛的血管生成中具有重要的作用。進(jìn)一步的部位導(dǎo)向分子可包括如b-內(nèi)啡肽或TGF-b。術(shù)語“催化基”意思是通過其作為常規(guī)酸、質(zhì)子酸、常規(guī)堿、質(zhì)子堿、親核基團(tuán)的作用而有助于催化作用的化學(xué)功能基團(tuán)或任何其它使對反應(yīng)的活化作用的阻礙降低或使底物的基態(tài)能量升高的方法?？紤]到的代表性催化基包括但不限于咪唑，胍，被取代的糖類如D-葡糖胺、D-甘露糖胺、D-半乳糖胺、D-葡糖胺等等，氨基酸如L-組氨酸和L-精氨酸，氨基酸的衍生物如組胺；氨基酸的聚合物如聚-L-賴氨酸、(LysAla)n、(LysLeuAla)m，其中n為1-30或優(yōu)選為1-10或更優(yōu)選為2-7等等，它們的衍生物和泰克薩菲瑞金屬復(fù)合體。術(shù)語“與泰克薩菲瑞復(fù)合體-部位導(dǎo)向分子共軛物相連”意思是該催化基通過不同長度的鍵或偶聯(lián)而直接附在泰克薩菲瑞金屬復(fù)合體或泰克薩菲瑞上，或通過或不通過不同長度的鍵或偶聯(lián)而附在泰克薩菲瑞復(fù)合體-部位導(dǎo)向分子共軛物的配位基部位。優(yōu)選的與泰克薩菲瑞偶合的部位導(dǎo)向分子是低密度脂蛋白(LDL)。人的LDL為通過高度親合力的受體攝入而被細(xì)胞進(jìn)行新陳代謝的生理性血清蛋白。已表明血管再生使LDL受體數(shù)增多；通過增加泰克薩菲瑞進(jìn)入血液脂蛋白相中的分配，預(yù)期使LDL更為有效地將泰克薩菲瑞轉(zhuǎn)運到靶組織。由于該共軛物較大，預(yù)期共軛物的泄漏僅發(fā)生在血管再生結(jié)構(gòu)中，因而泰克薩菲瑞-LDL共軛物具有對血管再生的選擇性?？梢愿鶕?jù)Hauel等(J.ClinInvest.，341345，1995)的方法對LDL進(jìn)行分離和純化?？蓪⑴悸?lián)描述成鍵合，也就是通過被設(shè)計在位于泰克薩菲瑞大環(huán)一定距離處的反應(yīng)活性基團(tuán)與另一分子發(fā)生共價連接的反應(yīng)而形成的共價產(chǎn)物。典型的鍵或偶聯(lián)為酰胺、胺、二硫化物、硫醚、醚、酯或磷酸鹽共價鍵。在極其優(yōu)選的實施方式中，通過碳-碳、碳-氮、碳-硫或碳-氧鍵將共軛物和所附帶的基團(tuán)共價連接到泰克薩菲瑞上，更優(yōu)選為通過碳-氧或碳-氮鍵進(jìn)行連接。優(yōu)選的官能化作用為如果R6和R9不為氫，則R5和R10為氫或甲基；如果R5和R10不為氫，則R6和R9為氫、羥基或除了碘化物之外的鹵化物。其它優(yōu)選的官能化為如果R6和R9為氫，則R5、R10、R11和R12為低級烷基或低級羥烷基。低級烷基優(yōu)選甲基或乙基，更優(yōu)選甲基。低級羥烷基優(yōu)選具有1到6個碳原子和1到4個個羥基，更優(yōu)選為3-羥基丙基。在本發(fā)明優(yōu)選的實施方式中，R1為(CH2)2CH2OH；R2和R3為CH2CH3；R4為CH3；R7和R8為O(CH2CH2O)2CH2CH2OCH3；R5、R6和R9-R12為H；M為Lu。本文將該泰克薩菲瑞命名為LuT2BET；在本發(fā)明的另一個優(yōu)選的泰克薩菲瑞化合物中，R1-R12為如表A和B所述的泰克薩菲瑞A1-A108，M如上述定義。但是，上述的泰克薩菲瑞是在本發(fā)明中優(yōu)選使用的化合物，但本發(fā)明并不局限于于此，而且任何一種光敏性泰克薩菲瑞都可用于PDT，而任何一種熒光性泰克薩菲瑞也可用于血管造影術(shù)。表A本發(fā)明的泰克薩菲瑞大環(huán)A1-A108的代表性的取代基表A給出了R1-R6的取代基而表B給出了R7-R12的取代基表A-續(xù)<表A-續(xù)表A-續(xù)</tables>表A續(xù)<表A-續(xù)表A-續(xù)表A-續(xù)表B本發(fā)明的泰克薩菲瑞大環(huán)A1-A108的代表性的取代基表A給出了R1-R6的取代基而表B給出了R7-R12的取代基<表B-續(xù)</tables>表B-續(xù)表B-續(xù)<表B續(xù)表B-續(xù)</tables>表B-續(xù)<p>表B-續(xù)重要的是，可采用某些取代基合成泰克薩菲瑞來影響脂-水分布系數(shù)從而使之最適于應(yīng)用于眼睛，也就是說，使之具備能被攝入到血管組織和易于操作的充足的水溶性。“水溶性”的意思是在含水液體中的溶解達(dá)到大約1mM或更好。本文列出關(guān)于泰克薩菲瑞及其制備和應(yīng)用的美國專利、PCT公開和未決的申請，且引用它們作為參考。美國專利5,041,078、5,159,065、5,120,411、5,302,714和5,457,195公開了假藍(lán)寶石化合物，本文引用每一項專利作為參考。有機合成領(lǐng)域的技術(shù)人員在本說明書和這些專利、本文引用作參考的申請和公開的啟發(fā)下可以對所參考的基本合成化學(xué)進(jìn)行引申和精選以得到具有多種取代基的泰克薩菲瑞。例如，聚醚鍵合的多羥基化基團(tuán)，糖類取代，其中糖類通過乙縮醛樣配糖鍵被加入，低聚糖或多糖可類似地鍵合到泰克薩菲瑞上?？梢詫⑵渲械聂然ㄟ^芳醚或官能化烷基取代基而被鍵合在泰克薩菲瑞核上使雙重羧化的泰克薩菲瑞轉(zhuǎn)化為各種酯化產(chǎn)物，其中，醚鍵的作用在于進(jìn)一步鍵合含羥基的基團(tuán)?？梢岳弥脔０锋I來合成多羥化泰克薩菲瑞衍生物。糖部分可以通過酰胺鍵加入。通過芳醚或酯可以將含有支鏈的多羥基(多元醇)亞單元的多羥化泰克薩菲瑞衍生物加到泰克薩菲瑞核上。用亞硫酰氯化物或?qū)?硝基酚乙酸酯對羧基化的泰克薩菲瑞進(jìn)行處理可以產(chǎn)生適于連接單克隆抗體或其它有用生命分子的活性?；?。標(biāo)準(zhǔn)的就地偶合方法(如1，1’-羰基二咪唑)可用于影響這種共軛。為進(jìn)行上述的應(yīng)用，應(yīng)將泰克薩菲瑞以藥物制劑的形式供給?？蓪⑻┛怂_菲瑞的藥物制劑單獨或與藥學(xué)上可接受的載體結(jié)合、以單或多劑量的形式給予。優(yōu)選的藥學(xué)載體包括無菌水溶液。由本發(fā)明的泰克薩菲瑞與藥學(xué)上可接受的載體結(jié)合形成的該藥物組合物將容易地以各種劑型給予?？梢砸造o脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、眼、眼球后、近球根或局部方式給藥，優(yōu)選以靜脈內(nèi)、局部、眼或眼球后方式給藥，最優(yōu)選靜脈內(nèi)給藥方式?？墒褂迷诤?或在無菌水溶液中的泰克薩菲瑞的溶液。如果需要應(yīng)該將這種水溶液進(jìn)行適宜地緩沖，而這種稀釋液首先要用足量的鹽水或葡萄糖使其等張。在這方面，熟悉本技術(shù)的人在本說明書的啟發(fā)下將知道可以使用無毒水介質(zhì)。可考慮在眼睛部位的表面區(qū)域應(yīng)用局部乳膏、乳劑、溶液等等。藥物劑型包括無菌水溶液或分散體和用于臨時制備無菌注射溶液或分散體的粉末。優(yōu)選的劑型為無菌、具備使其達(dá)到能在吸液比重計中易于使用的流動性，具備在制備和儲藏條件下的穩(wěn)定性，并且在隔絕了微生物如細(xì)菌和真菌污染作用的環(huán)境下保存?？墒褂玫乃帉W(xué)上可接受的載體可以是含水、乙醇、多元醇(例如，甘油、1，2-丙二醇、和液狀聚乙二醇等等)的溶劑或分散體，和它們適宜的混合物?？梢岳猛縿?，如卵磷酯，采用在分散體的條件下保持所需粒徑的大小和采用表面活性劑而獲得適宜的流動性?？梢酝ㄟ^各種抗菌藥或抗真菌藥來產(chǎn)生對微生物作用的保護(hù)，例如，對羥基苯甲酸酯類、氯代丁醇、苯酚、山梨酸、乙基汞水楊酸鈉等。在很多情況下，將優(yōu)選等張試劑，例如糖如甘露糖醇或葡萄糖和氯化鈉。更為優(yōu)選的等張試劑為2-8％濃度的甘露糖醇溶液，而最優(yōu)選5％濃度的甘露糖醇溶液。在該組合物中采用延遲吸收試劑如單硬脂酸鋁和凝膠，則可以使該可注射的組合物被延長吸收。無菌溶液是這樣制得的使合適的溶劑中所需數(shù)量的泰克薩菲瑞與上面例舉的其它成分結(jié)合，接著根據(jù)需要進(jìn)行濾過除菌。一般來說，通過將各種無菌活性成分結(jié)合到含有基本分散體介質(zhì)和上面例舉的所需的其它成分的無菌賦形劑中而制得分散體。用于制備無菌注射液的無菌粉末，優(yōu)選的制備方法為真空干燥和冷凍干燥技術(shù)，它能從自身先前的無菌濾液中得到活性成分和任何添加的預(yù)期成分的粉末。這里所用的“藥學(xué)上可接受的載體”包括任何及所有的溶劑、分散介質(zhì)、包衣、滲透增強劑、抗菌或抗真菌試劑、等張和吸收延遲試劑等。在本技術(shù)中已熟知這種介質(zhì)和試劑作為藥學(xué)活性物質(zhì)的應(yīng)用。除此以外任何不與活性組分相容的常規(guī)介質(zhì)或試劑，可以預(yù)料它們能在這種治療組合物中應(yīng)用。也可以在該組合物中加入輔助的活性成分。可以將藥物有效量的泰克薩菲瑞進(jìn)行給藥而將其應(yīng)用于本發(fā)明的血管造影和光動力學(xué)方法。以“藥物有效”意味著這樣劑量，即它能提供用于血管造影術(shù)的圖像或能使其暴露于適宜波長的光下，提供對異常脈管系統(tǒng)的實質(zhì)性治療。該特定的劑量的變化將取決于所選擇的特定的泰克薩菲瑞、隨后的服藥方式、光照射的暴露、給藥的時機、被治療的組織或疾病、檢測儀的靈敏度、用于觀察的濾波器和其被轉(zhuǎn)運的生理轉(zhuǎn)運系統(tǒng)。根據(jù)本技術(shù)中已知的或這里所述的方法可以決定這種用藥劑量。在本發(fā)明中進(jìn)行有效地血管造影和治療所用的參數(shù)是相互聯(lián)系的。因此，根據(jù)其它的參數(shù)如流量、輻射度、光動力學(xué)治療中所用光的持續(xù)時間、在給藥和進(jìn)行治療性照射之間的時間間隔來調(diào)整劑量?？梢詫⑦@些參數(shù)進(jìn)行調(diào)節(jié)從而對異常脈管系統(tǒng)的組織產(chǎn)生有效的殺傷而對周圍的組織不產(chǎn)生有效的傷害，在另一方面，在對眼睛血管的觀察時不會對周圍組織產(chǎn)生有效地傷害。一般來說，所用的泰克薩菲瑞劑量范圍約為0.001到15μmol/kg/治療，優(yōu)選約為0.01到5μmol/kg/治療。劑量減少的限度取于所用的檢測系統(tǒng)，如果檢測的方法得到改善則其下限會降低。而且，如果減少泰克薩菲瑞的劑量，則用于治療血管再生組織所需的熒光會有所變化。在給予光敏性的泰克薩菲瑞之后，在該泰克薩菲瑞的最大吸收波長處對眼睛內(nèi)所要治療的組織進(jìn)行照射，這種波長通常約為400-500nm或700-800nm。在本發(fā)明的光動力學(xué)治療方法中，光源可以是激光、光-發(fā)射二極管或來自氙燈等的濾光；這種光具有的波長范圍約為400-900nm，優(yōu)選約為400-500nm或700-800nm，更優(yōu)選約為450-550nm或約710-760nm，或最優(yōu)選為約450-500nm或約725-740nm；光可以局部地、在內(nèi)鏡或組織間隙給予(例如，通過纖維光學(xué)探測器)。優(yōu)選采用狹縫燈輸送系統(tǒng)給予這種光。特別優(yōu)選這個范圍以內(nèi)的波長是因為血和視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(RPE)在較長的波長處相對透明，因此治療的結(jié)果是對組織的損傷較少而光的穿透性更強。在光照治療期間的能量密度和輻射度可以隨組織的類型、靶組織的深度和上方液體和血液的數(shù)量而變化。據(jù)悉，照射的結(jié)果使處于三聯(lián)體狀態(tài)的泰克薩菲瑞與氧和其它化合物發(fā)生反應(yīng)形成活性中間體，如純態(tài)氧，它能造成對細(xì)胞結(jié)構(gòu)的破壞?？赡艿募?xì)胞靶包括細(xì)胞膜、線粒體、溶酶體膜、暗色體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體和細(xì)胞核。據(jù)悉脈管系統(tǒng)的閉塞是光動力學(xué)治療的主要機理，它造成對內(nèi)皮細(xì)胞的傷害，接著造成血小板粘著、脫粒和血栓的形成。在泰克薩菲瑞給予之后直到進(jìn)行光治療之間的最優(yōu)化的時間長度可以依據(jù)給藥的模式、給藥的方式和靶組織的類型而改變。例如，對血管組織來說，幾秒鐘到約5h的時間間隔比較合適。給藥后的光照時間是非常重要的，它是一種使治療具有最大選擇性，從而對靶組織以外的組織的損傷最小的途徑。就人而言，可以相信泰克薩菲瑞在給予藥物后數(shù)秒內(nèi)開始到達(dá)視網(wǎng)膜和脈絡(luò)膜脈管系統(tǒng)，一般來說，泰克薩菲瑞能維持幾分鐘到幾小時的時間，這取決于泰克薩菲瑞、劑型、劑量、灌輸速率和血管的類型及大小。另外，可以在對異常脈管系統(tǒng)組織進(jìn)行破壞的步驟之后，將泰克薩菲瑞以單一試劑的形式或與其它染料如熒光素或靛氰綠混合的形式用于觀察血管的癥狀。在血管造影術(shù)系統(tǒng)中，給予受試者足量的泰克薩菲瑞以在用光激活時，產(chǎn)生可觀察的熒光發(fā)射，優(yōu)選的光的波長范圍約為400-900nm，優(yōu)選約為400-500nm或700-800nm，更優(yōu)選為約450-500nm或約710-760nm，或最優(yōu)選為約450nm或約725-740nm。通過激發(fā)波長范圍內(nèi)的光照射眼睛來記錄圖像并在約700-800nm的發(fā)射波長處檢測熒光的數(shù)量，優(yōu)選為730-760nm。在眼科成像系統(tǒng)中，在這種全程儀器上能同時發(fā)射和接收430-760nm范圍的光的儀器優(yōu)選為TOPCONTM50VT照相機(眼科成像系統(tǒng)公司，221LathropWay，Suite1SacramentoCA)。一般來說，采用激光掃描顯微鏡進(jìn)行目測，而用于熒光檢測的激發(fā)波長是激光的波長。采用在近紅外區(qū)域的光的波長進(jìn)行成像消除了自身熒光并造成有效的光穿透組織，尤其是出血和著色的組織。照相機作為一種硬紙拷貝，用于收集被發(fā)射的熒光，對數(shù)據(jù)進(jìn)行數(shù)字化處理并存儲以供后來在視頻屏幕上進(jìn)行描述或者與其它某些成像系統(tǒng)連接。如果將外加的染料如熒光素與泰克薩菲瑞聯(lián)合使用，則可以采用底片記錄裝置，而CCD照相機(電荷-耦合裝置)為優(yōu)選，因為它能捕捉更大波長處的發(fā)射。結(jié)果是，將獲得關(guān)于不同的眼組織層血管結(jié)構(gòu)的模式和廣度的更為高級的信息，具有檢測作為新的血管和發(fā)炎的血管特征的“泄漏程度”的能力。而且，所使用的照相機優(yōu)選為能提供被合適地過濾的激發(fā)光從而僅輸送預(yù)期的激發(fā)波長范圍內(nèi)的光，然后用一種接收裝置捕捉被發(fā)射的熒光，并且這些熒光能被合適地過濾而使得僅有預(yù)期的發(fā)射波長范圍內(nèi)的光被吸收。以下所包括的實施例例示了本發(fā)明優(yōu)選的實施方式。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該能理解在以下實施例中所公開的技術(shù)代表本發(fā)明者所發(fā)現(xiàn)的較好地實施本發(fā)明的技術(shù)，因而可以認(rèn)為它們是本發(fā)明實施的優(yōu)選的方式。但是，本領(lǐng)域技術(shù)人員在說明書的啟發(fā)下，應(yīng)該理解在所公開的特定的實施方式中可以作許多變化而仍然得到相同或類似的結(jié)果，同時它不脫離本發(fā)明的實質(zhì)和范圍。實施例用于對眼睛的血管病變進(jìn)行血管造影術(shù)和光動力學(xué)治療的泰克薩菲瑞本實施例提供了本文所引用的采用Lu(III)T2BET對眼睛進(jìn)行熒光數(shù)字血管造影術(shù)和對眼睛的血管損傷進(jìn)行光動力學(xué)治療的研究的結(jié)果。LuT2BET在470和732nm處具有寬吸收帶(在732nm時ε＝32,000M-1cm-1)，具有高度的熒光性，并在圖1所示的750nm的中心區(qū)域表現(xiàn)出強烈的吸收曲線。診斷學(xué)意義上重要的波長范圍是700-800nm，因為來自內(nèi)源性生色團(tuán)的自身熒光(＜700nm)不會隱藏該發(fā)射信號。在正常NZW兔身上進(jìn)行Lut2BET、熒光素和ICG的熒光血管造影術(shù)的比較。使正常兔(n＝4)在肌內(nèi)鎮(zhèn)靜和瞳孔擴(kuò)張之后接受1-10μmol/kgLuT2BET的靜脈內(nèi)注射。旋即進(jìn)行全面的眼底檢查直至泰克薩菲瑞、熒光素和ICG給藥的2小時之后。熒光素和ICG血管造影照片和H&E組織學(xué)表明沒有正常組織損傷的跡象，這說明镥泰克薩菲瑞熒光血管造影術(shù)顯得比較安全。在進(jìn)一步的研究中，采用光致凝固法在白化病兔(NZW)身上誘發(fā)了包括血管再生的血管傷口。在誘發(fā)的傷口上采用LuT2BET進(jìn)行PDT。結(jié)果顯示可以確定血管閉塞、灌注減少的區(qū)域和血管再生的區(qū)域，這表明泰克薩菲瑞是進(jìn)行熒光血管造影術(shù)的有效試劑。該結(jié)果也展示了采用泰克薩菲瑞進(jìn)行PDT使誘發(fā)的血管傷口發(fā)生閉合，這表明泰克薩菲瑞是對眼睛的異常血管進(jìn)行PDT的有效試劑。因此，選擇性的Lu(III)T2BET在血管再生區(qū)域的選擇性蓄積有利于對與老化有關(guān)的斑惡化和與異常血管再生結(jié)構(gòu)有關(guān)其它病癥進(jìn)行診斷和光動力學(xué)治療。染料將镥泰克薩菲瑞，Lu(III)T2BET溶于5％的甘露醇達(dá)到2mM的濃度。在0.31mg/kg和7.5mg/kg的濃度下分別進(jìn)行靛氰綠(ICG，Cardio-Green，BectonDickinsonandCompany，Cockeysville，MD)和熒光素(AlconLaboratories，F(xiàn)ortWorth，TX)的熒光血管造影術(shù)。所有的給藥通過靜脈進(jìn)行。動物根據(jù)視覺和眼科學(xué)研究協(xié)會(ARVO)方案，采用所研究的動物設(shè)計和進(jìn)行研究。從R&R養(yǎng)兔場(Stanwood，WA)購得重為3-4kg的雄性新西蘭白兔。在這項研究的整個期間使兔子有規(guī)律地接受Purina實驗室兔飼料和隨意加入的水。通過耳靜脈給予氯胺酮(8.4mg/kg)/甲苯噻嗪(1.2mg/kg)雞尾酒而將每只被研究的兔子麻醉。用托吡卡胺(MYDRIACYL1％Alcon實驗室，F(xiàn)ortWorth，TX)和0.5％的丙對卡因(ALCAINE，Alcon實驗室，F(xiàn)ortWorth，TX)使其瞳孔擴(kuò)張。用10％的苯福林(AK-DILATETM，Akorn，Inc.AbitaSprings，LA)進(jìn)行局部麻醉。不采取任何措施保護(hù)動物與外周的光隔離。攝影采用與眼睛成像系統(tǒng)(眼睛成像系統(tǒng)公司，Sacramento，CA)連接的TOPCONTM50VT照相機進(jìn)行眼底攝影術(shù)和熒光血管造影術(shù)。用常規(guī)的激發(fā)和干涉濾波器進(jìn)行Lu-Tex成像。在790-805nm處激活I(lǐng)CG而在835nm處對熒光進(jìn)行檢測。熒光記錄包括在465-490nm處的激活，而在520-530nm處的發(fā)射。用氙燈來激發(fā)染料。血管再生的誘發(fā)采用氬染料激光(CoherentInc.PaloAlto，CA)在七只兔子的右斑視網(wǎng)膜上引入光致凝固灼傷。平均來說，采用577nm的光以50μm的斑點大小和充足的能量(一般為450nW)誘發(fā)五個傷口以造成視網(wǎng)膜內(nèi)出血。在光致凝固之后立即對眼睛進(jìn)行攝影。在光致凝固的11-15天后進(jìn)行熒光素和ICG的血管造影。在注射之后血管再生傷口立即表現(xiàn)出高度的熒光性，接著發(fā)生泄漏。兩只動物具有在髓射線內(nèi)誘發(fā)的一格十處傷口(采用一套300nW的電源在0.2內(nèi)形成200μm的斑點大小)。四只對照組動物，不具有被誘發(fā)的傷口，給予各自的染料對其進(jìn)行熒光血管造影術(shù)。PDT草案使動物接受Lu(III)T2BET，在注射30分鐘后通過裂隙燈系統(tǒng)將488nm處、1000μm斑點大小的激光對準(zhǔn)每個傷口。通過該過程進(jìn)行熒光素血管造影術(shù)，從PDT之前到之后。血漿分析通過耳靜脈給兔子注射1μmol的Lu(III)T2BET/kg，并在給藥后的15分鐘、30分鐘、3小時和5小時收集血液。將EDTA用作抗凝血劑。將血漿樣品(25μl)與10nM的TritonX100(3ml)混合，并用熒光進(jìn)行分析。采用SLM48000S儀器得到熒光光譜，激發(fā)發(fā)生在450-480nm處而測得發(fā)射發(fā)生在700-800nm。采用以下方法對Lu(III)T2BET與兔血漿蛋白和脂蛋白在體內(nèi)的結(jié)合進(jìn)行評估用KBr密度-梯度超速離心機分離蛋白質(zhì)/脂蛋白混合物，然后采用熒光光譜測得Lu(III)T2BET在低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)和重蛋白中的相對分布。組織評估在深度麻醉下將眼睛摘除并用10％緩沖的福爾馬林(100mg/kg)進(jìn)行固定。接著用過量的戍巴比妥(100mg/kg)將兔處死。將組織包埋在石蠟中并在距眼睛中心處每隔5mm取連續(xù)片斷，采用蘇木精和曙紅(H&E)進(jìn)行著色以進(jìn)行光學(xué)顯微評估。圖2提供了在對NZW兔進(jìn)行4μmol/kg的镥泰克薩菲瑞注射后立即對其右眼進(jìn)行的LuT2BET血管造影照片。大約在該研究的兩周前，用激光在兔子的眼睛的下方顳象限誘發(fā)傷口(大約在400時的暗區(qū)域)，而且在血管造影術(shù)之前，將來自抽吸染料的氬激光器的577nm的光應(yīng)用于傷口來使髓射線內(nèi)的視網(wǎng)膜血管與視神經(jīng)盤發(fā)生暫時的閉塞。激發(fā)是在500nm(50nm帶寬)而用于熒光成像的濾波器是750nm(10nm帶寬)。圖3顯示了激光LuT2BET血管造影照片。在血管造影照片的左上方可見血管壁被著色的情況而在該血管造影照片的右下方可見在相對無血管區(qū)域的周圍的血管再生情況(在圖2中表示為下顳病變)。圖4和圖5分別顯示了早期和晚期的血管造影照片。被損傷和被誘發(fā)血管再生的傷口在熒光素注射之后立即表現(xiàn)出高度的熒光性，接著發(fā)生廣泛的泄漏(圖5)。圖6描述了激光誘發(fā)的血管再生的ICG血管造影照片(下顳傷口，與圖3相同的部位)。ICG與無定形區(qū)域形成反差，而用LuT2BET成像的血管無法描繪。圖7和圖8展示了具有在接受用Lut2BET進(jìn)行PDT之前和之后誘發(fā)的傷口兔眼的熒光造影照片。已發(fā)現(xiàn)在靜脈內(nèi)注射0.1μmol/kg后的兔血漿中LuT2BET的濃度在15分鐘時為2.68μg/ml，在30分鐘時為1.79μg/ml，在3小時時為0.18μg/ml，而在5小時時為0.12μg/ml。采用密度梯度超速離心器對LuT2BET與血漿蛋白組分的相對體內(nèi)結(jié)合的情況進(jìn)行評估。與HDL片斷結(jié)合的感光劑較多(49％)，與之相比重蛋白為40.5％，而LDL蛋白為10.5％。ICG、熒光和Lu(III)T2BET的血管造影照片表現(xiàn)出了不同的熒光圖案。采用LuT2BET血管造影術(shù)能較好描繪兔的視網(wǎng)膜和脈絡(luò)膜的血管再生。與熒光素或ICG相比采用LuT2BET能對實驗誘發(fā)的視網(wǎng)膜和脈膜血管傷口進(jìn)行放大并精細(xì)地展示著色的的不同圖案。這與應(yīng)用不同波長和LuT2BET的可能的微分結(jié)合特性一致。熒光素是一種不與血漿成分結(jié)合的小分子，它廣泛地存在于傷口處而在缺血性/有疤區(qū)域中心分布較少。靛氰綠主要與白蛋白結(jié)合，與Lu(III)T2BET相比具有不同的熒光圖案。Lu(III)T2BET，主要與脂蛋白結(jié)合，而白蛋白在某種程度上保留了更多的關(guān)于剩余血管解剖學(xué)的血管造影信息。這三種試劑揭示了不同眼病的特性。在攝影之后的組織分析揭示了沒有跡象表明視網(wǎng)膜的毒性。圖7和圖8展示了在兔接受LuT2BET進(jìn)行的PDT之前和之后具有誘發(fā)傷口的兔眼的熒光素造影照片。用LuT2BET進(jìn)行注射之后，通過裂隙燈將488nm處、斑點大小為1000μm的激光指向傷口。在PDT之前，熒光性熒光素血管造影術(shù)顯示了在早期具有高度的熒光性，而過一段時間后發(fā)生泄漏(圖7所示)。在PDT之后，該熒光素血管造影照片則揭示了在血管中具有高度的熒光性(圖8)，這表明血流減小，從而表明血管發(fā)生了閉塞。而在PDT治療的血管之外只發(fā)生有限的熒光泄漏(將圖7與圖8相比)。這些研究證明了Lu(III)T2BET能夠作為進(jìn)行眼睛血管造影術(shù)的對照試劑，尤其是對視網(wǎng)膜和脈絡(luò)脈管系統(tǒng)進(jìn)行目測，并且能作為對眼睛的血管損傷進(jìn)行光動力學(xué)治療的光敏劑。Lu(III)T2BET展示了其對視網(wǎng)膜和脈絡(luò)膜血管結(jié)構(gòu)進(jìn)行填充，并在異常血管結(jié)構(gòu)如激光誘發(fā)的脈絡(luò)膜脈絡(luò)膜血管再生和視網(wǎng)膜的閉塞性血管病變的區(qū)域發(fā)生蓄積和發(fā)出熒光。在采用LuT2BET進(jìn)行PDT之后觀察到了誘發(fā)的傷口的閉合。沒有觀察到對周圍血管或組織造成了損傷。而且，在對照的正常脈絡(luò)膜或視網(wǎng)膜組織中沒有觀察到損傷。因此，PDT治療展示了其具備選擇性這一與激光光致凝固法等技術(shù)相比的優(yōu)點。由于溶解度、分配系數(shù)、分子量、蛋白結(jié)合和其它變量的不同，與兩種最普遍應(yīng)用的對照試劑的任何一種相比，Lu(III)T2BET血管造影術(shù)帶來了不同的信息。而且，Lu(III)T2BET比其中任一種試劑都具有較有效的能量-偶合能力。從而可以單一或多種給藥方式將Lu(III)T2BET應(yīng)用于血管造影和PDT。在本說明書的啟發(fā)下，無需過多的試驗就可以采用本文所描述和要求的應(yīng)用和方法。雖然已經(jīng)以優(yōu)選的具體實施方式描述了本發(fā)明的應(yīng)用和方法，但是，對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說可以對本發(fā)明的應(yīng)用、方法和如本文所述的方法的步驟及各步驟的順序加以改變來實施，同時它也不脫離本發(fā)明的思想、本質(zhì)和范圍。更為具體地說，很明顯，某種既與化學(xué)又與生理學(xué)相關(guān)的試劑可代替這里所述的試劑，同時取得相同或類似的結(jié)果。所有這些對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說明顯的類似取代和改性都被認(rèn)為是在所附的權(quán)利要求中所定義的本發(fā)明的實質(zhì)，范圍和思想之內(nèi)。權(quán)利要求1.光敏性泰克薩菲瑞在制備用于治療患者的眼病的藥物組合物中的應(yīng)用，該眼病的特征在于異常的脈管系統(tǒng)。2.權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中該光敏性泰克薩菲瑞具有熒光且該治療進(jìn)一步結(jié)合通過觀察泰克薩菲瑞的熒光來觀察患者的眼病。3.權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中，該眼病選自由以下組成的組斑惡化、青光眼、盤血管再生、視網(wǎng)膜血管再生、血管翳、翼狀胬肉眼、視網(wǎng)膜血管再生、脈絡(luò)膜血管再生、眼莢膜組織胞漿菌病綜合癥、近視、眼睛的炎性疾病、漿液性中心性視網(wǎng)膜病、視網(wǎng)膜下血管再生膜，或由瘤引起的血管再生。4.權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中，該患者的眼病是斑惡化。5.權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中，該光敏性泰克薩菲瑞具有結(jié)構(gòu)I或結(jié)構(gòu)II其中M為反磁性金屬陽離子；R1-R4、R7和R8分別為氫原子、鹵化物、羥基、烷基、烯基、炔基、芳基、鹵代烷基、硝基、甲?；Ⅴ；⒘u烷基、烷氧基、羥基烷氧基、羥烯基、羥炔基、糖類、羧基、羧基烷基、羧酰胺基、羧酰胺基烷基、氨基、氨基烷基、部位導(dǎo)向分子、催化基、或與部位導(dǎo)向分子或催化基偶合的偶合物；R6和R9分別選自R1-R4，R7和R8的基團(tuán)，并且附帶條件為鹵化物中排除了碘化物，而鹵代烷基中排除了碘代烷基；R5和R10-R12分別為氫、烷基、烯基、炔基、芳基、羥烷基、烷氧基、羥基烷氧基、羥烯基、羥炔基、羧基烷基、羧酰胺基、羧酰胺基烷基、氨基、氨基烷基、或者與糖類、部位導(dǎo)向分子或催化基偶合的偶合物；R13為烷基、烯基、氧烷基或具有至多約3個碳原子并且在第一結(jié)合碳原子附近具有旋轉(zhuǎn)靈活性的的羥烷基；n為小于或等于5的整數(shù)；6.權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中，該光敏性泰克薩菲瑞選自由表A和B中的泰克薩菲瑞A1-A108所組成的組。7.權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中，該光敏性泰克薩菲瑞結(jié)合在反磁性金屬陽離子上并且該反磁性金屬陽離子為Lu(III)、La(III)、In(III)、Zn(II)或Cd(II)。8.權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中，該光敏性泰克薩菲瑞結(jié)合在反磁性金屬陽離子上并且該反磁性金屬陽離子為Lu(III)。9.權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中，該治療采用波長范圍約為700到800納米的光。10.權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中，該治療是采用波長范圍約為725-740納米的光。11.權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中，該治療進(jìn)一步與順磁性泰克薩菲瑞結(jié)合。12.權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中，該光敏性泰克薩菲瑞為LuT2BET。13.可檢測的泰克薩菲瑞在制備用于觀察患者眼睛內(nèi)脈管系統(tǒng)的藥物組合物中的應(yīng)用。14.權(quán)利要求13的應(yīng)用，其中，該可檢測的泰克薩菲瑞具有熒光且這種觀察是通過熒光進(jìn)行的。15.權(quán)利要求14的應(yīng)用，其中，該熒光性泰克薩菲瑞與Y(III)、Lu(III)或Gd(III)一起結(jié)合在金屬復(fù)合體中。16.權(quán)利要求14的應(yīng)用，其中，用于誘發(fā)熒光的激發(fā)光源的波長約為400-500nm。17.權(quán)利要求14的應(yīng)用，其中，用于誘發(fā)熒光的激發(fā)光源的波長約為700-800nm。18.權(quán)利要求13的應(yīng)用，其中，該可檢測的泰克薩菲瑞與一順磁性陽離子發(fā)生復(fù)合，而這種觀察上通過磁共振成像進(jìn)行的。19.權(quán)利要求13的應(yīng)用，其中，這種觀察是通過X-射線成像進(jìn)行的。20.光敏性泰克薩菲瑞在制備一種用于對患者的斑惡化進(jìn)行光動力學(xué)治療的藥物組合物中的應(yīng)用。21.權(quán)利要求20的應(yīng)用，其中，該光敏性泰克薩菲瑞具有結(jié)構(gòu)I或結(jié)構(gòu)II其中，M為反磁性金屬陽離子；R1-R4、R7和R8分別為氫原子、鹵化物、羥基、烷基、烯基、炔基、芳基、鹵代烷基、硝基、甲酰基、?；⒘u烷基、烷氧基、羥基烷氧基、羥烯基、羥炔基、糖類、羧基、羧基烷基、羧酰胺基、羧酰胺基烷基、氨基、氨基烷基、部位導(dǎo)向分子、催化基或與部位導(dǎo)向分子或催化基偶合的偶合物；R6和R9分別選自R1-R4、R7和R8的基團(tuán)，并且附帶條件為鹵化物中排除了碘化物，而鹵代烷基中排除了碘代烷基；R5和R10-R12分別為氫、烷基、烯基、炔基、芳基、羥烷基、烷氧基、羥基烷氧基、羥烯基、羥炔基、羧基烷基、羧酰胺基、羧酰胺烷基、氨基、氨基烷基、或者與糖類、部位導(dǎo)向分子或催化基偶合的偶合物；R13為烷基、烯基、氧烷基或具有至多約3個碳原子并且在第一結(jié)合碳原子附近具有旋轉(zhuǎn)靈活性的的羥烷基；n為小于或等于5的整數(shù)；22.權(quán)利要求21的應(yīng)用，其中，該光敏性泰克薩菲瑞選自由表A和B中的泰克薩菲瑞A1-A108組成的組。23.權(quán)利要求21的應(yīng)用，其中，該光敏性泰克薩菲瑞結(jié)合在反磁性金屬陽離子上，且該反磁性金屬陽離子為Lu(III)、La(III)、In(III)、Zn(II)或Cd(II)。24.權(quán)利要求21的應(yīng)用，其中，該光敏性泰克薩菲瑞結(jié)合在反磁性金屬陽離子上，且該反磁性金屬陽離子為Lu(III)。25.光敏性帶熒光的泰克薩菲瑞在制備采用單一試劑對患者的眼病進(jìn)行觀察和治療的藥物組合物中的應(yīng)用，該眼病的特征在于異常脈管系統(tǒng)。全文摘要本發(fā)明提供了泰克薩菲瑞在眼睛的診斷和治療中的應(yīng)用,特別是光敏性泰克薩菲瑞在對異常脈管系統(tǒng)為特征的眼病進(jìn)行光動力學(xué)治療中的應(yīng)用,如斑惡化或翼狀胬肉眼。該光敏性泰克薩菲瑞可以是自由堿泰克薩菲瑞或被反磁性金屬所取代。優(yōu)選用镥取代該光敏性泰克薩菲瑞,泰克薩菲瑞與卟啉相比具有雙波長吸收,也就是在400—500nm和700—800nm處,尤其是約720nm,因而它與卟啉相比對人體更為有效而用途更廣。泰克薩菲瑞在眼睛的血管造影術(shù)中用作有效的對照試劑。文檔編號A61B3/14GK1265039SQ97182063公開日2000年8月30日申請日期1997年12月11日優(yōu)先權(quán)日1996年12月11日發(fā)明者M(jìn)·S·布魯門克拉茨,K·W·沃德布恩,R·A·米勒,S·W·揚申請人:環(huán)狀藥物公司